黄芪药材指纹图谱的研究进展

黄芪药材指纹图谱的研究进展
【摘要】黄芪是经常使用中药，制定科学靠得住的质量标准意义重大。

文章简要概述了黄芪药材指纹图谱的研究方式为黄芪药材的质量操纵提供了依据。

【关键词】黄芪指纹图谱
黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astraglus membranaceus( Fisch) Bge. var. mongholicus (Bge. ) Hsiao或膜荚黄芪Astragalus mem branaceus ( Fisch. ) Bge的干燥根。

春、秋二季采挖，除去须根及根头,晒干.甘、温,归肺、脾经。

具补气固表、利尿托毒、排浓、敛疮生肌的作用。

临床用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，气虚水肿，痈疽难溃，久溃不敛，血虚痿黄，内热消渴；慢性肾炎蛋白尿、糖尿病［1］等症。

黄芪为经常使用中药，每一年需求量约600万kg［2］。

黄芪的化学成份要紧有黄酮类、皂苷类和多糖等［3］。

长期以来对黄芪的质量操纵，人们仅以黄芪甲苷的含量作为黄芪及其复方制剂的质量标准，传统的方式一般是薄层法,最近几年来，随着科学技术的飞速进展，高效液相色谱法已愈来愈普遍的应用于质量操纵中。

但仅仅测定一个、两个单一成份无法完整表现中药材的全面情形。

指纹图谱方式的显现为全面靠得住的保证黄芪药材及其制剂的质量提供了靠
得住保证。

所谓中药指纹图谱是指某种(或某产地)中药材或中成药进行适当处置后，采纳必然的分析手腕取得的、能够标示该中药材或中成药特性的某类或数类成份的色谱或光谱的图谱，它具有特点性和稳固性［4］。

利用色谱技术进行指纹图谱分析的中药材，因生常年限、生长环境的转变而可能产生个体间较为明显的不同，但个体间必然有群体共有的相似性［5］。

因此,整体性和模糊性是其大体特点。

整体性是指比较完整的反映药材的面貌，模糊性强调样品之间的相似程度。

最近几年来对黄芪药材指纹图谱的研究包括色谱法、光谱法和其他方式。

那个地址以介绍色谱法为主。

现介绍如下。

1 色谱法
HPLC指纹图谱研究黄际薇等［6］
采纳剪碎黄芪药材 g，甲醇浸泡留宿，超声提取10 min，过滤，回收甲醇至干，残渣加水10 ml溶解后，以水饱和的正丁醇提取3次，20 ml/次，归并正丁醇提取液、回收至干，甲醇溶解定容至5 ml。

利用黄芪甲苷做对照品。

利用DAD检测器。

色谱条件为乙腈∶水(30∶70)二元梯度洗脱；检测波长203 nm；分析时刻：60 min。

结果说明
不同来源的黄芪药材所含黄芪甲苷等成份均取得专门好的分离，找到共有峰13个，其HPLC指纹图谱大体一致，共有峰面积之和均大于各总峰面积的90%，但其共有峰面积的比值有必然不同。

胡芳弟等［7］采纳称取药材粉末 g，用甲醇超声提取3次(30，30，30 ml)，30 min/次，蒸干甲醇，残渣用40 ml水溶解，再用正丁醇提取4次(40，40，20，20 ml)，分取正丁醇层、回收至干，残渣用甲醇超声溶解，定容至5 ml。

利用毛蕊异黄酮和芒炳花素做对照品。

利用DAD 检测器。

色谱条件为A相水，B相乙腈；梯度洗脱B相含量在80 min内从4%转变至100%；检测波长254 nm。

结果找到26个共有峰，12批样品相似度符合要求。

贾晓斌等［8］取药材粗粉2 g，加甲醇50 ml，回流提取2次，2 h/次，归并甲醇液，回收甲醇，残渣加热水10 ml溶解，用等量水饱和正丁醇提取5次，归并正丁醇液，用等量氨试液洗涤1次，弃去氨试液，正丁醇液水浴蒸干，残渣加60%乙腈溶解至5 ml，离心，过滤，取滤液1 ml，加参照物溶液1 ml，既得。

利用人参皂苷做对照品。

利用VWD 检测器。

色谱条件：流动相为水和乙腈；检测波长：203 nm；分析时刻：60 min。

共标出黄芪药材13个共有峰。

由于黄芪皂苷类成份UV没有特点吸收，应选择结尾吸收203 nm作为检测波长。

上述方式都是采纳 HPLC-UV测定黄芪药材的指纹图谱，但因为
紫外结尾吸收会对结果产生阻碍，因此管佳等［9］取药材粉末 g，用甲醇索氏回流提取5h，滤过，滤液回收甲醇至干，残渣加水10 ml 使溶解，用水饱和的正丁醇提取4次(20 ml/次)，归并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次(20 ml/次)，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇定容至5 ml，即得。

利用黄芪甲苷做对照品。

利用ELSD检测器。

色谱条件：流动相为水和乙腈,二元梯度洗脱15%～60% 乙腈；洗脱时刻65 min ；漂移管温度105℃；载气流速 L·min -1。

标定的各共有峰相对保留时刻的RSD值均小于% ，单峰面积大于或等于10%峰的峰面积比值也比较稳固，三者的图谱间具有专门好的相关性，10批样品间具有很高的相似度。

李翔等(第二军医大学硕士学位论文《黄芪药材色谱指纹图谱的研究》2005)对黄芪中的黄酮类成份和皂苷类成份别离提取，采HPLC/DAD，HPLC/ELSD 别离测定，制作了两套色谱指纹图谱。

充分反映了药材特性。

黄酮类：取黄芪药材粗粉约 g，用甲醇超声2次（100 ml/次，20 min），归并两次甲醇液、回收至干，甲醇溶解定容至5 ml，既得。

利用毛蕊异黄酮和芒柄花素做对照品。

利用DAD检测器。

色谱条件为流动相：A相为乙睛一甲醇(体积比9∶1)，B相为水，梯度洗脱A相含量在60 min内从5%转变至95%，检测波长：260 nm。

标定了11个共有峰，10批样品相似度符合要求。

皂苷类：取黄芪药材粗粉约 g，用甲醇90 ml，氨水10 ml，超
声处置60 min，滤过，滤渣用甲醇洗涤3次，20 ml/次，归并滤液、回收至干，残渣用甲醇定容至5 ml，既得。

利用黄芪甲苷做对照品，利用ELSD检测器。

色谱条件为漂移管温度：40℃；载气(空气)压力：；增益值：7 ；流动相：A相乙睛-甲醇(体积比9∶1)，B相水，梯度洗脱A相在60 min内由5%转变至95%；检测波长：203 nm。

标定共有峰8个，10批样品相似度均符合要求。

HPLC-MSD指纹图谱研究徐青等［10］别离成立了HPLC/DAD和HPLC/MSD图谱。

利用PAD检测器，质谱仪。

色谱条件为流动相：甲醇-水-异丙醇；检测波长203 nm。

液相色谱-质谱联用条件为大气压化学电离(APCI)接口和离子源；气化温度400℃；加热毛细管温度250℃；夹套气压414kPa；辅助气压10AU；质量扫描范围100～1 199 u；扫描速度 S。

以梯度洗脱及低波长检测取得的液相色谱图，可应用于不同产地黄芪药材的指纹图谱比较。

紫外和质谱两种检测器可对不同特性化台物的检测进行互补，取得相对充分的指纹图谱信息。

李翔等(第二军医大学硕士学位论文《黄芪药材色谱指纹图谱的研究》2005)测定了黄芪药材 HPLC/MSD指纹图谱。

利用ELSD检测器。

色谱条件为流动相：A相为乙腈，B相为水，梯度洗脱，A相在75 min 内由5%转变至85%；柱后分流比8∶2。

质谱条件为离子源：大气压电离-电喷雾电离(API-ESI)；检测模式：负离子；扫描范围：m/ z 200～1 000 ；干燥气(N2 )流速： L·min - 1 ；雾化气压力：30 psi；干燥气温度：350℃；裂解电压：110 V ；毛细管电压：3 500V。

黄芪药
材HPLC-MS总离子流色谱指纹图谱具有较好的稳固性、周密度和重复性，相对保留时刻和相对峰面积的RSD均小于%，标定13个共有峰，相似度计算结果均大于。

2 光谱法
史春香等［11］利用近红外光谱仪附件SabIR搜集不同产地黄芪药材的近红外光谱(NIR)，成立判别分析模型。

运用相应化学计量学软件结合SIMCA技术进行处置。

结果显示模型合理，具有优良的辨别分类功能，扩展了近红外在线监测仪器的功能，此方式比传统的性状辨别法更具有科学性，比常规的光谱、色谱和质谱法辨别更快速简便，且无污染，是药物分析的新进展方向。

3 其他方式
张庆芝等［12］采纳RAPD法确信DNA指纹图谱，HPLC-ELS测定黄芪甲苷的含量，比色法测定总黄酮的含量，硫酸-苯酚法测定黄芪总多糖的含量。

结果显示膜荚黄芪，蒙古黄芪和梭果黄芪有着较接近的遗传关系，苦黄芪，黑毛多枝黄芪和直立黄芪有超级近的亲缘关系。

张曦等［13］采纳PAPD技术扩增药材基因组DNA样品。

结果说明高盐低pH值法适合于提取黄芪药材的基因组DNA。

RAPD法能够准确，
快速的鉴定黄芪及其代用品，程序简单、快捷，样品用量小。

4 结语
中药指纹图谱的成立是全面反映中药所含内在化学成份的种类和数量，进而反映中药的质量，尤其在现时期中药的有效成份绝大多数没有确信，采纳中药指纹图谱的方式，将有效的表征中药质量。

同时指纹图谱也为国际社会所认可，有利于中药及其产品进入国际市场［14］。

现时期我国中药指纹图谱的研究还停留在利用各类方式成立药物及制剂的指纹图谱和对数字化信息处置的低级时期。

中药指纹图谱的高级时期将是进行指纹图谱与药效的相关性研究，和可用于中药理论和新药开发的研究体系和模式的成立［15］。

随着对黄芪药材及其产品的不断开发和应用，和新的分析技术，理论的进展，加倍靠得住、可行的指纹图谱研究方式会愈来愈多，为最终解决中药质量的科学性评判提供依据。

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