血液中乙醇浓度的检测

血液中乙醇浓度的检测
发表时间：2013-05-21T08:50:26.750Z 来源：《中外健康文摘》2013年第13期供稿作者：张云平[导读] 乙醇，俗称“酒精”，是酒类饮品中主要的成分，其对大脑有先兴奋后抑制的生理作用。

张云平（梧州食品药品检验所 543002）【摘要】目的建立在血液中检测乙醇含量的气相色谱法。

方法采用顶空进样毛细管气相色谱法，以叔丁醇为内标物。

结果乙醇在8.12～97.44μg?ml-1浓度范围内线性良好，相关系数为0.9999，平均回收率为99.8%，RSD为0.3%。

结论本方法操作简便、可靠，结果准确，重现性好，可用于血液中乙醇浓度的检测。

【关键词】血液乙醇
乙醇，俗称“酒精”，是酒类饮品中主要的成分，其对大脑有先兴奋后抑制的生理作用。

酒后驾车是发生交通事故的主要原因之一。

本文采用顶空进样、气相色谱分离检测的方式来对血液中的乙醇浓度进行测定。

1 仪器与试药
1.1 仪器
Agilant17890气相色谱仪带FID检测器；顶空进样器DANI HSS 86.50；色谱柱 DB-ALC1毛细管柱（30m×0.320mm×1.8μm）。

1.2 试剂与样品
水中乙醇标准物质（中国计量科学研究院，样品编号 09001，定值日期 2009年4月，标准值： 0.812 mg?ml-1）；内标物：叔丁醇（GR，上海晶纯试剂有限公司，批号：13593）。

样品：交警部门送来的疑似酒后驾车人员的血液样本。

2 方法和结果
2.1 实验条件
顶空进样器条件：平衡温度：60℃，平衡时间：20分钟，进样系统：90℃，传输管道：110℃，定量管：2ml。

气相色谱条件：进样口温度：150℃，柱温：75℃，检测器温度：200℃，载气：N2（99.999%），分流比：20：1。

2.2 标准曲线溶液的制备精密量取水中乙醇标准物质、叔丁醇适量，用水作为溶剂，配成乙醇浓度分别为8.12、16.24、32.48、64.96、97.44μg?ml-1，叔丁醇浓度为8μg?ml-1的标准溶液系列。

分别精密量取5ml标准液至10ml顶空瓶中，加塞压盖后上机检测。

以乙醇浓度为横坐标，以乙醇峰面积与叔丁醇峰面积的比值为纵坐标，回归方程为：Y=0.02379X+0.01963，r=0.9999，表明乙醇浓度在8.12～97.44μg?ml-1之间与两个峰的比值呈良好的线性关系（见表1、图1～3）。

表1 乙醇对照品线性关系
2.3 供试品溶液的制备
精密量取血液样本1ml置于25ml量瓶中,加入适量的叔丁醇，加水到刻度，制成含叔丁醇浓度为8μg?ml-1的供试品溶液。

按“2.1”检测条件进行检测。

（见图4）
2.4 空白样品的制备
精密量取经过检测为空白的血液样本1ml按按“2.3项”制备空白溶液，并按“2.1项”色谱条件进行测定结果表明空白溶液中在与乙醇峰相同的保留时间处没有色谱峰，表明血液中其它成分对其没有干扰。

（见图5）
2.5 精密度试验
取32.48μg?ml-1对照液连续进针6次，得峰面积比值的RSD=0.3%（n=6）,精密度和重复性试验均良好。

表2 精密度试验结果
2.6 稳定性试验
取同一个血液样品，按“2.3”项下方法制备、封装样品，考察0、4、8、12、24h峰面积比值的变化，结果RSD=0.4%（n=5）。

测定结果表明，在24h内，样品中的峰面积比值基本稳定，说明该方法稳定性好。

表3稳定性结果
2.7 重复性试验
取同一个血液样品，平行取样6份，按“2.3”项下方法制备、封装样品，并按“2.1”项下的色谱条件检测。

表4重复性试验
2.8 回收率试验
取已知乙醇含量的血液样品共6份，另精密加入一定量的乙醇标准品，按“2.3”项下方法制备、封装样品，并按“2.1”项下的色谱条件检测。

表5回收率试验
2.9 检测限
精密量取水中乙醇标准物质、叔丁醇适量，用水作溶剂，配成乙醇浓度为1.624μg?ml-1，叔丁醇浓度为8μg?ml-1的标准溶液作为检测
限液，按“2.1”项下的色谱条件检测。

（见图6）
图6：检测限图谱
2.10 样品含量测定
取待测血液样品6份，按“2.3”项下方法制备、封装样品，并按“2.1”项下的色谱条件检测。

表6样品结果表
3.讨论
3.1血液中乙醇含量测定的法定标准为GAT842-2009[1]，该标准要求标准曲线是用空白检材加标来制备，这样虽然最大程度避免了基质效应的影响，但空白检材有时难以得到，而且笔者认为已经用叔丁醇作为内标进行校正了，基质效应的影响可以忽略不计。

笔者用本方法通过了CNAS能力验证。

3.2本方法相对原标准来说更快，从样品前处理到最终结果的计算总共才2个小时不到，十分适合基层实际情况。

4.小结
本方法准确性和精密度好，回收率高，操作简单，检测速度快，十分适合基层人员操作。

参考文献
[1] 中华人民共和国公共安全行业标准GA/T 842-2009 《血液酒精含量的检验方法》.。