人参及生脉散补益作用的实验研究

LPO 交联而形成大分子化 合物沉聚于 细胞内 部, 从 而使细 胞 呈现衰老现象。自由基的过氧化作用可致 疾病和衰 老, 目 前
已被国内外所公认。机体在正常的生理状 态下, 于代谢过 程 中可产生较多量的自由基, 但在抗氧化酶系统( 如 SOD 等) 的
共同作用下 , 通过不 同的 途径将 其迅 速清 除, 使细胞 成分 免 受损伤。SOD 是防御自由基损害的 重要酶, 它可使 超氧自 由 基( O2- ) 歧化为 O2 和 H2O。抗脂类过氧化物的生成是研究 药
生物化学与生物物理进展, 1988, 15( 2) : 124 ( 收稿日期: 2000- 02- 12)
沉香与其伪品的鉴别
程莲银
湖北中医学院药学系( 430061)
关键词: 沉香; 伪品; 鉴别
中图分类号: R282 7
文献标识码: B
文章编号: 1008- 987X ( 2000) 03- 0023- 01
将正品沉香与伪品沉香分别研成粗粉末, 各取粗粉 2g,
程莲银, 女, 1953 年生, 实验师。
分别置 2 支试 管内, 再各加 95% 乙醇 20ml 放入 60 C 水浴 锅 中, 温浸 2 小时, 滤过, 滤液 挥去 乙醇, 得 残留 物。各 取残 留 物适量, 分别进行微量升华, 升化物加盐 酸一滴, 香草醛颗 粒 少量, 再滴加乙醇 1~ 2 滴。结果见表 2。
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湖北中医学院学报 Journal of Hubei College of TCM
2000 年 9 月第 2 卷第 3 期 September. 2000, Vol. 2,No. 3
人参及生脉散补益作用的实验研究
丁立忠 马 卓 刘小平
湖北中医学院附属医院( 430061)
摘 要: 目的: 探讨人参及生脉散补益作用的机理。 方法: 通过动 物体外 和体内 实验, 观察实 验动物 过氧化 脂
人参组 生脉散组
动物数( 只) 10 10 10
LPO ( nM / g 组织湿重 ! 103) 486. 53 39. 33
409. 16 26. 47* 424 51 25. 28*
* 与生理盐水组比较, P < 0 01
( 2) 体内法: 将小白鼠随机分为 3 组, 每组 10 只, 分别每天 灌 胃 0 5ml 人参、生脉散煎 煮液和 生理 盐水, 连续 15 天。实 验
质( LPO) 和超氧化物歧化酶( SOD) 的变化。结果: 人参及生脉散 可显著抑 制大鼠及 小鼠肝 组织中 LPO 的生 成( P <
0 01) , 还可明显增强小鼠肝组织中 SOD 的 活性( P < 0 01) , 结论: 表 明生脉散 具有较 好的抗 衰老作 用, 为 扩大生 脉
散的临床应用范围提供了理论依据。
动物数( 只) 10 10 10
LPO( nM/ g 组织湿重 ! 103) 576 10 72. 86 480. 62 81. 25* 488 21 94. 05*
* 与生理盐水组比较, P < 0 01 2 2 对小白鼠肝组织中 SOD 活性的影响
参照文献方法[4, 5] , 将小白鼠随机 分为 3 组, 每组 10 只, 分别每天灌胃 0 5ml 人 参、生脉 散煎 煮液 和生 理盐 水, 连 续
另取小白鼠, 断头处死后迅速取出肝脏组 织, 用滤纸吸
丁立忠, 男, 1962 年生, 主管药师。
出残留血迹, 制成 5% 的肝 匀浆生理 盐水溶 液。按上 述操 作
方法, 测定并计算每克 湿肝组 织中 的 LPO 的生成 量, 结果 见 表 2。
表 1 各组大白鼠肝匀浆中 LPO 生成比较( x s)
组别 生理盐水组
人参组 生脉散组
动物数( 只) 10 10 10
LPO ( nM / g 组织湿重 ! 103) 261 50 17 84 224 84 18 35* 219 70 30 15*
* 与生理盐水组比较, P < 0 01 表 2 各组小白鼠肝匀浆中 LPO 生成比较( x s)
组别 生理盐水组
15 天。实验前 12h 禁食, 断头处死, 迅速 打开腹腔, 取出肝 脏 组织, 放入冰冷的介 质中漂洗 ( 0 01mmol/ L EDTA, pH7 8) , 用
滤纸吸干后, 于天平上准确称重, 用玻璃 匀浆器研磨 后, 用 上 述介 质制成 10% 肝 匀浆 。取肝 匀浆 1 5ml 于离 心机 中离 心 10min( 1500r/ min) , 取上清液, 采用肾 上腺素 氧化测 定法[ 5] 测 定 SOD 活性。
沉 香来 源 于瑞 香科 植 物白 木 香#Aguilaria Sinensis( lour) Gilg∃含有树脂的 心材, 系名 贵中 药材。沉 香货源 稀少, 临 床 用药量大, 故药 材市场 多有 伪品沉 香。为了 便于 明辨 真伪, 确保临床用 药安全有 效, 现将 沉香及 一种 伪品沉 香的 性状、 显微、理化鉴别要点叙述如下。 1 性状鉴别 1. 1 正品沉香 呈不规则块 状或长条 状, 表 面凸凹不 平, 有 加工的刀痕。一面木质坚硬, 间有棕 黑色微显光 泽的树脂 和 黄白色不含 树 脂交 互 形成 的斑 纹; 另 一面 为 树脂 渗出 固 结 面, 有凹凸状 及 蜂窝 小洞 。断面 刺 状, 有 特 异的 香 气, 味 微 苦; 燃烧时有浓烟, 香气强烈, 并有黑色油状物渗出。 1. 2 伪品 呈不规则块状或 长条状, 表面灰 白色凸凹 不平, 有加工的刀痕和 部分 残留 树皮, 质轻 泡, 无棕 黑色微 显光 泽 的树脂和黄白色 树脂 交互 形成的 斑纹, 无 树脂渗 出, 无蜂 窝 状小洞, 无特异香 气, 味淡, 燃烧时有浓 烟, 但无 香气, 没有 油 状物渗出。 2 显微鉴别( 见表 1) 3 理化鉴别
* 与生理盐水组比较, P < 0 01
3 讨论 以上实验证明, 人参与生脉散可 显著抑制大 鼠及小鼠 肝
组织中过氧化脂质( LPO ) 的 生成( P < 0 01) 。 体内实 验还 证 明, 人参及生脉散可明显增强小鼠肝 组织中超氧 化物歧化 酶
( SOD) 的活性( P < 0 01) 。 自由基可使脂 类 形成 过 氧 化物, 即过 氧 化脂 质 ( LPO ) ,
物延缓衰老的主要指标之一。人参及生 脉散无论 对体外大、 小白鼠肝组织中 LPO 的生成, 还 是对体内小 鼠肝组织 中 LPO 的生成, 均有显著抑 制作用; 并能 增强小 鼠肝组 织中 SOD 的 活性, 从而达到抗衰老的目的。
近年来对 生脉散 的研 究主要 以心 血管系 统为 主。本 实 验证明, 生脉散能增 强肝脏组 织中 SOD 的 活性, 抑制 肝脏 组 织 LPO 的生成, 表明生脉 散具 有较好 的抗 衰老作 用, 为扩 大 生脉散的临床应用范围提供了理论依据。
关键词: 人参; 生脉散; 补益作用; 过氧化脂质( LPO) ; 超氧化物歧化酶( SOD)
中图分类号: R285 5
文献标识码: A
文章编号: 1008- 987X( 2000) 03- 0022- 02
生脉散是临床上的常用方剂之一, 由人参、五味 子、麦 冬 三味中药组成, 具有益 气敛 汗、养阴生 津之 功效。有 研究 表 明[1] , 生脉散可提高 机体耐高温、耐低温、耐缺氧、抗炎、解 毒 的功能, 可提高 免疫力 和抗肿 瘤能力, 并对 心血管、肝 脏、血 液系统有较好的作用。文献报道[ 2] , 经常口服生 脉散对气 阴 两虚型衰老者有一定的补益作用。笔者通 过体外、体内方 法 测定了鼠肝匀浆中 SOD 活性及 LPO 含量, 进一步探 讨人参及 生脉散的补益作用及抗衰老机理, 现报道如下 。 1 实验材料 1 1 动物 Wistar 大鼠 ( 200~ 250g ) , 昆 明种 小鼠 ( 20~ 22g, 雌雄各半, 雌性未孕) , 均由湖北中医学院实验动物房提 供。 1. 2 仪器与设备 恒 温振 荡, 离心 机, 组 织匀 浆机, 53W 紫 外- 可见分光光度计( 上海光学仪器厂) 。 1.3 药 品与 试剂 人参 煎煮 液( 0. 2g/ 1ml) 、生脉 散 煎煮 液 ( 1g/ 1ml) , 离心 10min( 2500r/ min) , 取 上清液 稀释 10 倍。三 氯 醋酸( 20% , 中 国 天 津 医 药站 化 剂 部 经 销) , 硫 化 巴 比 妥 酸 ( 0 067g/ ml, 上海试剂 二厂) , 四 乙氧 基丙 烷( Flaka 公司 出 口, AR) , L - 肾 上 腺 素( Flaka 公 司 出 品, AR, 以 双 蒸 馏 水 配 成 2mmol/ L) , 碳酸 缓冲 液( pH10, 由 0 05M Na2CO3 7 5ml 与 0 1M NaHCO32 5ml 混 合而 成) , EDTA ( 0 01mmol/ L, pH7 8) , 生 理 盐 水。 2 方法与结果 2. 1 对大白鼠、小白鼠过氧化脂质生成的影响 ( 1) 体外法: 参照文献方 法[ 3] , 断头 处死 大白 鼠, 迅速 取 出肝脏组织, 用滤纸吸去残留血迹, 制成 5% 的肝匀浆生 理 盐水溶液。分别取肝匀浆 ( 5mg/ ml) 1 5ml 加入 人参、生 脉 散煎煮液上清液 0 1ml, 对照 管加 等量生 理盐 水 0 1ml; 于 37 C 振荡 温育 1 5h, 取出后 加入 1 5ml 三 氯醋 酸。另设 空 白对照管, 温育前加入 1 5ml 三氯醋酸, 与上述二 种试管同 样温育振荡 1 5h ( 此管作为分光光度计 调零时用) , 混匀 后 静置 10min, 离 心 10min ( 3000r/ min) 取 上 清 液 1 5ml, 加 1ml 硫代巴比妥酸, 沸水浴 加热 10min。冷 却后在 53W 紫 外 - 可见分光 光度计 532mm 波 长处比色 测定, 以四乙 氧基 丙 烷为标准, 计算每克湿肝组织中过氧化脂质 ( LPO) 的生 成 量, 结果见表 1。
前 12h 禁食, 断头处死, 迅速打开腹腔 取出肝 脏, 以 滤纸吸 出 残留血迹, 制成 1% 的 肝匀浆生理盐水。按上述操作方法, 测
定并计算每克湿肝组织中过氧化脂质的生成量, 结果见表 3。 表 3 人参及生脉散对小白鼠肝匀浆中 LPO 生成的影响( x s)
组别 生理盐水组
人参组 生脉散组
酶活性单位: 按 酶活 性测 定条 件, SOD 抑制 肾上 腺素 自 氧化的 50% 所需量定为 一个 酶活性 单位, 每 ml 酶单 位按 下
列公式计算:
u/ ml=
AA
B ! 100% 50%
!
反应液体积
!
样品稀释倍数 酶提取液体积
结果见表 4。
2000 年 9 月第 2 卷第 3 期 September. 2000, Vol. 2, No . 3
湖北中 医学院学报 Journal of Hubei College of TCM
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表 4 人参及生脉散对小白鼠肝组织中 SOD 生成的影响( x s)
组别 生理盐水组
人参组 生脉散组
动物数( 只) 10 10 10
SOD( u/ ml) 0. 0989 0. 0154 0. 1496 0. 0116* 0. 1525 0. 0078*
表 1 沉香与伪品沉香的显微比较鉴别
项目 粗末
纤维
木薄壁细胞
石细胞 油细胞 草酸钙晶体
沉香 棕褐色
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
伪品沉香 灰白色
纤 维 成 束 或 长 梭 形 纤维众多、长梭形直 径
直径 20~ 30um
20~ 27um
参考文献
1 张之林. 生脉散的研究近况[ J] . 中成药, 1991, 13 ( 5) : 34 2 陈可冀. 抗衰老中药学[ M] . 北京: 中医古籍出版社, 1989. 198 3 陈文为, 路雪雅, 刘春梅. 清宫寿桃粉剂对大鼠肝 匀浆( 体外) 生 成
脂质过氧化物的影响[ J] . 中西医结合杂志, 1984, 4( 11) : 686 4 刘玉兰. SOD 应用研究集. 北京: 原子能出版社, 1991. 131 5 魏重琴, 艾建芳. 超氧化物歧化酶肾上腺素自 氧化测定法的研 究.