细针穿刺结合免疫组织化学检测在颈部淋巴结恶性肿瘤鉴别诊断中的作用

细针穿刺结合免疫组织化学检测在颈部淋巴结恶性肿瘤鉴别诊
断中的作用
高妮娜;邓亚平;李晶;方帆;刘志红;曾亮
【摘要】目的:探讨细针穿刺(FNAC)结合免疫组织化学(IHC)在鉴别诊断颈部淋巴结恶性肿瘤中的作用与意义.方法:采用细针穿刺获得50例颈部肿大淋巴结组织,涂片进行HE染色,观察细胞形态,可疑的恶性肿瘤病变进行免疫组织化学检测.结果:单独FNAC分型确诊病例为35.7％,FNAC-IHC分型确诊病例为90.5％.FNAC-IHC 对淋巴结肿瘤性病变的类型确诊率显著高于单独FNAC的确诊率.FNAC-IHC在颈部肿瘤性病变分型鉴别诊断的敏感度显著高于单独FNAC,而二者的特异性没有差别.结论:FNAC-IHC在颈部淋巴结恶性肿瘤的鉴别诊断价值优于FNAC.
【期刊名称】《华夏医学》
【年(卷),期】2014(027)001
【总页数】3页(P62-64)
【关键词】免疫组织化学;细针穿刺;细胞学;颈部淋巴结;恶性肿瘤
【作者】高妮娜;邓亚平;李晶;方帆;刘志红;曾亮
【作者单位】中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院病理科,湖南长沙410013;中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院病理科,湖南长沙410013;中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院乳腺内科,湖南长沙410013;中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院病理科,湖南长沙410013;中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院病理科,湖南长沙410013;中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院病理科,湖南长沙410013
【正文语种】中文
【中图分类】R739.91
细针穿刺细胞学(fine-needle aspiration cytology，FNAC) 是公认的诊断颈部结节性病变的有效方法[1-2]。

该方法诊断颈部转移癌的准确性达91%以上[3-5]。

但实际工作中发现部分恶性肿瘤类型，单凭细胞学检测难以确定，需要辅助检测技术协助肿瘤分型。

免疫组织化学技术(immunohistochanmical method， IHC)是使用最广的病理辅助诊断技术。

笔者探讨免疫组织化学技术结合穿刺细胞学(FNAC-IHC)在颈部淋巴结或肿块性病变鉴别诊断中的作用。

1.1 病例资料
50例病例为湖南省肿瘤医院2011年1月至2013年10月以淋巴结肿大或颈部包块为症状的就诊患者，男性27例，女性23例，平均年龄45.8岁(29岁至68岁)，临床诊断为淋巴结肿瘤性病变。

肿大淋巴结位于左颈部19例，右颈部31例。

淋
巴结病变发生率在年龄、性别、部位上没有差别。

患者均在外院进行过消炎治疗，效果欠佳而怀疑肿瘤性病变，建议行淋巴结细针穿刺细胞学检查。

本组病例的确
诊标准参照最终常规石蜡切片病理诊断，通过原发灶确诊，如鼻咽低分化鳞癌通过鼻咽活检确诊，胃癌通过胃镜活检确诊，肺癌通过支气管镜或肿块穿刺活检等。

50例患者中，经单独细针穿刺细胞学进行初步诊断，其中，炎症性病变占
16%(8/50)，可疑恶性肿瘤性病变84%(42/50)。

炎症性病变包括非特异性炎症5
例和结核3例，但有两例炎症性病变在进一步检查中，考虑是霍奇金淋巴瘤，在
病变良恶性方面的确诊率为96%。

可疑恶性肿瘤性病变，通过细胞形态学观察，
选择性进行免疫组织化学检测证实及鉴别诊断，鳞状细胞癌采用高分子量细胞角蛋白(HCK)，腺癌采用低分子细胞角蛋白，淋巴瘤采用白细胞共同抗原(CD45)，甲
状腺癌采用甲状腺球蛋白(TG)，神经内分泌肿瘤采用嗜铬素(CgA)，NSE，恶性黑
色素瘤采用Melanoma(Pan和S100)，乳腺癌采用乳腺球蛋白(Mammaglobin)
检测。

即用型非生物素免疫组化EliVisionTMplus检测试剂盒(KIT-9902)均为福州迈新生物技术公司产品。

1.2 细针穿刺细胞学检测
以左手固定肿物，右手持10 ml 5号干燥注射器，7号针头，常规消毒皮肤后刺入肿块。

注射器与皮肤形成45°角刺入。

在进入肿块中心后，回拉针芯，造成负压，吸取2～3次后，缓慢退出至皮下，再改变方向2次吸取。

抽吸完成后，在不带负压的情况下拔出针头，局部压迫片刻。

吸取物迅速置于清洁载玻片上，用推片或针头均匀推开。

将带有吸取物的载玻片置于酒精固定液，固定10 min后，进行HE
染色。

1.3 细胞涂片的免疫组织化学方法[6-7]
穿刺物涂片4张，1张用于HE染色进行细胞学常规诊断，其他3张用于免疫组化检测备用。

涂片自然干燥后，在-20 ℃预冷丙酮中固定10 min，吹干，PBS洗2次，0.3% H2O2孵育10 min，PBS洗2次，10%非免疫血清孵育10 min，加一抗后，37 ℃湿盒中孵育30 min，PBS洗2次，使用免疫组织化学超敏UltraSensitive TM SP试剂盒，生物素化二抗孵育10 min，PBS洗2次，链霉菌抗生素蛋白-过氧化物酶孵育10 min，PBS洗2次，DAB显色剂作用，随时观察，苏木素复染，水洗、吹干、封片，显微镜观察结果。

1.4 统计学方法
数据采用SPSS 11.0统计软件分析，单独FNAC和FNAC-IHC的诊断效果比较，采用χ2检验；非随机相关采用Fisher精确检验(Fisher’s exact test)分析，
P<0.05为差异有统计学意义。

2.1 颈部淋巴结肿大患者诊断分析
单独FNAC分型确诊病例为35.7%(15/42)，FNAC-IHC分型确诊病例为
90.5%(38/42)，38例IHC-FNAC确定的肿瘤类型包括：病理学类型低分化鳞癌
14例，腺癌5例，乳头状癌5例，淋巴瘤8例，恶性黑色素瘤2例，小细胞未分化癌2例，乳腺癌2例。

FNAC-IHC对淋巴结肿瘤性病变的类型确诊率高于单独FNAC的确诊率，差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2 单独FNAC和FNAC-IHC在颈部淋巴结肿瘤鉴别诊断中的敏感性比较
以常规石蜡切片做病理诊断标准，单独FNAC在颈部淋巴结肿瘤鉴别诊断中的敏
感度为35.7%(15/42)，阳性预期值为100%。

FNAC-IHC的在颈部淋巴结肿瘤鉴别诊断中的敏感度为90.5%(38/42)，阳性预期值为100%。

FNAC-IHC在颈部肿瘤性病变分型鉴别诊断的敏感度高于单独FNAC(54.2%)，差异有统计学意义
(P<0.05)。

而两者的特异性无差别。

颈部淋巴结肿大是成人和儿童常见的疾病症状，涉及多种病变，包括非肿瘤性病变和肿瘤性病变。

非肿瘤性病变常见有各种原因引起的淋巴结反应性增生和特殊类型的淋巴结病变；而肿瘤性病变有原发性和转移性，原发性颈部肿瘤性病变主要是恶性淋巴瘤，而转移性肿瘤性病变较为复杂，其组织学类型因原发病变不同而不同，鉴别诊断十分重要[5]。

细针穿刺细胞学检测是病理学中一种快速、经济、相对安
全和可靠的初步诊断方法。

一般穿刺细胞学诊断，主要用于鉴别良恶性，在诊断肿瘤性病变和非肿瘤性病变中具有较高的准确率，部分典型病例可以分型，但在肿瘤性病例类型判断中误诊率较高，因为部分恶性肿瘤特别是恶性程度高而分化低的肿瘤在形态学上有一定相似性，由于针吸细胞学检查具有一定的局限性，如取样较少、仅有细胞成分而没有组织结构的参考，往往易造成假阴性结果，诊断正确率不高，还需结合其他检查指标方可明确诊断。

因此，对其检查结果应进行客观的分析与评价，有保留地接受，以免造成误诊和漏诊。

笔者实验结果显示，单纯FNAC在鉴别肿瘤良性方面准确性较高，但在恶性肿瘤
鉴别方面准确性较差，特别对于分化较差的恶性肿瘤的类型鉴别。

但免疫组织化学
的应用，可改善这一情况，FNAC-IHC对肿瘤类型的确诊率达90.4%。

由于FNAC-IHC检查较组织学IHC检查要求高，主要是转移灶较小时，细针可能难以
取到病变组织。

比如霍奇金淋巴瘤，一般情况下瘤细胞较少，经常不能得到足够实验所需细胞。

而一些肿瘤的诊断，需要参照组织结构的异常才能确诊。

所以，尽管FNAC-IHC诊断的准确性高于单纯FNAC，但其应用范围受限，需结合临床诊断，以及细胞学涂片的初步诊断结果加以综合分析，以达到最佳的诊断效果。

③通信作者：曾亮， E-mail：**************。

【相关文献】
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[3] Chen J H， Wang C C. Use of routine ultrasound-guided fine-needle aspiration cytology to assess the neck in patients with head and neck squamous cell carcinoma[J]. Head Neck， 2012，34(11)：1678-1689.
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