第五章生物碱介绍
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非极性溶剂系统：一般先用10%的氢氧化 铵、碳酸氢钠或氢氧化钠碱化，使生物盐 游离，后用氯仿或乙醚提取，缺点是不能 提出水溶性生物碱。
第七页，编辑于星期日：七点 十四分。
极性溶剂系统：极性较大的生物碱可用
中性甲醇、乙醇、酸水（常用0.1%-1%的盐酸、硫酸等）以及缓冲液提取，
但提出的杂质较多，需净化。
第五章 中药制剂中各类化学成分分析
第一节 含生物碱（alkaloid）类成分的分析
第一页，编辑于星期日：七点 十四分。
生物碱的分布
含生物碱量多的科有罂粟科、防已科、茄科、小 檗科、毛茛科、芸香科、夹竹桃科、马钱科及茜 草科等，中药有三尖杉、麻黄、黄连、黄柏、乌 头、延胡索、粉防已、颠茄、洋金花、贝母、百 部等。
品精密称定，加无水乙醇溶液并放置24小时，过滤，减压
回收乙醇，至残留液至小量时加2%盐酸溶液（注2），
移入分液漏斗中，用乙醚萃取3次（注3），在样品液中
滴 加 氨 试 液 调 PH9 10 （ 注 4 ） ， 再 用 乙 醚 - 氯 仿 （3:1）混合液提取３次（注5），合并萃取液，蒸干， 加无水乙醇溶解．精密加入硫酸液（0.01mol/l）与
通常用磷酸盐缓冲液，但操作时由于存在 盐，做过后应充分洗柱，以免腐蚀柱子。
第二十六页，编辑于星期日：七点 十四分。
（2）、固定相方面的改进 A：选择C链较短的键合相硅胶为固定相，如C8
比C18好，原因是由于硅烷的C链较短则覆盖硅 胶的表面较好，只有较少的游离硅醇基。 B：封尾技术可使填料的键合更彻底，常用三甲 基氯硅烷（TMCS）处理，可减少残余羟基，增 加单体覆盖度。
人有了知识，就会具备各种分析能力，
明辨是非的能力。
所以我们要勤恳读书，广泛阅读，
古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力；
通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平，
培养文学情趣；
通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。
有许多书籍还能培养我们的道德情操，
第十五页，编辑于星期日：七点 十四分。
四、含生物碱类成分中药制剂的含量测定 （一）总生物碱的含量测定
第十六页，编辑于星期日：七点 十四分。
1、化学分析法
第十七页，编辑于星期日：七点 十四分。
2、 分光光度法 （1）直接测定法
第十八页，编辑于星期日：七点 十四分。
（2）离子对萃取比色法
酸性染料比色法 在一定pH介质中，生物碱B可与氢离子H+结
固定相表面的游离硅醇基的活性，使生物碱易出峰， 峰形好。最常用的有二乙胺、三乙胺；
B：加入离子对试剂，使其与生物碱生成离子对而 掩蔽其碱性基团，从而不会与固定相表面的硅醇基 作用；常用辛烷磺酸钠或十二烷基磺酸钠表面活性 剂。
第二十四页，编辑于星期日：七点 十四分。
C：也可以加入季铵盐试剂，
[R3SioH]
合生成生物碱盐的阳离子BH+，而酸性染料在 此条件下解离为阴离子In-,则阴阳离子能定量 结合生成有色化合物（离子对）。
再用合适的有机溶剂将该离子对提取，测定其 吸收度值，进而对生物碱定量。
第十九页，编辑于星期日：七点 十四分。
P117
注意事项：1、选择适当的pH 则生物碱成盐，成为阳
离子BH+而酸性染料成为阴离子In-，阴阳离子可结合。如 pH太低，则水相酸性强，虽然生物碱成盐，但酸性染料
酸碱性
生物碱结构中含氮，多呈碱性。能与无 机酸、有机酸成盐
N： + H+X-
[ N：H]+X-
碱性强弱为：季胺 > 叔胺 > 仲胺 > 伯胺 > 酰胺
沉淀反应
第五页，编辑于星期日：七点 十四分。
三、含生物碱类成分中药制剂的定性鉴别
第六页，编辑于星期日：七点 十四分。
常用的提取溶剂系统
给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。
第三十一页，编辑于星期日：七点 十四分。
第三十二页，编辑于星期日：七点 十四分。
第二十一页，编辑于星期日：七点 十四分。
雷氏盐比色法
第二十二页，编辑于星期日：七点 十四分。
（三）色谱法 1、高效液相色谱法 离子对色谱、正相色谱、反相色谱。
第二十三页，编辑于星期日：七点 十四分。
反相HPLC的改进：
（1）、流动相方面的改进 A：加入硅醇基抑制剂，可在流动相中抑制或掩蔽
甲基红指示剂３滴，用氢氧化钠液（0.02mol/l）滴定， 并计算含量．
回答：注１处，生乌头的主要有效成分是什么？ 注2处，加盐酸溶液的目的是什么？ 注3处，用乙醚萃取的目的是什么？ 注4处，滴加氨试液的目的是什么？滴于什么样品液中？ 注5处，用此混合液能提取出待测成分吗？为什么？
第三十页，编辑于星期日：七点 十四分。
第八页，编辑于星期日：七点 十四分。
混合溶剂系统：用不同极性的溶剂按不同比例 混合，可较好地进行提取。
第九页，编辑于星期日：七点 十四分。
（一）一般理化鉴别
第十页，编辑于星期日：七点 十四分。
（二）色谱鉴别
1、薄层色谱法 吸附剂的选择：硅胶本身有弱酸性，与生物碱 成盐，使吸附力增强，若用中性展开系统，其 Rf值小，易拖尾。一般用碱性展开系统或在中 性中加少量碱性溶剂，如二乙胺、氢氧化铵或 用氨水饱和（展开缸中放一小杯氨水）或制备 碱板（在硅胶板中加稀碱溶液）。碱性氧化铝 因本身带有碱性，故用中性展开剂即可使生物 碱得到很好的分离。
第十一页，编辑于星期日：七点 十四分。
脂溶性生物碱----用吸附薄层法，用活度较大 的吸附剂如硅胶、氧化铝。
水溶性生物碱----用硅藻土、纤维素作为支持 剂，硅胶板也可以
第十二页，编辑于星期日：七点 十四分。
展开剂的选择
脂溶性生物碱采取极性小的溶剂 水溶性用极性大的溶剂 但一般用混合溶剂较多，单一溶剂少
（3）、增加流动相的脂溶性 （4）、升高柱温
第二十七页，编辑于星期日：七点 十四分。
2、薄层色谱法
第二十八页，编辑于星期日：七点 十四分。
3、气相色谱法
适用于有挥发性的、遇热不分解的生物碱 类，如麻黄碱、槟榔碱、苦参碱和颠茄类 生物碱。
第二十九页，编辑于星期日：七点 十四分。
思考题：乌头（注1）的容量法测定的操作程序是：取样
亦以酸的形式存在；pH太高则水相碱性强，生物碱以游
离状态存在，酸性染料以离子形式存在。都不能使阴阳离 子定量地结合。
2、酸性染料的选择 常用的有溴酚蓝、溴甲酚绿、
溴麝香草酚蓝等
3、合适的有机溶剂 要求对生物碱与酸性染料的结
合物有很好的溶解度。氯仿、二氯甲烷
第二十页，编辑于星期日：七点 十四分。
苦味酸盐法
第十三页，编辑于星期日：七点 十四分。
显色剂的选择 某些生物碱本身有颜色，可直接于可见光
下观察。 有紫外吸收的可用紫外检测。 但大部分生物碱无色且无荧光，则需喷显
色剂，最常用的显色剂有改良碘化铋钾、 碘蒸气、氨蒸气
第十四页，编辑于星期日：七点 十四分。
2、纸色谱法
3、高效液相色谱法 4、气相色谱法
硅醇基
+ [A] ≒
季铵盐
[R3SioH.A] 复合物
连续添加季铵盐时，平衡向右，因而被分离 的生物碱和硅醇基之间的作用被阻碍，从而 使生物碱得到很好的分离。
常用有溴化四甲基胺
第二十五页，编辑于星期日：七点 十四分。
D：在流动相中加入一定浓度电解质缓冲盐， 可改变流动相离子强度，稳定pH值及促进离 子对作用，从而改善峰形及分离效果。
第二页，编辑于星期日：七点 十四分。
Hale Waihona Puke 、生物碱的理化性质第三页，编辑于星期日：七点 十四分。
溶解度 多数极性较小，属于亲脂性碱，游离状态下几
乎不溶于水。成盐后则水溶性增加，易溶于水 及醇中，不溶或难溶于苯、氯仿、乙醚等。生 物碱和其盐这一相反的溶解性质可以用于它的 提取、分离和精制。
第四页，编辑于星期日：七点 十四分。
第七页，编辑于星期日：七点 十四分。
极性溶剂系统：极性较大的生物碱可用
中性甲醇、乙醇、酸水（常用0.1%-1%的盐酸、硫酸等）以及缓冲液提取，
但提出的杂质较多，需净化。
第五章 中药制剂中各类化学成分分析
第一节 含生物碱（alkaloid）类成分的分析
第一页，编辑于星期日：七点 十四分。
生物碱的分布
含生物碱量多的科有罂粟科、防已科、茄科、小 檗科、毛茛科、芸香科、夹竹桃科、马钱科及茜 草科等，中药有三尖杉、麻黄、黄连、黄柏、乌 头、延胡索、粉防已、颠茄、洋金花、贝母、百 部等。
品精密称定，加无水乙醇溶液并放置24小时，过滤，减压
回收乙醇，至残留液至小量时加2%盐酸溶液（注2），
移入分液漏斗中，用乙醚萃取3次（注3），在样品液中
滴 加 氨 试 液 调 PH9 10 （ 注 4 ） ， 再 用 乙 醚 - 氯 仿 （3:1）混合液提取３次（注5），合并萃取液，蒸干， 加无水乙醇溶解．精密加入硫酸液（0.01mol/l）与
通常用磷酸盐缓冲液，但操作时由于存在 盐，做过后应充分洗柱，以免腐蚀柱子。
第二十六页，编辑于星期日：七点 十四分。
（2）、固定相方面的改进 A：选择C链较短的键合相硅胶为固定相，如C8
比C18好，原因是由于硅烷的C链较短则覆盖硅 胶的表面较好，只有较少的游离硅醇基。 B：封尾技术可使填料的键合更彻底，常用三甲 基氯硅烷（TMCS）处理，可减少残余羟基，增 加单体覆盖度。
人有了知识，就会具备各种分析能力，
明辨是非的能力。
所以我们要勤恳读书，广泛阅读，
古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力；
通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平，
培养文学情趣；
通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。
有许多书籍还能培养我们的道德情操，
第十五页，编辑于星期日：七点 十四分。
四、含生物碱类成分中药制剂的含量测定 （一）总生物碱的含量测定
第十六页，编辑于星期日：七点 十四分。
1、化学分析法
第十七页，编辑于星期日：七点 十四分。
2、 分光光度法 （1）直接测定法
第十八页，编辑于星期日：七点 十四分。
（2）离子对萃取比色法
酸性染料比色法 在一定pH介质中，生物碱B可与氢离子H+结
固定相表面的游离硅醇基的活性，使生物碱易出峰， 峰形好。最常用的有二乙胺、三乙胺；
B：加入离子对试剂，使其与生物碱生成离子对而 掩蔽其碱性基团，从而不会与固定相表面的硅醇基 作用；常用辛烷磺酸钠或十二烷基磺酸钠表面活性 剂。
第二十四页，编辑于星期日：七点 十四分。
C：也可以加入季铵盐试剂，
[R3SioH]
合生成生物碱盐的阳离子BH+，而酸性染料在 此条件下解离为阴离子In-,则阴阳离子能定量 结合生成有色化合物（离子对）。
再用合适的有机溶剂将该离子对提取，测定其 吸收度值，进而对生物碱定量。
第十九页，编辑于星期日：七点 十四分。
P117
注意事项：1、选择适当的pH 则生物碱成盐，成为阳
离子BH+而酸性染料成为阴离子In-，阴阳离子可结合。如 pH太低，则水相酸性强，虽然生物碱成盐，但酸性染料
酸碱性
生物碱结构中含氮，多呈碱性。能与无 机酸、有机酸成盐
N： + H+X-
[ N：H]+X-
碱性强弱为：季胺 > 叔胺 > 仲胺 > 伯胺 > 酰胺
沉淀反应
第五页，编辑于星期日：七点 十四分。
三、含生物碱类成分中药制剂的定性鉴别
第六页，编辑于星期日：七点 十四分。
常用的提取溶剂系统
给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。
第三十一页，编辑于星期日：七点 十四分。
第三十二页，编辑于星期日：七点 十四分。
第二十一页，编辑于星期日：七点 十四分。
雷氏盐比色法
第二十二页，编辑于星期日：七点 十四分。
（三）色谱法 1、高效液相色谱法 离子对色谱、正相色谱、反相色谱。
第二十三页，编辑于星期日：七点 十四分。
反相HPLC的改进：
（1）、流动相方面的改进 A：加入硅醇基抑制剂，可在流动相中抑制或掩蔽
甲基红指示剂３滴，用氢氧化钠液（0.02mol/l）滴定， 并计算含量．
回答：注１处，生乌头的主要有效成分是什么？ 注2处，加盐酸溶液的目的是什么？ 注3处，用乙醚萃取的目的是什么？ 注4处，滴加氨试液的目的是什么？滴于什么样品液中？ 注5处，用此混合液能提取出待测成分吗？为什么？
第三十页，编辑于星期日：七点 十四分。
第八页，编辑于星期日：七点 十四分。
混合溶剂系统：用不同极性的溶剂按不同比例 混合，可较好地进行提取。
第九页，编辑于星期日：七点 十四分。
（一）一般理化鉴别
第十页，编辑于星期日：七点 十四分。
（二）色谱鉴别
1、薄层色谱法 吸附剂的选择：硅胶本身有弱酸性，与生物碱 成盐，使吸附力增强，若用中性展开系统，其 Rf值小，易拖尾。一般用碱性展开系统或在中 性中加少量碱性溶剂，如二乙胺、氢氧化铵或 用氨水饱和（展开缸中放一小杯氨水）或制备 碱板（在硅胶板中加稀碱溶液）。碱性氧化铝 因本身带有碱性，故用中性展开剂即可使生物 碱得到很好的分离。
第十一页，编辑于星期日：七点 十四分。
脂溶性生物碱----用吸附薄层法，用活度较大 的吸附剂如硅胶、氧化铝。
水溶性生物碱----用硅藻土、纤维素作为支持 剂，硅胶板也可以
第十二页，编辑于星期日：七点 十四分。
展开剂的选择
脂溶性生物碱采取极性小的溶剂 水溶性用极性大的溶剂 但一般用混合溶剂较多，单一溶剂少
（3）、增加流动相的脂溶性 （4）、升高柱温
第二十七页，编辑于星期日：七点 十四分。
2、薄层色谱法
第二十八页，编辑于星期日：七点 十四分。
3、气相色谱法
适用于有挥发性的、遇热不分解的生物碱 类，如麻黄碱、槟榔碱、苦参碱和颠茄类 生物碱。
第二十九页，编辑于星期日：七点 十四分。
思考题：乌头（注1）的容量法测定的操作程序是：取样
亦以酸的形式存在；pH太高则水相碱性强，生物碱以游
离状态存在，酸性染料以离子形式存在。都不能使阴阳离 子定量地结合。
2、酸性染料的选择 常用的有溴酚蓝、溴甲酚绿、
溴麝香草酚蓝等
3、合适的有机溶剂 要求对生物碱与酸性染料的结
合物有很好的溶解度。氯仿、二氯甲烷
第二十页，编辑于星期日：七点 十四分。
苦味酸盐法
第十三页，编辑于星期日：七点 十四分。
显色剂的选择 某些生物碱本身有颜色，可直接于可见光
下观察。 有紫外吸收的可用紫外检测。 但大部分生物碱无色且无荧光，则需喷显
色剂，最常用的显色剂有改良碘化铋钾、 碘蒸气、氨蒸气
第十四页，编辑于星期日：七点 十四分。
2、纸色谱法
3、高效液相色谱法 4、气相色谱法
硅醇基
+ [A] ≒
季铵盐
[R3SioH.A] 复合物
连续添加季铵盐时，平衡向右，因而被分离 的生物碱和硅醇基之间的作用被阻碍，从而 使生物碱得到很好的分离。
常用有溴化四甲基胺
第二十五页，编辑于星期日：七点 十四分。
D：在流动相中加入一定浓度电解质缓冲盐， 可改变流动相离子强度，稳定pH值及促进离 子对作用，从而改善峰形及分离效果。
第二页，编辑于星期日：七点 十四分。
Hale Waihona Puke 、生物碱的理化性质第三页，编辑于星期日：七点 十四分。
溶解度 多数极性较小，属于亲脂性碱，游离状态下几
乎不溶于水。成盐后则水溶性增加，易溶于水 及醇中，不溶或难溶于苯、氯仿、乙醚等。生 物碱和其盐这一相反的溶解性质可以用于它的 提取、分离和精制。
第四页，编辑于星期日：七点 十四分。