不同检测方法对透析用水细菌监测的应用效果评价

不同检测方法对透析用水细菌监测的应
用效果评价
摘要:目的：评价不同检测方法检测透析用水细菌的效果。

方法：遴选2021年11月份我院透析用水样本共计60份，检测方法分别应用①过滤法；②涂布法；
③倾注法，分别采用普通琼脂（48h，36℃）及胰化蛋白胨葡萄糖培养基TGEA （168h，20℃）实施细菌培养，互比其细菌菌落数。

结果：无论在细菌检出率，亦是培养培养菌落计数中低温度长时间培养（20℃，168h）要远远优于高温度短时间培养（36℃，48h）（P＜0.05）。

结论：低温度长时间培养（20℃，168h）——TGEA过滤法更加适宜应用在透析用水质量的监测当中，其检测结果准确、便捷等优势，能够保障血液透析患者的治疗安全。

关键词：细菌培养；TGEA培养基；透析用水；血液透析；细菌菌落数
血液透析是肾衰竭患者替代肾功能的方法，而血液透析用水的质量是血液透析的重中之重。

通常情况下，血液透析患者每周都会与透析用水（360L）直接或者间接接触，正常人饮水量仅是该数据的1/30，倘若透析用水中含有污染物（化学污染、内毒素、细菌等），都会通过透析膜进入患者体内，而透析中任何一个患者出现问题，都可能对患者的身体健康，甚至是生命带来威胁，并影响血液透析的质量。

此外，伴随着血液透析技术的广泛应用，医生越来越重视透析用水的质量。

基于此，本次研究将不同透析用水检测方法进行一一比较，旨在选择可行性的检验方法，保障血液透析效果及安全性。

方法如下。

1材料与方法
1.1样本来源
遴选2021年11月份我院透析用水样本共计60份，分别来源于水处理系统进水软管连接部位、透析机断开、回水口及出水口部位。

1.2材料
①微生物检测试剂盒；②TGEA由天津施特雷商务科技股份有限公司提供；③无菌过滤膜（0.45µm）；④抛弃型无菌过滤杯（Microsart®@filter）；⑤微生物限度三联不锈钢过滤器（Combisart®）德国赛多利斯公司提供；⑥普通营养琼脂培养基由北京路桥提供；⑦菌落计数仪器由西班牙IUT公司提供；⑧生化培养箱（LRH250A）。

1.3方法
60份样本来自我处10台血液透析机，在水处理正常使用中，遵循无菌原则，利用乙醇（75%）行消毒采样。

取样阀门打开情况下并连续冲洗1min后，应用无菌采样瓶，对透析用水实施采样（200ml），要求在4h内送检。

检测方法分别应用①过滤法；②涂布法；③倾注法，分别采用普通琼脂（48h，36℃）TGEA（168h，20℃）实施细菌培养。

过滤法：将1ml的水样注入微生物检测试剂盒内，待滤膜将其完全吸收后，在其表面均匀覆盖TGEA行培养。

另外取1ml水样将其注入无菌过滤杯内，再加入无菌蒸馏水50ml，采用微生物限度三联不锈钢过滤器抽滤做集菌操作，最后在普通营养琼脂培养基上贴附取下后的滤膜（注意：不留气泡），最后行细菌培养。

涂布法：在无菌平皿中分别将普通营养琼脂培养基和TGEA倾注，待凝固后方可适应。

分别取1ml的水样，在无菌平皿上采用无菌L棒涂抹均匀，行培养操作。

细菌培养：无菌平皿内注入1ml水样，在普通营养琼脂培养基和TGEA冷却至40℃至45℃且融化，倾注水样（15ml至20ml），行培养。

1.4观察指标
待培养操作结束后，应用菌落计数仪器对（平行样本）不同检验方法读取其菌落数。

当菌落计数均值大于或等于1CFU/ml被判定为阳性[1]。

1.5统计学方法
SPSS25.0展开详细分析，数量数据采用（%）体现，x2检验，由于检验结果
呈非正态分布，故运用M（P
25，P
75
）即四分位间距表示菌落数据，Z检验，如P值
＜0.05，为具有统计学意义。

2结果
2.1细菌检测情况
不同检测方法（过滤、涂布、倾注）TGEA法20℃，168h培养检出率远远高于普通营养琼脂培养基36℃，48h培养（P＜0.05），表1。

表1不同培养条件和不同检测方法细菌检测情况（份，%）
检测方法
份
数
检
出菌落
数量
检
出率
x2P
倾注法
TGEA法20℃，168h培
养
6
36
6
0.0
16
.269
＜
0.05
普通营养琼脂培养基
36℃，48h培养
6
22
3
6.67
涂布法
TGEA法20℃，168h培
养
6
37
6
1.67
23
.014
＜
0.05
普通营养琼脂培养基
36℃，48h培养
6
23
3
8.33
过滤法
TGEA法20℃，168h培
养
6
38
6
3.33
18
.351
＜
0.05
普通营养琼脂培养基
36℃，48h培养
6
22
3
6.67
2.2菌落计数
不同检测方法（过滤、涂布、倾注）TGEA法20℃，168h培养培养菌落计数远远高于普通营养琼脂培养基36℃，48h培养（P＜0.05），表2。

表2不同培养条件和不同检测方法细菌计数[份，M（P
25，P
75
）]
检测方法
份
数
菌落计
数
（CUF/ml）
Log10z P
倾注
法TGEA法20℃，
168h培养
6
1.0
（0,14,23）
0.3
（0,1,17）
3
.158
＜
0.05
普通营养琼脂培养基36℃，48h培养
6
（0,3,22）
（0,0,57）
涂布TGEA法20℃，
168h培养
6
2.5
（0,18,48）
0.54
（0,1,27）
3
.016
＜
0.05
法
普通营养琼脂培养基36℃，48h培养
6
（0,5.23）
（0,0,78）
过滤
法TGEA法20℃，
168h培养
6
4.0
（0,24,23）
0.7
（0,1,38）
3
.266
＜
0.05
普通营养琼脂培养基36℃，48h培养
6
（0,5.00）
（0,0,76）
3讨论
透析用水是自来水经过多道工序达到去除不溶性杂质（大颗粒）、微生物、氯、金属离子（镁、钙等）等，主要用于血液透析。

对于实施血液透析患者而言，透析用水经过处理已经丢失了消毒的因子，在储水罐或者管道内更加容易生成多种有害物质，譬如：内毒素、异养菌、生物膜等。

既如此，为了保障血液透析患者治疗安全性，实时监测透析水工作意义深远。

就当前而言，各个医院监测能力依然存在一定的差异。

部分医院采用高营养性培养基，培养用时短，为此阳性结果较低。

但大多数研究学者指出，低营养基，培养用时长、温度低，适宜异养菌生长，为此阳性率较低，但假阴性数据高。

早在2017年我国实行的《血液透析及相关治疗用水》[2]标准中，对透析用水检测建议采用薄膜滤过TGEA法，并将温度建议控制在17℃至23℃区间，培养时间为168h。

综上所述，低温度长时间培养（20℃，168h）——TGEA过滤法更加适宜应用在透析用水质量的监测当中，其检测结果准确、便捷等优势，能够保障血液透析患者的治疗安全。

参考文献
[1]国家食品药品监督管理总局．YY 0572-2015血液透析及相关治疗用水[S].北京：中国标准出版社，2015.
[2]钱雪峰，乔美珍，金美娟，等．三种用于血液透析和相关治疗用水微生物学监测方法的评价[J].中国感染控制杂志，2017，16(8)：698-701．。