人参`党参`黄芪`甘草`当归`冬虫夏草`淫羊藿`枸杞子`何首乌`刺五
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(3)大分子性
抗原决定簇: 抗原物质 表面特定 化学基团。
抗体: 机体受抗原刺激后产生的,并且 能与该抗原发生特异性结合的 具有免疫功能的球蛋白。
抗毒素 凝集素 分布:主要在血清中; 组织液及外分泌液(乳汁\唾液)也有。
抗原被体液中抗体消灭----体液免疫 抗原被相应的免疫细胞消灭----细胞免疫
造血干细胞
胸腺(thymus) 骨髓(bone marrow)
B淋巴细胞 少数 少数 淋巴结脾脏 淋巴器官 扁桃体 抗原刺激 抗原刺激 效应B细胞 效应T细胞 T淋巴细胞
2、抗原和抗体 抗原:可使机体发生特异性 免疫反应的物质。 如:细菌、病毒、花粉 外毒素 类毒素 抗原特性(1)异物性 (2)特异性
常用E花环试验方法有总T玫瑰花环和活性 E玫瑰花环试验。 ①总T细胞E玫瑰花环试验 将分离的淋巴细胞与SRBC混合,经37℃ 短时间温育,继以低速离心沉淀后,移置1℃至 少2小时,在这种条件下,静止期和活动期T细 胞,均能与不同数量的SRBC自发形成E花环, 所得E花环的百分率和绝对数可代表被检标本 中全部T细胞的百分率和总数,故又称Et花环 试验(t指total)。
(2)中性白细胞功能测定:中性自细胞具有 非特异性吞噬和杀菌功能,可以在一定程度 上反映机体的非特异性免疫功能,观察中药 药理作用。
常用方法:小鼠中性白细胞 体外吞噬功能 测定试验
4,几种重要淋巴因子测定方法 4.1小鼠干扰素测定:干扰素除抑制病毒复制 和瘤细胞增殖外,还有免疫调节功能。其方法 基本原理是观察干扰素(小鼠血清)抑制病毒对 细胞的致病变作用。
4.2白细胞介素-1(IL-1)测定
IL-1主要由单核细胞或M在体外受刺激物(如 LPS等)刺激而产生,对T淋巴细胞具有辅丝裂原 作用的肽类分子,其主要生物功能之是刺激T淋 巴细胞增殖分化。
常用E花环试验方法有总T玫瑰花环和活性 E玫瑰花环试验。 ①总T细胞E玫瑰花环试验 将分离的淋巴细胞与SRBC混合,经37℃ 短时间温育,继以低速离心沉淀后,移置1℃至 少2小时,在这种条件下,静止期和活动期T细 胞,均能与不同数量的SRBC自发形成E花环, 所得E花环的百分率和绝对数可代表被检标本 中全部T细胞的百分率和总数,故又称Et花环 试验(t指total)。
第二节
免疫
非特异性免疫(先天免疫或天然免疫) 免疫 特异性免疫(后天产生)
非特异性免疫
人体皮肤、黏膜----第一道防线 体液中的杀菌物质、吞噬细胞--第二道防线
特点:天生,对多种病原体都有一定免疫作用
特异性免疫----第三道防线(淋巴细胞) 1、淋巴细胞的起源和分化
淋巴细胞:由骨髓中造血干细胞分化、 发育而来。
②活性T细胞E玫瑰花环试验 人外周血T细胞中有部分T细胞对SRBC具有高 度亲和力的受体,与较低比例的SRBC混合,低 速离心后不经低温放置即迅速形成E花环,称为活 性T细胞E玫瑰花环(Ea花环,a指active),它更能 敏感反映人体细胞免疫水平和动态变化。
1.2 T细胞功能测定方法 (1)T淋巴细胞转化增殖试验 主要有形态学方法和3H-胸腺嘧啶核苷掺 入法。
②活性T细胞E玫瑰花环试验 人外周血T细胞中有部分T细胞对SRBC具有高 度亲和力的受体,与较低比例的SRBC混合,低 速离心后不经低温放置即迅速形成E花环,称为活 性T细胞E玫瑰花环(Ea花环,a指active),它更能 敏感反映人体细胞免疫水平和动态变化。
1.2 T细胞功能测定方法 (1)T淋巴细胞转化增殖试验 主要有形态学方法和3H-胸腺嘧啶核苷掺 入法。
(五)延缓衰老 许多补虚药都有延缓衰老的作用,这是中医药 能使人类健康长寿而具有特色的重要作用之一。
(六)增强某些器官和系统的功能 1,心血管系统 ①强心、升压、抗休克 ②扩张血管和降低血压 ③扩张冠脉、增加冠脉血流量、改善心肌血氧 供应,抗心肌缺血。 ④抗心律失常
2,造血系统 ①升高红细胞数和血红蛋白含量 ②升高血小板数 ③升高白细胞数 3,消化系统 多数补气药及补气方能促进 和调节胃肠运动并有抗溃疡作用。 (七)抗肿瘤
(2)中性白细胞功能测定
常用方法:小鼠中性白细胞 体外吞 噬功能测定试验
4.几种重要淋巴因子测定方法 4.1小鼠干扰素测定
4.2白细胞介素-1(IL-1)测定 4.3白细胞介素-2(IL-2)测定
5. 体液中有关可溶性免疫分子测定 5.1血清补体水平测定 方法: 血清总补体活性 单个补体成份(C3)活性测定
第一节 概述 一
补气药、补血药 补阴药、补阳药
与补益药有关的概念 虚证:
禀赋不足 烦劳过度 七情所伤 大病失养 饮食不节
阴血不足 阴虚-补阴药 血虚-补血药 气虚-补气药 阳虚-补阳药
阳气不足
虚证不是指某种疾病,其涉及范围广、几乎所有的 慢性病、部分急性疾病、先天不足和衰老等
4、细胞免疫 (抗原侵入细胞) A、感应阶段 B、反应阶段 C、效应阶段
(二)对中枢神经系统的影响
提高脑力工作效率和提高学习记忆能力。
(三)对物质代谢的影响 ①促进核酸代谢和蛋白质合成; ②对脂肪、糖代谢的影响; ③调节微量元素代谢; ④调节环核昔酸水平。
(四)对内分泌系统的影响 1.增强下丘脑一垂体一肾上腺皮质轴功能 2.增强下丘脑一垂体一性腺轴功能 3.调节下丘脑一垂体一甲状腺轴功能
3.耐低温和高温实验
耐低温实验常将小鼠放于-5℃以下的低温冰箱 内;耐高温实验则将小鼠放于45±l℃的恒温箱 内。观察小鼠生存时间和比较给药组和空白组动 物存活百分率。
(2)细胞毒T细胞(CTL)杀伤功能测定
方法:空斑减少法
2,B淋巴细胞功能测定:B淋巴细胞受抗原 刺激后,可增殖分化为浆细胞,能分泌免疫球 蛋白(Ig)进入血流和组织液中,供机体产生对相 应抗原的体液免疫。
2.1 体外抗体形成细胞(PFC)测定方法 原理:SRBC免疫小鼠,其小鼠脾细胞与一定 量SRBC混合,PFC释放溶血素(抗SRBC抗体), 在补体参与下,使SRBC溶解,从而在每一个 PFC周围形成一个肉眼可见的溶血空斑,计算出 100万个脾细胞中PFC的均值。PFC试验具有特 异性意,筛检力强,可直接观察等特点,作为判 断机体免疫功能及研究中药对机体免疫功能影响 的指标。
(2)细胞毒T细胞(CTL)杀伤功能测定
方法:空斑减少法
2.1 体外抗体形成细胞(PFC)测定方法 原理: SRBC免疫小鼠,其小鼠脾细胞与一定量SRBC 混合,PFC释放溶血素(抗SRBC抗体),在补体 参与下,使SRBC溶解,从而在每一个PFC周围 形成一个肉眼可见的溶血空斑,计算出100万个 脾细胞中PFC的均值。PFC试验具有特异性意, 筛检力强,可直接观察等特点,作为判断机体免 疫功能及研究中药对机体免疫功能影响的指标。
方法: (1)51Cr释放法
(2)孔雀绿比色法
3.3巨噬细胞活性检测
巨噬细胞在抗肿瘤免疫、抗感染免疫及免疫 调节中起重要作用。 (1)小鼠体内吞噬廓清能力测定试验:从整 体水平测定单核M$系统(主要由肝、脾及血管内 皮吞噬细胞构成的网状内皮系统)吞噬功能,常 用方法有隋性炭粒的廓清试验和同位素。
4.B淋巴细胞增殖试验:检测B淋巴细胞功能, 常用方法为3H-TdR掺入法。 5.免疫球蛋白(Ig)定量测定
3,其它免疫功能细胞测定方法 机体除T,B淋巴细胞外,还有自然杀伤细 胞(Natural Killer)、K细胞,巨噬细胞和LAK 细胞(Lymphokine Activated Killer)等具有免 疫功能细胞,这些细胞活性测定对研究中药对 机体免疫功能的影响有重要意义。
体液免疫
A、感应阶段 呈递 吞噬细胞处理呈递 呈递 T呈递 B细胞识别 B、反应阶段 B细胞增值分化 记忆细胞形成
C、效应 阶段
体液免疫特点: 1、抗原在 体液 中。 2、主要与 B 淋巴细胞有关。 3、抗体是由 效应 B淋巴细胞产生。 4、体液免疫也需要 T 淋巴细胞帮助 吞噬 体液免疫还需要_____细胞协助
4.B淋巴细胞增殖试验:检测B淋巴细胞功能, 常用方法为3H-TdR掺入法。 5.免疫球蛋白(Ig)定量测定
3.其它免疫功能细胞测定方法
3.1 NK细胞活性检测方法 3.2 K细胞活性测定方法 方法:
(1)51Cr释放法 (2)孔雀绿比色法
3.3巨噬细胞活性检测
(1)小鼠体内吞噬廓清能力测定试验
第二十章补益药
教学目的 掌握补益药的主要药理作用 人参、党参、黄芪、甘草、当归、冬虫 夏草、淫羊藿、 枸杞子、何首乌、刺五 加的药理作用、有效成分 教学内容 常用补益药的功效及分类。 补益药的主要药理作用。 人参、党参、黄芪、甘草、当归、冬虫 夏草、淫羊藿、 枸杞子、何首乌、刺五 加的有效成分,药理作用 教学重点 补益药的药理作用;人参、党参、黄芪、 甘草的主要药理作用
方法:同位素(51Cr,126IudR)释放法 效应细胞人用外周血分离的单核细胞, 小鼠异脾淋巴细胞;人NK细胞敏感的靶细胞 为K562,小鼠用51Cr,126IudR标记靶细胞。 效应细胞与靶细胞在一定效靶比例下共同温 育,进行体外细胞毒试验,被NK细胞破坏的 靶细胞可释放51Cr,126IudR ,其释放量与NK 细胞活性成正比,故测定上请液中放射性的 强弱,可推算出NK细胞活性相对水平。
2.2 血清溶血素抗体测定
原理:SRBC免疫动物,产生抗SRBC抗体-溶血素,释放至外周血。分离免疫动物血清, 与SRBC一起温育,在补体参与下,SRBC裂 解释放血红蛋白,测定血红蛋白量,以SRBC 半数溶血时吸收度值(HC50)表示,反映中药对 体液免疫的影响。该法准确、客观、省去空斑 计数的困难。
5.2溶菌酶活性测定
6. 免疫器官(胸腺脾脏)重量测定方法 胸腺和脾脏为机体主要免疫器官,一些免 疫抑制剂可使胸腺、脾脏萎缩;免疫增强剂可 使胸腺、脾脏增重。因此,胸腺、脾脏重量作 为观察药物对免疫影响初步研究.
(二)抗应激研究方法
1.鼠游泳实验
2.小鼠耐缺氧实验 2.1 常压缺氧 2.2 减压缺氧 2.3 小鼠断头后致急性脑缺氧实验
3.1 NK细胞活性检测方法
NK是与T、B细胞不同的另一类新发现的杀 伤淋巴细胞,它毋需抗原或有丝分裂原预先刺 激,也毋需抗体或补体参与,能在体内、外杀 伤肿瘤细胞、病毒感染细胞等。NK细胞在机体 肿瘤监护,抵御感染及免疫功能调节中发挥重 要作用。因此检测NK细胞活性对研究中药免疫 作用有重要意义。
2.2 血清溶血素抗体测定
原理:SRBC免疫动物,产生抗SRBC抗体-溶血素,释放至外周血。分离免疫动物血清, 与SRBC一起温育,在补体参与下,SRBC裂 解释放血红蛋白,测定血红蛋白量,以SRBC 半数溶血时吸收度值(HC50)表示,反映中药对 体液免疫的影响。该法准确、客观、省去空斑 计数的困难。
二、共同的药理作用
1、对机体免疫功能的影响
1)增强非特异性免疫功能: 免疫器官; 巨噬细胞功能;
外周血白细胞数
2)对特异性免疫功能的影响
A、增强细胞免疫:
B、调节体液免疫: 主要表现为体液免疫功能紊乱。
与免疫有关的概念 免疫:
从拉丁而来,愿意是“免除税收”, 在医学上具有“免除疫患”之意。
是机体识别“自已”或“非已”, 并产生特异性免疫应答排除抗原物质 的能力。
3.2 K细胞活性测定方法 K细胞是一类具有杀伤作用的特殊淋巴细 胞,它单独不能杀伤靶细胞,只有带抗原的靶 细胞与相应的特异抗体(IgG)结合后,才能对 靶细胞起杀伤作用,这一作用称为抗体依赖性 细胞毒作用(Antibody Dependent Celluar cytotoxicity,ADCC)。K细胞能在微量的特 异抗体存在下,杀伤肿瘤细胞和病毒感染细 胞,因此体外用ADCC试验检测K细胞活性, 可作为反映机体免疫功能的一个指标。
三,常用实验方法 (一)免疫系统试验: 1.T淋巴细胞测定方法 T淋巴细胞是介导机体细胞免疫的重要细胞。 1.1 T淋巴细胞标志测定方法 E花环试验:人外周血活T细胞具有绵羊红细 胞(SRBC)受体,在体外一定条件下,能与SRBC 结合形成玫瑰花样细胞团,称为E玫瑰花环 (Erythrocyte,E),E受体是T细胞的特异标记, 已被广泛用作检测T细胞的一项指标。
抗原决定簇: 抗原物质 表面特定 化学基团。
抗体: 机体受抗原刺激后产生的,并且 能与该抗原发生特异性结合的 具有免疫功能的球蛋白。
抗毒素 凝集素 分布:主要在血清中; 组织液及外分泌液(乳汁\唾液)也有。
抗原被体液中抗体消灭----体液免疫 抗原被相应的免疫细胞消灭----细胞免疫
造血干细胞
胸腺(thymus) 骨髓(bone marrow)
B淋巴细胞 少数 少数 淋巴结脾脏 淋巴器官 扁桃体 抗原刺激 抗原刺激 效应B细胞 效应T细胞 T淋巴细胞
2、抗原和抗体 抗原:可使机体发生特异性 免疫反应的物质。 如:细菌、病毒、花粉 外毒素 类毒素 抗原特性(1)异物性 (2)特异性
常用E花环试验方法有总T玫瑰花环和活性 E玫瑰花环试验。 ①总T细胞E玫瑰花环试验 将分离的淋巴细胞与SRBC混合,经37℃ 短时间温育,继以低速离心沉淀后,移置1℃至 少2小时,在这种条件下,静止期和活动期T细 胞,均能与不同数量的SRBC自发形成E花环, 所得E花环的百分率和绝对数可代表被检标本 中全部T细胞的百分率和总数,故又称Et花环 试验(t指total)。
(2)中性白细胞功能测定:中性自细胞具有 非特异性吞噬和杀菌功能,可以在一定程度 上反映机体的非特异性免疫功能,观察中药 药理作用。
常用方法:小鼠中性白细胞 体外吞噬功能 测定试验
4,几种重要淋巴因子测定方法 4.1小鼠干扰素测定:干扰素除抑制病毒复制 和瘤细胞增殖外,还有免疫调节功能。其方法 基本原理是观察干扰素(小鼠血清)抑制病毒对 细胞的致病变作用。
4.2白细胞介素-1(IL-1)测定
IL-1主要由单核细胞或M在体外受刺激物(如 LPS等)刺激而产生,对T淋巴细胞具有辅丝裂原 作用的肽类分子,其主要生物功能之是刺激T淋 巴细胞增殖分化。
常用E花环试验方法有总T玫瑰花环和活性 E玫瑰花环试验。 ①总T细胞E玫瑰花环试验 将分离的淋巴细胞与SRBC混合,经37℃ 短时间温育,继以低速离心沉淀后,移置1℃至 少2小时,在这种条件下,静止期和活动期T细 胞,均能与不同数量的SRBC自发形成E花环, 所得E花环的百分率和绝对数可代表被检标本 中全部T细胞的百分率和总数,故又称Et花环 试验(t指total)。
第二节
免疫
非特异性免疫(先天免疫或天然免疫) 免疫 特异性免疫(后天产生)
非特异性免疫
人体皮肤、黏膜----第一道防线 体液中的杀菌物质、吞噬细胞--第二道防线
特点:天生,对多种病原体都有一定免疫作用
特异性免疫----第三道防线(淋巴细胞) 1、淋巴细胞的起源和分化
淋巴细胞:由骨髓中造血干细胞分化、 发育而来。
②活性T细胞E玫瑰花环试验 人外周血T细胞中有部分T细胞对SRBC具有高 度亲和力的受体,与较低比例的SRBC混合,低 速离心后不经低温放置即迅速形成E花环,称为活 性T细胞E玫瑰花环(Ea花环,a指active),它更能 敏感反映人体细胞免疫水平和动态变化。
1.2 T细胞功能测定方法 (1)T淋巴细胞转化增殖试验 主要有形态学方法和3H-胸腺嘧啶核苷掺 入法。
②活性T细胞E玫瑰花环试验 人外周血T细胞中有部分T细胞对SRBC具有高 度亲和力的受体,与较低比例的SRBC混合,低 速离心后不经低温放置即迅速形成E花环,称为活 性T细胞E玫瑰花环(Ea花环,a指active),它更能 敏感反映人体细胞免疫水平和动态变化。
1.2 T细胞功能测定方法 (1)T淋巴细胞转化增殖试验 主要有形态学方法和3H-胸腺嘧啶核苷掺 入法。
(五)延缓衰老 许多补虚药都有延缓衰老的作用,这是中医药 能使人类健康长寿而具有特色的重要作用之一。
(六)增强某些器官和系统的功能 1,心血管系统 ①强心、升压、抗休克 ②扩张血管和降低血压 ③扩张冠脉、增加冠脉血流量、改善心肌血氧 供应,抗心肌缺血。 ④抗心律失常
2,造血系统 ①升高红细胞数和血红蛋白含量 ②升高血小板数 ③升高白细胞数 3,消化系统 多数补气药及补气方能促进 和调节胃肠运动并有抗溃疡作用。 (七)抗肿瘤
(2)中性白细胞功能测定
常用方法:小鼠中性白细胞 体外吞 噬功能测定试验
4.几种重要淋巴因子测定方法 4.1小鼠干扰素测定
4.2白细胞介素-1(IL-1)测定 4.3白细胞介素-2(IL-2)测定
5. 体液中有关可溶性免疫分子测定 5.1血清补体水平测定 方法: 血清总补体活性 单个补体成份(C3)活性测定
第一节 概述 一
补气药、补血药 补阴药、补阳药
与补益药有关的概念 虚证:
禀赋不足 烦劳过度 七情所伤 大病失养 饮食不节
阴血不足 阴虚-补阴药 血虚-补血药 气虚-补气药 阳虚-补阳药
阳气不足
虚证不是指某种疾病,其涉及范围广、几乎所有的 慢性病、部分急性疾病、先天不足和衰老等
4、细胞免疫 (抗原侵入细胞) A、感应阶段 B、反应阶段 C、效应阶段
(二)对中枢神经系统的影响
提高脑力工作效率和提高学习记忆能力。
(三)对物质代谢的影响 ①促进核酸代谢和蛋白质合成; ②对脂肪、糖代谢的影响; ③调节微量元素代谢; ④调节环核昔酸水平。
(四)对内分泌系统的影响 1.增强下丘脑一垂体一肾上腺皮质轴功能 2.增强下丘脑一垂体一性腺轴功能 3.调节下丘脑一垂体一甲状腺轴功能
3.耐低温和高温实验
耐低温实验常将小鼠放于-5℃以下的低温冰箱 内;耐高温实验则将小鼠放于45±l℃的恒温箱 内。观察小鼠生存时间和比较给药组和空白组动 物存活百分率。
(2)细胞毒T细胞(CTL)杀伤功能测定
方法:空斑减少法
2,B淋巴细胞功能测定:B淋巴细胞受抗原 刺激后,可增殖分化为浆细胞,能分泌免疫球 蛋白(Ig)进入血流和组织液中,供机体产生对相 应抗原的体液免疫。
2.1 体外抗体形成细胞(PFC)测定方法 原理:SRBC免疫小鼠,其小鼠脾细胞与一定 量SRBC混合,PFC释放溶血素(抗SRBC抗体), 在补体参与下,使SRBC溶解,从而在每一个 PFC周围形成一个肉眼可见的溶血空斑,计算出 100万个脾细胞中PFC的均值。PFC试验具有特 异性意,筛检力强,可直接观察等特点,作为判 断机体免疫功能及研究中药对机体免疫功能影响 的指标。
(2)细胞毒T细胞(CTL)杀伤功能测定
方法:空斑减少法
2.1 体外抗体形成细胞(PFC)测定方法 原理: SRBC免疫小鼠,其小鼠脾细胞与一定量SRBC 混合,PFC释放溶血素(抗SRBC抗体),在补体 参与下,使SRBC溶解,从而在每一个PFC周围 形成一个肉眼可见的溶血空斑,计算出100万个 脾细胞中PFC的均值。PFC试验具有特异性意, 筛检力强,可直接观察等特点,作为判断机体免 疫功能及研究中药对机体免疫功能影响的指标。
方法: (1)51Cr释放法
(2)孔雀绿比色法
3.3巨噬细胞活性检测
巨噬细胞在抗肿瘤免疫、抗感染免疫及免疫 调节中起重要作用。 (1)小鼠体内吞噬廓清能力测定试验:从整 体水平测定单核M$系统(主要由肝、脾及血管内 皮吞噬细胞构成的网状内皮系统)吞噬功能,常 用方法有隋性炭粒的廓清试验和同位素。
4.B淋巴细胞增殖试验:检测B淋巴细胞功能, 常用方法为3H-TdR掺入法。 5.免疫球蛋白(Ig)定量测定
3,其它免疫功能细胞测定方法 机体除T,B淋巴细胞外,还有自然杀伤细 胞(Natural Killer)、K细胞,巨噬细胞和LAK 细胞(Lymphokine Activated Killer)等具有免 疫功能细胞,这些细胞活性测定对研究中药对 机体免疫功能的影响有重要意义。
体液免疫
A、感应阶段 呈递 吞噬细胞处理呈递 呈递 T呈递 B细胞识别 B、反应阶段 B细胞增值分化 记忆细胞形成
C、效应 阶段
体液免疫特点: 1、抗原在 体液 中。 2、主要与 B 淋巴细胞有关。 3、抗体是由 效应 B淋巴细胞产生。 4、体液免疫也需要 T 淋巴细胞帮助 吞噬 体液免疫还需要_____细胞协助
4.B淋巴细胞增殖试验:检测B淋巴细胞功能, 常用方法为3H-TdR掺入法。 5.免疫球蛋白(Ig)定量测定
3.其它免疫功能细胞测定方法
3.1 NK细胞活性检测方法 3.2 K细胞活性测定方法 方法:
(1)51Cr释放法 (2)孔雀绿比色法
3.3巨噬细胞活性检测
(1)小鼠体内吞噬廓清能力测定试验
第二十章补益药
教学目的 掌握补益药的主要药理作用 人参、党参、黄芪、甘草、当归、冬虫 夏草、淫羊藿、 枸杞子、何首乌、刺五 加的药理作用、有效成分 教学内容 常用补益药的功效及分类。 补益药的主要药理作用。 人参、党参、黄芪、甘草、当归、冬虫 夏草、淫羊藿、 枸杞子、何首乌、刺五 加的有效成分,药理作用 教学重点 补益药的药理作用;人参、党参、黄芪、 甘草的主要药理作用
方法:同位素(51Cr,126IudR)释放法 效应细胞人用外周血分离的单核细胞, 小鼠异脾淋巴细胞;人NK细胞敏感的靶细胞 为K562,小鼠用51Cr,126IudR标记靶细胞。 效应细胞与靶细胞在一定效靶比例下共同温 育,进行体外细胞毒试验,被NK细胞破坏的 靶细胞可释放51Cr,126IudR ,其释放量与NK 细胞活性成正比,故测定上请液中放射性的 强弱,可推算出NK细胞活性相对水平。
2.2 血清溶血素抗体测定
原理:SRBC免疫动物,产生抗SRBC抗体-溶血素,释放至外周血。分离免疫动物血清, 与SRBC一起温育,在补体参与下,SRBC裂 解释放血红蛋白,测定血红蛋白量,以SRBC 半数溶血时吸收度值(HC50)表示,反映中药对 体液免疫的影响。该法准确、客观、省去空斑 计数的困难。
5.2溶菌酶活性测定
6. 免疫器官(胸腺脾脏)重量测定方法 胸腺和脾脏为机体主要免疫器官,一些免 疫抑制剂可使胸腺、脾脏萎缩;免疫增强剂可 使胸腺、脾脏增重。因此,胸腺、脾脏重量作 为观察药物对免疫影响初步研究.
(二)抗应激研究方法
1.鼠游泳实验
2.小鼠耐缺氧实验 2.1 常压缺氧 2.2 减压缺氧 2.3 小鼠断头后致急性脑缺氧实验
3.1 NK细胞活性检测方法
NK是与T、B细胞不同的另一类新发现的杀 伤淋巴细胞,它毋需抗原或有丝分裂原预先刺 激,也毋需抗体或补体参与,能在体内、外杀 伤肿瘤细胞、病毒感染细胞等。NK细胞在机体 肿瘤监护,抵御感染及免疫功能调节中发挥重 要作用。因此检测NK细胞活性对研究中药免疫 作用有重要意义。
2.2 血清溶血素抗体测定
原理:SRBC免疫动物,产生抗SRBC抗体-溶血素,释放至外周血。分离免疫动物血清, 与SRBC一起温育,在补体参与下,SRBC裂 解释放血红蛋白,测定血红蛋白量,以SRBC 半数溶血时吸收度值(HC50)表示,反映中药对 体液免疫的影响。该法准确、客观、省去空斑 计数的困难。
二、共同的药理作用
1、对机体免疫功能的影响
1)增强非特异性免疫功能: 免疫器官; 巨噬细胞功能;
外周血白细胞数
2)对特异性免疫功能的影响
A、增强细胞免疫:
B、调节体液免疫: 主要表现为体液免疫功能紊乱。
与免疫有关的概念 免疫:
从拉丁而来,愿意是“免除税收”, 在医学上具有“免除疫患”之意。
是机体识别“自已”或“非已”, 并产生特异性免疫应答排除抗原物质 的能力。
3.2 K细胞活性测定方法 K细胞是一类具有杀伤作用的特殊淋巴细 胞,它单独不能杀伤靶细胞,只有带抗原的靶 细胞与相应的特异抗体(IgG)结合后,才能对 靶细胞起杀伤作用,这一作用称为抗体依赖性 细胞毒作用(Antibody Dependent Celluar cytotoxicity,ADCC)。K细胞能在微量的特 异抗体存在下,杀伤肿瘤细胞和病毒感染细 胞,因此体外用ADCC试验检测K细胞活性, 可作为反映机体免疫功能的一个指标。
三,常用实验方法 (一)免疫系统试验: 1.T淋巴细胞测定方法 T淋巴细胞是介导机体细胞免疫的重要细胞。 1.1 T淋巴细胞标志测定方法 E花环试验:人外周血活T细胞具有绵羊红细 胞(SRBC)受体,在体外一定条件下,能与SRBC 结合形成玫瑰花样细胞团,称为E玫瑰花环 (Erythrocyte,E),E受体是T细胞的特异标记, 已被广泛用作检测T细胞的一项指标。