证明孟德尔三大定律

伴性遗传卡方检测表
红眼♀ 红眼♂ (+) (+)
实验观察数(O)
白眼♀ 白眼♂ 合计 (w) (w)
预期数 (1:1:0:1)(C)
偏差(O-C) 卡方值(OC)2/C
4、三点测验
测交后代 表型 sn w m + + + + w + sn + m sn + + + w m + + m sn w + 总计 重组值 观察 数量 w-m 重组发生在 m-sn w-sn
反交组为什么不能直接做三点测验?
分析如图示: 果蝇三点测验基因示意图 亲本：WMS/ WMS X wms/Y ↓ F1： WMS/wms X WMS/Y ↓ WMS wms wMS Wms WmS wMs WMs wmS 反交组基因示意图
正交组示意图
亲本： wms / wms X WMS/Y ↓ F1 ： WMS / wms X wms/Y ↓ F2 ： WMS wms wMS Wms WmS wMs WMs wmS
具体分析如下：
F1代产生的雌雄个体杂交后,由于F1雄性三个基因 都为显性,所以产生的F2代不能完全体现F1雌性的 交换情况. 即使F1雌性个体在产生配子时发生了基因交换,由 F1 , 于F1雄性所传给子代的基因型一定为等位显性,这 样F1雌性的隐性性状无法再后代的表现型里统计 出,进而也无法做出正确的三点测验.而正交组的 F1代雄性为全隐性,可将F1雌性的所有基因型都在 F2代中表现出来,故可由F2代统计数据分析做基因 定位.
将雌雄果蝇放在一起培养，雌蝇的生殖器中有 贮精囊，可保留交配所得的大量精子，雌蝇一 次交配所得的精子，足够它多次排出的卵受精， 因此在做杂交试验时，雌蝇必须选用处女蝇 （没有交配过的雌蝇）。 雌蝇孵出后12小时内不会交配，这个时间内把 果蝇全部倒出，分出雌雄蝇，单独饲养，这时 收集的雌蝇是处女蝇。
在进行杂交和F1自交后一定时间为什么要释放杂交 在进行杂交和F1自交后一定时间为什么要释放杂交 F1 亲本？ 亲本？
果蝇综合大实验
正交组
一、实验目的
理解分离定律、自由组合定律、伴性遗传、 三点测验及基因的连锁与交换的原理 掌握果蝇的杂交技术 学习记录交配结果和掌握统计处理方法 熟悉果蝇的饲养及其生活史 掌握果蝇的雌雄鉴别方法
二、实验原理
（一）分离定律 一对等位基因在杂合子中保持相对独立性， 形成配子时彼此分离并随机分配到不同的 配子里。一般情况下，F1配子的分离比是1： 1;基因型的分离比是1：2：1，杂种第二代 表型的分离比是3：1。
三点测验预期实验结果：
P: 6♀白短卷 w m sn F1: ♀ 红长直
+ + + w m sn
× ×
26♂ 红长直 +++ ♂白短卷
w m sn
F2:
红长直 白短卷 红短卷 白长直 红短直 白长卷 红长卷 白短直 亲本型 重组型
果蝇的性状主要从以下四个方面进行观察： 每个方面都有不同的性状：
灰体 红眼
其形态特征为:
品系 体色 6 灰 26 黑檀e(3) 黑檀 眼色 白w(1) 红 翅型 短m(1) 长 刚毛 卷sn(1) 直
实验器具与药品
1、用具：果蝇饲养瓶、麻醉瓶、死蝇瓶、 白瓷板、双筒解剖镜、毛笔、镊子、解剖 针、不干胶标签 2、药品：乙醚（用于麻醉果蝇）、玉米粉、 琼脂、蔗糖、酵母粉、丙酸（用于配制培 养基）
2、F1杂交培养与观察统计
把选出的雌雄果蝇，根据杂交实验组合的 要求装入一个培养瓶内，每瓶放5—6对。 贴上标签标明正反交,组名,日期.在20-25度 恒温培养箱中培养,7-8天后,倒去亲本蝇.
倒去亲本蝇后的4~5天F1代成蝇出现后, 观察记录其表型和数量（连续统计7~8 天）。
3、F2代果蝇的培养 代果蝇的培养
四、实验步骤
1 、选出亲本蝇 对（保证亲本雌蝇为处 选出亲本蝇5-6对 选出亲本蝇 女蝇） 女蝇） 挑选处女蝇的方法：将亲本培养瓶中的成 蝇全部除去（可在晚上22：00至23：00期 22 00 23 00 间将成蝇移入另一个培养瓶中，次日早晨8： 00至9：00对新羽化的果蝇进行挑选）。以 后每隔6-8h观察一次，并将新羽化的雌雄 成蝇取出并分别放入培养瓶内备用。
5、三点测验
测交：将隐性亲本的处女蝇与F1杂合子做测交实 验。7~8天后对测交结果进行统计。 果蝇三点测验基因示意图 P： wms / wms X WMS /Y ↓ F1 ： WMS / wms X wms /Y ↓ F2 : WMS wms wMS Wms WmS wMs WMs wmS 亲本型 重组型
从F1代中选出20-30对果蝇，放入新的培养 瓶中继续杂交。每瓶5-6对（这里的雌蝇无 须是处女蝇）。在各瓶上贴好标签。于2025度恒温培养箱中培养.培养7-8天后,移去 亲本蝇。
4、F2代果蝇观察与统计 代果蝇观察与统计
4-5天后,F2代成蝇出现,开始观察。把F2代 果蝇倒出麻醉，放在白瓷板上，用实体显 微镜检查眼色、翅形、刚毛，各类果蝇分 别计数，检查过的果蝇倒在死蝇瓶内。 过2天后再检查第二批，连续检查8~10天， 即3~4次，以保证获得足够数目的被观察后 代 ，记录于对应的统计表中，并用X2进行 测验，说明实验结果是否与理论数值相符 合。 至少统计300只果蝇。
黑檀体(e)
合计
2、基因的自由组合定律
本实验采用体色和眼色两对相对性状作为研究载体 验证自由组合定律。
自由组合定律F2代数据分析表
子代类型
统计日期
黑檀体 灰体 红眼 白眼
黑檀体 白眼
灰体 红眼
合计
自由组合定律卡方检测表
灰体红眼 灰体白眼 黑檀体 红眼 实验观察数(O) 黑檀体 白眼 合计
预期数 (9:3:3:1)(C) 偏差(O-C)
自由组合预期实验结果：
F1 ♀ Ee Ww
(灰体、红眼)
× ♂ Ee wY
（灰体、白眼）
F2 灰红 ： 3 ：
↓ 黑红 ： 3 ：
灰白 ： 黑白 1 ： 1
（三）伴性遗传
位于性染色体上的基因所控制的性状在遗 传上与性别相联系的遗传现象，称为伴性 遗传。果蝇的性染色体有X和Y两种，雌蝇 为XX，是同配性别；雄蝇为XY，是异配性 别。 把本组实验的结果跟反交组做对比，就可 以证明果蝇的眼色的遗传属于伴性遗传。
体色
黑体 b (2) 黑檀体 e (3) 黄体 y (1) 长翅
眼色
白眼 棒眼 直刚毛
w (1) B (1)
翅型
短翅 m (1) 卷翅 Cy (2) 残翅 vg 2)
刚毛
卷刚毛 sn (1)
三 、实验材料
果蝇材料
6号系雌果蝇品系（多突变型：灰体、白眼、短翅、 卷刚毛[+ w m sn]) 26号系雄果蝇品系(单突变型：黑檀体、红眼、长 翅、直刚毛[e + + +])
六、实验结果问题分析
利用实验室保存的那两个果蝇品系杂交， 利用实验室保存的那两个果蝇品系杂交，即可一次验证所 有的遗传定律？ 有的遗传定律？ 灰体， 白眼，卷刚毛，短翅） 6号 （灰体， 白眼，卷刚毛，短翅） 26号 黑檀体，红眼，直刚毛，长翅） 26号（黑檀体，红眼，直刚毛，长翅） 反交：26(♀ 6(♂ 反交：26(♀) × 6(♂) 正交： 6(♀ (♂ 正交： 6(♀）×26 (♂)
伴性遗传预期实验结果：
♀白 XwXw F1 ： ♀红 X+Xw P:
1 F2 ： ♀红
× ↓ × ↓
:ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
♂红 X+Y ♂白
XwY 1
1
♀白 ♂红 ♂白 : 1 : 1 : 1
（四）三点测验
对于三个连锁的基因来说，用三隐性个体 和纯合的三显性个体杂交，制成三因子杂 种，再把雌性杂种与三隐性个体测交，在 下一代中就可以得到8种不同表型的果蝇， 这样经过数据处理，一次实验就可以测出 三个连锁基因的距离和顺序。这种基因定 位的方法称作三点测验.
从F1代中选出20-30对果蝇，放入新的培养瓶 中继续杂交。每瓶5-6对。在各瓶上贴好标签。 7-8天后，蛹出现，倒去亲本。 4~5天后，蛹孵化出亲二代（F2）成蝇。 把F2果蝇倒出麻醉，放在白瓷板上，用实体显微镜检查 眼色、翅形、刚毛。各类果蝇分别计数。检查过的果蝇倒 掉。过2天后再检查第二批，连续检查8~10天，即3~4次。
卡方值(O-C)2/C
3、伴性遗传定律
本实验采用果蝇眼色作为研究的载体,验证伴性遗传定律.
伴性遗传定律的F1代统计结果分析表
实验结果 统计日期 各类果蝇的数目 红眼雌性 白眼雄性
总计
伴性遗传定律F2代统计分析表
观察结果 统计日期 各类果蝇数目 红眼雌 白眼雄 红眼雄 白眼雌 性 性 性 性
总计 百分比
具体流程图（正交组6(♀）×26 (♂)） 6(♀ (♂ 6(
收集6号品系个体的处女蝇5-6只，在培养瓶中培养。 收集孵化8小时内的雌幼蝇。 杂交：挑出5-6只26号品系雄蝇放于处女蝇瓶中杂交。 贴好标签，在25摄氏度中培养。7-8天后出现蛹。倒去亲本。 需时7-8天，亲本要除净 4-5天后，蛹孵化出子一代F1成蝇。 观察并记录F1的表型。 需时：4-5天 。 连续检查2-3天，若性状不符则实验有差错 F1代雌蝇不必是处女蝇。 需时7-8天，亲本要除净 需时：4-5天 。 需时8-10天。自第一批果 蝇孵化出10天内是可靠 的，至少统计200只果蝇。
五、结果记录
1、 基因的分离定律
本实验以果蝇体色作为载体来验证分离定律
分离定律F1代统计分析表 黑檀 ♂ × 灰体 ♀ 观察结果
统计日期
黑檀体数
灰体数
合计
分离定律F2代统计结果分析表
黑檀 ♂ × 灰体♀ ♀ 黑檀体数 灰体数
观察结果 统计日期
合计
分离定律卡方检测表
灰体(+)
实验观察数(O) 预期数(3:1)(C) 偏差(O-C) 卡方值(OC)2/C
分离定律预期的实验结果:
6号:♀(灰体) E/E × 26号:♂(黑檀体)e/e ↓ F1: E/e(灰体) ↓⊕ F2:基因型 E/E 2E/e ee 表型 (灰体) (灰体) (黑檀体) 3 : 1
（二）自由组合定律
位于非同源染色体上的两对等位基因决定 的性状在杂种第二代形成配子时是自由组 合的。 由分离定律可知一对等位基因决定性状在 杂种第二代表型比是3：1，两对互不连锁 的基因决定的性状在杂种第二代表型比是9： 3：3：1。
避免亲代与F1子代间发生交配； 释放亲代后才能对子代的形状进行统计， 否则亲代掺杂在自代中影响子代性状统计
在伴性遗传的性状在正交和反交后代中为 什么会出现差异？与性别的关系如何？ 什么会出现差异？与性别的关系如何？
若正交 ，F1代♀♂都为野生型，F1自交得 F2代，则♀都是野生型，♂则野生型和白 眼各占一半。 若反交，F1代与正交不同， ♀为野生型， ♂为白眼，F1自交得F2代，则♀和♂的红 眼与白眼的比例都为1：1。
本实验中为何正交组与反交组自由组合定律的分离比不同？ 本实验中为何正交组与反交组自由组合定律的分离比不同？ 由于本次实验中用于证明自由组合定律的对比性状分别位 和常染色体上， 于X和常染色体上，所以导致正反交的比率不同。 和常染色体上 所以导致正反交的比率不同。
亲本雌蝇为何一定要选用处女蝇？ 亲本雌蝇为何一定要选用处女蝇？怎样才能保证所选雌蝇为 处女蝇？ 处女蝇？