植物组织培养园艺
植物组培技术的应用和发展前景
植物组培技术的应用和发展前景植物组培技术是一种利用植物的细胞和组织进行繁殖和培养的技术，已经被广泛应用于农业、园艺、林业和药物等领域。
它通过无菌培养的方式，可以快速繁殖大量的植株，同时也可以进行遗传改良和药物合成等研究。
本文将探讨植物组培技术的应用和发展前景。
首先，植物组培技术在农业领域的应用十分广泛。
通过组培技术，可以实现农作物的快速繁殖和大规模生产，提高农作物的产量和品质。
例如，水稻的组培技术可以实现无性繁殖，大大提高了水稻的繁殖效率。
此外，组培技术还可以用于农作物的遗传改良，通过基因工程的手段，可以将抗病、抗虫等有益基因导入作物中，提高作物的抗性和适应性。
其次，植物组培技术在园艺领域也有广泛的应用。
通过组培技术，可以实现珍稀植物的大规模繁殖和保护。
例如，一些稀有的花卉品种，由于生长环境的限制，无法大规模繁殖，但是通过组培技术，可以实现这些珍稀植物的快速繁殖和保护。
此外，组培技术还可以用于花卉的花色改良和品质提高，通过基因工程的手段，可以改变花卉的颜色和花型，提高花卉的观赏效果。
再次，植物组培技术在林业领域的应用也十分重要。
通过组培技术，可以实现林木的无性繁殖和大规模生产。
例如，一些珍稀的树种，由于生长环境的限制，无法大规模繁殖，但是通过组培技术，可以实现这些珍稀树种的快速繁殖和保护。
此外，组培技术还可以用于林木的遗传改良，通过基因工程的手段，可以提高林木的抗病性和适应性，提高林木的生长速度和木材质量。
最后，植物组培技术在药物研发领域也有广泛的应用。
通过组培技术，可以实现药用植物的大规模生产和药物合成。
例如，一些药用植物由于生长环境的限制，无法大规模生产，但是通过组培技术，可以实现这些药用植物的快速繁殖和药物合成。
此外，组培技术还可以用于药物的研发和生产，通过基因工程的手段，可以提高药物的产量和纯度，降低药物的成本。
总的来说，植物组培技术在农业、园艺、林业和药物等领域的应用前景广阔。
随着科学技术的不断进步，植物组培技术将会得到更广泛的应用和发展。
《园艺植物组织培养》课程改革探讨
林 玉玲等
《 园艺植物组织培养》 课程 改革探讨
３ ７
程 的教 学 水平 和教 学效 果 。 １ 原《 园艺植 物 组织 培养 》 课 程教 学 中存 在 的不 足
大学教学名师赖钟雄教授等对《 园艺植物组织培养》 课程的教学大纲进行 了再次修订 ， 增加 了“ 植物人工
在 以往《 园艺植物组织培养》 的教学 中， 存在教 种 子制 作 与试管 花卉 培育 ” 和“ 植 物 特化 组织 和 变态
构 和基 本 能力 的形成 。 在早 期 ， 福建 农林 大 学 园艺学
院所 使 用 的教 材 为 １ ９ ９ ６年 福 建 农林 大 学 园艺 植 物 加 活跃 。此 外 ， 充分 利用 现 代信 息 技术 ， 利 用 多媒体 生 物工 程 研究 所 实验 室陈 振光 教授 主编 的全 国统编 课 件教 学 和 网络上各 种 花卉 快 繁视 频 。如在 讲 授快 教 材《 园艺 植 物离 体培 养学 ， 目前使 用 的教 材 为甘 繁 技 术 的应 用 时 ， 播放 “ 植 物花 药 的组 织 培 养 ”“ 草
遍 。
解 金 线莲 、 铁皮 石斛 的相关 功效 、 快 繁 过程 中存 在 的 难点 ， 目前市 场 价 格 、 需 求 等情 况 ； 随后 让 学 生 分 成
２ 《 园艺植物组织培养》 课程改革方法
２ ． １ 更新教 学 内容 。 优 化课 程体 系
不 同组 别 以 Ｐ Ｐ Ｔ形 式将 他 们 的 了解 情 况 进 行 汇报 ； 教学 内容和课程体系决定 了学生 的基本知识结 最后采用 同学讨论 、 老师点评的模式 ， 从而使学生对 目前组 培 市场 有一个 更 全 面 的 了解 ，使 课堂 氛 围更
植物组织培养的原理及应用
植物组织培养的原理及应用1. 概述植物组织培养是一种无土栽培技术，通过在无菌条件下，利用植物的组织和细胞的再生和分化能力，实现植物的繁殖和培育。
它不仅可以用于植物病毒的检验和植物基因工程的研究，还可以用于植物品种改良和植物繁殖的大规模生产。
2. 原理植物组织培养的原理主要包括以下几个方面：2.1 组织培养的基本要素•原始组织：从植物的茎、根、叶等组织中选择合适的原始组织，如幼嫩茎尖、腋芽、子叶等。
•培养基：选择适合植物生长的培养基，如遗传变异培养基、细胞分裂诱导培养基等。
•生长调节剂：添加适量的植物生长激素和抑制剂，以促进或抑制植物细胞的分化和再生。
2.2 培养方法•分化：将原始组织进行无菌培养，在适当的生长调节剂的作用下，促进细胞分化成分化组织，如茎、叶、根等。
•分裂：将原始组织进行细胞培养，在适当的培养基中，增加细胞分裂的频率和速度。
•再生：通过细胞分裂和分化，实现从原始组织到整个植株的再生过程。
2.3 无菌条件植物组织培养需要在无菌条件下进行，避免外界菌落的污染。
常用的无菌处理方法包括高温灭菌、化学消毒和紫外线照射。
3. 应用植物组织培养在农业、园艺等领域有广泛的应用，主要包括以下几个方面：3.1 病毒检测通过植物组织培养，可以将带有病毒的植物组织分离出来，利用特定的培养基和条件，使病毒再生和繁殖，从而达到病毒检测的目的。
3.2 基因工程研究植物组织培养可以用于植物的基因转化，通过将外源基因导入植物组织中，培养得到转基因植株，从而实现植物基因工程的研究。
3.3 植物品种改良通过植物组织培养，可以选择植物的优良品种进行无性繁殖，以保留其特有的优良性状，并通过细胞分化和再生，实现新品种的筛选和培育。
3.4 大规模生产植物组织培养可以实现大规模的无菌繁殖和生产，节约时间和空间，提高繁殖效率。
在林业、园艺等领域中，可以用于大批量的苗木繁殖。
4. 总结植物组织培养是一种重要的无土栽培技术，通过合理利用植物的细胞再生和分化能力，实现植物的繁殖和培育。
简述植物组织培养在园艺作物中的主要应用
简述植物组织培养在园艺作物中的主要应用
1植物组织培养在园艺作物中的应用
植物组织培养是生物技术的一种，可用来研究植物的发育，繁殖和调节生长等相关技术。
在园艺作物中，植物组织培养技术有广泛的应用，可以用于增加植物数量，保护稀缺植物种类，培育各种新品种，延续文化遗产，防治病害等等。
1.1根据基因工程培育优良新品种
植物组织培养技术可以研究园艺作物的基因组，从而通过“剪切”和“增补”技术改造植物基因，以获得新的优质植物。
它的优势是，可以高效保持和完善植物基因组结构，并培育出具有抗病性、耐旱性等特性的优良新品种。
1.2保护稀缺植物种类
植物组织培养技术可以用于保护稀缺植物种类。
它可以利用每一株植物的细胞，在培养基上进行“增殖”，获得大量的植株，从而扩大植物的种植范围，减少植物的死亡率，对保护稀缺植物种类起到大有裨益。
1.3调节生长衰老
植物组织培养技术目前在调节植物生长和衰老方面有着广泛的应用。
科学家可以利用这种技术，使植物能在营养激素的作用下，延长处于增生期的生长，从而调节植物的植株衰老，延长生长时间。
总之，植物组织培养技术在园艺作物中有广泛的应用，如增加植物数量、保护稀缺植物种类、培育各种新品种、研发调节植物生长衰老等技术，为园艺作物的发展做出大量的贡献。
植物组织培养的用途
植物组织培养的用途植物组织培养是一种在无菌条件下将植物细胞、组织或器官转移到合适的培养基上，以促进组织生长、发育和分化的技术。
它可以用于各种目的，包括农业、园艺、植物繁殖、药物生产、基因改良等。
下面将详细介绍植物组织培养的用途：1. 植物繁殖和无性繁殖植物组织培养可以通过体细胞胚胎发生、愈伤组织培养、离体培养等方法，实现植物繁殖的快速和无性繁殖的大规模生产。
例如，通过离体培养可以迅速获得大量植株，用于园艺观赏植物的繁殖、林木等的人工林培育、经济作物的种子繁殖等。
2. 植物基因改良植物组织培养是进行植物基因改良的重要手段之一。
通过遗传工程的方法，可以将外源基因导入植物组织中，实现对植物性状的改良和优化。
例如，导入抗虫基因、耐逆性基因等，可以提高植物的抗病虫害能力和逆境环境下的生存能力。
3. 生物药物生产植物组织培养可以作为生物药物生产的工具之一。
通过转基因植物的培养和大规模培养技术，可以实现多种蛋白质的产生和大规模生产。
例如，目前已经使用转基因植物成功进行多种药物的生产，如罗勃饮食品耐性、癌症治疗药物等。
4. 细胞和分子生物学研究植物组织培养也是细胞和分子生物学研究的重要手段之一。
通过培养植物组织，可以研究细胞的分裂、分化、细胞生理等过程，也可以进行基因表达、基因调控等研究。
例如，通过培养愈伤组织可以获得大量的细胞用于基因表达研究，通过植物细胞的转化可以进行基因的功能研究等。
5. 遗传资源保存和利用植物组织培养可以用于遗传资源的保存、繁殖和利用。
通过培养植物的愈伤组织、胚乳组织等可实现植物的长期保存和传播，以便今后的利用和研究。
例如，由于植物组织培养技术的高效和精确性，目前已经成功保存了大量濒危物种和珍稀植物的遗传资源。
6. 植物病毒研究植物组织培养可以用于植物病毒的研究。
通过培养含有病毒的植物组织，可以观察和研究病毒的侵染和传播机制，了解植物对病毒的抗性和免疫机制等。
研究植物病毒有助于发展植物抗病技术和控制病毒病的策略。
植物组织培养的用途
植物组织培养的用途
植物组织培养是一种基于细胞和组织的体外培养技术，广泛应用于植物科学、农业、园艺和生物技术等领域。
以下是植物组织培养的一些主要用途：
1. 植物繁殖与繁育：通过组织培养技术可以实现植物的无性繁殖，包括愈伤组织的诱导、植株再生和植株繁殖。
这种方法可以大幅提高繁殖速度和繁殖量，以获得大量具有相同基因型的植株。
2. 基因转化与遗传改良：植物组织培养可用于导入外源基因到植物细胞或组织中，实现基因转化。
这为植物遗传改良提供了重要的手段，包括抗病虫害、耐逆性和提高产量等方面的改良。
3. 药物和化学物质生产：通过组织培养技术，可以大规模培养植物细胞或组织，以生产药物、天然产物和化学物质。
这种方法具有高效、可控和可重复的优点，为药物和化学工业提供了可持续的生产途径。
4. 培育优良品种和育种研究：植物组织培养可以用于筛选和培育优良的植物品种，包括抗病虫害、适应性强和高产性等特点的育种。
这为农业生产和园艺业的发展提供了重要的技术支持。
5. 保存和恢复濒危植物：植物组织培养技术可以用于保存和恢复濒危植物种质资源。
通过体外培养，可以保存和繁殖濒危植物，以防止物种灭绝和遗传多样性的丧失。
6. 研究植物生理和生物学：植物组织培养为研究植物生理和生物学提供了实验材料和平台。
通过控制培养条件和处理方式，可以研究植物生长、发育、代谢和响应环境的机制。
总的来说，植物组织培养在植物科学、农业和生物技术等领域具有广泛的用途。
它为植物繁殖、遗传改良、药物生
产、品种培育、濒危物种保护和科学研究提供了强大的工具和平台。
园艺植物育种学(9.13)--植物离体培养育种
第八章 植物离体培养育种一、名词解释1.植物离体培养：即广义的植物组织培养（Plant tissue culture），是指通过无菌操作，将植物的组织、器官、细胞以及原生质体等接种于人工配制的培养基上在人工控制的环境条件下进行培养，以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他生物产品的一种技术。
2．组织培养：以植物各部分组织为外植体的离体培养技术。
如分生组织、形成层组织、表皮组织、薄壁组织等。
3.器官培养：以植物的某一器官的全部或部分或器官原基作为外植体的离体培养技术。
如根尖、茎尖、茎段、叶片等。
4.花粉培养：指以未成熟花粉作为外植体的离体培养技术。
又称游离小孢子培养。
5.花药培养：指以未成熟花药作为外植体的离体培养技术。
6.单倍体植物：指具有配子染色体数的植物。
7.细胞培养：指以能保持较好分散性的单细胞或很小的细胞团作为外植体的离体培养技术。
8.原生质体培养：指以除去细胞壁而获得的原生质体作为外植体的离体培养技术。
9.体细胞杂交：指使不同的原生质体相互融合形成杂种细胞，再经过人工培养诱导杂种细胞分化形成植株的过程。
二、问答题1.植物离体培养有哪些主要类型？（1）胚胎培养 （embryo culture）（2）组织培养（tissue culture）（3）器官培养（organ culture）（4）花粉培养与花药培养（pollen and anther culture）（5）细胞培养（cell culture）（6）原生质体培养（protoplast culture）2.试述植物离体培养技术在园艺植物育种上的应用。
（1）扩大变异范围；（2）克服远缘杂交的一些障碍；（3）获得体细胞杂种；（4）倍性控制；（5）突变的诱导和立题选择；（6）加速亲本材料的纯化；（7）快速无性繁殖；（8）获得脱毒苗；（9）种质资源的试管保存；（10）可作为外源基因转化的受体系统。
3.试述植物组织培养的步骤和方法。
（1）无菌培养的建立（2）营养繁殖体的增殖（3）生根（4）试管苗移栽大田4. 简述单倍体在园艺植物育种上的应用。
植物组织培养课程标准
植物组织培养课程标准《植物组织培养》课程标准课程名称：《园林植物植物组织培养》课程性质：职业能⼒必修课学分：3分计划学时：45适⽤专业：园艺技术、园林技术、种⼦⽣产与经营专业1.前⾔1.1课程定位《植物组织培养技术》是⼀门园艺技术、园林技术等专业的基础课，也是⼀门实践性很强的课程。
通过本门课程学习，主要培养学⽣将来能从事相关⼯作，如能够独⽴设计组培⽅案、具备培养基制备、进⾏⽆菌操作、快繁、控制污染、褐化、玻璃化等不良现象发⽣和分析解决问题的能⼒，还能够独⽴从事植物组织培养经营管理的⼯作。
该课程以化学、植物学、植物⽣理学、遗传学等学科为基础建⽴起来的，为适应时代发展，结合当前⾼职教育改⾰实际，压缩理论课时，精选教学内容，增加单位时间内的知识传授量，增加实验实训课的课时。
培养技能型、应⽤型⼈才，使课程教学朝着⾼职院校校企合作的办学模式，⼯学结合的⼈才培养模式，教学做合⼀的教学模式⽅向发展。
1.2设计思路本课程理论课时48学时。
根据植物组织培养岗位对从业⼈员知识、能⼒和素质要求，以“应⽤”为主旨和特征，构建课程内容模块体系。
课程内容打破传统的“⽼三段”模式，打破学科特性，理论知识要求“必需、够⽤”，实践教学突出能⼒培养，注重知识的应⽤性、实践性和针对性，并以此来构建组培课结构和内容体系。
在实践教学上，以“项⽬教学法”为主导，强化实训项⽬的实⽤性。
本课程⼀般按照“实验室设计与培养条件要求―培养基制备―⽆菌操作技术―器官培养―个体植物组织培养与园艺植物栽培”的顺序进⾏。
2．课程⽬标2.1总体⽬标通过理论学习和实践锻炼，掌握植物组织培养的基本理论，能识别常见的污染、褐变、玻璃化等现象，掌握组培培养⽅案设计程序和器官培养要求，掌握组培各流程环节与技术要求。
通过参观组培实验室，掌握组培实验室的场地选择和⼚房设计的原理和⽅法；通过配制母液、培养基的制作、使⽤⽆菌操作技术，能熟练掌握培养基母液和激素母液的配制，并且能够独⽴完成培养基的制作和⾼压灭菌锅的使⽤，还要掌握不通植物材料⽆菌接种技术。
园艺植物组织培养
器官发生型(organogenesis type)：
▪ 诱导器官外植体产生愈伤组织，经分化培
养形成芽、根再生成植株的方式。 ▪ 技术关键：外植体诱导产生的愈伤组织要早
期挑选，使其来源尽量一致。 ▪ 特点：繁殖速度快；培养经愈伤组织阶段再
生成植株，遗传性不稳定，易产生变异。
芦荟、烟草、油菜等
无菌母株制备
▪ 优点：繁殖率高，速度较快；遗传性稳定。
三倍体无籽西瓜、甘蔗、香蕉、香石竹、 丝石竹等
原球茎型(protocorm type)
▪ 兰属特有的方式， 即外植体经培养产 生原球茎，再直接 长成植株。
▪ 原球茎：兰科植物组织培养中形成的一种 特殊的中间繁殖体，是呈珠粒状、由胚性 细胞组成、基部生假根、类似嫩茎的器官。 圆球茎可以增殖形成原球茎丛。
▪ 在试管内形成小鳞茎需较长时间
百合
郁金香
孢子型
▪ 用成熟或未成熟的孢子进行培养
▪ 孢子繁殖最困难的是表面消毒，萌发时 间较长
▪ 地钱
狼尾蕨
根茎型
▪ 蕨类具有横向的茎及直立的短根茎，为 组织培养的最佳外植体。
▪ 根状茎上产生蕨叶及根，繁殖速度较孢 子型快
▪ 肾蕨等
微枝扦插型
▪ 带芽的小插条在试管内进行无菌扦插 ▪ 为木本植物进行快速繁殖的主要方式 ▪ 葡萄、杨树
合子胚与体胚比较
合 子 心 型 胚 正 在 萌 发 的 体 胚
针叶松体细胞胚及体胚萌发生长
花椰菜体胚发育的不同阶段
菊花花瓣体细胞胚胎发生及体胚发育过程的扫描电镜观察
不定芽型（adventitious bud type)：
▪ 选取具有顶芽和腋芽的短枝 无菌培养，诱导芽萌发成苗 或增殖产生许多不定芽发育 成苗，将新萌生的枝条再转 接继代，重复芽到苗的增殖 过程，最后使其生根形成植 株的方式。
植物组织培养技术在园艺植物繁育中的应用
植物组织培养技术在园艺植物繁育中的应用植物是大自然中的美丽艺术品，园艺植物更是为人们的生活增添了色彩与乐趣。
在园艺活动中，繁育新的植物品种是一个重要的环节。
而植物组织培养技术的出现为园艺植物的繁育提供了新的途径和可能性。
本文将就植物组织培养技术在园艺植物繁育中的应用进行探讨。
首先，植物组织培养技术可以实现无性繁殖。
无性繁殖是通过植物器官的分离培养来获得多个与母本完全相同的新植株。
这种方法不仅可以节约时间和资源，还使得母本特性得以完全遗传。
例如，现代园艺中独特的花色或花型在无性繁殖中可以保留，使得人们能够形成多样化的花卉品种。
这种无性繁殖的优势在传统育种方法中是无法达到的。
其次，植物组织培养技术可以修复植物的基因缺陷。
在植物培养的过程中，一些植物器官可能出现遗传缺陷或遭受重大的环境压力，使得植物的生长和发育受到限制。
通过植物组织培养技术可以将健康的细胞培养并转化为整株植物，从而修复这些基因缺陷或病害，提高植物的抗性和适应性。
这对于高价值园艺植物的繁育来说尤为重要，因为它可以在短时间内获得大量高质量的植株。
另外，植物组织培养技术也可以促进多倍体植物的繁殖。
多倍体是指植物染色体数目不是两倍的个体。
相比于二倍体，多倍体植物在营养需求、抗病性和植物形态等方面具备更强的变异性。
而植物组织培养技术可以通过多种途径（如细胞融合、激素处理等）获得多倍体植物，并通过无性繁殖方法进行大规模扩展。
这为园艺植物的品种改良提供了更广阔的空间，并且使得繁殖新品种的速度加快。
最后，植物组织培养技术还可以促进珍稀濒危物种的保护与繁育。
由于人类活动和环境因素等原因，一些珍稀濒危的植物物种正面临着灭绝的危险。
而植物组织培养技术可以通过对植物基因和细胞的保存，以及植物器官的无性繁殖来实现这些植物的保护与繁育。
这种方法不仅可以在短时间内获得大量健康的植物物种，还可以将其重新引入到自然环境中，从而保护和恢复生态平衡。
总结起来，植物组织培养技术在园艺植物繁育中发挥了重要的作用。
园艺植物组织培养绪论1
(3)组织或愈伤组织培养(tissue callus culture)
为狭义的组织培养，是对植物体的各部分组织进行培 养，如茎尖分生组织、形成层、木质部、韧皮部、表皮 组织、胚乳组织和薄壁组织等等；或对由植物器官培养 产生的愈伤组织进行培养，二者均通过再分化诱导形成 植株。
(4)细胞培养(cell culture)：
直接器官发生
间接器官发生
体细胞胚胎发生
贯叶金丝桃不定芽直接再生过程
非洲紫罗兰叶片培养
优化培养基
无蔗糖
1%蔗糖
5%蔗糖
无BAP
BAP 0.1mg/l
BAP 5.0mg/l
无NAA
台湾百合离体培养
器官发生途径（原球茎的形成）：
大花蕙兰原球茎增殖与植株再生
大蒜愈伤组织培养
日本牵牛花的离体培养
（2）体细胞胚胎发生（Somatic embryogenesis）：
体胚发生途径是指二倍体或单倍体的体细胞在特定条 件下．未经性细胞融合而通过与合子胚发生类似的途径发 育出新个体的形态发生过程。经体胚发生形成类似合子胚 的结构称为胚状体（embryoid）或体细胞胚(somatic embryo).
固体培养 液体培养
体胚液体培养
不同类型液体培养装置 液体培养体系
菠萝种苗液体培养系统
丹参毛状根培养
植物组织培养过程示意图
上面的示意图中还有什么地方不够完善的？ 没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。
植物组织培养的基本过程
离体的植物 脱分化 器官、组织、 细胞
愈 再分化 根
伤
组
织
芽
植 物 体
③管理方便，利于工厂化生产和自动化控制。
植物组织培养是在一定的场所和环境下，人为提供 一定的温度、光照、湿度、营养、激素等条件，极利于高 度集约化和高密度工厂化生产，也利于自动化控制生产。 它是现代农业工厂化育苗的发展方向。它与盆栽、田间栽 培等相比省去了中耕除草、浇水施肥、防治病虫害等一系 列繁杂劳动，可以大大节省人力、物力及田间种植所需要 的土地。
植物组织培养基本原理园艺
三．培养基
○ 植物营养 ○ 植物生长调节剂 ○ 培养基的物理性质
四．培养条件
#2022
第三章作业：
愈伤组织 外植体
细胞水平再分化
薄壁细胞 分生细胞 管胞细胞 色素细胞
再生植株
各种器官
器官水平再分化
(器官发生-----形成器官原基)
离体培养中器官发生的两种类型：
1. 器官型
2. 器官发生型
组织水平再分化
分 生 组 织
维 管 组
结织
节
3.2.3 植株再生
离体培养中再生植株的主要途径：器官发生 途径和胚胎发生途径
外植体细胞
胚胎发生 愈伤组织
萌发
脱分化 （器官发生型）器官发生
不定根
器官发生 （器官型）
胚胎发生
不定芽 萌发
再生植株
三．愈伤组织培养
四．愈伤组织形成过程的三个阶段
○ 诱导期：外植体细胞准备进行分裂的时期； ○ 分裂期：外植体外层细胞迅速分裂并逐渐恢复到分生组织状态，细胞进行脱分化的时
期； ○ 分化期：分裂期的愈伤组织中由于一些停止分裂的细胞内发生一系列形态和生理变化，
丛生芽：指由顶芽或侧芽 在适宜的培养基和培养条 件下，诱导腋芽原基不断 萌发而形成的丛生状芽。
原球茎：兰科植物组织培 养中形成的一种特殊的中 间繁殖体，是呈珠粒状、 由胚性细胞组成、基部生 假根、类似嫩茎的器官。 圆球茎可以增殖形成原球 茎丛。
3.2.2 再分化
外植体经离体培养形成完整再生植株所经历的再 分化过程:
脱分化和再分化
脱分化概念：
再分化概念：
不定芽：植物组织培养中，外植体在适宜的培养基和培
《植物组织培养》课程标准
蝶
（5）花梗、花粉及花药、细胞的
兰
通过对蝴蝶兰组培过程
培养方法；
的
的学习，使学生的理论
（6）组培苗的驯化与移栽方法
2组
和动手能力都能得到进
（7）污染产生的原因 8 及解决方
织
一步的提升。
法；
培
（8）褐化产生的原因及解决方
养
法；
植物组培工厂的经营与管理
（9）蝴蝶兰组培中遗传稳定性的 4
问题
（10）植物组培工厂的经营与管理
项目教学法、现场指导法 项目教学法、现场指导法 项目教学法、现场指导法 项目教学法、现场指导法
组培苗的驯化与移栽
项目教学法、现场指导法
（三）考核评价 本课程的考核评价注重学生的综合素质，全面改革“期末一张卷”的传统考 核方法，由此建立了平时测评成绩与期末考试成绩并举的开放式、全程化考核评 价体系。本考核评价体系建设主要包括以下几个方面： 1．考试组成：理论考试 50%+实践考试 50% (1) 理论考试包括平时表现考核 10%、作业和提问 40%、期末考试 50%等四 部分。 期末考试为闭卷形式。 (2)实践考试包括实验表现 10%，实验实训报告 50%，实践技能考试 40% 。 实验实训报告和随堂进行数据记录，课后整理完成。实践技能操作选择几个常规 的实验实训方法(如培养基制做、灭菌、接种、培养检查等)，分数评定主要依据 操作规范程度和污染率及成活结果等来决定.
(一) 专业能力目标 1. 正确使用植物组织培养工厂仪器、设备； 2. 掌握植物组织培养工厂的构成及功能；
3. 熟悉外植体的选择、灭菌、诱导、继代、生根；培养基配制等； 4. 具备运用植物组织培养技术培育花卉、苗木的能力。 (二) 方法能力目标 1. 掌握植物组织培养相关的文献和资料的能力； 2．运用植物组织培养技术研究和培育花卉、苗木的能力； 3．学习新技术和新知识的能力； 4. 适应岗位变化的可持续发展能力。 （三）社会能力目标 1．培养团队协作能力； 2．加强与社会沟通能力； 3．能够具有较强的责任感和严谨的工作作风； 4．能够具有良好的心理素质和克服困难的能力。
园艺植物组织培养-绪论
. 愈伤组织培养(callus culture) 愈伤组织(callus)是指植物在受伤后于其伤口表面形成的一团薄壁细胞。在植物组织细胞培养中，则指在人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞。
根据外植体材料的不同
组织培养类型
根据外植体材料的不同 4 . 细胞培养(cell culture ) 5 .原生质体培养(protoplast culture). 摇 床 发 酵 罐
单击此处添加小标题
另一主要发展：Overbreek
奠 基 阶 段
添加标题
20世纪50年代开始以后
01
添加标题
1955年Miller
04
添加标题
1952年Morel和Martin
02
添加标题
1957年skoog和Miller
05
添加标题
1953-1954年Muir
03
添加标题
1958年Steward
组织培养类型
根据外植体材料的不同 器官培养(organ culture)，包括根、茎、叶、胚、花药、 子房等
组织培养类型
根据外植体材料的不同
茎尖分生组织培养(shoot tip culture,shoot apex culture, apical meristem culture)
组织培养类型
01
固体培养
单击此处添加正文，文字是您思想的提炼，为了演示发布的良好效果，请言简意赅地阐述您的观点。
02
半固体培养
单击此处添加正文，文字是您思想的提炼，为了演示发布的良好效果，请言简意赅地阐述您的观点。
03
液体培养
根据培养基状态 液体培养又包括有静止培养、振荡培养、旋转培养、纸桥培养
园艺生物技术
园艺生物技术一、名词解释1、组织培养：指在无菌条件下，将植物的离体器官、组织、细胞、胚胎、以及原生质，接种在到人工配制的培养基上，在人工控制的条件下进行培养，使其生长、分化，并长成完整植株的过程。
2、植物细胞的全能型：指植物的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，并具有发育成为完整的植株的潜在能力。
3、植物细胞分化：指在个体发育过程中，细胞在邢台、结构和功能上的特化过程。
4、无病毒苗：是指不含有该种植物的主要危害病毒，即经检测主要病毒在植物内的存在表现为阴性反应的苗木。
5、立体快速繁殖：指通过无菌操作，将外植体接种于培养基上，在人工控制的营养和环境条件控制下进行培养，，使其在较短的时间内快速的再生出大量完整植株的方法。
6、脱分化：指植物离体的器官、组织、细胞在培养条件下，经过多次细胞分裂，而失去原来的分化状态，形成无结构的愈伤组织或细胞团，并使其恢复到胚性细胞状态的过程。
7、再分化：指离体培养的植物组织或细胞可以由脱分化状态再度分化成另一种或几种类型的细胞、组织、器官、甚至是最终再生成完整植株的过程。
8、体细胞无性系变异：在培养阶段发生变异，进而导致再生植株亦发生遗传改变的现象。
9、种质资源的离体保存：是指对离体培养的小植株、器官、组织、细胞或原生质等材料，采用限制、延缓或停止其生长的处理使之保存，在需要时重新恢复其生长，并再生植株的方法。
10、园艺植物的细胞工程：指应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程学的试验方法和技术，在细胞水平上研究改造园艺植物遗传特性和生物学特性，以获得特定的细胞、细胞产品或园艺植物新品种的科学。
11、基因工程：将外源基因通过体外的重组后导入受体细胞内使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译、表达的系列操作技术总称。
12、限制性内切酶：从细菌中分离提纯的内切酶，可以识别并切开核酸序列特定位点----分子手术刀。
13、基因文库：指将基因组DNA通过限制性内切酶部分酶解后所产生的基因组DNA 片段随机地同相应的载体重组、克隆，所产生的克隆群体代表了基因组DNA的所有序列。
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2.2 培养基
组培中培养基的重要性： 基本培养基：指只含有维持离体植物细胞基
本生命活动所需的营养成分的培养基。通常 包括水分、无机营养成分和有机营养成分， 不包括激素和天然有机附加物。 完全培养基：指在基本培养基的基础上另外 附加激素或天然有机附加物所组成的培养基。
13
2.2.1 培养基的构成
1～10mmol/L或0.1～1mg/L ⑵ 配制方法 生长素类 细胞分裂素类 ⑶ 培养基的保存
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2.2.3.2 培养基的配制
水 准备 母液 混合定容 调pH 加入琼脂
糖 加热溶解
培养器皿 清洗 干燥 分装 封口
高压蒸汽灭菌 冷却 凝固
培养基配制程序
培养基具体配制操作过程：P21
接种
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2.3 组培实验基本操作技术
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2.2.1.5 天然有机添加物质
椰汁：CM 100～150ml/L 酵母提取液：YE 0.01%～0.5% 番茄汁：5% ～ 10% 马铃薯汁：100g/L ～ 200g/L 香蕉泥（汁）：150mg/L ～ 200mg/L
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2.2.1.6 培养基的pH值 灭菌前pH值调控范围：pH=5.7～5.8 pH对培养基凝固的影响 pH调节剂 2.2.1.7凝固剂
则和物质种类的不同，将基本培养基 配方所包括的物质进行分组；
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②基本培养基配方中物质划分组数的多 少，即配制母液数的多少可根据实际情况而 定，如MS培养基可以配制三液式、四液式、 五液式等； 例如：MS培养基五液式 大量元素母液 钙盐母液 微量元素母液 铁盐母液 有机营养成分母液
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2、激素母液的配制 ⑴ 激素母液的浓度
培养室最好设在南面，设大玻璃窗，以双层 玻璃窗为最好。如果培养室是设在房屋的边 侧，其东边或西边的墙上也可设置大玻璃窗；
培养室房间及门要小，而且密闭性要好，最 好装移门；
无菌操作室要小，要设缓冲间，也最好装移 门，且门要稍大一些。
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2.1.3 组培实验室的基本设备 2.1.3.1 器皿和器械类
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2、细胞分裂素类 常用类型：6-BA,KT.TDZ,2-ip 功能 培养基中常用浓度： 10-7～10-5mol/L或
0.1～10mg/L
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3、组织培养时，植物激素的使用规律 在生长素存在的条件下，细胞分裂
素的作用有加强的趋势，但二者在使用 上有一定的顺序关系，处理顺序不同， 培养物的分化状态也不同。规律如下：
⒈琼脂： 用量范围：3～10g/L 影响琼脂凝固的因素
⒉Gelrite：植物凝胶 2.2.1.8 其他添加物
活性炭（AC）、维生素C、抗生素等
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2.2.2 基本培养含量的培养基 代表类型：MS，LS，BL，ER ⒉硝酸钾含量较高的培养基 代表类型：B5，N6，SH ⒊中等无机盐含量的培养基 代表类型：Nitsch，Miller，H ⒋低无机盐含量的培养基 代表类型：White，WS，HE
2.1.1.2 无菌操作室
⒈功能 ⒉组成 缓冲室（间）： 接种室（间）： ⒊无菌操作室的消毒 ⒋主要设备 超净工作台 金属器械消毒器
1
2.1.1.3 培养室 功能 主要设备 环境条件
2
2.1.1.4 温室 功能
3
2.1.2 组培实验室的布局 2.1.2.1 布局基本要求
便于隔离，便于操作，便于灭菌和便于观察。
2.2.1.1 水 2.2.1.2 无机盐类 大量元素化合物 微量元素化合物 2.2.1.3 有机营养成分 糖类 维生素类 氨基酸类
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2.2.1.4 植物生长调节剂
1、生长素类 常用类型：NAA,2,4-D,IBA,IAA 功能 培养基中常用浓度：10-7～10-5mol/L或 0.1～10mg/L
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2.2.2.2 基本培养基的选择 MS培养基 B5培养基 N6培养基 改良的White培养基 WPM培养基
★ 培养基是否适合所培养的植物，必须 通过试验进行筛选。
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2.2.3 培养基的配制
母液稀释法
2.2.3.1 培养基母液的配制和保存 1、基本培养基母液的配制 ⑴ 单配法 ⑵ 混配法 ① 按照避免难溶性沉淀形成的原
⒈玻璃器皿 ⒉器械 镊子类 解剖刀 剪刀 接种针 细菌过滤器
7
2.1.2.2 仪器设备 ⒈无菌操作设备
超净工作台
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高压蒸汽灭菌器
9
电热烘箱 接种器具消毒器
10
⒉培养设备
空调 加湿器和去湿机 定时器 培养架 摇床或旋转床 培养箱
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⒊药品贮存和配制仪器设备 冰箱 天平 酸度计 ⒋观察分析仪器设备 体视显微镜 普通光学显微镜 倒置显微镜 ⒌其它仪器设备 离心机 恒温水浴锅
⑴ 先用生长素处理，后用细胞分 裂素处理，有利于细胞分裂，但细胞不 容易分化,容易产生多倍体细胞。
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⑵ 先用细胞分裂素处理，后用生长 素处理，细胞分裂也分化。
⑶ 用生长素和细胞分裂素同时处理， 细胞脱分化后分化频率提高。但二者的 使用浓度比值可以决定器官分化方向： 生长素/细胞分裂素比值高时，有利于 根分化，抑制芽形成。反之，有利于芽 分化，抑制根形成。比值适中时，促进 愈伤组织的形成和生长。
2.1.2.2 基本布局规律
根据实验操作程序排列实验室； 接种室和培养室设在与外界环境隔离性好的区
域； 灭菌室与接种室相邻； 其他实验室的布局可根据条件，以方便使用为
宜。
4
培
养
储藏室
准备室
室 灭菌室
缓接 冲种 室室
植物组织培养实验室布局示意图
5
2.1.2.3 设计组培实验室时的注意事项
为了减少污染，实验室最好设一走廊且走廊 上方最好安装紫外灯；
2.3.1 器皿和器具的洗涤 P19
1.洗涤剂：无磷中性的肥皂粉、洗衣粉和 洗洁精
2.常用清洗方法 洗涤剂清洗法 超声波清洗法
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3.玻璃器皿的清洗 新购置的玻璃器皿的清洗 用过的培养器皿的清洗 已经污染的玻璃器皿的清洗
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2.3.2 灭菌
2.3.2.1 器具的灭菌方法 干热灭菌法 高压蒸汽灭菌法（湿热灭菌法） 火焰灼烧灭菌法
2.3.2.2 培养基的灭菌方法 高温蒸汽灭菌法 过滤除菌法