hα-syn蛋白核酸疫苗pVAX1-hαS1-140的构建及其表达

hα-syn蛋白核酸疫苗pVAX1-hαS1-140的构建及其表达王加才;王少君;彭国光;罗琴;江思德;王法祥
【期刊名称】《重庆医学》
【年(卷),期】2008(37)17
【摘要】目的构建含人α-突触核蛋白(human α-synuclein,hα-syn)编码基因的真核重组载体,并在COS-7细胞中表达,为帕金森病的核酸疫苗开发奠定基础.方法通过PCR方法扩增hα-syn基因的CDS全长片段,舍酶切位点KpnⅠ、XbaⅠ和Kozak序列.扩增产物和真核表达载体pVAX1经双酶切、纯化、连接,转化感受态细胞E.coli TOP10,筛选含目的基因的重组载体pVAX1-hαS1-140,并在COS-7细胞中表达,用RT-PCR法和western blot法检测其表达产物.结果经单、双酶切证实插入的基因片段大小一致,基因测序证实其序列和方向完全正确.用RT-PCR法和Westem blot法检测表明,重组质粒pVAx1-hαS1-140在COS-7细胞中能表迭目的蛋白,而且具有生物活性.结论成功构建了核酸疫苗pVAX1-hαS1-140,并在COS-7细胞中表达,为帕金森病的核酸疫苗治疗研究奠定了良好的基础.
【总页数】3页(P1953-1955)
【作者】王加才;王少君;彭国光;罗琴;江思德;王法祥
【作者单位】重庆医科大学附属第一医院神经内科,重庆市神经病学重点实验室,400016;重庆医科大学附属第一医院神经内科,重庆市神经病学重点实验
室,400016;重庆医科大学附属第一医院神经内科,重庆市神经病学重点实验
室,400016;重庆医科大学附属第一医院神经内科,重庆市神经病学重点实验
室,400016;重庆医科大学附属第一医院神经内科,重庆市神经病学重点实验
室,400016;重庆医科大学附属第一医院神经内科,重庆市神经病学重点实验
室,400016
【正文语种】中文
【中图分类】R745.1;R979.5
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