T淋巴细胞结果的解读
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2细胞淋巴细胞比例及计数绑定机体免疫状况无法精确判断t淋巴细胞亚群比例检测临床常用但较片面t淋巴细胞亚群数量观察免疫细胞数值变化评估免疫状况通常采用流式细胞仪法特别针对cd4的检测已成为金标准功能数量比例结合更精确评估机体免疫状态1234目前临床主要可以做以下项目的检测淋巴细胞亚群tbnk的比例和计数t细胞亚群cd4细胞cd8细胞cd4cd8比值mhladr单核细胞hladrcd4cd25treg调节细胞及th17细胞我们工作目前国内绝大多数医院没有开展淋巴细胞计数项目bd健康中国人参考范围cd4
15
存在免疫麻痹的Septic患者死亡率大大增加
100名septic患者
无免疫麻痹
免疫麻痹
28天死亡
脓毒症休克患者T淋巴细胞凋亡、存在免疫紊乱
存活与死亡Septic中T淋巴细胞亚群的变化
一项对院内感染的老年脓毒症患者的前瞻性对照研究
严重多发伤患者免疫细胞的变化特点
CD4/CD8降低 MHLA-DR降低
25
对 照 组
CD14^+单核细胞人类白细胞抗原-DR(HLA-DR) 表达情况
脓 毒 症 组
重症脓毒症患者存在免疫麻痹
中国急救医学杂志, 2011, 31(9): 836-838.
27
总结
➢ T淋巴细胞亚群的研究越来越多 ➢ 某种T细胞亚群过高或过低，都提示存在免疫功能紊乱，主
要用于了解恶性肿瘤、免疫缺陷、重症病毒感染、自身免疫 病等患者机体的免疫功能是处于什么状态。 ➢ T细胞亚群的表达受多种因素影响 常“变幻莫测”，因此T 细胞亚群的解读应细胞比例结合计数和功能状态，连续动态 监测更有意义。 ➢ 严重脓毒症存在免疫紊乱，T淋巴细胞的凋亡，与预后有一 定关系。创伤等应激状态同样导致免疫紊乱。
T细胞亚群结果的解读
淋巴细胞分化图
T淋巴细胞的分类方法
按T细胞所处的活化阶段
按T细胞CD4和CD8分子表型
初始T细胞（naive T cell）
CD4+ T细胞
效应T细胞（effector T cell）
CD8+ T细胞
记忆性T细胞（memory T cell）
按T细胞表面受体（TCR） 按T细胞的功能分类
2 T淋巴细胞亚群
比例检测 临床常用，但较片面
4
功能、数量、比 例结合
更精确评估机体免 疫状态
3
T淋巴细胞亚群数量
观察免疫细胞数值变化，评估 免疫状况，通常采用流式细胞 仪法，特别针对CD4的检测，已 成为“金标准”。
目前临床主要可以做以下项目的检测
淋巴细胞亚群(T+B+NK)的比例和计数 T细胞亚群(CD4+细胞、CD8+细胞、CD4+/CD8+比值） MHLA-DR（单核细胞HLA-DR) CD4CD25Treg（调节细胞）及Th17细胞（我们工作）
CD4细胞计数为0.63×109/L×32.5%≈0.20 ×109 /L
CD8细胞计数为0.63×109/L×31.1%≈0.19 ×109 /L
单核细胞人类白细胞抗原DR（ CD14/HLA-DR）
CD14为LPS复合物受体,主要分布在单核细胞，HLA-DR为活 化标志。
CD14/HLA-DR可反映人体细胞免疫功能，<30%提示免疫麻 痹。也有人认为HLA-DR浓度如果连续两天低于8000AB/C可
T细胞及单核细胞 凋亡增加
Injury, Int. J. Care Injured (2007) 38, 1346—1357
烧伤患者早期外周血淋巴细胞亚群的变化特点
烧伤患者白细胞低于正常组 早期CD3、CD4、CD8细胞计数 均明显下降。 HLA-DR表达降低。 CD4/CD8比值下降。
CD4T细胞亚群新分类：Th1 、Th2 、Treg 、Th17 我们的研究
抗炎细胞Treg及其分泌的抗炎介质IL-10；促炎细胞Th17 及分泌的促炎介质IL-17、IL-6在人体的炎性免疫稳态中 发挥重要作用。
结论一：脓毒症患者中Treg明显升高，表明抗炎反应的增强
中国呼吸与危重监护杂志, 2010, 09(04): 416-418.
23
脓毒症患者中Th17表达明显升高，提示促炎反应的增强。
CD4/CD8
百分含量 （%淋巴 细胞） 5-18%
7-40%
50-84%
27-51%
15-44%
0.71-2.78
项目
Total T lymphocyte (CD3+)
Thelper/inducer cell (CD3+/CD4+ /CD8-)
Tsupressor/cytot oxic cell (CD3+/CD4/CD8+
CD4／CD8比值异常：
比值降低：一般被称为“免疫抑制”状态，常见于免疫缺陷病、恶性肿 瘤、再生障碍性贫血、白血病、某些病毒感染等
比值增高：表明细胞免疫功能处于“过度活跃”状态，容易出现自体免 疫反应。此外还可用于监测器官移植的排斥反应，若移植后CD4/CD8较 移植前明显增加，则可能发生排异反应
CD19+B细胞正常范围为：5-18%
与血细胞计数仪联用，得出各淋巴细胞百分比后 乘以淋巴细胞数量，得出各淋巴细胞的绝对浓度。
不精确、繁琐
举例如下
省钱
患者血常规中淋巴细胞计数为0.63 ×109 /L,
淋巴细胞比例测定结果CD3 为64.9%,CD4为 32.5%,CD8为31.1%
推
算
CD3细胞计数为0.63×109/L×64.9%≈0.41 ×109 /L
对 照 组
脓 毒 症 组
结论二：在脓毒症患者中Th17表达明显升高
吴铁军,亢翠翠, 中华急诊医学杂志, 2012, 21(04): 378-380.
24
淋巴细胞Ag-NoR在健康组中的表达 淋巴细胞Ag-NoR在Sepsis组中的表达
对照组
脓毒症组
重症脓毒症患者淋巴细胞增殖能力低下、凋亡
吴铁军，张丽娜 中国呼吸与危重监护杂志, 2010, 09(04): 416-418.
加红细胞裂解液，溶血，离心，弃 上清。
用PBS洗1Biblioteka ，PBS重悬细胞，上机检 测。FCM分析 电子计算机自动计算出阳 性细胞百分率及总细胞计数。
CD4T淋巴细胞的计数方法二（推算）
CD3+T细胞正常范围为：50-84%
CD4+T细胞正常范围为： 27-51%
CD8+T细胞正常范围为： 15-44%
分类
Th（辅助T细胞）
+ T细胞 + T细胞
TS（抑制T细胞） Tr（调节T细胞）
外周血中各亚群占淋巴细胞总数的比例
15-44%
60-80%
27-51%
T淋巴细胞 CD4T淋巴细胞 CD8T淋巴细胞
淋巴细胞监测注重数量、比例、功能相结合
血液分析常规检测
1 依据白细胞、淋巴细胞比例
及计数绑定机体免疫状况， 无法精确判断。
目前国内绝大多数医院没有开展淋巴细胞计数项目
(BD)健康中国人参考范围
项目
Total B lymphocyte (CD19+)
NK cell (CD3/CD16+56+)
Total T lymphocyte (CD3+)
T helper/inducer cell (CD3+/CD4+)
T supressor/cytotoxic cell (CD3+/CD8+)
脓毒症休克期存在免疫麻痹
The shift from a pro-in-flammatory to an anti-inflammatory immune response predominant at the systemic level likely occurs before 24 h after diagnosis of shock.
百分含量 （% T 淋巴细 胞）
34-70%
25-54%
绝对含量 （cells/ L）
770-2041
414-1123
238-874
CD3+CD4+CD8 0.5-4.0%
6-56
+ cell
CD4+、 CD8+ T淋巴细胞的计数方法一（FCM)
简单、快速、相对精确
取100μl全血，加三种不同荧光素 标记的鼠抗人CD3、CD4、CD8McAb， 阴性对照。
认为存在免疫麻痹。
广泛应用于临床。
T淋巴细胞亚群研究
研究逐年增多
淋巴细胞亚群变化的常见临床意义
CD4淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应 用免疫抑制剂的患者
CD8淋巴细胞增多：见于自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮 （SLE）、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等
15
存在免疫麻痹的Septic患者死亡率大大增加
100名septic患者
无免疫麻痹
免疫麻痹
28天死亡
脓毒症休克患者T淋巴细胞凋亡、存在免疫紊乱
存活与死亡Septic中T淋巴细胞亚群的变化
一项对院内感染的老年脓毒症患者的前瞻性对照研究
严重多发伤患者免疫细胞的变化特点
CD4/CD8降低 MHLA-DR降低
25
对 照 组
CD14^+单核细胞人类白细胞抗原-DR(HLA-DR) 表达情况
脓 毒 症 组
重症脓毒症患者存在免疫麻痹
中国急救医学杂志, 2011, 31(9): 836-838.
27
总结
➢ T淋巴细胞亚群的研究越来越多 ➢ 某种T细胞亚群过高或过低，都提示存在免疫功能紊乱，主
要用于了解恶性肿瘤、免疫缺陷、重症病毒感染、自身免疫 病等患者机体的免疫功能是处于什么状态。 ➢ T细胞亚群的表达受多种因素影响 常“变幻莫测”，因此T 细胞亚群的解读应细胞比例结合计数和功能状态，连续动态 监测更有意义。 ➢ 严重脓毒症存在免疫紊乱，T淋巴细胞的凋亡，与预后有一 定关系。创伤等应激状态同样导致免疫紊乱。
T细胞亚群结果的解读
淋巴细胞分化图
T淋巴细胞的分类方法
按T细胞所处的活化阶段
按T细胞CD4和CD8分子表型
初始T细胞（naive T cell）
CD4+ T细胞
效应T细胞（effector T cell）
CD8+ T细胞
记忆性T细胞（memory T cell）
按T细胞表面受体（TCR） 按T细胞的功能分类
2 T淋巴细胞亚群
比例检测 临床常用，但较片面
4
功能、数量、比 例结合
更精确评估机体免 疫状态
3
T淋巴细胞亚群数量
观察免疫细胞数值变化，评估 免疫状况，通常采用流式细胞 仪法，特别针对CD4的检测，已 成为“金标准”。
目前临床主要可以做以下项目的检测
淋巴细胞亚群(T+B+NK)的比例和计数 T细胞亚群(CD4+细胞、CD8+细胞、CD4+/CD8+比值） MHLA-DR（单核细胞HLA-DR) CD4CD25Treg（调节细胞）及Th17细胞（我们工作）
CD4细胞计数为0.63×109/L×32.5%≈0.20 ×109 /L
CD8细胞计数为0.63×109/L×31.1%≈0.19 ×109 /L
单核细胞人类白细胞抗原DR（ CD14/HLA-DR）
CD14为LPS复合物受体,主要分布在单核细胞，HLA-DR为活 化标志。
CD14/HLA-DR可反映人体细胞免疫功能，<30%提示免疫麻 痹。也有人认为HLA-DR浓度如果连续两天低于8000AB/C可
T细胞及单核细胞 凋亡增加
Injury, Int. J. Care Injured (2007) 38, 1346—1357
烧伤患者早期外周血淋巴细胞亚群的变化特点
烧伤患者白细胞低于正常组 早期CD3、CD4、CD8细胞计数 均明显下降。 HLA-DR表达降低。 CD4/CD8比值下降。
CD4T细胞亚群新分类：Th1 、Th2 、Treg 、Th17 我们的研究
抗炎细胞Treg及其分泌的抗炎介质IL-10；促炎细胞Th17 及分泌的促炎介质IL-17、IL-6在人体的炎性免疫稳态中 发挥重要作用。
结论一：脓毒症患者中Treg明显升高，表明抗炎反应的增强
中国呼吸与危重监护杂志, 2010, 09(04): 416-418.
23
脓毒症患者中Th17表达明显升高，提示促炎反应的增强。
CD4/CD8
百分含量 （%淋巴 细胞） 5-18%
7-40%
50-84%
27-51%
15-44%
0.71-2.78
项目
Total T lymphocyte (CD3+)
Thelper/inducer cell (CD3+/CD4+ /CD8-)
Tsupressor/cytot oxic cell (CD3+/CD4/CD8+
CD4／CD8比值异常：
比值降低：一般被称为“免疫抑制”状态，常见于免疫缺陷病、恶性肿 瘤、再生障碍性贫血、白血病、某些病毒感染等
比值增高：表明细胞免疫功能处于“过度活跃”状态，容易出现自体免 疫反应。此外还可用于监测器官移植的排斥反应，若移植后CD4/CD8较 移植前明显增加，则可能发生排异反应
CD19+B细胞正常范围为：5-18%
与血细胞计数仪联用，得出各淋巴细胞百分比后 乘以淋巴细胞数量，得出各淋巴细胞的绝对浓度。
不精确、繁琐
举例如下
省钱
患者血常规中淋巴细胞计数为0.63 ×109 /L,
淋巴细胞比例测定结果CD3 为64.9%,CD4为 32.5%,CD8为31.1%
推
算
CD3细胞计数为0.63×109/L×64.9%≈0.41 ×109 /L
对 照 组
脓 毒 症 组
结论二：在脓毒症患者中Th17表达明显升高
吴铁军,亢翠翠, 中华急诊医学杂志, 2012, 21(04): 378-380.
24
淋巴细胞Ag-NoR在健康组中的表达 淋巴细胞Ag-NoR在Sepsis组中的表达
对照组
脓毒症组
重症脓毒症患者淋巴细胞增殖能力低下、凋亡
吴铁军，张丽娜 中国呼吸与危重监护杂志, 2010, 09(04): 416-418.
加红细胞裂解液，溶血，离心，弃 上清。
用PBS洗1Biblioteka ，PBS重悬细胞，上机检 测。FCM分析 电子计算机自动计算出阳 性细胞百分率及总细胞计数。
CD4T淋巴细胞的计数方法二（推算）
CD3+T细胞正常范围为：50-84%
CD4+T细胞正常范围为： 27-51%
CD8+T细胞正常范围为： 15-44%
分类
Th（辅助T细胞）
+ T细胞 + T细胞
TS（抑制T细胞） Tr（调节T细胞）
外周血中各亚群占淋巴细胞总数的比例
15-44%
60-80%
27-51%
T淋巴细胞 CD4T淋巴细胞 CD8T淋巴细胞
淋巴细胞监测注重数量、比例、功能相结合
血液分析常规检测
1 依据白细胞、淋巴细胞比例
及计数绑定机体免疫状况， 无法精确判断。
目前国内绝大多数医院没有开展淋巴细胞计数项目
(BD)健康中国人参考范围
项目
Total B lymphocyte (CD19+)
NK cell (CD3/CD16+56+)
Total T lymphocyte (CD3+)
T helper/inducer cell (CD3+/CD4+)
T supressor/cytotoxic cell (CD3+/CD8+)
脓毒症休克期存在免疫麻痹
The shift from a pro-in-flammatory to an anti-inflammatory immune response predominant at the systemic level likely occurs before 24 h after diagnosis of shock.
百分含量 （% T 淋巴细 胞）
34-70%
25-54%
绝对含量 （cells/ L）
770-2041
414-1123
238-874
CD3+CD4+CD8 0.5-4.0%
6-56
+ cell
CD4+、 CD8+ T淋巴细胞的计数方法一（FCM)
简单、快速、相对精确
取100μl全血，加三种不同荧光素 标记的鼠抗人CD3、CD4、CD8McAb， 阴性对照。
认为存在免疫麻痹。
广泛应用于临床。
T淋巴细胞亚群研究
研究逐年增多
淋巴细胞亚群变化的常见临床意义
CD4淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应 用免疫抑制剂的患者
CD8淋巴细胞增多：见于自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮 （SLE）、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等