ε-聚赖氨酸生产菌株的诱变及其在葡萄酒发酵中的应用
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１ 材 料 与方 法
１１ 试验 材料 ．
ｓ一聚赖氨酸标准 品和甲基橙从水 中重结 晶 ，并 干燥 至
恒重 ， 实验前将两者溶于 ０７ ｏ Ｌ磷酸缓 冲液（Ｈ ． 中。 ． ｍｍ ｌ ／ ｐ ６９ ）
ｅ一聚赖氨酸标准曲线的绘制 ：配制不 同浓度 的 ｓ 一聚
赖氨酸的磷 酸盐溶液 ， 分别 取 ２ ｍＬ与 ２ ｍ ｏ Ｌ甲基橙在 ｍＬ １ ｍ ｌ ／ 室温下混合反 应 ， 剧烈振荡 ３ ｍ ｎ 在 ５ ０ ｒ ｉ ０ ｉ， ００／ ｎ离心 ２ ｍｉ。 ｍ ０ ｎ 取上 清液稀释 ２ ０倍 ，用分光光度法在 ４ ５ ｍ下 以磷 酸缓冲 ６ｎ 液作 为参 比进行 吸光度 的测定。 ｓ一聚赖氨酸含量为横坐标 值 ， 为纵坐标值 ， Ａ 得到 ｓ一聚赖氨酸含量 的标准 曲线。 白色链霉菌 的发酵液 中 ８一聚赖氨酸产量的测定 ：培养 ７ ｈ ２
脂） ， 为去离子水 。 其余
１ ． 试验 方 法 ２
１ ． 子液 培养条件优化正交实验设计 方案 ． １种 ３ 选取 ｅ一聚赖氨酸高产菌株进行发 酵试验 ，以发酵液中 选取 ８一聚赖氨酸含量作为指标 ， 选取温度 、 培养时间和摇 床 转速三个因素 ， 过 （ 正交表进行培养优化实验 ， 通 ３） 以得 到 最佳种子成熟条 件。实验设计方案见表 １ 。
ｃ ｍｐ ｕ ｄｏ ｔｉ ｍ ｈ ｏ ｄ ｂ ａｎ ｈ ｇ — ｉｌ ｔ ｉ ｓｏ ￡－ ｏｙｙ ｉ ｅ Ａｆ ｒｔｓｉｇ ｔ ｅｅ ｍｉ ｅｉ ｓ ｅ ｓ ｆ ｕ ｄｏ ｔ ｚ ｔ ｎ ｏ ｒ ｃ ｓ ｏ ｏ ｎ ｆ ｉ ｕ ｃ ｌ ｒ ｅ ｔ ｏ ｔ ｉ ｉｈ ｙｅ ｄｓｒ ｎ ｆ ｐ ｌｌ ｓ ． ｔ ｔ ｄ ｔ ｒ ｎ ｅ ｄ ｉ ｐ ｉ ａ ｉ ｆ ｏ ｅ ｓ ｌ ｈ ｉ ｏ ａ ｎ ｅ ｅ ｎ ｏ ｆ ｏｆ ｌ ｍｉ ｏ ｐ
多数是从土壤 中分离 白色链霉菌 ， 发酵生产 ｓ 聚赖氨酸 ， 一 但
自然界 中的白色链霉菌产 ｅ一聚赖氨酸的能力 较低 ，一般产 量不超过 ｌ／ ，但 产物 中含有一定量的 Ｏ一聚赖氨酸 ，有毒 ｇ Ｌ ｔ 性， 必须 分离 出去方可在食 品中使用 ， 给工业生产带来很 大难
作者简介 ： 成 ， 陈 高级 工程 师， 事发 酵食品 的研 究。 从
陈
（ ． 江省轻工科学研究 院， １ 黑龙 黑龙江
成 韩建春 ，
１０ １ ；． ５００２ 东北农业大学 ， 黑龙江 哈尔滨 １０ ３ ） ５００
哈尔滨
摘
要： 究以弗吉尼亚链 霉菌为 出发 菌株 ， 研 经过硫 酸二 乙酯（ Ｅ ） 变和 紫外复合氯化锂诱 变， Ｄ Ｓ诱 获得 ８一聚
赖氨 酸高产 菌株 。 经过试验确定种子液优化 工艺参数 ： 温度 ３＇ 培养 时间 ４ｈ 摇床 转速 １０／ ｉ ； ０ Ｃ， ８， ５ ｒｍ ｎ 发酵液优 化参数 为： 接种量 ５ 发 酵时间 ６ ％， ６小时、 初始 ｐ ．。将该茵株 与酿酒酵母复合应用 于葡萄酒发酵， Ｈ６５ 降低杂茵 感染几率， 经过挑战加速 实验结果表 明 ， 萄酒的保质期大大延长。 葡 关键词 ： 弗吉尼 亚链霉菌 ； 变； 诱 ￡一聚赖氨酸 ； 葡萄酒； 发酵
高的特点 。２０ ０ ４年 ２月 ２ 日日本 Ｃ ｉ ｏ公司生产的聚 ４ ｈｓ ｓ 赖氨 酸这 种 天然 食 品添加 剂 作为 Ｇ Ａ Ｒ Ｓ物 质 通过 了美 国
等引起食物 中毒与腐败 的菌 有强烈 的抑制 作用 ， 同时还具有
一
Ｆ Ａ 认证 ， Ａ Ｄ Ｃ Ｓ登 记号为 ２ ２ ｌ ｏ — ，标 志着 ８一聚赖氨 ８ １— ４ ３
２ｍｉ，上 清液 即为待测 液 ，稀 释 ２ ０ ｎ ０倍 ，用分 光光度 法在
４ ５ ｍ下 以磷酸缓冲液作为参 比进行 吸光度 的测定 ，再根据 ６ｎ 标准 曲线得 出发酵液 中 ｅ一聚赖氨酸的含量。
１ ． 试验 设 计 方案 ３
７ ２００ ｇ Ｆ Ｓ ４・Ｈ２ ． ５ ／（ Ｈ ０ ．６ ／ ｅＯ ７ ０ ００ ｇ 固体 斜 面添加 ２ Ｌ， ４ Ｌ ％的 琼
中 图 分 类 号 ： Ｓ ６ ．； Ｓ６ ． ； ２ １４ Ｔ ２ ２６ Ｔ ２ １１ ＴＳ ６ ． ２ 文 献标 识 码 ： Ｂ
Ｒｅ ｅ ｒ ｈ ｏ ｓ ａ ｃ ｆ － ｏｙ ｙ ｉ ｅ Ｐｒ ｄ ｃ ｉｎ Ｓ ｒ ｉ ｎ ｒ ｎ ａ ｉ ｎ Ｃｏ ｄ ｔｏ ｓ ｏ ｐ ｌ ｌ ｓｎ ｏ ｕ ｔｏ ｔ ａ ｎ ａ ｄ Ｆｅ ｍｅ ｔ ｔ ｎ ｉｉ ｎ ｆ ｏ Ｍ ｕ ａ ｉｎ ｔ ｔｏ
Ａ ｓｒｃ： ｎｔｉ ｓ ｄ， ｓｔ ｔ ｔ ｇｓ ａ ｆ ｔ ｐｏｎｃｓｖ ｇ ｉ ， ｆ ｒｄ ｔｙ ｓｌｔ （ Ｅ ） ｔ ｅ ｅｉ ａ ｄＵ ｕａｅｅｉ ｂ ｔａｔ Ｉ ｓ ｔ ｙ ａ ｅｓ ｒｎ ｒ ｎｏ ｒ ｔ ｙｅ ｉ ｉ ａ ａｅ ｉ ｈｌ ｕｆｅ Ｄ Ｓ ｍｕ ｇｎ ｓ ｎ Ｖ ｍ ｔ ｎｓ ｈ ｕ ｈ ａｉ ｔｉ Ｓｅ ｙ ｒｎ ｅ ｔ ｅ ａ ａ ｓ ｇ ｓ
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第３ ８卷 第 ４期
２０ １１年 Ｏ 月 ７
酿
酒
Ｖ０ ． ８ Ｎ ． １ ． ｏ４ ３
Ｉ Ｌ Ｕ Ｒ ＭＡＫ ＮＧ Ｉ Ｏ Ｑ
Ｊｌ ｕｙ， ２ １ ０１
文 章 编 号 ：０ ２ ８ １ （０ １０ 一 Ｏ４ ０ １０ — １０ ２ １ ）４ Ｏ４ — ４
￡ 一聚赖氨酸生产 菌株 的诱 变及 其 在 葡萄 酒发酵 中的应 用 ★
ｗｉ ． ｎｅ
Ｋ ｅ ｗ ｏ ｄｓＳｔｅ ｔ ｙ ｙ ｅ ｖｒ ｉ ａ ｍ ｕ ｔｏ ｙ ｒ ： ｒ ｐ ｏ ｎ ｃ ｓ ｉｇｎｉｅ； ｔ ｉｎ；￡ －ｐ ｌｌ ｓｎｅ； ｉ ｅ、ｅｍ ｅ ｔ ａ ｏｙ ｙ ｉ Ｗ ｎ ｆｒ ｎ
０ 引言 ｅ一聚赖氨 酸是 上世 纪 ８ 年代 由 日本 首先发 现 的继 Ｏ Ｎｓ ｉｎ之后的一种新 型食品抑菌 剂 ， 有广谱 抑菌性 ， 于酵 ｉ 具 对 母属 的尖锐假丝酵母 菌 、 红酵母菌 、 法 产膜毕 氏酵母 、 玫瑰掷 孢酵母 ； 兰氏 阳性 菌 中的耐热脂 肪芽孢 杆菌 、 结芽孢 杆 革 凝
编号为 ： ＩＣ １ 。 ＣＣ １０ ３ １
１． ．２培养基配方 １ 可溶 性淀 粉 ５ ｇＬ （Ｈ ） Ｏ １ｇ ，酵母 提取物 ７５／ ０ ／ ，Ｎ ４Ｓ ４０／ ２ Ｌ ． Ｌ， ｇ
Ｋ ＨＰ ． ｇ Ｌ， ２ Ｏ４ ０ ８ ／ ＫＨ２ Ｏ４ ．６ ／ Ｍｇ ０ ‘ Ｈ２ ０ ７ ｇＬ， ｎ Ｏ４。 Ｐ １３ ｇＬ， Ｓ ４ ７ ０ ．５ ／ Ｚ Ｓ
的发酵液在 ８０ ｒ ｉ 离 心 ２ ｍ ｎ 取 ２ ０ ０／ ｎ ａ ｒ ０ ｉ， ｍＬ上清液 与 １ ｍｏ Ｌ ｍ ｌ ／ 甲基橙在 室温 下反应 ，剧烈振 荡 ３ ｍｉ，在 ５ ０ ｒ ｉ ０ ｎ ０ ０／ ｎ离心 ａ ｒ
１１１ ．． 试验 菌株
弗 吉尼亚链霉菌购买 于 中国工业微生 物菌种保藏 中心 ，
表 １ 正 交实验设计表
１． ． １菌种诱 变方法 ２
１ ． １单孢子悬液制备 ．１ ２．
取 出发菌 株弗 吉尼 亚链 霉 菌一环 接 于斜 面培 养基 上 ， ２ ％培养 ７ ６ ｄ待孢子成熟铺满斜面 ，用无菌生理盐水洗下 ， 在 装有玻璃珠的无 菌生理盐水 中振 消化后 又可变成单的赖氨酸而成
为人体营养的强化剂， 故聚赖氨酸作为食品防腐剂， 具有无毒
副作用 ， 安全性 高的特 点。聚赖氨酸 的热稳定性非常好 ， 其最
基金项 目 ： 龙江省普通 高等学校青年学术骨干支持计划项 目 黑
收 稿 日期 ：０ １ ０ — ４ ２ １— ４ ２
定的抗噬茵体的能力【 １ １ 。其化学组成是 由人体必需氨基酸
酸已被 国际标准所认可［ ｅ 聚赖氨酸抑菌谱广 ， ３ ～ １ 。 对革兰 氏 阳性菌 、 氏阴性菌 、 革兰 酵母菌 、 均有 一定 的抑菌作用 ， 霉菌 而 且其对一些耐热性 芽孢杆菌 和一些病毒也有抑制作用［ ４ １ 。
国内很 多科研机构对 ￡ ～聚赖氨酸也进行 深入 的研 究 ，
ＣＨＥＮ Ｃ ｅ ｇ。 ｈ ｎ ０ＨＡＮ ｉｎ ｃ ｕ ａ Ｊａ — ｈ ｎ￣
（． ｉｎｊ ｎ ｒｖ ｃ ｉ ｔＩｄ ｓｉ ｃ ｎｅ Ｒ ｓａ ｈ Ｉｓｔ ｅＨａ ｉ， ｉｎｊ ｎ １０ １ ，Ｃ ｉａ １ ｌ ｇａ ｇＰｏｉ ｅ Ｌｇ ｎ ｕｔａ Ｓ ｉ ｃ ｅｅｒ ｎｔｕ ， ｒ ｎ Ｈｅｏ ｇａｇ ５０ ０ ｈｎ ； Ｈｅｏ ｉ ｎ ｈ ｒｌ ｅ ｃ ｉｔ ｂ ｌ ｉ ２ ｏｔｅｓ Ａ ｒ ｕｔｒ ｎｖｒ ｔ， ｒ ｉ， ｉｎｊ ｎ ５ ０ ０ Ｃ ｉａ ． ｒ ａｔ ｇｉ ｌ ａ Ｕ ｉ ｓｙＨａ ｎ Ｈｅｏ ｇａｇ １０ ３ ，ｈｎ） Ｎ ｈ ｃ ｕｌ ｅｉ ｂ ｌ ｉ
”通讯作者 ： 韩建春 。
●
第四期
陈 成， ： 等 ８一聚赖氨酸生产菌株 的诱变及其在葡萄酒发酵中的应用
２ １ ０１
度， 同时产品生产成本很高 ， 故至今国内对 ｓ一聚赖氨酸尚未 规模化生产 ， 仅限于科学研究 阶段［ ５ １ 。本研究 以中国工业微生
配制 ０ ｍ ｌ ． ｍｏ Ｌ磷酸缓 冲液（Ｈ ． 和 １ ｍ ｌ ７ ／ ｐ ６９ ） ｍ ｏ Ｌ甲基橙 试 ／
菌、 枯草 芽孢 杆菌 ； 革兰 氏阴性菌 中的产气节杆 菌 、 大肠杆菌
适 ｐ ～， Ｈ５ ８ 也就是说其在 中性 和微 酸性 环境 中有较强 的抑菌 性。 ８ 一聚赖氨酸是 由人体 必需氨基酸 Ｌ 一赖氨酸构 成的多 肽 ，它经消化后又可变成单一的赖氨酸而成为人体营养的强 化剂 ， 聚赖氨酸作 为食 品防腐剂 ， 故 具有无毒副作 用 ， 安全性
剂。
物菌种保藏 中心保藏的弗吉尼亚链霉菌为 出发菌株 ， 物理 、 经 化学诱 变 ， 筛选 一株 ｅ 一聚赖 氨酸高产 突变 菌株 ， 能可达 产 ９ ２／ ， 物中没有 Ｏ一聚赖 氨酸 ， ． ｇＬ 产 ４ ｔ 大大降低 了生 产成本 ， 经 ５吨发 酵罐 中试 ， 吨培养 基生产 ８ 一聚赖氨酸回收量 可达 ９ ｇ ｋ 以上 ， 完全可 以规模化生产。
１１ 试验 材料 ．
ｓ一聚赖氨酸标准 品和甲基橙从水 中重结 晶 ，并 干燥 至
恒重 ， 实验前将两者溶于 ０７ ｏ Ｌ磷酸缓 冲液（Ｈ ． 中。 ． ｍｍ ｌ ／ ｐ ６９ ）
ｅ一聚赖氨酸标准曲线的绘制 ：配制不 同浓度 的 ｓ 一聚
赖氨酸的磷 酸盐溶液 ， 分别 取 ２ ｍＬ与 ２ ｍ ｏ Ｌ甲基橙在 ｍＬ １ ｍ ｌ ／ 室温下混合反 应 ， 剧烈振荡 ３ ｍ ｎ 在 ５ ０ ｒ ｉ ０ ｉ， ００／ ｎ离心 ２ ｍｉ。 ｍ ０ ｎ 取上 清液稀释 ２ ０倍 ，用分光光度法在 ４ ５ ｍ下 以磷 酸缓冲 ６ｎ 液作 为参 比进行 吸光度 的测定。 ｓ一聚赖氨酸含量为横坐标 值 ， 为纵坐标值 ， Ａ 得到 ｓ一聚赖氨酸含量 的标准 曲线。 白色链霉菌 的发酵液 中 ８一聚赖氨酸产量的测定 ：培养 ７ ｈ ２
脂） ， 为去离子水 。 其余
１ ． 试验 方 法 ２
１ ． 子液 培养条件优化正交实验设计 方案 ． １种 ３ 选取 ｅ一聚赖氨酸高产菌株进行发 酵试验 ，以发酵液中 选取 ８一聚赖氨酸含量作为指标 ， 选取温度 、 培养时间和摇 床 转速三个因素 ， 过 （ 正交表进行培养优化实验 ， 通 ３） 以得 到 最佳种子成熟条 件。实验设计方案见表 １ 。
ｃ ｍｐ ｕ ｄｏ ｔｉ ｍ ｈ ｏ ｄ ｂ ａｎ ｈ ｇ — ｉｌ ｔ ｉ ｓｏ ￡－ ｏｙｙ ｉ ｅ Ａｆ ｒｔｓｉｇ ｔ ｅｅ ｍｉ ｅｉ ｓ ｅ ｓ ｆ ｕ ｄｏ ｔ ｚ ｔ ｎ ｏ ｒ ｃ ｓ ｏ ｏ ｎ ｆ ｉ ｕ ｃ ｌ ｒ ｅ ｔ ｏ ｔ ｉ ｉｈ ｙｅ ｄｓｒ ｎ ｆ ｐ ｌｌ ｓ ． ｔ ｔ ｄ ｔ ｒ ｎ ｅ ｄ ｉ ｐ ｉ ａ ｉ ｆ ｏ ｅ ｓ ｌ ｈ ｉ ｏ ａ ｎ ｅ ｅ ｎ ｏ ｆ ｏｆ ｌ ｍｉ ｏ ｐ
多数是从土壤 中分离 白色链霉菌 ， 发酵生产 ｓ 聚赖氨酸 ， 一 但
自然界 中的白色链霉菌产 ｅ一聚赖氨酸的能力 较低 ，一般产 量不超过 ｌ／ ，但 产物 中含有一定量的 Ｏ一聚赖氨酸 ，有毒 ｇ Ｌ ｔ 性， 必须 分离 出去方可在食 品中使用 ， 给工业生产带来很 大难
作者简介 ： 成 ， 陈 高级 工程 师， 事发 酵食品 的研 究。 从
陈
（ ． 江省轻工科学研究 院， １ 黑龙 黑龙江
成 韩建春 ，
１０ １ ；． ５００２ 东北农业大学 ， 黑龙江 哈尔滨 １０ ３ ） ５００
哈尔滨
摘
要： 究以弗吉尼亚链 霉菌为 出发 菌株 ， 研 经过硫 酸二 乙酯（ Ｅ ） 变和 紫外复合氯化锂诱 变， Ｄ Ｓ诱 获得 ８一聚
赖氨 酸高产 菌株 。 经过试验确定种子液优化 工艺参数 ： 温度 ３＇ 培养 时间 ４ｈ 摇床 转速 １０／ ｉ ； ０ Ｃ， ８， ５ ｒｍ ｎ 发酵液优 化参数 为： 接种量 ５ 发 酵时间 ６ ％， ６小时、 初始 ｐ ．。将该茵株 与酿酒酵母复合应用 于葡萄酒发酵， Ｈ６５ 降低杂茵 感染几率， 经过挑战加速 实验结果表 明 ， 萄酒的保质期大大延长。 葡 关键词 ： 弗吉尼 亚链霉菌 ； 变； 诱 ￡一聚赖氨酸 ； 葡萄酒； 发酵
高的特点 。２０ ０ ４年 ２月 ２ 日日本 Ｃ ｉ ｏ公司生产的聚 ４ ｈｓ ｓ 赖氨 酸这 种 天然 食 品添加 剂 作为 Ｇ Ａ Ｒ Ｓ物 质 通过 了美 国
等引起食物 中毒与腐败 的菌 有强烈 的抑制 作用 ， 同时还具有
一
Ｆ Ａ 认证 ， Ａ Ｄ Ｃ Ｓ登 记号为 ２ ２ ｌ ｏ — ，标 志着 ８一聚赖氨 ８ １— ４ ３
２ｍｉ，上 清液 即为待测 液 ，稀 释 ２ ０ ｎ ０倍 ，用分 光光度 法在
４ ５ ｍ下 以磷酸缓冲液作为参 比进行 吸光度 的测定 ，再根据 ６ｎ 标准 曲线得 出发酵液 中 ｅ一聚赖氨酸的含量。
１ ． 试验 设 计 方案 ３
７ ２００ ｇ Ｆ Ｓ ４・Ｈ２ ． ５ ／（ Ｈ ０ ．６ ／ ｅＯ ７ ０ ００ ｇ 固体 斜 面添加 ２ Ｌ， ４ Ｌ ％的 琼
中 图 分 类 号 ： Ｓ ６ ．； Ｓ６ ． ； ２ １４ Ｔ ２ ２６ Ｔ ２ １１ ＴＳ ６ ． ２ 文 献标 识 码 ： Ｂ
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第３ ８卷 第 ４期
２０ １１年 Ｏ 月 ７
酿
酒
Ｖ０ ． ８ Ｎ ． １ ． ｏ４ ３
Ｉ Ｌ Ｕ Ｒ ＭＡＫ ＮＧ Ｉ Ｏ Ｑ
Ｊｌ ｕｙ， ２ １ ０１
文 章 编 号 ：０ ２ ８ １ （０ １０ 一 Ｏ４ ０ １０ — １０ ２ １ ）４ Ｏ４ — ４
￡ 一聚赖氨酸生产 菌株 的诱 变及 其 在 葡萄 酒发酵 中的应 用 ★
ｗｉ ． ｎｅ
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０ 引言 ｅ一聚赖氨 酸是 上世 纪 ８ 年代 由 日本 首先发 现 的继 Ｏ Ｎｓ ｉｎ之后的一种新 型食品抑菌 剂 ， 有广谱 抑菌性 ， 于酵 ｉ 具 对 母属 的尖锐假丝酵母 菌 、 红酵母菌 、 法 产膜毕 氏酵母 、 玫瑰掷 孢酵母 ； 兰氏 阳性 菌 中的耐热脂 肪芽孢 杆菌 、 结芽孢 杆 革 凝
编号为 ： ＩＣ １ 。 ＣＣ １０ ３ １
１． ．２培养基配方 １ 可溶 性淀 粉 ５ ｇＬ （Ｈ ） Ｏ １ｇ ，酵母 提取物 ７５／ ０ ／ ，Ｎ ４Ｓ ４０／ ２ Ｌ ． Ｌ， ｇ
Ｋ ＨＰ ． ｇ Ｌ， ２ Ｏ４ ０ ８ ／ ＫＨ２ Ｏ４ ．６ ／ Ｍｇ ０ ‘ Ｈ２ ０ ７ ｇＬ， ｎ Ｏ４。 Ｐ １３ ｇＬ， Ｓ ４ ７ ０ ．５ ／ Ｚ Ｓ
的发酵液在 ８０ ｒ ｉ 离 心 ２ ｍ ｎ 取 ２ ０ ０／ ｎ ａ ｒ ０ ｉ， ｍＬ上清液 与 １ ｍｏ Ｌ ｍ ｌ ／ 甲基橙在 室温 下反应 ，剧烈振 荡 ３ ｍｉ，在 ５ ０ ｒ ｉ ０ ｎ ０ ０／ ｎ离心 ａ ｒ
１１１ ．． 试验 菌株
弗 吉尼亚链霉菌购买 于 中国工业微生 物菌种保藏 中心 ，
表 １ 正 交实验设计表
１． ． １菌种诱 变方法 ２
１ ． １单孢子悬液制备 ．１ ２．
取 出发菌 株弗 吉尼 亚链 霉 菌一环 接 于斜 面培 养基 上 ， ２ ％培养 ７ ６ ｄ待孢子成熟铺满斜面 ，用无菌生理盐水洗下 ， 在 装有玻璃珠的无 菌生理盐水 中振 消化后 又可变成单的赖氨酸而成
为人体营养的强化剂， 故聚赖氨酸作为食品防腐剂， 具有无毒
副作用 ， 安全性 高的特 点。聚赖氨酸 的热稳定性非常好 ， 其最
基金项 目 ： 龙江省普通 高等学校青年学术骨干支持计划项 目 黑
收 稿 日期 ：０ １ ０ — ４ ２ １— ４ ２
定的抗噬茵体的能力【 １ １ 。其化学组成是 由人体必需氨基酸
酸已被 国际标准所认可［ ｅ 聚赖氨酸抑菌谱广 ， ３ ～ １ 。 对革兰 氏 阳性菌 、 氏阴性菌 、 革兰 酵母菌 、 均有 一定 的抑菌作用 ， 霉菌 而 且其对一些耐热性 芽孢杆菌 和一些病毒也有抑制作用［ ４ １ 。
国内很 多科研机构对 ￡ ～聚赖氨酸也进行 深入 的研 究 ，
ＣＨＥＮ Ｃ ｅ ｇ。 ｈ ｎ ０ＨＡＮ ｉｎ ｃ ｕ ａ Ｊａ — ｈ ｎ￣
（． ｉｎｊ ｎ ｒｖ ｃ ｉ ｔＩｄ ｓｉ ｃ ｎｅ Ｒ ｓａ ｈ Ｉｓｔ ｅＨａ ｉ， ｉｎｊ ｎ １０ １ ，Ｃ ｉａ １ ｌ ｇａ ｇＰｏｉ ｅ Ｌｇ ｎ ｕｔａ Ｓ ｉ ｃ ｅｅｒ ｎｔｕ ， ｒ ｎ Ｈｅｏ ｇａｇ ５０ ０ ｈｎ ； Ｈｅｏ ｉ ｎ ｈ ｒｌ ｅ ｃ ｉｔ ｂ ｌ ｉ ２ ｏｔｅｓ Ａ ｒ ｕｔｒ ｎｖｒ ｔ， ｒ ｉ， ｉｎｊ ｎ ５ ０ ０ Ｃ ｉａ ． ｒ ａｔ ｇｉ ｌ ａ Ｕ ｉ ｓｙＨａ ｎ Ｈｅｏ ｇａｇ １０ ３ ，ｈｎ） Ｎ ｈ ｃ ｕｌ ｅｉ ｂ ｌ ｉ
”通讯作者 ： 韩建春 。
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第四期
陈 成， ： 等 ８一聚赖氨酸生产菌株 的诱变及其在葡萄酒发酵中的应用
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度， 同时产品生产成本很高 ， 故至今国内对 ｓ一聚赖氨酸尚未 规模化生产 ， 仅限于科学研究 阶段［ ５ １ 。本研究 以中国工业微生
配制 ０ ｍ ｌ ． ｍｏ Ｌ磷酸缓 冲液（Ｈ ． 和 １ ｍ ｌ ７ ／ ｐ ６９ ） ｍ ｏ Ｌ甲基橙 试 ／
菌、 枯草 芽孢 杆菌 ； 革兰 氏阴性菌 中的产气节杆 菌 、 大肠杆菌
适 ｐ ～， Ｈ５ ８ 也就是说其在 中性 和微 酸性 环境 中有较强 的抑菌 性。 ８ 一聚赖氨酸是 由人体 必需氨基酸 Ｌ 一赖氨酸构 成的多 肽 ，它经消化后又可变成单一的赖氨酸而成为人体营养的强 化剂 ， 聚赖氨酸作 为食 品防腐剂 ， 故 具有无毒副作 用 ， 安全性
剂。
物菌种保藏 中心保藏的弗吉尼亚链霉菌为 出发菌株 ， 物理 、 经 化学诱 变 ， 筛选 一株 ｅ 一聚赖 氨酸高产 突变 菌株 ， 能可达 产 ９ ２／ ， 物中没有 Ｏ一聚赖 氨酸 ， ． ｇＬ 产 ４ ｔ 大大降低 了生 产成本 ， 经 ５吨发 酵罐 中试 ， 吨培养 基生产 ８ 一聚赖氨酸回收量 可达 ９ ｇ ｋ 以上 ， 完全可 以规模化生产。