小鼠眼球取血.doc
小鼠摘除眼球采血及分离血清
小鼠摘除眼球采血及分离血清
一．器材离心管，弯头镊子，离心机，移液器
二．步骤
1. 摘除眼球采血
（1）左手拇、食指抓取小鼠双耳及颈后皮肤，小指固定尾部；（2）中指将小鼠左侧前肢轻压在胸骨心脏部位，无名指按在腹部，捻动拇指，轻压取血侧眼部皮肤，使眼球充血突出；（3）用弯头镊夹取眼球；（4）根据需要捻动拇指与食指的方向，使血液从眼眶内以不同速度垂直流入离心管；（5）同时用左手中指轻按小鼠心脏部位，以加快心脏泵血速度；（6）当血液流尽时，用脱臼法处死小鼠。
2. 分离血清（1）将离心管中的血置37℃温箱或水浴1小时，也可室温2小时；（2）再置4℃冰箱内3～4小时或过夜；（3）待血液凝固血块收缩后，4000rpm离心10分钟；（4）取上清于干净的离心管中，保存于-20℃，或加入防腐剂(0.01％硫柳汞或0.02％叠氮钠)，置4℃冰箱中保存备用。
三．注意： 1. 采血前，可给小鼠喂点水； 2. 摘眼球采血取血量能达0.8～1.2ml，但老年和疾病小鼠血量会降低；3. 采血场所有充足的光线；室温夏季保持在25～28℃，冬季，15～20℃为宜；4. 防止血液浸入眼部周围毛发，否则会造成污染和溶血； 5. 按压心脏时，用力一定要适度，若用力过度，一是会造成动物采血中途死亡，使采血不完全，二是有可能引起溶血现象发生，影响实验结果；6. 采血用的器材和试管必须保持清洁干燥；7. 采血时要防止小鼠挣扎，否则会损失比较多的血样；8. 血液凝固后不宜在4℃放置过久，否则会溶血。
实验小鼠眼眶静脉丛采血方法
实验小鼠眼眶静脉丛采血方法
优点：眼眶后静脉丛采血法方法简单，便于掌握。
血流较快，采血量多，能在较短时间内采约0.5mL血。
伤口较小，愈合较快。
成功率高，死亡率低。
缺点：不能避免组织液的混入，对于血样要求较高的研究应谨慎使用。
小鼠经气体麻醉后，左手拇指及食指压迫小鼠的颈部两侧，阻碍静脉回流，使眼球充分外突，提示眼眶后静脉丛充血。
也可以将小鼠放置在侧卧位，拇指与食指分别置于小鼠头顶和下颌，将皮肤向后及向下拉。
抓握时要避免对气管施压，否则可能会影响小鼠呼吸。
将毛细采血管（建议采用0.5*100mm规格的毛细管，在使用前折成小段，每段大约3-4cm）置于内侧眼角处，并且以与鼻翼平面成30-45度沿内眦插入内眼角，滑入眼球后方，轻轻向眼底方向刺入。
当感到有阻力时即轻轻旋转采血管的同时施加压力以切开静脉丛，血液将通过毛细作用流入采血管。
不能刺地过深，一般2-3mm即可。
采血结束后，立即松开手指对小鼠的压迫，使眼球复位，同时将采血器拔出。
可用干棉球压住眼眶，确保止血。
一般眼眶静脉丛采血量可以达到0.2-0.3ml。
大小鼠眼眶取血方法(附图)知识讲解
2014-5-5
交流提纲
实验环境 实验材料
具体操作
动物处理
大鼠 PK 取血
血样处理
.
取血容量 时间安排
问题讨论
动物处理
动物 体重要求 一般 不低于250g 给药前 禁食12-24h，给药前 提前 0.5-1.0h 按 0.5-1.0%（V/W）给水
实验期间 ，补充体液 ，目前常规为：取血后灌胃给予 等统计生理盐水/葡萄糖溶液。
5去管止血
Step5.取血完成，立即 除去颈部压力，将采血 器拔出，按压止血
Step 5 A 当得到所需的血量后，即 除去加于颈部的压力，同时，将 采血器拔出，以防止术后穿刺孔 出血。 B 尽量把眼睛周围的血渍搽 干净，避免结块影响下次取血。
6样品摇匀 Step6.血样管轻轻混匀， 防止凝血、溶血
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实验之后，外用消炎药涂布眼部
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容量 时间
取血 容量 时间 安排
选点一般原则
吸收相 3-4个点 吸收相 3-4个点 分布相 3-4个点
一般12h内取血 不超过动物质量 2.0% （v/w）
每次0.25- 0.5 mL
药物性质
预实验建立
给药途径
注射 一般 呈现 降低 趋势，给药后较短时间内采集的点数适当增加； 灌胃 存在Cmax-tmax，需通过考察tmax，根据一般原则，适当调整时间间隔。
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大鼠眼眶取血流程
2压迫颈部
Step2.紧握颈部，压 迫颈两侧，使眼突出， 眶后静脉丛充血
Step2 A 可用管试探性触碰眼球是否已经 突出； B 此时大鼠反抗挣扎最厉害，保证抓 紧的同时，不能太过，使其窒息死亡。
大小鼠眼眶取血方法(附图)
大鼠眼眶取血流程
1左手保定
Step1.将大鼠按压 在鼠笼上，拇+中 +食指固定住头部
Step 1 A 建议笼子内放置重物 防止摇晃； B 一定要带手套； C 开始必须牢牢固定住头部 头部乱 动，扎位置容易得偏离，且易被咬伤； D 可在此时将大鼠取血侧的胡须剪 掉，防止接触凝血。
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实验期间 ，补充体液 ，目前常规为：取血后灌胃给予 等统计生理盐水/葡萄糖溶液。
实验之后，外用消炎药涂布眼部
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容量 时间
取血 容量 时间 安排
选点一般原则
吸收相 3-4个点 吸收相 3-4个点 分布相 3-4个点
一般12h内取血 不超过动物质量 2.0% （v/w）
小鼠眼球取血技巧 根据需要捻动拇指与食指的方向,使血液从眼眶内以不同速度垂直流
小鼠眼球取血技巧小鼠摘除眼球采血及分离血清一．器材离心管，弯头镊子，离心机，移液器二．步骤1. 摘除眼球采血（1）左手拇、食指抓取小鼠双耳及颈后皮肤，小指固定尾部；（2）中指将小鼠左侧前肢轻压在胸骨心脏部位，无名指按在腹部，捻动拇指，轻压取血侧眼部皮肤，使眼球充血突出；（3）用弯头镊夹取眼球；（4）根据需要捻动拇指与食指的方向，使血液从眼眶内以不同速度垂直流入离心管；（5）同时用左手中指轻按小鼠心脏部位，以加快心脏泵血速度；（6）当血液流尽时，用脱臼法处死小鼠。
2. 分离血清（1）将离心管中的血置37℃温箱或水浴1小时，也可室温2小时；（2）再置4℃冰箱内3～4小时或过夜；（3）待血液凝固血块收缩后，4000rpm离心10分钟；（4）取上清于干净的离心管中，保存于-20℃，或加入防腐剂(0.01％硫柳汞或0.02％叠氮钠)，置4℃冰箱中保存备用。
三．注意：1. 采血前，可给小鼠喂点水；2. 摘眼球采血取血量能达0.8～1.2ml，但老年和疾病小鼠血量会降低；3. 采血场所有充足的光线；室温夏季保持在25～28℃，冬季，15～20℃为宜；4. 防止血液浸入眼部周围毛发，否则会造成污染和溶血；5. 按压心脏时，用力一定要适度，若用力过度，一是会造成动物采血中途死亡，使采血不完全，二是有可能引起溶血现象发生，影响实验结果；6. 采血用的器材和试管必须保持清洁干燥；7. 采血时要防止小鼠挣扎，否则会损失比较多的血样；8. 血液凝固后不宜在4℃放置过久，否则会溶血。
另附其他几种采血方法1）尾尖取血：当所需血量很少时采用本法。
固定动物并历出鼠尾，将鼠尾在45℃温水中浸泡数分钟，也可用二甲苯等化学药物涂擦，使局新血管扩张。
将鼠尾擦干，剪去尾尖，血自尾尖流出，让血液滴入盛器或直接用移液器吸取。
如需间隔一定时间，多次采取鼠尾尖部血液，每次采血时，将鼠尾剪去很小一段，取血后，先用棉球压迫止血并立即用6％液体火棉胶涂于尾巴伤口处，使伤口外结一层火棉胶薄膜，保护伤口。
老鼠眼眶取血
.眼眶静脉丛采血采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套)，应防止动物窒息。
当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，使眶后静脉丛充血。
右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(3～4cm)硬质玻璃滴管(毛细管内径0.5-1.0mm)，使采血器与鼠面成45℃的夹角，由眼内角刺入，针头斜面先向眼球，刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。
刺入浓度，小鼠约2～3mm，大鼠约4～5mm。
当感到有阻力时即停止推进，同时，将针退出约0.1-0.5mm，边退边抽。
若穿刺适当血液能自然流入毛细管中，当得到所需的血量后，即除去加于颈部的压力，同时，将采血器拔出，以防止术后穿刺孔出血。
若技术熟练，用本法短期内可重复采血均无多大困难。
左右两眼轮换更好。
体重20-25g 的小鼠每次可采血0.2-0.3ml；体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml，可适用于某些生物化学项目的检验。
大小鼠眼眶取血方法(附图)知识讲解
5去管止血
Step5.取血完成，立即 除去颈部压力，将采血 器拔出，按压止血
Step 5 A 当得到所需的血量后，即 除去加于颈部的压力，同时，将 采血器拔出，以防止术后穿刺孔 出血。 B 尽量把眼睛周围的血渍搽 干净，避免结块影响下次取血。
6样品摇匀 Step6.血样管轻轻混匀， 防止凝血、溶血
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C 如看见血液已经在毛细管中凝固 必须迅速 拔除毛细管，再搽干净眼睛，重新换管扎针；
D 等到出血后 将力道转移到大鼠的身体上 大鼠出现乱动的情况很大的一部分力是他的后 肢使出来的 保证她的后肢无法乱蹬就能很好的 保定大鼠，然后将中指和食指处解除一半的力 道，可以保证血液的顺畅
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大鼠眼眶取血流程
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大鼠眼眶取血流程
2压迫颈部
Step2.紧握颈部，压 迫颈两侧，使眼突出， 眶后静脉丛充血
Step2 A 可用管试探性触碰眼球是否已经 突出； B 此时大鼠反抗挣扎最厉害，保证抓 紧的同时，不能太过，使其窒息死亡。
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大鼠眼眶取血流程
3旋转刺入
Step3.眼内眦部， 45 ℃夹角，旋转刺 入，旋转退出。
Step3 A 针头斜面先向眼球，刺入后再转 一定角度使斜面对着眼眶后界； B 刺入深度，小鼠约2-3mm，大鼠 约4-5mm。当感到有阻力时即停止推 进，同时，管退出约0.1-0.5mm，边 退边旋转； C 不要使用管的尖锐锋利端插入， 易留玻璃碎片在眼内，造成持续伤害， 使得下次反抗增加； D 拿管的手要保持干净，带血渍的 手指不要接触管的两端，易造成凝血， 可用醇水擦洗。
大小鼠眼眶取血方法(附图)
• 介绍 • 眼眶取血方法 • 眼眶取血的优点与局限性 • 眼眶取血的实际应用 • 结论
01
介绍
眼眶取血的目的
01
眼眶取血是一种常用的动物实验 取血方法，主要用于获取鼠类的 血液样本。
02
通过眼眶取血可以检测和分析动 物血液中的各种成分，用于评估 药物效果、生理和病理状态等研 究。
对大小鼠眼眶取血的总结
眼眶取血是一种方便、快捷、对 动物损伤较小的采血方法，适用
于大小鼠等小型哺乳动物。
在进行眼眶取血时，应掌握正确 的操作技巧和注意事项，以确保
采血过程的安全和有效性。
眼眶取血可用于多种实验研究领 域，如药理学、毒理学、生理学
等，具有广泛的应用价值。
对未来研究的建议
进一步研究眼眶取血方法的最佳操作流程和注意 事项，以提高采血效率和动物福利。
优化实验设计 根据实验需求合理设计实验方案， 尽量减少对动物的损伤和实验误 差。
提高操作技巧 为提高取血的准确性和动物舒适 度，操作者应熟练掌握操作技巧， 尽量减少对动物的损伤和实验误 差。
注意动物凝血状况 对于凝血功能异常的动物，应避 免使用眼眶取血方法，以防止出 血不止或形成血肿。
04
眼眶取血的实际应用
适用于需要反复或连 续采血的实验场景。
02
眼眶取血方法
大小鼠眼眶取血步骤
固定动物
将大小鼠固定在装 置中，确保其舒适 且稳定。
采血
使用采血针从大小 鼠的眼眶静脉丛中 采集血液。
准备工具
准备大小鼠固定装 置、酒精棉球、采 血针等工具。
消毒
用酒精棉球对大小 鼠眼部周围进行消 毒。
注意事项
采血过程中要轻柔， 避免对动物造成伤 害。
大小鼠眼眶取血方法(附图)课件
在实际操作中，需要注意压迫的力度和时间，以 免对动物造成不必要的损伤或影响实验结果。
采血后需要对动物进行适当的护理和观察，以确 保其健康和生存。
结论应用
眼眶取血方法适用于需要反复采血的 实验，如药物筛选、毒理学研究等。
需要注意的是，眼眶取血方法不适用 于需要大量采血的实验，如血液生理 研究等。
由于该方法对动物损伤小，因此在需 要长时间观察的实验中具有优势。
尽量快速地完成采血过程，以减少动物的不适感 。
观察动物状态
在采血过程中，要密切观察动物的状态，如出现 异常反应应及时停止操作。
操作注意事项
01
02
03
04
消毒措施
在操作前应确保所有工具和材 料都已经消毒，以减少感染的
风险。
动物福利
在采血过程中，要确保动物的 福利，避免对其造成不必要的
பைடு நூலகம்痛苦和应激。
避免损伤其他组织
眼眶取血针
专用的眼眶取血针，确保取血 准确、快速、方便。
试管
用于存放采集的血液样本，根 据需要选择不同规格的试管。
实验台和实验器具
实验台应保持清洁，准备好其 他必要的实验器具，如手术刀 、棉球等。
实验环境
清洁度
实验环境应保持清洁，定期进行消毒，确保无菌操 作。
温度和湿度
控制实验环境的温度和湿度，保持适宜的温湿度， 以减少对实验结果的影响。
光照
实验环境的光照应适度，避免过强或过弱的光照对 实验结果产生影响。
03
方法
操作步骤
准备工具与材料
准备大小鼠固定装置、消毒棉球、 眼科剪、眼科镊、试管、抗凝剂等 。
固定动物
将大小鼠置于固定装置中，确保其 舒适且稳定。
小鼠取血方法
小鼠取血方法主要有三类方法：1、少量取血：鼠尾采血法一一固定动物并露出鼠尾，将尾部侵入45-50度温水中数分钟，使静脉充血，擦干，再用酒精棉球擦拭消毒。
剪掉尾尖约0∙2-0.3cm。
拭去第一滴血。
然后用毛细管定量吸取尾血。
采血完毕用棉球压迫止血2、中等量取血：眼眶静脉丛采血一一左手拇指及食指紧紧握住小鼠颈部，压迫颈部两侧使眶后静脉丛充血，但用力要恰当，防止动物窒息死亡。
右手持玻璃毛细管从右眼或左眼内眦部以45度角刺入，刺入深度为2-3mm。
若遇阻力稍后调整角度后再刺入，如穿刺恰当，血液能自然流入毛细管内。
得到血厚，即除去颈部压力，拔出毛细管，用干棉球压迫止血3、大量采血：断头采血一一用于动物实验结束后。
左手握住小鼠，右手持剪刀，快速剪掉头颈部，倒立动物让血液滴入容器。
注意防止断毛落入•卜鼠利大鼠剪尾取IilL祛；将清嘔鼠袈入探顒色的布袁中，粽鼠身塩疾・用酒精涂擦或用锻水浸趟怏机管扩张，剪斷尾光已堆静肚血脚可就出，川丁轻轻地从厘根绷冋尾次挤崔，可取到一定量的血敲U UlIl 后，川柿球斥迫止血・也可采刖交誓切割壓静脉方法収血’用一糠利刀片在尾光部切破一段尾靜J⅛∙ ⅛J⅛ 血即可流曲毎⅛∏Γ⅛0.3-0. S nl・⅛-⅛lfr^⅛⅛J⅛.三根毘清關町替换册害IL ⅛J≡⅛∣5J⅛⅛C切⅛L 由丁鼠血易瓶屈要仝血时，应事先将抗旅刘直丁和IiL管中”如用ιliL⅛D∣J⅛⅛⅛HS・⅛±j½i⅛⅛⅛i⅛.恨琲同抄怵妝取血法：左于持孤脚忻与中捋抓仕现讯皮抓疲壻按托头都向下，阴瞬静膩冋流,便腹球后静肮丛范机，眼球外突.右于持俠肝素浒浸池过的FI制吸血器，从内毗部刺入，沿内卜谨咂⅛向眼球后折谜4~5血.旋转吸Mtt头，切开静脉M t IfiL液H初斑入吸Ill憎筒.轮轻拥吸M管〔防止负乐压1⅛^⅛A⅛抽血电圉恭人拔出吸Ifiith放松手床力.4⅞∣f∣ι⅛J∏⅛⅛f?止-也可用转制的披璃取血管悄长7〜10 Ui IJ前刑憧成毛MU管，内⅛0- 1 -L 5皿1 UIl l后站管悴为0«T “哮要吋可在屈S I剌？L重覆収血・it法也适用諱鼠和家兔。
大小鼠眼眶取血方法附图演示文稿
取血时必须提前检查管的质量，标号分组， 适当多备。
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动物处理
动物 体重要求 一般 不低于250g 给药前 禁食12-24h，给药前 提前 0.5-1.0h 按 0.5-1.0%（V/W）给水
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大鼠眼眶取血流程
4固定采血
Step4.固定身体，压住 后肢，放松手指，调整 毛细管，流畅出血。
Step 4
A 一般血流速度快，证明插破了眼眶动脉， 如果血流速度慢，证明要调整毛细管的位置， 血液都流到组织中了，没顺毛细管流出来；
B 出血过程中如遇到出血不畅 不用着急拔 毛细管 可以调整一下毛细管的扎入位置 或深或 浅的挑正一下 血会重新流出；
大小鼠眼眶取血方法附图演示文稿
交流提纲
实验环境 实验材料
具体操作
动物处理
大鼠 PK 取血
血样处理
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取血容量 时间安排
问题讨论
环境 材料
A 通风台面 B 毛细管 C 抗凝EP管 D 计时工具
长时间操作，透气通风 宽敞台面，便于多组多步骤同时操作
小鼠眼球取血
====Word行业资料分享--可编辑版本--双击可删====小鼠摘除眼球采血及分离血清一．器材离心管，弯头镊子，离心机，移液器，剪毛剪，乙醚。
二．步骤1.取血前准备在相对封闭的空间内用棉花蘸取乙醚，对小鼠进行麻醉。
用剪毛剪剪去胡子，防止发生溶血反应。
2 摘除眼球采血（1）左手拇、食指抓取小鼠双耳及颈后皮肤，小指固定尾部；（2）中指将小鼠左侧前肢轻压在胸骨心脏部位，无名指按在腹部，捻动拇指，轻压取血侧眼部皮肤，使眼球充血突出；（3）用弯头镊夹取眼球；（4）根据需要捻动拇指与食指的方向，使血液从眼眶内以不同速度垂直流入离心管；（5）同时用左手中指轻按小鼠心脏部位，以加快心脏泵血速度；（6）当血液流尽时，用脱臼法处死小鼠。
3. 分离血清（1）将离心管中的血置37℃温箱或水浴1小时，也可室温2小时；（2）再置4℃冰箱内3～4小时或过夜；（3）待血液凝固血块收缩后，4000rpm离心10分钟；（4）取上清于干净的离心管中，保存于-20℃，或加入防腐剂(0.01％硫柳汞或0.02％叠氮钠)，置4℃冰箱中保存备用。
三．注意：1. 采血前，可给小鼠喂点水；2. 摘眼球采血取血量能达0.8～1.2ml，但老年和疾病小鼠血量会降低；3. 采血场所有充足的光线；室温夏季保持在25～28℃，冬季，15～20℃为宜；4. 防止血液浸入眼部周围毛发，否则会造成污染和溶血；5. 按压心脏时，用力一定要适度，若用力过度，一是会造成动物采血中途死亡，使采血不完全，二是有可能引起溶血现象发生，影响实验结果；6. 采血用的器材和试管必须保持清洁干燥；7. 采血时要防止小鼠挣扎，否则会损失比较多的血样；8. 血液凝固后不宜在4℃放置过久，否则会溶血。
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大小鼠眼眶取血方法(附图)课件
实验之后，外用消炎药涂布眼部
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注射 一般 呈现 降低 趋势，给药后较短时间内采集的点数适当增加； 灌胃 存在Cmax-tmax，需通过考察tmax，根据一般原则，适当调整时间间隔。
取血 容量 时间 安排
选点一般原则
预实验建立
药物性质
给药途径
分布相 3-4个点
吸收相 3-4个点
吸收相 3-4个点
一般12h内取血 不超过动物质量 2.0% （v/w）
每次0.25- 0.5 mL
容量 时间
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6样品摇匀
1.将大鼠按压在鼠笼上，拇+中+食指固定住头部
3.右手持毛细管从眼内眦部，与鼠面成45 ℃夹角，旋转刺入
2.紧握颈部，压迫颈两侧，使眼突出，眶后静脉丛充血
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血浆/全血（V/V） 前五点低于40%--后续60%
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5去管止血
Step5.取血完成，立即除去颈部压力，将采血器拔出，按压止血
Step 5 A 当得到所需的血量后，即除去加于颈部的压力，同时，将采血器拔出，以防止术后穿刺孔出血。 B 尽量把眼睛周围的血渍搽干净，避免结块影响下次取血。
6样品摇匀
Step6.血样管轻轻混匀，防止凝血、溶血
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大鼠眼眶取血流程
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小白鼠眼球采血实训报告
一、实训目的1. 掌握小白鼠眼球采血的方法和技巧。
2. 了解小白鼠眼球采血的适应症和禁忌症。
3. 培养无菌操作意识和实验技能。
二、实训时间2021年X月X日三、实训地点实验室四、实训材料1. 小白鼠2. 无菌操作台3. 10号金属针头4. 生理盐水5. 无菌棉球6. 采血管7. 麻醉剂（可选）五、实训步骤1. 准备工作（1）将小白鼠放置在实验台上，用棉球轻轻擦拭眼部，确保眼部清洁。
（2）打开无菌操作台，准备好实验器材。
2. 固定小白鼠（1）用一只手轻轻抓住小白鼠的颈部皮肤，使其头部向上抬起。
（2）用另一只手轻轻向下压迫颈两侧，使眼球充血。
3. 采血操作（1）用10号金属针头垂直插入内眦，向眼底方向转动，以便切开静脉丛。
（2）血液便会连续不断地滴入采血管。
4. 采血完毕（1）拔出针头，用无菌棉球压迫止血。
（2）将小白鼠放回笼子，观察其状态。
5. 无菌操作（1）在实验过程中，始终保持无菌操作，避免细菌污染。
（2）实验完毕后，对实验台、器材进行清洁和消毒。
六、实训结果1. 采血成功，血液质量良好。
2. 小白鼠状态稳定，无不良反应。
七、实训讨论1. 眼球采血是一种常用的动物采血方法，具有操作简单、采血量较大、成功率高等优点。
2. 在采血过程中，应注意以下几点：（1）确保小白鼠眼部清洁，避免细菌污染。
（2）固定小白鼠时，力度适中，避免造成伤害。
（3）采血时，保持针头垂直，避免损伤眼部组织。
（4）采血完毕后，及时止血，避免出血过多。
3. 眼球采血的禁忌症：（1）眼部有炎症或感染的小白鼠。
（2）有严重心脏病或血液病的小白鼠。
4. 在实训过程中，发现以下问题：（1）部分小白鼠在采血过程中出现挣扎，影响采血效果。
（2）个别小白鼠采血后出现眼部出血现象。
八、实训总结本次小白鼠眼球采血实训，使我掌握了小白鼠眼球采血的方法和技巧，提高了无菌操作意识和实验技能。
在实训过程中，我深刻体会到以下几点：1. 眼球采血是一种实用的动物采血方法，具有广泛的应用前景。
大小鼠眼眶取血方法(附图)
4、All that you do, do with your might; things done by halves are never done right. ----R.H. Stoddard, American poet做一切事都应尽力而为，半途而废永远不行6.17.20216.17.202110:5110:5110:51:1910:51:19
大小鼠眼眶取血方法交流（附 图）
2014-5-5
交流提纲
实验环境 实验材料
具体操作
动物ห้องสมุดไป่ตู้理
大鼠 PK 取血
血样处理
.
取血容量 时间安排
问题讨论
环境 材料
A 通风台面 B 毛细管 C 抗凝EP管 D 计时工具
长时间操作，透气通风 宽敞台面，便于多组多步骤同时操作
0.9mm × 100mm，看个人习惯使用， 经常一管三断，30mm/管，弃去中间段。
13、He who seize the right moment, is the right man.谁把握机遇，谁就心想事成 。2021/6/282021/6/282021/6/282021/6/286/28/2021
14、谁要是自己还没有发展培养和教 育好， 他就不 能发展 培养和 教育别 人。2021年6月 28日星 期一2021/6/282021/6/282021/6/28
5.取血完成，立即除 去颈部压力，将采血 器拔出，按压止血。
1左手保定 2压迫颈部 3旋转刺入 4固定采血 5去管止血 6样品摇匀
2.紧握颈部，压迫颈 两侧，使眼突出，眶 后静脉丛充血
4.固定身体，压住后 肢，放松手指，调整 毛细管，流畅出血。
6血样管轻轻混匀， 防止凝血、溶血。
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小鼠摘除眼球采血及分离血清
一．器材
离心管，弯头镊子，离心机，移液器，剪毛剪，乙醚。
二．步骤
1.取血前准备
在相对封闭的空间内用棉花蘸取乙醚，对小鼠进行麻醉。
用剪毛剪剪去胡子，防止发生溶血反应。
2 摘除眼球采血
（1）左手拇、食指抓取小鼠双耳及颈后皮肤，小指固定尾部；
（2）中指将小鼠左侧前肢轻压在胸骨心脏部位，无名指按在腹部，捻动拇指，轻压取血侧眼部皮肤，使眼球充血突出；
（3）用弯头镊夹取眼球；
（4）根据需要捻动拇指与食指的方向，使血液从眼眶内以不同速度垂直流入离心管；（5）同时用左手中指轻按小鼠心脏部位，以加快心脏泵血速度；
（6）当血液流尽时，用脱臼法处死小鼠。
3. 分离血清
（1）将离心管中的血置37℃温箱或水浴1小时，也可室温2小时；
（2）再置4℃冰箱内3～4小时或过夜；
（3）待血液凝固血块收缩后，4000rpm离心10分钟；
（4）取上清于干净的离心管中，保存于-20℃，或加入防腐剂(0.01％硫柳汞或0.02％叠氮钠)，置4℃冰箱中保存备用。
三．注意：
1. 采血前，可给小鼠喂点水；
2. 摘眼球采血取血量能达0.8～1.2ml，但老年和疾病小鼠血量会降低；
3. 采血场所有充足的光线；室温夏季保持在25～28℃，冬季，15～20℃为宜；
4. 防止血液浸入眼部周围毛发，否则会造成污染和溶血；
5. 按压心脏时，用力一定要适度，若用力过度，一是会造成动物采血中途死亡，使采血不完全，二是有可能引起溶血现象发生，影响实验结果；
6. 采血用的器材和试管必须保持清洁干燥；
7. 采血时要防止小鼠挣扎，否则会损失比较多的血样；
8. 血液凝固后不宜在4℃放置过久，否则会溶血。