青海刚察绵羊几种病原的检测

反应 在 ９ ６ 孔 Ｖ型 微量 有 机玻
流产 ， 病 死率很 高 。２ ０ １ ３ 年１ Ｏ 月， 我们对青 海省 刚 察 县 泉 吉 乡 和伊 克 乌 兰 乡 的 ２ ８ ２只 藏 系 绵 羊 进 行 了布鲁 菌病 、 衣原 体病 、 弓形虫 病及 绵羊 传染 性胸 膜 肺 炎 的 血 清 学 调 查 ， 报告如下 。
原２ ５ Ｌ， 将反 应板置 于微量振 荡器上 １ ～２ ｍ ｉ ｎ ， 盖上 一块 与 反应 板 大小 相等 的玻 璃板 以防落人 灰尘 ， 置３ ７℃温 箱 作 用 ２ ｈ 后 判 定 结 果 。 当 阳性 对照各孔 均发 生凝集 ， 阴性 对 照 各 孔 均 未 发 生 凝
性血清 （ 生 产批号 ： ２ ０ １ ３ ０ ３ １ ３， ２ ０ １ ３ ０ ８ ０ ９ ） ， 以及 羊
原体 Ｄ Ｎ Ａ的 提 取 采 用 Ｄ Ｎ Ａ 提 取 试 剂 盒 进 行 （ Ｑ Ｉ Ａ ａ ｍ ｐ Ｄ Ｎ Ａ Ｍ ｉ ｎ ｉ Ｋ ｉ ｔ ） ， 按 照说 明 书 操 作 ， 衣 原 体
１ ． １ 被 检血 清
青 海 省 刚 察 县 泉 吉 乡 和 伊 克 乌
兰乡 ２ ８ ２份 被 检 血 清 样 品 ， 均 空腹 从 颈 静 脉 采 集 ， 采集后摆成斜 面 ， 自然 凝 固后 放 入 ４℃冰 箱 约 ５ ｈ 左右 ， 然后置 ３ ７℃温 箱 ２ ｈ， 收集血清 ， 一 ２ ０℃冷 冻
外 膜 蛋 白基 因 的 Ｐ Ｃ Ｒ扩 增 按 照 文 献 ［ ２ ］ 中介 绍 的
方法进行操作 。
传染性胸膜 肺炎冻 干抗 原 、 阴、 阳性 血清 （ 生产批 号： ２ ０ １ ３ ０ ２ ２ ５ ） ， 均 购 自中 国农 业 科 学 院 兰 州 兽 医
研 究所 。
１ ， ４ ． ３ 弓形 虫 病
集 时进行判 定 ， 被检 血清滴 度不低 于 １ ： １ ６ （ 第 二
孔） 为 阳性 ， 被 检 血 清滴 度 低 于 １ ： ４ （ 第 一孔 ） 为 阴 性， 被 检血 清滴度 在 １ ： ４ ～１ ： １ ６之 间 为 可 疑 。 衣
保存 。 １ ． ２ 诊 断试 剂 虎红 平 板 凝 集抗 原 、 阳性 血清 （ 生 产批 号 ： ２ ０ １ ３ ０ ３ １ ５ ） ， 购 自青 岛易 邦生 物 工程 有 限公 司 ； 衣 原体 、 弓形虫 Ｉ Ｈ Ａ冻 干抗 原 阴 、 阳
１ ４ ． １ 布鲁菌病 在 洁净无菌玻璃板上依次滴加 ３ ０ Ｌ布 鲁 菌 病 虎 红 拼 版 凝 集 抗 原 ， 并设定 阴 、 阳
液７ ５ Ｌ 及相应 的样 品 、 阴性 、 阳性血清 ２ ５ Ｌ ， 稀 释 至第 ３ 孔 。之 后 ， 每孔 加诊 断抗原 ２ ５ Ｌ， 加 完 后将 反应板 置 于微量振 荡器上 １ ～２ ｍ ｉ ｎ ， 盖上 一
块 与反 应 板 大 小 相 等 的玻 璃 板 以 防 落 入 灰 尘 ， 置 ２ ２℃～ ３ ７℃下 作 用 ２ ～３ ｈ 后， 进 行 结 果 判 定 。在 阳性 对 照 血 清 滴 度 不 低 于 １ ： １ ０ ２ ４ ， 阴 性 对 照 血 清
１ 材 料 与 方 法
璃反应板 上进行 ， 并设 阴 、 阳性 对 照 孔 ， 每孔加稀
释液 ７ ５ Ｌ及 相 应 的 样 品 、 阴 性 及 阳 性 血清２ ５
Ｉ ｘ Ｌ ， 依 次 稀 释 至第 三 孔 ， 第 三 孔 稀 释后 弃 去 ２ ５ Ｉ ｘ Ｌ ， 即每孔 剩余 液体为 ７ ５ Ｌ ， 之后 每孔加诊 断抗
文献 标 志码 ： Ｂ 来自文章 编 号 ： ０ ５ ２ ９ — ６ ０ ０ ５ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ４ — ０ ０ ４ ６ — ０ ３
布鲁菌病是 由布鲁 菌引起 的人 畜共患 的一种 急性 或慢性传 染病 ， 临床 上 以母 畜流产和公 畜睾
丸炎 为主要 特征 ； 羊 衣 原 体 病 是 一 种 由鹦 鹉 热 衣 原体 引起 的以流产 、 肺炎 、 关节 炎 、 结 膜 炎 等 多 临
性对 照 ， 依次加入 ３ ０ Ｌ 待 检血清及 阴、 阳性对照 血清 ， 混 匀后 ４ ｍ ｉ ｎ观 察 结 果 。 出 现 肉 眼 可 见 凝
集块 、 液 体 基 本 透 明者 判 为 阳性 ， 否 则 判 为 阴 性 。细 菌 Ｄ Ｎ Ａ的 提 取 采 用 Ｄ Ｎ Ａ 提 取 试 剂 盒 （ Ｑ Ｉ Ａ ａ ｍｐ Ｄ Ｎ Ａ Ｍｉ ｎ ｉ Ｋ ｉ ｔ ）， 按 照说 明书操 作 ， 血 清 学 阳性 样 品 的 Ｐ Ｃ Ｒ检 测 按 照 文 献 ［ １ 】 中 介 绍 的方 法进 行 扩 增 和 结果 判 定 。
４ ６
中国兽 医杂志 ２ ０ １ ５ 年 （ 第５ １ 卷） 第４ 期
青 海 刚 察 绵 羊 几 种 病 原 的 检 测
黄 荣 ， 李 秀萍 ， 王光华 ， 马利 青
（ 青海 省畜 牧兽 医科学 院 ， 青海 西 宁 ８ １ ０ ０ １ ６ ）
、
中 图分 类号 ： ￥ ８ ５ ２ ． ６ ５
反应 在 ９ ６孔 ｖ型 微 量 有 机 玻
璃反应 板上进 行并设 阴阳性对 照孔 ， 每 孔 加 稀 释
１ － ３ 仪器
９ ６孔 “ Ｖ” 型有机玻 璃微量 反应板 ， 微
量加 样器 ， 微 量振 荡器 ， 离 心机 、 Ｐ Ｃ Ｒ仪 、 凝 胶 成 像仪、 电泳 仪 。
１ ． ４ 检 测 方 法
床症 状为特 征的传染病 ； 弓形虫病 是 由专性 细胞 内 寄 生 的原 虫 一 龚 地 弓 形 虫 引 起 的 一 种 人 兽 共 患 原 生动物性疾 病 ； 绵 羊 传 染 性 胸 膜 肺 炎 是 由支 原
体 引 起 的一 种 高 度 接 触 性 传 染 病 ， 也 可 引起 母 羊
１ ． ４ ． ２ 衣 原体 病