龙胆氨醇提取液对小鼠中枢抑制及组织中ace含量影响

2019年12
月
龙胆氨醇提取液对小鼠中枢抑制
及组织中ACE 含量影响
李楠
谷政阳
宁佳楠步一平
孙艳平*
（西安医学院药学院，陕西西安710021）
龙胆为龙胆科植物龙胆（Gentiana scabra Bge ）、条叶龙胆（G.manshurica Kitag ）、三花龙胆（G.triflora Pal1）或滇龙胆（G.rigescens Franch ）的干燥根和根茎。

前3种习称“龙胆”，后一种习称“坚龙胆”。

性寒、味苦、归肝、胆经；能清热燥湿、泻肝胆火，用于湿热黄疸、阴部湿痒、带下、肝火目赤、耳鸣耳聋、肋痛口苦、惊风抽搐等[1]。

现代药理研究表明龙胆具有保肝、利胆、健胃、抗炎、抗病毒、抗惊厥和镇静催眠、抗糖尿病等药理作用[2-5]。

龙胆中主要化学成分是环烯醚萜类化合物，其中龙胆苦苷是龙胆的主要有效成分。

龙胆苦苷在体内经代谢后的活性产物为龙胆碱(又名秦艽甲素)，龙胆碱也可由龙胆苦苷与氨水所得反应产物[6-7]。

肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAAS ）是人体调节血压的重要的内分泌系统，在调节水、电解质平衡以及血容量、血管张力和血压方面具有重要作用。

肾素作为蛋白水解酶，可水解血中的a2球蛋白即血管紧张素原成为血管紧张素I ，在血管紧张素转换酶(angiotensi converting enzyme,ACE ）的作用下，转化成血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ),Ang Ⅱ是已知最强的缩血管活性物质之一。

正常情况下，肾素、血管紧张素和醛固酮三者处于动态平衡之中，相互反馈和制约[8-9]。

本实验研究通过肝经中药龙胆草中龙胆苦苷的转化成分龙胆碱对ACE 途径抑制活性研究。

研究龙胆碱是否对ACE 的影响而实现降压效果有一定的临床意义，可以扩展其药用范围，同时对龙胆草的开发与利用有一定的应用推广价值。

1实验部分
1.1实验材料、试剂
坚龙胆饮片：购于药材市场经由生药教研室冯永辉教授鉴
定为坚龙胆。

昆明种小鼠：购于成都达硕实验动物有限公司。

实验用试剂：95%乙醇，浓氨水。

氨醇混合液（95%乙醇：10%氨水=50:7），血管紧张素转化酶（ACE ）试剂盒。

1.2实验用仪器、设备
8通道动物自主活动仪，电子天平，水浴锅，恒温培育箱。

2实验方法
2.1龙胆氨醇提取物的制备
称量龙胆草饮片200g 洗净，加入2倍量氨醇混合液浸泡过
夜，过滤除渣后，70℃水浴加热，将小滤液浓缩至无醇味，并调节pH 6.8～7.3，4℃保存备用。

2.2实验动物分组、给药剂量
加蒸馏水将龙胆氨醇提取物分别配置成相应浓度药剂供小鼠灌胃使用。

30只小鼠适应性喂养一周后，苦味酸标记，随机分为空白组（0.9%生理盐水），低剂量给药组（龙胆氨醇提取物8mg/kg ，）高剂量给药组（龙胆氨醇提取物16mg/kg ），灌胃给药。

2.3小鼠自主活动行为测定
按3.2方法动物给药15天后，用动物自主活动仪测试动物15h 自主活动情况，测定期间建立绝对安静并有光源的环境，记录自主活动数据，并进行统计分析，评价小鼠的自主活动情况。

2.4小鼠协同抑制作用测定
按3.2方法动物给药18天后，给予15%乌拉坦液（剂量为0.45mg/kg ）进行中枢抑制实验，自小鼠催眠后，以翻正反射消失为标准记录时间段，以此睡眠时间作为中枢抑制时间。

记录数据，并进行统计分析，评价药物对小鼠的协同抑制效果。

2.5小鼠二甲苯耳肿胀法测定药物的抗炎效果
按3.2方法动物给药20天后，每组动物小鼠分别涂抹二甲苯至右耳，左耳涂抹等剂量的生理盐水，1h 后，处死动物，将左右耳相同部位打孔并用分析天平称重，计算肿胀度。

记录数据，并进行统计分析，评价药物对小鼠抗炎效果。

2.6小鼠血浆、肝脏及肺脏中ACE 含量
按3.2方法动物给药20天后，15%乌拉坦液麻醉动物后，摘眼球取血EDTA-K2抗凝，室温放置20min 后，3000r/min 离心10min ，取上清血浆备用。

处死动物取小鼠肝脏、肺脏称重，将组强加2倍量生理盐水匀浆，3000r/min 离心10min ，取上清液备用。

3实验结果
表1龙胆氨醇提取物对小鼠镇静、抗炎作用的影响(x ˉ±s )组别
（只）空白组（7）高剂量组(10）低剂量组（9）
自主活动数（次）3840±25603900±14646871±4280
睡眠时间
（m in ）84±4750±2948±30*
耳肿胀度（m g ）0.91±0.551.40±1.251.10±0.87*
注:*与空白组比较，P ＜0.05
表2龙胆氨醇提取物对小鼠组织中ACE 含量的测定(x ˉ±s )组别
（只数）空白组（7）
高剂量组10）低剂量组（9）血浆中浓度（ng/
m L ）427.55±85.67
375.64±63.69392.49±52.13
肝脏中含量（ng/g ）171.83±37.43228.16±38.49219.73±102.02*
肺脏中含量（ng/g ）615.55±124.54644.46±99.73797.79±244.46*
注:*与空白组比较，P ＜0.05
23
2019年12
月
结果统计分析：
（1）小鼠自主活动次数各组与空白组相比，P>0.05，无显著性差别。

（2）龙胆氨醇液对小鼠中枢抑制协同作用结果，给药低剂量与空白组相比，P ＜0.05，差别有统计学意义。

（3）龙胆氨醇液对小鼠肝组织和肺组织中ACE 含量影响作用结果，给药低剂量与空白组相比，P ＜0.05，差别均有统计学意义。

而对血浆中的含量，各组与空白组织比较均无统计学差异。

4结语
（1）通过龙胆氨醇提取物对小鼠自主活动、龙胆氨醇提取物对小鼠乌拉坦翻正反射作用评价，实验结果表明龙胆碱氨醇提取物有一定的镇静作用。

（2）龙胆氨醇提取物对小鼠二甲苯耳肿胀法测抗炎作用，表明龙胆氨醇提取物对二甲苯致炎有抗炎作用。

（3）龙胆氨醇提取物对小鼠血浆、肝脏、肺脏中ACE 浓度进行测定，并通过标准曲线计算出ACE 浓度。

通过空白组与高、低剂量组对比发现血浆和肝脏中的ACE 含量，给药后其含量水平降低，但在肺组织中ACE 水平在给药后呈现升高的趋势。

参考文献：
[1]国家药典委员会.中国药典(一部)[S].北京:中国医药科技出版社,2015:89.
[2]陈长勋,刘占文,孙峥嵘,等.龙胆苦苷抗炎药理作用研究[J].中草药,2003,34(9):814.[3]刘学伟,刘树民,柳长凤,等.龙胆碱镇静催眠作用及对小
鼠脑内5-HT 、GABA 含量的影响[J].时珍国医国药,2012,23(2):
394-396.
[4]刘占文,陈长勋,金若敏,等.龙胆苦苷的保肝作用研究[J].中草药,2002,33(1):47-49.
[5]穆祯强,于洋,龙胆属秦艽组植物的化学成分和药理作用研究进展[J].中国中药杂志,2009,34(16):2012-2015.
[6]石垚,王琳琳,余河水.高速逆流色谱法分离纯化龙胆碱
性乙醇提取物中的龙胆碱[J].天津中医药大学学报,2016,35(1):44-47.
[7]刘学伟,刘天宇,刘树民,等.正交试验优选龙胆中龙胆碱提取工艺[J].中国药房,2009,20(33):2582-2583.
[8]胡慧,张平安.高血压患者肾功能及RAAS 系统对其尿酸
水平影响[J].职业与健康,2018,34(05):642-645,649.
[9]Gruen RL,Elliott JH,Nolan ML,et al.Sustainability science :
an integrated approach for health-programme planning[J].Lancet,2008,372(9649):1579-1589.
作者简介：李楠（1996-），女，陕西人，本科，汉，研究方向：中药
药效物质基础。

通讯作者：孙艳平。

基金项目：西安医学院大学生创新基金项目（2016DXS1-21）；西安医学院药学省级重点学科建设项目（2016YXXK06），陕西省教育厅专项基金（17JK0651）
金属材料化学成分分析
方法的初步认知和趋势
研究
刘丽（巴音郭楞职业技术学院，新疆库尔勒841000）
摘
要：金属材料是重工业以及一些重大建设项目的重要材
料，在很多行业中均有重要应用。

根据不同的使用需求，金属材料的化学成分也存在较大差异。

研究发现，金属材料的化学成分决定了其商业用途，要想提高金属材料的应用效果，就必须严格分析其化学成分。

文章就金属材料化学成分分析方法的初步认知和趋势研究展开论述，分析探究金属材料化学成分的重要作用，对比传统与现代金属材料化学成分分析方法，探究其发展趋势。

关键词：金属材料；化学成分；分析方法
随着我国经济的持续稳定增长，各行各业都有了良好的发展形势，对金属材料的应用需求也越来越多。

金属材料被用于多个领域，如汽车制造行业、建筑行业、电气及自动化行业，发挥了重要作用。

金属材料的化学成分不同，用途也不同，本文重点探究金属材料化学成分分析方法。

1分析探究金属材料化学成分的重要作用
金属材料的用途由其化学成分决定，对于金属材料来讲，化学成分不同，分子排布规则不同，内部结构也存在较大差异。

金属材料的化学材料还影响金属的外形，对其应用起决定性作用。

分析探究金属材料化学成分有3个重要作用，第一，研究金属材料的化学成分能够更好的分析金属材料的性质，结合各个行业对金属材料的使用需求选择合适的金属材料，能够提高金属材料的应用价值。

第二，分析金属材料的化学成分能够更好的探究金属材料的加工条件，有利于提高金属材料的质量。

第三，分析金属材料的化学成分能够完善金属材料的加工工艺，对于金属材料来说，最重要的加工工艺为热处理，在热处理过程中，能够全面金属材料的性能，提高金属材料的质量。

2传统金属材料化学成分分析方法
2.1分光光度法
分光光度法是常用的金属材料化学成分分析方法，利用金属材料中所含的不同化学成分在分光光度计中的波长不同的特征分析金属的化学成分。

当然，这种方法不能直接分析金属材料，需要将金属材料转换成含有金属材料的溶液中，利用分光光度计在溶液中对不同化学成分的反射波长不同判断化学成分，从而得到金属材料的化学成分分析表。

这种方法在应用过程中，还要根据各种化学成分对光的敏感性将光线种类进行归纳，分析在不同种类光线下发生反射的化学成分，如红外线、紫外线等，最后将测试结果以光谱曲线的形式表示出来。

2.2滴定分析方法
24。