注射用三七素小鼠急性毒性试验

注射用三七素小鼠急性毒性试验
摘要】目的通过一次给予小鼠一定剂量的注射用三七素，观察小鼠的急性毒性
反应。

方法将注射用三七素配制成适当浓度，观察小鼠静脉注射的急性毒性。

结
果注射用三七素小鼠急性毒性试验剂量设定为1000、900、810、729、656mg/kg
和生理盐水组。

1000mg/kg组雄、雌鼠各死亡9只，死亡率为9/10。

900mg/kg组雄鼠死亡3只，死亡率为3/10，雌鼠死亡5只，死亡率为5/10。

810mg/kg组雄、雌鼠各死亡2只，死亡率为2/10。

729mg/kg组雄、雌鼠各死亡1只，死亡率为
1/10。

656mg/kg组和0.9%氯化钠注射液组雄、雌鼠均无死亡。

结论注射用三七
素雄性小鼠静脉给药半数致死量（LD50）为903.1 mg/kg，95%可信区间为850.5-959.0mg/kg。

注射用三七素雌性小鼠LD50为882.4mg/kg，95%可信区间为835.3 -932.3mg/kg。

【关键词】注射用三七素急性毒性动物实验
【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）22-0140-01
Acute toxicity study of dencichine for injection
Sun wu, Zhou bo, Liu jing
JiangSu Center for Safety Evaluation of Drugs, Jiangsu Institute of MateriaMedica Nanjing，210009 China
【Abstract】Objective To evaluate the acute toxicity of dencichine for injection. Methods Dencichine for injection was dissolved in saline.Results The mouse were treated with 1000, 900, 810, 729 or 656mg/kg of the compound once, while the
control group received only saline. The death rate in 1000mg/kg group was 90%; in
900 mg/kg group of male mice was 30% and of female mice was 50%, in 810mg/kg group was 20% and in 729mg/kg group was 10%. There was no death mice in 656
mg/kg group and the control group.
Conclusion The dose of LD50 of dencichine for injection in male mice was 903.1mg/kg, and a 95% confidence range of its LD50 was 850.5-959.0mg/kg. The dose of LD50 in female mice was 882.4mg/kg, and the 95% confidence range was 835.3-932.3mg/kg.
【Key words】dencichine for injection acute toxicity animal tests
三七素，化学名为β-草酰基－L－α,β-二氨基丙酸。

实验证明其可明显缩短多
种动物模型的出血时间，促进血液凝固，降低模型动物毛细血管通透性。

临床上
可用于需减少流血或止血性的各种医疗情况下，如外科、内科、妇产科、眼科、
口腔科等临床科室的出血或出血性疾病的预防和治疗[1]。

本试验在GLP条件下，
按照相关技术指导原则要求，对注射用三七素的急性毒性进行研究，为临床用药
提供依据。

1 材料与方法
1.1 药物与试剂
注射用三七素（50.64mg/瓶），批号20091101，江苏省药物研究所提供；白
色冻干状物或粉末。

生理盐水，南京小营药业集团有限公司提供。

1.2 动物
SPF级ICR小鼠120只，雌雄各半，5周龄，体重18-22g；生产许可证号：SCXK(苏) 2008-0010由江苏省科技厅签发，由南通大学实验动物中心提供。

检疫3
天后用于试验。

1.3 方法
1.3.1 预试验
按照相关指导原则[2]，先进行预试验，给药前用生理盐水溶解，配制成不同
浓度的溶液，根据小鼠体重给药，给药容积为0.5ml/20g体重。

设置4个剂量组，分别为937.5、703.1、527.3和395.5mg/kg；每个剂量组6只，雌雄各半。

给药
过程中937.5mg/kg组动物有呼吸急促、抽搐、俯卧等毒性反应。

703.1mg/kg组
雄鼠有呼吸急促、俯卧等反应而雌鼠除个别外无明显毒性反应。

527.3和
395.5mg/kg 组动物无毒性反应。

937.5mg/kg组动物死亡率为6/6，703.1mg/kg组
死亡率为1/6，剩余两组小鼠无死亡情况。

1.3.2 正式试验
1.3.3.1 试验剂量和分组
根据预试验结果，参考相关指导原则[2,3]，注射用三七素单次静脉给药毒性
试验设定剂量为1000、900、810、729和656mg/kg。

每组20只，雌雄各半，给
药容积为0.5ml/20g。

设对照组，给予生理盐水。

1.3.2 临床观察及LD50计算
给药后连续观察4小时，观察期间每天上午进行临床症状和死亡情况观察，
具体内容包括：动物死亡、精神状态、行为活动、皮肤、眼、耳、鼻、口腔、外
生殖器、肛门、四肢、粪便及呼吸等。

根据所观察到的毒性反应出现时间、严重程度、持续时间以及大体解剖中肉
眼可见的病变和组织病理学检查结果分析判断出现的各种反应可能涉及的组织、
器官或系统。

采用Bliss法计算LD50。

2 结果和分析
给药过程中1000mg/kg、900mg/kg、810mg/kg组雄、雌鼠均有呼吸急促、抽搐、角弓反张等毒性反应。

729mg/kg组雄鼠有呼吸急促、俯卧、活动减少等反应而雌鼠除个别外无明显毒性反应。

1000mg/kg组雄、雌鼠各死亡9只，死亡率为
9/10。

900mg/kg组雄鼠死亡3只，死亡率为3/10，雌鼠死亡5只，死亡率为
5/10。

810mg/kg组雄、雌鼠各死亡2只，死亡率为2/10。

729mg/kg组雄、雌鼠
各死亡1只，死亡率为1/10。

656mg/kg组和对照组均无死亡。

雄鼠的LD50为903.1mg/kg，95%可信区间为850.5-959.0mg/kg。

雌鼠的LD50为882.4mg/kg，95%可信区间为835.3-932.3mg/kg。

试验结束时存活小鼠经解剖，肉眼未见明显异常
变化，具体各组动物死亡情况见表2.1-2.2。

3 结果和讨论
本次注射用三七素急性毒性结果约为人临床等效剂量的600倍（人体重按照70kg计算）。

符合药物安全评价的标准，说明该药可供临床使用。

本次试验严格按照毒理学的标准进行测定，结果真实可靠。

通过此次研究，为今后进行注射用三七素的长期毒性实验、遗传实验等
试验设计提供剂量选择依据和有关毒性信息，丰富了注射用三七素的毒理学资料，对于研究
和评价其毒性具有重要意义。

参考文献
[1] Van Moorhem M, Lambein F, Leybaert L. Unraveling the mechanism of β-N-oxalyl-α,β-diaminopro pionic acid (β-ODAP) induced excitotoxicity and oxidative stress, relevance for neurolathyrism prevention. Food Chem Toxicol. 2011;49:550-5.
[2] 国家食品药品监督管理局,化学药急性毒性试验技术指导原则.[Z]. 2005-03.
[3] 袁伯俊,廖明阳,李波.药物毒理学实验方法与技术[M].北京:化学工业出版社. 2007, 250-261.。