绿色木霉产纤维素酶降解各种废纸效果研究
耐酸耐盐青霉和木霉产纤维素酶的研究的开题报告
耐酸耐盐青霉和木霉产纤维素酶的研究的开题报告一、研究背景纤维素是植物细胞壁的主要成分，是天然的、丰富的可再生资源，具有广泛的应用前景，如生物燃料、食品工业、纺织品、造纸等领域。
然而，纤维素的结构特殊，难以被生物酶降解，是目前环保工业中的一个难点。
因此，研究纤维素酶的产生和作用机制对纤维素降解技术的发展具有重要的意义。
目前已知有许多微生物能够产生纤维素酶，其中包括青霉和木霉。
与其他微生物相比，青霉和木霉具有耐酸、耐盐等特性，适用于广泛的环境条件。
因此，研究耐酸耐盐青霉和木霉产纤维素酶的具体情况，对于研发高效、低成本的纤维素降解技术具有极大的意义。
二、研究目的1. 探究耐酸耐盐青霉和木霉对纤维素的降解能力。
2. 研究耐酸耐盐青霉和木霉产纤维素酶的菌株特性、菌株筛选、酶活性测定等问题。
3. 探究耐酸耐盐青霉和木霉的纤维素降解机制。
三、研究内容1. 菌株的筛选及鉴定本研究将从环境样品中筛选出一系列耐酸耐盐青霉和木霉的菌株，通过形态学、生理生化特征等方法进行初步鉴定。
2. 酶活性测定通过发酵培养、离子交换层析、凝胶过滤层析等方法纯化纤维素酶，并测定酶活，确定最适酶活条件，并进行酶动力学研究。
3. 纤维素降解的研究通过质谱、核磁共振等手段，研究纤维素降解的机制，进一步了解纤维素的结构以及纤维素分解产物的组成。
四、研究意义1. 为纤维素降解技术的发展提供理论基础和技术支持。
2. 为研发高效、低成本的生物燃料、食品工业等领域的新产品提供参考。
3. 为开展生物多样性研究提供新的视角和方向。
五、研究方法1. 样品的采集及处理本研究将采集自然界中的样品，经霉菌分离纯化、快速扩增等步骤进行预处理。
2. 菌株的鉴定及筛选通过革兰氏染色、生理生化特性等方法对菌株进行初步鉴定，然后通过陶瓷稀释法、平板媒体筛选、发酵培养等方法进行菌株筛选。
3. 酶活性测定通过离子交换层析、凝胶过滤层析等方法纯化纤维素酶，并测定酶活，确定最适酶活条件，并进行酶动力学研究。
绿色木霉F-UV264产纤维素酶酶学性质研究
１ 材料与 方法 １ １ 材料 。
结果 的 比较采用 相 对 酶 活形 式 表 示 ， 以某 一 条 件 下
的酶 活为 １ ０ ， 他条 件 下 的结 果 与之 相 比即得 ０％ 其 各 自的相对 酶 活值 。
１４ 纤维 素酶酶 学性 质 的研 究 ． １４ １ 纤维 素 酶 反 应 的 最适 ｐ 。． Ｈ值 在 酶 活 测定
ｍｏ Ｌｐ 值 ４ ６的柠 檬 酸 一柠檬 酸 钠 缓 冲 液 稀释 ｌ Ｈ ／ ． 后 ， 应 体 系 分 别 置 于 不 同温 度 （０、０、０ ６ 、０ 反 ３ ４ ５ 、０ ７
ｏ 的水浴 中反应 ， Ｃ） 然后 测定 酶活 。
１４３ 纤 维 素酶 的 ｐ 值稳 定 性 ． Ｈ
酶 加 于不 同 ｐ Ｈ
４ ６～ ， ５ ６ 此时能保持 ９ ％以上 的酶 活 ，Ｈ值为 ５０时相对 酶活最高 ； 宜温度在 ４ ５ ０ ｐ ． 适 ０～ ０℃之间 ， ５ 在 ０℃时相 对 酶活达到最大值 ， 纤维素酶有较好 的热稳定性 ， ５ 在 ５℃保温 １ｈ后 ， 剩余酶活力为 ７ ． ％。 ４１
关 键 词 ： 色木 霉 ；纤 维 素 酶 ； 学 性 质 ； Ｈ值 ； 度 绿 酶 ｐ 温 中 图分 类 号 ： ９３ Ｑ ３ 文 献 标 识 码 ：Ａ 文章 编 号 ： ０ —１０ （０７ ０ １ ２ ３ ２ ２０ ）６—０ ２ ０ ０ ２ ６— ２
纤维 素酶作 为 一种 新 型 畜禽 饲 料 添 加剂 ， 提 可 高粗 饲料 的消化 率和 利用率 ， 明显 改善 饲料 品质 ， 降
值 的缓冲液 中，０℃保温 ２ｈ测定剩余酶活力。 ５ ，
１４４ 纤 维 素 酶 的 热 稳 定 性 酶 液 用 ０ １ｍ ＬＬ ． ． ｏ／ ｐ Ｈ值 ４ ６的柠 檬 酸 一柠檬 酸钠 缓 冲液稀 释后 ， ． 分别 在 不 同的温度 （０、０、０、０ ７ Ｃ） 保 温 １ｈ 每 ３ ４ ５ ６ 、０ｏ 下 ，
纤维素酶法废纸脱墨机理的初步研究
的情 况下 ，废 纸 的再生 利用 显得 尤其 重要 。废 纸 的 再 生 过程 中 ，油墨 是主 要 的杂质 ，油 墨 的残存 量直 接影 响着 脱墨 浆 的质量 ，并 决定 了纸 浆 的用途 。因
纤维 素 酶 ： 由 丹 麦 诺 维 信 公 司 提 供 ，型 号 ５ １ ０ ６ ４ ，经分 析其 组 分 主 要 为纤 维 素 酶 ，其 次 为 半 纤维 素 酶 ，其 活性 如表 １所示 。
于被 洗 涤去 除。
关键 词 ：纤 维素酶 ；废 纸 ；脱 墨 ；机 理 ；研 究
中 图分类 号 ：Ｘ ６ ７ ３—９ ６ ５ ５（ ２ ０ １ ３ ）０ ４— ０ ０ ８ ３— ０ ４
废纸 再生 具有 节省 原生 纤维 资 源 、减 少环 境污 染 、简化工 艺 流程 以及 降低 能耗 等 优点 Ｈ 。国 内 许 多造 纸 企 业 正 逐 步提 高废 纸 在 造 纸 原 料 中 的 比
１ ． ３ 实验 方法
表面活性剂以及漂 白剂 。因此上述的脱墨过程存在 以下 缺点 ：脱 墨废 水 中含有 大量 的化 学药 品 ，容易 造成 环境 污染 、加 重水 污 染治理 的 成本 ；大量 化学
品 的使用 增加 了脱 墨制 浆 的成本 ；碱 性化 学 品 的加 入容 易造 成纸 浆 “ 碱性发黑” 或 “ 碱 性 发 黄 ” 的
环境 科 学导刊
ｈ ｔ ｔ ｐ ：／ ／ ｈ ｊ ｋ ｘ ｄ ｋ ． ｙ ｉ ｅ ｓ ． ｏ ｒ ｇ ． ｅ ｎ ２ ０ １ ３ ，３ ２（ ４ ）
Ｃ Ｎ ５ ３—１ ２ ０ ５ ／ Ｘ Ｉ Ｓ Ｓ Ｎ １ ６ ７ ３— ９ ６ ５ ５
纤 维 素 酶 法废 纸 脱 墨机 理 的初 步研 究
王 帅 ，刁玲 玲 。郝 海龙
绿色木霉WL 0422高产纤维素酶的研究
维素酶菌株 ，由江南大学医学系分子生物学研究室筛选
获得和保藏 。
１ ． ２原料 和 试 剂
和 Ｂ 葡萄糖苷酶（ Ｃ３ ．．１等 ３种酶组成…。它在饲 一 Ｅ ． １ ） ２ ２
料、 纺织 、 食品 、ห้องสมุดไป่ตู้酿造和造纸等工业中有广泛 的应用潜力 ，
饲料和纺织用酶是 当今国内外研究和开发的热点 。含纤
１３培 养基 及 培 养 方法 ．
理或抛光 ， 能改善织物和服饰的手感 、 外观和舒适性ｂ。 ］
国产纤维素酶的发酵酶活力低 ， 生产成本高 ， 限制 了
酶的广泛使用。作者从丝状真菌中筛选获得一株 高产酸 性纤维素酶的绿色木霉 ＷＬ０ ２ ４ ２菌株。为挖掘该菌株产
１． ．１斜面培 养基 ３
反 应 ３ ｍｉ。 以 每 ｈ水 解 滤纸 产 生 １Ｉ ｌ 原 糖 （ 葡 ０ ｎ ｍｏ 还 ￣ 以
萄糖计 ） 所需酶量定义为 １ Ｆ Ａ单位 （ ） 个 Ｐ Ｉ 。 Ｕ
２结果 与 讨 论
２１ 形瓶 固态发 酵 工 艺 条 件试 验 ．锥
２１１培 养 温度 和 时间 ．．
Ｃ Ｃ Ｉ ｇ十 曲 ） １８ ６ １９ ４ １ ８ ０ ２０ ５ １８ ５ １５ ５ Ｍ Ａ（Ｕ／ ３ ０ ９ ６ ８ ７
（ 以葡萄糖计） 所需酶量定义为 １ Ｃ Ａ单位（ 。 个 ＭＣ Ｉ Ｕ）
１４３滤 纸 酶 活 力 （ Ｐ ） 定 ．． ＦＡ 测
０１ Ｌ适 当稀释酶液 ， ．ｍ 加至含一张 １Ｘ６ｅ ｍ新华滤 纸片的 ２ ＬＮ ２Ｐ ． ｍ ａＨ Ｏ一柠檬酸缓冲液（Ｈ ４ ） ５ ℃ ４ ｐ ． 中，０ ６
１３３麸 曲种 子培 养 基 －＿
２ ０ Ｌ三角瓶 装 ＆ ｇ ５ｍ ０ 基料 （ 麸皮 ： 草粉 ＝ ．ｇ１ ） 稻 ６ ： ４ 五ｇ，
绿色木霉-M1固态发酵产纤维素酶条件研究
现 代农 业科技
２１ 年第 １ ０１ ２期
农 业基础 科学
绿 色木 霉 一 １固态 发酵 产 纤 维素 酶条 件 研 究 Ｍ
李 杰 王景 胜 肖连冬 程 爽
（ 阳理 工学 院 生化 学 院 ， 南 南 阳 ４ ３０ 天 冠 集 团 ） 南 河 ７ ０ ４；
摘 要 为 了用廉价 基质 生产 纤维素 酶 ， 对绿 色木 霉一 Ｍ１利 用稻 草和麸 皮 固 态发 酵 生产 纤 维素酶 的条 件进 行 了研 究 。 结果表 明 ， 固态发 酵产 纤 维素酶 的较 优条 件 为培 养 温度 ２ ８℃ ， 液 比 为 ｌ：５ 氮 源浓 度 １ ％ ， 草 和麸 皮 比例 为 ７３ 在 此 条件 下 ， 种 １％液 态种 子进 行 料 ：．， ！ ． 稻 ５ ：； 接 Ｏ 培养 ， 酶活 力在 Ｏ ６ ～ ０ｈ逐渐 上升 ，０ ７ 慢 下降 ，２ｈ岳酶 活 重新上 升 ，０ 活达 最大值 。 ６ ～ ２ｈ缓 ７ １８ｈ酶 关 键 词 稻 草 秸 秆 ； 态发 酵 ； 维 素 酶 固 纤 中图分 类号 Ｔ ９ ９ Ｑ ２ 文 献标 识码 Ａ 文章 编号 １０ — ７ ９ ２ １ ）２ ０ ４ — ３ ０ ７ ５ ３ （０ １ １ — ０ ９ ０
ａｔｒ１ ８ｈ． ｆ ｅ ０
１Hale Waihona Puke １ Ｋｅ ｒ ｓ ｒｃ ｔａ ；ｏ ｉ—ｓａｅｆｒ ｎ ａｉｎ； ｅｌｌｓ ｙｗｏ ｄ ｉ ｅｓｒｗ ｓ ｌｄ ｔｔ ｍｅ ｔｔｏ ｃ ｌ ａ ｅ ｅ ｕ
近年纤维素降解菌株筛选研究进展
第29卷第2期2021年6月纤维素科学与技术Journal of Cellulose Science and TechnologyV ol. 29 No. 2Jun. 2021文章编号：1004-8405(2021)02-0068-10 DOI: 10.16561/ki.xws.2021.02.07近年纤维素降解菌株筛选研究进展宫秀杰，钱春荣，于洋，郝玉波，李梁，姜宇博，吕国一（黑龙江省农业科学院耕作栽培研究所，黑龙江哈尔滨150086）摘要：简述了近年来纤维素降解菌株筛选的研究进展，目前筛选到纤维素降解菌的真菌主要有木霉属Trichoderma、青霉属Penicillium和曲霉属Aspergillus，细菌主要是芽孢杆菌属Bacillus、放线菌主要是链霉菌属Streptomyces。
重点介绍了筛选到的纤维素降解菌的菌株名称、菌株种属鉴定、菌株筛选来源、菌株酶活测定条件和纤维素降解效果等。
同时，对近年来已报道筛选的纤维素降解菌株的产酶活特性及降解效果进行比较。
期望对高效纤维素降解菌株筛选提供借鉴。
关键词：纤维素降解；菌株筛选；研究进展中图分类号：Q939.9 文献标识码：A纤维素是世界上最丰富的可再生资源、可被持续利用的绿色有机质资源，在高等植物、细菌、动物和海藻等生物中广泛存在，每年总量有几百亿吨，具有巨大的经济开发价值，就我国玉米秸秆纤维素而言，每年资源高达1.32亿t（纤维素按32%计算）[1]。
然而，（1）纤维素由D-吡喃葡萄糖环彼此以β-1,4-糖苷键以C1椅式构象联结而成的线形高分子化合物；（2）纤维素由结晶相和非结晶相交错组成，其中结晶相纤维素中大量的羟基基团，产生数目庞大的氢键，这些氢键构成巨大的氢键网格，直接导致了致密的晶体结构的形成[2]；（3）纤维素聚合度非常大，约2 000到15 000以上，当大量游离羟基形成氢键时，氢键力非常大，它们使纤维素片之间的距离保持在很小的范围。
绿色木霉H7产纤维素酶条件的研究
王 小涵 周 晶 王仁君 沙未 来 （ 曲阜 师 范大 学生命科 学 学院 ２ ３ ６ ） ７ １ ５
摘 要 ：采 用 摇 床 液 体 发 酵 试 验 ． 对 绿
பைடு நூலகம்
用 价 值 闭。纤 维 素 酶 的 生 产 有 固态 发
酵 和 液 体 发 酵 两 种 方 法 ： 固态 发 酵 劳 动 强 度 大 ，生 产 率 低 ，易 污 染 ， 而 液 体 发 酵 具 有 不 易 污 染 ，培 养 条 件 易 控 制 ，生 产 效 率 高 等 特 点 ， 因 而 适 合 大 规 模 工 业 化 生 产 。 但 目前 发 酵 液 酶
作 为 工 业 酶 解 发 酵 的 原 料 ，纤 维 素 酶 活 力 不 高 而 导 致 酶 用 量 过 大 是 限 制 其
优 良菌 种 性 能 、获 得 高 产 酶 量 ， 对 畜
牧 业 有 很 大 意 义 。 本 文 以 玉 米 秸 秆 为
主 要 原 料 ，研 究 了 产 纤 维 素 酶 菌 株 一
为 粗酶 液 。 １ － 酶 的 活性 测 定 －３ ３
的糖 化 有 酸 解 和 酶 解 法 等 。 酶 解 法 由 于 能 耗 低 ，反 应 条 件 温 和 以及 不 使 用 有 毒 和 腐 蚀 性 的 化 学 物 质 而 倍 受 青 睐 １ 然 而 至 今 未 能 应 用 木 质 纤 维 素 ３ １ 。
ｌ ０ ｍ ，ｐ ５ — ． ，碱 处 理 过 的 玉 米 Ｏ０ ｌ Ｈ ． ６ ５ ０ 秸 秆粉 １ ｇ ０。
活 性 偏 低 ，导 致 液 体 发 酵 生 产 的 纤 维
素 酶 产 品 价 格 偏 高 ． 限 制 了 其 在 工 业 中 的 应 用 。 因 此 ，选 育 一 株 适 合 液 体
绿色木霉固态发酵产纤维素酶活力的研究_王仪明
草地畜牧业绿色木霉固态发酵产纤维素酶 活力的研究 王仪明1,张宗舟1,2,蔺海明1,孙小弟3,雷艳芳1,王东明4(1.甘肃农业大学农学院,甘肃兰州730070;2.天水师范学院生命科学与化学学院,甘肃天水741001;3.天水师范学院工学院,甘肃天水741000;4.甘肃省科学院自动化研究所,甘肃兰州730000)摘要:以麦秆和麸皮为主要原料,通过正交试验和单因素试验优化绿色木霉T richderma v iride固态发酵产纤维素酶的最佳工艺条件,并研究绿色木霉对小麦秸秆纤维素降解的影响,为绿色木霉降解小麦秸秆纤维素提供最佳条件,进而提高小麦秸秆的利用率。
结果表明,不同条件下绿色木霉产纤维素酶活力存在显著差异(P<0.05),最佳培养基为:氮源为(N H4)2SO4,pH值5.5,含水量为200%,麦秆∶麸皮质量比为4∶1;最佳发酵条件为:培养时间为96h、温度35℃、初始pH值6.0、含氮量0.4%、接种量15%,培养方式为半密闭;发酵后小麦秸秆中中性洗涤纤维(N DF)、酸性洗涤纤维(AD F)、纤维素含量和半纤维素含量比发酵前分别下降5.22%、6.88%、4.73%和4.16%,木质素含量无明显变化。
关键词:绿色木霉;发酶条件;纤维素酶活;小麦秸秆;纤维素中图分类号:T Q925.9 文献标识码:A 文章编号:1001-0629(2009)05-0123-05 纤维素类物质是世界上最丰富的可再生资源[1]。
纤维素材料可转化为具有商业价值的乙醇、乙酸、单细胞蛋白等纤维素的产品[2-3]。
纤维素的生物转化近些年受到了极大的重视,大规模纤维素生物转化工艺的发展,将有效解决食品和动物饲料不足的问题[4-6]。
利用微生物所产生的纤维素酶将秸秆转化为营养价值较高的单细胞蛋白饲料倍受人们的青睐[7]。
纤维素酶作为一种高活性生物催化剂使其成为研究新型蛋白饲料开发与利用的重要内容[7-8]。
纤维素酶不是一个单种酶,而是参与纤维素降解的多组分酶的总称,一个完整的纤维素酶系,通常由作用方式不同而能相互协同催化水解纤维素的3类酶组成:内切葡聚糖酶(EG)、外切葡聚糖酶(EX)和β-葡萄糖苷酶(BG),在分解纤维素时,任何一种酶都不能单独裂解纤维素,只有3种酶共同存在并协同作用才能完成水解过程[9]。
绿色木霉产纤维素酶的研究进展
ｕ 添加 ０ ％的 Ｔ ｅ ｒ０ ０ ％ ０ ％的洗衣粉可分 ； ． １ ｗ ｅ８ 和 ． ￣． ｒ ５ ７
别为 Ｆ Ａ，］ ａｅ Ｃ Ｐ ＩＣ ｓ 和 ＭＣ的酶活提高 ２３ 、 ． － ．倍 ２ ８倍、 ２ ＿ ３倍和 ３１ 、３ ．倍 ． 、３０倍；培养基含水量 、培养 ７倍 ． 温 度、培养起始 ｐ 分别为 ２０ Ｈ ５ ％，２ 和 ｐ ． ， ８Ｃ Ｈ３ ０ ５时 产酶活力最高 。 张德强等人在采用绿色木霉 ＡＳ． ３ 固体发酵 ３３ ２ ０ 产 酶研 究的 同时 ， 进行液体发酵 生产纤 维素酶 的试验 。 研 究 了碳源 ，氮源 ，培养基起始 ｐ 值 ，接种 量，摇 Ｈ 床 转速对绿色木霉产酶活力 的影 响，结果表 明： 以爆 破 后的甘蔗渣为碳源 时，滤纸酶 活和酶 活力分 别高达 ５３Ｉ＿Ｉ和 ４８ＩｍＩ ． 『 ， ． 『 ， 同氮源产酶 活力大 小顺序 ７／ ｍ ９ ／ ：不
始ｐ Ｈ值对绿色木霉产酶活力的影响。 研究结果表明： 碳源 以麸蔗 比为 ３２时， Ｐ ，￣Ｃ ｓ 和 Ｃ ： ＦＡ ａｅ ＭＣ酶活力
均最高 ，１ 曲分别高达 １８ ３ ．Ｕ和 １１． ｇ干 ３．Ｕ，１４６ ２ ６３１ Ｕ；以硫 ｅ酶活 力较高 ，１ 曲分别 高达 １２ ｇ干 ２．Ｕ，１７．Ｕ和 １９３ ５ ４０ ０ １＿
维普资讯
《 现代食品科技》
Ｍｏ ｅｎＦ ｏ ｃｅ ｃ ｎ ｅ ｈ ｏｏ ｙ ｄ ｒ ｏ ｄＳ ｉｎ ｅ ｄＴ ｃｎ ｌｇ ａ
Ｖ １ ３ ．（ ９ ） ｏ． ５总 ５ ２ Ｎｏ
绿色木霉产纤维素酶 的研 究进展
李文佳 ，林 亲录 ’
（ 中南林业科技大学食品科学与工程学院，湖南 长沙 ４００） １ ． １０４ （ 湖南农业大学食品科技 与技术学院， ２ ． 湖南 长沙 ４０ ２） １ １８
绿色木霉产纤维素酶菌种诱变
2结果与讨论
2.1硫酸二乙酯（DES）诱变：
DES诱变原理：DES是一种烷化剂，烷化剂主要是通过烷化基团使DNA分子上的碱基及磷酸部分被烷化，DNA复制时导致碱基配对错误而引起突变。其诱变效应很复杂，能够诱发DNA多种突变，且形成各种突变类型。
图1 DES不同处理时间下的致死率
Fig. 1Colonial lethal rate of differentDEStreatment times
Key words :cellulase ; microwave;mutation; cellulose activity
前言
纤维素是地球上最丰富、最廉价的可再生资源。植物每年通过光合作用,可以产生15.5×1010t的纤维素类物质,其中纤维素、半纤维素占1/2以上[1],但其中只有极少部分为人们所利用。随着石油和煤炭资源的日渐枯竭,纤维素的降解和利用越来越受到人们的重视。利用纤维素酶降解纤维素的优点在于特异性高,反应条件温和,环境污染小[2]。纤维素酶可广泛应用于食品、化工、造纸、麻纺、环境保护等领域[3]，随着纤维素酶应用领域的不断扩大，纤维素酶的需求量不断提升，同时对酶的质量要求也越来越高，而酶活力是酶质量的关键因素，因此提高菌种活力势在必行[4]。本文通过硫酸二乙脂和微波诱变绿色木霉菌种的方法提高菌株产酶活力。
由图1可以看出，用DES处理40min时致死率达到81%，处理50min时致死率达到95%，为减少筛选的工作量，本实验选择50min作为诱变剂量进行反复诱变。诱变筛选得到10株透明圈较大的菌株进行复筛，测FPA酶活力，酶活测定方法按QB2583-2003(以下同)，结果见表1：
纤维素降解菌的筛选及相互作用分析
Ａｂ ｔａ ｔ Ｔ ｒｅ ｓｅ ｉｓｏ ｕ ｇ ｉ ｉｈ ｃｌ ａｅ ａｔｖｔ ｒ ｅｅ ｔｄ ｆ ｍ ｏｌｌｎ ｉｈ ｉ ｅ ｓｉｋ ｎ ｅｏｉｔ ｎａ ｄｍｕ ｏ ｔｅＯ ｔ ｔ ｔｅ ｓｒ ｃ ｈ ｅ ｐ ｃｅ ｆｆｎ ｉｗｔ ｈｇ ｅｌ ｓ ｃｉｉ ｗｅｅｓｌｃｅ ｏ ｓｉ ｏ ｇｒｃ ｎ ｔ ｔｃ ｓａ ｄ ｄ ｆｌ ｉ ｄｆ ｍ Ｕｌ ｈ ｈ ｕｌ ｙ ｒ ｈ ａｏ ｎ ｒ ｈ ｅｏ ｆ
圈直径与菌 落直径 比值 大的菌株进行 初筛 。 １ ． 菌 株 的 复筛 。将 初 筛 的 菌 株接 种 于 液 体 发 酵 培 养 ．２ ２
基 ，８℃ ．０ ｎｎ振荡 培养 ９ ， ０ ｎｎ离心 １ ｉ， ２ ２０ｒ ｆ ／ｉ ６ｈ ３ ０ｒ ｆ ０ ／ｉ ０ｍ ｎ 收
集 上清液测 Ｃ Ｃｓ酶 活 ， 出纤 维素酶 高产菌株 。 Ｍａ ｅ 选
Ｃ ｃ ｃ ａｅｄｇａａｉ ｆｃｅｃ ． ｎ ｙｎ ｅ ａ ｌ ｉ ｒ ｓ ｅｒｄｔ ｎｅ ｉ ｙ ｏ ｉ ｎ
Ｋｅ ｒ ｓ Ｃ ｌ ｌｓ ｅｒｄ ｔ ｎ；Ｍｉｅ ｕｔｒ ｙ ｗｏ ｄ ｅｌ ｏｅｄ ｇａ ａｉ ｕ ｏ ｘ ｃ ｌ ｅ；Ｄ ｇａ ａｉｎ ｅｆｃｅ ｃ ｄ ｕ ｅ ｒｄ ｔ ｆ ｉｎｙ ｏ ｉ
１ 材料 与方法
合发 酵培养 ， 各处 理组 合 酶 活性 测定 结果 如 表 １ 示 ， 活 所 酶
绿色木霉菌的拮抗作用
产品名称：绿色木霉孢子粉有效活孢子含量：10亿/克产品特性：绿色木霉是所产纤维素酶活性最高的菌株之一，所产生的纤维素酶对作物有降解作用，效果非常好，绿色木霉又是一种资源丰富的拮抗微生物，在植物病理生物防治中具有重要的作用。
具有保护和治疗双重功效，可有效防治土传性病害。
绿色木霉孢子粉可直接加入腐熟剂、有机肥料、生物菌剂等肥料中，在分解纤维、病理防治中有重要作用。
产品添加量：根据实际工艺做添加调整。
一般1千克/吨保存方式：低温(25℃以下)干燥密封保存。
保质期：12个月绿色木霉菌的拮抗作用可能是两种或三种机制同时或顺序作用的综合。
Baker研究表明, 用绿色木霉菌处理菜豆种子后, 绿色木霉菌菌对腐霉的作用包括产生抗生素及重寄生作用两种机制。
木霉菌在产生抗菌素的同时, 也产生各种降解细胞壁的胞外酶以抑制土传植物病原菌的菌丝生长和孢子萌发。
【防治对象】立枯病、腐霉病、猝倒病、枯萎病等土传病害。
【使用方法】●处理土壤将绿色木霉菌粉剂和育苗基质以1：500的比例充份混合后直接播种或扦插。
若直接处理苗床，可按1：10的比例与育苗基质混匀后，撒入苗床，每公斤处理苗床10—15平方。
●拌种或浸种将绿色木霉菌剂稀释100倍，浸种2小时后播种，或者拌种后直播。
●根部处理移栽前，以木霉菌剂500倍液浸根30分钟，然后定值；移栽后，可用500倍液灌根。
●喷雾以绿色木霉菌剂600～800倍液进行喷雾，发病前或初期使用效果更佳。
●制作生物肥将1公斤绿色木霉菌加入1000公斤有机肥中，作为生物肥料使用。
【包装】25公斤/袋或5kg/袋保质期：24个月。
【注意事项】1、不要与杀菌剂混合使用2．避免太阳光直射。
2、置于阴凉干燥处保存。
绿色木霉T206产纤维素酶特性与酶促动力学研究
酶 热 稳 定 性 强 ， 热 变温 度 为 ６ ～８ ℃ ，反 应 的 最 适 温度 为 ５ ℃ ， 最 适 ｐ 值 为 ４５ ０ ０ ０ Ｈ ．。
南
方
农
业
第 ２卷 第
Ｖ ｏｌ ２ Ｎ ｏ． １ｌ
．
２ ０ ￣ １ ］ ０ ８－ １Ｐ
Ｎ ｏｖ． ２ Ｑ毽 Ｑ ． ２ｏ０８
Ｓ ｕｔ ｏ ｈ Ｃｈｉ ｒ ｃ ｔ ｒ ｎａ Ａｇ ｉ ｕｌｕ ｅ
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绿色 木霉 Ｔ ２ ０ ６产纤 维素酶特 性 与酶促 动 力学研 究
关键 词：绿 色木 霉； 纤维素 酶； 力学 动
纤 维 素是 世 界上 最 大 的 可再 生 有 机资 源 ，我 国 于秸 秆生 物降 解提 供 一定理 论 依据 。 的纤维类资 源极为丰 富 ，仅秸秆 和皮壳每 年可达 ７× １ 。 目前其 有效利用 率低 ，主 要的利用 方式还 是作 ０ｔ
Ｈ Ｏ ０ ３ ０ ２ ｗｅｎ８ ， ０ ０ Ｈ， ２ ２ 。 ｍｉ 法降解纤维 素条件温 和 ，且无 污染 。但纤 维素酶活 力 ７ ２ ． ％ ， ． ％Ｔ ｅ一０ 自然 ｐ １ １℃ ， ０ ｎ
低 ，一直是 阻碍大规模 生产应用 的瓶 颈。 因此 ，加 强 １ 纤维 素 酶活 力 测定 方法 － ２ 纤维 素 酶产 生 菌菌 种 选育 、发 酵工 艺 及 降解 机 制 的 酶 液的制备： ５ ２ ０ｍＬ三角瓶装入 ５ ０ｍＬ液体培养
绿色木霉液体发酵生产纤维素酶条件的优化
例治疗试验 ，治愈率达９ ８ ． ９ ％，研究 者 们一 致认 为 纤维 素 酶制 剂 具疗 效 高 、
别 （ 乞永立 ，２ ０ ０ ０ ） 。二是标 准上 的原
提高５ ％ ～１ ０ ％的 日增重和３ ％一７ ％的饲 料效 率 （ Ｔ Ｔ Ｔ ｅ ｅ ｒ ｉ ，１ ９ ９ ７ ） 。在 肉鸡 方 面 ，秦江 帆等也进行 了相 关研 究 。王 怀 凡等在 蛋鸡 日粮 中添 加０ ． １ ％纤 维素 酶 ，结果使产蛋率 提高１ ０ ． ８ ％，蛋重提 高１ ． ７ ％，料蛋 比下降１ ４ ． ６ ％。裴相元等
类 碳水化 合物 ，同时也是 地球 上数
量 最多 的再生 资源 。 目前 ， 自然 界 中
是技 术上 的原 因。 由于 纤维素 酶是
种 微 生物 制剂 ，它对 温 度 、湿 度 、
的纤维 素 只 有一 小部 分 得 到 了利 用 ， 绝 大多 数纤 维素不仅 被 白 白浪 费 ，并 且 还会 对环境 造成污 染 。利用纤 维素 酶将 纤 维素 转 化为 人类 急 需 的 能源 、 食 物和 化工原 料 ，对 于人类 社会 解决
２ ０ ０ ０ ） 。 目前 ，纤维素酶生产 中存 在的
于多年 的研究 ，陈侠 甫等认 为 ，纤维 素酶对 马急慢性 消化 不 良、便秘 、牛 前 胃迟 缓 、瘤 胃膨胀 、瘤 胃积食 等疾
病具 有明显疗效 。经过十个兽 医院３ ７ ９
维 素酶 的酶活进 行优化 ，以期对 纤维 素酶 的生产技术有一定 的帮助。
绿色木霉液体发酵生产纤维素酶条件的优化
鹤壁职业技术学院
摘
张
帆
要 ： 目的 ：研究表 明，纤维素酶对于纤维素的分解可应用于环保、畜牧 、食品加工等 多个领 域 ，对于改善Ａ ． ４ １ ＇ １ 的生活有 重大意义。
绿色木霉概念与作用
绿色木霉概念与作用绿色木霉（Trichoderma viride）是真菌世界中的一种重要生物控制剂。
它属于担子菌门担子菌纲真菌门，并且被广泛用于农业、园艺和环境保护领域。
绿色木霉的主要作用是通过产生酶、竞争性抑制和拮抗活性来控制病原真菌的生长，从而保护农作物、增强植物健康并促进土壤生态系统的可持续发展。
绿色木霉在生物控制方面的作用主要有三方面：产酶作用、竞争性抑制和拮抗活性。
首先，绿色木霉可以产生多种酶，包括纤维素酶、蛋白酶和壳聚糖酶等。
这些酶可以分解植物残渣、有机肥料和病原真菌的细胞壁，释放出养分和生物活性物质。
通过释放酶，绿色木霉可以提高土壤的肥力，促进植物的根系生长，并同时降解有害的病原真菌的细胞壁，从而达到控制病害的效果。
其次，绿色木霉具有竞争性抑制病原真菌的能力。
绿色木霉具有强烈生长和繁殖的能力，它能够迅速占据土壤和植物根系的空间，减少病原真菌生长的机会。
此外，绿色木霉产生的酶和代谢产物可以抑制病原真菌的生长，阻碍其侵入植物组织。
这种竞争性抑制作用使得绿色木霉能够有效地降低植物发病的风险和病原真菌的种群密度。
最后，绿色木霉表现出拮抗活性对病原真菌产生抑制作用。
绿色木霉通过产生抗生素、挤压竞争和分泌酶等方式与病原真菌进行直接的拮抗。
绿色木霉产生的抗生素可以直接杀死病原真菌，阻止其生长和繁殖。
另外，绿色木霉的生长也可以通过挤压的方式抑制病原真菌。
绿色木霉发出的分泌酶可以降解病原真菌的细胞膜，导致其死亡。
这些拮抗性作用使得绿色木霉成为一种有效的生物防治剂。
总的来说，绿色木霉作为一种生物控制剂，在农业、园艺和环境保护方面发挥着重要作用。
通过产生酶、竞争性抑制和拮抗活性，绿色木霉可以有效地控制病原真菌的生长，保护农作物，增强植物健康并促进土壤生态系统的可持续发展。
此外，绿色木霉还具有低毒性、环境友好的特点，对人类和环境无害，因此被广泛应用于农业生产和环境保护领域。
草酸青霉木质纤维素降解相关酶类的表征与增效机制研究
草酸青霉木质纤维素降解相关酶类的表征与增效机制研究木质纤维素生物质的生物降解研究具有重要的生物学和工业应用意义。
对木质纤维素降解酶系进行组成优化和酶学性质改造,对促进木质纤维素生物转化生产生物燃料和大宗化产品具有重要价值。
草酸青霉(Penicillium oxalicum)作为一种重要的产纤维素酶工业微生物,和里氏木霉相比具有酶系组成和比例更加合理、半纤维素酶活力更高的优点。
目前已有的草酸青霉木质纤维素降解酶系在大规模工业化生产生物乙醇中仍然存在用量大、成本高的问题。
找到能够促进纤维素降解的关键酶组分、降低生产成本是提高木质纤维素生物转化经济性的关键途径之。
本论文的主要研究结果如下:1.草酸青霉木质纤维素降解酶库的构建及其成员的酶学性质研究通过同源、异源方式表达了 12种木质纤维素降解相关酶,构建成一个小型的草酸青霉木质纤维素降解酶库。
其中纤维素酶有2种,半纤维素酶有8种,此外还有2个辅助酶。
测定了部分酶库成员的比酶活、最适温度、最适pH、温度稳定性以及pH耐受性。
外源添加β-葡萄糖苷酶能够显著提高草酸青霉高产菌株JU-A10-T酶系对工业废渣木糖渣的糖化能力,从而减少了达到同等水解效率时酶的用量。
2.添加α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶Abf43D等半纤维素酶对预处理木质纤维素底物降解的促进作用添加α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶Abf43D和内切-β-1,4-甘露聚糖酶Man5A 可以明显促进草酸青霉酶系降解水热法预处理的玉米芯和木糖渣时的葡萄糖产量。
进一步探究Abf43D促进纤维素降解的机理发现,用Abf43D预处理能够提高底物的转化率,推测其能够通过除去底物中木聚糖侧链上的阿拉伯呋喃糖基,从而打破糖化中的抗降解屏障,与内切-β-1,4-木聚糖酶Xyn1OA等协同促进半纤维素的降解,并有利于纤维素酶对纤维素的水解,最终提高了葡萄糖产量。
此外Abf43D的添加能够缓解木聚糖水解液对纤维二糖水解酶活力的抑制作用。
绿色木霉和黑曲霉协同酶解稻草秸秆纤维素的效果研究
绿色木霉和黑曲霉协同酶解稻草秸秆纤维素的效果研究
杨长军;汪勤;杨平
【期刊名称】《酿酒科技》
【年(卷),期】2010(000)010
【摘要】采用双酶混合酶解可以缓解单一酶酶解过程中存在的产物累积抑制作用.对经过15%氨水预处理后的稻草残渣进行双酶(绿色木霉和黑曲霉)混合酶解实验.单因子实验发现纤维素酶解的最适条件为:纤维素酶加入量为20FPU/g底物、底物浓度为80g/L、pH值4.8、糖化温度为50℃;正交实验表明,酶的用量对酶解效果最为显著,其次是糖化温度,然后是pH,底物浓度对酶解得率的影响较小.最佳的酶解条件为:纤维素酶加入量30FPU/g底物、底物浓度60 g/L、PH4.8、糖化温度为50℃,在此条件下的酶解得率可达到80%.该研究为纤维素的有效利用提供了依据.【总页数】4页(P32-35)
【作者】杨长军;汪勤;杨平
【作者单位】四川大学建筑与环境学院,四川,成都,610065;四川省宜宾市经济委员会,四川,宜宾,644002;四川大学建筑与环境学院,四川,成都,610065
【正文语种】中文
【中图分类】Q93-3%Q55%TQ353
【相关文献】
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2.绿色木霉与黑曲霉混合发酵产纤维素酶的研究 [J], 姜伯玲;王曙阳;李文建;董妙
音;陈积红;刘敬;胡伟
3.稻草秸秆预处理方法对绿色木霉产纤维素酶的研究 [J], 孙宪迅;孙宪猛;韩雪;孙齐英
4.黑曲霉Ⅲ与绿色木霉Ⅰ混合发酵产纤维素酶的分离纯化及酶学性质研究 [J], 侯红萍;杨盛
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摘 要：绿 色木霉５５ ４ 菌株所 产纤维素 酶对草稿纸 、复 印纸 、滤纸 、 包装材料和 新 闻纸 等五 种类型废 纸有不 同的降解 ．７ ４ 效果 。结 果表 明 ： 包装材料 作 为底物 时的纤 维素 酶酶活 始终 较 高， 因而最终 降解效 果也 最好 ，酶解４ 时后酶 活仍 为 小
２７ Ｕ ｍ 。就 酶解速度 来说 ， 以新 闻纸 为底 物 时最 高，在 酶解 １ 、 ．２ ／ Ｌ Ｊ 时后 酶活 力即达２５ Ｕ ｍ 。液体培 养所得 纤维素酶 活 】 ．２ ／ Ｌ 力在 ２ 天 时 间达 到 最 高 ，其 中 以打 印纸和 新 闻纸 作 为碳 源 时 纤维 素 酶 活 力 最 高 ，在 三 天后 分别 达 到 ４５ Ｕ ｍ 和 ～５ ．１／ Ｌ
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５６ Ｕ Ｌ ．４ ／ｍ 。Fra bibliotek关键 词：纤维素 酶；废纸 ；降解
Ｄ Ｉ ７ ． ９ ９ ｊｉ ｎ１ ７ －６ ９ ．０ｆ ． ６０ ６ Ｏ ： ３ ６ ／ ．ｓ． ｊ ３ ６２ Ｏ ２ ． ０ ｏ ｓ ６
Ｂｉ ｅ ｒ ｄ ｔ ｎ ｆＤｉ ｅ ｅ ｔＫｉ ｄ ｏｄ ｇ ａ ａｉ ｏ ｆ ｒ ｎ ｎ ｓ０ｆ ｏ ｔ ａ ｒｂ ｌｕ ｏ ｅｆｏ Ｔｒｅ ｏ ｅ ｍ ａＶｉｉ ｅ ｅＰ ｐｅ ｙＣｅｌ ｌ ｓ ｒ ｍ ｉｈ ｄ ｒ ｒｄ
中雷西 部科 技 ２ １ 年Ｏ 月 （ ００ ９ 中旬 ）第０ 卷 第２ 期 总第２ ３ ９ ６ ２ 期
绿色木霉产纤维素酶降解各种废纸效果研究
张 磊
吴 兴 泉。
（ ． 南科技 学院食品 学院，河南 新 乡 ４ ３ ０ ；２河 南 工 业 大 学 生物 工 程 学 院 ， 河 南 郑 州 ４ ０ ５ ） １河 ５ ０ ５ ． ５ ０ ２
ａ ｔｖｔ ｅ ｃ ｅ ｏｔ ｅｈｇ ｅ ｔ ｙｓ ｂ ｅｇ ｄｃ ｌ ｅａｔｒ２ｔ ａ ｓａ ｎ ｉｈ ｄ ｐｉａｉ ｇｐ ｐ ｒ ｎ ｅ ｐ ｐ ｒｉ ｈ ｃｉｉ ｒ ａ ｈ ｄｔ ｈ ｉｈ ｓ ｕ ｍ ｒ ｅ ｕ ｔ ｆｅ ｏ３ｄ ｙ ，ｍｏ ｇｗｈｃ ｕ ｌ ｔｎ ａ ｅ ｄｎ ｗｓ ａ ｅ ｓｔ ｅ ｙ ｂ ｕｒ ｃ ａ
酶 液 添 加 量 分 别 设置 ０３ ｍ 、０ ７ Ｌ １ ０ Ｌ １３ Ｌ ． ５Ｌ ． ｍ 、 ． ｍ 、 ．ｍ 、
Ｉ 前言 纤维素酶是重要的复合酶产品 ，在饲料 、酒精 、纺织 和食 品等领域 已得 到广 泛应用。在造纸工业 中，通过纤维
素酶 对 不 同类 型废 纸 降 解 效 果 的 研 究 ，能 够 很 好 地 解 决 该 工 业 目前 面 临 的 “ 原料 短 缺 ， 能 源 紧 张 ，污 染 严 重 ”等 三 大 问题 。但 是 ， 目前 还 未 发 现 国 内利 用 纤 维 素 酶 生 物 降解
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