Tris饱和酚
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Tris饱和酚
简介:
华越洋生物Tris饱和酚一般PH大于7.8,用于DNA的提取。
其中,酚是强的蛋白变性剂,可以使细胞或组织中的蛋白质变性析出。
而Tris的主要作用是防治止酚类氧化,若酚类氧化,则会形成醌(两个苯环),醌含有强自由基,会破坏核酸结构。
同时,由于PH 值大于7,在碱性环境中DNA处于水相,RNA处于有机相。
从而分离上清,即可得到DNA。
Tris饱和酚的配置:
1、冰箱取出重蒸酚,室温放置---68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂
2、加8-羟基喹啉至0.1%和β-巯基乙醇至0.2%,(原液14. 4MOL/ML),混匀,溶液呈现黄色,倒入分液漏斗中(也可在烧杯中进行)
3、加入等溶剂的1MOL/ML的Tris(PH8.0),反复混匀后,静至分层;放出下层黄色酚液,弃上层
4、加固体Tris约1g/100ml酚,摇匀,去水相
5、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)平衡数次,至PH为8.0
6、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)于棕色瓶中4度保存
7、如黄色消失或呈粉红色(说明酚已经被氧化),则不能使用.
技术参数:
本试剂为使用0.5M Tris.HCl(pH8.0)饱和过的重蒸酚,为浅黄色透明液体,上层为Tris盐酸溶液,pH>7.5,溶液内加有抗氧化的0.1% 8-羟基喹啉和0.2%β-巯基乙醇。
保存要求:
4℃,避光
注意事项:
Tris饱和酚有较强的腐蚀性,应尽量避免皮肤接触或吸入体内。
如发现变为红色或
棕色,表明发生氧化,不能使用。
有效体积:≥250毫升(25℃,250毫升装)。
有效时间:6个月。