扶脾柔肝方对肝纤维化大鼠肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体-γ与转化生长因子-β1表达的影响
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【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ａｎｄ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＰＰＡＲ）一－ｙａｎｄ ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ（ＴＧＦ）一１３１ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｏｎ ｈｅｐａｔｉｃ ｆ ｉｂｒｏｓｉｓ ｒａｔｓ ｂｙ Ｆｕｐｉ Ｒｏｕｇａｎ ｆｏｒｍｕｌａ．Ｍ ｅｔｈｏｄｓ ＳＤ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｎｏｒ－
ＡＮ Ｚｈｅｎ·Ｘｉａｎｇ，ＨＥ Ｙｕａｎ－Ｌｉ，Ｗ ＡＮＧ Ｍ ｉｎ，ｅｔ ａ１． Ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ Ａｆ ｉ ｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｇｕｉｙａｎｇ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍ ｅｄｉｃｉｎｅ，Ｇｕｉｙａｎｇ ５５０００１，Ｇｕｉｚｈｏｕ，Ｃｈｉｎａ
ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ ＰＰＡＲ－ ａｎｄ ＴＧＦ一１ ３１ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｆ ｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ＰＣＲ ａｎｄ Ｗｅｓｔｅｒ ｎ ｂｌｏｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｈｅｐａｔｉｃ ｆ ｉｂｒｏｔｉｃ ｓｔａｇｉｎｇ ｏｆ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒ ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０１）．Ｔｈｅ ｈｅｐａｔｉｃ ｆ ｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎｄｅｘｅｓ ｏｆ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒ ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）．Ｉｔ ｉｓ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｉｎ ＰＰＡＲ一＾ｙ ｍＲＮＡ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓ— ｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ ｉｎ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０１），ｔｈｅ ＴＧＦ－１ ３１ ｍＲＮＡ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌｓ ｗｅｒｅ ｅｌｅｖａｔｅｄ（Ｐ＜０．Ｏ１）．Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｏｓｅ ｏｆ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ＰＰＡＲ一 ｍＲＮＡ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ｅａｃｈ ｄｒｕｇ ｉｎｔｅｒ ｖｅｎｔｉｏｎ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｕｐ—ｒｅｇｕｌａｔｅｄ．Ｔｈｅ ＴＧＦ－Ｂｌ
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中 国老 年 学杂 志 ２０１８年 ９月 第 ３８卷
扶 脾柔 肝 方对 肝 纤维 化 大 鼠肝脏 过 氧 化物 酶体 增 殖物 激 活受 体一＾ｙ与 转 化 生长 因子 一ｐ１表 达 的影 响
安 祯祥 何远 利 王 敏 黄 丹 陈昱江 （贵 阳 中医学 院第一 附属 医院 ，贵 州 Байду номын сангаас 阳 ５５０００１）
［摘 要 ］ 目的 研究扶脾柔肝方 （ＦＲＦ）对肝纤维化 （ＨＦ）大 鼠肝组织 过氧化物酶体增殖 物激活受体 （ＰＰＡＲ）一 与转 化生长 因子 （ＴＧＦ）一１３１表达 的影响及机制。方法 ８Ｏ只 ｓＤ大鼠随机分为正常对照组 、模 型组 、秋水仙 碱组 、扶正 化瘀组 、ＦＲＦ大 、中、小剂 量组 ，采用 四氯 化碳加上 乙醇复制大 鼠 ＨＦ模 型 ，造模 １０ ｗ成功后 ，给予对应药 物干预 ，每 日 １次 ，连续 ４ ｗ，正 常对照组 、模 型组给 予生理盐水 。检测血清肝纤维化指 标 ，采用 苏木 素－伊红 （ＨＥ）染 色观 察 ＨＦ程度 ，免疫 组化 法观 察肝组 织 ＰＰＡＲ． 的 表达 ，ｑＲＴ ＰＣＲ、Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹 方法检测 肝组 织 ＰＰＡＲ一 、ＴＧＦ．１ ３１ ｍＲＮＡ和蛋 白表 达水 平。结 果 模 型 组 的 ＨＦ分 期较 其余 组 明显 升高 （Ｐ＜ ０．０１），模型组大 鼠肝纤维化指 标较 其余各组 均明显升高 （Ｐ＜０．０１），模型组肝组织 ＰＰＡＲ一 ｍＲＮＡ和蛋 白表达 明显下 调（Ｐ＜０．０１）， ＴＧＦ一１ ３１表达 明显升高 （Ｐ＜Ｏ．０１）；与模 型组 比较 ，各药物干预组肝 组织 ＰＰＡＲ一 ｍＲＮＡ和蛋 白表达上调 ，ＴＧＦ一１３１ ｍＲＮＡ和蛋 白表达 下调 ，其 中 ＦＲＦ大剂量组差异有统计 学意义（Ｐ＜０．０１）。结论 ＦＲＦ上调 ＨＦ肝组织 ＰＰＡＲ． ｍＲＮＡ和蛋 白表达 水平 ，下调 ＴＧＦ一１３１ 表 达 ，可能是其抗 ＨＦ作用机制之一 。
【关键词］ 肝纤维化 ；过氧化物酶体增殖物激活受体一 ；转化生 长因子一１３１；扶脾柔肝方
［中圈分类号 ］ Ｒ５７５．２ ［文献标识码］ Ａ ［文章编号 ］ １００５－９２０２（２０１８）１８－４４７４－０５；ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｍ１００５－９２０２．２０１８．１８．０４５
Ｅｆｅｃｔ ｏｆ Ｆｕｐｉ Ｒｏｕｇａｎ Ｆｏｒｍｕｌａ Ｇｒａｎｕｌｅ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｏｆ ＰＰＡＲ－ ａｎｄ ＴＧＦ－１３１ ｉｎ ｒａｔｓ ｗｉｔｈ ｌｉｖｅｒ ｆ ｉｂｒｏｓｉｓ
ｍａｌ，ｇ ｒ ｏｕｐ，ｗｅｓｔｅｒ ｎ ｍｅｄｉｃｉｎｅ，ｔｈｅ ｐｒｏｐｒｉｅｔａｒｙ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ， Ｃｈｉｎｅｓｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｈｉｇｈ—ｄｏｓｅ， ｍｅｄｉａｌ－ｄｏｓｅ ａｎｄ ｌｏｗ—ｄｏｓｅ ｇ ｒ ｏｕｐｓ． ＳＤ ｒａｔ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｃ ｆ ｉｂｒｏｓｉｓ ｗｅｒｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｃａｒｂｏｎ ｔｅｔｒａｅｈｌｏｒｉｄｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ ｅｔｈａｎｏ１． Ａｆｔｅｒ １０ ｗｅｅｋｓ，ｅａｃｈ ｇ ｒ ｏｕｐ ｗａｓ ｇｉｖｅｎ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ｄｒｕｇ ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ｂｙ ｏｎｃｅ ｄａｉｌｙ ｆｏｒ ４ ｗｅｅｋｓ．Ｔｈｅ ｎｏｒ ｍ ａｌ ａｎｄ ｍｏｄｅｌ ｇ ｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｖｅｎ ｎｏｒ ｍ ａｌ ｓａｌｉｎｅ．Ｔｈｅ ｈｅｐａｔｉｃ ｆ ｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎｄｅｘｅｓ ｉｎ ｓｅｒｕｍ ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ．ＨＥ ｓｔａｉｎｉｎｇ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｄｅｇ ｒｅｅ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｆ ｉｂｒｏｓｉｓ．ＰＰＡＲ一 ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｂｙ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．Ｔｈｅ ｍＲＮＡ
ＡＮ Ｚｈｅｎ·Ｘｉａｎｇ，ＨＥ Ｙｕａｎ－Ｌｉ，Ｗ ＡＮＧ Ｍ ｉｎ，ｅｔ ａ１． Ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ Ａｆ ｉ ｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｇｕｉｙａｎｇ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍ ｅｄｉｃｉｎｅ，Ｇｕｉｙａｎｇ ５５０００１，Ｇｕｉｚｈｏｕ，Ｃｈｉｎａ
ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ ＰＰＡＲ－ ａｎｄ ＴＧＦ一１ ３１ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｆ ｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ＰＣＲ ａｎｄ Ｗｅｓｔｅｒ ｎ ｂｌｏｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｈｅｐａｔｉｃ ｆ ｉｂｒｏｔｉｃ ｓｔａｇｉｎｇ ｏｆ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒ ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０１）．Ｔｈｅ ｈｅｐａｔｉｃ ｆ ｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎｄｅｘｅｓ ｏｆ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒ ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）．Ｉｔ ｉｓ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｉｎ ＰＰＡＲ一＾ｙ ｍＲＮＡ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓ— ｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ ｉｎ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０１），ｔｈｅ ＴＧＦ－１ ３１ ｍＲＮＡ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌｓ ｗｅｒｅ ｅｌｅｖａｔｅｄ（Ｐ＜０．Ｏ１）．Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｏｓｅ ｏｆ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ＰＰＡＲ一 ｍＲＮＡ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ｅａｃｈ ｄｒｕｇ ｉｎｔｅｒ ｖｅｎｔｉｏｎ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｕｐ—ｒｅｇｕｌａｔｅｄ．Ｔｈｅ ＴＧＦ－Ｂｌ
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中 国老 年 学杂 志 ２０１８年 ９月 第 ３８卷
扶 脾柔 肝 方对 肝 纤维 化 大 鼠肝脏 过 氧 化物 酶体 增 殖物 激 活受 体一＾ｙ与 转 化 生长 因子 一ｐ１表 达 的影 响
安 祯祥 何远 利 王 敏 黄 丹 陈昱江 （贵 阳 中医学 院第一 附属 医院 ，贵 州 Байду номын сангаас 阳 ５５０００１）
［摘 要 ］ 目的 研究扶脾柔肝方 （ＦＲＦ）对肝纤维化 （ＨＦ）大 鼠肝组织 过氧化物酶体增殖 物激活受体 （ＰＰＡＲ）一 与转 化生长 因子 （ＴＧＦ）一１３１表达 的影响及机制。方法 ８Ｏ只 ｓＤ大鼠随机分为正常对照组 、模 型组 、秋水仙 碱组 、扶正 化瘀组 、ＦＲＦ大 、中、小剂 量组 ，采用 四氯 化碳加上 乙醇复制大 鼠 ＨＦ模 型 ，造模 １０ ｗ成功后 ，给予对应药 物干预 ，每 日 １次 ，连续 ４ ｗ，正 常对照组 、模 型组给 予生理盐水 。检测血清肝纤维化指 标 ，采用 苏木 素－伊红 （ＨＥ）染 色观 察 ＨＦ程度 ，免疫 组化 法观 察肝组 织 ＰＰＡＲ． 的 表达 ，ｑＲＴ ＰＣＲ、Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹 方法检测 肝组 织 ＰＰＡＲ一 、ＴＧＦ．１ ３１ ｍＲＮＡ和蛋 白表 达水 平。结 果 模 型 组 的 ＨＦ分 期较 其余 组 明显 升高 （Ｐ＜ ０．０１），模型组大 鼠肝纤维化指 标较 其余各组 均明显升高 （Ｐ＜０．０１），模型组肝组织 ＰＰＡＲ一 ｍＲＮＡ和蛋 白表达 明显下 调（Ｐ＜０．０１）， ＴＧＦ一１ ３１表达 明显升高 （Ｐ＜Ｏ．０１）；与模 型组 比较 ，各药物干预组肝 组织 ＰＰＡＲ一 ｍＲＮＡ和蛋 白表达上调 ，ＴＧＦ一１３１ ｍＲＮＡ和蛋 白表达 下调 ，其 中 ＦＲＦ大剂量组差异有统计 学意义（Ｐ＜０．０１）。结论 ＦＲＦ上调 ＨＦ肝组织 ＰＰＡＲ． ｍＲＮＡ和蛋 白表达 水平 ，下调 ＴＧＦ一１３１ 表 达 ，可能是其抗 ＨＦ作用机制之一 。
【关键词］ 肝纤维化 ；过氧化物酶体增殖物激活受体一 ；转化生 长因子一１３１；扶脾柔肝方
［中圈分类号 ］ Ｒ５７５．２ ［文献标识码］ Ａ ［文章编号 ］ １００５－９２０２（２０１８）１８－４４７４－０５；ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｍ１００５－９２０２．２０１８．１８．０４５
Ｅｆｅｃｔ ｏｆ Ｆｕｐｉ Ｒｏｕｇａｎ Ｆｏｒｍｕｌａ Ｇｒａｎｕｌｅ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｏｆ ＰＰＡＲ－ ａｎｄ ＴＧＦ－１３１ ｉｎ ｒａｔｓ ｗｉｔｈ ｌｉｖｅｒ ｆ ｉｂｒｏｓｉｓ
ｍａｌ，ｇ ｒ ｏｕｐ，ｗｅｓｔｅｒ ｎ ｍｅｄｉｃｉｎｅ，ｔｈｅ ｐｒｏｐｒｉｅｔａｒｙ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ， Ｃｈｉｎｅｓｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｈｉｇｈ—ｄｏｓｅ， ｍｅｄｉａｌ－ｄｏｓｅ ａｎｄ ｌｏｗ—ｄｏｓｅ ｇ ｒ ｏｕｐｓ． ＳＤ ｒａｔ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｃ ｆ ｉｂｒｏｓｉｓ ｗｅｒｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｃａｒｂｏｎ ｔｅｔｒａｅｈｌｏｒｉｄｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ ｅｔｈａｎｏ１． Ａｆｔｅｒ １０ ｗｅｅｋｓ，ｅａｃｈ ｇ ｒ ｏｕｐ ｗａｓ ｇｉｖｅｎ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ｄｒｕｇ ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ｂｙ ｏｎｃｅ ｄａｉｌｙ ｆｏｒ ４ ｗｅｅｋｓ．Ｔｈｅ ｎｏｒ ｍ ａｌ ａｎｄ ｍｏｄｅｌ ｇ ｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｖｅｎ ｎｏｒ ｍ ａｌ ｓａｌｉｎｅ．Ｔｈｅ ｈｅｐａｔｉｃ ｆ ｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎｄｅｘｅｓ ｉｎ ｓｅｒｕｍ ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ．ＨＥ ｓｔａｉｎｉｎｇ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｄｅｇ ｒｅｅ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｆ ｉｂｒｏｓｉｓ．ＰＰＡＲ一 ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｂｙ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．Ｔｈｅ ｍＲＮＡ