实验十酪蛋白的制备
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
器材：离心机、水浴锅、pH计
Hale Waihona Puke 、操作方法10mL牛奶预热 40°C
40°C预热的醋酸buffer 10mL
调pH至4.7
边加边搅拌
室温冷却 5000r/min 离心得 5min
沉淀 4mL H2O于离心管内悬浮 5000r/min 离心 得沉淀 20mL乙醇于离心管内去脂5m肪in 5min
漏斗过滤
实验十 酪蛋白的制备
一、目的要求
学习从牛乳中制备酪蛋白的原理和 方法。
二、原理
牛奶含有半乳糖、蛋白质、脂肪成 份。蛋白质中的酪蛋白通过等电点沉淀， 再通过离心而获得，糖类小分子由于处 于清液中而分离，沉淀物中所含的脂肪 通过有机溶剂抽提而去除，最终得到纯 白色、晶状酪蛋白。
三、试剂与器材
试剂：0.2 mol/L HAc-Na buffer、 95%乙醇、乙醚
七、思考题
1.在酪蛋白制备时为什么要用醋酸缓冲液调pH到4.8？ 2.乙醚、乙醇作用是什么？
滤干 20mL乙醇
20mL乙醇乙醚混合液（1:1）
微搅动
洗涤 20mL乙醚 洗涤（脂肪完毕） 60°C,4h 带
滤纸烘干 称重
计算。
五、计算
实际获得百分率=
酪蛋白质量（g）
10mL 牛奶
╳ 100%
六、注意事项 1、牛奶与缓冲液要预热 2、缓冲液要缓加缓搅 3、在滤纸上样品的脱脂过程要搅动，不得
破滤纸 4、实验环境要保持空气流通，门窗要开
Hale Waihona Puke 、操作方法10mL牛奶预热 40°C
40°C预热的醋酸buffer 10mL
调pH至4.7
边加边搅拌
室温冷却 5000r/min 离心得 5min
沉淀 4mL H2O于离心管内悬浮 5000r/min 离心 得沉淀 20mL乙醇于离心管内去脂5m肪in 5min
漏斗过滤
实验十 酪蛋白的制备
一、目的要求
学习从牛乳中制备酪蛋白的原理和 方法。
二、原理
牛奶含有半乳糖、蛋白质、脂肪成 份。蛋白质中的酪蛋白通过等电点沉淀， 再通过离心而获得，糖类小分子由于处 于清液中而分离，沉淀物中所含的脂肪 通过有机溶剂抽提而去除，最终得到纯 白色、晶状酪蛋白。
三、试剂与器材
试剂：0.2 mol/L HAc-Na buffer、 95%乙醇、乙醚
七、思考题
1.在酪蛋白制备时为什么要用醋酸缓冲液调pH到4.8？ 2.乙醚、乙醇作用是什么？
滤干 20mL乙醇
20mL乙醇乙醚混合液（1:1）
微搅动
洗涤 20mL乙醚 洗涤（脂肪完毕） 60°C,4h 带
滤纸烘干 称重
计算。
五、计算
实际获得百分率=
酪蛋白质量（g）
10mL 牛奶
╳ 100%
六、注意事项 1、牛奶与缓冲液要预热 2、缓冲液要缓加缓搅 3、在滤纸上样品的脱脂过程要搅动，不得
破滤纸 4、实验环境要保持空气流通，门窗要开