白色念珠菌
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平皿。 2019/7/10
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念珠菌显色培养基(CHROMagar)
念珠菌显色培养基根据酶底物法,白色念 珠菌具有β-硝基半乳糖苷酶,可分解NGL, 使对-硝基苯酚游离,在碱性条件下显色。
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1%吐温80-玉米琼脂培养基
黄色玉米粉 40g
琼脂 10~15g
聚山梨酯80 10ml
水 1000ml
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分离培养
取上述培养物划线接种于沙氏葡萄糖琼脂 培养基平板上,培养24~48 小时(必要时 延长至72 小时)。
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初步判断
与其菌落形态特征相符或疑似 挑选2~3个菌落 念珠菌显色培养基平板
24~48h
无绿色或翠绿色的菌落生长 菌落为绿色或翠绿色
未检出
挑选2~3个菌落
1%吐温80-玉米琼脂培养基
取玉米粉、吐温80 及蒸馏水500ml, 混合, 65℃加热30 分钟,混匀,用纱布滤过,补足 原水量。取琼脂,水500ml, 混合,加热溶
解。将以上两种溶液混合,摇匀,分装,
灭菌。 2019/7/10
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白色念珠菌与酵母菌的鉴别
1、酵母菌在显色培养基上不显色,为乳白 色。
2、酵母菌无假菌丝和厚膜孢子 3、酵母菌可发酵蔗糖不能发酵麦芽糖。 以上实验结果和特征可与念珠菌进行鉴别。
呈灰色或奶油色,表面光滑有浓酵 母气味,培养时间稍久则菌落增大,
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念珠菌在显色培养基上的菌落颜 色
念珠菌
菌落颜色
白色念珠菌
热带念珠菌
克柔念珠菌 光滑念珠菌 其他念珠菌
绿色,翠绿色(直径约 2nm)
蓝色,铁蓝色(直径约 1.5nm) 粉红色(直径约4.5nm) 紫色(直径约2nm) 白色(直径不定)
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结果判断
供试品检出控制菌或其他致病菌时,按一 次检出结果为准,不再复试。
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沙氏葡萄糖液体培养基
用途:用于药品抑菌剂效力检测中细菌检 测、真菌的培养
葡萄糖 40g
水 1000ml
蛋白胨 10g
除葡萄糖外。取上述成分,混合,微温溶 解,滤过。加入葡萄糖,溶解,分装,灭 菌。
萄糖提供碳源;琼脂是凝固剂。
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念珠菌显色培养基(CHROMagar)
蛋白胨 10.2g
琼脂 15g
氯霉素 0.5g
灭菌水 1000ml
色素 22.0g
除琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,
调节pH 值至6.3±0.2。滤过,加入琼脂,
加热煮沸,不断搅拌至琼脂完全溶解,倾注
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白色假丝酵母菌在显色培养基上 的颜色和菌落形态
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鉴定依据
1、菌落特征
2、显色培养基反应
3、厚膜孢子形成 假菌丝末端或侧缘形成 典型的厚膜孢子
4、芽管形成 有孢子长出短小芽管 5、生化试验 6、注意与其他常见念珠菌和酵母菌的鉴别。
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24~48h
培养物进行染色,镜检及芽管试验
无菌生长 与其菌落形态特征不符的
未检出
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芽管试验
挑取1%吐温80-玉米琼脂培养基上的培养 物,接种于加有一滴血清的载玻片上,盖 上盖玻片,置湿润的平皿内,置35~37℃、 1~3 小时,置显微镜下观察,可见到由孢 子长出短小芽管。
若上述疑似菌为非革兰阳性菌,显微镜未 见厚膜孢子、假菌丝、芽管,判供试品未 检出白色念珠菌。
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沙氏葡萄糖琼脂培养基
用途:用于真菌的分离培养
葡萄糖 40g
琼脂 15~18g
蛋白胨 10g
水 1000ml
除琼脂和葡萄糖外。混合,微温溶解,滤 过。加入琼脂和葡萄糖,溶解,分装,灭
菌。
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沙氏葡萄糖琼脂培养基
原理:
蛋白胨提供氮源,维生素,生长因子;葡
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增菌 分离培养 初步判断 芽管试验 结果判断
检查步骤
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增菌
白色念珠菌(Candida albicans) 取供试液 10ml(相当于供试品1g、1ml、10cm2)直 接或处理后接种至适量(不少于100ml)的 沙氏葡萄糖肉汤培养基中,培养48~72 小 时。
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白色念珠菌
简介
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白色念珠菌的典型特征 显微镜下特征 白色念珠菌菌落形态 鉴定依据 检查步骤 白色念珠菌与酵母菌的鉴别
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白色念珠菌的典型特征
白色念珠菌菌细胞呈圆形或卵圆形,直径 为3~6µm,革兰染色为阳性,但菌体着色 不均匀,以出牙方式繁殖,在适宜的培养 基上出芽生孢子及假菌丝生长,在假菌丝 间其末端形成厚膜孢子。
白色念珠菌具有β-硝基半乳糖苷酶,可分解 NGL,使对-硝基苯酚游离,在碱性条件下 显色。
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显微镜下特征
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白色假丝酵母菌的镜下形态(假 菌丝)
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白色假丝酵母菌的镜下形态(厚 膜孢子)
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白色假丝酵母菌的镜下形态(芽 管)
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酵母菌在显色培养基上的颜色和 菌落形态
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常见念珠菌及酵母菌生化试验结 果
细菌名 称
白色念 珠菌
热带念 球菌
啤酒酵 母菌
酿酒酵 母菌
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蔗糖试 验 -
+
+
+
生化试验
葡萄糖发 麦芽糖发
酵
酵
+
+
尿素酶分 解
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+
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白色假丝酵母在血平板的镜下形 态(芽管)
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白色念珠菌菌落形态
培养基
沙氏琼脂培 养基
菌落形态
乳白色偶见谈黄色,表面光滑有浓 酵母气味,培养时间稍久则菌落增 大,颜色变浓,质地变硬或有皱褶。
吐温80-玉 米琼脂培养 基 血平板
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灰色或奶油色,表面光滑有浓酵母 气味,培养时间稍久则菌落增大, 颜色变浓,质地变硬或有皱褶。