硫色曲霉β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的组成型分泌表达

硫色曲霉β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的组成型分泌表达李松瑜;陈小玲;王军军;曹云鹤;董冰
【期刊名称】《生物技术通讯》
【年(卷),期】2009(020)001
【摘要】目的:构建硫色曲霉β-甘露聚糖酶的毕赤酵母组成型分泌表达菌株,研究重组菌株的产酶水平.方法:EcoRI/Xba I 双酶切质粒pPIC-mann-opt,琼脂糖凝胶电泳、回收目的基因片段后,与组成型毕赤酵母表达载体pGAPzαA连接,转化大肠杆菌,经筛选获得含有pGAP-mann-opt的重组克隆;提取pGAP-mann-opt,用限制性内切酶BapH I 线性化后,转化毕赤酵母X-33感受态细胞,进行Zeocin抗性筛选和PCR鉴定.结果:获得了重组菌株,重组菌株在YPD培养基中摇瓶发酵24 h,上清液酶活达到343 U/mL,产酶蛋白约为1.0 mg/mL.结论:构建的硫色曲霉β-甘露聚糖酶组成型表达菌株具有较好的应用前景.
【总页数】3页(P12-14)
【作者】李松瑜;陈小玲;王军军;曹云鹤;董冰
【作者单位】中国农业大学,动物营养学国家重点实验室,北京,100193;中国农业大学,动物营养学国家重点实验室,北京,100193;中国农业大学,动物营养学国家重点实验室,北京,100193;中国农业大学,动物营养学国家重点实验室,北京,100193;中国农业大学,动物营养学国家重点实验室,北京,100193
【正文语种】中文
【中图分类】Q78
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