对花仙宫血胶囊止血抗炎作用的实验研究

2020年第33卷第6期
对花仙宫血胶囊止血抗炎作用的实验研究*
岳明1，仝敏1△，卢健1，马丽2，张恩户2
1咸阳市中心医院，陕西咸阳712000；2陕西中医药大学
［摘要］目的：观察花仙宫血胶囊的止血、抗炎作用。

方法：选择SD受孕大鼠50只制备功血模型，随机分为模型组，宫血宁胶囊组，花仙宫胶囊低、中、高剂量组；设10只健康大鼠为空白对照组，各组给予对应剂量药物灌胃。

比较各组大鼠子宫出血量；应用二甲苯致小鼠耳肿胀、冰醋酸致小鼠毛细血管通透，进行抗炎试验。

结果：花仙宫血胶囊高、中、低剂量组均能减少功血模型大鼠出血量，并能显著抑制小鼠耳肿胀；花仙宫血胶囊中、高剂量组对毛细血管的通透性增加有一定的降低作用。

结论：花仙宫血胶囊具有良好的止血与抗炎作用。

［关键词］子宫出血，功能性；花仙宫血胶囊；止血；抗炎；动物实验
［中图分类号］R271.11［文献标识码］A［文章编号］1004-6852(2020)06-0017-03
Experimental Study on Hemostatic and Anti-inflammatory Effects
of Huaxian Gongxue Capsules
YUE Ming1,TONG Min1△,LU Jian1,
MA Li2,ZHANG Enhu2
1Xianyang Central Hospital,Xianyang712000,China;2Shaanxi University of Traditional Chinese Medicine To observe hemostatic and anti-inflammatory effects of Huaxian Gongxue capsules.Methods:Fifty pregnant SD rats were chosen,prepared into the models with dysfunctional uterine bleeding(DUB),and they were randomized into the model group,Gongxuening capsules group,low,moderate and high doses groups of Huaxian Gongxue capsules;ten healthy rats were set as blank control group,different groups were drenched with the correspon-
ding dose of medicine.To compare uterine bleeding amount and peritoneal capillary permeability among different groups;anti-inflammatory test was performed after inducing ear swelling in mice with xylene,and capillary permea-bility with glacial acetic acid.Results:Low,moderate and high doses of Huaxian Gongxue capsules could reduce
blood loss of rat model,and inhibit ear swelling of the mice significantly;moderate and high doses
of Huaxian
Gongxue capsules could relieve capillary permeability increase certainly.Conclusion:Huaxian Gongxue capsules own good hemostatic and anti-inflammatory effects.
uterine bleeding,dysfunctional;Huaxian Gongxue capsules;hemostatic;anti-inflammatory;
experimental study
功能失调性子宫出血(dysfunctional ute-rine bleeding，DUB)简称功血［1］。

国内报道其发病率约占妇科门诊患者的10%［2-3］，严重影响女性身心健康，病情进展后甚至可致子宫内膜癌、失血性休克，危及患者生命。

研究［4-6］表明，中医药治疗功血疗效显著［7］。

花仙宫血胶囊为咸阳市中心医院院内制剂，其由益母草、续断、仙鹤草、地锦草等多味中药组成，主要功效为化瘀补肾、止血调经，作用。

本研究通过动物模型研究，观察花仙宫血胶囊的止血与抗炎作用，为临床提供其治疗功血的药理学依据。

1材料与方法
1.1实验动物90只SD大鼠，其中雌性60只，体质量200~220g，雄性30只，体质量280~300g；50只昆明小鼠，体质量24~28g，均由西安交通大学实验动物中心提供，动物合格证号：SCXK(陕) 2012-003。

1.2药品与试剂花仙宫血胶囊(咸阳市中心医院制剂室［批准文号：陕药监制字(2002)第1121号，批号：170113，规格0.5g/粒，相当于原药材1.72g)；宫血宁胶囊(云南白药集团股份有限公司，批号：ZDA1601，规格：0.13g/粒)；米非司酮(华润紫竹药业有限公司，批号：431610111，规格：25mg/片)；米索前列醇片(华润紫竹药业有限公司，批号：43161003，规格：0.2mg/片)；醋酸地塞米松(遂成药业股份有限公司，批号：160302，规格：0.75mg/片)；二甲苯(天津市科密欧化学试剂有限公司，批号：050403)；冰醋酸(天津市耀华化学试剂有限责任公司，批号：20150305)；伊文思蓝(国药集团化学试剂有限公司，批号：WC20060626)。

1.3实验仪器XDS-1B型倒置生物显微镜(重庆光电仪器有限公司)；UV-2550型紫外可见分光光度计(北京京科瑞达科技有限公司)；分析电子天平(赛多利斯科学仪器有限公司
)
；TDL-80-2B 型离心机(上
海安亭科学仪器厂)；U-2550型紫外分光光度计(岛津企业管理有限公司)。

DOI：10.12174/j.issn.1004-6852.2020.06.04
药理研究
Western Journal of Traditional Chinese Medicine,2020Vol.33No.6
表2各组模型小鼠耳肿胀比较(χ±s )
组别
空白对照组
阳性对照组
花仙宫胶囊低剂量组花仙宫胶囊中剂量组花仙宫胶囊高剂量组
剂量(g/kg)
-0.010.731.462.92
肿胀率(%)90.44±17.8738.06±9.3972.98±11.66*58.15±10.67**46.25±13.93**
肿胀抑制率(%)
-57.9219.3135.7046.81
注：与空白对照组比较，*表示P ＜0.05，**表示P ＜0.01
鼠数1010101010
1.4实验方法
1.4.1对功血模型大鼠出血量的影响
1.4.1.1分组与造模将健康SD 雌性大鼠60只，体质量200~220g ，雄性大鼠30只，体质量280~300g ，按2∶1比例合笼，次日晨阴道涂片镜检，以发现精子为妊娠第1天。

选取50只受孕大
鼠随机分为模型组，宫血宁胶囊组，
花血宫胶囊低、中、高剂量组，每组10只。

另选取10只健康大
鼠为空白对照组，除正常对照组外，余5组受孕大
鼠在第7天8时灌胃米非司酮(8.3mg/kg)，18∶00时灌胃米索前列醇(100μg/kg)，造成子宫出血模型［8］，即功血模型大鼠。

1.4.1.2给药各组大鼠均于受孕第5天开始每天按10mL/kg 体质量灌胃给药1次，连续10天。

宫血宁组以浓度为13mg/mL 宫血宁混悬液灌胃；花仙宫血胶囊低、中、高剂量组分别以浓度为92、46、23mg/mL 花仙宫血混悬液灌胃；空白对照组和模型组灌胃等体积蒸馏水。

1.4.1.3测定出血量模型组，宫血宁胶囊组，花仙宫血胶囊低、中、高剂量组在灌胃米非司酮和米索前列醇后，于大鼠阴道内放入1个消毒棉球(棉球重85~90mg)，于次日8∶00和18∶00各更换一次棉球，将收集的棉球密闭冷藏保存，连续至第14日。

各组大鼠尾静脉采血0.02mL ，加入5%氢氧化钠(NaOH)溶液4mL 混匀。

将收集的子宫出血棉球根据出血量加入适量5%NaOH 浸泡搓洗血渍，保存浸洗液。

再重复浸洗棉球血渍，洗液保存容器中。

根据棉球血渍量，决定是否需要再浸洗1~2
次。

将所得浸洗液混匀，并记录所用5%NaOH 总量。

取5mL 混均的浸洗液过滤，以5%NaOH 溶液为空白对照，分别将已过滤的4mL 浸洗液、4mL5%NaOH 溶液的大鼠尾静脉血在546nm 波长处测定吸光度(A)值，计算子宫出血量。

子宫出血量(mL)=［尾静脉采血量(0.02mL)×子宫浸洗液A 值×V 2］/(尾静脉血A 值×V 1)，V 1=稀释尾静脉血所用5%NaOH 量；V 2=浸提子宫血5%NaOH 用量。

1.4.2对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响［9-10］
取昆明种小鼠50只，雌雄各半，随机分成5组，分别为花仙宫血胶囊低、中、高剂量组，阳性对照组，空白对照组。

阳性对照组按5mg/kg 体质量灌胃醋
酸地塞米松；花仙宫血胶囊低、中、高剂量组，分别按2.92、1.46、0.73g/kg 灌胃；空白对照组灌胃等体积的生理盐水。

各组每天灌胃给药1次，连续给药7天。

于末次给药后30min ，以二甲苯棉球接触右耳3s ，20min 后处死，剪下双耳，分别在同一部位用7mm 耳打孔器打下圆耳片，称质量并记录左右耳质量。

耳肿胀率(%)=(右耳质量-左耳质量)／右耳质量×100%。

耳肿胀抑制率(%)=(对照组肿胀率-给药组肿胀率)/对照组肿胀率×100%。

1.4.3对冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响［11-12］动物分组与给药同“1.4.2”项。

末次给药1h 后，尾静脉注射0.5%伊文思兰(0.1mL/10g)，腹腔注射0.6%醋酸溶液(0.2mL/只)。

20min 后脱颈处死，剪开小鼠腹腔，用6mL 生理盐水分次冲洗腹腔，再加入生理盐水至10mL 。

于3000r/min ，离心半径13cm ，离心10min ，取上清液，用紫外分光光度计于590nm 比色，测其光密度值(OD)值结果与对照组比较。

1.5统计学方法采用SPSS 20.0统计软件分析数据，计量资料以(χ±s )表示，采用t 检验，P ＜0.05为差异有统计学意义。

2实验结果
2.1模型大鼠出血量花仙宫血胶囊低、中、高剂量组可明显减少功血模型大鼠出血量。

见表1。

2.2模型小鼠耳肿胀度花仙宫血胶囊低、中、高剂量组均能抑制小鼠耳肿胀，与阳性对照组比较，差异有统计学意义(P ＜0.05)。

见表2。

2.3模型小鼠腹腔毛细血管通透性花仙宫血胶囊中、高剂量组能显著抑制冰醋酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性，与阳性对照组比较，差异有统计学意义(P ＜0.01)。

见表3。

表1各组大鼠出血量比较(χ±s )组别
空白对照组模型组
宫血宁胶囊组
花仙宫血胶囊低剂量组花仙宫血胶囊中剂量组花仙宫血胶囊高剂量组剂量(g/kg)--0.130.230.46
0.92
出血量(mL)-0.698±0.0980.472±0.086**0.503
±0.087
**0.484±0.109**0.477±0.086**
注：与模型组比较，**表示P ＜0.01
鼠数101010
1010
10药理研究
2020年第33卷第6期
表3
各组模型小鼠腹腔毛细血管通透性比较(字依s )
组别
空白对照组阳性对照组
花仙宫血胶囊低剂量组花仙宫血胶囊中剂量组花仙宫血胶囊高剂量组
剂量(mg/kg)
-0.010.731.462.92
吸光度(A)0.8239±0.10780.4309±0.08470.8068±0.08960.6709±0.0835**0.5851±0.1060**
注：与空白对照组比较，**表示P ＜0.01
鼠数1010101010
3
讨论
功血属于中医妇科疑难急重病症［13-14］
，严重
影响患者的生理和心理健康［15-16］。

目前治疗功血
的方法有口服避孕药、孕激素、非甾体抗炎药、氨
甲环酸、促性腺激素释放激素类似物等［17］
；外科手术常采取子宫内膜刮除和子宫切除术。

中医学将功血归属于“崩漏”范畴，认为该病
的主要病机是冲任损伤，不能制约经血，导致经血
妄行。

常见的病因是肾虚、血热、血瘀等，其中肾虚
是根本内因、热扰冲任是主要病理机制、
瘀血是主要病理产物、
肾-天癸-冲任-胞宫生殖轴功能失调是其发病的实质［18-23］
，基于上述病因病机，应在功血的临床辨证论治中遵循“塞流、澄源、复旧”治法。

本实验在验证花仙宫血胶囊止血的同时采用抗炎实验，观察其是否具有改善继发感染等作用，以期证明花仙宫血胶囊的多靶点防治功血作用。

课题组采用药物流产常用药物米非司酮与米索前列醇，制备功血模型，临床表现为阴道不规则出
血。

研究结果表明，花仙宫血胶囊低、
中、高剂量组均能显著减少功血模型大鼠阴道出血量，且随着剂量的增加出血量随之减少。

通过本实验表明，花仙宫血胶囊能够显著减少药物流产后子宫出血
量。

同时还采用两种致炎症模型，验证花仙宫血胶囊的抗炎作用。

实验研究结果表明，花仙宫血胶囊
能够明显减少功血模型大鼠子宫出血量，
降低二甲苯致小鼠耳肿胀，
降低冰醋酸对小鼠毛细血管的通透性，证实该方具有良好的止血与抗炎作用。

参考文献
［1］PITKIN J.Dysfunctional uterine bleeding ［J ］.BMJ ，2007,
334(7603):1110-1111.
［2］陈桂清，
李成志.功能失调性子宫出血的发病机制及治疗进展［J ］.医学综述，2015，21(3):390-392.
［3］FARRELL E.Dysfunctional uterine bleeding ［J ］.Aust
Fam hysician ，2004，3(11):906-908.
［4］张卉.正本清源汤联合米非司酮治疗围绝经期功能性子宫
出血45例［J ］.西部中医药，2018，31(4):90-92.
［5］李效兰.中西医结合治疗更年期功能性子宫出血40例［J ］.
西部中医药，2013，26(1):93-94.
［6］袁秀芳.左归丸治疗绝经期功能性子宫出血92例［J ］.西部
中医药，2014，27(8):69-70.
［7］刘婷.基于META 分析功能失调性子宫出血文献评价及临床
研究试验方案建立［D ］.长沙：湖南中医药大学，2008.［8］王晓东，赵军宁，
张白嘉，等.药物致早孕大鼠子宫出血模型的建立［J ］.中国药理学通报，1999，15(2):182-184.［9］郭珍，李蕾，
刘静，等.头痛宁胶囊对小鼠镇痛抗炎作用的实验研究［J ］.陕西中医，2015，36(11):1564-1565.
［10］李效振，贾书红，
张东升，等.中药复方宫炎净不同溶剂提取物对小鼠耳廓肿胀及毛细血管通透性的影响［J ］.西北农业学报，2014，23(2):21-25.
［11］李江，罗昱澜，童东锡，等.三叶青藤醇提物对小鼠腹腔毛细
血管通透性的影响［J ］.华夏医学，2013，26(1):9-10.［12］薛强，罗莹，许小林.宽筋藤提取物对小鼠抗炎作用的实验
研究［J ］.右江医学，2014，42(3):285-287.
［13］张利.中医治疗血瘀型崩漏研究进展［J ］.云南中医中药杂
志，2014，35(2):65-66.
［14］章轶立.中医药治疗功能性子宫出血［J ］.长春中医药大学
学报，2012，28(5):841-843.
［15］JENSEN J T ，LLEFEBVRE P ，ALIBERTE F ，et al.Cost bur-den and treatment patterns associated with manage-ment of heavy menstrual bleeding ［J ］.J Women's Health (Larchmt)2012，21(5):539-547.
［16］COTE I ，JACOBS P ，CUMMING D.Work loss associated with
increased menstrual loss in the United States ［J ］.Obstet Gynecol ，2002，100(4):683-687.
［17］BRADLEY L D ，GUEYE N A.The medical management of
abnormal uterine bleeding in reproductive-aged women ［J ］.Am J Obstet Gynecol ，2016，214(1):31-44.
［18］唐玉珠，金季玲.金季玲教授治疗无排卵型功能性子宫出血
经验介绍［J ］.新中医，2006，38(11):13-14.
［19］解月波，胥受天.胥受天老中医对功血病因病机的探析［J ］.
陕西中医，2009，30(5):579-609.
［20］陈彩云，熊辅信.导师熊辅信治疗功能性子宫出血经验［J ］.
云南中医中药杂志，2008，29(4):1-2.
［21］李雯，朱雪琼，池丽芳，等.辨证分型治疗无排卵型功血的临
床研究与探讨［J ］.中华中医药学刊，2009，27(4):810-812.［22］严谨，贺丰杰.贺丰杰教授治疗血瘀型崩漏经验［J ］.现代中
医药，2014，34(5):6-8.
［23］李绍林.功能性子宫出血的中医病机及治疗思路探析［J ］.
世界中西医结合杂志，2017，12(9):1185-1188.
收稿日期：2019-07-25
*基金项目：陕西省2012年度自然科学基础研究(2012JM4016)。

作者简介：岳明(1983—)，女，硕士学位，主管中药师。

研究方
向：医院制剂质量控制及药效学研究。

△通讯作者：仝敏(1972—)，女，副主任药师。

研究方向：临床药学。

药理研究。