AEG-1在胃癌组织中的表达及意义研究

AEG-1在胃癌组织中的表达及意义研究
刘福华;许珂;何池友
【摘要】采用免疫组化Maxvision法检测AEG-1在胃癌组织中的表达。

通过肿瘤微血管内皮标志物(CD34)标记胃癌新生微血管密度(MVD)。

结果AEG-1在胃癌组织中高表达，其表达水平与胃癌的患者性别、年龄、肿瘤大小无关，与胃癌淋巴结转移和分化程度有关。

AEG-1的表达与胃癌微血管密度呈正相关关系。

AEG-1高表达与胃癌不良生物学行为有关，其可能促进胃癌微血管的生成。

【期刊名称】《现代诊断与治疗》
【年(卷),期】2015(000)007
【总页数】2页(P1525-1526)
【关键词】胃癌;AEG-1;微血管生成;免疫组化
【作者】刘福华;许珂;何池友
【作者单位】彭泽县疾病预防控制中心，江西彭泽 332700;彭泽县疾病预防控制中心，江西彭泽 332700;彭泽县人民医院，江西彭泽332700
【正文语种】中文
【中图分类】R735.2
实体肿瘤的生物侵袭性对自身微血管的生成能力具有很大的依赖性［1］，故许多与血管生成有关的调节因子参与了肿瘤的发生发展过程。

已有研究证实，微血管生成与胃癌的不良生物学行为和不良预后有关［2］。

AEG-1(Astrocyte elevated gene-1)最初是在胶质细胞中发现能被HIV-1感染和TNFα刺激诱导高表达的基
因［3］。

目前有大量的实验证实，AEG-1是一种多功能基因，具有调节多种肿瘤细胞的凋亡、增殖、耐药、上皮简直转化和微血管生成能力［3］，与肿瘤的侵袭转移及不良预后显著相关。

目前，关于AEG-1与胃癌微血管生成的关系尚未见报道，本实验通过检测AEG-1在胃癌组织中的表达情况，进而分析起表达与胃癌微血管密度和不良生物学行为的关系，从而揭示AEG-1在胃癌组织中的表达情况及其意义。

报道如下。

1.1 一般资料收集2010～2014年侵润性胃癌标本作为研究对象，标本均来至彭泽县人民医院手术切除并经病理检查证实。

其中男28例，女12例，年龄30～70（平均48）岁。

1.2 试剂兔抗人浓缩型AEG-1多克隆抗体购自英国Abcam公司，Maxvision二抗和鼠抗人CD34单克隆抗体(MAB-0034)试剂盒均购自福建省福州迈新公司。

1.3 免疫组化采用免疫组化Maxvision法检测AEG-1的基因表达。

标本石蜡切片3～5μm厚，脱蜡、水洗后，柠檬酸热修复，3%H2O2处理，PBS漂洗后，切片滴加鼠抗人CD34单克隆抗体50μl，室温下放置3h，PBS漂洗3次后，每片加50μl的Maxvision二抗，置于室温下0.5h，漂洗后加DAB(3,3-二氨基联苯胺显色液)显色，采用苏木精复染，中性树胶封片固定。

以PBS代替一抗做阴性对照。

AEG-1基因表达蛋白以胞质呈现棕黄色颗粒为阳性。

选取肿瘤阳区性表达最强的高倍镜视野。

运用图像分析软件测量平均光密度（Mean density,MD）值。

同等条件下，图片测量2次取MD的均数，为该视野的AEG-1表达强度。

最后以同一切片的4个视野测定的MD均数，作为该片的单样本组织中AEG-1表达的平均表达强度。

1.4 Weinner［4］计数微血管密度（Microvascular density，MVD）的测定在400×镜下计数4个不同视野中CD34阳性的微血管数量，均值作为MVD值。

1.5 统计学方法应用SPSS 17.0统计软件数据处理，AEG-1的值采用（s）表示，
各指标组间表达差异采用t检验，相关性分析采用Pearson Correlation相关分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2.1 胃癌和癌旁组织中AEG-1的表达情况及关系胃癌组织中AEG-1阳性表达，
胞质呈现棕黄色颗粒。

AEG-1在胃癌组织中呈现高表达。

见表1，图1、2。

2.2 AEG-1阳性表达与胃癌临床病理的关系 AEG-1 AEG-1在胃癌组织中高表达，与患者性别、年龄、肿瘤大小无镜特征［J］.山西医药杂志,2007,36(7)：1679-1681.
［5］沈志祥．上消化道出血的病因分类［J］．中国实用内科杂志，1998，18 (1)：3.
［6］王仁云.罗非昔布的药理及临床研究［J］.中国新药杂志,2000,9(9)：601-604.
［7］王世卿,张锦辉.非甾体类抗炎药致胃肠道损伤1256例分析［J］.中国误诊学杂志,2003,3(1)：40.
［8］黄晓春.非甾体类药物导致相关性溃疡的内镜特点探析［J］.中国实用医
药,2013,8(5)：161-162.
［9］潘信良.非甾体类药物对消化性溃疡影响的临床观察［J］.中外医
疗,2012,31(15)：141-142.关，与胃癌的淋巴结转移及癌组织分化程度有关。

低
分化癌AEG-1阳性表达显著高于高分化组。

见表2。

2.3 胃癌组织AEG-1的表达与MVD的关系胃癌中AEG-1的表达与MVD间相关系数r=0.472(P=0.003)。

胃癌组织中AEG-1的表达与MVD呈现正相关。

见图3。

星形胶质细胞上调基因(Astrocyte elevated gene-1，AEG-1)是2002年发现的
新基因。

该基因位于人8号染色体(8q22)，全长3611bp，包含12个外显子和
11个内含子。

AEG-1最早发现在胶质细胞中，能被HIV-1感染和TNF-α刺激诱
导高表达的基因，后来发现AEG-1在正常永生化的鼠胚胎纤维母细胞（CREF）中
的过表达能促使CREF发生恶性转化并促进CREF非锚定性生长和侵袭能力。

胃癌是严重影响人类健康的最常见消化道恶性肿瘤。

尽管目前随着多种肿瘤化疗药物的研制，使得临床上胃癌化疗方案、化疗效果取得显著的进展，但胃癌侵袭转移仍然是困扰临床治疗、导致患者预后不良的难题。

肿瘤的侵袭转移是一个多步骤、多因素共同作用的过程，肿瘤细胞自身基因表达分子机制的复杂变化，产生多种功能蛋白有助于肿瘤细胞侵袭、转移。

AEG-1是决定肿瘤转移后能否继续生存生长的相关因子之一，能通过激活NF-κB信号途径参与肿瘤细胞存活、凋亡、代谢、耐药等多种调节过程。

缺氧是实体肿瘤生长过程中常见的生长环境，NF-κB信号的激活可上调肿瘤组织HIF-1α的表达，HIF-1α进而调节下游靶基因VEGF、MMP2、Ang-1等表达，启动肿瘤强大的血管生成能力，以适应缺氧环境并快速生长，AEG-1可调节肿瘤血管生成能力。

本实验通过临床浸润性胃癌标本微血管密度检测和AEG-1蛋白表达检测，发现AEG-1高表达于胃癌癌组织，与胃癌的淋巴结转移和分化程度有关，且AEG-1的表达与胃癌新生微血管密度呈正相关关系。

这一结果提示，AEG-1的高表达与胃癌的不良生物学行为有关，可能参与胃癌癌微血管生成的调控过程。

关于AEG-1参与胃癌微血管生成调节的机制尚待进一步研究证实。

【相关文献】
［1］Carmeliet P,Jain RK.Angiogenesis in cancer and other diseases［J］.Nature，2000，407(6801)：249-257.
［2］Ai-Moundhri MS,Ai-Nabhani M,Burney IA,et al.Gastric cancer risk predisposition and prognostic significance of vascular endothelial growth factor(VEGF)gene polymorphisms-a case-control study in an Omani population［J］.Mol Carcinoq,2009,48(12)：1170-1176. ［3］Long M,Dong K,Gao P,et al.Overexpression of astrocyte-elevated gene-1 is associated with cervical carcinoma progression and angiogenesis［J］.Oncology reports,2013,30(3)：1414-1422.
［4］Weidner N,Folkman J,Pozza F,etal.Tumorangiogenesis：a new significant and independent prognostic indicator in early-stage breast carcinoma［J］.Journal of the National Cancer Institute,1992,84 (24)：1875-1887.。