诊断学-第二章溶贫8版
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• ATP合成减少，影响膜上钙-镁-ATP酶活性，使钙 沉积在细胞膜上，改变膜的柔韧性和变形性，在 血循环易于破坏。
自身溶血试验及其纠正试验
结果：均阳性，即溶血率>5% ，多者可
>50%
• G6PD缺陷 ： ＋ATP：可纠正
但不能纠至正常
＋G： 同上
•
PK缺陷 ： ＋ATP：可纠正
＋G： 不纠正
（一） 高铁血红蛋白还原试验
（一）抗人球蛋白试验 （ Coombs）
原理 ：
直接抗人球蛋白试验： 自身免疫性溶血性贫血（AIHA） 血清中有抗自身红细胞的不完全抗体，他与表面附有相应 抗原的红细胞结合，成为致敏红细胞，加入抗人球蛋白与 红细胞表面不完全抗体结合，使红细胞相互连接起来出现 凝集现象。来证实红细胞表面有不完全抗体。——抗人球 蛋白直接试验阳性
概念：红细胞在低渗盐溶液中发生膨胀破裂的特性 渗透脆性反映红细胞抵抗低渗溶液的能力。 脆性大=抗低渗液的能力小=容易破 脆性小=抗低渗液的能力大=不易破
临床意义:衰老的红细胞，遗传性球形红细胞增多症 其脆性特别大。
铁：Hb合成必需原料
体内过程：成人每天需20～30mg合成Hb，其中5%由食 物补充，95%来自体内铁（衰老红细胞被巨噬细胞吞噬破 坏，Hb分解释放的铁）的再利用。Fe3+需还原成Fe2+才能 被利用。
• 正常值：25~32天 • 51Cr同位素标记。 • 溶血性贫血时半衰期<15天，说明有溶血存在。
（六）Hb尿测定
红细胞代偿性增生的检查
网织红细胞计数 （无特异性）
• 血象 见图 • 骨髓象 见图
正常： 百分数0.5~1.5% 绝对值（24~84）×109/L
溶 贫 时 达 5~25% ， 甚 至 75% 以 上 。
2、脆性减低：缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血。
（三）自身溶血试验及其纠正试验
• 红细胞在37℃孵育48小时，其 间由于膜异常引起钠内流倾向 明 显 增 加 ， ATP 消 耗 过 多 ； 或 糖 酵 解 途 径 酶 缺 乏 所 引 起 ATP 生成不足等原因可导致溶血， 称为自身溶血试验。
• 在孵育时，加入葡萄糖或ATP 作为纠正物，观察溶血可否有 一定的纠正，称为纠正试验。
分类
（一）按病因和发病机制分类
• 红细胞内在缺陷：多为遗传疾病 • 红细胞外在因素损伤：均为后天获得性疾病
分类
(二)按溶血发生部位分类（RBC破坏场所）
血管内溶血 血管外溶血
血管内溶血：急性溶血
红细胞 破坏（血循环中）
游 离 血 红 蛋 白↑ 结合珠蛋白↓ 血红蛋白尿 含铁血黄素尿 高铁血红蛋白
一 溶血性贫血的筛查检测
（一） 血浆游离Hb测定（敏感）
• 正常值：<50mg/L
• 意义:血管内溶血时明显增加（60~650mg/L）
•
血管外溶血时正常
（二） 血清结合珠蛋白测定（Hp）
• 正常值：0.7~1.5g/L • 溶血存在时，Hp减少。以血管内溶血时减
低为显著。
（三）血浆高铁血红素清蛋白检测：
成人<1%，地中海贫血轻型少数RBC呈阳 性，重型阳性RBC明显增多。
（三）胎儿血红蛋白测定或HbF碱变性试验 在碱性溶液中， HbF不易变性沉淀，其他Hb在碱 性溶液中易变性沉淀，测定滤液中Hb含量，即HbF 含量。 成人<2%，新生儿55~85%, 1岁左右同成人 增高：β地中海贫血明显（80~90%）。急性白血 病、再障、红白血病、淋巴瘤轻度↑。
三、红细胞酶缺陷的检测
红细胞失去核和线位体，不含糖原，必须从血中吸 取葡萄糖以获得能量，红细胞内缺乏完整的有氧氧化酶 系统，不能进行有氧氧化。
无氧糖酵解（90％）—丙酮酸激酶 戊糖旁路途径（5％-10％）—葡萄糖-6-磷酸脱氢酶
G6PD和PK缺陷
• ATP合成减少时，红细胞膜上Na+-K + -ATP酶活 性减低，红细胞内钾丧失而钠增加，易在单核-巨 噬细胞系统内阻留和破坏。
• 不稳定血红蛋白病含小体的细胞百分率为 75%~84%。
• HbH病和化学物质中毒时也增高。（ G6PD缺乏 症，NADPH减少时，红细胞内还原型谷胱甘肽减 少，高铁血红蛋白增高，形成变性珠蛋白小体）
Heinz Body Haemolytic Anaemia
G6PD deficiency is the most common enzymopathy causing hereditary haemolytic anaemia.
咬合形细胞 、 盔形红细胞
Heinz bodies
水泡细胞 Blister cell
(4)G6PD荧光斑点试验和活性测定
G6P
G-6-PD
6-PGA
G-6-PD
核酸-5-磷酸
NADP+
NADPH
NADP+
NADPH
•NADPH在紫外线照射下会发出荧光 •NADPH的吸收峰在波长340nm处，可通过单位时间
•红细胞 •破坏（脾脏） 珠蛋白
正常红细胞代谢
单核巨噬细胞系统
循环血液
血红蛋白
红细胞
非结合胆红素
与葡萄糖醛酸结合
结合胆红素
门静脉
尿胆原
尿胆原
尿胆素 粪胆原
溶血性黄疸发生机理示意图
单核巨噬细胞系统 血红蛋白
循环血液 红细胞
非结合胆红素
与葡萄糖醛酸结合
结合胆红素
门静脉 尿胆原
尿胆原
尿胆素 粪胆原
三 、实验室检查
（一）血红蛋白电泳检测：
醋酸纤维膜电泳法，检查有无异常血红 蛋白区带。
诊断地中海贫血
+
异常HB带
—
醋酸纤维蛋白膜电泳
临床意义：
①HbA2↑：β-地中海贫血。恶贫、巨贫轻 度↑。 ②HbA2↓：缺铁、铁粒幼红细胞贫血。 （二）胎儿Hb酸洗脱试验 HbF抗酸能力较强，不易被酸洗脱。 血片置酸性缓冲液保湿一定时间。含HbF 的红细胞不被洗脱，再用伊红染色呈鲜红 色
红细胞膜缺陷的检验
红细胞渗透脆性试验 红细胞孵育渗透脆性试验 自身溶血试验及纠正试验
（一）红细胞渗透脆性试验
检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液的抵抗力
主要取决于红细胞表面积与其体积之比。 表面积大而体积小对低渗盐水抵抗力较大（脆性较小）， 反之抵抗力较小（脆性增加）。
等体积的血液加入一系列的低 渗NaCl溶液中; 达到平衡; 高速离心并测定光密度. 大多数正常RBC在NaCl浓度 约 0.50%时开始结构破坏. 当盐浓度进一步降低 渗漏和
G-6-PD
G-6-PD
G6P
NADP+
6-PGA
NADPH
NADP+
核酸-5-磷酸
NADPH
•NADPH是高铁血红蛋白还原酶和谷胱甘 肽还原酶的辅酶。
G6PD缺陷 •NADPH减少时，高铁血红蛋白和谷胱甘 肽还原下降。
参考值：高铁血红蛋白还原率>75% 高铁血红蛋白0.3-1.3g/L
G6PD缺陷—高铁血红蛋白还原率明显下降
白蛋白
返回
free Hb (a2b2 tetramers)
Hb尿
Hb
Hp
dimers
肾脏
肝
含铁血黄素尿
高铁Hb
HpHb complex
globin ferriheme (Fe3+)
binds to hemopexin & albumin
血管外溶血：慢性溶血
•血红素
卟啉
铁
游离胆红素↑
尿胆原↑ 粪胆原↑
生成的NADPH的量来测定G-6-PD活性。 •正常人有很强荧光,酶活性为（4.97±1.43）U/gHb •G-6-PD缺陷者荧光很弱或无荧光 •杂合子或某些G-6-PD变异者则可能有轻到中度荧光
(5) PK荧光斑点试验和活性测定
PK PEP
ADP ATP
LD
丙酮酸
乳酸
NADH NAD
• 标记荧光于NADH上，此时有荧光的NADH变为无荧光的NAD • 正常人PK活性斑点在20钟内消失,酶活性15.1±1.99 U/gHb • 荧光斑点不消失或时间延长说明PK活性缺乏 • 中间缺乏（杂合子）时，荧光25min~60min消失 • 严重缺乏（纯合子）时，荧光60min不消失。
参考值： • 正常人轻微溶血，溶血度
<3.5%； • 加葡萄糖、ATP溶血明显纠正，
溶血度<1%。
临床意义
1、遗传性球形红细胞增多症时，溶血明显增加，加 葡萄糖、ATP溶血明显纠正。
2、Ⅰ型先天性非球形细胞性HA G6PD缺陷 ： ＋ATP：可纠正 但不能纠至正常 ＋G： 同上
3、Ⅱ型先天性非球形细胞性HA PK缺陷 ： ＋ATP：可纠正 ＋G： 不纠正
（三）变性珠蛋白小体生成试验
37℃1~2h
受检RBC＋乙酰苯肼
作活体染色（甲基紫）
有变性珠蛋白小体，则膜上形成紫黑色颗粒
• 计算含5个及以上珠蛋白小体的红细胞的百分率 • 正常人含5个及以上珠蛋白小体的红细胞一般小于
30%
Hale Waihona Puke 见图• G6PD缺乏症常高于45%，故可作为G6PD缺乏的 筛检试验。
• 还原型谷胱甘肽缺乏症也增高。
Cabot’s ring
嗜多色性红细胞
Howell-Jolly body
嗜碱点彩红细胞
骨髓象
• 幼红细胞显著增生， 以中幼和晚幼红细 胞最多，核分裂象 多见。
二 红细胞膜缺陷的检测
• 红细胞膜上的蛋白（膜蛋白带Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、 Ⅳ1、 Ⅳ2、收缩蛋白、骨架蛋白、功能蛋白 ） 的数量或结构发生变化，出现形态和功能异常， 发生溶血性贫血。
红细胞的可塑变形性
(plastic deformation）
正常红细胞在外力作用下具有变形的能力， 称为 可塑变形性。
变形能力的大小与红细胞的形态、膜特性及内容物 的性质和量有关。
例如：球形红细胞；膜弹性降低；Hb变性或浓度 过高，粘度增高都可使红细胞变形性下降。
渗透脆性(osmotic fragility)
溶血增加.
正常渗透脆性
HS时低渗溶液中的 异常溶血
参考值 开始溶血：0.42%~0.46%（4.2~4.6g/L）NaCI
完全溶血：0.28%~0.34%（2.8~3.4g/L）NaCI
临床意义 开始溶血＞0.50％、完全溶血＞0.38％ 为脆性增高
（1）脆性增高 遗传性球形红细胞增多症 （2）脆性减低 小细胞低色素性贫血：海洋性贫
四 珠蛋白生成异常的检测
• 血红蛋白由珠蛋白和血红素构成，珠蛋白分子由 两对肽链组成，一对是α链，另一对是非α链（β、 γ、δ），正常成人血红蛋白有3种：HbA(α2β2)、 HbA2 (α2 δ2)、HbF(α2 γ2)。
• 珠蛋白异常分为两大类，一类是某个肽链合成量 减少，即地中海贫血（ α、β ），另一类是多肽 链的结构发生质的改变，即异常血红蛋白病。
进入血液的铁与转铁蛋白结合被运送到幼红细胞，来合成 血红蛋白。
临床：造血功能增强而供铁不足（婴幼儿、孕妇、乳母）， 铁吸收利用障碍（胃酸、VitC缺乏)或铁丢失过多（慢性失 血）→缺铁性贫血（小细胞低色素性贫血）。可口服硫酸 亚铁补充铁盐。
红细胞的破坏
平均寿命约为120天。90%的衰老红细胞在脾 和骨髓等处被巨噬细胞吞噬（血管外破坏） ， 吞噬后释放出的铁、氨基酸被重新利用，而脱 铁血红素转变为胆色素随粪或尿排出体外。此 外，10％的衰老红细胞在血管内破坏，游离血 红蛋白与结合珠蛋白结合被肝摄取。
• 遗传缺陷—遗传性球形、椭圆形、口形红细胞增多 症。细胞在脾脏清除，属于血管外溶血。
• 后天获得性红细胞膜缺陷—阵发性睡眠性血红蛋白 尿, 膜上糖化肌醇磷脂（ GPI ）锚连蛋白异常。为慢 性血管内溶血。
Normal
细胞膜 细胞骨架
Hereditary spherocytosis
膜脂质丢失 = 变形能力下降 = 脾清除率增加
血、缺铁性贫血
（二）红细胞孵育渗透脆性试验
原理：37℃孵育24小时，细胞内葡萄糖消耗增加，
ATP减少，钠离子泵出减少，细胞膨胀脆性增高 。
参考值 未孵育 50%溶血4~4.45g/L 孵育 50%溶血4.65~5.9g/L
意义 ：
1、脆性增高：遗传性球形红细胞增多症、遗传性椭 圆形细胞增多症、遗传性非球形细胞溶血性贫血。
（四）HbA2定量测定：1.1~3.2% 临床意义同Hb电泳
（五）限制性内切酶谱分析： 意义：Hb病的基因诊断。
五 自身免疫性 溶血性贫血检测
自身免疫性溶血性贫血
（autoimmune hemolytic anemia AIHA）
是体内免疫发生异常，产生自身抗体或（和） 补体。结合在RBC膜上， RBC 易被单核－巨噬 细胞系统所吞噬，RBC破坏加速而引起一组溶血 性贫血。
正常人： 阴性
阳性：严重血管内溶血。
生化法—高血红素清蛋白与硫化氨形成铵血色原，光 谱仪观测在558nm处有一吸收光带
电泳法—醋酸纤维膜电泳，出现一条高铁血红素清蛋 白带
（四）尿含铁血黄素试验（Rous test)
• 铁离子在酸化的低铁氰化钾溶液中生成蓝色的铁 氰化铁，即普鲁士蓝反应。
（五） RBC寿命测定
自身溶血试验及其纠正试验
结果：均阳性，即溶血率>5% ，多者可
>50%
• G6PD缺陷 ： ＋ATP：可纠正
但不能纠至正常
＋G： 同上
•
PK缺陷 ： ＋ATP：可纠正
＋G： 不纠正
（一） 高铁血红蛋白还原试验
（一）抗人球蛋白试验 （ Coombs）
原理 ：
直接抗人球蛋白试验： 自身免疫性溶血性贫血（AIHA） 血清中有抗自身红细胞的不完全抗体，他与表面附有相应 抗原的红细胞结合，成为致敏红细胞，加入抗人球蛋白与 红细胞表面不完全抗体结合，使红细胞相互连接起来出现 凝集现象。来证实红细胞表面有不完全抗体。——抗人球 蛋白直接试验阳性
概念：红细胞在低渗盐溶液中发生膨胀破裂的特性 渗透脆性反映红细胞抵抗低渗溶液的能力。 脆性大=抗低渗液的能力小=容易破 脆性小=抗低渗液的能力大=不易破
临床意义:衰老的红细胞，遗传性球形红细胞增多症 其脆性特别大。
铁：Hb合成必需原料
体内过程：成人每天需20～30mg合成Hb，其中5%由食 物补充，95%来自体内铁（衰老红细胞被巨噬细胞吞噬破 坏，Hb分解释放的铁）的再利用。Fe3+需还原成Fe2+才能 被利用。
• 正常值：25~32天 • 51Cr同位素标记。 • 溶血性贫血时半衰期<15天，说明有溶血存在。
（六）Hb尿测定
红细胞代偿性增生的检查
网织红细胞计数 （无特异性）
• 血象 见图 • 骨髓象 见图
正常： 百分数0.5~1.5% 绝对值（24~84）×109/L
溶 贫 时 达 5~25% ， 甚 至 75% 以 上 。
2、脆性减低：缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血。
（三）自身溶血试验及其纠正试验
• 红细胞在37℃孵育48小时，其 间由于膜异常引起钠内流倾向 明 显 增 加 ， ATP 消 耗 过 多 ； 或 糖 酵 解 途 径 酶 缺 乏 所 引 起 ATP 生成不足等原因可导致溶血， 称为自身溶血试验。
• 在孵育时，加入葡萄糖或ATP 作为纠正物，观察溶血可否有 一定的纠正，称为纠正试验。
分类
（一）按病因和发病机制分类
• 红细胞内在缺陷：多为遗传疾病 • 红细胞外在因素损伤：均为后天获得性疾病
分类
(二)按溶血发生部位分类（RBC破坏场所）
血管内溶血 血管外溶血
血管内溶血：急性溶血
红细胞 破坏（血循环中）
游 离 血 红 蛋 白↑ 结合珠蛋白↓ 血红蛋白尿 含铁血黄素尿 高铁血红蛋白
一 溶血性贫血的筛查检测
（一） 血浆游离Hb测定（敏感）
• 正常值：<50mg/L
• 意义:血管内溶血时明显增加（60~650mg/L）
•
血管外溶血时正常
（二） 血清结合珠蛋白测定（Hp）
• 正常值：0.7~1.5g/L • 溶血存在时，Hp减少。以血管内溶血时减
低为显著。
（三）血浆高铁血红素清蛋白检测：
成人<1%，地中海贫血轻型少数RBC呈阳 性，重型阳性RBC明显增多。
（三）胎儿血红蛋白测定或HbF碱变性试验 在碱性溶液中， HbF不易变性沉淀，其他Hb在碱 性溶液中易变性沉淀，测定滤液中Hb含量，即HbF 含量。 成人<2%，新生儿55~85%, 1岁左右同成人 增高：β地中海贫血明显（80~90%）。急性白血 病、再障、红白血病、淋巴瘤轻度↑。
三、红细胞酶缺陷的检测
红细胞失去核和线位体，不含糖原，必须从血中吸 取葡萄糖以获得能量，红细胞内缺乏完整的有氧氧化酶 系统，不能进行有氧氧化。
无氧糖酵解（90％）—丙酮酸激酶 戊糖旁路途径（5％-10％）—葡萄糖-6-磷酸脱氢酶
G6PD和PK缺陷
• ATP合成减少时，红细胞膜上Na+-K + -ATP酶活 性减低，红细胞内钾丧失而钠增加，易在单核-巨 噬细胞系统内阻留和破坏。
• 不稳定血红蛋白病含小体的细胞百分率为 75%~84%。
• HbH病和化学物质中毒时也增高。（ G6PD缺乏 症，NADPH减少时，红细胞内还原型谷胱甘肽减 少，高铁血红蛋白增高，形成变性珠蛋白小体）
Heinz Body Haemolytic Anaemia
G6PD deficiency is the most common enzymopathy causing hereditary haemolytic anaemia.
咬合形细胞 、 盔形红细胞
Heinz bodies
水泡细胞 Blister cell
(4)G6PD荧光斑点试验和活性测定
G6P
G-6-PD
6-PGA
G-6-PD
核酸-5-磷酸
NADP+
NADPH
NADP+
NADPH
•NADPH在紫外线照射下会发出荧光 •NADPH的吸收峰在波长340nm处，可通过单位时间
•红细胞 •破坏（脾脏） 珠蛋白
正常红细胞代谢
单核巨噬细胞系统
循环血液
血红蛋白
红细胞
非结合胆红素
与葡萄糖醛酸结合
结合胆红素
门静脉
尿胆原
尿胆原
尿胆素 粪胆原
溶血性黄疸发生机理示意图
单核巨噬细胞系统 血红蛋白
循环血液 红细胞
非结合胆红素
与葡萄糖醛酸结合
结合胆红素
门静脉 尿胆原
尿胆原
尿胆素 粪胆原
三 、实验室检查
（一）血红蛋白电泳检测：
醋酸纤维膜电泳法，检查有无异常血红 蛋白区带。
诊断地中海贫血
+
异常HB带
—
醋酸纤维蛋白膜电泳
临床意义：
①HbA2↑：β-地中海贫血。恶贫、巨贫轻 度↑。 ②HbA2↓：缺铁、铁粒幼红细胞贫血。 （二）胎儿Hb酸洗脱试验 HbF抗酸能力较强，不易被酸洗脱。 血片置酸性缓冲液保湿一定时间。含HbF 的红细胞不被洗脱，再用伊红染色呈鲜红 色
红细胞膜缺陷的检验
红细胞渗透脆性试验 红细胞孵育渗透脆性试验 自身溶血试验及纠正试验
（一）红细胞渗透脆性试验
检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液的抵抗力
主要取决于红细胞表面积与其体积之比。 表面积大而体积小对低渗盐水抵抗力较大（脆性较小）， 反之抵抗力较小（脆性增加）。
等体积的血液加入一系列的低 渗NaCl溶液中; 达到平衡; 高速离心并测定光密度. 大多数正常RBC在NaCl浓度 约 0.50%时开始结构破坏. 当盐浓度进一步降低 渗漏和
G-6-PD
G-6-PD
G6P
NADP+
6-PGA
NADPH
NADP+
核酸-5-磷酸
NADPH
•NADPH是高铁血红蛋白还原酶和谷胱甘 肽还原酶的辅酶。
G6PD缺陷 •NADPH减少时，高铁血红蛋白和谷胱甘 肽还原下降。
参考值：高铁血红蛋白还原率>75% 高铁血红蛋白0.3-1.3g/L
G6PD缺陷—高铁血红蛋白还原率明显下降
白蛋白
返回
free Hb (a2b2 tetramers)
Hb尿
Hb
Hp
dimers
肾脏
肝
含铁血黄素尿
高铁Hb
HpHb complex
globin ferriheme (Fe3+)
binds to hemopexin & albumin
血管外溶血：慢性溶血
•血红素
卟啉
铁
游离胆红素↑
尿胆原↑ 粪胆原↑
生成的NADPH的量来测定G-6-PD活性。 •正常人有很强荧光,酶活性为（4.97±1.43）U/gHb •G-6-PD缺陷者荧光很弱或无荧光 •杂合子或某些G-6-PD变异者则可能有轻到中度荧光
(5) PK荧光斑点试验和活性测定
PK PEP
ADP ATP
LD
丙酮酸
乳酸
NADH NAD
• 标记荧光于NADH上，此时有荧光的NADH变为无荧光的NAD • 正常人PK活性斑点在20钟内消失,酶活性15.1±1.99 U/gHb • 荧光斑点不消失或时间延长说明PK活性缺乏 • 中间缺乏（杂合子）时，荧光25min~60min消失 • 严重缺乏（纯合子）时，荧光60min不消失。
参考值： • 正常人轻微溶血，溶血度
<3.5%； • 加葡萄糖、ATP溶血明显纠正，
溶血度<1%。
临床意义
1、遗传性球形红细胞增多症时，溶血明显增加，加 葡萄糖、ATP溶血明显纠正。
2、Ⅰ型先天性非球形细胞性HA G6PD缺陷 ： ＋ATP：可纠正 但不能纠至正常 ＋G： 同上
3、Ⅱ型先天性非球形细胞性HA PK缺陷 ： ＋ATP：可纠正 ＋G： 不纠正
（三）变性珠蛋白小体生成试验
37℃1~2h
受检RBC＋乙酰苯肼
作活体染色（甲基紫）
有变性珠蛋白小体，则膜上形成紫黑色颗粒
• 计算含5个及以上珠蛋白小体的红细胞的百分率 • 正常人含5个及以上珠蛋白小体的红细胞一般小于
30%
Hale Waihona Puke 见图• G6PD缺乏症常高于45%，故可作为G6PD缺乏的 筛检试验。
• 还原型谷胱甘肽缺乏症也增高。
Cabot’s ring
嗜多色性红细胞
Howell-Jolly body
嗜碱点彩红细胞
骨髓象
• 幼红细胞显著增生， 以中幼和晚幼红细 胞最多，核分裂象 多见。
二 红细胞膜缺陷的检测
• 红细胞膜上的蛋白（膜蛋白带Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、 Ⅳ1、 Ⅳ2、收缩蛋白、骨架蛋白、功能蛋白 ） 的数量或结构发生变化，出现形态和功能异常， 发生溶血性贫血。
红细胞的可塑变形性
(plastic deformation）
正常红细胞在外力作用下具有变形的能力， 称为 可塑变形性。
变形能力的大小与红细胞的形态、膜特性及内容物 的性质和量有关。
例如：球形红细胞；膜弹性降低；Hb变性或浓度 过高，粘度增高都可使红细胞变形性下降。
渗透脆性(osmotic fragility)
溶血增加.
正常渗透脆性
HS时低渗溶液中的 异常溶血
参考值 开始溶血：0.42%~0.46%（4.2~4.6g/L）NaCI
完全溶血：0.28%~0.34%（2.8~3.4g/L）NaCI
临床意义 开始溶血＞0.50％、完全溶血＞0.38％ 为脆性增高
（1）脆性增高 遗传性球形红细胞增多症 （2）脆性减低 小细胞低色素性贫血：海洋性贫
四 珠蛋白生成异常的检测
• 血红蛋白由珠蛋白和血红素构成，珠蛋白分子由 两对肽链组成，一对是α链，另一对是非α链（β、 γ、δ），正常成人血红蛋白有3种：HbA(α2β2)、 HbA2 (α2 δ2)、HbF(α2 γ2)。
• 珠蛋白异常分为两大类，一类是某个肽链合成量 减少，即地中海贫血（ α、β ），另一类是多肽 链的结构发生质的改变，即异常血红蛋白病。
进入血液的铁与转铁蛋白结合被运送到幼红细胞，来合成 血红蛋白。
临床：造血功能增强而供铁不足（婴幼儿、孕妇、乳母）， 铁吸收利用障碍（胃酸、VitC缺乏)或铁丢失过多（慢性失 血）→缺铁性贫血（小细胞低色素性贫血）。可口服硫酸 亚铁补充铁盐。
红细胞的破坏
平均寿命约为120天。90%的衰老红细胞在脾 和骨髓等处被巨噬细胞吞噬（血管外破坏） ， 吞噬后释放出的铁、氨基酸被重新利用，而脱 铁血红素转变为胆色素随粪或尿排出体外。此 外，10％的衰老红细胞在血管内破坏，游离血 红蛋白与结合珠蛋白结合被肝摄取。
• 遗传缺陷—遗传性球形、椭圆形、口形红细胞增多 症。细胞在脾脏清除，属于血管外溶血。
• 后天获得性红细胞膜缺陷—阵发性睡眠性血红蛋白 尿, 膜上糖化肌醇磷脂（ GPI ）锚连蛋白异常。为慢 性血管内溶血。
Normal
细胞膜 细胞骨架
Hereditary spherocytosis
膜脂质丢失 = 变形能力下降 = 脾清除率增加
血、缺铁性贫血
（二）红细胞孵育渗透脆性试验
原理：37℃孵育24小时，细胞内葡萄糖消耗增加，
ATP减少，钠离子泵出减少，细胞膨胀脆性增高 。
参考值 未孵育 50%溶血4~4.45g/L 孵育 50%溶血4.65~5.9g/L
意义 ：
1、脆性增高：遗传性球形红细胞增多症、遗传性椭 圆形细胞增多症、遗传性非球形细胞溶血性贫血。
（四）HbA2定量测定：1.1~3.2% 临床意义同Hb电泳
（五）限制性内切酶谱分析： 意义：Hb病的基因诊断。
五 自身免疫性 溶血性贫血检测
自身免疫性溶血性贫血
（autoimmune hemolytic anemia AIHA）
是体内免疫发生异常，产生自身抗体或（和） 补体。结合在RBC膜上， RBC 易被单核－巨噬 细胞系统所吞噬，RBC破坏加速而引起一组溶血 性贫血。
正常人： 阴性
阳性：严重血管内溶血。
生化法—高血红素清蛋白与硫化氨形成铵血色原，光 谱仪观测在558nm处有一吸收光带
电泳法—醋酸纤维膜电泳，出现一条高铁血红素清蛋 白带
（四）尿含铁血黄素试验（Rous test)
• 铁离子在酸化的低铁氰化钾溶液中生成蓝色的铁 氰化铁，即普鲁士蓝反应。
（五） RBC寿命测定