Infinity HE高清恒染系统在病理常规染色中的应用

Infinity HE高清恒染系统在病理常规染色中的应用
薛晓伟;王德田;李星奇
【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》
【年(卷),期】2014(000)009
【总页数】2页(P1072-1073)
【关键词】Infinity高清恒染系统;传统HE染色系统;HE染色;评分
【作者】薛晓伟;王德田;李星奇
【作者单位】中国医学科学院北京协和医院病理科，北京 100730;中国医学科学院北京协和医院病理科，北京 100730;中国医学科学院北京协和医院病理科，北京 100730
【正文语种】中文
【中图分类】R361+.2
在日常病理工作中，为保证HE染色的质量，一般染片1 500～1 800张需更换染液。

由于苏木精氧化持续等因素的存在，每张切片进行染色时试剂所处的状态不一致，也无法做到每张切片着色均一。

在相对固定的染色程序中寻找稳定性较高的染液，保证在一定染片数量范围内每张切片着色均一，成为病理工作者致力解决的问题之一。

本文就Infinity高清恒染系统在常规病理染色的稳定性进行评价。

1 材料与方法
1.1 材料取自北京协和医院病理科常规测试蜡块。

1.2 试剂与设备苏木精，Infinity HE高清恒染系统，徕卡RM2235轮转式石蜡切片机(德国)，徕卡AutoStainer XL自动染色机(德国)，徕卡CV5030全自动封片
机(德国)，酒精，二甲苯均为国产分析纯。

1.3 方法
1.3.1 染色在常规测试蜡块上连续切片数张，编号，随机分成两组，一组在Infinity高清恒染系统中进行染色，一组应用传统HE染色系统进行染色。

1.3.2 评分取每组的第1、500、1 000、1 500、2 000、2 500张切片的染色进
行单盲评分。

细胞核和细胞质染色评分标准如表1、2所示。

1.4 统计学分析所有数据以平均值±标准差表示，并用SPSS 11.5软件进行统计学分析。

表1 细胞核染色评分标准分值细胞核染色强度细胞核的分辨率核质共染0未着色
缺乏重1不充分低中2充分中轻3强高无
表2 细胞质染色评分标准分值细胞质染色强度结缔组织的染色强度核质分明0未
着色未着色无1不充分不充分轻2充分充分中3强强重
2 结果
使用Infinity高清恒染系统进行HE染色的切片，第1张(17.60±0.16)和第2
500(16.60±0.43)张染色较为恒定，无明显的变浅现象(图1、2)，且染色评分无明显差异(P>0.05)。

使用传统染色系统行HE染色的切片，随着染色切片数量的增加，着色逐渐变浅(图2)，且在第1张(17.50±0.17)和第1 500张(14.70±0.60)切片是评分差异有显著性(P<0.05，表3)。

表3 Infinity高清恒染系统与传统染色系统的染色得分组别Infinity高清恒染系统
传统染色系统第1张17.60±0.1617.50±0.17第500张17.50±0.2217.30±0.21
第1 000张17.20±0.2516.90±0.23第1 500张17.00±0.3914.70±0.60∗第2 000张16.70±0.3712.50±0.54∗∗第2 500张16.60±0.4310.70±0.45∗∗
n=10；*P<0.05，**P<0.01
3 讨论
苏木精-伊红染色简称HE染色，是病理常规染色中应用最为广泛的染色方法。

苏木精本身并没有染色能力，必须经过氧化成熟过程才能够进行染色。

目前病理科多采用在苏木精里添加氧化汞等氧化剂的方法对苏木精进行氧化，这种化学氧化方法虽极大地缩短了苏木精成熟的时间，但由于化学作用，苏木精在使用过程中仍不断的氧化，随着时间的延长，就会出现过氧化，导致苏木精对细胞核的选择性染色特异性消失而出现核质共染现象，同时还会不停地产生氧化膜和黑色结晶[1，2]。

另外，传统染色试剂中所使用的分化液为1%盐酸酒精，具有挥发性，浓度难以维持恒定，所以即便是在染完1 500～1 800张切片后及时更换试剂，也无法保证同一批次的第1张和最后1张切片的染色效果一致。

因此，使用传统试剂进行HE染色时，病理常规染色只能保证1 500～1 800张制片的染色质量稳定在一个范围，而不能保证染色效果的一致性。

本实验使用传统染色试剂组中，随着染色切片数目的增长，评分逐渐降低，第1 500张切片的染色评分与第1张切片的评分差异有显著性。

图1 经Infinity高清恒染系统的HE染色切片：A.第1张；B.第2 500张图2 经传统染色系统的HE染色切片：A.第1张；B.第1 500张
使用传统试剂要达到染色效果一致的目的，只能采用个性化的染色程序，但就目前的条件来说难以实现。

因此，采用一种稳定的染色试剂能够保证在恒定的染色程序条件下，保证染色的稳定性。

本实验使用Infinity高清恒染系统染色所得的染色切片第1张至第2 500张评分差异无显著性，在2 500张切片以内均能够保证较强的稳定性。

因此，将Infinity高清恒染系统应用于常规染色切片中可行，并且在2 500张切片
以内，Infinity高清恒染系统在常规病理染色中较传统染色试剂相比具有较强的稳定性。

但使用该系统染色的HE切片是否能够在存档过程中不褪色，需后续试验继续研究。

参考文献：
[1] 凌启波, 梁英杰. HE制片质控要求[J]. 临床与实验病理学杂志, 2005,21(4):333-4.
[2] 司明远. 基层医院如何制备优质病理切片[J]. 临床与实验病理学杂志, 2012,28(2):221.。