分子生物学笔
分子生物学论文通用4篇

分子生物学论文通用4篇分子生物学论文篇一1制定合理的带教计划,重点明确实习学生在本院实习分子生物学的时间为4周。
由于实习时间较短,带教老师应首先制定合理的带教计划,便于学生充分利用有限的时间掌握实习内容。
在制定带教计划的过程中,不仅要结合学科的大纲要求,还应结合历届学生的学习情况和实验室的基本情况,制定最合理、最贴近实际的带教计划。
由于本实验室开展的检验项目较多,而学生实习时间较短,实习内容不可能面面俱到,因此在带教计划中将带教内容分为4个类别,即熟练掌握、基本掌握、熟悉和了解。
例如,分子生物学实验室的分区制度、工作流程、乙型肝炎病毒DNA检测等纳入实习生应熟练掌握的内容。
有侧重点的带教可以让实习学生在有限的时间内牢固掌握常用检测项目的原理、操作方法、注意事项、临床意义等,有助于学生在以后的工作中进一步由点到面地进行分子生物学检验知识的学习。
2注重岗前教育,树立整体意识为引导实习学生转变角色,保证实习质量,岗前教育是必不可少的。
分子生物学实验室对设备、环境和操作人员有较高的要求,因此在实习学生进入分子生物学实验室前,应首先对其进行岗前教育,包括分子生物学实验室基本情况、分区制度及相关工作流程等。
并且要求学生实习前仔细阅读实验室管理文件和标准操作规程(SOP)文件,着重学习分子生物学实验室各区的工作制度、各项目检测操作规范、质量控制、生物安全防护及标本接收、处理和保存等内容,使学生对实验室工作有初步的认识。
学生进入实验室后,带教老师应首先引导实习学生按照区域流向制度依次参观各实验分区,系统地向其介绍各检验项目的检测原理及临床意义。
然后,根据带教计划的侧重点,选择常用检测项目,结合项目介绍主要相关仪器设备的工作原理、操作程序、日常保养及记录登记,让实习生树立整体意识,对实验室的工作有全面的了解。
3加强操作训练,培养质量控制理念分子生物学的发展速度较快,学生在校园内依靠有限的教学设备和较少的实验课时难以掌握分子生物学的基本技术。
考研分子生物学书籍

考研分子生物学书籍考研分子生物学书籍分子生物学是生物学中的一个重要分支,它研究生物体内发生的各种生物分子的结构、功能、相互关系以及它们之间的相互作用。
分子生物学作为生物科学的前沿领域,对于揭示生命的本质和生命过程中的基本规律具有重要意义。
对于广大考研生来说,学习分子生物学是考研生物学专业考试的必备内容。
在此,笔者将推荐几本优秀的考研分子生物学教材供考生参考。
第一本书是《分子生物学导论》(Introductory Molecular Biology)这是一本经典的教材,由美国著名生物学家维尔曼(Wilmanns)教授主编。
该书系统介绍了分子生物学的发展、基本概念、实验技术和研究方法,重点阐述了DNA、RNA、蛋白质的结构和功能,以及基因表达和调控的分子机制。
此外,该书还涵盖了基因组学、蛋白质组学、转录组学、基因工程等前沿课题,为考生提供了全面深入的学习材料。
第二本书是《分子生物学:细胞透视》(Molecular Biology: Cell Perspective)这本教材是美国纽约州立大学生物化学系主任科斯塔(Costa)教授编撰的,具有指导性强、易于理解的特点。
该书全面介绍了分子生物学的基本原理和实验技术,系统论述了DNA、RNA、蛋白质的结构和功能,以及细胞信号传导、凋亡、肿瘤等重要的分子生物学过程。
此外,该书还补充了最新的研究成果和发展趋势,对于学习分子生物学的考生很有参考价值。
第三本书是《分子生物学》(Molecular Biology)这本教材是中国科学院近代物理研究所优秀教师苏小红教授编著的,是国内较权威的分子生物学教材之一。
该书全面系统地介绍了分子生物学的基本知识和实验技术,包括DNA、RNA、蛋白质的结构和功能,基因组学、转录组学、蛋白质组学等前沿领域的研究进展。
此外,该书还重点强调了分子生物学与疾病的关系,阐述了分子生物学在疾病诊断和治疗中的应用。
对于考研生物学专业的考生来说,该书是一本不可多得的参考书。
分子生物学知识点总结

宛本人自己总结, 大家随便一看。
基因与基因组基因(gene): 储存有功能的蛋白质多肽链或RNA序列信息, 及表达这些信息所必须的全部核苷酸序列所构成的遗传单位。
1.顺式作用元件有: 启动子和上游启动子元件, 反应元件, 增强子, 沉默子, Poly加尾信号启动子: 有方向性, 转录起始位点上游, TA TA盒, B地贫, 与RNA聚合酶特异结合及启动转录上游启动子元件: TATA盒上游, 与反式作用因子结合, 调控基因转录效率。
CAAT盒, GC盒, CACA盒—B地贫反应元件: 与激活的信息分子受体结合, 调控基因表达增强子: 与反式作用因子结合, 基因表达正调控, 无方向性沉默子: 与反式作用因子结合, 基因表达负调控Poly加尾信号: 结构基因末端AA TAAA及下游富含GT或T区, 多聚腺苷酸化特异因子, 在3末端加200个A B地贫1.除逆转录病毒外, 通常为单倍体基因组。
逆转录病毒: 单股正链二倍体RNA, 三个结构基因, gag, pol, env, 5端甲基化帽, 3端poly加尾。
HIV免疫缺陷病毒, 白血病病毒, 肉瘤病毒感染细菌的病毒基因组与细菌相似, 基因连续, 感染真核细胞的病毒基因组与真核细胞相似, 有内含子, 基因不连续。
3.基因组连续:冠状病毒, 脊髓灰质炎病毒, 鼻病毒4.编码区占大部分原核生物基因组1.由一条环状双链DNA分子组成, 通常只有一个复制起点。
2.结构基因大多组成操纵子, 形成多顺反子(mRNA)3.非编码区主要是调控序列。
(转录终止区可有强终止子有反向重复序列, 形成茎环结构)4.存在可移动的DNA序列(转座因子:能够在一个DNA内或两个DNA间移动的DNA片段转座因子:插入序列, 转座子, 可转座的噬菌体, 转座作用的机制:复制性转座, 简单转座, 共整合体, 插入突变)5.编码区大于非编码区真核生物基因组1.有同源性的功能相关基因构成基因家族核酸序列相同, 核酸序列高度同源, 编码产物的功能或功能区相同, 假基因2.真核基因为断裂基因, 编码为单顺反子。
分子生物学与细胞生物学实验基本技术

分子生物学与细胞生物学实验基本技术2005-02实验一组织块培养法一、目的学习原代培养方法,从供体取得组织细胞后在体外进行的首次培养。
二、概述组织块培养法是常用的、简便易行和成功率较高的原代培养方法。
可以采用剪切法,即将组织块剪切成小块后,接种于培养瓶,组织小块贴壁24h或更长时间后,细胞就从组织四周游出。
但由于在反复剪切和接种过程中对组织块的损伤,并不是每个小块都能长出细胞。
用于组织块培养的培养瓶可根据不同细胞生长的需要作适当处理,如预先涂以胶原薄层,以利于上皮样细胞等的生长。
(本节以新生牛主动脉平滑肌培养为例)三、材料(一)仪器1.净化工作台2.恒温水浴箱3.冰箱(4℃、-20℃)4.倒臵相差显微镜5.培养箱(二)玻璃器皿1.培养皿(Φ100mm)2.吸管(弯头)3.烧杯(500ml、200ml、10ml)4.广口试剂瓶(500ml)5.玻璃瓶(250ml、100ml)6.培养瓶7.废液缸(三)塑料器皿1.吸头2.枪头3.胶塞4.EP管(四)其他物品1.微量加样枪2.眼科组织剪(直尖、弯)3.眼科组织镊(直、弯)4.12.5cm组织镊(无钩、1×2钩)5.25cm敷料镊(无钩)6.止血钳(18cm直纹式、12.5cm直纹式、弯纹式)7.解剖剪(五)试剂1.D-Hanks液2.小牛血清3.RPMI16404.双抗(青霉素、链霉素)5.1N HCl6.7.4%NaHCO3四、操作步骤1.取材:打开胸腔,无菌操作下取出主动脉胸段,浸到预先配制好的含双抗(500u/ml青、链酶素)的D-Hanks液中漂洗。
2.组织的冲洗、修剪:取出主动脉,用锋利的剪刀修剪除去周围组织,再用D-Hanks冲洗主动脉3次,除去血块及杂组织等。
3.平滑肌组织分离:纵向剖开主动脉,撕下主动脉内层,取主动脉中层的平滑肌组织,无血清RPMI1640漂洗3次。
4.剪切:将平滑肌组织用锋利的眼科剪反复剪切至剪成1mm3小块,在剪切过程中,可以适当向组织中滴加1~2滴培养液,以保持湿润。
分子生物学实验教学中DNA转化方法的简化

对 比 10mm l a I溶 液 和 5 a I 1 r ・ 0 o/ C C2 L 0mM C C2 0mM Ti 与 s
H Ip .) 液 对 感 受 态 细 胞 转 化 率 的影 响 。 C (H8 溶 O 1 转 化 效 率 的计 算 . 3
an ri经 热 击 转 化 后 计 算 感 受 态 细 胞 的 转 化 率 。 1. N .4 2 D A转 化 后 复 苏 时 间 的 影 响
大肠杆 菌 EelJ 0 菌 株为实 验室 保存 , . iM1 1 o 质粒 p h 5 Mc a 和
p MB为本 实 验 室 保 存 , 白胨 、 蛋 酵母 提 取 物 购 自 Sg a 司, im 公 N C, a I甘油 、 其他试剂均为国产分 析纯 。
1 材 料 和 方 法 11 材 料 .
6 0 m离 心 1 i。弃 除 l清 , 原 始培 养体 积 的 1 0 0r p 0r n a = 用 / 5 2的 0
m C C 1 r ・ 1p .) 液悬 浮 细胞 , 至冰 上5 M a 1 和 0mM T i HC (H8 溶 s 0 放 a , r n 进行第二次离心 。弃上清后 , i 悬浮细菌于原始培养体积的 1 /
试 剂 :. m l aI 5m l a1 含 有 p . 01 o/ C C 0 o/ C C。f L , L H8 0的 l 0
mm 1 r — C) 3 %甘 油 。 o/ Ti H 1、0 L s
将4 2℃热击后 的感受态细胞溶液 , 5 0 培养基 ,7 培 加 0 I 3 育 一段时 间后再进行 涂布 吲体 培养基 , 培养时 问为 0 3 ai、O 、0r n 6 an ri。研究复苏培养对感受态细胞转化率的影响。
分子生物学科耗材及仪器

分子生物学科耗材及仪器
以下是一些常见的分子生物学科耗材及仪器:
1. 实验耗材:
- 移液器和吸头:用于准确量取液体。
- 离心管和离心机:用于分离和沉淀细胞、核酸和蛋白质等。
- 培养皿和培养箱:用于细胞培养和微生物培养。
- PCR 管和 PCR 仪:用于聚合酶链式反应(PCR)实验。
- 电泳槽和电泳仪:用于核酸和蛋白质的电泳分离。
- 试剂瓶和移液器:用于储存和分配试剂。
- 一次性手套和实验服:用于保护实验人员的安全。
2. 实验仪器:
- 紫外可见分光光度计:用于测定核酸和蛋白质的浓度。
- 凝胶成像系统:用于观察电泳结果。
- 实时荧光定量 PCR 仪:用于定量检测基因表达。
- 离心机:用于分离和沉淀细胞、核酸和蛋白质等。
- 移液器:用于准确量取液体。
- 生物安全柜:用于处理危险的生物样本,提供安全的实验环境。
这些耗材和仪器是分子生物学实验中常用的工具,它们的选择和使用将取决于具体的实验需求和研究目的。
在进行分子生物学实验时,正确选择和使用合适的耗材及仪器是确保实验成功和结果准确性的重要因素。
(NEW)朱玉贤《现代分子生物学》(第5版)笔记和课后习题(含考研真题)详解

4.3 名校考研真题详解 第5章 分子生物学研究法(上)——DNA、RNA及蛋白质操作技术
5.1 复习笔记 5.2 课后习题详解 5.3 名校考研真题详解 第6章 分子生物学研究法(下)——基因功能研究技术 6.1 复习笔记 6.2 课后习题详解 6.3 名校考研真题详解 第7章 原核基因表达调控 7.1 复习笔记 7.2 课后习题详解 7.3 名校考研真题详解 第8章 真核基因表达调控 8.1 复习笔记 8.2 课后习题详解 8.3 名校考研真题详解
② T2噬菌体感染大肠杆菌实验
a.在分别含有35S和32P的培养基中培养大肠杆菌。
b.用上述大肠杆菌培养T2噬菌体,分别制备含35S的T2噬菌体和32P的
T2噬菌体。
c.分别用含35S的T2噬菌体和32P的T2噬菌体感染未被放射性标记的大 肠杆菌。
d.培养一段时间后,将混合液离心,检测子代噬菌体放射性。上清液 主要是噬菌体,沉淀物主要是大肠杆菌。
(4)基因组、功能基因组与生物信息学研究
基因组计划是一项国际性的研究计划,其目标是确定生物物种基因组所 携带的全部遗传信息,并确定、阐明和记录组成生物物种基因组的全部 DNA序列。
功能基因组学相对于测定DNA核苷酸序列的结构基因组学,其研究内容 是在利用结构基因组学丰富信息资源的基础上,应用大量的实验分析方 法并结合统计学和计算机分析方法来研究基因的表达、调控与功能,以 及基因间、基因与蛋白质之间和蛋白质与底物、蛋白质与蛋白质之间的 相互作用和生物的生长发育等规律。功能基因组学的研究目标是对所有 基因如何行使其职能从而控制各种生命现象的问题作出回答。
严格地说,重组DNA技术并不完全等于基因工程,因为后者还包括其他
可能使生物细胞基因组结构得到改造的体系。
分子生物学词汇P1

分子生物学词汇(P1)分子生物学词汇(Pl)分子生物学词汇(P1)p element p因子[果蝇的可动遗传因子,会造成杂种不育,可用作外源基因的载体]p nucleotide p核苷酸[见于免疫球蛋白及t细胞受体等基因,为重排中根据模板信息所插入]pacemaker起搏点,起搏器pacemaker enzyme 定步酶pachynema粗线期packaging 包装packaging ratio包装率[一条染色单体基本纤维的全长与dna 双螺旋的全长之比,反映dna分子的凝聚状态]packed填充的packed cellvolume收集细胞体积[用以表示培养物的相对增长率]paddle blender浆式捣碎器[利用往复运动的浆叶捣碎密封塑料袋中的材料]paedogenetic parthenogenesis 幼体孤雌生殖paired sib method同胞对照法pairing酉己对palindrome回文序列,回文结构palindromic sequence 回文序列palisade tissue 栅栏组织palytoxin岩沙海葵毒素pancreas 胰腺pancreastatin胰抑制素[可抑制胰岛素分泌]pancreatic 胰的pancreatin胰酶制剂pancreozymin促伊妹儿素panmixis随机交配panning 淘选panning technique淘选技术[如通过亲和层析纯化细胞]panose潘糖panoxadiol 人参二醇panoxatriol人参三醇pantetheine泛酰巯基乙胺pantothenate泛酸;泛酸盐、酯、根pantropic virus泛嗜性病毒papain木瓜蛋白酶papaverine 罂粟碱paper raft nursing technique纸桶保育技术[可用于培养单个植物细胞]papilla [植物]乳突毛;[动物]乳头papillomavirus乳头瘤病毒papovavirus孚L多空病毒parabasal body 副基粒paracasein副酪蛋白,衍酪蛋白paracentric inversion 臂内倒位parachromatin 副染色质paracodon副密码子[trna上被氨酰trna合成酶识别的碱基,与trna识别氨基酸有关]paracrine旁分泌paracrystal 次晶paracrystalline state 次晶态paradoxical sleep 异相睡眠paraffin imbedding 石蜡包埋法parafilm [商]石蜡膜,石蜡封口膜[american can公司的商标] paraformaldehyde低聚甲醛,仲甲醛,多聚甲醛parafuscin草履虫融膜蛋白paraglobulin副球蛋白paralbumin副蛋白,副清蛋白parallel平行的paralogous gene共生同源基因,平行进化同源基因paramagnetic 顺磁的paramecin草履虫素,草履虫蛋白paramecium 草履虫paramucin异粘液素paramucosin仲唾液蛋白paramutation 副突变paramylum原生动物糖paramyosin 副肌球蛋白paramyxovirus 副粘病毒paranemic joint平行汇接[由双链dna分子在重组区解旋而形成]paranemic spiral平行螺旋,反向双股螺旋pararosaniline碱性副品红parasexuality 准性生殖parasite寄生虫parasitism 寄生parasporal crystal 伴胞晶体parathion对硫磷parathyrin甲状旁腺素parathyroid gland 甲状旁腺paratope [抗原]互补位parenchyma [植物]薄壁组织;[动物]实质parental亲本的,亲代的parental imprinting亲本印记[配子发生过程中亲本基因的选择性差异表达]parental type亲本型[如用于描述子代性状]parental virus 亲代病毒parity宇称parkinson disease 帕金森病paromomycin巴龙霉素parotin腮腺素pars amorpha [核仁]无定形区pars fibrosa [核仁]纤维区pars granulosa [核仁]颗粒区parsnip yellow fleck virus 欧防风黄点病毒parthenocarpy 单性结实parthenogamy孤雌核配parthenogenesis孤雌生殖[雌体产生不需受精即可发育的卵子];孤雌发育[卵子不经受精进行发育]parthenogenetic embryo 单性胚,孤雌胚parthenogonidium孤雌生殖细胞parthenomixis孤雌两核融合partial molar偏摩尔的particle gun基因枪,粒子枪partitivirus 分病毒parvalbumin小白蛋白,小清蛋白[如见于鲤鱼]parvovirus细小病毒passage佟细胞]传代passage type过渡形式pasteur effect巴斯德效应,巴氏效应[有氧氧化抑制酵解]pasteur pipet巴氏吸管,巴斯德吸管pasteurella巴氏菌属,巴斯德菌属pasteurization巴氏消毒法patch clamp膜片箝,膜片钳patch clamping technique膜片箝术,膜片钳术[可用于监测膜通道活性]patching膜片形成paternity test 亲权认定pathogen病原体pathovar致病变型patroclinal ingeritance 偏父遗传patrogenesis孤雄生殖pattern [特征序列]模式patulin展青霉素pauli exclusion principle 泡利不相容原理pauperization 杂交弱势paxillin桩蛋白[见于粘着斑,被栓在膜上]pea enation mosaic virus 豌豆耳突花叶病毒pectamycin密旋霉素pectin果胶pectinase果胶酶pedigree 系谱pediocin片球菌素pellicle菌膜;(菌)醛"细胞]表膜penetrance夕卜显率penicillinase 青霉素酶penicillium 青霉属penicillium chrysogenum virus 产毒青霉病毒pentagastrin五肽胃泌素pentamer五聚体penton五邻体[见于腺病毒]pentosan戊聚糖pentose 戊糖pentyl戊基peplomer包膜突起peplos包膜pepscan肽扫描(技术)pepsin胃蛋白酶pepsinogen胃蛋白酶原pepsitensin胃酶解血管紧张肽pepstatin胃(蛋白)酶抑制剂,抑胃酶肽peptidase 肽酶peptide nucleic acid肽核酸[一类dna类似物,以氨基酸取代糖磷酸主链]peptide screening肽筛选[常指利用合成肽进行表位作图的方法]peptidergic fiber 肽能纤维peptidoglycan 肽聚糖peptidyl 肽基peptization 胶溶peptone 月东pepzyme肽性酶[人工合成的小分子肽催化剂]percoll [商]珀可[pharmacia公司商标,是聚乙烯吡咯酮包被的二氧化硅壳粒的无菌胶体悬液,可以形成1.3g/ml以下的各种密度梯度]perforin穿孔素perfringocin产气荚膜竣菌素perfusion 灌流peri effect近位效应peri position 近位perianth花被;[苔藓]蒴萼periblem皮层原[见于植物]pericardial cavity 心包腔pericardium 心包膜pericentric inversion 臂间倒位periclinal 平周的pericycle中柱鞘periderm周被[见于植物]peridium [粘菌]抱囊被;包被perikaryon 核周体periodic protein周期性蛋白[含有周期性重复序列]periosteum骨夕卜膜peripheral外周的,周边的peripherin外周蛋白[一种中间丝蛋白,最初发现于神经元]periplasm (外)周质periplast周质体perisperm夕卜胚孚Lperistalsis 蠕动peristaltic pump 蠕动泵perithecium 子囊壳peritoneum 腹膜perlecan基底膜(蛋白)聚糖permeability 通透性permeabilization透化(作用)[使通透性增加]permeabilizing 透化(处理)permease通透酶permissive action允许作用[如特指激素间一种协同作用]permselective membrane选择透性膜,选择(性)通透膜permselectivity选择通透性permutation变换,置换;排列peroxidase过氧化物酶persitol鳄梨糖醇perturbation 微扰pertussis toxin百日咳毒素pervaporation 全蒸发perxisome过氧化物酶体pesticin鼠疫菌素pestivirus瘟病毒属petri dish培养皿petroselinic acid岩芹酸,6-十八(碳)烯酸pfu dna polymerase pfu dna 聚合酶[来自pyrococcus furiosus的耐热dna聚合酶(stratagene公司专利产品)兼具5'-3-dna聚合活性及3'-5'外切校正活性]phaeophyll 叶褐素phaeophyta 褐藻门phaeophytin 褐藻素10phaeoplast 叶褐体phage antibody噬菌体抗体[噬菌体蛋白与免疫球蛋白的融合体,表达于噬菌体表面]phage display噬菌体展示[将抗体或肽表位展示于噬菌体表面]phage typing噬菌体分型[利用噬菌体进行细菌分型]phagecyte吞噬细胞phagemid噬菌粒,噬粒phagetype噬菌体型phagevar噬菌体变型phagocytosis 吞噬(作用)phagosome吞噬体phallacidin类鬼笔(毒)环肽phallin鬼笔溶血(毒)环肽,白鬼笔(毒)环肽phallisin类鬼笔素phalloidin鬼笔(毒)环肽phalloin鬼笔素phallotoxin鬼笔毒素,鬼笔毒蕈肽[类名,包括鬼笔素,鬼笔环肽等]pharynx 咽phaseolin云扁豆蛋白phaseoline 菜豆碱11phaseolotoxin菜豆丁香假单胞杆菌毒素,菜豆菌毒素phasmid噬菌粒,噬粒phastgel [商]快速凝胶[phastsystem所用现成凝胶]phastsystem [商]快速凝胶电泳系统[pharmacia公司生产的快速聚丙烯酰胺凝胶电泳]phenanthrene 菲phenanthroline 菲咯啉phenazine 吩嗪phenobarbital 苯巴比妥phenocopy拟表型,表型模拟phenogenetics发育遗传学phenotype 表型phenotypic 表型的phentolamine酚妥拉明phenylacetamidase 苯乙酰胺酶phenylacetamide 苯乙酰胺phenylacetic acid 苯乙酸phenylalanini 苯丙氨酸phenylarsenic oxide 氧化苯胂phenylethanol 苯基乙醇phenylethanolamine 苯基乙醇胺phenylethylamine 苯乙胺12 phenylisothiocyanate 异硫氰酸苯酯phenylketonuria苯丙酮尿症phenylthiocarbamide 苯确脲phenylthiohydantoin 乙内酰苯硫脲pheophyll叶褐素pheophytin褐藻素,脱镁叶绿素pheromone信息素,外激素pheron脱辅(基)酶phlobaphene 鞣红phloem韧皮部phloroglucinol藤黄酚,间苯三酚phorbol佛波醇phosgene 光气phosphagen 磷酸原phosphatase 磷酸酶phosphatidase 磷脂酶phosphatide 磷脂phosphatidylcholine 磷脂酰胆碱phosphatidylethanolamine 磷脂酰乙醇胺phosphatidylglycerol 磷脂酰甘油phosphatidylserine磷脂酰丝氨酸13phosphine 膦phosphoarginine磷酸精氨酸phosphocellulose 磷酸纤维素phosphocreatine 磷酸肌酸phosphodiester 磷酸二酯phosphodiesterase 磷酸二酯酶phosphoenolpyruvate烯醇丙酮酸膦酸phosphoeptide 磷酸肽phosphoester 磷酸酯phosphofructokinase 果糖磷酸激酶phosphoglucoisomerase葡糖磷酸异构酶phosphoglucomutase葡糖磷酸变位酶phosphogluconate shunt葡糖酸膦酸支路phosphogluconolactone磷酸葡糖酸内酯phosphoglycerate 磷酸甘油酸phosphoglyceride 磷酸甘油phosphohistidine 磷酸组氨酸phosphokinase 磷酸激酶phospholamban 受磷蛋白phospholipase 磷脂酶phospholipid 磷脂14phospholipoprotein 磷酸脂蛋白phosphonate 膦酸酯phosphonoacetic acid膦酰乙酸,膦羧乙酸phosphonomycin 磷霉素phosphoramidite 亚磷酰胺phosphoramidon膦酰二肽[一种来自微生物的蛋白酶抑制剂,即n-(a-鼠李吡喃糖基膦酰胺-ser-trp] phosphorescence 磷光phosphoribosyl磷酸核糖的phosphorimeter 磷光计phosphorodithioate 二硫代磷酸酯phosphorolysis 磷酸解phosphorotein 磷蛋白phosphorothioate 硫代磷酸(酯)phosphorylase 磷酸化酶phosphorylation 磷酸化phosphoserine磷酸丝氨酸phosphothreonine 磷酸苏氨酸phosphotransferase 磷酸转移酶phosphotriester 磷酸三酯phosphotyrosine磷酸酪氨酸phosphtidylinositol 磷脂酰肌醇15phosvitin卵黄高磷蛋白photoabsorption 光吸收photoacoustic 光声的photoactivation 光活化photoactive光活性的,光敏的photoaffinity 光亲和的photoallergy光变态反应photoautotroph光(能)自养生物photoautotrophic 光能自养的photoautotrophy 光(能)自养photoautoxidation 光(能)自动氧化photobacteria (发)光细菌photobiology光生物学photobiont共生光合生物photobiotin [商]光生物素[澳大利亚bresa公司的商标通过带电荷的连接臂将具有光化学反应活性的芳基叠氮基团连接于生物素]photobleaching 光漂白photocatalysis 光催化(作用)photocatalyst 光催化剂photochemical 光化学的photochemistry 光化学photochromism光致变色(性)16 photoconductive 光导的photodecomposition 光(分)解(作用)photodegradable 光降解的photodegradation 光降解(作用)photodensitometer 光密度计photodensitometry 光密度分析(法)photodigoxigenin [商]光(敏)地高辛配体,光(敏)洋地黄毒苷photodiode 光(电)二极管photodissociation 光解离photoelectric 光电的photoelectrocatalysis 光电催化photoelectron 光电子photogene nucleic acid detection system [商]光化学核酸检测系统[lifetechnologies 公司(brl)商标]photohemolysis 光致溶血photoheterotroph光(能)异养生物photoheterotrophic 光(能)异养菌photoheterotrophy 光(能)异养photoinduction 光诱导photoisomerization 光异构化17 photolithotrophic光(能)无机营养的photolithotrophy光(能)无机营养photoluminescence 光致发光photolyase 光解酶photolysis光解(作用)photomedicine 光医学photomicrogr叩hy显微摄影(术),显微照相(术)photomovement 光运动photomultiplier光电倍增管photon光子photonasty 感光性photoorganotroph光能有机营养生物photoorganotrophic 光能有机营养的photoorganotrophy光能有机营养photooxidation 光氧化(作用)photoperiodism光周期现象,光周期性photoperoid 光周期photophase光照阶段photophosphorylation 光合磷酸化photopolymerization 光(致)聚合(作用)photopotential 光电位photopsin光视蛋白18photoreaction 光反应photoreactivation 光复活photoreactive光敏的,光反应性的photorearrangement 光重排photoreception感光,光感受(作用)photoreceptor 光感受器photoreceptor transduction 感光传导photoredox reaction光致氧化还原(反应)photoreduction 光还原(反应)photorespiration 光呼吸(作用)photosensitive 光敏的photosensitivity 光敏感性photosensitization 光敏化(作用)photosensitizer 光敏剂photosensory 感光的photostage光照阶段photosynthate 光合产物photosynthesis 光合作用photosynthetic 光合的photosystem 光系统phototaxis趋光性[(细胞)受光源方向或强度的影响进行定向运动]19phototroph光养生物phototrophic 光养的phototrophy 光(营)养phototropic 向光的phototropism向光性[受光源方向或强度影响的(细胞)定向生长]photoxidation 光氧化phragmoplast 成膜体phrenosin羟脑苷脂phycobilin藻胆(色)素phycobiliprotein藻胆(色素)蛋白phycobilisome藻胆体,藻胆蛋白体phycobiont 共生藻phycochrome 藻色素phycocyanin藻蓝蛋白,藻青蛋白phycocyanobilin 藻蓝素phycodnavirus 藻dna 病毒phycoerythrin 藻红蛋白phycoerythrobilin 藻红(胆)素phycomycetes藻状菌纲phycophaein 藻褐素phycophage 噬藻体20 phycovirus 藻病毒phycoxanthine 藻黄素phylaxin抵抗素phyllocaerulin叶泡雨蛙肽phyllocaline 成叶素phyllolitorin叶泡雨滨蛙肽phyllospheric microganism 叶际微生物phylogenesis系统发育phylogenetic系统发育的,系统的phylogeny系统发育physalaemin 泡蛙肽physical selection物理选择[根据突变体的特有性状进行选择]physostigmine 毒扁豆碱phytanic acid 植烷酸phytic acid 植酸phytoalexin植物抗毒素phytochelatin植物螯合肽phytochemistry 植物化学phytochrome (植物)光敏(色)素phytocide除草剂phytocidin植物杀菌素phytoecdysteroid植物蜕皮类固醇,植物蜕皮甾体21phytoferritin植物铁蛋白phytohemagglutinin 植物凝集素phytohormone植物激素phytol叶绿醇,植醇phytoplankton 浮游植物phytosphingosine植物鞘氨醇,4-羟二氢鞘氨醇phytotoxin毒植物素[微生物产生的对植物有毒害作用的一种物质]phytotron人工气候室phytylmenaquinone叶绿甲基萘醍,维生素k1picking挑取(菌落、噬斑、蚀斑等)picolinic acid吡啶甲酸[色氨酸代谢产物]picornavirus 小rna 病毒picrotoxin印防己毒素,木防己苦毒素piericidin粉蝶霉素,杀粉蝶菌素pigementation 色素形成pilin菌毛蛋白pilocarpine毛果(芸香)碱pilot experiment 预试验pilot protein先导蛋白pilus菌毛pimaricin匹马菌素22pimelate庚二酸;庚二酸盐、酯、根pimelic acid 庚二酸pin technology大头针技术[采用特制聚乙烯大头针作支持体进行超微量固相多肽合成的技术,可用作表位作用]pinacol频哪醇pinane蒎烷pineal松果体的pineal body 松果体分子生物学词汇(Pl)相关内容:23。
分子生物学教学教案

分子生物学教学教案教案内容:一、教学内容:本节课的教学内容选自人教版《分子生物学》教材,第四章“DNA复制”。
具体内容包括:DNA复制的过程、DNA复制机制、复制起点和复制的酶等。
二、教学目标:1. 让学生了解DNA复制的过程及机制,掌握复制起点和复制的酶的作用。
2. 培养学生运用分子生物学知识解决实际问题的能力。
3. 激发学生对分子生物学的兴趣,培养学生的创新思维。
三、教学难点与重点:难点:DNA复制的过程及机制、复制起点和复制的酶的作用。
重点:DNA复制的过程、复制机制和复制酶的作用。
四、教具与学具准备:教具:多媒体教学设备、黑板、粉笔。
学具:教材、笔记本、彩色笔。
五、教学过程:1. 实践情景引入:以“克隆羊多莉的诞生”为例,引导学生思考DNA复制在生物繁殖中的重要性。
2. 知识点讲解:(1)介绍DNA复制的过程:解旋、合成子链、形成子代DNA分子。
(2)讲解DNA复制机制:半保留复制、双向复制。
(3)阐述复制起点的作用:启动复制、确定复制方向。
(4)介绍复制的酶:DNA聚合酶、解旋酶、连接酶等。
3. 例题讲解:分析DNA复制过程中可能遇到的问题,如复制错误、修复等。
4. 随堂练习:(1)简述DNA复制的过程。
(2)解释DNA复制机制的作用。
(3)列举至少三种复制的酶及其作用。
5. 知识拓展:介绍DNA复制在医学、生物科技领域的应用,如基因治疗、克隆技术等。
六、板书设计:板书DNA复制板书内容:1. 复制过程:解旋、合成子链、形成子代DNA分子2. 复制机制:半保留复制、双向复制3. 复制起点:启动复制、确定复制方向4. 复制酶:DNA聚合酶、解旋酶、连接酶等七、作业设计:1. 简述DNA复制的过程。
答案:DNA复制是指在细胞分裂过程中,DNA分子通过解旋、合成子链、形成子代DNA分子的过程。
2. 解释DNA复制机制的作用。
答案:DNA复制机制的作用是确保遗传信息的准确传递,保证子代细胞的基因组与亲代细胞一致。
分子生物学探针的名词解释

分子生物学探针的名词解释分子生物学探针,是一种广泛应用于分子生物学研究中的工具。
它们通常是人工合成的小分子,具有特定的生物学性质,可用于识别、定位和标记目标分子。
这些分子生物学探针在生物学实验中发挥着关键的作用,使研究者能够更深入地了解生命现象,揭示细胞机制,甚至开发新的药物治疗手段。
一、荧光探针荧光探针是最常见和广泛应用的一类分子生物学探针。
它们通过与目标分子发生相互作用,并发出特定的荧光信号来实现目标分子的检测和追踪。
荧光探针通常由两个主要组成部分构成:荧光染料和连接分子。
荧光染料具有发出荧光的能力,而连接分子可与目标分子特异地结合,将荧光信号传递给目标分子。
荧光探针在生命科学研究中被广泛应用,如细胞成像、蛋白质定位和分离、DNA/RNA检测等。
二、酶探针酶探针也是重要的分子生物学探针之一。
它们利用特定酶的催化活性来实现目标分子的检测和定量。
通常,酶探针由两个部分组成:底物分子和信号分子。
底物分子在酶的催化下发生特定的反应,生成一种可检测的产物。
而信号分子则能与底物分子发生特定的相互作用,产生检测信号。
酶探针广泛应用于酶活性测定、代谢途径研究、蛋白质检测等领域。
三、合成探针合成探针是指通过人工合成的方法获得的分子生物学探针。
它们具有特定的结构和化学性质,可用于探测目标分子的存在和活性。
合成探针可以分为多种类型,如核酸探针、蛋白质探针和药物探针等。
核酸探针常用于检测和分析DNA/RNA的序列、结构和功能。
蛋白质探针用于研究蛋白质的结构、相互作用和功能。
药物探针则被设计用于发现和研究靶向特定分子的药物。
四、纳米探针纳米探针是一种基于纳米技术的分子生物学探针。
它们具有纳米尺度的尺寸,能够在分子和细胞水平上进行精确的探测和操作。
纳米探针通常由纳米材料、生物分子和信号发生器组成。
纳米材料如金颗粒、碳纳米管和磁性纳米颗粒等,可用于传递和放大信号。
生物分子如DNA和蛋白质等,可结合目标分子实现特异性识别和测量。
分子生物学实验指导

分子生物学实验指导分子生物学实验指导动植物检疫专业2012,2分子生物学实验注意事项1.课前要提前预习实验内容,了解实验设计的原理,理清实验顺序,制定实验方案(没有方案或方案不合理者不能进入实验操作)。
2.由于实验内容多,时间短,多数实验需要同时或穿插进行,一定要做好统筹安排。
3.实验课中的所有单项实验都属于一个整体流程。
实验时间安排上没有上下午晚上等严格的作息安排,一切服从实验进度,必须在理论课上课期间完成。
4.实验的每一步都要详细地记录操作内容、时间、步骤、结果等,以备查询!5.对任何自己不熟悉的实验仪器都不要随意操作(尤其是微量移液器!)。
在操作的过程中发现任何意外的现象都要及时向任课教师汇报。
6.写作实验报告或实验论文一定要文理通顺、逻辑清晰、图表说明详细,讨论分析透彻。
7.在实验室内不能大声喧哗。
8.在实验的过程中制造的任何垃圾都要丢到垃圾筐里(或先放在自己的桌面一角),严禁随地丢弃!特别注意对废弃细菌的杀灭和有毒垃圾的定点投放。
9.实验结束后要把用过的器皿清洗后归放整齐并清点数目,向教师汇报征得同意后方可离开实验实。
10.值日组的同学最后离开,等待清扫实验室的卫生,关闭门窗水电。
11.实验时损坏的任何物品都要及时申报。
实验一质粒DNA的提取1.目的学会最常用的小量制备质粒DNA的碱裂解方法。
2.原理根据共价闭合环状质粒DNA与线性DNA在拓扑学上的差异来分离。
在pH12.0 12.5这个狭窄的范围内,线性DNA双螺旋结构解开而被变性。
尽管在这项的条件下共价闭合环状质粒DNA也会变性,但两条互补链彼此互相盘绕,仍会紧密结合在一起。
当加入pH4.8的乙酸钾高盐缓冲液使pH恢复中性时,共价闭合环状质粒DNA复性快,而线性的染色体DNA复性缓慢,经过离心与蛋白质和大分子RNA一起沉淀下去。
3.器材超净工作台,接种环,酒精灯,台式离心机,旋涡混合器,微量移液取样器,1.5ml微量离心管,恒温摇床,摇菌试管,双面微量离心管架,试管架,标签纸,磁力搅拌机。
分子生物学鉴定方法

分子生物学鉴定方法
分子生物学鉴定是一种通过分析生物体内的分子结构和序列来区分不同生物种类或个体的方法。
常见的分子生物学鉴定方法包括:
1. PCR(聚合酶链反应):通过特定引物和DNA聚合酶酶,使特定基因片段在体外扩增成百万倍,从而可以快速检测和鉴定目标物种。
2. DNA测序:通过测定DNA序列,可以准确地确定物种的遗传信息和进化关系,从而进行鉴定。
3. RFLP(限制性片段长度多态性)分析:通过酶切不同物种的DNA,然后利用凝胶电泳,观察DNA片段的大小差异,来鉴定不同物种。
4. DNA条形码:通过选择具有高保守性和变异性的基因片段,利用PCR或测序技术进行鉴定。
常用的DNA条形码基因包括COI(线粒体细胞色素C氧化酶亚基)、rbcL(核糖体大亚基L1)等。
5. 聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP):将PCR扩增的DNA 产物经限制性酶切,然后通过凝胶电泳等方法分析切割产物的大小和形状,从而鉴定物种。
6. 实时荧光PCR:通过引入荧光标记的探针,在PCR反应的同时测量荧光信号,
可以快速、准确地检测和鉴定目标物种。
这些方法根据不同的研究目的和实际应用的需要,可以单独使用或联合使用,以提高鉴定的准确性和可靠性。
分子生物学的研究方法

分子生物学的研究方法1. 基因克隆啊,这就好比是复制粘贴一样神奇!比如说我们要研究一个很重要的基因,那我们就可以通过基因克隆这个方法把它复制出来,然后好好研究它。
就像找到一把神奇的钥匙,打开我们了解生命奥秘的大门啊!2. 聚合酶链式反应,哇,这可是个厉害的家伙!你想想看,就像快速变魔术一样,能把少量的 DNA 迅速扩增好多倍。
比如要检测一个很微小的病原体,聚合酶链式反应就能大显身手啦!3. 核酸杂交,嘿,这不就像是在茫茫人海中寻找那个特别的人嘛!通过它可以找到特定的核酸序列哦。
比如说在基因诊断中,核酸杂交就能精准地找到出问题的地方,是不是超厉害呀!4. 基因测序就像在解读生命的密码本!我们可以知道基因的具体序列啦。
像破解一个神秘的代码一样,让我们对生命的了解深入到每一个碱基。
比如研究遗传病,基因测序就能告诉我们到底是哪里出了问题呀!5. 蛋白质印迹,这就像照妖镜一样,能让特定的蛋白质现形!当我们想知道某种蛋白质有没有表达或者表达量多少的时候,它就派上大用场了。
哎呀,简直太妙了!6. 细胞培养,哇塞,这就如同给细胞安个家呀!我们可以让细胞在特定的环境中生长繁殖。
比如想研究某种药物对细胞的影响,细胞培养不就正好嘛,多有趣呀!7. 基因编辑,这可是能直接修改生命蓝图的神技啊!就像我们拿着笔可以随心所欲地修改一样。
像要治疗一些基因导致的疾病,基因编辑没准就是未来的希望呢!8. 免疫印迹,嗯,这有点像侦探在找线索呢!通过它可以检测特定的蛋白质和抗体。
比如说研究自身免疫性疾病,免疫印迹就能帮忙找出那些捣乱的家伙呀!9. 实时荧光定量 PCR,嘿,这绝对是个精确的计量器呀!能实时检测DNA 的变化呢。
在监测基因表达的动态过程中,它可太有用啦,厉害不厉害!我觉得分子生物学的这些研究方法真的超级神奇,它们让我们对生命的探索不断深入,有着无比广阔的前景和重要性啊!。
分子生物学的新研究成果

分子生物学的新研究成果当我们谈论生命时,不可避免地会涉及分子生物学这个领域。
分子生物学研究的是生物体内分子水平的生命现象,涉及的范围极为广泛,包括对基因,蛋白质,细胞以及机体的研究等等。
随着技术的不断进步,分子生物学的研究也在飞速发展。
在最近的研究中,一些新的成果值得我们关注。
一、基因编辑基因编辑技术是一种革命性的方法,可用于修改生物体内基因序列。
这项技术已经被用于许多研究领域,如治疗疾病,培育新的植物品种以及生产更高效的农业生产物等等。
最近,由于一项新技术的发明,基因编辑朝着更加具有前景的方向迈进了一步。
这项技术称为“Prime Editing”,可在单个活细胞中高效地编辑基因序列。
与过去的技术有所不同,在Prime Editing中,蛋白质实际上会从一个自己创建的RNA模板中脱离出来,将其与目标基因的目的序列配对,然后实现基因编辑。
与其他技术相比,Prime Editing不需要使用“剪刀”来割断双链DNA,而是使用一种更加精准的“编辑笔”。
虽然这项技术仍处于试验阶段,但无疑,它为我们未来的基因编辑领域开辟了一个全新的方向。
二、细胞信号传导细胞信号传导是生命体系中复杂的过程之一,涉及的是从环境到细胞内外的各种信号,这一过程包括多种多样的分子交互,从而最终影响细胞的各种活动以及它们构成的组织和器官的功能。
在过去的几年中,一种型号被发现可以影响人类细胞信号传导。
名为“celastrol”的天然化合物可以降低细胞中心井鼓泡的数量。
这个研究结果是非常重要的,因为中心井鼓泡是在信号传递过程中必不可少的组成部分。
此外,研究者们还发现一种新的药物,称为“Qanliyuan”,可以增强细胞的信号传导以及促进神经发育。
三、超分子化学分子生物学中的一大研究方向,即超分子化学,关注于由分子自组装形成的大分子结构,这些结构具有高度有序的结构、高稳定性和广泛的应用领域。
最近,研究人员利用基因编辑技术来创造了一种新的人造酶。
分子生物学复习资料-绝对重点

分子生物学复习资料(第一版)一名词解释1 Southern blot / Northern blot—DNA斑迹法 / RNA转移吸印技术。
是为了检测待检基因或其表达产物的性质和数量(基因拷贝数)常用的核酸分子杂交技术。
二者均属于印迹转移杂交术,所不同的是前者用于检测DNA样品;后者用于检测RNA样品。
2 cis-acting element / trans-acting factor—顺式作用元件 / 反式作用因子。
均为真核生物基因中的转录调控序列。
顺式作用元件是与结构基因表达调控相关、能被基因调控蛋白特异性识别和结合的特定DNA序列,包括启动子和上游启动子元件、增强子、反应元件和poly(A)加尾信号。
反式作用因子是能与顺式作用元件特异性结合、对基因表达的转录起始过程有调控作用的蛋白质因子,如RNA 聚合酶、转录因子、转录激活因子、抑制因子。
3VNTR / STR—可变数目串联重复序列 / 短串联重复。
均为非编码区的串联重复序列。
前者也叫高度可变的小卫星DNA,重复单位约9~24bp,重复次数变化大,变化高度多态性;后者也叫微卫星DNA,重复单位约2~6 bp,重复次数约10~60次,总长度通常小于150bp 。
(参考第7题)4 viral oncogene / cellular oncogene—病毒癌基因 / 细胞癌基因。
病毒癌基因指存在于逆转录病毒中、体外能使细胞转化、体内能导致肿瘤发生的基因;细胞癌基因也叫原癌基因,指存在于细胞内,与病毒癌基因同源的基因序列。
正常情况下不激活,与细胞增殖相关,是维持机体正常生命活动所必须的,在进化上高等保守。
当原癌基因的结构或调控区发生变异,基因产物增多或活性增强时,使细胞过度增殖,从而形成肿瘤。
第1 页/共16 页5 ORF / UTR—展开阅读框 / 非翻译区。
均指在mRNA中的核苷酸序列。
前者是特定蛋白质多肽链的序列信息,从起始密码子开始到终止密码子结束,决定蛋白质分子的一级功能;后者是位于前者的5'端上游和3'端下游的、没有编码功能的序列,主要参加翻译起始调控,为前者的多肽链序列信息改变为多肽链所必须。
分子生物学实验室实验器材清单

分子生物学实验室所需试剂、耗材清单1、普通化学试剂,共计约2.89万。
名称单位单价(元)购置数量金额(元)95%乙醇AR 瓶7 20 140 无水乙醇AR 瓶10 20 200 DEPC 瓶150 10 1500 EDTA二钠AR 瓶50 9 450 柠檬酸钠AR 瓶27 9 243 柠檬酸三钠AR 瓶15 9 135 L-精氨酸BR 瓶126 5 630 Tris 瓶220 10 2200 苯酚AR 瓶36 9 324 变色硅胶瓶19 18 342 冰乙酸AR 瓶10 9 90 丙酮AR 瓶18 5 90 二甲苯AR 瓶20 1 20 二乙醇胺cp 瓶38 1 38 甘露醇AR 瓶15 1 15 甘油AR 瓶28 2 56 高碘酸AR 瓶240 2 480 甲醇AR 瓶8.4 5 42 磷酸氢二钠AR 瓶11 1 11 硫酸AR 瓶14 3 42 硫酸铵AR 瓶10 17 170 硫酸镍AR 瓶102 1 102 氯仿AR 瓶28 10 280 氯化钾AR 瓶20 2 40 氯化镁瓶18 1 18 氯化钠AR 瓶10 10 100 氯金酸AR 瓶196 1 196 莽草酸瓶390 3 1170 明胶CP 瓶35 1 35 钼酸瓶290 1 290 钼酸铵AR 瓶380 1 380 尿素AR 瓶18 5 90 牛肉浸膏BR 瓶90 1 90 硼酸AR 瓶18 10 180 氢氧化钠AR 瓶10 10 100 去离子甲酰胺瓶780 4 3120 三乙醇胺瓶25 1 25 碳酸钙AR 瓶23 1 23碳酸钠AR 瓶12 1 12碳酸氢钠AR 瓶16 1 16无水碳酸钾AR 瓶22 1 22硝酸瓶10 1 10硝酸银瓶350 5 1750 销酸钴瓶48 1 48盐酸AR 瓶14 2 28乙酸钾AR 瓶45 1 45乙酸锌AR 瓶36 1 36蔥酮AR 瓶68 1 68消毒/双氧水30% AR 瓶11 4 44 Trypan Blue 瓶32 1 32Tween-20 瓶20 1 20硝酸钾瓶15 1 15硫酸铁瓶15 1 15氢氧化钾瓶15 1 15甲醛500ml 瓶8 15 120 硼砂瓶12 5 60乳酸500ml 瓶27 1 27硝酸钙瓶12 1 12乙酸钠瓶46 4 184 异丙醇AR 瓶10.45 8 83.6 异戊醇AR 瓶40 8 320 SDS 瓶38 40 1520 合计28890.62、分子生物学试剂, 共计约4.5万元。
分子生物学枪

分子生物学枪分子生物学枪是一种用于探索和研究生物细胞内信号传导途径的工具。
它是由瑞典科学家马丁斯塔尔默提出的,他将其称为“精密的眼睛”。
这种发明是在二十世纪八十年代末期,由一系列的基因组学研究,以及技术的发展而形成的。
分子生物学枪的原理是根据基因转录率的改变,来监测介导信号传导的蛋白质。
它使用一种叫做“活性报告单体”的技术,它允许科学家研究生物活性分子,而这些活性分子是它们被激活后合成表达特定基因的产物。
分子生物学枪有助于研究疾病的遗传机制。
例如,科学家可以使用它来检测癌症基因的改变,以及这些改变如何影响细胞的生长和死亡。
它也可以用来研究神经系统疾病,精神疾病和某些免疫系统疾病。
分子生物学枪也可以用来研究植物疾病。
通过它,科学家可以检测病原菌在植物细胞中产生的影响,以及这种影响如何影响植物的健康或其他生命过程。
分子生物学枪也被用于抗生素监测。
它可以帮助科学家探索基因突变与耐药性之间的关系,以便研发有效的抗菌药物。
此外,分子生物学枪可以用于检测生物的环境敏感性,以及这种敏感性如何影响生物的生长和发育。
它还可以用于识别新物种,以及探索某些种类之间的进化关系。
需要指出的是,分子生物学枪主要用于生物学研究,但也有其他应用。
例如,它也可以用于软件和硬件设计,这些设计用于生物系统的建模和模拟。
此外,它还可以用于生物医学工程和生物系统工程,以及生物技术的研究与开发。
总之,分子生物学枪是一种非常有用的工具,它可以用于多种研究领域。
它给生物学家和科学家提供了极大的帮助,推动了生物学进步。
因此,它可以被认为是一个重要的发明,也是分子生物学中重要的研究工具。
分子生物学实验注意事项

分子生物学实验注意事项l. 实验前应做好试剂的配置、用品灭菌等准备工作。
配置各种试剂,必须要使用重蒸水。
2. 使用后的器皿必须认真清洗干净,洗完后还要用重蒸水冲洗三次。
3. 凡是可以进行灭菌的试剂与用具都必须要经过高压蒸汽灭菌后进行使用,防止其他杂质或酶对DNA、RNA 或蛋白质的降解。
4. 凡操作所用的一切塑料器具(Eppendorf 管、吸嘴等),在使用前都应装入盒子和瓶子中灭菌,且装盒或装瓶过程中都应采用镊子,或戴上一次性手套进行操作,不能直接用手去拿,严防手上杂酶污染。
5. 对于Eeppendorf 管、吸嘴与非玻璃离心管等只能湿热灭菌,然后放置在50°C 箱中烘干后使用。
6. 实验中加入任何试剂后应注意样品的混匀,保温等反应后的样品也应离心一下后再进行下步的实验。
7. 限制性内切酶等工具酶保存于50%的甘油中,-20°C 可以长期保存。
应自始至终将酶保持在零度以下,取酶时不能用手指接触储存酶的部分。
在需要加酶的时候将酶从冰箱中取出,放在冰盒里,用完后立即放回冰箱。
8. 微量移液器的使用:微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器。
其装有直接读数容量计,读数由三位拨号数字组成,在移液器容量范围内能连续调节,从上(最大数)到下(最小数)读取。
移液器的型号即是其最大容量值。
按钮向下压以及放的动作、速度要缓慢平稳。
9. 电子天平使用:1) 注意在天平的最大称量范围内使用。
2) 天平应放在无振动、无空气对流处,使用前须先调节水平泡至中央位置。
3) 使用后应保持仪器的洁净。
10. 微波炉内不可使用金属容器以及空载。
11. 配制药品取试剂时,所用的钥匙不能混用,否则会造成药品污染。
12. 实验过程中应做好每个样品的标记工作,如样品的名称、保存的时间.且一般在Eeppendorf 管上用记号笔作标记时,应在两处重复做好标记。
实验琼脂糖凝胶电泳检测DNA【实验目的】通过本实验学习琼脂糖凝胶电泳检测DNA 的方法和技术。
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(gene)RNA DNA--(exon)--(intron)5'-3'-(UTR)()(split-gene)(genome)()DNA3X1 09(30bp)10DNA C(C-value Paradox)human genome project, HGPgenomics,structural genomics functional genomicsproteome proteomicsDNA(2--3)DNA•()(>lO5)DNA(Satellite DNA)()1DNA()2(long interspersed repeated segments) LINES(Short interspersed repeated segments) SINESSINES<500bp>105AluLINEs>1000bp(7Kb),104-105LINEl()(Unique Sequence)(gene family)(ancestral gene)(duplication)(gene cluster)(tandemly repeatedgenes)rRNA tRNA(Pseudogene) a1a1(processed pseudogene)1tRNA1300tRNA tRNA2rRNA>l00copy rRNA(28S18S 5.8s-rRNA)330-40copy7q32-q36(H1H2A H2B H3H4)intron Poly(A)- RNA416p13(24Kb)5'------1--2--1--3'11p15(60Kb)5'----Gr--Ar--------3'(Supergene family Superfamily)1A1u50-1003-6Kb AluA1u300bp2X130bp+31bp()7-21bp(direct repeats)?Alu90%AluAlu2• •Variable number tamdem repeat VNTRDNA(minisatellite DNA)(6-40bp)(6-100)VNTR----DNA fingerprint.DNA H-Ras3short tandem repeat,STRDNA microstallite DNA2-6(10-60),l0kbDNA STR{CA)n50000-100000116569bp(H)(L )mtDNA1324RNA(22rRNA 2tRNA)2DNA3mtDNA4mtDNA5DNA DNA1--23DNA1DNA RNA23X1033X106bp34(RNA DNA)RNA56--(chromatin)--(chromosome)--()(nucleosome)DNA(H2A H2B H3H4) 1.8(146bp),Linker DNA(0-80bp)+Linker=(180-210bp)DNA Ladder()(histone)<Lys Arg)DNA1H2A H2B H3H4(102-135aa)DNA2H1(220aa)Linker DNA•130nm2(looped domain)3=Chromatid)46(Karyotype)()centromere)()(telomere)DNADNA1G(kb)DNA TTAGGC212-163'DNADNADNA(DNA Replication)DNA1. (Semi-Conservative)Meselson-Stahl2. ()(origin)+=(, Replicon)3.(Semi-discontinuous)(leading strand)-(Lagging Strand)-,(okazaki fragment).DNA()1.DNA.2RNA(RNA Primer)8-14nt.3'-OH.DNA(DNA Helicase),DNA.(Proliferating cell nuclear antigen.PCNA).(Telomerase)(),RNA.RNA.():.PCR"TRAP"Telomerase repeat amplificationprotocol Kim,N et al.,science,266,2011-2014(1994)5%.DNA DNA repairDNADNA1DNA C U A IReactiveoxygen species ROS2X(Base excision repair BER)(glycosylase)()DNA(AP)DNADNABER(1)DNA(UDG)DNA(2)3--(3MeA)DNA(3)DNA Fpg MutM DNABER DNA()(Nucleotide excision repair NER)DNADNA DNA20(CPD)(6--4)((6--4)PPs)NERNER Xeroderm pigmentosum,XPNER(1)(Global Genomicrepair GGR)DNA(2)(Trancsription--coupledrepair TCR)()DNARNA II TFIIH(Mismatch repair)DNASTR-(loop)-expansion microsatellite instabilitycoli MMR mutS,mutH,mutL uvrD DNA DNA mutS,mutHHNPCC(Recomhinant repair)DNAFurther readings:1 Wood RD DNA repair in eukaryotes Ann RevBiochem199665135--1672 Krokan HE,et a1., DNA glycosylase in the base excisionrepair of DNA Biochem J19973251--163 Vrieling H et a1., Transcription coupled repair and its impacton mutagenesis Mutation Res1998400135--142(recombination).2DNA DNA, ,DNA..(Homologous recombination)DNA,DNA..(transposition)DNA(mobile DNA elements)-(Transposable element).DNADNA DNA.-:1.,DNA.2.(transposase).(M2+)3.3-12bp(),DNA..(transposon):DNA.(retroposon),RNA(DNA RNA DNA):Alu.LINE1.(retro-pseudogene)-DNA mRNA""-(heterochromatin)()(euchromatin)10%()()DNaseI()DNase IDNase I(DNase I HyperSensitive Sites DHSS)()H3CyS110)(Phased positioning)1(rotational positioning)DNA DNA`2(translational positioning)DNA DNA()1H12Lys)HMGHMG high mobility group)--, HMG14/HMG17.DNA()DNA(Methylation)5%C(m C)mC CpGCpG CpG(CpG islands)10Kb CpGCpG()()DNA1(X23()(housekeeping gene)(Constitutivegene)(genomic imprinting)(imprinted)--DNA()(+1---)RNA Pol(GTFs)()(promoter)DNA RNApoII100-200bp1(core promoter)TF DTATA(TATA box) -25-30bp(initiator Inr) InrTATA Inr2(Upstream Promoter element UPE)(-30-110bp)CAAT GC GC SPl()RNA(mRNA)7-10(CTD)7(Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Set)CTD()(basal transcription factor)RNA--RNA(generaltranscription factor)1RNA II(TF II)TFIID,TF B,TFIIF TFIIE TFIIH TFIIATFIID TATA(TATA binding protein TBP)8TBP(TBP associated factor TAF)TFIID(TATA Inr)TF B C TFIID DNA N-TF F RNA II TFIIE,TFIIHTFIIH RNA Pol CTDTFIIA TFIID TATA2TAFTFIID8TBP,30--250kD,TAF-30250 TAF150(1nr)TAF(cis-regulatingelement)DNA DNAconsensus sequence)()(promoter)()(enhancer)8-12bp)1()235'-3'45'-3'-5(30Kb)6()--(silencer)()1(responsive elements)--()2DNA(trans-acting factor)()()()(domain)(motif)1DNA(DNA binding domain)//Helix-turn-helix,HTHDNA(Homeodomain)HTH Homeodomain (Zinc finger)(His2Cys2)2(cys2cys2)DNAGC SPl WT1 (Leucine-Zipper)6 a aLeu Leu----LeuC-Jun/C-fos(APl)--(Helix-loop-Helix HLHt)2(loop)C-myc MaxHLH Leu---aa DNAbzip bHLHb=basic)2(Transactivation domain) `DNA30-100aa(acidic a-Helix domain)Jun(glutamine--rich domain)SPl(proline-rich domain)()1POUDNA-POIJPOUN POU(POUs)+C POU(POUHPOU Pit1octl oct2unc86POU2(GR(ER AR)(TR) (RAR)VitD3(VD3R)DNA2Cys2Cys2(2)DNA(HRE Hormoneresponsive elements)3NF-BRelA(P65)P60RelB C-Rel P50P50RelAP50RelA•I B()I B(mRNA)(openreading frame ORF)mRNA-mRNA--RNA(heterogeneous nuclear RNA hnRNA)hnRNA(hnRNP), mRNA hnRNP()5'-(capping)--mRNA5'-(m7pppN)5'm7G1mRNA23mRNA)3'-(poly(A))--mRNA3'200--250(A)poly(A)1mRNA2mRNA3)mRNA(sp!icing)--1Gu AG5'-()3'-()branchsite)mRNA2mRNA-lariat intermediate)23(spliceosome)RNA(300)--SnRNA small nuclear RNA)U1--U6 snRNA-SnRNP mRNA snRNP--mRNAU2U6U4U6 SnRNP()RNA(RNA editing)mRNA mRNADNARNA apo--B C U(alternativesplicing)mRNAmRNApoly(A)mRNA mRNA(isoform)>5%(IF)1eIF-4F2eIF-2mRNA)5'-UTR1mRNA5'm7G2"AUG"(AUG AUG)3AUG Kozak GCCAUGG()3'-UTR1poly(A)2UAmRNAmRNA3'--UTR1poly(A)mRNA23'-UTR UA mRNA1N-O-2Proprotein protein.1N-202 N-3SV40 T pro-lys-lys-lys-Arg-lys(127-132)Viral oncogene V-onc).(cellular oncogene c-onc)(protoncogene)--v-onc(tumor suppressor gene)1(PCD)23(germ 1ine)l22•3()C--ras121361C-ras(21kD,P21)RAS GTP GTP()(translocation)1t(922)c-abl bcr P2102t(814)c-myc()(gene amplification)HL-60C-myc8-22c-erb B c-net()LTRLTR(long terminal repeat)1sis(PDGF-)fgf(int-2csf-1)2()neu ht met erbB trk fms ros-13()src src syn fyn abl lck ros yes fes ret4()raf raf-1mos pim-15G()GTP GTP ras H-ras K-ras N-ras mel ral6DNA()myc fos Jun ets rel erb A()()(Lossof heterozygosity LOH)LOS DNA(RFLP VNTR STR SSCP) LOHp53P5317P1311393p535-8, 2493G T,B1P53P53DNA N C1P5310bp N-P53DNA2P53DNA3P53C-4P53cki p21, G1.5p53 GADD456P537p53DNA P538Mdm2p53Mdm2)(signal transduction)12()3(intracellular messenger)(secondmessengers)cAMP{)ATP cAMP;cAMP cAMP5'-AMPAcGMP()cGMPGinositol triphosphate,IP3diacyglycerol, DAGG-C IP3DAG1IP3Ca2+2DAD Ca2+C(SR)[Ca2+]>>[Ca2+]()()()()IP3()Ca2+(calmodulin, CaM)Ca2+•CaMCa2+•CaM(NO)NO L-NONO(NOS)(nNOS)(ecNOS)iNOS)cGMPNO(Proteinkinase PK)()ATP (Protein phosphatase PPase){)(Ser Thr PK)1A PKA)-cAMP.PKA C RPKA cAMPPKA()2C(PKC)-Ca2+Ca2+DAG TPA()PKC N-C--PKC(>12)PKCEGFRMap TauNa+-H+Ca2+-ATPRaf-13Ca2+•(Cam-PK)Cam-PKII4cGMP(PKG)5DNA(DNA-PK)DNADNA SPl Fos Jun Myc P53DNA,TF;(Checkpoint).6(Mitogen-activated protein kinase MAPK)MAPK-MAPKK MEKMyc Jun Ets()Tyrosine protein kinase TPK)--1srcc-src Src C-N--SH1SH2SH3(SH=srchomolog)SHlSH2SHSrc src yes lyn fyn lck blk fgr bcd yrk TPKSH2SH22JAKJAK(Janus kinase)Jakl Jak2Jak3Tyk2Jak TPK Src TPkJaK SH2SH3Jak()PPl PP2A PP2B PP2CPP2A()(PTPase)PTPase21()SH2 domain PTPlC PTPlB2(PTPR)2CD45PTPlC()N2SH2{Tyr•P)CJak PTP1CPTPaseG(IGF EGF PDGF NGF SCF HGF )()TPKJak(cytokine)(IFN)(IL)LIF M (IL-8R G)()(ACH)5-HT GGG(effector)GG-(G-protein)GG Gs,Go,Gi,Gq CT PT G-G-G-pr C A2RAS-MAPK1Ras G-)RasSOSRas•GDP Ras•GTP() GTP GAPGrb2SH2TyrSH3pro SOS SOS Ras2Ras-MAPK()SH2(Grb2) SOS Ras-GTP Rafl MAPKK MEK MAPK3Ras-MAPKRas-MAPK(Ras)cAMP-PKA Raf-1PKC Raf~lJak-statSTAT signal transducer and activators oftranscription684-113KD SH2()SH3DNA StatJak-Stat()Jak Stat Stat()•(cell proliferation)(cell cycle)G1S G2M(G1S G2)G1(Gap1)DNA()DNA;S DNA;G2DNA;M(Mitosis)MS+G2+M G1G11)S()2)Co()3)S DNA M21G1DNA G1RNA(restrictionpoint R)G1DNADNA(checkpoint)DNA2S DNA()S2 •S G2DNA3G2RNA4M(cyclin-dependent kinases CDKs)(cyclin)-(CDK)cyc-CDK cyc-CDK1G1cyc-CDKG1C D D1D2D3)ED CDK4(CDK2CDK5CDK6)R(G0G1E CDK2cycE-CDK2G1S2S M cyc-CDKscycA-CDK2ScycB-cdc2G2M(cdc2p34cdc2CDKl)(cyclin-dependent kinase inhibitor CKIs)CKls CDKsCKIsCKls1Kip Cip P21P27P57cyc-CDKP21(WAFI CIPl)P53P21cycDl-CDK4cycE-CDK2 (DNA)P53P27TGF-2INK4P16P15P18P19INK4cycD-CDK4cycD-CDK6CDKP15TGF-G1'1cyclin CDKs2CKI CDKp16(MTSl)(myc)pRB •106KDG0G1pRB E2F-1()GF cycD-CDK4cycE-CDK2pRb()E2F DNAp53()-DNA(P21 G1)1GF GFR Ras-MAPK fos/jun cycD-CDK4pRB E2F2TGF-G1(Ubiquitin Ub)(P27)apoptosis, programmed cell death,PCDapoptosis vs. necrosis1homeostasis,2341shrinkage2blebbing34DNA DNA ladder56()Fas TNFBcl-2B bcl-2ced-91814bcl-22Bcl-2Bcl-Xl, Bcl-w, Mcl-1, and A13Bcl-2Bcl-xlBax-Bcl-21Bcl-2Bax Bak Bik Bid Bim HRK2Bcl-23Bcl-2Bax4Bax P53DNA P535Caspase -1cysteine aspartic acid2Caspase procaspasecaspase prodomain3caspase IL-1(ICE=caspase-1) pro-IL-1ICE CrmA CrmA caspase412caspasecaspase(e.g. DEV D)a. DFF -DNA fragmentation factor- cleavage of an inhibitorysubunit activates this nuclease which cuts the DNA into a distinctladder-likepattern and for chromatin to condense.b. PARP -Poly-ADP ribose polymerase, a DNA repair enzymeinactivated by caspasesc. nuclear lamin - causes nucleus to lose its structural integrityafter cleavaged. cytoskeletal proteins - cleavage causes membrane blebbing5T-granzymes granzymescaspase6caspasesCaspases1TNF TRADD FADD Fas FADD2FADD caspase-8 (FLICE),3caspase-8.4.Fas FasL Fas Fas,5FasL FasLFasApaf1- caspase1Caspase-8Bid C-2Bid Bcl2C.3Bcl2cytochrome c4Cytochrome c Apaf-1Apaf-1/cytochrome c(Apoptosome)procaspase-95procaspase-96Caspase-9caspase-3caspases effector phase ,IAPs, caspaseA. IAPs are inhibitors of apoptosis protein. There are 7identified IAPs in human.B. IAPs inhibit apoptosis by inhibiting caspase activities.C. IAPs provide a safeguard mechanism against minimal activationof the apoptosis program.D. Several IAPs are overexpressed in tumors.A. CancerB. Autoimmune diseaseC. Neurodegenerative disease1. ALS - Amyotrophoic lateral sclerosis or Lou Gehrig's disease2. Spinal muscular atrophygenecloning,DNADNAclone DNA DNA(cloning)DNADNADNADNA DNADNA1DNA2DNA5'-3'-35'-3'-DNA4MboI Sau3A ""Sambrook,J et al . molecular cloning(vector)DNA DNA,DNADNA DNADNADNADNADNADNA(plasmid)DNAkbDNADNA<15kbDNA50kb+DNA12COS20kb,12-24kb,10kb,DNA DNA5-20kb DNA5-7kb DNA,cDNA gtDNA13136407bp DNADNA DNA DNA100-200DNA,M13507DNA M13M13M13Mp18M13<1000bp,M13DNADNA DNADNA COS(20-bp)4-6kb,40-50kb DNADNA(cen4)(ARS1)(Tel)DNA200-1000kb DNADNADNA DNAcDNADNADNA()DNADNA20-24kbDNAcDNAcDNA mRNA DNA.mRNA cDNA cDNA cDNAcDNAmRNAcDNAcDNAcDNA;cDNADNADNADNA cDNADNADNA DNA DNA DNADNADNA DNA5'-3'-DNA DNA T4 DNA ATPT4 DNADNADNADNA DNA DNA 5'-DNAT4DNA DNA3'-5'-5'-5'-DNA klenow3'-3'- T4 DNA3'5'T4DNADNAT4DNA DNADNA DNADNADNADNADNA DNADNADNA DNADNA DNAampr tetrrDNAlacZ N-146lacZ15C-X-galX-galDNA,DNADNA PCRDNADNA5x105-5x10612PCR3Nucleic acidhybridizationDNADNADNA Denaturatioin DNATm DNA DNA DNADNA Tm GC GC TmDNA Renaturation DNA TmTmTm15Tm0.4M Tm1%DNA/DNADNA/RNA Tm0.7250%1DNA cDNA2RNA RiboprobeRNA()Northen34mRNAP14.335S87.133P(25.4)1Random primingDNA klenow2(Nick translation0DNase DNA3RNARNA RNANorthern4DNATaq DNA dNTP,sk c DNA 55'-T4DNA5'-3'-32P-dNTP ddNTP65'-123blot456Dot/slotblot DNA RNASouthern DNASouthern1DNA;2DNAa3DNADNASouthern DNANorthern RNAmRNANothern1RNA2RNA3RNA45RNA DNA SouthernRNA1RFLPpolymorphism DNA1%RFLP DNAsouthernblotting PCRRFLPVNTR RFLP DNA fingerprinting2ASO3Northern blottingPCRPCRPCRPCR DNA1Denaturation DNA2Annealing3Extension DNAPCR5'DNAPCR1Taq DNADNA5'-3'DNA5'-3 3'-5'PCRPCR Taq 0.5-2.5U2PCRPCR15-30G/C A/T G/C45%-55%3'3'-3'G C T5'-ATGPCR0.1-0.5uM3MgCl2 Mg2+Taq DNA Tm PCRPCR MgCl2 1.5-2.5mM(Mg2+Mg2+ dNTP EDTA4dNTP dNTP 4 dNTP200umol/L,dNTP Mg2+5DNA RNA cDNAPCR Taq/PCR()PCR1Initial denaturationDNA PCR953-52Primer annealingPCR372Taq49530DNA5PCR25-356725-15PCRPCR12PCR carry-overPCRPCR Reverse transcription PCR,RT-PCRRNA PCR.PCR RT PCRPCRRT PCR cDNA gDNAPCR Multiple PCRPCRPCR DNA() PCR nested PCRPCR PCR,()PCR asymmetric PCRPCR50100:1PCR,DNAPCRPCRPCR1Restriction fragment length polymorphism-RFLP;2(Sequence polymorphism);3(Length polymorphism)PCR-RFLPPCRPCRPCR ASOASO Allele specificoligonucleotide1PCR AS0ASO ASO2ASO PCR-reversedot blotrasHLA typingA11eles specificamplification ASA-(Amplification refractory mutationsystem ARMS)PCR3'DNAPCR3'PCRPCR-SSCPDNADNA DNA --Singlestrand conformation polymorphism SSCPPCR SSCP PCR PAGEPCR SSCP200bp175-345ntAmp-FLPVNTR STRPCRPAGEPCRDNAPCR PCR DNAPCR cyclesequencing PCR ddNTPPCRPCRPCR PCR.PCR-RFLP Amp-FLPPCR1HBV HCV HIV HPV21ras,p5323CML Minimal residual disease MDR4multi-drug resistance,MDR5Gene chip/DNA chip DNA DNAMicroarray DNA1Genechip,Affymatrix,Inc2DNA DNAMicroarray DNADNADNA1mRNA,cDNA2microarray3element mRNA123/( single nucleotide polymorphism, SNP)45mRNA cDNANorthern Blot12345Further Readings1. Ekins R. and Chu F.W. Microarrays: their origins andapplications. Trends in Biotechnolology, 1999, 17, 217-218.2. Sinclair, B. Everything's Great When It Sits on a Chip - Abright future for DNA arrays, The Scientist, 1999 May 24, 13(11),18-20.3. Nature Genetics published a special issue (January 1999Supplement), The Chipping Forecast. It's a collection of morethan 10 reviews (60 pages) on different aspects of microarrayanalysis. All the reviews are freely available online.4. Schena, M., Heller, R.A., Theriault, T.P., Konrad, K.,Lachenmeier, E., and Davis, R.W. Microarrays: biotechnology'sdiscovery platform for functional genomics. Trends inBiotechnology 1998, 16, 301-306.5. Service, R.F. Microchip arrays put DNA on the spot. Science1998, 282(5388), 396-399.6. Ramsay, G. DNA chips - states-of-the-art. Nature Biotechnology1998, 16(1), 40-44.7. Marshall, A.; Hodgson, J. DNA chips - an array ofpossibilities. Nature Biotechnology 1998, 16(1), 27-31.。