脑脊液常规
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1.项目名称
脑脊液常规
(1)标本处理
1.标本送验必须及时,收到标本后应立即检验。久置可致细胞破坏,影响细胞计数及分类检查;葡萄糖分解使含量降低;病原菌破坏或溶解。
2.细胞计数管应避免标本凝固,遇高蛋白标本时,可用EDTA盐抗凝。
(2)一般性状检查
主要观察颜色与透明度,可记录为水样透明、白雾状浑浊、微黄浑浊、绿黄浑浊、灰白浑浊等。脓性标本应立即直接涂片进行革兰染色检查细菌,并应及时接种培养基。
1)红色:
如标本为血性,为区别蛛网膜下腔出血或穿刺性损伤,应注意:
(1)将血性脑脊液试管离心沉淀(1500r/min),如上层液体呈黄色,隐血试
验阳性,多为蛛网膜下腔出血,且出血的时间已超过4h。如上层液体澄
清无色,红细胞均沉管底,多为穿刺损伤或因病变所致的新鲜出血。
(2)红细胞皱缩,不仅见于陈旧性出血,在穿刺外伤引起出血时也可见到。
因脑脊液渗透压较血浆高所致。
2)黄色:
除陈旧性出血外,在脑脊髓肿瘤所致脑脊液滞留时,也可呈黄色。黄疸患者的
脑脊液也可呈黄色。但前者呈黄色透明的胶冻状。
3)米汤样:
由于白(脓)细胞增多,可见于各种化脓性细菌引起的脑膜炎。
4)绿色:
可见于绿脓杆菌、肺炎链球菌、甲型链球菌引起的脑膜炎。
5)褐或黑色:
见于侵犯脑膜的中枢神经系统黑色素肉瘤。
(3)潘氏(Pandy)球蛋白定性试验
[原理]
脑脊液中球蛋白与苯酚结合,可形成不溶性蛋白盐而下沉,产生白色浑浊或沉淀。
[试剂]
5%苯酚溶液:
取纯苯酚25m1,加蒸馏水至500m1,用力振摇,置37℃温箱内1—2天,待完全溶解后,置棕色瓶内保存。
[操作]
取试剂2—3m1,置于小试管内,用毛细滴管滴入脑脊液l一2滴,衬以黑背景,立即观察结果。
[结果判断]
阴性:清晰透明,不显雾状。
极弱阳性(土):微呈白雾状,在黑色背景下,才能看到。
弱阳性(十):灰白色云雾状。
阳性(2十):白色浑浊。
强阳性(3十):白色浓絮状沉淀。
最强阳性(4十):白色凝块。
[临床意义]
正常时多为阴性。有脑组织和脑膜疾患时常呈阳性反应,如化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、梅毒性中枢神经系统疾病、脊髓灰白质炎、流行性脑炎等。脑出血时多呈强阳性反应,如外伤性血液混入脑脊液中,亦可呈阳性反应。
(4)细胞计数
1)细胞总数
[器材及试剂]
1.细胞计数板;
2.红细胞稀释液(配法同血液红细胞稀释液)。
[操作]
1.对澄清的脑脊液可混匀后用滴管直接滴入计数池,计数10个大方格内红、白细胞数,其总和即为每μl的细胞数。再换算成每升脑脊液中的细胞数。
如细胞较多,可计数一大格内的细胞×10,即得每μl脑脊液中细
胞总数。如用升表示,则再乘以10。
2.浑浊或带血的脑脊液可用血红蛋白吸管吸取混匀的脑脊液20μl,加入含红细胞稀释液0.38m1的小试管内,混匀后滴入计数池内,用低倍镜计数4个
大方格中的细胞总数,乘以50,即为每μl脑脊液的细胞总数。
2)白细胞数
1.非血性标本:
小试管内放入冰乙酸1—2滴,转动试管,使内壁沾有冰乙酸后倾去之,然后滴
加混匀的脑脊液3—4滴,数分钟后,混匀充入计数池,按细胞总数操作中的
红、白细胞计数法计数。
2.血性标本:
将混匀的脑脊液用1%冰乙酸溶液稀释后进行计数。为剔除因出血而来的白细
胞数,用下式进行校正。
每μl脑脊液内白细胞校正数=
每μl脑脊液内白细胞未校正数
每μl脑脊液内内红细胞数×每μl血液内白细胞
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每μl血液内红细胞
[参考值]
正常人脑脊液中无红细胞,仅有少量白细胞。
成人:(0—8)×106/L
儿童:(0一15)×106/L
多为淋巴细胞及大单核细胞,两者之比约为7:3,偶见内皮细胞。
[附注]
1.计数应及时进行,以免脑脊液凝固,使结果不准确。
2.细胞计数时,应注意新型隐球菌与白细胞的区别。前者不溶于乙酸,加优质墨汁后可见不着色的荚膜。
3.计数池用后,应用75%乙醇消毒60min。忌用苯酚消毒,因有损计数池的刻
度。
3)细胞分类
<1>.直接分类法:
白细胞计数后,将低倍镜换为高倍镜,直接在高倍镜下根据细胞核的形态分别
计数单个核细胞(包括淋巴细胞及单核细胞)和多核细胞,应数100个白细胞,
并以百分率表示。若白细胞少于100个,应直接写出单核、多核细胞的具体数
字。
<2>.染色分类法:
如直接分类不易区分细胞时,可将脑脊液离心沉淀,取沉淀物2滴,加正常血
清l滴,推片制成均匀薄膜,置室温或37℃温箱内待干,进行瑞氏染色后用油
镜分类。
如见有不能分类的细胞,应另行描述报告,如脑膜白血病或肿瘤时。
4)、临床意义
1.中枢神经系统病变的脑脊液,细胞数可增多,其增多的程度及细胞的种类与病变的性质有关。
2.中枢神经系统病毒感染、结核性或霉菌性脑膜炎时,细胞数可中度增加,常以淋巴细胞为主。
3.细菌感染时(化脓性脑膜炎),细胞数显著增加,以中性粒细胞为主。
4.脑寄生虫病时,可见较多的嗜酸性粒细胞。
5.脑室或蛛网膜下腔出血时,脑脊液内可见多数红细胞。
(5)细菌直接涂片检查
临床怀疑流行性脑脊髓膜炎或化脓性脑脊髓膜炎时,应作细菌学涂片检查。操作如下:
1.将脑脊液立即离心沉淀,取沉淀物涂片2张。