关于开展细胞治疗项目的可行性报告

细胞治疗与细胞分离方法

细胞治疗作为一种新兴的治疗方法已经悄悄地进入了临床，它同药物治疗、手术治疗、物理治疗一样，成为治疗疾病的又一有力武器。细胞治疗与传统的治疗方法有相似之处，但具有传统治疗方法难以达到的效果。它是人类医学发展史中又一个里程碑，也是新世纪医生的必然选择。

一、细胞治疗的内容

1、细胞治疗是指医生可以用结构和功能正常的细胞作为“药物” 输给患者，以修复受损的组织细胞和器官，达到治愈疾病的目的。

2、干细胞治疗疾病较传统方法具有很多优点

1）低毒性（或无毒性），一次给药，长期有效；

2）不需要完全了解疾病发病的确切机理；

3）还可能用自身干细胞移植，避免产生免疫排斥反应。

3、细胞治疗的特点

1）细胞治疗只是修复受损的组织器官；

2）细胞治疗的供体可以是自体，也可以是异体；

3）细胞治疗方法适用于所有细胞损伤性疾病；

4）脐带血用于细胞治疗时，可以忽略HLA配型问题，因为脐带

血的表面抗原性很弱，弱到不被受体的免疫系统所识别

4、干细胞可以治疗各类细胞损伤性疾病

干细胞可以治疗的疾病列表

二、细胞治疗的要求

细胞治疗是当今医院的新项目与新方法，如何提高治疗效果？获取

高质量的干细胞是细胞治疗的关键前提和必要保障。

1、干细胞满足临床治疗的五大要素

1）具备临床使用安全性。符合国家药监部门的技术标准和管理规定。

2）细胞数量大。

用于临床治疗的干细胞数量如果达不到108以上，治疗是无意义的。

3）细胞种类全。

在细胞治疗中究竟哪种干细胞在起作用，治疗机理尚不十分明确，所以要扭转用单一细胞治病的观念，保留所有的干细胞形成一个综合的体系治疗。

4）细胞活性强。

5）细胞体积小。

2、干细胞的来源外周血、骨髓、脐带血

①骨髓中的干细胞比外周血的干细胞原始。

②脐带血比骨髓更为原始。

③脐带血的干细胞自我繁殖能力最强。繁殖速度最快。骨髓次之

④脐带血中干细胞的比率最大，骨髓次之

⑤外周血中的干细胞更接近终端细胞或叫祖细胞或前体细胞。

三、干细胞分离方法

1、体外扩增培养

体外扩增培养存在的问题：

①培养条件不易控制，产物不稳定；

②扩增传代的代数不容易控制；

③培养的干细胞数量有限影响治疗效果；

④体外培养容易出现污染；

⑤自体细胞的活性受年龄因素影响；

⑥细胞来源不确定，使用受限。

⑦培养成本增高

⑧细胞多次复制后存在癌变问题。

2、外周血细胞分选仪

根据血液各成份密度不同，离心杯中的全血被分为不同层面，较

密的细胞成份移到离心杯外侧，较轻的血浆成份移到中央，通过光电探测器探测各层面浊度不同来收集所需干细胞层面。

适用范围：外周血

结论：

①外周血中只存在极少量的造血干细胞，采集前一般需用大剂量

化疗加粒细胞集落刺激因子动员，使骨髓中造血干细胞向外周游走。分离后获取的干细胞数量根本达不到临床治疗的要求量。

②采集前7 天需要用动员剂，对采集者来说存在一定的临床风险。打动员剂会使病人的白细胞极度增高至3 万—8 万，导致机体体温升高；同时病人体质较弱，采集易造成个体出现贫血问题。

③细胞标记问题

细胞分选仪是先用细胞标记物，再筛选出被标记的细胞。每次最多只能选6 种细胞。操作复杂，得到的细胞种类不全。

④液体量的问题细胞分选仪最后分离得到的液体量较大，红细胞去

除不彻底。

3、淋巴细胞分离液外周血中单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞，其体积、形态和密度与其他细胞不同，红细胞和多核白细胞密度较大，为1.090 左右，而淋巴细胞和单核细胞密度为1.075 ～1.090 ，血小板为1.030 ～1.035 。为此利用一种密度介于1.075 ～1.092 之间而近于等渗的溶液（分层液）做密度梯度离心，使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将各种血细胞加以分离。

适用范围：主要用于分离外周血中的单个核细胞

结论：Ficoll 是用来分离人或动物外周血中单个核细胞（PBMC）的分层液。分离出来的细胞中淋巴细胞约占90％～95％。只有少量单核细胞；细胞获得率达80％（其高低与室温有关，超过25℃时会影响细胞获得率）。

4、细胞处理试剂盒

专业的干细胞分离试剂。

适用范围：外周血、骨髓、脐带血

结论：试剂盒能有效全部除去红细胞、血小板及全部血浆物质，只回收有核细胞。不损伤干细胞，干细胞表面无任何标记物，能完整地保持干细胞原有的生物学活性。

《细胞处理试剂盒》分离出的干细胞具备四大特点：即干细胞数

量大、种类全、体积小、活性强，分离出的细胞完全满足临床治疗的需要。

试剂盒使用安全、可操作性强，且适用于从人体骨髓或脐带血中提取干细胞，避免了细胞治疗存在伦理问题的争论及异体配型的风险。