探究影响酶活性的因素PPT课件
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高考生物大一轮复习 第五章 影响酶活性的条件探究课件 新人教版必修1
探究 影响(yǐngxiǎng)酶活性的条件
第一页，共48页。
考纲 考情
三年5考 高考指数：★★★☆☆ 探究影响酶活性的因素
第二页，共48页。
【实验原理】
1.温度对酶活性的影响(yǐngxiǎng)：
(1)反应原理：淀粉 淀粉酶 麦芽糖
碘液 碘液
无蓝色出现
_____ _蓝__色________(chūxiàn)
第二十九页，共48页。
二、实验(Leabharlann híyàn)步骤：步骤加入 试剂
设置反 应条件
剂量 观察气 泡产生
试管编号
a
b
c
d
3%H2O2 2 mL
第十一页，共48页。
2.在“比较过氧化氢(ɡuò yǎnɡ huà qīnɡ)在不同条件下的分解”实验 中，对实验的处理如表所示：
试管 组别
试管1 试管2 试管3 试管4
加入3%H2O2(mL) 2 2 2 2
实验处理
温度
加入试剂
常温
/
90℃
/
常温 常温
2滴3.5%FeCl3溶液 2滴20%肝脏研磨液
淀粉(diànfěn)的
(2)鉴定原理：温度影响(yǐngxiǎng)酶的活性，从而影响
水解
(yǐngxiǎng)___________，
滴加碘液，根据是否出现____蓝_及色_____蓝__色__的__深来浅判断酶的
活性。
第三页，共48页。
2.pH对酶活性的影响：
(1)反应原理：2H2O2 过氧化氢酶2H_2_O_+_O_2__。
第十二页，共48页。
对该实验的有关分析不正确的是( ) A.在上表的实验处理中，研究了温度和催化剂两个自变量 B.试管2中因为(yīn wèi)没有加入任何试剂，所以应为空白对照组 C.若试管4和试管1组成对照实验，可说明酶具有催化作用 D.若要研究酶的高效性，可选用的实验组合是试管4和试管3
第一页，共48页。
考纲 考情
三年5考 高考指数：★★★☆☆ 探究影响酶活性的因素
第二页，共48页。
【实验原理】
1.温度对酶活性的影响(yǐngxiǎng)：
(1)反应原理：淀粉 淀粉酶 麦芽糖
碘液 碘液
无蓝色出现
_____ _蓝__色________(chūxiàn)
第二十九页，共48页。
二、实验(Leabharlann híyàn)步骤：步骤加入 试剂
设置反 应条件
剂量 观察气 泡产生
试管编号
a
b
c
d
3%H2O2 2 mL
第十一页，共48页。
2.在“比较过氧化氢(ɡuò yǎnɡ huà qīnɡ)在不同条件下的分解”实验 中，对实验的处理如表所示：
试管 组别
试管1 试管2 试管3 试管4
加入3%H2O2(mL) 2 2 2 2
实验处理
温度
加入试剂
常温
/
90℃
/
常温 常温
2滴3.5%FeCl3溶液 2滴20%肝脏研磨液
淀粉(diànfěn)的
(2)鉴定原理：温度影响(yǐngxiǎng)酶的活性，从而影响
水解
(yǐngxiǎng)___________，
滴加碘液，根据是否出现____蓝_及色_____蓝__色__的__深来浅判断酶的
活性。
第三页，共48页。
2.pH对酶活性的影响：
(1)反应原理：2H2O2 过氧化氢酶2H_2_O_+_O_2__。
第十二页，共48页。
对该实验的有关分析不正确的是( ) A.在上表的实验处理中，研究了温度和催化剂两个自变量 B.试管2中因为(yīn wèi)没有加入任何试剂，所以应为空白对照组 C.若试管4和试管1组成对照实验，可说明酶具有催化作用 D.若要研究酶的高效性，可选用的实验组合是试管4和试管3
探究温度、PH对酶活性的影响
• 材料与试剂
2% 新鲜淀粉酶溶液，3% 可溶性淀粉溶液，碘液，水，冰 块。
试管，试管架，烧杯，滴管，酒精灯，温度计，试管夹， 石棉网。
温度对淀粉酶活性的影响
2 mL淀粉溶液 2 mL淀粉溶液 2 mL淀粉溶液
A
B
C
1 mL淀粉酶溶液 1 mL淀粉酶溶液 1 mL淀粉酶溶液
A’
B’
C’
A和A’温试管度放对入淀冰块粉中酶，B活和性B’的试管影放响入温水（约
探究影响酶活性的因素
影响作酶出的假活设性的因素有
• 温度 • pH • 重金属 • 某些盐或有机溶剂
1.探究温温度度对对淀酶粉活酶性活的性影的响影响
淀粉+淀粉的温度
温度对淀粉酶活性的影响
• 原理
淀粉酶能催化淀粉分解。碘液检测剩余的淀粉的含量来反 映淀粉酶的活性。颜色越深，剩余的淀粉越多，酶活性越小。
60℃），C和C’试管放入沸水中，维持各自的温度5 min。
A
A’ B
B’
C
C’
0℃ 冰块
60℃
100℃ 沸水
分别将温A度和A对’试淀管粉，酶B和活B’性试的管，影C和响C’试管
混合，振荡，置于原来水浴中保温5 min。
A’
B’
C’
A
B
C
0℃
60℃
100℃ 沸水
目的：使反应终止
取出3支试管，放入冰块中，使温度都为0℃，分别 滴入3滴碘液，摇匀，观察记录颜色变化。
火柴。
pH对H2O2酶活性的影响
步骤：
1. 取6支试管，标号1、2、3、4、5、6，向1、2、3试 管分别加入3 mL 30% H2O2 溶液；4、5、6试管分别 加入1mL肝脏研磨液。
2% 新鲜淀粉酶溶液，3% 可溶性淀粉溶液，碘液，水，冰 块。
试管，试管架，烧杯，滴管，酒精灯，温度计，试管夹， 石棉网。
温度对淀粉酶活性的影响
2 mL淀粉溶液 2 mL淀粉溶液 2 mL淀粉溶液
A
B
C
1 mL淀粉酶溶液 1 mL淀粉酶溶液 1 mL淀粉酶溶液
A’
B’
C’
A和A’温试管度放对入淀冰块粉中酶，B活和性B’的试管影放响入温水（约
探究影响酶活性的因素
影响作酶出的假活设性的因素有
• 温度 • pH • 重金属 • 某些盐或有机溶剂
1.探究温温度度对对淀酶粉活酶性活的性影的响影响
淀粉+淀粉的温度
温度对淀粉酶活性的影响
• 原理
淀粉酶能催化淀粉分解。碘液检测剩余的淀粉的含量来反 映淀粉酶的活性。颜色越深，剩余的淀粉越多，酶活性越小。
60℃），C和C’试管放入沸水中，维持各自的温度5 min。
A
A’ B
B’
C
C’
0℃ 冰块
60℃
100℃ 沸水
分别将温A度和A对’试淀管粉，酶B和活B’性试的管，影C和响C’试管
混合，振荡，置于原来水浴中保温5 min。
A’
B’
C’
A
B
C
0℃
60℃
100℃ 沸水
目的：使反应终止
取出3支试管，放入冰块中，使温度都为0℃，分别 滴入3滴碘液，摇匀，观察记录颜色变化。
火柴。
pH对H2O2酶活性的影响
步骤：
1. 取6支试管，标号1、2、3、4、5、6，向1、2、3试 管分别加入3 mL 30% H2O2 溶液；4、5、6试管分别 加入1mL肝脏研磨液。
探究影响酶活性的因素
答
2.实验步骤和结果 (1)探究温度对酶活性的影响
序号
实验操作内容
试管1
试管2
试管3
1 加入等量的可溶性淀粉溶液
2 mL
2 mL
2 mL
60 ℃热水(5分钟
2
控制不同的温度条件
沸水(5分钟) 冰块(5分钟)
)
1 mL(5分钟 3 加入等量的新鲜淀粉酶溶液 1 mL(5分钟) 1 mL(5分钟)
)
4
产物总量也不会1 2增3加4 5
解析
答案
(4)生物体内酶的化学本质是__蛋__白__质__或__R__N_A， 其特性有__高__效__性__、__专__一__性_(答出两点即可)。
12345
解析
答案
(排除温度干扰)，且将酶溶液的pH调至 预设 pH后再 滴入，
不宜在未达到预设pH前，让反应物与酶接触。
过氧 化氢
过
过酶
氧
氧
化
化
氢
氢
酶
酶
关键点拨
1.实验材料选择时的注意事项 (1)在探究温度对酶活性的影响的实验中，不宜选择过氧化氢 (H2O2)和过氧化氢酶作为实验材料，因为过氧化氢(H2O2)在常 温常压时就能分解，加热的条件下分解会加快，从而影响实 验结果。 (2)在探究pH对酶活性的影响实验中，不宜选用淀粉和淀粉酶 作为实验材料，因为在酸性条件下淀粉本身分解也会加快， 从而影响实验结果。
长句应命题探究 答突破简答 题
如图为不同条件下，某酶促反应生成物的浓度随时间的变化曲线，请分析：
1.若表示的是不同催化剂条件下的反应，③是不加催化剂， ②是加无机催化剂，①是加酶，这体现了酶的高效性， 酶具有该特性的原理是同无机催化剂相比，酶能显著降低化 学反应的活化能。
2.实验步骤和结果 (1)探究温度对酶活性的影响
序号
实验操作内容
试管1
试管2
试管3
1 加入等量的可溶性淀粉溶液
2 mL
2 mL
2 mL
60 ℃热水(5分钟
2
控制不同的温度条件
沸水(5分钟) 冰块(5分钟)
)
1 mL(5分钟 3 加入等量的新鲜淀粉酶溶液 1 mL(5分钟) 1 mL(5分钟)
)
4
产物总量也不会1 2增3加4 5
解析
答案
(4)生物体内酶的化学本质是__蛋__白__质__或__R__N_A， 其特性有__高__效__性__、__专__一__性_(答出两点即可)。
12345
解析
答案
(排除温度干扰)，且将酶溶液的pH调至 预设 pH后再 滴入，
不宜在未达到预设pH前，让反应物与酶接触。
过氧 化氢
过
过酶
氧
氧
化
化
氢
氢
酶
酶
关键点拨
1.实验材料选择时的注意事项 (1)在探究温度对酶活性的影响的实验中，不宜选择过氧化氢 (H2O2)和过氧化氢酶作为实验材料，因为过氧化氢(H2O2)在常 温常压时就能分解，加热的条件下分解会加快，从而影响实 验结果。 (2)在探究pH对酶活性的影响实验中，不宜选用淀粉和淀粉酶 作为实验材料，因为在酸性条件下淀粉本身分解也会加快， 从而影响实验结果。
长句应命题探究 答突破简答 题
如图为不同条件下，某酶促反应生成物的浓度随时间的变化曲线，请分析：
1.若表示的是不同催化剂条件下的反应，③是不加催化剂， ②是加无机催化剂，①是加酶，这体现了酶的高效性， 酶具有该特性的原理是同无机催化剂相比，酶能显著降低化 学反应的活化能。
探究影响酶活性的因素
下表为某同学做的探究pH对酶活性影响的实验：
试管编号
A
B
实 1 加入2 mL体积分数为 加入2 mL体积分数
验
3%的H2O2溶液
为3%的H2O2溶液
步 2 5滴猪肝研磨液
5滴猪肝研磨液
骤
3 0.5 mL质量分数为5%的 0.5 mL质量分数为
NaOH溶液
5%的HCl溶液
4 观察气泡的产生速率 观察气泡的产生速率
上述实验设计中有两处不妥之处，请指出： a. 缺少pH＝7的对照组
加入NaOH和HCl的时间顺序不合理，
b. 应在加入H2O2酶前改变溶液的pH
3．将乳清蛋白、淀粉、胃蛋白酶、唾液淀粉酶
和适量的水混合装入一容器中，调整pH值至
2.0，保存于37℃的水浴锅内。过一段时间后
容器内剩余的物质是
（）
A．淀粉、胃蛋白酶、多肽、水
B．唾液淀粉酶、胃蛋白酶、多肽、水
C．唾液淀粉酶、麦芽糖、胃蛋白酶、多肽、水
D．唾液淀粉酶、淀粉、胃蛋白酶、水
谢谢
克／升，在70℃~80℃条件下作用12小时，褪浆率仅为
50%~60%；加酶法，用少量细菌淀粉酶，在适宜温度时只需5分
钟，褪浆率达100%，这一事实说明
（ B)
A．酶具有多样性 B．酶具有高效性
C．酶具有专一性 D．酶具有溶解性
2．淀粉酶使淀粉水解为麦芽糖，而不能使麦芽糖水解为葡萄糖，
这一事实说明了酶的（B）
例如：鉴别蔗糖溶液和KCl溶液
1、将洋葱表皮细胞置于一定浓度的KNO3溶液 中，一段时间后用显微镜观察，未观察到质
壁分离现象。以下推测不合理的是( C )
A．所取洋葱表皮细胞可能是死细胞 B．KNO3溶液的浓度可能低于细胞液浓度 C．细胞在盐溶液中不发生质壁分离 D．细胞可能发生质壁分离后又自动复原
高三生物一轮复习课件3.7.2探究酶的特性和影响酶活性的因素(实验)
（4）在常规实验中，高温下淀粉无法与碘液形成稳定的蓝色复合物，因此常
见的处理办法是将各组试管都冷却至0 ℃后，再滴加碘液，但这样操作的弊端
考法1 围绕教材基础实验，考查实验探究 1．(2022·浙江选考)下列关于研究淀粉酶的催化作用及特性实验的叙述，正
确的是( B )
A．低温主要通过改变淀粉酶的氨基酸组成，导致酶变性失活 B．稀释100万倍的淀粉酶仍有催化能力，是因为酶的作用具有高效性 C．淀粉酶在一定pH范围内起作用，酶活性随pH升高而不断升高 D．若在淀粉和淀粉酶混合液中加入蛋白酶，会加快淀粉的水解速率
考法1 围绕教材基础实验，考查实验探究
2．(2022·山东烟台期末)下列关于酶的实验叙述，正确的是( A )
A．研究pH对酶活性的影响时，不宜用淀粉作为底物
B．可用过氧化氢酶和过氧化氢探究温度对酶活性的影响
C．用麦芽糖、淀粉、淀粉酶作为实验材料，验证酶的专一性时，可用碘液进
行检测
D．比较H2O2在加了新鲜肝脏研磨液和加热蒸馏水时的分解速率，可验证酶具 有高效性
实验结论
生成物量最多的一组，或底物剩余量最少的一组所处温度（或pH） 为最适温度（或pH）
2、探究酶的最适温度或pH
（2）操作实例
①探究酶的最适温度
②探究酶的最适pH
探究温度(pH)对酶活性影响的实 验设计思路与探究酶的最适温度(pH) 基本相同，只是无须设置一系列温度 (pH)梯度，设置几组温度(pH)做自变 量即可，其他操作过程基本相同。
⑤5 ＋
40
30
B．结合①、②组的相关变量分析，自变量为温度
C．该酶催化反应的最适温度为70 ℃，最适pH为9
D．尚需补充实验才能确定该酶是否能水解其他反应物
见的处理办法是将各组试管都冷却至0 ℃后，再滴加碘液，但这样操作的弊端
考法1 围绕教材基础实验，考查实验探究 1．(2022·浙江选考)下列关于研究淀粉酶的催化作用及特性实验的叙述，正
确的是( B )
A．低温主要通过改变淀粉酶的氨基酸组成，导致酶变性失活 B．稀释100万倍的淀粉酶仍有催化能力，是因为酶的作用具有高效性 C．淀粉酶在一定pH范围内起作用，酶活性随pH升高而不断升高 D．若在淀粉和淀粉酶混合液中加入蛋白酶，会加快淀粉的水解速率
考法1 围绕教材基础实验，考查实验探究
2．(2022·山东烟台期末)下列关于酶的实验叙述，正确的是( A )
A．研究pH对酶活性的影响时，不宜用淀粉作为底物
B．可用过氧化氢酶和过氧化氢探究温度对酶活性的影响
C．用麦芽糖、淀粉、淀粉酶作为实验材料，验证酶的专一性时，可用碘液进
行检测
D．比较H2O2在加了新鲜肝脏研磨液和加热蒸馏水时的分解速率，可验证酶具 有高效性
实验结论
生成物量最多的一组，或底物剩余量最少的一组所处温度（或pH） 为最适温度（或pH）
2、探究酶的最适温度或pH
（2）操作实例
①探究酶的最适温度
②探究酶的最适pH
探究温度(pH)对酶活性影响的实 验设计思路与探究酶的最适温度(pH) 基本相同，只是无须设置一系列温度 (pH)梯度，设置几组温度(pH)做自变 量即可，其他操作过程基本相同。
⑤5 ＋
40
30
B．结合①、②组的相关变量分析，自变量为温度
C．该酶催化反应的最适温度为70 ℃，最适pH为9
D．尚需补充实验才能确定该酶是否能水解其他反应物
探究影响酶活性的条件
得出不同温度下的反应速率v，结果见下表：
请你根据上表数据，在坐标图中绘பைடு நூலகம்酶活性受温度影响的曲
线图。
(3)若用新鲜土豆研磨液代替上述新鲜猪肝研磨液，是否会出 现上述表格中类似的数据？___________ 。 (4)以上实验说明酶的催化作用需要 ___________ 。 (5)本实验得出的结论是 ___________________ 。
馏水，条件还应满足适宜pH；D错误，鸡蛋清溶液和酶液应在
调节到预设的温度和pH后再混合均匀进行水浴加热。
4.(2011·扬州模拟)某小组在完成探究“温度是否会影响酶 的活性”这个实验后提出一个问题：“酶活性受温度影响示
意图”是否真的如教材所示，呈规则的、左右对称的抛物线
呢？希望通过定量实验进行探究。以下是小组内同学们的讨 论： 甲同学提出：可通过测单位时间内反应物的消耗量来测定酶 的反应速率；
称的抛物线。
答案：(1)不可行 (2)见图
不具有可测性
(3)会
(4)适宜的温度
(5)过氧化氢酶活性受温度影响不像教材所画的那样是规则、 对称的抛物线
【解析】(1)甲同学方案不可行，因为H2O2分解可产生H2O和O2, 无法测定H2O2的消耗量。(2)绘图时应先将横纵坐标的含义标
明，然后描点连线，连成一条平滑的曲线。 (3)土豆中的H2O2
酶类似于猪肝研磨液中的H2O2酶，均具有最适pH，因此，若用 新鲜土豆研磨液也会出现类似表格中的数据。 (4)据表可知， 酶的催化作用需要适宜的温度。(5)据绘制的曲线不难判断： 过氧化氢酶活性受温度影响不像教材所画的那样是规则、对
2在探究温度对酶活性影响的实验中操作过程中第一步与第二步不能颠倒在探究ph对酶活性影响的实验中操作步骤与一定不能颠倒顺序否则在调节温度或ph的过程中酶会将淀粉或过氧化氢分解导致实验失败
影响酶活性的因素
实验中出现的结果及分析 实际实验结果情况：（1）在100或60摄氏度中变蓝 （2）试管中的颜色偏紫色 实际实验结果分析：（1）冰水中的实验最不易做成，因为学生加的 酶过量或保温时间不够等。 （2）放置的时间不够 （3）在放置时弄混试管 （4）
你的困惑
1. 在探究温度和pH对酶活性的影响实验时，能否先将酶和反应物混合后再 分别放置在不同条件下处理？ —不能。因为酶具有高效性，把酶和反应物混合后就会立即发生催化反应。 2. 在探究温度对酶活性的影响时不宜选用过氧化氢酶催化H202，为什么？ ———因为H2O2加热的条件下分解会加快。如果要做的话，可以把猪肝研磨液 加热到100℃，等冷却后加入过氧化氢溶液中 。 3. 为什么在探究温度对淀粉酶活性的影响时要把3号试管取出待冷却后在 加入碘液？ ———因为碘预热易升华。
二、实验原理
• 酶的活性受温度和pH等条件的影响，适宜 的温度和pH有利于酶发挥活性。
• 温度对酶的影响是：
• pH值对酶的影响是：
三、实验材料及用具
试剂： 体积分数30％过氧化氢溶液 质量分数2%的新配制的淀粉酶溶液 质量分数3%的可溶性淀粉溶液 质量分数5％HCl溶液 质量分数5％NaOH溶液 新鲜的质量分数为20%的肝脏研磨液 蒸馏水 冰块 碘液
pH对过氧化氢酶活性的影响的实验现象
序号
1 2
项
目
A 1mL 2mL
试管 B 1mL /
C 1mL /
注入新鲜的肝脏研磨液 注入蒸馏水
3 ４
5
注入氢氧化钠溶液 注入盐酸
注入过氧化氢溶液
/ /
1mL
产生大量 气泡
2mL /
1mL
无气泡 产生
/ 2mL
1mL
影响酶活性的条件
酶的概念
酶是活细胞产生的具有生物催化作用的有机物。
酶的来源
酶的功能 降低活化能
酶的本质
其中绝大多数酶是蛋白质 少数是RNA。
◆酶的活性
细胞中几乎所有的 化学反应都是由酶来催化 的。酶对化学反应的催化 效率称为酶活性
探究影响酶活性的条件
相关资料1：①加酶洗衣粉的包装袋上，
往往注明这种洗衣粉的适用温度范围。 ②人在发烧时，食欲较差。
步 三
骤 四
冰水中水浴3分钟 37℃中水浴3分钟 沸水中水浴3分钟
1与2试管混合摇 3与4试管混合摇 5与6试管混合摇 匀，充分反应 匀，充分反应 匀，充分反应
取出试管，滴4滴 取出试管，滴4滴 取出试管，滴4滴
碘，观察
碘，观察
碘，观察
预期现象 因变量
实验结论
2.下列是某学生设计的探究pH对酶活性的影响实验
在最适温度的两侧，反应速率都比较低 较高的温度容易使酶的 空间结遭构到破坏，蛋白质变 性，而失去 。活性
在最适合的pH下， 过氧化氢酶 酶的活性 最高
动物体里的酶最适PH大 多在6.5---8.0之间， （但
胃蛋白酶为1.5，胰液中的酶 为8---9）
植物体里的酶最适PH大 多在4.5-----6.5之间
（一）证明大多数酶是蛋白质的依据
1、酶能被蛋白酶水解而失活，水解最终产物 是氨基酸。 2、能使蛋白质变性的因素（高温、强酸、强 碱等）都可使酶变性失活。 3、酶与双缩脲试剂反应呈紫色。
◆1、酶的活性
细胞中几乎所有的 化学反应都是由酶来催化 的。酶对化学反应的催化 效率称为酶活性
（四）酶的作用条件比较温和
步骤五：分析和结论
1. 温度对酶活性的影响
①汇报实验现象（颜色变化）： 冰水 蓝色 ；
酶是活细胞产生的具有生物催化作用的有机物。
酶的来源
酶的功能 降低活化能
酶的本质
其中绝大多数酶是蛋白质 少数是RNA。
◆酶的活性
细胞中几乎所有的 化学反应都是由酶来催化 的。酶对化学反应的催化 效率称为酶活性
探究影响酶活性的条件
相关资料1：①加酶洗衣粉的包装袋上，
往往注明这种洗衣粉的适用温度范围。 ②人在发烧时，食欲较差。
步 三
骤 四
冰水中水浴3分钟 37℃中水浴3分钟 沸水中水浴3分钟
1与2试管混合摇 3与4试管混合摇 5与6试管混合摇 匀，充分反应 匀，充分反应 匀，充分反应
取出试管，滴4滴 取出试管，滴4滴 取出试管，滴4滴
碘，观察
碘，观察
碘，观察
预期现象 因变量
实验结论
2.下列是某学生设计的探究pH对酶活性的影响实验
在最适温度的两侧，反应速率都比较低 较高的温度容易使酶的 空间结遭构到破坏，蛋白质变 性，而失去 。活性
在最适合的pH下， 过氧化氢酶 酶的活性 最高
动物体里的酶最适PH大 多在6.5---8.0之间， （但
胃蛋白酶为1.5，胰液中的酶 为8---9）
植物体里的酶最适PH大 多在4.5-----6.5之间
（一）证明大多数酶是蛋白质的依据
1、酶能被蛋白酶水解而失活，水解最终产物 是氨基酸。 2、能使蛋白质变性的因素（高温、强酸、强 碱等）都可使酶变性失活。 3、酶与双缩脲试剂反应呈紫色。
◆1、酶的活性
细胞中几乎所有的 化学反应都是由酶来催化 的。酶对化学反应的催化 效率称为酶活性
（四）酶的作用条件比较温和
步骤五：分析和结论
1. 温度对酶活性的影响
①汇报实验现象（颜色变化）： 冰水 蓝色 ；
生物化学--酶促反应的速率和影响因素 PPT课件
一个酶的活性中心不是一 个点、一条线或一个面， 而是一个空间部位。 酶活性中心的氨基酸残基 在一级结构上可以相距较 远，但通过肽键的盘绕折 叠，在空间结构中都处于 邻近位置。
酶活性中心的必需基团
酶活性中心含有多种不同的基团，其中 一些基团是酶的催化活性必需的，称为 必需基团。 在酶的催化过程中，这些必需基团与底 物分子通过非共价力等方式，起催化作 用。
按照酶活性部位的功能，分为
1.结合部位：是活性中心，决定酶的专一性 结合部位在空间形状和氨基酸残基组成上有利于与底物形 成复合物使参加化学变化的反应基团相互接近并定向。 2.催化部位：是活性中心，决定酶的催化能力 酶的催化部位与结合部位重叠或者靠近。催化部位含有多 种具有活性侧链的氨基酸残基，如Ser,His,Asp,Cys等，及 辅酶和金属离子。作用是使底物的价键发生形变或极化， 降低过渡态活化能。 3.调控部位：不是酶的活性中心，调控部位的作用是调节 酶促反应的速率或方向。可以与底物以外的分子发生某种 程度的结合，引起酶分子空间构象的变化，对酶起激活或 抑制作用。
米氏常数Km
Km=(k2+k3)/k1
Vmax [S] v K m [S]
当反应速率等于最大速率一半时，即v=1/2vmax 米氏方程可以表示为Km=[S]，Km的物理意义 是当酶促反应初速度达到最大反应速率一半时 的底物浓度，单位为浓度单位.
米氏常数Km是酶学研究中的重要数据
1. 不同的酶具有不同的Km值，它是酶的一个重 要的物理常数。只与酶的性质有关，与酶的浓度 无关。 可以用来鉴别酶。
酶活力
即酶活性，指酶催化某一化学反应的能 力
酶活力的大小可以用在一定条件下所催 化的某一化学反应的反应速率来表示.
单位时间内底物的减少量或产物的增加量
实验六酶活性影响因素的测定-温度、pH对酶活性的影响-精品文档
以1分钟的间隔,依次向第1至第8号试管 中加入稀释100倍的唾液2毫升,摇匀,并以1 分钟的间隔依次将8支试管放入37℃恒温水 浴中保温.然后,按照第9 号试管的保温时间, 依次将各管迅速取出,并立即加入碘化钾-碘 溶液2滴,充分摇匀.观察各管呈现的颜色,判 断在不同pH值下淀粉被水解的程度,可以看 出PH对唾液淀粉酶活性的影响,并确定其最 适pH.
本实验分别以不同温度及不同pH条件下让淀粉 酶作用于淀粉，并用碘液检查酶促淀粉的水解程度， 来说明温度及pH对酶活力的影响。 实验中以稀释的唾液作为淀粉酶液。唾液内的 淀粉酶可将淀粉逐步水解成各种不同大小的糊精分 子，最终产物为麦芽糖ห้องสมุดไป่ตู้少量的葡萄糖。它们遇碘 呈不同的颜色。直链淀粉（即可溶性淀粉）遇碘呈 蓝色；糊精按分子从大到小的顺序，遇碘可呈蓝色、 紫色、暗褐色和红色，最小的糊精和麦芽糖遇碘不 显颜色。由于在不同温度，不同pH条件下唾液淀粉 酶的活性高低不同，则淀粉被水解的程度不同，所 以，可由酶反应混合物遇碘所呈现的颜色来判断上 述诸因素对酶活性的影响。
操作步骤
1.稀释的新鲜唾液：
取唾液适量，量取 倍。 一定体积，用蒸馏水稀释20
2. 温度对酶活力的影响
取3支试管，编号后各加入淀粉溶液2毫升。将第 1，2号试管放入37℃恒温水浴中保温，第3号试管放 入冰水中冷却，5分钟后，向第1号试管中加入煮沸5 －15分钟的稀释唾液1毫升，向第2，3号试管加稀释 唾液各1毫升。摇匀，20分钟后取出3支试管，各加 碘化钾－碘溶液2滴，混匀，比较各管溶液的颜色。 判断淀粉被唾液酶水解的程度，并说明温度对唾液 酶活性的影响。
思考题：将乳清蛋白、淀粉、胃蛋白酶、唾液淀粉酶和适量 水混合装入一个容器内，调整pH至2.0 ，保存于37℃的水溶 锅中，过一段时间后，容器内剩余的物质是什么？为什么？
酶促反应的速率和影响因素PPT(完整版)
1931年，德国化学家Michaelist和Menten根据中间产物学说对酶 促反应的动力学进行研究，推导出了整个反应中的底物浓度和反 应速度关系著名公式，即米氏方程
Km——米氏常数
Vmax——最大反应速率
Leonor Michaelis (1875-1949) Maud Menten (1879-1960
3、当反应速率等于最大速率一半时，即V=0.5Vmax时。则
Km=【S】
米氏方程所规定动力学规律，是酶促反应的一项基本熟悉属性
米氏常数的求法，双倒数作图法
可以将米氏方程的形式加以改变，将方程两边同时取倒数，使方 程变成y=ax+b的直线方程
米氏常数K,m的意义
由米氏方程可知，当反应速度等于最大反应速度的一半时，即
适合条件下，酶促反应速率最大，在不同的pH条件下，酶的活性
中心与底物之间形成氢键的能力和方向不同，其结果是影响了 酶——底物过渡态的形成和稳定程度，从而对酶的活性产物影响。
pH对于不同的酶也不一样
E-S复合物的形成的速率和酶与底物的性质有关。 3、当反应速率等于最大速率一半时，即V=0. 酶促反应的速率和影响因素 温度对酶促反应速率的影响有俩个方面 酶促反应的速率和影响因素 反应速率与底物浓度成正比； Leonor Michaelis (1875-1949) Maud Menten (1879-1960 反应速率与底物浓度成正比； 反应速率不再增加，达最大速率； 酶促反应的速率和影响因素 酶促反应的速率和影响因素 动物 最适温度＝35度-40度 pH对于不同的酶也不一样 少数酶特殊，如液化淀粉酶 的最适温度为90度 由米氏方程可知，当反应速度等于最大反应速度的一半时，即 适合条件下，酶促反应速率最大，在不同的pH条件下，酶的活性中心与底物之间形成氢键的能力和方向不同，其结果是影响了酶——底物过渡态的形成和稳定程度，从而对酶的活 性产物影响。 医学上，实验室中高温消毒，高温使酶蛋白变性 1931年，德国化学家Michaelist和Menten根据中间产物学说对酶促反应的动力学进行研究，推导出了整个反应中的底物浓度和反应速度关系著名公式，即米氏方程
Km——米氏常数
Vmax——最大反应速率
Leonor Michaelis (1875-1949) Maud Menten (1879-1960
3、当反应速率等于最大速率一半时，即V=0.5Vmax时。则
Km=【S】
米氏方程所规定动力学规律，是酶促反应的一项基本熟悉属性
米氏常数的求法，双倒数作图法
可以将米氏方程的形式加以改变，将方程两边同时取倒数，使方 程变成y=ax+b的直线方程
米氏常数K,m的意义
由米氏方程可知，当反应速度等于最大反应速度的一半时，即
适合条件下，酶促反应速率最大，在不同的pH条件下，酶的活性
中心与底物之间形成氢键的能力和方向不同，其结果是影响了 酶——底物过渡态的形成和稳定程度，从而对酶的活性产物影响。
pH对于不同的酶也不一样
E-S复合物的形成的速率和酶与底物的性质有关。 3、当反应速率等于最大速率一半时，即V=0. 酶促反应的速率和影响因素 温度对酶促反应速率的影响有俩个方面 酶促反应的速率和影响因素 反应速率与底物浓度成正比； Leonor Michaelis (1875-1949) Maud Menten (1879-1960 反应速率与底物浓度成正比； 反应速率不再增加，达最大速率； 酶促反应的速率和影响因素 酶促反应的速率和影响因素 动物 最适温度＝35度-40度 pH对于不同的酶也不一样 少数酶特殊，如液化淀粉酶 的最适温度为90度 由米氏方程可知，当反应速度等于最大反应速度的一半时，即 适合条件下，酶促反应速率最大，在不同的pH条件下，酶的活性中心与底物之间形成氢键的能力和方向不同，其结果是影响了酶——底物过渡态的形成和稳定程度，从而对酶的活 性产物影响。 医学上，实验室中高温消毒，高温使酶蛋白变性 1931年，德国化学家Michaelist和Menten根据中间产物学说对酶促反应的动力学进行研究，推导出了整个反应中的底物浓度和反应速度关系著名公式，即米氏方程
酶复习课件.ppt
溶__液__后__加__斐__林__试__剂__、__加__斐__林__试__剂__后__要__水__浴__加__热___。
四、影响酶促反应速率的因素
底物浓度、酶浓度、温度、pH 、激活剂抑制剂等
酶量足够
底物量足够
酶量一定
底物量一定
巩固练习： 1、有关下列坐标图的叙述不正确的是( C )
A．图①虚线表示酶量增加一倍时，底物浓度和反 应速度关系
(3)能否用斐林试剂检测，为什么？ 不__能__。__因__为__水__浴__加__热__会__改__变__温__度__从__而__影__响_实__验__结。果
4．下表是有关酶的两个实验，根据内容回答问题：
表
1 步骤 操作方法 1 加淀粉溶液
试管A 2 mL
试管B 试管C 2 mL 2 mL
2 温度处理 60℃ 100℃ 0℃
H2O2分解 反应速率
气泡产生速率
验证酶的 B
专一性
淀粉、 蔗糖
水解反应 是否发生
加斐林试剂水浴加热， 有无砖红色出现
温度对酶 C
活性影响
温度
淀粉水 解程度
加碘后溶液 颜色的变化
D 质壁分离 0.3 g/mL的 原生质层与 原生质层与细胞壁间隙
与复原 蔗糖溶液 细胞壁分离
的大小
2、在探究pH对酶活性的影响的实验中，温度和
3、分析下列图像，你能得出哪些结论？
总结：能引起酶变性的因素有哪些？ 高温、过酸、过碱、重金属盐等都能引起酶变性。
巩固练习： 1、下列4支试管中都加入3mL浆糊。另外A、C内分
别注入2mL清水，B、D内分别注入2mL人的唾液淀 粉酶。5min后，再向4支试管内分别滴入碘液，
最可能不变蓝的是( B )
探究温度对酶活性的影响ppt课件
活动4：
实验结论：
低温不使酶失活，温度升高时， 酶的活性可以增强。
高温使酶失活，温度降低时， 酶的活性不再恢复。
除了温度对酶的活性有影响， 你认为还有哪些因素？你会通过 实验证明吗？
网站登录：
2279.shtml
探究温度对酶活性的影响
授课人:
活动1：
1、认真阅读学案1，并预测实验结果。
2、依据实验报告进行实验操作。 （实验中注意安全！）
3、各小组展示实验结果并总结实验 结论。
4、完成实验报告。
1号
2号3号0℃来自60℃100℃
保滴温加5碘mi液n
实验结论：
温度可以影响酶的活性。 适宜温度时酶的活性强， 高于或低于适宜温度酶的活性减弱。
案例1：
原因分析：
实验操作顺序不恰当。
常温下将淀粉酶与淀粉溶液混合，淀粉 酶可以使淀粉发生水解。
保温过程中，温度是由常温分别向0℃、 60 ℃、100 ℃转变，这需要一定时间。 酶具有高效性，此过程中淀粉可能已经完全 水解。所以，滴加碘液后溶液都不变蓝。
案例2：
原因分析：
可能由于使用斐林试剂检测时， 需要在水浴条件下进行，使得1号试管 中温度由0℃升高，淀粉酶的活性随之 增强。在淀粉酶的作用下，淀粉发生 水解产生还原性糖，故而检测时出现 砖红色沉淀。
影响酶活性的因素实验
思考：测定人体内某些酶的活性时，反应体系中温 度、pH值应如何设定，为什么？
通过实验了解温度、pH值对酶作用的影响。
1、酶的活性受到温度、pH值的影响 2、淀粉酶可催化淀粉逐步水解生成糊精，糊 精分子的大小不同，遇碘时呈现的颜色也不 同。 3、可根据颜色判断淀粉被水解的程度，从而 判断温度、pH值对酶活性的影响。
图中物质的背景颜色表示该物质遇碘时所呈现的颜色，无 底色表示为无色透明。
试管号
1
2
3
pH3.0缓冲溶液（d） pH6.8缓冲溶液（d） pH8.0缓冲溶液（d）
1%淀粉溶液（d） 稀唾液（d） 稀碘液（d） 观察颜色
20 10 5 1
20 10 5 1
20
10 5 1
混匀，37℃水浴10分钟
1、加入稀唾液后应充分混匀。 2、滴加稀碘液时注意不可摇晃试管。 3、碘液不能滴加太多。
试管号
1
2
3
pH6.8缓冲溶液（d） 1%淀粉溶液（d） 水浴
稀唾液（d） 水浴 稀碘液（d） 观察现象（颜色）
20 10 0℃水浴5分钟
10 37℃水浴5分钟
5 混匀后37℃水浴10 分钟 1
20 10 100℃水浴5分钟
5 混匀后100℃水浴10 分钟 1
1、1％淀粉溶液 2、稀碘液 3、pH3.0、pH6.8、pH8三种缓冲溶液 4、实验器材 试管，试管夹，冰浴，沸水浴，恒温水浴锅 (37℃),吸管，滴管，试管架，记号笔，120ml烧 杯一个（或一次性纸杯）
1、制备稀释唾液 漱口后含约20ml蒸馏水在口中做咀嚼动作，3 分钟后吐入120ml烧杯或纸杯中，备用。
酶活性测定的主要影响因素及控制.ppt
将上述实测ε值代入K值计算公式得到校准K值外。
K V 10 6
v L
3.4 K的校准（酶校准物）
使用公认的酶校准物对K值进行校准，它是 国际上目前酶测定标准化新途径。
使用酶校准物的优点， 除具有实测ε值换算出的校准K值所具有的 一切优点外， 还可促进方法间的一致性和增加常规酶方 法的可靠性，可使不同实验室之间的测定 结果相对统一。
只是在延滞期去除部分干扰物。 这种模式可采用单一试剂剂型。
2.3 底物启动模式与样品启动模式
双试剂与单试剂酶促反应时间进程曲线
2.3 需要注意
某些双试剂剂型是基于试剂稳定性考虑， 并没有将底物单独作为第二试剂，也起不 到消除内源性干扰的作用。
2.4 正向反应与逆向反应
一般根据测定底物或产物的难易程度来决定。 除原则上选择对底物亲和力大，酶转换率高的
检测系统
光度计的准确性、重复性、线性范围和杂散光等 均会造成结果的偏差。
3 仪器影响因素的控制
在日常工作中，除常规做好仪器和设备的 正确使用和维护外，
重点应注意仪器的校准问题。
3.1 酶活性浓度的计算公式
U / L A K min
K V 10 6
vL
摩尔吸光系数 和系数 K 均为常数， 和 K受仪器诸多因素的影响，
反应时底物浓度高，反应时间短； 这也是淀粉酶的碘淀粉比色法逐渐被色素源底物
所取代的原因之一。 除部分测定NADH减少可以看成测底物的消耗量外，
已很少采用测定底物消耗量的项目。
2.2 检测底物或检测产物的选择
底物与产物
举例
ALT测定（赖氏法-定时法） L-丙氨酸 + α-酮戊二酸 A LT α-丙酮酸 + L-谷氨酸
K V 10 6
v L
3.4 K的校准（酶校准物）
使用公认的酶校准物对K值进行校准，它是 国际上目前酶测定标准化新途径。
使用酶校准物的优点， 除具有实测ε值换算出的校准K值所具有的 一切优点外， 还可促进方法间的一致性和增加常规酶方 法的可靠性，可使不同实验室之间的测定 结果相对统一。
只是在延滞期去除部分干扰物。 这种模式可采用单一试剂剂型。
2.3 底物启动模式与样品启动模式
双试剂与单试剂酶促反应时间进程曲线
2.3 需要注意
某些双试剂剂型是基于试剂稳定性考虑， 并没有将底物单独作为第二试剂，也起不 到消除内源性干扰的作用。
2.4 正向反应与逆向反应
一般根据测定底物或产物的难易程度来决定。 除原则上选择对底物亲和力大，酶转换率高的
检测系统
光度计的准确性、重复性、线性范围和杂散光等 均会造成结果的偏差。
3 仪器影响因素的控制
在日常工作中，除常规做好仪器和设备的 正确使用和维护外，
重点应注意仪器的校准问题。
3.1 酶活性浓度的计算公式
U / L A K min
K V 10 6
vL
摩尔吸光系数 和系数 K 均为常数， 和 K受仪器诸多因素的影响，
反应时底物浓度高，反应时间短； 这也是淀粉酶的碘淀粉比色法逐渐被色素源底物
所取代的原因之一。 除部分测定NADH减少可以看成测底物的消耗量外，
已很少采用测定底物消耗量的项目。
2.2 检测底物或检测产物的选择
底物与产物
举例
ALT测定（赖氏法-定时法） L-丙氨酸 + α-酮戊二酸 A LT α-丙酮酸 + L-谷氨酸
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0.25 发生
B 则马铃薯的细胞液浓度大约为 g/ml
A、0.05—0.10 B、0.10-0.15
C、0.15-0.20
D、0.20-0.25
.
3. 将甲乙两种不同植物的成熟活细胞置于 0.3mol/l的蔗糖溶液中，用显微镜观察其形 态，如图所示B Nhomakorabea甲
乙
A、甲细胞液浓度较高不适应盐碱地栽培 B、甲细胞液浓度较高更适应盐碱地栽培 C、乙细胞液浓度较高更适应盐碱地栽培 D、乙细胞液浓度较高不适应盐碱地栽培
.
探究淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用
淀粉溶液
蔗糖溶液
一
实
验 步
二
骤
1号试管中加入2mL 2号试管中加入2mL
淀粉溶液
蔗糖溶液
分别加入淀粉酶2滴，振荡，试管下半部浸入 60℃左右的热水中，反应5min
三 加入斐林试剂
振荡 约60℃水浴2min
实验 现象
砖红色沉淀
无变化
结论 淀粉酶只能催化淀粉水解，不能催化蔗糖水解
五、质壁分离和复原的扩展应用
（1）判断细胞的死活；
发生质壁分离和复原 （活细胞） 待测细胞+蔗糖溶液-----
不发生质壁分离 （死细胞）
（2）测定细胞液的浓度范围
待测细胞 + 一系列浓度梯度的蔗糖溶液—— 细胞液浓度范围=未发生质壁分离和刚刚发生质 壁分离的外界溶液的浓度范围。
.
3、比较不同植物细胞的细胞液浓度 不同细胞在 同样溶液中
一
试管各加入2mL淀粉溶液
实验 步骤
二
保持0℃冰水中 加热至60℃，加热至100℃，
约5min
约5min 约5min
三 加入淀粉酶2滴，振荡
四 各加入两滴碘液
振荡
实验现象 蓝色
无明显现象
蓝色
结论
温度影响酶的活性，适宜温度下酶的催化效率最高
.
• 3．实验设计程序
淀粉
淀粉酶
↓
↓
各自在所控制的温度下处理一段时间
C＜B＜A
4、比较溶液浓度的大小
.
相同细胞在不 同浓度溶液中
C＞B＞A
5、鉴别不同种类的溶液
镜检
相同成熟植物细胞＋不同种类溶液
（1）若只发生质壁分离： 蔗糖溶液 溶质不能通过原生质层的溶液
（2）质壁分离后自动复原： KCl溶液 溶质可以通过原生质层的溶液
例如：鉴别蔗糖溶液和KCl溶液
.
1、将洋葱表皮细胞置于一定浓度的KNO3溶液 中，一段时间后用显微镜观察，未观察到质壁
.
探究影响酶活性的因素
必修一：P84 百年学典：P 60—62
.
探究影响酶活性的因素
(1)细胞中几乎所有的化学反应都是由酶来催化 的。酶对化学反应的催化效率称为酶活性。
(2)环境中的一些因素，如温度、pH等对酶的催 化作用有一定的影响。
例如PH: 唾液淀粉酶：6.2—7.4 胃蛋白酶：1—2
（3）酶作用的特点：a、高效性 b、专一性 c、需要适宜的温度和PH
A．高效性
B．专一性
C．多样性
D．生物性
.
3．在右图所示的实验中属于自变量的是 （ A )
A．催化剂不同 B．过氧化氢分解的速率的大小 C．试管的大小 D．试管中的过氧化氢溶液的量
.
探究一、探究温度对酶活性的影响
1、会做出怎样的假设？ __温__度_会__影__响__酶__的_活__性__，__温__度_过__高__、__过低，酶的活性都会降低 2、如何验证你的假设？（设计实验） 实验的自变量？ ____温__度_________ 如何控制自变量？使_用__水__浴_恒__温__箱__，__底__物_与__酶__混合前要先预热处理。 无关变量？ 反_应_物__的__浓__度__，_滴__加__的__量__；_滴__加__酶__的__量；PH值-------
分离现象。以下推测不合理的是( C)
A．所取洋葱表皮细胞可能是死细胞 B．KNO3溶液的浓度可能低于细胞液浓度 C．细胞在盐溶液中不发生质壁分离 D．细胞可能发生质壁分离后又自动复原
.
2、将一块新鲜马铃薯切成5块，放在一定浓 度的蔗糖溶液中，通过显微镜观察细胞，结 果是
蔗糖浓度g/ml 0.05 0.10 0.15 0.20 质壁分离情况 不发生 不发生 刚发生 发生
3、选择的酶是 淀粉酶，反应物是 淀粉 。
.
一、温度对酶活性的影响
1．实验原理
• (1)如图所示
淀粉酶
淀粉
麦芽糖
碘液
碘液
蓝色
无蓝色出现
(2)温度影响酶的活性，从而影响淀粉的水解，滴加 碘液，根据是否出现蓝色及蓝色的深浅来判断酶的 活性。
.
探究温度对淀粉酶活性的影响
淀粉溶液 1号试管
2号试管
3号试管
↓
淀粉与相应温度的淀粉酶混合
↓
在各自所控制的温度下保温一段时间
↓
滴加碘液，观察颜色变化
• 本实验不宜选用过氧化氢酶催化过氧化氢分解，因为过氧化氢酶 催化的底物过氧化氢在加热的条. 件下分解也会加快。
为了得出的结果更准确：
实验组可等梯度温度多做几组
.
探究二、探究PH值对酶活性的影响
1、自变量是___P_H_值________，怎样控制自变 量？ 通过给酶溶液中滴加酸或碱溶液。
组对 照
.
管编 号
2
3
4
2ml 2ml 2ml
2滴Fecl3 2滴肝脏 研磨液
90℃水 浴加热
实验组
.
1
直接观察 对照组
2
水浴加热 实验组
3
肝脏研磨液 实验组
4
FeCl3溶液 实验组
.
酶的专一性： 每种酶只能催化一种或一类化学反应
验证实验： (1)方案一：用同一种酶催化两种不同物质 (2)方案二：用两种不同酶催化同一种物质
.
探究淀粉酶和蛋白酶对淀粉的水解作用
一 1、2号试管中分别加入2mL淀粉溶液
实
（两试管中PH和温度正常且相同）
验 步
二
1号加入
淀粉酶
2号加入 蛋白酶
骤
三 碘液
碘液
实验 不变蓝 现象
变蓝
结论 淀粉酶能催化淀粉水解，蛋白酶不能催化淀粉 水解
.
1．纺织工业上的褪浆工序常用两种方法：化学法，需用NaOH7~9
克／升，在70℃~80℃条件下作用12小时，褪浆率仅为
50%~60%；加酶法，用少量细菌淀粉酶，在适宜温度时只需5分
钟，褪浆率达100%，这一事实说明
（ B)
A．酶具有多样性 B．酶具有高效性
C．酶具有专一性 D．酶具有溶解性
2．淀粉酶使淀粉水解为麦芽糖，而不能使麦芽糖水解为葡萄糖，
这一事实说明了酶的（ B）
.
高效性： 比较过氧化氢在不同条件下的分解。
实验原理
2H2O2
2H2O + O2
条件1：常温下分解。 条件2：加热分解。 条件3：加入FeCl3后分解。 条件4：加入肝脏研磨液（H2O2酶）后分解。
.
实验操作、现象和结论
试
步骤及记录
1
加入过氧化氢的量
2ml
加入催化剂
温度
产生气泡多少
现象 卫生香燃烧情况