最新7第七章工业发酵染菌的防治lin

19.96
泡沫冒顶
0.48
夹套穿孔
12.36
盘管穿孔
5.89
接种管穿孔
0.39
阀门渗漏
பைடு நூலகம்
1.45
搅拌轴密封渗漏
2.09
罐盖漏
1.54
其它设备渗漏
10.13
操作原因
10.15
原因不明
24.94
上海第三制药厂染菌原因分析
项目 种子带菌 盘管穿孔 阀门渗漏 空气系统有菌 管理不善 其它 原因不明
百分率% 14.15 14.20 23.30 10.0 25.80 7.49 5.78
链霉素制药厂发酵染菌原因分析
项目 外界带入杂菌（取样、补料） 设备穿孔 空气系统有菌 停电罐压跌零 接种 蒸汽压力不足或蒸汽量不足 管理问题 操作违反规程 种子带菌 原因不明
百分率% 8.20 7.60
26.00 1.60 11.00 0.60 7.80 1.60 0.60
35.00
造成染菌的主要原因总结
1、设备渗漏
设备渗漏包括夹套穿孔、盘管穿孔、接种管穿孔、阀门渗漏、搅拌轴 渗漏、罐盖漏和其它设备漏等。日本工业技术院发酵研究所对染菌原 因分析，这类染菌占33.85％，上海三厂的分析这类染菌为37.5％。
2、空气带菌
从日本工业技术院和上海第四制药厂分析空气带菌而造成的染菌分别 为19.96％和 26%。国内外空气除菌技术虽已有较大改善，但仍然没 有使染菌率降低到理想的程度。因为空气除菌系统较为复杂，环节多， 偶遇不慎便会导致空气除菌失败。
2，从染菌的时间来分析 ❖ 发酵早期染菌：种子带菌、培养基和设备灭菌不彻底
、设备或管道有死角 ❖ 中、后期染菌：中间补料、设备渗漏、操作不合理
3，从染菌的类型来分析 ❖ 耐热性芽抱杆菌：死角或灭菌不彻底 ❖ 球菌、酵母：可能是从蒸汽的冷凝水或空气中带来的 ❖ 霉菌：灭菌不彻底或无菌操作不严格
四、染菌的防止
7第七章工业发酵染菌 的防治lin
（一）染菌对发酵的影响
1、染菌对不同产品发酵的影响
放线菌由于生长的最适pH为7左右，染细菌较多；霉菌生长pH 为5左右，因此染酵母菌为多。 青霉素发酵染菌，绝大多数杂菌都能直接产生青霉素酶，另一 些杂菌则可被青霉素诱导而产生青霉素酶。不论在发酵前期、 中期或后期，染有能产生青霉素酶的杂菌，都能使青霉素迅速 破坏。 链霉素、四环素、红霉素、卡那霉素等发酵染菌也会造成不同 程度的危害。如杂菌大量消耗营养干扰生产菌的正常代谢；改 变pH，降低产量。 疫苗生产危害很大。现在疫苗多采用深层培养，有些疫苗是不 加提纯而直接使用的产品，在其深层培养过程中，一旦污染杂 菌，不论死菌、活菌或内外毒素，都应全部废弃。因此，发酵 罐容积越大，污染杂菌后的损失也越大。
3、防止培养基灭菌不彻底
培养基灭菌前含有大量杂菌，灭菌时如果蒸汽压力不足，就达不到要 求的温度；灭菌时产生大量泡沫或发酵罐中有污垢堆积，就会窝藏大 量杂菌，造成灭菌不彻底。
4、防止空气引起的染菌
空气冷却器的列管穿孔泄露，冷却水会渗入到空气中，造成染菌。 棉花-活性炭过滤器长期使用后，棉花和活性炭的体积被压缩而厚薄 不均，厚的一边阻力大空气不畅通，薄的一边空气容易通过，久而久 之，薄的一边长期受空气顶吹而使棉花活性炭改变位置，造成过滤器 失效。 过滤器用蒸汽灭菌时，若被蒸汽冷凝水润湿就会降低或丧失过滤效能， 灭菌完毕应立即缓慢通入压缩空气，将水分吹干。 超细纤维纸作过滤介质，灭菌时必须将管道中冷凝水放干净，以免介 质受潮失效。
3、种子带菌
种子带菌又分为种子本身带菌和种子培养过程中染菌。加强种子管理， 严格无菌操作，种子本身带菌是可以克服的。种子培养过程染菌与发 酵一样有许多因素造成。
4、灭菌不彻底
蒸汽通入培养基，升温快慢、保温时间——产生过多泡沫
蒸汽总压是否达到要求标准
5、技术管理不善（要对发酵每个环节严格控制）
环境中的杂菌数量因季节而有很大差别。如在卡那霉素生产中， 于炎热的夏季将连续灭菌预热至800C的培养基采样培养，可发 现无法计数的大量的芽孢杆菌；而冬季取样的培养中，则仅发 现2～3个芽孢杆菌。故染菌率因季节不同而发生明显变化。
原材料储存和保管，如液胨、玉米浆、母液糖等有机原料—— 杂菌的数量
发酵罐、培养基配制罐等设备的清洗质量——有无灭菌的死角 对减少或避免染菌仍然是十分必要的。
三、染菌情况分析
1，从染菌的规模来分析染菌原因 ❖ 大批发酵罐染菌 ：空气系统 ❖ 部分发酵罐(或罐组)染菌：前期可能是种子带杂菌，或灭
菌不彻底，中后期则可能是中间补料系统或油管路系统发 生问题所造成的 ❖ 个别发酵罐连续染菌：设备问题(如阀门的渗漏或罐体腐 蚀磨损)，设备的腐蚀磨损所引起的染菌会出现每批发酵 的染菌时间向前推移的现象 ❖ 个别发酵罐偶然染菌：原因比较复杂，因为各种染菌途径 都可能引起。
二、染菌的原因
（一）发酵染菌的检查判断
表观法：溶氧水平、排气 中CO2
实验法：镜检法、平皿划 线或斜面检查法、肉汤培 养法
（二）染菌原因
日本工业技术院发酵研究所多年来抗生素发酵染菌原因分析
项目
百分率%
种子带菌或怀疑种子带菌
9.64
接种时罐压跌零
0.19
培养基灭菌不透
0.79
总空气系统有菌
5、发酵染菌后的措施
染菌后的培养基必须灭菌后才可放下水道。可通蒸汽灭菌， 也可加入过氧乙酸等化学灭菌剂搅拌半小时，才放下水道。否 则由于各罐的管道相通，会造成其它罐的染菌，而且直接放下 水道也会造成空气的污染而导致其它罐批染菌。
凡染菌的罐要找染菌的原因，对症下药，该罐也要彻底清洗， 进行空罐消毒，才可进罐。
1、防止种子带菌
制备种子时对沙土管及摇瓶严格加以控制。
沙土制备时要多次间歇灭菌
注意接种、移种时的无菌操作
无菌室和摇床间都要保持清洁。无菌室内要供给恒温恒湿的无菌 空气，还要装紫外灯用以灭菌，或用化学药品灭菌。
2、防止设备渗漏
发酵设备及附件由于化学腐蚀、电化学腐蚀，物料与设备摩擦造成 机械磨损以及加工制作不良等原因会导致设备及附件渗漏。 试漏方法可采用水压试漏法。即被测设备的出口处装上压力表，将 水压入设备，待设备中压力上升到要求压力，关闭进出水，看压力 有否下降。压力下降则有渗漏。但有些渗漏很小，看不出何处漏水， 可以用稀碱溶液压入设备，然后用蘸有酚酞的纱布揩，只要酚酞能 变红处即为渗漏处。