手术室空气采样方法

1、采样时间：消毒后、操作前进行采样。

2、采样方法：

（1））布点：

室内面积≤30 m2 ，设内、中、外对角线 3 点，内外点距墙1m ；室内面积>30 m2 ，设四角及中央 5 点，四角点距墙1m 。

（2））平板暴露法

平板直径9cm 、采样高度 1.5m ，暴露5min 。

3、检验方法

平板37 ℃培养48h 。计数菌落数并分离致病菌。

4、平板暴露法结果计算

50000N

细菌总数（cfu/m3 ）=A×T

A 为平板面积（cm2 ）；T 为暴露时间（min ）；N 为平均菌落数（cfu ）

5、结果判定

（1））I、II 类区域，细菌总数≤10cfu/cm3 ，并未检出致病菌为消毒合格。

（2））III 类区域，细菌总数≤200cfu/cm3 ，并未检出致病菌为消毒合格。

（3））IV 类区域，细菌总数≤500cfu/cm2 ，并未检出致病菌为消毒合格。

6、注意事项：采样前关好门窗，在无人走动的情况下，静止10min 进行采样

层流手术室空气日常监测方法：

要求日常实行动态监测，必测项目为平板采样法（沉降法）或采样器法(浮游菌法)检测细菌菌落总数。

（1 ）回风口动态平板采样法：应在手术开始、手术 2 小时、手术结束前抽检3-4 次。每个回风口中部摆放 3 个倾斜30 ℃，Φ90 培养皿，暴露30 分钟后，37 °C 培养24 小时。

标准：每皿菌落计数平均值应符合表 4 标准要求。单皿最大值不应超过平均值 3 倍。

（2 ）动态采样器法：浮游菌菌落检测应在手术进行如切皮、缝合、连台手术之间、手术

进行 4 小时等，选择不少于 3 个程序，测定细菌菌落总数。

标准：I 级<30cfu/m3 ；II 级<150 cfu/m3 ；III 级<450 cfu/m3 ；IV 级<500 cfu/m3 。

（3 ）其他洁净用房在当天上午10 时和下午 4 时各测 1 次，在每个回风口中部摆放 3 个Φ90 培养皿，沉降0.5h 后在37℃下培养24h 。

标准：同回风口动态平板采样法标准。

层流手术室静态（空态）时空气采样方法：

1 、采样方法：

（1）当送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；当送风口分散布置时，按全

室统一布点方法检测。

（2 ）沉降法采样时，用直径9cm 的培养皿，在空气中暴露30min ，37 ℃培养24h ，培养皿中的菌落数（cfu ）代表空气中沉降下来的细菌数，以个/皿表示。

（3 ）浮游法采样时，用裂隙采样器在空气中随机采样30min ，对采样皿或采样条培养得

出的菌落数（cfu ），代表空气中浮游下来的细菌数，以个/m3 表示。

2 、采样高度：

（1 ）采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m 的任意高度上；

（2）在手术区检测时应无手术台；当手术台已固定时，检测高度应在台面之上0.25cm 。

3 、布点方法：（见表1）

4 、采样注意事项：

（1 ）在100 级区域检测时，采样口应对着气流方向；在其他区域检测时，采样口均向

上；

（2 ）采样后的培养基条或培养皿，应37 ℃条件下培养24h ，并计算菌落数，菌落数的

平均值均四舍五入选位到小数点后 1 位；

（3 ）当采用浮游法测定浮游菌浓度时，细菌浓度测点数应和被测区域的含尘浓度测点数

相同，且宜在同一位置上。每次采样应满足表8 的最小采样量的要求，每次采样时间不应

小于30 分钟。

（4 ）当用沉降法测定沉降菌浓度时，细菌浓度测点数即要不少于含尘浓度测点数，应满足表9 规定的最少培养皿数的要求（不含对照皿）。如沉降时间适当延长，则最少要求培养

皿数可按比例减少，但不能少于含尘浓度的最少测点数。

（5 ）不论用何种方法检测细菌浓度，都必须有两次空白对照。第一次用于检测培养皿或

培养基条（每批一个对照皿（条））；第 2 次对操作过程做对照试验（每室或每区将 1 个对照皿（条），打开后又立即封盖，进行模拟操作）；两次对照结果必须为阴性，整个操作过程

应符合无菌操作的要求。

（6 ）新房验收时，应最后做空气、物表细菌检测。

表 1 洁净手术室空气采关布点位置与方法

区域最少测点数手术区图示

Ⅰ级洁净手术室 5 点（双对角线布点）

手术区和洁净辅助用房8 点（每边内 2 点）

局部100 级区

Ⅰ级周边区

Ⅱ～Ⅲ级洁净手术 3 点（单对角线布点）集中送风面正投影区

室手术区 6 点（长边内 2 点，短边内 1 点）集中送风面正投影区

Ⅱ级周边区 4 点（每边内 1 点）

Ⅲ级周边区

Ⅳ级洁净手术室及分散 4 点（避开送风口正下方）

布置送风口的洁净室面 2 点（避开送风口正下方）

积＞30 ㎡

面积≤30 ㎡

注：分布在集中送风面正投影区角的采样点距离邻近两边的距离位0.12 米

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