氨基酸分析仪原理、分类及几种氨基酸分析仪的比较-科邦实验室
氨基酸分析仪法实验报告
• 方法评价：根据实验结果，评价氨基酸分析仪法的优缺点 • 应用前景：分析氨基酸分析仪法在食品、饲料、医药等领域的应用前景 • 改进措施：提出实验方法的改进措施和建议
04
实验结论与建议
实验结论总结
实验结论
• 验证了氨基酸分析仪法在实际应用中的准确性和可靠性 • 评价了氨基酸分析仪法在食品、饲料、医药等领域的应用前景 • 提出了实验方法的改进措施和建议
技术发展
• 氨基酸分析仪的自动化程度不断提高，减少人为误差 • 样品前处理技术的改进，提高样品处理效率 • 数据处理方法的创新，提高数据分析准确性和可靠性
02
实验原理与方法
氨基酸分析仪法基本原理
氨基酸分析仪法的基本原理
• 利用化学显色反应，将氨基酸转化为具有特定颜色的化合物 • 通过分光光度计测定颜色强度，计算氨基酸含量 • 根据标准曲线，将测定结果转换为氨基酸浓度
实验建议
• 加强方法研究，扩大氨基酸分析仪法的应用领域 • 推广氨基酸分析仪法，提高氨基酸分析的准确性和可靠 性 • 加强学术交流，促进氨基酸分析仪法的发展和应用
未来研究方向与应用前景
未来研究方向
• 氨基酸分析仪法的深入研究，提高分析速度和准确度 • 氨基酸分析仪法与其他分析技术的联合应用，提高综合分析能力 • 氨基酸分析仪法在新兴领域的应用研究，拓展应用范围
实验分析方法
• 标准曲线法：通过测定标准品的颜色强度，制作标准曲线，计算样品中氨基酸含量 • 质量控制：通过分析质控样品，评估评估氨基酸分析仪法的优势
03
实验数据与分析
实验数据收集与整理
实验数据收集
• 氨基酸含量测定：记录样品中各氨基酸的浓度 • 质控样品分析：记录质控样品的氨基酸含量 • 数据比对：记录实验结果与其他分析方法的对比数据
氨基酸分析原理与方法
4.提高流动相PH值，氨基酸正电荷减少，吸附力减弱，最后从离子交换柱 上洗脱下来。洗脱顺序是酸性和带羟基氨基酸、中性氨基酸、碱性氨基 酸。
5.氨基酸标准液中各种氨基酸在氨基酸自动分析仪上被洗脱的顺序有一定; 标准液各种氨基酸的浓度一定，洗脱峰的面积一定;由此可计算出样品中
• 生理体液样品首先要除去样品中的蛋白质，获得游离 氨基酸。除去蛋白质化学方法为：
• 1.苦味酸法 • 2.三氯醋酸法 • 3.磺基水杨酸法 • 4.乙醇沉淀法 • 常用方法为磺基水杨酸法：用4%磺基水杨酸，按1:3比
例与样品混合离心去蛋白，转速2万转以上离心10分钟 或更长一些时间。取上清液用样品稀释液稀释后上机 测定。（建议进样前用C18过滤柱处理一下为好）。
• 山东大学生命科学院发表的《低智儿童与正常儿童中氨 基酸的比较研究》一文着重叙述了血清中11种氨基酸的降 低可直接影响人体组织的正常发育、生长，从而导致儿童 智力发育不全。
• 军事医科院《条件性必需氨基酸在创伤愈合中的作用》 一文中叙述了条件性必需氨基酸在创伤愈合中的关系。
• 北京军区总医院《人胃癌组织及胃正常组织氨基酸的差 异研究》一文中通过对胃癌组织及自身胃正常组织氨基酸 的测定，探讨了肿瘤组织氨基酸代谢的变化规律。
LL--88880000氨氨基基酸酸分分析析仪仪 成成都都交交流流讲讲座座
吕守民 天美科技有限公司
目录
• 一、氨基酸分析仪 • 二、氨基酸 • 三、氨基酸分析仪基本分析原理 • 四、氨基酸分析仪法与HPLC的比较 • 五、样品的制备 • 六、应用
日立L-8800氨基酸分析仪简介
一、氨基酸分析仪： （一）氨基酸分析仪的构成（见图1) （二）氨基酸分析仪的流程图（见图2)
氨基酸分析仪的基本分析原理
氨基酸分析仪的基本分析原理
氨基酸分析仪是一种用于定量分析样品中各种氨基酸的仪器。
其基本分析原理是通过将样品中的氨基酸分离、检测和定量，从而确定样品中各种氨基酸的含量。
首先，样品中的氨基酸需要被分离出来。
一种常用的方法是利用离子交换色谱技术。
离子交换色谱是通过样品中氨基酸的酸性基团和碱性基团与固定在色谱柱上的阴、阳离子交换剂之间的离子交换作用进行分离的。
通过调整溶剂和柱温等条件，可以实现对氨基酸的选择性分离。
其次，分离出的氨基酸需要被检测。
最常用的检测方法是紫外吸收检测。
氨基酸在紫外区域有特定的吸收峰，对应着特定的波长。
通过测量样品在不同波长下的吸光度，可以得到吸收峰的强度。
根据吸光度和吸光度与浓度之间的关系，可以计算出样品中各种氨基酸的浓度。
最后，根据样品中氨基酸的浓度，通过一定的计算公式，可以定量地确定样品中各种氨基酸的含量。
通常，会利用标准曲线法，即利用已知浓度的氨基酸标准溶液制备一系列浓度不同的标准曲线。
将样品中各种氨基酸的吸光度值与标准曲线进行比较，就可以得到各种氨基酸的浓度。
综上所述，氨基酸分析仪通过分离、检测和定量的步骤，可以对样品中的氨基酸进行分析，从而确定样品中各种氨基酸的含量。
氨基酸分析仪概况
氨基酸分析仪概况氨基酸分析仪是一种用于检测和分析氨基酸的仪器设备，广泛应用于食品、农产品、生物医药等领域。
该仪器通过特殊的分析方法和技术，可以快速、准确地测定样品中氨基酸的含量和组成，为科研和生产提供了重要的数据支持。
氨基酸是构成蛋白质的基本组成单位，同时也是生命体内重要的代谢产物。
因此，准确测定样品中的氨基酸含量和组成对于了解生物体的代谢状态、蛋白质的结构和功能等方面具有重要意义。
氨基酸分析仪的出现大大简化了氨基酸的分析过程，提高了分析效率和准确性。
1.试剂槽和自动进样系统：用于储存和供给所需的试剂。
自动进样系统能够实现样品的自动进样，提高分析效率。
2.反应器：用于将样品与试剂进行反应。
反应过程中，氨基酸与试剂发生特定的化学反应，产生可检测的信号。
3.检测器：用于检测反应产生的信号。
常见的检测器包括紫外-可见光谱检测器、荧光检测器等。
检测器能够将检测到的信号转化为可读取的数据。
4.数据分析系统：用于处理和分析检测到的数据。
数据分析系统可以进行数据的整理、统计和绘图等操作，提供数据报告和结果分析。
5.控制系统：用于控制仪器的运行和参数调节。
控制系统可以对温度、压力、流速等参数进行调控，保证仪器的稳定运行。
氨基酸分析仪的工作原理通常基于特定的化学反应原理，常用的分析方法包括高效液相色谱法(HPLC)、氨基酸分析仪电泳法(AAA)等。
其中，HPLC是目前应用最广泛的分析方法之一、HPLC基于样品中氨基酸与特定试剂发生反应，形成具有特定吸收或荧光性质的产物，通过波长选择器和检测器对产物进行检测和分析。
AAA则是通过电泳的原理分离和检测样品中的氨基酸，根据氨基酸的电泳迁移速率和特定检测方法进行分析。
氨基酸分析仪的应用领域非常广泛。
在食品工业中，氨基酸分析仪可以用于检测食品中的氨基酸，评估蛋白质的含量和质量，并对食品中的氨基酸进行监控和调节。
在农业领域，氨基酸分析仪可以帮助农业科研人员了解植物和动物组织中的氨基酸含量和代谢状态，对肥料的选择和使用提供科学依据。
氨 基 酸 自 动 分 析 仪 简 介
氨基酸自动分析仪氨基酸是蛋白质的组成成分，是蛋白质化学研究的主要内容之一。
蛋白质是一切生命物质的基础，因此，探讨和揭示生命现象的发生、生长、新陈代谢、遗传变异过程，都与氨基酸的研究有关。
随着近代物理学、化学和电子学的飞速发展，氨基酸的分析技术亦在不断更新。
氨基酸分析仪是本世纪50年代研制的，仅40多年，已发展到现在的进样、分离、检测和数据处理全部自动化的程度。
检出量由微克分子到毫微克分子，分析时间由原来的24小时到现在的半个小时，分析技术的提高促进了其他科学领域的发展。
一、氨基酸自动分析仪的进展用于氨基酸分析的方法很多，有纸色谱法、柱色谱法、薄层色谱法、电泳法及气相色谱法等。
一般认为离子交换柱色谱法是较为精确的检测方法，氨基酸分析仪就是在此基础上研制成功的。
1951年Moor和Stein采用离子交换树脂色谱，用茚三酮试剂显色和分光光度计检测而设计，后来在Spaekman的协助下，使分析操作自动化。
迄今氨基酸分析仪的条件和自动程度有了很大的改观，其特点主要表现以下几个方面。
⒈树脂粒径减小近年来制成的小颗粒球状树脂，使氨基酸分析仪得到很大改进。
由于树脂粒径减小就对应地增加等量树脂的总面积，使现在少量树脂达到过去大量树脂的分离效果，从而减小了树脂柱的内径和体积，节省了试剂用量，缩短了分析时间。
树脂的粒径从200→20→10→5µm。
⒉色谱柱内径缩小树脂粒径减小使填充树脂床的色谱柱内径减小，由过去的粗长柱变为微柱。
色谱柱内径的变化为18→6→2.8→1.75mm。
⒊输压泵压力增高一般氨基酸分析仪采用低压泵，其施加于输液的压力只有几9.80665×104Pa，以后增加至几十9.80665×104Pa，现在发展到2068×104Pa。
⒋分析时间缩短由于树脂粒径的改善，色谱柱内径缩小和泵压增高，使分析时间大大缩短。
蛋白质水解液的分析时间从过去的24小时缩短到现在的半个小时左右。
氨基酸检测方法及原理
氨基酸检测方法及原理嘿，朋友们！今天咱来聊聊氨基酸检测方法及原理，这可有意思啦！你想啊，氨基酸就像是我们身体这个大机器里的小零件，它们得各就各位，才能让我们健康又活力满满呀！那怎么知道这些小零件有没有安好呢？这就需要检测啦！先来说说一种常见的方法——高效液相色谱法。
这就好比是一个超级厉害的筛选器，能把各种氨基酸一个一个地挑出来，分得清清楚楚。
它利用不同氨基酸在特定条件下的流动速度不一样，就像小朋友们赛跑，有的跑得快，有的跑得慢，这样就能把它们区分开来啦。
是不是很神奇？还有一种叫气相色谱法呢！这个呀，就好像是个精细的分类大师。
它能把氨基酸变成气体，然后根据它们的特性来进行辨别。
你说神奇不神奇？那氨基酸检测的原理又是什么呢？其实啊，就像是给每个氨基酸贴上一个独特的标签，检测方法就是根据这些标签来找到它们的。
比如说，有些方法是根据氨基酸的化学性质来检测的。
就好像不同颜色的糖果，我们根据颜色就能认出它们来。
再想想，检测氨基酸不就像是在一个大宝藏里找特定的宝贝嘛！我们得有合适的工具和方法，才能准确无误地找到我们想要的那些氨基酸呀。
你说，如果没有这些检测方法，我们怎么能知道身体里的氨基酸是不是够呢？怎么能知道该吃什么来补充呢？检测氨基酸，就像是给我们的身体做一次细致的检查。
它能告诉我们哪里需要调整，哪里需要改进。
这多重要啊！而且哦，这些方法还在不断进步呢！就像我们的科技一样，越来越厉害，越来越精确。
以后啊，说不定能一下子就把所有氨基酸都检测得明明白白的。
总之呢，氨基酸检测方法及原理可真是个有趣又实用的东西。
它让我们能更好地了解自己的身体，更好地照顾自己。
难道不是吗？所以啊，大家可别小瞧了它哟！原创不易，请尊重原创，谢谢!。
氨基酸常用的检测方法和原理
氨基酸常用的检测方法和原理氨基酸是构成蛋白质的基本组成单元，对于研究蛋白质结构和功能具有重要意义。
因此，准确、快速地检测氨基酸的方法和原理是科学研究和实际应用中的关键问题之一。
本文将介绍几种常用的氨基酸检测方法及其原理。
一、纸层析法纸层析法是一种简单、快速的氨基酸检测方法。
其原理是根据氨基酸在纸上的迁移速度差异来分离和检测氨基酸。
首先，将待测样品与色谱溶剂混合，然后将混合液滴在纸上，待溶剂上升至一定高度后，根据不同氨基酸的迁移距离和颜色变化，可以判断样品中是否含有特定的氨基酸。
二、高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是一种精确、灵敏的氨基酸检测方法。
其原理是利用氨基酸在液相中的分配系数差异来实现分离和检测。
首先，将待测样品通过色谱柱进行分离，然后通过检测器检测样品中各种氨基酸的浓度。
由于不同氨基酸的分配系数不同，它们在色谱柱中的停留时间也不同，从而实现了氨基酸的分离和检测。
三、毛细管电泳法毛细管电泳法是一种高效、快速的氨基酸检测方法。
其原理是利用氨基酸在电场作用下在毛细管中的迁移速度差异来实现分离和检测。
首先，将待测样品注入毛细管中，然后施加电场，通过检测器检测样品中各种氨基酸的浓度。
由于不同氨基酸的电荷性质和大小不同，它们在电场作用下的迁移速度也不同，从而实现了氨基酸的分离和检测。
四、质谱法质谱法是一种高精确度、高灵敏度的氨基酸检测方法。
其原理是利用氨基酸分子在质谱仪中的质量-电荷比差异来实现分离和检测。
首先，将待测样品通过质谱仪进行分离，然后通过检测器检测样品中各种氨基酸的质量-电荷比。
由于不同氨基酸的分子量不同，它们在质谱仪中的质量-电荷比也不同，从而实现了氨基酸的分离和检测。
纸层析法、高效液相色谱法、毛细管电泳法和质谱法是常用的氨基酸检测方法。
每种方法都有其独特的原理和优势，可以根据实际需要选择合适的方法进行氨基酸的检测。
这些方法的应用不仅在科学研究中具有重要意义，也在食品、医药等领域有着广泛的应用前景。
氨基酸分析仪培训讲义
6、开放的试剂
试剂配方公开、可自行配制不需冷 藏保存。
氨基酸
二、氨基酸 （一）氨基酸的定义 （二）氨基酸的分类 （三）氨基酸的化学性质
二、氨基酸
自然界中的氨基酸种类很多，但组成蛋 白质的氨基酸只有20多种，从结构式上来 看组成蛋白质的氨基酸除甘氨酸以外，都 有一个不对称碳原子、即a-碳原子，a-碳 原子有四个不同的取代基：COOH羧基、NH2 氨基、H氢原子、和R基团，不同氨基酸的R 基团不同。氨基酸的R基团又称为侧链，由 于不同氨基酸的侧链不同它们的分子量、 解离程度和化学反应、性能均不同。除甘 氨酸外每种氨基酸都有L-构型、D-构型。 蛋白质中的氨基酸都是L-型的，从形状
下面将日立氨基酸分析仪的构成、流程图 及特点给大家介绍如下： （一）氨基酸分析仪的构成
1、输液单元（泵与管路） 作用：输送缓冲液、反应液在流路系统 中流动。
2、进样单元（自动进样器） 作用：将样品在流动相的带动下送入仪 器体系中。
3、分离单元（离子交换柱、柱温箱）
作用：主要是样品的分离、将混合的样 品分离成单一组分。
通讯接口、电源连接器、氮气源连接器。
(二）氨基酸分析仪流程图 见图（2）
（三）日立氨基酸分析仪特点 1、优异的性能 （1）高灵敏度：以蛋白水解液标准
为例可检测到3pmol，是灵敏度最高的仪 器之一。
（2）快速、高分辨率：日立氨基酸 分析仪，目前在各种氨基酸分析仪中分 析时间是最短的，水解氨基酸分析时间 只有30分钟。能在短短的30分钟之内将 18种氨基酸分离开来、关键在于采用了 最新的日立专用3um阳离子交换树脂填充 的高分辨率的分析柱，同等条件下对于 填充柱来讲，填充微粒越细的树脂
其理论塔板数越高，其分离效果也越好， 而且此种填充柱还可以在高流速下进行 工作，大大提高了分辨率和工作效率。
氨基酸分析方法及测试仪器的比较_刘雨
氨基酸分析方法及测试仪器的比较刘 雨，蒋耀兴（现代丝绸国家工程实验室（苏州） 江苏苏州 ２１５１２３）摘 要：介绍了氨基酸分析的基本原理及方法，针对日立Ｌ－８８００型与Ｌ－８９００型氨基酸分析仪在分析中的实际应用情况，对这两种机型的设备做了比较。
关键词：氨基酸分析仪；比较；日立Ｌ－８８００；日立Ｌ－８９００ 自然界氨基酸主要有两种存在形式，一种是以结合态存在于肽和蛋白质中，另一种是以游离态存在于生理体液、食品中。
基于氨基酸对人类生活重要性，氨基酸分析一直是分析领域研究重要课题之一。
氨基酸分析在蛋白质化学、生物化学、食品科学等领域研究中起着重要作用。
因此，对氨基酸分析方法研究与改进得到人们高度重视。
本文对氨基酸分析测定常用方法进行综述并对Ｌ－８８００和Ｌ－８９００进行比较。
１ 氨基酸分析方法的发展氨基酸分析是现代化饲料工业和食品工业实施质量控制以及临床医学和生物化学研究领域必不可少的手段，主要包括对组成蛋白质和多肽的２２种氨基酸［１，２］以及众多的生理体液和天然氨基酸的分析。
１９５４年，Ｈｉｒｓ、Ｍｏｏｒ等人［３，４］较早提出采用磺酸盐离子交换树脂分析氨基酸，并在此后几年将此项技术进一步发展。
１９５８年，Ｓｐａｃｋｍａｎ、Ｍｏｏｒ、Ｓｔｅｉｎ［５］合作研制出世界上第一台用离子交换树脂和柱后茚三酮衍生检测法的自动氨基酸分析仪，使氨基酸定量分析进入一个崭新阶段。
２０世纪６０至８０年代，氨基酸分析的速度、灵敏度、自动化程度均大大提高［６，７］。
２０世纪８０年代中后期，柱前衍生方法已逐渐占据主导地位，其中激光诱导荧光检测器应用使检测灵敏度提高到一个新的台阶［８］。
近年来，对氨基酸分析引入质谱、核磁与ＨＰＬＣ联用技术，大大提高定性分析准确性［９，１０］。
２ 氨基酸分析方法的分类目前，多组分氨基酸的分析方法主要有柱前衍生液相色谱法、离子色谱法、柱后茚三酮衍生色谱法等。
氨基酸分析按是否衍生可分为两大类：一类是直接分析法；另一类是衍生化间接分析法。
氨基酸分析基本原理与应用
氨基酸分析基本原理与应用
目录
一、氨基酸分析仪 二、基本原理及特点 三、样品的制备 四、影响氨基酸分析的各种因素 五、应用
氨基酸分析基本原理与应用
日立L-8900氨基酸分析仪
氨基酸分析基本原理与应用
（一）氨基酸分析仪的构成
1、输液单元（泵与管路） 2、进样单元（自动进样器） 3、分离单元（离子交换柱、柱温箱） 4、反应单元（反应柱、反应温度加热设备） 5、检测单元（分光光度计） 6、程序控制、数据处理（工作站）
4、氨气排除系统：增加了除氨柱，能很好的排除 氨在分析过程中对基线及峰形的干扰。
氨基酸分析基本原理与应用
二、基本原理
氨基酸
__
R H _ C _ COOH
NH2
组成蛋白质的20种氨基酸除甘氨酸外 、都有一个不对称碳原子，即а-碳原 子。
а-碳原子有四个不同取代基：羧基、 氨基、氢原子和R基团，不同氨基酸 的R基团不同。
氨基酸分析基本原理与应用
所以，用不同离子强度、PH值的缓冲 液依次将氨基酸按吸附力的不同洗脱 下来，被洗脱下来的氨基酸与茚三酮 反应液在加热条件下反应（135℃）， 生成可在分光光度计中570nm的蓝紫 色物质（仲氨生成浅黄色物质， 440nm检测）外标法定量。
氨基酸分析基本原理与应用
（四）氨基酸分析仪与HPLC法的比较
氨酸分析基本原理与应用
三、样品的制备
（一）蛋白质的水解 （二）游离氨基酸样品的制备 （三）生理体液样品的前处理
氨基酸分析基本原理与应用
（一）蛋白质的水解
用于全氨基酸测定的样品，凡是以蛋白质形式存在 的都要进行水解处理，水解方法有三种： 1、酸水解法：标准水解法，水解彻底，但色氨酸被 破坏。 2、碱水解法：用NaOH作为水解剂，色氨酸不被破 坏，但有消旋作用，丝氨酸、苏氨酸等被破坏。 3、酶水解法：水解条件温和，无需特殊设备，氨基 酸不受破环，但水解时间长，而且不易水解完全。
氨基酸分析原理与方法
非必需氨基酸 谷氨酸
天门冬氨酸 丙氨酸 丝氨酸 脯氨酸 羟脯氨酸
• 动物的必需氨基酸除上述8种外，还有精 氨酸、组氨酸共10种。
（三）氨基酸的化学性质
• 氨基酸分子中都具有氨基和羧基，因此 它们都能产生氨基与羧基的一般反应， 如脂化、甲基化、乙酰化以及酸碱的中 和作用等。有些氨基酸由于存在其它基 团而产生特殊反应，如半胱氨酸的巯基 （－SH)
碱性氨基酸 > 芳香族氨基酸 > 中性氨基酸 > 酸性氨基酸及羟基氨基 酸
4.提高流动相PH值，氨基酸正电荷减少，吸附力减弱，最后从离子交换柱 上洗脱下来。洗脱顺序是酸性和带羟基氨基酸、中性氨基酸、碱性氨基 酸。
5.氨基酸标准液中各种氨基酸在氨基酸自动分析仪上被洗脱的顺序有一定; 标准液各种氨基酸的浓度一定，洗脱峰的面积一定;由此可计算出样品中
• DYDA在570nm处有最大吸收。 • 脯氨酸、羟脯氨酸与茚三酮反应生成黄色物
质，在440nm处吸收峰最大。 • 生除成氨有基色酸物以质外（，这如N种H反2肽应类机也理可现与应茚用三于酮我反们应使
用的氨基酸分析仪之中）。
三、氨基酸分析仪基本分析原理
• 氨基酸的分离分析方法很多，近几年来 一般认为离子交换色谱法是比较准确的 定量方法。氨基酸分析仪就是以此为基 础研制出来的。近几年越来越多的日立 L-8800型氨基酸分析仪被引进到各行各 业之中，为我们科学研究及检测提供了 现代化的手段。
OPA是快速反应剂，有些氨基酸反应极其不稳定，特别 是甘氨酸、赖氨酸衍生物的信号衰减很快，一天变化很 大。从以往我们做的实验来看此方法的变异系数CV%一 般为5％左右，个别的氨基酸如组氨酸可达9%左右，尤 其对带有盐分的饲料氨基酸类样品特别不适合，因样品 中带有的盐分直接影响衍生（紫外法基线不好）。
氨基酸分析仪的原理
氨基酸分析仪的原理氨基酸分析仪是一种用于分析和测定样品中氨基酸含量的仪器。
它采用了高效液相色谱技术（HPLC），通过检测和分离样品中的氨基酸，然后使用特定的检测方法来确定各个氨基酸的浓度。
氨基酸分析仪的工作原理基于氨基酸的特性。
当样品进入仪器后，首先需要进行样品的预处理，以提取目标氨基酸。
常用的预处理方法包括酸水解、酶解和固相萃取等。
经过预处理后，得到的样品将注入进高效液相色谱柱。
高效液相色谱柱是氨基酸分析仪中的核心部件。
它使用特殊的填料材料来分离混合样品中的各个氨基酸。
填料材料通常是一种多孔材料，具有高比表面积和特定的化学结构，可以与氨基酸发生相互作用。
当样品通过填料时，不同氨基酸会因为其特定的物化性质而在填料中发生吸附和解吸附过程，从而被有效地分离。
在色谱柱中，样品中的氨基酸以一定的顺序进入和离开柱。
为了分离和检测各个氨基酸，需要选用适当的移动相（溶剂）和梯度程序。
移动相通常是一种或多种有机溶剂和缓冲液的混合物，根据氨基酸的亲水性和亲油性进行调节。
在柱后的检测器中，氨基酸被逐个检测并测量。
常用的检测方法包括紫外吸收检测器和荧光检测器等。
例如，紫外吸收检测器可以根据不同氨基酸的吸收光谱特征，通过测量其在特定波长下的吸光度来定量分析各个氨基酸的浓度。
最后，通过数据处理和分析软件，可以对检测到的各个氨基酸的峰进行定量分析和结果解释。
这样就可以得到样品中各个氨基酸的含量和相对比例。
总的来说，氨基酸分析仪利用高效液相色谱技术对样品中的氨基酸进行分离和测定，通过特定的预处理、样品注入、分离、检测和数据处理等步骤，实现对氨基酸含量的精确测量。
氨基酸分析仪原理
氨基酸分析仪原理
氨基酸分析仪的原理可以分为两个基本部分：色谱分离和检测。
首先是色谱分离。
氨基酸分析仪使用液相色谱法进行氨基酸的分离。
将待测样品中的氨基酸与特定的试剂反应生成衍生化合物，提高氨基酸的稳定性和检测性能。
然后，样品溶液经过进样装置进入液相色谱柱。
液相色谱柱是由高效分离固定相填充的管状设备。
不同氨基酸根据其化学性质和物理性质在固定相上的分配系数不同，因此会以不同的速率通过色谱柱，实现氨基酸的分离。
其次是检测。
液相色谱柱通过检测器与数据处理系统连接。
最常用的检测方法是紫外光检测法。
在紫外线的激发下，氨基酸会发生吸收，产生特定的吸收峰。
检测器可以测量样品中吸收光强的变化，并转化为电信号，通过数据处理系统进行处理和分析，最终得到各个氨基酸的浓度。
在氨基酸分析仪中，还可以使用其他检测方法，如荧光检测法或融合球束电泳等，以满足不同实验需求。
但无论采用何种检测方法，氨基酸分析仪的核心原理仍然是通过色谱分离和检测来实现氨基酸的定量分析。
氨基酸自动分析仪简介
氨基酸自动分析仪氨基酸是蛋白质的组成成份，是蛋白质化学研究的要紧内容之一。
蛋白质是一切生命物质的基础，因此，探讨和揭露生命现象的发生、生长、新陈代谢、遗传变异进程，都与氨基酸的研究有关。
随着近代物理学、化学和电子学的飞速进展，氨基酸的分析技术亦在不断更新。
氨基酸分析仪是本世纪50年代研制的，仅40连年，已进展到此刻的进样、分离、检测和数据处置全数自动化的程度。
检出量由微克分子到毫微克分子，分析时刻由原先的24小时到此刻的半个小时，分析技术的提高增进了其他科学领域的进展。
一、氨基酸自动分析仪的进展用于氨基酸分析的方式很多，有纸色谱法、柱色谱法、薄层色谱法、电泳法及气相色谱法等。
一样以为离子互换柱色谱法是较为精准的检测方式，氨基酸分析仪确实是在此基础上研制成功的。
1951年Moor和Stein采纳离子互换树脂色谱，用茚三酮试剂显色和分光光度计检测而设计，后来在Spaekman的协助下，使分析操作自动化。
迄今氨基酸分析仪的条件和自动程度有了专门大的改观，其特点要紧表现以下几个方面。
⒈树脂粒径减小最近几年来制成的小颗粒球状树脂，使氨基酸分析仪取得专门大改良。
由于树脂粒径减小就对应地增加等量树脂的总面积，使此刻少量树脂达到过去大量树脂的分离成效，从而减小了树脂柱的内径和体积，节省了试剂用量，缩短了分析时刻。
树脂的粒径从200→20→10→5µm。
⒉色谱柱内径缩小树脂粒径减小使填充树脂床的色谱柱内径减小，由过去的粗长柱变成微柱。
色谱柱内径的转变为18→6→→。
⒊输压泵压力增高一样氨基酸分析仪采纳低压泵，其施加于输液的压力只有几×104Pa，以后增加至几十×104Pa，此刻进展到2068×104Pa。
⒋分析时刻缩短由于树脂粒径的改善，色谱柱内径缩小和泵压增高，使分析时刻大大缩短。
蛋白质水解液的分析时刻从过去的24小时缩短到此刻的半个小时左右。
⒌仪器灵敏度提高由于仪器的不断改良，使灵敏度大为提高，过去仪器的最高灵敏度已远不及此刻仪器的最低灵敏度。
氨基酸分析仪工作原理
氨基酸分析仪工作原理
氨基酸分析仪是一种用于检测和分析氨基酸组成的仪器。
其工作原理基于氨基酸分析技术，下面将介绍其工作原理。
首先，样品制备阶段。
需要将待测样品或混合物进行样品制备，取出所需氨基酸，并将其转化为可以被仪器检测的形式。
常见的制备方法有酸水解、酶解和自动制备等。
接下来，进行氨基酸分离阶段。
分析仪通常采用高效液相色谱（HPLC）技术进行分离。
样品溶液被注入到色谱柱中，利用
柱中的填料即色谱介质，不同氨基酸会在填料中以不同速度移动，从而实现氨基酸的分离。
然后，进行氨基酸检测阶段。
分离出的氨基酸会通过检测器进行检测。
常用的检测器包括紫外检测器（UV-DAD）和荧光检测器。
UV-DAD可以通过测量氨基酸在紫外光下的吸收来得
到其浓度信息，而荧光检测器则利用氨基酸的荧光特性进行检测。
最后，进行数据处理和结果分析。
仪器会自动将检测到的氨基酸信号转化为数字信号，并通过连接的计算机或数据处理系统进行数据转储和分析。
分析人员可以根据需要选择合适的分析方法和数据处理软件，对结果进行计算、统计和解读。
综上所述，氨基酸分析仪的工作原理主要包括样品制备、氨基酸分离、氨基酸检测以及数据处理和结果分析等步骤。
通过这
些步骤，可以准确地分析和确定样品中存在的氨基酸成分和浓度，为相关领域的研究和应用提供重要的实验数据。
氨基酸分析仪概况
氨基酸分析仪概况氨基酸分析仪是一种用于测定氨基酸含量和氨基酸序列的仪器。
由于氨基酸在生命体内的重要作用，氨基酸分析在药物研发、蛋白质结构研究、食品安全检测等领域具有广泛的应用。
本文将对氨基酸分析仪的原理、类型、应用和发展进行详细介绍。
一、氨基酸分析仪的原理1.色谱法原理色谱法是使用气相色谱或液相色谱进行氨基酸的分离。
其中，气相色谱法（GC）是最常用的方法之一，其原理是将氨基酸样品蒸发成气体，通过柱子进行分离，再利用检测器来检测分离出的氨基酸。
液相色谱法（HPLC）则是将样品通过柱子进行分离，再利用检测器进行检测。
2.质谱法原理质谱法是使用质谱仪来分析氨基酸的含量和序列。
其中，质谱仪可分为两类：质谱-质谱仪（MS/MS）和飞行时间质谱仪（TOF-MS）。
MS/MS是通过将氨基酸样品进行离子化，并在质谱仪中进一步分离与检测。
TOF-MS则是利用分子在质荷比与时间之间的关系进行分析。
二、氨基酸分析仪的类型根据氨基酸分析仪的原理和应用领域的不同，可以将氨基酸分析仪分为多种类型。
1.色谱法氨基酸分析仪色谱法氨基酸分析仪主要包括气相色谱仪和液相色谱仪。
气相色谱仪主要适用于挥发性氨基酸的分析，其优点是分辨率高、分离效果好。
液相色谱仪则适用于非挥发性氨基酸的分析，可以根据实际需求选择柱子和检测器。
2.质谱法氨基酸分析仪质谱法氨基酸分析仪主要包括质谱-质谱仪（MS/MS）和飞行时间质谱仪（TOF-MS）。
MS/MS可用于测定氨基酸中的特定氨基酸，如赖氨酸和精氨酸等，同时还可以用于测定氨基酸序列。
TOF-MS则适用于氨基酸含量的分析，其分辨率高，可以同时分析多个氨基酸。
三、氨基酸分析仪的应用1.药物研发氨基酸在药物研发中起着重要的作用，例如生物合成药物中的氨基酸序列是其药效的决定因素之一、氨基酸分析仪可以用于药物研发过程中的质量控制，确保药物质量稳定。
2.蛋白质结构研究蛋白质是由氨基酸构成的，因此氨基酸分析是蛋白质结构研究的重要一环。
氨基酸分析仪功率
氨基酸分析仪的工作原理
• 利用色谱技术对样品中的氨基酸进行分离
• 通过检测器对分离后的氨基酸进行定量分析
• 根据分析结果，计算出样品中氨基酸的含量和组成
氨基酸分析仪的主要应用领域
农业生产
• 评估饲料和肥料中的氨基酸含量，指导农业生产
提高设备运行效率
• 通过人机交互界面，方便操作人员对设备进行控制和调
节，提高设备使用便利性
氨基酸分析仪的功率优化效果评估
功率优化对设备性能的影响
功率优化对生产成本的影响
• 提高氨基酸分析仪的分析效率和准确性
• 降低能源消耗，降低生产成本
• 降低设备能耗，延长设备使用寿命
• 提高设备生产效率，提高企业经济效益
氨基酸分析仪的各个组成部分的功率需求
输液系统
• 泵：提供氨基酸溶液的输送动力，功率需求较大
• 色谱柱：分离氨基酸，功率需求较低
检测系统
• 检测器：对氨基酸进行定量分析，功率需求较高
• 数据处理系统：处理分析结果，功率需求较低
控制系统
• 控制器：控制氨基酸分析仪的工作，功率需求较低
• 显示器：显示分析结果，功率需求较低
优化检测器的设计
• 提高泵的效率，降低能耗
• 提高检测器的灵敏度和准确性，降低能耗
• 采用变频技术，实现泵的转速调节，满足不同分析需求
• 采用热导检测器、荧光检测器等不同类型的检测器，满
足不同氨基酸的分析需求
降低氨基酸分析仪的能耗
优化设备运行参数
• 根据样品和分析需求，调整泵的转速、检测器的温度等参数，降低能耗
功率需求与设备性能的关联性
氨基酸分析仪
氨基酸分析仪洗脱过程
1.氨基酸在PH2.2的条件下都带正电荷，在阳离子交换树脂上均 被吸附,但结合强度各不相同。
2.随着缓冲液在离子交换柱上流动，氨基酸不断地吸附、解吸附。 由于氨基酸性质的差异（酸碱性、极性、分子大小）,吸附强度 有差异。 3.不同氨基酸与离子交换树脂的亲和力不同：碱性氨基酸> 芳香 族氨基酸>中性氨基酸>酸性氨基酸及羟基氨基酸。 4.提高流动相PH值，氨基酸正电荷减少，吸附力减弱，最后从离 子交换柱上洗脱下来。洗脱顺序是酸性和带羟基氨基酸、中性氨 基酸、碱性氨基酸。 5.氨基酸标准液中各种氨基酸在氨基酸自动分析仪上被洗脱的顺 序一定;标准液各种氨基酸的浓度一定，洗脱峰的面积一定;由此 可计算出样品中各种氨基酸的含量。
L-8900 AAA的流程图
L-8900 AAA的性能指标
以蛋白水解液标准分析方法为例： 净分析时间：30分钟 检出限：3 pmol(信噪比=2，天门冬氨酸） 保留时间重现性：CV 0.3% （精氨酸） 峰面积重现性：CV 1.0% (甘氨酸、组氨酸）
氨基酸分析仪最大的特点：
1 灵敏、快速、提供数据准确可靠：分辨 率高、操作简单，分析周期短（水解30分 钟、体液110分钟）。 2 保留时间、峰面积、重现性好，检出限 可达3pmol。 3 不存在液相方法生成二级衍生物的问题。 4 峰形显高斯分布，体系稳定快（半小时 即可）。
日立L-8900全自动氨基酸分析仪
日立氨基酸分析仪的历史
KLA-5
四十多年的历史，拥有2000多用户
835 L-8800 L-8900
Sold KLA in 1962 L-8500
L-8900 AAA的内部结构
L-8900 AAA的组成
组件名称 缓冲液 色谱柱 泵 自动进样器 柱温箱 反应单元 检测单元 控制系统 参数 6种（试剂与清洗液） 4.6mm id x 60mm， 阳离子树脂填充（标配) 0.001-0.999ml/min, 0-20MPa, 2 1500µl; 200vial (200 cooler) ; 0.1-100µl 20-85℃（1℃）, 电子加热/制冷的温控装置。 50℃ --140℃,电子加热的温控系统 可见分光光度计（570，440nm） EZChrom Elite 分析软件 CPU: 32bits OS, Windows xp
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氨基酸分析仪原理、分类及几种氨基酸分析仪的比较概述氨基酸分析仪是一种分析仪器，采用经典的阳离子交换色谱分离、茚三酮柱后衍生法，对蛋白质水解液及各种游离氨基酸的组分含量进行分析。
工作原理通常细分为两种系统：蛋白水解分析系统（钠盐系统）和游离氨基酸分析系统（锂盐系统），利用不同浓度和pH值的柠檬酸钠或柠檬酸锂进行梯度洗脱。
其中钠盐系统一次最多分析约25种氨基酸，速度较快，基线平直度好；锂盐系统一次最多分析约50种氨基酸，速度较慢，基线一般不如钠盐系统好。
应用全自动氨基酸分析仪主要应用:各种物质中18种氨基酸的定性定量分析。
1.饲料上的应用：质量控制：各种饲料必需氨基酸的含量和它们之间的比例必须恰当，测定原料和产品中的氨基酸含量，以达到保证质量的目的。
真伪鉴别：鱼粉氨基酸组成特点是赖氨酸、蛋氨酸含量高，氨基酸分析结果很容易就可以区别它的真伪。
2.农业、食品、饮料及玉米、大豆、小麦等农作物的氨基酸含量进行检测；对果汁、饮料进行真伪的鉴别；检验测定茶氨酸来鉴别真伪茶叶；对酱油级别的认定。
分类氨基酸分析仪按其分离和检测方法的不同可分为两大类型。
第一类是基于阳离子交换柱分离、柱后茚三酮衍生光度法测定的经典方法（IEC）。
此类方法于1972年获诺贝尔奖，是当今国际标准和国家标准以及仲裁和涉外的方法。
第二类是所有基于反相色谱分离、柱前衍生、荧光或紫外检测的高效液相法（HPLC）以及阴离子交换分离直接安培法检测的离子色谱法（IC）。
选型指南1、原理。
基于阳离子交换柱分离、柱后茚三酮衍生、光度法测定的离子交换色谱法（IEC）。
此类方法由Stein和Moore两人1958年发明，并于1972年获诺贝尔奖，是当今国际标准和国家标准以及仲裁和涉外的方法。
2、重要指标。
满足分析需要的技术指标如分离度、重复性等要求，而其中的分离度又是更为重要的指标，因为，色谱理论一般以分离度达到1.2作为两峰基本分离的判定前提，只有峰分开了，才有意义去讨论定性和定量的重复性。
3、指标的真实性。
有些厂家只标出个别氨基酸的指标如Asp或Arg，或只用平均数据替代全部数据等等，而仪器性能好，经营信誉较高的厂家就会标出全部氨基酸的指标供用户参考。
4、仪器的可靠性。
如果仪器今天堵了、明天漏了，用户不仅要付出大量人力财力，分析结果的可信度也将大打折扣。
5、仪器的运行成本。
例如是否可以使用国产试剂、柱子寿命（以多少次进样计算、而不以多少年计算）等。
6、仪器设计是否有利于氨基酸分析。
例如是否有惰性气体保护（茚三酮极易被氧化）、是否提供在线脱气、是否提供溶液和样品的制冷控制等。
7、售后服务。
分析过程中遇到困难是在所难免，厂家必须能够快速响应、尽快解决问题。
另外，常用备件的价格也是一个重要因素，因为用户在购买前一般难以注意到售后的问题，而很多厂家也没有公示自己的常用备件价格，这就为将来的使用埋下了隐患，事实上，也的确有很多仪器在出现一些看似微小的故障之后，就因为维修费用太高而被“束之高阁”。
几种氨基酸分析仪比较常规氨基酸分析是指20种蛋白水解氨基酸和40余种游离氨基酸的分析。
氨基酸分析仪自1958年问世以来，不断借助现代化的硬件和软件更新换代，现已发展成为现代食品、饲料、生物技术、医药卫生和生命科学等行业氨基酸分析必不可少的自动化常规检测设备。
氨基酸分析仪按其分离和检测方法的不同可分为两大类型。
第一类是基于阳离子交换柱分离、柱后茚三酮衍生光度法测定的经典方法（IEC）。
此类方法于1972年获诺贝尔奖，是当今国际标准和国家标准以及仲裁和涉外的方法。
第二类是所有基于反相色谱分离、柱前衍生、荧光或紫外检测的高效液相法（HPLC）以及阴离子交换分离直接安培法检测的离子色谱法（IC）。
两类方法的特性比较见表1。
表1：氨基酸分析方法的分类和特性比较表方法IEC HPLC原理阳离子交换分离、柱后茚三酮衍生光度法测定高效液相反相色谱分离、柱前衍生、光度法测定阴离子交换直接测定衍生试剂茚三酮PITCOPA FMOC AQCDABS-Cl无基体干扰无有有有有有有多余试剂不干扰需除去不干扰需除去不干扰需除去无检测器可见光UV荧光荧光荧光UV安培检测限3-50pmol 50pmol1-5pmol1pmol3pmol50pmol Xpmol优点方法成熟可靠。
稳定性、重现性和线性均优于HPLC法，无基体干扰，柱子寿命长，一次可分析43种氨基酸仪器可一机多用，对一些氨基酸有很高的灵敏度，分析时间较短缺点对整机性能要求高，需要浓度和温度双梯度程控。
仪器专用化衍生反应和产物稳定性常受基体和过量试剂干扰，方法的稳定性、重现性、线性和可靠性不如茚三酮法。
且柱子寿命短，衍生试剂一般较贵，方法对操作技术要求高。
应用水解和游离氨基酸分析的国际和国家标准方法，质量控制分析方对一些个别氨基酸分析有应用价值。
作为非标准方法亦用于肽类、水解和游离氨基酸的分析法说明：IEC离子交换色谱；PITC异硫氰酸苯酯；OPA邻苯二甲醛；FMOC9-芴基甲氧羰酰氯；AQC6-氨基-喹啉基-N-羟基琥贝酰亚胺-氨基甲酸酯；DABS-Cl二甲基氨基偶氮苯磺酰氯由表1可见，IEC标准方法优于HPLC非标准方法，且此类仪器为专用型自动氨基酸分析仪器。
国外氨基酸分析仪器中，基于IEC标准方法原理并按照国家计量法规规定迄今业已正式通过国家技术质量监督总局型式认证的，有日立公司的L-8800，安玛西亚公司的30系列和安米诺西斯公司的A200型三种氨基酸分析仪。
尚待通过计量认证的有Sykam和Jeol。
而提供HPLC型氨基酸分析仪器的外国厂家有沃特斯、安捷伦、岛津和戴安等。
但此类仪器用做氨基酸分析仪器时，还须首先通过氨基酸分析的计量认证。
上述三家IEC型仪器的性能和技术参数见表2。
表2：三种IEC型氨基酸分析仪主要性能和技术参数对比一览表对比内容安米诺西斯.A200日立L-8800安玛西亚30系列原理IEC型：阳离子交换分离、柱后茚三酮衍生、570nm/440nm光度法检测、分析过程自动化（国际标准；中国国标）相同相同仪器构型21世纪新型：集成式小型化，无须氮气，试剂消耗为传统型的1/4，体积小65x65x90cm,重量轻55kg20世纪传统型：非集成式，须用氮气，试剂消耗多3倍，体积900x650x1050mm,重量240kg20世纪传统型：非集成式，须用氮气，试剂消耗多3倍，体积重量中等硬件新型、微型化硬件该公司传统硬件该公司传统硬件泵微型双柱塞泵：钛合金内衬，耐压45Mpa,流速0.001-9.99ml/min普通双柱塞泵：不锈钢内衬，耐压19.6Mpa,0.05-0.99ml/min普通双柱塞泵：陶瓷内衬，耐压45Mpa,流速130ml/hr自动三维传动，120位，带制冷型转盘型，80位，须另转盘型，须另选配制进样器选配制冷型冷型分离模式双梯度分离：浓度梯度+温度梯度浓度梯度+恒温浓度梯度+恒温柱温箱半导体装置，精度0.010C最适宜作精密温度梯度控制半导体装置，精度10C，等温度分离，无温度梯度半导体装置，精度10C，等温度分离，无温度梯度光度计基于二级管技术，570nm440nm波长灵敏度较常规光度计高10倍以上，无需保养，长寿命常规光栅光度计，需保养防潮，对环境敏感，寿命较短常规光栅光度计，需保养防潮，对环境敏感，寿命较短分析柱和分析方法锂盐方法（7μ锂盐柱4.6x100mm）能兼作水解氨基酸和游离氨基酸，无需更换分析体系。
钠盐方法（7μ钠盐柱4.6x100mm）能作21种水解氨基酸传统的锂盐方法只能作游离氨基酸，不能作水解氨基酸。
传统的钠盐方法（3μ钠盐柱4.6x60mm）能作18种水解氨基酸传统的锂盐方法只能作游离氨基酸，不能作水解氨基酸。
传统的钠盐方法（8μ钠盐柱4.6x200mm）能作18种水解氨基酸控制软件新型控制软件aminoControl控制温度梯度、浓度梯度等全部参数，符合GLP规范，每分钟自动记录仪器状态和参数，具黑匣子功能，可供远程诊断，直观图象化一般控制软件一般控制软件数据处理软件氨基酸分析专用软件aminoPeak除一般功能外还增设如氨基酸词库、双通道合并、新颖的谱图识别和统计功能等功能。
具中、英文双版本一般分析软件，英文版本一般分析软件，英文版本保留时间重现性小体积进样（2-4nmol）精氨酸0.03%,21种氨基酸全部CV≤0.1%(中国计量认证资料)大体积进样（10nmol）精氨酸0.3%（厂家样本）大体积进样（10nmol）精氨酸0.5%,峰面积重现性小体积进样（2-4nmol）甘氨酸0.5%,组氨酸0.3%，21种氨基酸大体积进样（10nmol）甘氨酸1%,组氨酸大体积进样（10nmol）甘氨酸全部CV≤0.8%，(中国计量认证资料)1% 1.5%,组氨酸1.5%分离度苏氨酸/丝氨酸：～100%甘氨酸/丙氨酸：93%21种氨基酸平均≥98%(中国计量认证资料)苏氨酸/丝氨酸：90%甘氨酸/丙氨酸：90%苏/丝：85%甘/丙：85%检测限：信噪比2组氨酸1pmol,天冬氨酸3pmol21种氨基酸平均3pmol(中国计量认证资料)天冬氨酸3pmol组氨酸9pmol,仪器线性甘氨酸r=0.9999组氨酸r=1.0000(中国计量认证资料)无甘氨酸r=0.99组氨酸r=0.99分析时间分析21种氨基酸ca.45min分析43种氨基酸ca.75min分析18种氨基酸30min,完全分离80min，分析43种氨基酸ca.110min分析18种氨基酸40min,完全分离80min，分析43种氨基酸ca.120min试剂方案4种方案1）提供原装成品试剂2）提供浓缩液供用户自行稀释3）提供配方，试剂本土化时单次分析试剂成本约1元人民币4）协助用户购买必要的进口固体试剂，帮助自配试剂提供配方供用户自行配制，或购买原装试剂用户购买原装试剂售后服务2年免费保修，永久性维护1年免费保修1年免费保修。