线性范围试验-文档资料
临床生化检验试剂盒性能评价试验线性范围试验
临床生化检验试剂盒性能评价试验线性范围试验线性范围试验是评价试剂盒在测量不同浓度样本时的测量范围。
通常情况下，试剂盒都会提供一个标称的测量范围，但实际使用时需要验证其测量范围是否准确、可靠，以确保测量结果的准确性和可比性。
线性范围试验的基本原理是通过在试剂盒标准样本中制备一系列不同浓度的样本，然后使用试剂盒对这些样本进行测量。
使用不同浓度的样本测量所得的结果应当在试剂盒标称的测量范围内，且具有线性的关系。
线性范围试验的步骤如下：1.准备试剂盒和标准样本：选择合适的试剂盒，并根据试剂盒说明书中的建议，准备一系列不同浓度的标准样本。
样本的制备应当精确、稳定，并与生化水平的变化有一定的相关性。
2.设置测量参数：根据试剂盒说明书中的要求，设置试剂盒所需的测量参数，如波长、反应时间等。
确保所设置的参数与说明书的要求一致。
3.测量标准样本：使用试剂盒对准备好的标准样本进行测量。
将每个标准样本均匀地分配到试剂盒提供的反应容器中，按照说明书中的步骤进行反应，并使用试剂盒提供的光度计或分析仪器进行读数。
4.绘制标准曲线：将试剂盒测量结果与标准样本的浓度进行对比，绘制标准曲线。
通常，标准曲线具有一条近似直线的形状，且通过原点。
5.判断线性范围：根据绘制的标准曲线，通过线性回归分析或相关统计分析的方法，确定试剂盒的线性范围。
一般情况下，线性范围可由标准曲线所覆盖的浓度范围来确定。
6.评价线性范围：根据试剂盒的应用领域和临床需要，评价试剂盒的线性范围是否满足要求。
如果线性范围过窄或过宽，可能会导致浓度超出测量范围，使结果不准确。
线性范围试验的结果报告应当包含以下内容：1.试剂盒的标称测量范围。
2.标准样本的浓度和对应的测量结果。
3.绘制的标准曲线图和线性回归方程。
4.试剂盒的线性范围和评价结论。
总之，线性范围试验是临床生化检验试剂盒性能评价试验中的一个重要内容。
通过验证试剂盒在不同浓度样本中的测量范围，可以确保试剂盒的使用可靠性和测量结果的准确性。
线性范围实验的操作方法
线性范围实验的操作方法
线性范围实验是一种可以确定程度或拟物化的实验方法，通常用于确定观察对象的不同水平或程度之间的差异。
以下是进行线性范围实验的一般操作方法：
1. 确定实验目的：首先需要明确实验的目的和研究的对象，例如确定观察对象的不同水平之间的差异。
2. 设计实验材料：根据实验目的设计实验材料，例如是以数字、形状、颜色或其他特征表达程度的差异。
3. 确定度量尺度：选择适合实验目的的度量尺度，例如可以使用等距尺度（interval scale）进行度量。
4. 制定试验流程：明确实验的具体流程和步骤，确保按照相同的顺序对观察对象进行评估。
5. 选择实验参与者：选择适当数量和类型的实验参与者，确保样本具有代表性。
6. 进行实验：按照设定的试验流程，逐个对观察对象进行评估，并记录评估结果。
7. 数据分析：对收集到的数据进行分析，可以计算平均值、标准差等统计指标，
以及绘制统计图表。
8. 结论和解释：根据数据分析的结果，得出结论并解释不同水平之间的差异。
9. 讨论和应用：讨论实验结果的意义和应用，可以进一步探讨实验的局限性，并提出改进方法。
需要注意的是，在设计和进行线性范围实验时应遵循科学研究的伦理准则，并确保实验过程的一致性和可重复性。
线性范围试验
线性范围试验实验5 线性范围试验在光谱分析中，测定该实验条件下被测物质符合Beer定律的浓度范围(线性范围)，是评价分析⽅法准确性和实⽤性的重要⼯作。
通过线性范围测定，选择线性段作为该⽅法的分析范围，直线上任何⼀点的待测物浓度与吸光度的⽐值均为⼀常数，其斜率tanθ都相等，即tanθ=，此处的值称为校正常数，可⽤于计算测定结果。
这样，可使具有临床意义的标本测定值都限定在此范围内，以保证测定结果的可靠。
线性误差表现为溶液的浓度与吸光度不成线性关系，出现正偏离或负偏离的现象。
这种偏离，按Beer定律现象来⾃两个⽅⾯：⼀是溶液本⾝不符合Beer定律，这种现象叫做化学偏离；⼆是仪器本⾝各种因素的影响，使吸光度与浓度之间不成线性，这种现象叫仪器偏离，如杂光、有限带宽、检测器噪声、环境条件的变化、波长的变动、⽐⾊杯的误差、辐射光的⾮平⾏性、检测器本⾝的⾮线性等。
因此，在做⽅法学线性范围评价实验时，良好的仪器性能是必须的。
【原理】使⽤不同浓度的葡萄糖标准溶液，⽤GOD-POD法试剂测定各⾃的吸光度，以标准浓度为横坐标，以其对应的吸光度为纵坐标，在⽅格纸上作图，即可绘制出⼀条直线，即剂量反应曲线(dose-respones curve)。
⼀般测定⽅法的线性范围要求能覆盖临床上的参考值和常见疾病的医学决定⽔平，以减少标本稀释重测的机会。
【试剂】1．40mmol/L葡萄糖标准溶液称取已⼲燥恒重的⽆⽔葡萄糖0.7208g，溶于12mmol/L 苯甲酸溶液约70ml中，以12mmol/L苯甲酸溶液定容⾄100ml。
2h后⽅可应⽤。
2．其它试剂同GOD-POD法试剂。
【操作步骤】按表2-1操作表2-1⾎糖与GOD-POD试剂剂量反应曲线的制作加⼊物标准管0 1 2 3 4 5葡萄糖标准液(µl) 0 2 4 6 8 10 蒸馏⽔(µl) 10 8 6 4 2 0 GOD-POD试剂(ml) 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5下同GOD-POD法，读取各管吸光度。
临床生化检验试剂盒性能评价试验线性范围试验
临床生化检验试剂盒性能评价试验线性范围试验线性范围是指在一定的浓度范围内，检测结果与样本浓度之间呈线性关系的范围。
线性范围试验的目的是确定试剂盒的线性范围及其上下限。
线性范围的确定对于准确测量样品浓度非常重要，因为如果超出了线性范围，测量结果将不准确。
试验前需要准备一系列不同浓度的样品，通常使用稀释法制作。
然后依次使用这些样品进行检测，记录每个样品的测量结果。
在绘制一个标准曲线时，可以将样品的测量结果作为纵坐标，样品的浓度作为横坐标，在纸上标出一系列点，并通过这些点拟合一条直线。
这条直线称为标准曲线。
标准曲线的斜率和截距可以反映试剂盒的灵敏度和误差。
斜率表示单位浓度变化时，测量值的变化情况，斜率越大，灵敏度越高。
截距表示零浓度时的测量值，截距越小越接近零浓度。
通过分析标准曲线的相关系数可以评估试剂盒的线性程度。
相关系数越接近1，线性程度越好。
一般认为，相关系数超过0.99，即可认为试剂盒满足线性要求。
在进行线性范围试验时需要注意以下几个方面：1.样品浓度的选择：应根据所测定物质的生理浓度范围来选择样品浓度，以保证测试的实用性。
2.样品的制备与存储：样品的制备应精确控制，避免因稀释或浓缩不准确而影响试验结果。
样品的存储应避免长时间曝光于大气中，以免发生化学反应导致样品浓度的变化。
3.试剂盒的选择：应根据所测定物质的特性和预期的分析结果，选择适宜的试剂盒进行测试。
4.试剂盒的操作：应按照试剂盒说明书的要求进行操作，严格控制操作步骤和时间，以减少试验误差产生的可能性。
5.数据处理和分析：应根据所测定物质的特性和测量结果，采用适当的统计方法进行数据处理和分析，并在数据分析报告中详细说明试验设计、方法和结果。
通过进行线性范围试验，可以确定试剂盒的线性范围及其上下限，为临床生化检验提供可靠的测试数据，为临床诊断提供准确的参考依据。
同时，线性范围试验还可以评估试剂盒的稳定性和重复性，为试剂盒的质量控制提供参考依据。
二、最低检测限与线性范围试验1
（五）方法学评价 1.精密度较好、准确度较高，WHO 精密度较好、 精密度较好 准确度较高， 推荐方法。 推荐方法。 2.线性范围宽（10-120g/L）。 线性范围宽（ 线性范围宽 ）。 3.操作简便你、快速，成本低廉。 操作简便你、快速，成本低廉。 操作简便你 4.灵敏度较低。 灵敏度较低
（六）临床意义 1.蛋白浓度升高 蛋白浓度升高 （1）血液浓缩：脱水、外伤性休克等。 ）血液浓缩：脱水、外伤性休克等。 （2）蛋白质合成增加：多发性骨髓瘤、 ）蛋白质合成增加：多发性骨髓瘤、 免疫增殖病等。 免疫增殖病等。
临床可报告范围（ ）：指定量 临床可报告范围（CRR）：指定量 ）： 检测项目向临床能报告的检测范围， 检测项目向临床能报告的检测范围，患 者样本可经稀释、浓缩或其它预处理。 者样本可经稀释、浓缩或其它预处理。
（一）原理 线性范围是指系统最终输出值（ 线性范围是指系统最终输出值（浓度 或活性）与被分析物浓度或活性成比例 或活性） 的范围。 的范围。线性范围的测定即测定浓度曲 线接近直线的程度， 线接近直线的程度，它反映整个系统的 输出特征。 输出特征。
最低检测限（ ）：指当标本中 最低检测限（LLD）：指当标本中 ）： 不含有待测分析物时，反应响应量可 不含有待测分析物时， 能出现的数值范围， 能出现的数值范围，即单次测量可达 到的非空白检测响应量对应的分析物 量。
功能灵敏度（ ）：以日间重复CV ）：以日间重复 功能灵敏度（FS）：以日间重复 为20%时对应检测限样品具有的平均浓 时对应检测限样品具有的平均浓 度确定为检测系统或方法可定量报告的 分析物的最低浓度或其它量值 。
1.制备不同浓度的样本 1.制备不同浓度的样本
U1 DH2O（ul） 200 （ ） 血清（ ） 血清（ul） 300 浓度（ 浓度（g/L) 5.6 U2 200 300 9.3 U3 200 300 15.6 U4 200 300 U5 200 300 U6 200 300 U7
低检测限与线性范围试验
影响因素
仪器噪音
仪器本身的噪音水平会影响检测限， 因此需要选择低噪音仪器。
样品基质
样品基质中的其他组分可能会干扰待 测物的测量，需进行基质匹配或消除 干扰。
测量方法
选择合适的测量方法，如光谱法、色 谱法等，以提高检测灵敏度。
环境因素
环境温度、湿度等环境因素可能影响 仪器的性能和稳定性，需进行控制。
联用技术
尝试与其他分离、富集技术联用，进一步提 高目标组分的检出限和准确性。
标准化与规范化
制定该方法的操作规程和标准，推动其在行 业内得到更广泛的应用和认可。
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生态毒理学研究
低检测限与线性范围试验在生态毒理学研究中用于检测环境中的有毒物质对生物体的影响。这些研究有助于了解有毒 物质对生态系统的影响，并为环境保护和可持续发展提供科学依据。
放射性核素测量
低检测限与线性范围试验在放射性核素测量中用于精确测量放射性物质的活度和浓度。这些测量有助于 核能安全、核废料处理和核医学等领域的研究和管理。
药物分析
01
药物质量控制
低检测限与线性范围试验在药物分析中用于药物质量控制，确保药物的
有效性和安全性。这些试验用于检测药物中的杂质、降解产物和溶剂残
留等，以确保药物的质量和稳定性。
02
药代动力学研究
低检测限与线性范围试验在药代动力学研究中用于测量药物在体内的浓
度。这些研究有助于了解药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程，
验证仪器性能
在确定的线性范围内，对仪器进行验 证，确保其性能理
对试验数据进行处理，包括数据清洗、异常值剔除等。
线性关系评估
根据标准曲线的斜率和截距，评估仪器与标准品之间的线性关系。
临床生化检验试剂盒性能评价试验—线性范围试验方案
临床生化检验试剂盒性能评价试验—线性范围试验方案线性范围试验旨在评价试剂盒在一定的浓度范围内是否能够提供准确、可靠的测量结果。
线性范围是指试剂盒能够正常工作的浓度范围，通常以
正常生理范围为基础进行选择。
试验方案包括以下几个步骤：
1.准备样本：选择一种或多种具有不同浓度的标准物质，可以是纯品、混合物或者浓度已知的样本。
确保选取的样本覆盖到试剂盒的线性范围。
2.样本加样：按照试剂盒使用说明书中的方法，将不同浓度的样本加
入到试剂盒提供的反应池中。
同时还可以加入一定浓度的质控品作为质量
控制。
3.反应：按照试剂盒使用说明书中的方法，将试剂盒放入适当的温度
和时间条件下进行反应。
4.测量：使用相应的测量仪器对反应后的样品进行测量。
注意，为了
减小误差，每个样本应重复测量多次。
5.数据分析：根据测量结果，绘制标准曲线。
标准曲线是通过浓度与
测定值之间的关系绘制的，其中浓度为横坐标，测定值为纵坐标。
可以使
用常见的回归分析方法进行数据处理，如线性回归或非线性回归。
6.评价：通过标准曲线的拟合度来评价试剂盒的线性范围。
通常使用
相关系数（R）和决定系数（R^2）来评估标准曲线的拟合度。
相关系数越
接近于1，表明试剂盒的线性范围越好；决定系数越接近于1，表明试剂
盒的拟合度越好。
线性范围试验是评价试剂盒性能的重要指标之一、通过此试验，可以
验证试剂盒在标准浓度范围内测定结果的准确性和可靠性。
同时，线性范
围试验结果还可以用于确定测定结果的限制范围，有助于指导临床医生进行判断和诊断。
线性范围试验
间曲线观察.
以吸光度为纵坐标，反应时间为横坐标作图，观察 动态期（包栝延迟期，线性期，混和期）和平衡期 出现，持续和终止的时间，分析有关性能指标。
2019/8/23
3
临床生化试剂盒性能指标主要有
3.稳定性
是指试剂盒在规定条件下储存仍保持其 性能指标的期限
2.线性评价统计 采用回归分析,求出此直 线的截距a和斜b,建立直线回归方程y=a+bx; 并作相关分析,求出相关系数(r).
2019/8/23
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注意事项
1.葡萄糖标准液的加量必须十分准确,应用计量性 能准确度很高的微量进样器加样.
2.本方法线性可达22.24mm/L,(指生化分析仪)造成 线性变窄的原因试剂配料中组分投料不足;试剂配 制后组分稳定性差;因运输或储存不当等导致试剂 组分的含量发生变化.
3.酶法测定时,有时当酶量相对不足时,用标准液所 作的线性范围可以达到指定的高值,但在测定同样 高值样本时,结果却明显偏低,这往往
是样本中介质效应引起的，值得注意.
2019/8/23
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线形回归计算法
1.按下【MODE】【2】.进入回归分析状态, 显示“LR”,同样数据前要先按【INV】 【AC】,以清除可能存储的其他数据,输入X 值后既按【X▫.Y▫】键，输入Y值后既按 【DATA】键.若已知变量X的一个观察
2019/8/23
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实验六
临床生化检验试剂盒性能评 价试验—线性范围试验
2019/8/23
1
临床生化试剂盒性能指标主要有
1.线性范围
这一点在试剂盒评价中很重要,是指试 剂盒按说明书使用可准确测量的范 围。试剂盒测定线性范围是衡量其 质量的重要指标,也是保证正确使 用和鉴定试剂盒关键指标之一。
线性范围试验精品文档
2019/10/24
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2.线性评价统计 采用回归分析,求出此直 线的截距a和斜b,建立直线回归方程y=a+bx; 并作相关分析,求出相关系数(r).
2019/10/24
10
注意事项
1.葡萄糖标准液的加量必须十分准确,应用计量性 能准确度很高的微量进样器加样.
2.本方法线性可达22.24mm/L,(指生化分析仪)造成 线性变窄的原因试剂配料中组分投料不足;试剂配 制后组分稳定性差;因运输或储存不当等导致试剂 组分的含量发生变化.
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血糖与GOD-POD试剂剂量反应曲线的 制作
加入物
标准管
4
5
0
1
2
3
葡萄糖标准液(ul) 0
4
16 20
8
12
蒸馏水(ul) 10
20
16 12
8
4
0
GOD-POD试剂 3
3
3 (ml)
3
3
3
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结果计算
1.测定结果 5个不同浓度的标本,(应每管 平行做3管取平均值)
3.酶法测定时,有时当酶量相对不足时,用标准液所 作的线性范围可以达到指定的高值,但在测定同样 高值样本时,结果却明显偏低,这往往
是样本中介质效应引起的，值得注意.
2019/10/24
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线形回归计算法
1.按下【MODE】【2】.进入回归分析状态, 显示“LR”,同样数据前要先按【INV】 【AC】,以清除可能存储的其他数据,输入X 值后既按【X▫.Y▫】键，输入Y值后既按 【DATA】键.若已知变量X的一个观察
实验六
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线性与范围(linearity and range)分析方法的线性是在给定范围内获取与样品中供试物浓度成正比的试验结果的能力。
换句话说，就是供试物浓度的变化与试验结果(或测得的响应信号)成线性关系。
所谓线性范围是指利用一种方法取得精密度、准确度均符合要求的试验结果，而且成线性的供试物浓度的变化范围，其最大量与最小量之间的间隔，可用mg／L ~ mg／L、ug／ml ~ ug ／ml等表示。
线性与范围的确定可用作图法(响应值Y／浓度X)或计算回归方程(Y＝a+bX)来研究建立。
测定样品时所有生物药物分析方法都必须同时作标准曲线。
每次作标准曲线时，方法应与分析方法考核时完全一致。
标准浓度应包括一定梯度的5-8个浓度(非线性者如免疫分析可适当增加)，每个浓度只需测定一次(免疫分析可测定两次并取均值)；标准曲线应覆盖样品可能的浓度范围，对于含量测定要求一般浓度上限为样品最高浓度的120％，下限为样品最低浓度的80％(但应高于LOQ)；目前仍广泛采用相关系数(r)表示标准曲线的线性度、并控制r≥0.9900。
对照品的LOQ必须包括在线性范围。
线性范围是指与检测器响应信号成线性关系的样品的含量范围.一般情况下,标准曲线的最低和最高值是包含在线性范围内的,而且不同人做的标准曲线,他所取的最低和最高值也不会都相同,打个比方来说,A做5个点的标准曲线,所选择的标准样品的浓度分别为:1,5,10,15,20,那么最低最高值分别为1和20,而对于这种要检测的物质来说,它的线性范围可能是10E5,要远大于制作标准曲线所选择的浓度范围.通常在建立一个新方法的时候可以通过文献查到一些物质的线性范围,而实际工作中,要确切知道某种物质的线性范围必要性可能也不大。
S/N=3时的浓度是检测限，也就是峰高约在基线噪音高的3倍，注入液相色谱仪的对照品百分浓度％。
S/N=10是定量限，也就是峰高约在基线噪音高的10倍时，注入液相色谱仪的对照品量。
体外诊断试剂分析性能评估线性范围
C
符合要 求
该方法 呈线性
停顿
缩小范围？(5.3.3) 能够
不行
该方法是非线 性
舍去非线性显
著处低或高值
B
点(5.3.3)
停顿
第14页
举例: Ca检测: 试验室准备样本和对6个不一样浓度水平标本进行
重复测定，假定试验室设定Ca重复性和非线性误差均为
0.20mg/dL
标本
测量值1
测量值2
均值
1
4.7
如非线性系数b2.b3与0比较，经t检验（p>0.05）， 存在线性关系，不精密度满足条件时，则分析完 成。 如二次多项式模型非线性系数b2，或三次多项式 模型b2或b3中任一个与0比较，有显著差异 （p<0.05），则该组数据存在非线性。
体外诊断试剂分析性能评估线性范围
第13页
设计方法和确定误差目 标（非线性和重复性） (6.3)
138
138.5
3
269
273
271.0
4
337
343
340.0
5
409
404
406.5
从表中数据能够看出，没有显著离群值，但在低水平浓度处重复性很好，
而在高浓度水平处两次测量结果差异较大。重复性差异检测以下:
标本号 1 2 3 4 5
均值 26.35 138.5 271.0 341.0 406.5
体外诊断试剂分析性能评估线性范围
图C4: Ca线性评价差值点图—1-5稀释
第20页
举例
在试验室内准备五个等距浓度标本测定IgM，每标本重复测定两次。假定 试验室设定重复性和线性允许误差范围分别为2%和5%。随机次序测试结 果以下:
线性范围
八、方法学评价
测定上限应使95%的临床标本不经稀释即可 进行测定，其具体数值是通过线性范围试验加以 确定。当测定值高于测定上限时，应减少标本用 量或将标本稀释后重新测定，而对于测定下限， 实测多少就报告多少。如果未经验证，随意延长 测定下限的做法是不正确的。
剂量反应曲线实验可以确定某种测定方法的 线性范围，可作为制作实际工作中使用的校准曲 线的依据。
实验八：线性范围实验
一、实验目的
1．掌握线性范围实验的原理和方法。 2．掌握线性范围数据的处理。
二、实验原理
配制系列不同浓度的葡萄糖标准溶液，用 GOD-POD法测定各标准管的吸光度，以浓度为 横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制出剂量反应曲 线(dose-response curve)，确定方法线性范围。
2．对数据进行线性回归分析，得直线回归方程Y=bX+a；作相
关分析，可求出相关系数(r)。
a和b的计算公式分别为：
a Y b X Y bX
n
n
XY பைடு நூலகம்X )(Y ) / n b
X 2 (X ) 2 / n
如果两方法表示的某分析物量具相同的计量单位时，理
想状态的回归式应为y＝x，即b=1，a=0。b≠1，a≠0分别
表示两方法间的测定标本时的比列误差和恒定误差。 相关性分析：
相关系数r=
XY (X )(Y ) / n
[X 2 (X )2 / n][Y 2 (Y )2 / n]
七、注意事项
1．测定方法的线性范围要求能覆盖正常参考范围和 常见疾病的医学决定水平，以减少标本稀释重测 的机会。
2．一般在试剂更换或者比色计检修后，需重新制作 校准曲线。
3．标本的加量必须十分准确，应用准确度很高的微 量进样器加样。
线性范围试验测定实验报告
线性范围试验测定实验报告一、实验目的线性范围试验用于评价候选方法的分析测量范围。
二、实验材料1.试剂：40mmol/L葡萄糖标准溶液、5.55mmol/L葡萄糖标准溶液、1、2号血清质控品、GOD- POD试剂盒2.器材：722型分光光度计、移液管、移液枪、试管等三、实验方法1.原理：使用不同浓度的葡萄糖标准溶液，用GOD-POD法试剂测定各自的浓度，以标准预期浓度为横坐标，实际测得的浓度为纵坐标，在方格纸上作图，即可绘制出一条直线，即计量反应曲线，根据建立的直线方程进行线性范围的评价。
2.步骤：1.将40mmol/L葡萄糖标准溶液与生理盐水进行如下稀释，制作系列标准管。
加入物标准管0 1 2 3 4 5 40mmol/L葡萄糖标准溶液（ul）0 2 4 6 8 10 蒸馏水（ul）20 18 16 14 12 10 GOD- POD应用液（ml） 3 3 3 3 3 3 各管混匀后，37°C水浴10min，在505nm波长下进行比色2.用GOD-POD法分别测定系列标准管血糖浓度，测定时做二次重复测定，且测定秩序应随机排列。
四、实验结果1.质控结果标准管实验前实验中质控1 质控2 质控1 质控2 吸光度 0.233 0.165 0.344 0.173 0.358浓度（mmol/l） 5.55 3.93 8.22 4.12 8.532.线性实验结果管号0 1 2 3 4 5A1 0 0.205 0.347 0.457 0.588 0.809A2 0 0.205 0.347 0.458 0.590 0.809A 0 0.205 0.347 0.458 0.589 0.809 C 0 4.88 8.27 10.91 14.03 19.27线性评价试验y = 0.9031x + 0.528602468101214161820220246810121416182022预期浓度实测浓度五、结果分析1.由图可知所有的质控品都在控。
线性范围试验的原理
线性范围试验的原理线性范围试验是一种用于确定设备或系统线性动态范围的实验方法。
线性动态范围是指设备或系统能够正常工作的最大和最小输入范围。
通过线性范围试验可以确定设备或系统在此范围内的输入输出特性。
下面将详细介绍线性范围试验的基本原理。
1.基本原理-线性范围：在设备或系统的线性范围内，输入和输出之间存在线性关系，即输入的变化会导致相应输出的变化。
-饱和效应：当输入超出设备或系统的线性范围时，输出可能会饱和，即不能进一步增加或减少。
因此，通过逐步逼近设备或系统的极限输入值，可以确定其线性范围。
线性范围试验一般通过逐步增加或减小输入信号的幅度来完成。
2.实验步骤-步骤1：确定输入和输出信号的量化方式和量程。
输入信号可以是电压、电流、光强等，输出信号可以是电压、电流、功率等。
-步骤2：确定试验的最小和最大输入值。
这些值应尽可能接近设备或系统的极限输入。
-步骤3：确定逐步增加或减小输入信号的步长。
这个步长应足够小以确保可以逐步逼近极限输入。
-步骤4：以最小输入值为起点，逐步增加或减小输入信号的幅度，记录每个输入值对应的输出值。
-步骤5：计算输出信号和输入信号的关系。
可以通过绘制输入-输出曲线或计算输入输出比例等方式来确定线性范围。
-步骤6：检查输出信号是否饱和。
如果在试验过程中发现输出信号饱和，则应重新选择更合适的输入范围进行试验。
3.实验要点在线性范围试验中，需要注意以下要点：-输入信号的稳定性：输入信号在试验过程中应保持稳定，避免幅度和频率的变化对试验结果的影响。
-采样频率：选择合适的采样频率，确保采样点足够多，以获取准确的输入输出值。
-数据处理：对于大量数据，需要进行适当的数据处理，如平均值计算、滤波等，以消除噪声和提高结果的可靠性。
-精确度要求：根据设备或系统的敏感度和应用要求，确定试验结果的精确度要求。
4.应用举例-传感器：测量传感器的灵敏度和线性关系，确定其合适的工作范围。
-放大器：测试放大器的放大倍数和线性失真，确定其最大的输入输出范围。
线性范围和可报告范围验证表
线性范围和可报告范围验证表
操作者：李英智
评价⼈：姚林军
结论：A-TSHR 在0.75-36.98IU/L 浓度范围内在呈线性,与试剂⼚商提供数据基本符合。
线性范围性能评估
2 实验⽅法：
3 要求：
a 值在1±0.05范围内，相关系数r ≥0.975，截距
b ⼩于检测上限浓度的5%。
4 结果：
1 实验⽬的：对试剂⼚商提供的线性范围进⾏验证。
其可报告范围为：0.75-369.8IU/L
选取⼀份⾼浓度⾎清,稀释到仪器接近于检测上限附近，以此⾎清作为原倍⾎清分别按1:2，1:4，1:8，1:16……的⽐例进⾏倍⽐稀释，每个稀释度重复测定3次，计算其均值。
将实测值与理论值进⾏⽐较，计算 y=ax+b ，验证线性范围。
如果结果呈线性则可报告范围为线性范围与⼚家允许的最⼤稀释倍数的乘积。
4.1 A-TSHR ：取⼀份⾼浓度A-TSHR 的患者⾎清稀释1.5倍测定3次的均值(36.98IU/L)作为原倍⾎
清，验证其检测线性范围(0.3-40.00IU/L)。
%。
⾎清分别按1:2，1:4，1:8，1:16理论值进⾏⽐较，计算 y=ax+b，
倍数的乘积。
方法学评价-线性范围试验
1
方法学评价
——通过一系列的实验，对某一实验方 法作出客观的评价。
2
方法学评价试验
——线性范围试验 ——批内重复试验
——回收试验
——干扰试验
——方法比较试验
——检测能力试验
3
评价对象
——葡萄糖氧化酶法（GOD-POD法）。
4
GOD-POD法评价之 线性范围试验
5
光谱分析—Beer定律：
量-反应曲线（dose-responses curve）。
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GOD-POD法原理：
葡萄糖氧化酶(GOD)
葡萄糖 + O2
葡萄糖酸 + H2O2
过氧化物酶(POD)
H2O2 + 酚 + 4-氨基安替比林
（色原性氧受体）
醌类 + H2O+O2
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试剂：
40mmol/L葡萄糖标准溶液
GOD-POD法相关试剂
——溶液的吸光度与溶液浓度成正比。
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吸光度
溶液浓度
A=abc
吸光系数 液层厚度 吸光度A
0
浓度C
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A
C
8
仪器偏离
线性误差
偏离
化学偏离
仪器线性检查仪器偏离
——杂光、有限带宽、检测器噪声、环 境条件变化、波长的变化、比色杯误差、 辐射光的非平行性、检测器本身的非线 性等
化学偏离
——有色物质的电离、水解、缔合等原 因。
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线性范围试验目的： ——通过进行线性范围的测定，选 择线性段作为该测定方法的分析范 围。
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A
线性段
θ
C
tanθ＝A1/C1＝A2/C2＝A3/C3＝……＝An/Cn＝K
线性范围试验的原理
线性范围试验的原理
线性范围试验的原理是通过在测试物体上施加不同的载荷或应力，来观察物体的变形或破裂情况，从而确定物体的线性范围。
线性范围试验是针对材料或物体的弹性行为进行的实验，即当载荷或应力在某个范围内时，物体的变形呈线性关系，即满足胡克定律。
在线性范围试验中，通常使用特定的载荷或应力施加装置（如载荷机或压力机），将逐渐增加的载荷或应力施加在待测物体上。
同时，通过对物体变形或位移的测量，可以得到载荷或应力与物体响应的关系曲线。
当该曲线为直线时，即为线性范围。
此时，可以通过斜率来确定物体的弹性模量或刚度。
如果曲线发生明显的非线性变化或出现破裂，则表示超过了线性范围。
通过线性范围试验，可以获得物体的弹性特性参数，为材料的设计和使用提供重要的参考依据。
线性范围及检测限
线性与范围(linearity and range)分析方法的线性是在给定范围内获取与样品中供试物浓度成正比的试验结果的能力。
换句话说，就是供试物浓度的变化与试验结果(或测得的响应信号)成线性关系。
所谓线性范围是指利用一种方法取得精密度、准确度均符合要求的试验结果，而且成线性的供试物浓度的变化范围，其最大量与最小量之间的间隔，可用mg／L ~ mg／L、ug／ml ~ ug ／ml等表示。
线性与范围的确定可用作图法(响应值Y／浓度X)或计算回归方程(Y＝a+bX)来研究建立。
测定样品时所有生物药物分析方法都必须同时作标准曲线。
每次作标准曲线时，方法应与分析方法考核时完全一致。
标准浓度应包括一定梯度的5-8个浓度(非线性者如免疫分析可适当增加)，每个浓度只需测定一次(免疫分析可测定两次并取均值)；标准曲线应覆盖样品可能的浓度范围，对于含量测定要求一般浓度上限为样品最高浓度的120％，下限为样品最低浓度的80％(但应高于LOQ)；目前仍广泛采用相关系数(r)表示标准曲线的线性度、并控制r≥0.9900。
对照品的LOQ必须包括在线性范围。
线性范围是指与检测器响应信号成线性关系的样品的含量范围.一般情况下,标准曲线的最低和最高值是包含在线性范围内的,而且不同人做的标准曲线,他所取的最低和最高值也不会都相同,打个比方来说,A做5个点的标准曲线,所选择的标准样品的浓度分别为:1,5,10,15,20,那么最低最高值分别为1和20,而对于这种要检测的物质来说,它的线性范围可能是10E5,要远大于制作标准曲线所选择的浓度范围.通常在建立一个新方法的时候可以通过文献查到一些物质的线性范围,而实际工作中,要确切知道某种物质的线性范围必要性可能也不大。
S/N=3时的浓度是检测限，也就是峰高约在基线噪音高的3倍，注入液相色谱仪的对照品百分浓度％。
S/N=10是定量限，也就是峰高约在基线噪音高的10倍时，注入液相色谱仪的对照品量。
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2019/3/7
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血糖与GOD-POD试剂剂量反应曲线的 制作
加入物 4 5 葡萄糖标准液(ul) 0 16 20 蒸馏水(ul) 10 20 4 0 GOD-POD试剂 3 3 3 (ml)
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标准管
0
4 16
1
8 12
2
12 8
3
3
3
3
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结果计算
1.测定结果 5个不同浓度的标本,(应每管 平行做3管取平均值) 2.线性评价统计 采用回归分析,求出此直 线的截距a和斜b,建立直线回归方程y=a+bx; 并作相关分析,求出相关系数(r).
包栝原包装和工作液在指定条件下稳 定性
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4
线性范围实验
目的与要求 掌握检测临床生化检验商品试剂盒测定线性范 围的原理和方法,计量反应曲线的绘制,统计 方法和性能评价;熟悉线性范围变窄的原因; 了解影响线性的因素.
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原理
使用不同浓度的葡萄糖标准溶液光度为纵坐标,在方格纸上 作图.即可绘制出一条直线,即剂量反应曲线 (dose-response curve).
2.酶促反应时间曲线或化学反应速度时 间曲线观察.
以吸光度为纵坐标，反应时间为横坐标作图，观察 动态期（包栝延迟期，线性期，混和期）和平衡期 出现，持续和终止的时间，分析有关性能指标。
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临床生化试剂盒性能指标主要有
3.稳定性
是指试剂盒在规定条件下储存仍保持其 性能指标的期限
实验六
临床生化检验试剂盒性能评 价试验—线性范围试验
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1
临床生化试剂盒性能指标主要有
1.线性范围
这一点在试剂盒评价中很重要,是指试 剂盒按说明书使用可准确测量的范 围。试剂盒测定线性范围是衡量其 质量的重要指标,也是保证正确使 用和鉴定试剂盒关键指标之一。
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临床生化试剂盒性能指标主要有
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线形回归计算法
1.按下【MODE】【2】.进入回归分析状态, 显示“LR”,同样数据前要先按【INV】 【AC】,以清除可能存储的其他数据,输入X 值后既按【X▫.Y▫】键，输入Y值后既按 【DATA】键.若已知变量X的一个观察 值，求估计值Y时，可直接输入X值，随后按 【Y】即可求得；若已知Y值求估计值X，则 输入Y值后按【INV】【X】即可求得X值．
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注意事项
1.葡萄糖标准液的加量必须十分准确,应用计量性 能准确度很高的微量进样器加样. 2.本方法线性可达22.24mm/L,(指生化分析仪)造成 线性变窄的原因试剂配料中组分投料不足;试剂配 制后组分稳定性差;因运输或储存不当等导致试剂 组分的含量发生变化. 3.酶法测定时,有时当酶量相对不足时,用标准液所 作的线性范围可以达到指定的高值,但在测定同样 高值样本时,结果却明显偏低,这往往 是样本中介质效应引起的，值得注意.
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试剂
1. 25mmol/L葡萄糖标准溶液 2. 其他试剂
同GOD-POD法试剂,试剂配制: 用蒸馏水将试剂2进行10倍稀 释,然后等量与试剂1混合成 酶
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操作步骤
按表操作.为提高计量反应曲线制作的可靠 性,可将表中葡萄糖标准液和蒸馏水同时扩 大10倍,制备1,2,3,4各浓度管,然后分别取 20ul,各加GOD-POD试剂3ml测定.
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① 操作进入LR状态，清除内存【MODE】【2】 【INV】 【AC】 ②输入原始数据X 【X▫.Y▫】， Y 【DATA】 ③输出结果 回归方程的截距【INV】【A】 回归系数【INV】【B】 相关系数【INV】【r】 【A】
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