类风湿性关节炎患者2H4_T淋巴细胞亚群的流式细胞仪分析[1]
类风湿关节炎患者Th亚群的双标流式细胞分析
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１ 材 料 与 方 法
１１ 标 本 ． Ｒ Ａ患 者 滑液 单 个 核 细胞 （ Ｆ Ｃ 和外 周 ＳＭ ）
维普资讯 中 国免 疫 学 杂 志来自２Ｏ ０ ２年 第 １ ８卷
类风湿关节炎 患者 Ｔ ｈ亚 群 的双 标 流 式 细胞 分 析
张 浩 董 书魁 李雪丽
Ｒ ９ ． Ｂ ２８
王清娟
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虎① （ 二炮 兵 总 医院 检 验科 ， 京 １ｏ８ ） 第 北 ｏｏ８
患者 滑液 和 外 周血 中 ｒ １Ｔ２和 Ｔ０的分 布及 平 衡 Ｉ ，ｈ １ ｈ ｈ
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类风湿关节炎患者淋巴细胞亚群分析
类风湿关节炎患者淋巴细胞亚群分析王云萍;董佳莉【期刊名称】《临床医药实践》【年(卷),期】2016(025)012【摘要】目的：检测类风湿关节炎（RA）患者外周血淋巴细胞亚群，探讨 RA 患者外周血淋巴细胞亚群与疾病转归之间的相关性。
方法：采取横断面研究，纳入RA 患者42例，其中初发组15例，治疗组27例。
根据治疗前后类风湿关节炎疾病活动性评分（DAS28）的变化，治疗组分为缓解组12例和难治组15例。
用流式细胞术测定外周血淋巴细胞亚群。
采用 t 检验、单因素方差分析（one - way ANOVA）、χ2检验、Pearson 相关性分析进行统计学处理。
结果：初发组的淋巴细胞、CD3＋ T 细胞、CD56＋ CD16＋ NK 细胞计数均低于对照组（P ＜0.01），而 CD19＋ B 细胞高于对照组（P ＜0.01）；难治组的淋巴细胞、CD3＋ T 细胞、CD56＋ CD16＋ NK 细胞计数均低于缓解组（P ＜0.01），而 CD19＋ B 细胞高于RA 缓解组（P ＜0.01）；T、B 淋巴细胞与 DAS28评分、红细胞沉降率（ESR）均具有相关性。
结论：各型淋巴细胞均在RA 中起着重要作用，且与疾病活动度相关。
【总页数】4页(P911-914)【作者】王云萍;董佳莉【作者单位】运城同心风湿病医院，山西运城 044000;运城同心风湿病医院，山西运城 044000【正文语种】中文【中图分类】R593.22【相关文献】1.类风湿关节炎合并骨质疏松症患者外周血T淋巴细胞亚群、炎症因子水平与骨代谢指标的相关性分析2.类风湿关节炎并发骨质疏松患者外周血淋巴细胞亚群的表达水平3.甲氨蝶呤、硫酸羟氯喹联合小剂量甲泼尼龙对老年类风湿关节炎患者外周血淋巴细胞亚群的影响4.依那西普联合甲氨蝶呤对类风湿关节炎患者外周血T 淋巴细胞亚群及血清炎症因子水平的影响5.T淋巴细胞亚群CD3+,CD4+,CD8+及CD4+/CD8+类风湿关节炎患者外周血中的变化因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
流式细胞术检测淋巴细胞亚群操作规程
流式细胞术检测淋巴细胞亚群操作规程一、编号：JS0604二、标题：流式细胞术检测淋巴细胞亚群操作规程三、关键词：流式细胞术淋巴细胞操作规程四、目的：规范流式细胞术检测淋巴细胞亚群的实验操作五、背景知识：T细胞亚群变化的临床意义主要表现在肿瘤、自身免疫性疾病中。
在感染性疾病中，因为CD4+ T细胞是辅助、诱导T细胞的标志，CD4+ T 细胞下降常见于某些病毒感染性疾病，如AIDS、巨细胞病毒感染、瘤型麻风。
而CD4+ T细胞长期低于正常水平，常提示患者易于被病毒等微生物侵袭。
CD8+是抑制、杀伤T细胞的标志，在传染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染、慢性乙型肝炎等感染性疾病中，CD8+ T细胞常升高。
CD4+／CD8+细胞比值下降，除肿瘤等疾病外，常见于AIDS、瘤型麻风、传染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染、血吸虫病等。
六、原理：利用不同荧光物质标记的抗CD3、CD4、CD8单克隆抗体，与待测成分作用，然后上流式细胞仪检测待测细胞。
待测细胞随流动室内的流动鞘液排列成单列，一个个迅速通过激光聚焦区，激光在对每个细胞进行照射时可同时得到前向角散射和侧向角散射2种散射光以及激发荧光标记物质发出的信号，利用这些信号，可计算出CD3+、CD4+、CD8+的相对含量，从而得出各细胞群的相对比值。
七、仪器设备和材料：肝素抗凝静脉血1ml，不同荧光素标记的抗CD3、CD4、CD8单克隆抗体，同型阴性对照荧光物，溶血剂，固定剂，流式细胞仪。
八、操作步骤1、100μ1抗凝血加20μl荧光单克隆抗体，同时做阴性对照。
2、避光室温作用20min，溶去红细胞后，固定剂固定。
3、上流式细胞仪测定，以阴性对照测出本底参数，调节荧光补偿，设定阳性参数值，软件将计算出阳性表达细胞比例。
九、注意事项1、为保证所得结果的可靠性，每次试验前应以标准荧光微球检测仪器的变异系数。
2、每次应做阴性对照、阳性对照、正常对照、质控对照，以确保将各种试剂及操作过程对结果的影响降至最低。
流式细胞仪测定淋巴细胞和T淋巴细胞HLA-B27表达比较
流式细胞仪测定淋巴细胞和T淋巴细胞HLA-B27表达比较凡瞿明;张国元
【期刊名称】《川北医学院学报》
【年(卷),期】2004(019)002
【摘要】目的通过用流式细胞仪测定淋巴细胞和T淋巴细胞HLA-B27的表达,对比分析,寻求一种经济实用的HLA-B27检测方法.方法用流式细胞仪分别以SSC-FSC特性选定淋巴细胞和CD3+确定T淋巴细胞测定HLA-B27的表达情况,分析其差异.结果两者表达百分率无本质性差异.结论用单色HLA-B27荧光抗体处理样本,采用流式细胞仪测定HLA-B27的表达结果完全能满足临床需要.
【总页数】2页(P87-88)
【作者】凡瞿明;张国元
【作者单位】川北医学院附属医院检验科,四川,南充,637000;川北医学院附属医院检验科,四川,南充,637000
【正文语种】中文
【中图分类】R446.11+3
【相关文献】
1.强直性脊柱炎与HLA-B27的表达及T淋巴细胞亚群和细胞因子相关性分析 [J], 邓菊慧;李志强;张睿;李艳梅
2.流式细胞仪测定小儿再障外周血NK细胞及T淋巴细胞亚群 [J], 魏晓军
3.流式细胞仪测定肝病患者T淋巴细胞亚群及NK细胞 [J], 李玉中;王朝晖;等
4.Beckman和BD两种机型流式细胞仪检测CD4^＋T淋巴细胞数比较研究 [J],
卢红艳;吴昊;赵辉;宋淑静;计云霞;孙伟东;张启云;张芹;黑发欣;赵月娟;叶景荣
5.应用微量淋巴细胞毒与流式细胞仪检测HLA-B27的比较 [J], 方勇飞;钟兵;李维;王勇
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类风湿关节炎患者T细胞亚群的检测及意义
类风湿关节炎患者T细胞亚群的检测及意义
张卫平
【期刊名称】《中国社区医师（医学专业）》
【年(卷),期】2012(014)021
【摘要】目的:研究T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+类风湿关节炎(RA)患者外周血中的变化,分析其在类风湿关节炎发病的作用及意义,并探讨其在类风湿关节炎发病的机制.方法:挑选43例类风湿关节炎患者(观察组),另取正常体检者30例为对照组.采用免疫荧光法检测CD3+、CD4+、CD8+水平,观察其在类风湿关节炎炎中表达的变化.结果:类风湿关节炎患者CD3+、CD4+及
CD4+/CD8+水平较对照组明显下降而CD8+水平较对照组的无明显变化.结论:类风湿关节炎患者外周血中CD3+、CD4+及CD4+/CD8+,表达下降,免疫功能受损,其外周血淋巴细胞的增生能力和细胞毒反应性下降.
【总页数】2页(P242-243)
【作者】张卫平
【作者单位】300193天津中医药大学第一附属医院
【正文语种】中文
【相关文献】
1.强直性脊柱炎和类风湿关节炎患者外周血T细胞亚群检测的意义 [J], 苏帆;赵丹;苏卓娃;马文松
2.类风湿关节炎患者T细胞亚群的检测及意义 [J], 张卫平
3.弥漫大B细胞淋巴瘤患者外周血可溶性白细胞介素-2受体T细胞亚群及自然杀
伤细胞检测的临床意义 [J], 许晓强;邢志华;张巧花
4.女性不孕不育患者外周血DNT细胞、T细胞亚群的检测及临床意义 [J], 梁杨焕;张炯;谢芹
5.免疫球蛋白、白细胞介素及T细胞亚群检测对慢性荨麻疹患者的临床意义 [J], 崔昭婷
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类风湿关节炎淋巴细胞亚群的临床研究
类风湿关节炎淋巴细胞亚群的临床研究
郭宁茹
【期刊名称】《临床合理用药杂志》
【年(卷),期】2016(9)8
【摘要】目的探索类风湿关节炎(RA)患者外周血T淋巴细胞亚群水平变化。
方法选择2014年8月-2015年7月医院门诊收治的RA患者45例为研究组,另选择同时期进行健康体检者45名为对照组,使用流式细胞分析仪测定T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+比值)并进行组间比较。
结果研究组
CD3+(58.86±5.65)%、CD4+(31.56±4.32)%和CD4+/CD8+比值(1.15±0.33)与健康对照组比较明显减少,CD8+(29.32±3.78)与健康对照组比较明显增加,上述差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论 RA发病与细胞免疫功能受损有密切相关性,T淋巴细胞亚群变化可为临床诊断和治疗提供参考,极具应用和推广价值。
【总页数】2页(P130-131)
【作者】郭宁茹
【作者单位】河南省濮阳市油田总医院风湿免疫科
【正文语种】中文
【中图分类】R725.622.5
【相关文献】
1.PD-1在类风湿关节炎外周血T淋巴细胞亚群表达的临床意义
2.六味补肺益肾颗粒治疗支气管哮喘患者的临床疗效及对T淋巴细胞亚群、炎症因子的影响研究
3.
初发类风湿关节炎患者外周血淋巴细胞亚群及TNF-α、IL-6表达与临床意义4.T 淋巴细胞亚群分析联合胸腺肽α1治疗对严重脓毒血症预后的临床研究5.T淋巴细胞亚群检测在新型冠状病毒肺炎临床应用价值中的研究进展
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两种流式细胞仪检测T细胞亚群的比对分析
两种流式细胞仪检测T细胞亚群的比对分析流式细胞仪是一种用于研究和分析细胞的仪器。
它可以通过分析细胞的表面标记物或细胞内的分子，来获得关于细胞亚群的信息。
其中，T细胞是一类重要的免疫细胞，可以分为多个不同的亚群，如细胞毒性T细胞（CD8+）、辅助性T细胞（CD4+）等。
在免疫学研究和临床检测中，了解T细胞亚群的数量和比例对于评估免疫功能的状态至关重要。
下面将介绍两种常用的流式细胞仪检测T细胞亚群的比对分析方法。
1.全血淋巴细胞表面标记法全血淋巴细胞表面标记法是通过将新鲜全血样本进行细胞表面标记，然后使用流式细胞仪进行分析。
该方法的优点是样本处理简单快速，可以直接得到体内T细胞亚群的比例。
具体步骤如下：（1）制备淋巴细胞上清液：将新鲜全血样本与等体积的生理盐水混合，用离心管密封离心，将上清液分离出来。
（2）染色：将淋巴细胞上清液转移到离心管中，加入适量的表面标记的单克隆抗体。
常用的表面标记抗体有CD3、CD4和CD8等。
（3）洗涤：离心管密封离心，将上清液倒掉，再次加入适量的生理盐水洗涤淋巴细胞。
（4）流式细胞仪检测：将洗涤后的细胞上样到流式细胞仪中，设置相应的检测参数，如激发波长和荧光信号的检测通道。
通过流式细胞仪收集数据，并使用分析软件对数据进行解析和计算。
这种方法的优点是可以同时检测多种T细胞亚群，准确计算亚群的比例。
但是由于这种方法无法获得细胞内的功能和分子表达信息，只能通过表面标记物进行鉴定。
2.胞浆染色法胞浆染色法是通过流式细胞仪检测细胞胞浆内的标记物，从而分析T 细胞亚群的比例。
该方法通常与细胞表面标记法联合使用，可以同时获得细胞表面和胞浆内的信息。
具体步骤如下：（1）制备全血淋巴细胞上清液：与全血淋巴细胞表面标记法相同。
（2）染色：将淋巴细胞上清液进行细胞膜标记和胞浆胞浆标记。
胞浆标记常用的有抗体和荧光染料，如免疫球蛋白（IgG）等。
（3）洗涤：与全血淋巴细胞表面标记法相同。
（4）流式细胞仪检测：与全血淋巴细胞表面标记法相同，但需要在分析软件中选择相应的通道来检测胞浆标记物。
淋巴细胞亚群流式
淋巴细胞亚群流式
淋巴细胞亚群流式是一种通过流式细胞术检测淋巴细胞亚群的方法。
流式细胞术是一种用于分析细胞特性和功能的生物技术，通过将单个细胞与特异性抗体结合，对细胞表面和内部标记物进行定量和定性分析。
在淋巴细胞亚群流式中，通过使用特异性抗体标记不同的淋巴细胞亚群，如T细胞、B细胞、NK细胞等，然后利用流式细胞仪对标记后的细胞进行快速分析和计数。
这种方法可以获得淋巴细胞亚群的相对百分比和绝对值，从而评估机体的免疫状态。
淋巴细胞亚群流式在临床诊治中发挥了重要作用。
例如，在白血病诊断和治疗中，通过监测异常淋巴细胞亚群及绝对计数结果，可以为临床初步判断信息提供依据。
同时，在诊疗阶段，更为明确的白血病分型及MRD监测有助于为治疗方案选择、临床疗效分析、预后判断、复发监测等方面提供更加精准的医学决策支持。
此外，在免疫重建过程中，多参数流式细胞术结果对于及时评价患者的细胞免疫功能，指导免疫抑制剂等药品的使用种类和剂量等方面均具有重要价值。
需要注意的是，临床检测都有标准化的检测方案，可以直接上机调用建立好的内置模板，使用比较方便。
类风湿关节炎患者外周血T淋巴细胞亚群 CD4＋／CD8＋表达的意义
类风湿关节炎患者外周血T淋巴细胞亚群 CD4＋／CD8＋表达的意义梅序桥;吴阿阳;郑燕苹;陈宏浦;郑源海;杨惠聪;张佳林【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2015(000)021【摘要】目的：探讨类风湿关节炎（RA ）患者外周血T淋巴细胞亚群CD4＋／CD8＋的表达变化对疾病进展的关系。
方法采用流式细胞术检测94例RA患者和22例健康对照者外周血T淋巴细胞亚群CD4＋／CD8＋。
其中94例RA患者按RA疾病活动指数（DAS28）评分分为低值、中值、高值3组。
结果与健康对照组比较，RA组外周血中CD3＋CD4＋T淋巴细胞的表达率明显升高（P＜0．05），其中CD3＋ CD4＋ T 淋巴细胞在DAS28低值组为（41．03±9．53）％，DAS28中值组为（42．16±7．08）％，DAS28高值组为（43．72±9．63）％；CD3＋ CD8＋ T 淋巴细胞表达率明显降低（P＜0．05），其中CD3＋ CD8＋ T 淋巴细胞在DAS28低值组为（21．33±6．67）％，DAS28中值组为（21．39±7．36）％，DAS28高值组为（21．28±6．60）％。
结论 CD4＋／CD8＋比值与RA 患者疾病进程相关，表明CD4＋／CD8＋失衡在RA的发病中发挥了重要作用。
%Objective To investigate the correlation between the change of peripheral b lood T‐lymphocyte subsets CD4/CD8 with the disease progress in the patients with rheumatoid arthritis (RA) .Methods The peripheral blood T‐lymphocytes subsets CD4/CD8 in 94 patients with RA and 22 healthy controls were examined by flow cy‐tometry .94 cases of RA were divided into low value ,median value and high value groups by RAdisease activity index (DAS28) scores .Results Compared with the healthy controls ,the expression rate of peripheral blood CD3+CD4+ T cells in the RA group was increased significantly (P<0 .05) ,in which CD3+CD4+ T cells were (41 .03 ± 9 .53)% in DAS28 low value group ,(42 .16 ± 7 .08)% in DAS28 median value group and (43 .72 ± 9 .63)% in DAS28 high value group .The expression rate of CD3+CD8+ T was significantly decreased (P<0 .05) ,in which CD3+CD8+ T cells were (21 .33 ± 6 .67)% in DAS28 low value group ,(21 .39 ± 7 .36)% in DAS28 median value group and (21 .28 ± 6 .60)%in DAS28 high value group .Conclusion CD4+ /CD8+ ratio is associated with RA progression ,indicating that the CD4+ /CD8+ imbalances plays an important role in the pathogenesis of RA .【总页数】4页(P3144-3146,3149)【作者】梅序桥;吴阿阳;郑燕苹;陈宏浦;郑源海;杨惠聪;张佳林【作者单位】福建医科大学附属漳州市医院检验科，福建漳州 363000;福建医科大学附属漳州市医院检验科，福建漳州 363000;福建医科大学附属漳州市医院检验科，福建漳州 363000;福建医科大学附属漳州市医院血液科，福建漳州 363000;福建医科大学附属漳州市医院检验科，福建漳州 363000;福建医科大学附属漳州市医院检验科，福建漳州 363000;福建医科大学附属漳州市医院血液科，福建漳州 363000【正文语种】中文【相关文献】1.慢性乙肝患者外周血CD4+细胞HLA-DR、CD8+细胞CD28表达的检测及其意义 [J], 徐祖龙;朱晓丽;陈斌;朱学骏;叶军;张立新2.梅毒患者外周血CD4+、CD8+调节性T细胞表达的临床意义 [J], 杨静;孙兆伟;张渝3.幼年型类风湿关节炎患者外周血和滑液CD4+和CD8+T细胞CD25表达及意义[J], 廉水清;毋小玉;张瑛4.乳腺癌患者手术前后外周血CD4+和CD8+及Treg细胞的表达及临床意义 [J], 林永忠; 陈榕; 钱之远; 陈夏; 谢树贤5.sPD-1、IFY-γ、IL-12、IL-10及T淋巴细胞CD4+、CD8+在慢性乙肝患者血浆中的表达及临床意义 [J], 柯淑慧; 杨伟琴; 吴炳; 张涵斌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
cd4t细胞亚群流式分选
cd4t细胞亚群流式分选
CD4+T细胞亚群是人体免疫系统中的重要组成部分，它们在维持免疫平衡和抵御疾病方面发挥着关键作用。
流式分选技术是一种高效、精确的方法，用于分离和鉴定这类细胞。
在流式分选中，首先需要收集所需的细胞样本，通常是外周血或淋巴结穿刺液。
样本经过适当的处理后，会被标记上荧光抗体，这些抗体能够特异结合CD4+T细胞表面的抗原。
抗体标记的细胞通过流式细胞仪进行检测和分析，该仪器能够快速分析大量细胞，并根据荧光信号将它们分成不同的亚群。
流式分选的关键在于抗体标记的选择，以及流式细胞仪的参数设置。
针对CD4+T细胞的不同亚群，需要选择相应的特异性抗体，以便准确地区分不同的细胞类型。
此外，还需要调整流式细胞仪的参数，包括激光波长、滤片、电压等，以确保最佳的检测效果。
通过流式分选，我们可以获得高纯度的CD4+T细胞亚群，这对于研究免疫细胞的生理和病理功能、开发新的治疗方法具有重要的意义。
例如，某些疾病如艾滋病、风湿性关节炎等与CD4+T细胞的功能异常有关，通过流式分选可以深入了解这些疾病的发病机制。
此外，流式分选技术还可以用于监测疾病的进展和治疗反应。
例如，在艾滋病治疗中，通过监测CD4+T细胞亚群的动态变化，可以评估治疗效果和调整治疗方案。
总之，CD4+T细胞亚群的流式分选技术是一种强大的工具，有助于我
们深入了解免疫系统的功能和疾病的发生发展机制。
随着技术的不断进步和应用领域的拓展，流式分选将在未来的医学研究中发挥更加重要的作用。
T淋巴细胞功能变化与类风湿性关节炎病情相关性的研究的开题报告
T淋巴细胞功能变化与类风湿性关节炎病情相关性的
研究的开题报告
一、选题背景及意义
类风湿性关节炎（Rheumatoid Arthritis，RA）是一种常见的自身免
疫性疾病，严重影响患者生活质量。
目前认为，T淋巴细胞参与了RA的发生和发展过程。
一些研究表明，患者的T淋巴细胞功能存在异常，但
这种异常与RA病情的严重程度和预后的关系还不清楚。
因此，本研究旨在探究患者T淋巴细胞的功能变化与RA病情的关系，为深入研究RA发病机制、早期诊断和治疗提供新思路和理论基础。
二、研究目的和问题
目的：探究RA患者T淋巴细胞的功能变化与病情严重程度的关系。
问题：
1. RA患者的T淋巴细胞功能如何改变？
2. RA患者T淋巴细胞功能的改变是否与病情严重程度相关？
3. 不同治疗方案是否会影响RA患者T淋巴细胞的功能？
三、研究方法
1. 研究对象
选取符合RA诊断标准的患者，并以同期健康人群为对照。
2. 研究方法
（1）采用流式细胞术分析RA患者和健康人T淋巴细胞表面标志物
和功能指标的变化。
（2）通过检测不同临床病情的患者的T淋巴细胞表面标志物及功能指标的变化，探究T淋巴细胞功能变化与RA病情的相关性。
（3）利用统计学方法对实验结果进行分析，探究不同治疗方案对T 淋巴细胞功能的影响。
四、预期结果
预期通过研究RA患者T淋巴细胞功能，揭示其特定的表面标志物和功能指标的变化，并建立其与病情严重程度的关联，为进一步了解RA发病机制、早期诊断和治疗提供新的思路和理论基础。
类风湿性关节炎患者外周血T淋巴细胞Ag-NORs及T亚群的变化
类风湿性关节炎患者外周血T淋巴细胞Ag-NORs及T亚群的变化周晖;江楚文;石蕴珍;崔阳;张建军;周茂华【期刊名称】《现代检验医学杂志》【年(卷),期】2005(020)006【摘要】目的探讨外周血T淋巴细胞Ag-NORs及T亚群在类风湿性关节炎中的应用价值.方法32例类风湿性关节炎患者,17例病人处于活动期,15例经治疗后处于缓解期.36例健康体检者作为对照.分别检测外周血T淋巴细胞AgNORs、T亚群(CD3+、CD4+、CD8+),计算CD4+/CD8+比值.结果与对照组相比,RA病人活动期T淋巴细胞Ag-NORs、CD4+细胞、CD4+/CD8+比值均升高(P＜0.05),而CD8+细胞降低(P＜0.05).RA缓解期T淋巴细胞Ag-NORs、CD4+细胞、CD4+/CD8+比值较活动期下降(P＜0.05),CD8+细胞较活动期升高(P＜0.05),与对照组相比均无显著性差异(P＞0.05).CD3+T细胞在RA活动期、缓解期中与对照组相比均无显著性差异(P＞0.05).T淋巴细胞Ag-NORs与CD3+、CD4+、CD8+细胞和CD4+4/CD8+比值之间相关系数均小于0.3(P＞0.05),无相关性.结论外周血T淋巴细胞Ag-NORs含量、T细胞亚群分析与RA的发生、发展、治疗有一定关系,结合二者,在观察RA患者的机体免疫状态、疗效方面有一定意义.【总页数】3页(P7-9)【作者】周晖;江楚文;石蕴珍;崔阳;张建军;周茂华【作者单位】广东省人民医院检验科,广东,广州,510080;广东省临床检验中心,广东,广州,510080;广东省人民医院风湿科,广东,广州,510080;广东省人民医院风湿科,广东,广州,510080;广东省人民医院检验科,广东,广州,510080;广东省人民医院检验科,广东,广州,510080【正文语种】中文【中图分类】R593.22;R446.63【相关文献】1.类风湿性关节炎患者外周血T淋巴细胞亚群的变化分析 [J], 张淑花;李琳;2.系统性红斑狼疮患者外周血T淋巴细胞亚群及Ag-NORs的变化 [J], 周晖;江楚文;石蕴珍;崔阳;张建军;周茂华3.类风湿性关节炎患者外周血T淋巴细胞亚群分析 [J], 吴福国;朱立平4.类风湿性关节炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化的临床意义 [J], 董丽娜5.类风湿性关节炎患者外周血T淋巴细胞亚群的观察 [J], 邓惟德;张育因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
类风湿关节炎患者Th细胞亚群的检测及其临床意义
类风湿关节炎患者Th细胞亚群的检测及其临床意义陈海燕;韩捷;华咏;王维东;沈培辰【期刊名称】《中国误诊学杂志》【年(卷),期】2008(8)6【摘要】目的:探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血和关节液中Th1、Th2型细胞在患者病情演变中的特点及临床意义。
方法:用流式细胞术检测RA患者及健康人外周血单个核细胞(PBMC)和关节液单个核细胞(SFMC)中IFN-γ、IL-4阳性细胞比例。
结果:RA患者外周血和关节液中以IFN-γ阳性细胞百分率和IFN-γ阳性细胞/IL-4阳性细胞比值明显增高;早期RA患者以IFN-γ阳性细胞百分率和IFN-γ阳性细胞/IL-4阳性细胞比值增高为主,非早期RA患者以IL-4阳性细胞百分率增高为甚。
IFN-γ阳性细胞百分率与血沉、晨僵、休息痛、STOKE指数呈正相关关系。
IL-4阳性细胞百分率与类风湿因子显著正相关。
结论:RA患者外周血及关节液中存在Th细胞亚群比例失调。
早期RA及关节液表现为Th1亚群细胞增多,而非早期RA以Th2亚群细胞增多。
Th1、Th1/Th2与RA临床症状及活动指标密切相关,药物干预Th1/Th2失衡是RA治疗新的途径。
【总页数】3页(P1272-1274)【关键词】关节炎,类风湿/免疫学;Th1细胞/免疫学;Th2细胞/免疫学;人类【作者】陈海燕;韩捷;华咏;王维东;沈培辰【作者单位】上海市同济大学附属东方医院风湿免疫科;上海市同济大学附属东方医院中心实验室【正文语种】中文【中图分类】R392.8【相关文献】1.类风湿关节炎患者CD4+T细胞亚群4-1BB和CD28分子的表达及临床意义 [J], 赵进良;王勤;张学光;沈静霞;刘奇;汤俊明2.检测乙肝患者Th1细胞因子、T淋巴细胞亚群、特异性细胞毒T淋巴细胞表达的临床意义 [J], 许琴;郑水华;郑建鹏3.类风湿关节炎患者血清白细胞介素6、白细胞介素17、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和肿瘤坏死因子α水平检测的临床意义 [J], 王丽4.细胞因子和淋巴细胞亚群在类风湿关节炎中检测的临床意义 [J], 王喜英;毛少华;张小青;李素娟5.弥漫大B细胞淋巴瘤患者外周血可溶性白细胞介素-2受体T细胞亚群及自然杀伤细胞检测的临床意义 [J], 许晓强;邢志华;张巧花因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
类风湿关节炎患者外周血滤泡辅助性T细胞的表达
类风湿关节炎患者外周血滤泡辅助性T细胞的表达祝骥;董浙清;许颖龄;卢德赵【摘要】目的观察新型CD4+T辅助细胞亚群-滤泡辅助性T细胞(Tfh)在类风湿关节炎(RA)患者中的表达,探究其在RA发病中的作用及机制.方法采用流式细胞术(FCM)检测RA患者和健康者外周血单个核细胞(PBMC)中Tfh细胞的比例,同时提取淋巴细胞RNA,用实时荧光定-量PCR检测Tfh的特异性转录因子Bcl-6,用ELISA检测效应分子IL-21.结果与对照组比较,RA患者Tfh细胞的比例明显上调,其特异性转录因子Bcl-6和效应分子IL-21的表达水平均显著上升.结论 Tfh细胞亚群的功能调节失常可能是RA的重要发病机制之一.【期刊名称】《浙江临床医学》【年(卷),期】2016(018)009【总页数】2页(P1694-1695)【关键词】类风湿关节炎;滤泡辅助性T细胞;流式细胞术【作者】祝骥;董浙清;许颖龄;卢德赵【作者单位】310005 浙江中医药大学附属第三医院检验科;310005 浙江中医药大学附属第三医院检验科;310053 浙江中医药大学生命科学学院;310053 浙江中医药大学生命科学学院【正文语种】中文类风湿关节炎（RA）是临床常见的一种以关节滑膜慢性炎症为特征的全身性自身免疫性疾病，其发病机制至今尚不完全清楚［1-2］。
研究表明免疫功能异常是重要的致病因素。
滤泡辅助性T细胞（Tfh）是最近发现的一种能够辅助B细胞产生抗体反应的CD4+T细胞亚群。
Tfh定位于生发中心，表面特异性标志为CD4+CXCR5+，其分化不仅由转录因子Bcl-6调控，且需要人IL-21、诱导性协同刺激分子、抗体亲和力等多种因素参与［3］。
Tfh中的任何相关因子表达异常，将引发多种自身免疫性疾病。
本实验拟通过对RA患者外周血Tfh细胞表型及相关转录因子和细胞因子的检测，探讨其与RA发病的关系。
1.1 一般资料选取2014年1月至2015年1月本院门诊及病房的初次诊断未接受治疗的类风湿性关节炎患者20例，其中男6例，女14例；年龄40～55岁，均符合2009年RA诊断标准。
流式细胞术检测体液T淋巴细胞亚群的临床应用
【 摘要 】 目 的 探 讨胸 水 、 水 、 泡灌 洗 液 Ｔ 淋 巴 细胞 亚 群 的检 测 方 法及 临床 价 值 。方 法 采 用 流式 细 胞 术 检 测 良 、 性 腹 肺 恶 疾病患者的 ５ Ｏ例胸 水 、 ６例腹 水 、 ７例肺 泡 灌 洗 液 （ Ａ ） Ｔ淋 巴 细 胞 亚 群 的水 平 并 分 组 进 行 比较 。结 果 １ 胸 水 ： 核 性 ４ ４ Ｂ Ｉ 中 Ｆ ） 结
病 组 肺 泡灌 洗 液 Ｔｓ 胞 占 Ｔ 淋 巴细 胞 的（ ４５ ±９ ５ ） 、 ｈ细 胞 占 Ｔ 淋 巴 细 胞 的 （９ ２ ± １． ８ ％ 、 ｈ Ｔ 细 ４ ． ４ ． ６ Ｔ ４ ．８ ２ ８ ） Ｔ ／ ｓ比值 为 １ １ ± ．３
０２， ． ９ 肺部 恶性 肿 瘤 组 肺 泡灌 洗 液 Ｔｓ 细胞 【 淋 巴 细胞 的（ ５ １ ±７ ７ ） 、 Ｔ ６ ． １ ． ７ Ｔｈ细 胞 占 Ｔ 淋 巴 细 胞 的（ ４ ５ ±６ ６ ） 、 ／ ｓ ３ ． ７ ． ５ Ｔｈ Ｔ
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５ ・ Ｏ
国际检验 医学杂志 ２１ １ 第 ３ 卷第 ｌ ００年 月 １ 期 ｌｔ ａ ｎ ＪＬｂ
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临 床 研 究
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流 式 细 胞 术 检 测 体 液 Ｔ 淋 巴细 胞 亚 群 的 临床 应 用
莫 扬 许 小 东 ，
（ 中科技 大学 同济 医学院 附属 襄樊 医院检验科 ， 北襄樊 ４ １ ２ ；． 生部北京 医院流式细胞仪 室 １ ０ ３ ） 华 湖 ４ ０ １２卫 ０ ７ ０
流式临床检测项目之T细胞亚群及其意义
流式临床检测项目之T细胞亚群及其意义T细胞是免疫系统中的重要组成部分，起着关键的作用。
T细胞可以分为多个亚群，包括CD4+T细胞、CD8+T细胞、调节性T细胞等。
这些不同的亚群在免疫应答中起着不同的作用，如参与细胞免疫、体液免疫、调节免疫等过程。
因此，通过流式细胞术对T细胞亚群进行检测，可以帮助医生了解免疫系统的功能状态，提供重要的临床参考价值。
CD4+T细胞是一种辅助性T细胞，主要通过与抗原递呈细胞结合，释放细胞因子来协助B细胞产生抗体或直接激活细胞免疫。
在临床检测中，CD4+T细胞数量的变化常常与免疫功能的改变相关。
例如，在感染艾滋病毒（HIV）的患者中，CD4+T细胞数量的下降是艾滋病的重要标志之一，也是监测疾病进展的常用指标。
此外，CD4+T细胞数量的变化还与其他免疫疾病如自身免疫性疾病、感染性疾病等相关联。
CD8+T细胞是一种细胞毒性T细胞，主要通过直接杀伤感染细胞来参与细胞免疫。
CD8+T细胞数量和功能的改变与许多病理过程有关。
临床研究表明，肿瘤患者往往存在CD8+T细胞功能下降的现象，这可能导致肿瘤的免疫逃逸和肿瘤发展。
因此，通过检测CD8+T细胞的数量和活性，可以为肿瘤免疫治疗的疗效评估提供重要依据。
调节性T细胞（Treg细胞）是一种具有免疫抑制功能的亚群，其主要通过抑制其他免疫细胞的活性来维持免疫耐受和免疫平衡。
Treg细胞的数量和功能异常与多种疾病的发生和发展密切相关。
例如，在自身免疫性疾病中，Treg细胞的缺失或功能异常会导致免疫系统对自身组织的攻击。
因此，通过检测 Treg细胞的数量和功能状态，可以辅助诊断和治疗一系列疾病，如自身免疫性疾病、移植排斥反应等。
流式细胞术是一种常用的检测技术，可以对T细胞亚群进行高效、准确的分析。
通过将T细胞标记上特定的抗体，然后通过流式细胞仪进行细胞的检测和分析，可以得到T细胞亚群的数量和功能状态等信息，为临床诊断和治疗提供重要依据。
总之，T细胞亚群的检测在临床中具有重要的意义。
如何运用流式细胞仪进行T淋巴细胞亚群分析
如何运用流式细胞仪进行T淋巴细胞亚群分析流式细胞技术(FCM)是70年代发展起来得一种快速对单细胞定量分析的新技术,它借鉴了荧光显微镜技术,同时利用与荧光染料,激光技术,单抗技术以及计算机技术的发展,将荧光显微镜的激发光源改为激光,使之具有更好的单色性与激发效率,因而大大提高了检测灵敏度,同时将固定的标本台改为流动的单细胞悬液,用计算机进行数据处理,因而大大提高了检测速度与统计精确性,而且从同一个细胞中可以同时测得多种参数,为生物医学与临床检验学发展提供了一个全新的视角和强有力的手段.目前,该技术已经广泛用于基础研究与临床应用,在免疫学,遗传学,血液学,肿瘤学等领域内发挥前重要的作用.本文着重介绍流式细胞仪基本原理及其在临床上的应用.基本原理：流式细胞仪（flow cytometer）是一种能够探测和计数以单细胞液体流形式穿过激光束的细胞检测装置，由于在检测中使用的细胞标志示踪物质为荧光标记物，因此，用来分离、鉴定细胞的流式细胞仪有被称为荧光激活细胞分类仪（fluorescence activated cell sorter,FACS）,是分离和鉴定细胞群及亚群的一种强而有力的应用工具。
其原理是在一组混合的细胞群中，加入特异的针对特定靶细胞表面分子的荧光标记单克隆抗体，这种特异单克隆抗体与其对应的抗原靶分子结合，结合后的荧光标记抗体停留在特定细胞的表面，称为荧光抗体标记的靶细胞；将含有被标记细胞的混合细胞群混悬在一定容积的上样缓冲液中，再通过FACS的进样吸管孔，仪器就会将细胞悬液制成以单细胞排列的微细流束。
当每一个细胞通过仪器的激光束照射时，带在细胞上的荧光就会被相应的激光束激活并发出对应的荧光，通过敏感的光电倍增管即可检测到从细胞表面发出的荧光。
根据测得的散射光（scattered light ）可得到细胞大小及颗粒状态的信息；而从荧光的发射强度(fluorescence emissions)则提供了结合在细胞上的抗体信息，进而也被反映了该细胞表面相应分子的表达情况。
类风湿关节炎患者淋巴细胞亚群分析
一
中图分类号 ： Ｒ ５ ９ ３ ． ２ ２
类风湿关节炎 （ Ｒ Ａ ） 是一种高度致 残的慢性 自 身免疫性疾病 ， 发病率高， ５— １ ０年病程 的致残率高 达６ ０ ％ 。主要 病 理 改 变 是 由于 关 节 滑膜 炎 性 细 胞 浸润 ， 滑膜增生 ， 滑膜新生血管大量形成 ， 继而形成
２ ０ ０ ５ ， １ ０ ， 郑直， 等． 小 儿铁 缺 乏症 研 究 ［ Ｊ ］ ． 中国小儿血液 ， ２ ０ ０ １ ， ６ （ ２ ） ： ９ ２— ９ ５ ．
收 稿 日期 ： ２ ０ １ ６— ０ ９—０ ６ （ 本文编辑 ： 张红）
胞 亚群 。采用 ｔ 检验 、 单 因素方差 分析 （ ｏ ｎ ｅ— ｗ ａ ｙ Ａ Ｎ Ｏ Ｖ Ａ） 、 ｘ 检验 、 Ｐ ｅ ａ ｒ ｓ ｏ ｎ相关性分析进行统计学 处理 。结果 ： 初发 组的淋 巴细胞 、 Ｃ Ｄ ３ Ｔ细胞 、 Ｃ Ｄ ５ ６ Ｃ Ｄ１ ６ Ｎ Ｋ细胞计数 均低 于对 照组 （ Ｐ＜０ ． ０ １ ） ， 而Ｃ Ｄ １ ９ Ｂ细 胞高 于对照组 （ Ｐ＜
Ｉ 临床 医药实践
２ ０ １ ６年 １ ２月第 ２ ５卷第 ｌ ２期
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９１１ ・
产生 不好 的影 响 ， 由此 也 提 示 我 们 应 该 注 意 对 婴 幼 儿铁 剂 的及 时补充 ， 尤其 是 ６～ ２ ４个月 龄婴 幼 儿 ， 应 该多 吃一 些含 铁 丰富 的食 物 ， 积极 预 防缺铁 性 贫血 。
ｐ ｒ ｅ ｄ ｉ ｓ ｐ ｏ ｓ ｅ ｄ ｔ ｏ Ｈ． ｐ ｙ ｌ ｏ ｒ ｉ ａ ｃ ｑ ｕ ｉ ｓ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗ ｉ ｔ ｈ ｓ ｕ ｂ ｓ ｅ ｑ ｕ ｅ ｎ ｔ ｉ —
［ ３ ］
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T 细胞无明显变化 ,CD8 T 细胞明显减少 ,CD4 Π CD8 比值增加 。CD4 2H4 T 细胞在 CD4 T 细胞中的比例减少 , 而 CD4
+ + + + + + + + +
4B4 T 细胞的比例增加 。 进一步研究发现 ,RA 患者活化的 CD25 T 淋巴细胞比率增加 。此外 , 血清学研究发现 ,RA 患者 IgG
类风湿性关节炎 ( Rheumatoid Arthritis , RA) 是一 种病因复杂的自身免疫性疾病 ,其发病机制至今还不 清楚。许多学者认为 T 淋巴细胞亚群比率异常在 RA [1 ] 发病机制中可能具有重要作用 。但这种异常在类 风湿性关节炎患者中尚无一定的规律。鉴于此 , 本 文利用流式细胞仪技术对 11 例 RA 患者外周血淋巴 细胞亚群进行了检测 ,并观察了其血清免疫球蛋白含 量的变化 ,以寻找其免疫功能紊乱的证据 ,揭示细胞 和体液免疫功能异常在 RA 发病机制中的意义。
・132 ・
中国免疫学杂志 1999 年第 15 卷
类风湿性关节炎患者 2 H4 T 淋巴细胞亚群的流式细胞仪分析
② ③ 吴福国 邱翠娥 韩晓琳 朱立平 蒋 明 ( 山东济宁医学院生化教研室 ,济宁 272113)
+
①
中国图书分类号 R593. 2 R392 摘 要 目的 : 了解类风湿性关节炎患者免疫功能的异常变化 , 探讨其发病机制 。方法 : 使用间接免疫荧光和直接免疫 荧光方法对 11 例 RA 患者和 12 例健康人的外周血 T 淋巴细胞进行了研究 。结果 :RA 患者与对照组比较 CD3 + T 细胞和 CD4 +
吴福国等 类风湿性关节炎患者 2H4 + T 淋巴细胞亚群的流式细胞仪分析 第3期
・133 ・
兴实验试剂开发公司提供 。 1. 3 外周血单个核细胞 ( PBMNC) 的制备 从肘静 脉取 10 ml 血 , 肝 素 抗 凝 , 与 等 量 磷 酸 盐 缓 冲 液 ( PBS) 混匀后 , 置含 10 ml 淋巴细胞分离液 ( 上海试 剂二厂产品) 的离心管中 , 离心后取界面层细胞 , 洗 涤 3 次 ,计数细胞 ,调整细胞浓度为 1 × 10 ml 。 1. 4 细胞表面分化抗原间接免疫荧光染色与直接 免疫荧光染色 取1× 10 PBMNC , 分别与各种稀释 μ 的单抗 100 l 混匀 , 置冰浴 30 min , 冷洗涤液洗 3 次 。若为直接免疫荧光染色试剂则直接加 0. 5 ml PBS 上机 。 若为非直接免疫荧光染色试剂则需要加 1 :30 稀释的 FITC 标记兔抗鼠 IgG 100 μ l , 冰浴 30
centrations in RA patients were significantly higher than that in healthy controls. However , there were no significantly differences between RA patients and healthy controls in the serum IgM and IgA. Conclusion :The combination of the increment in helper T cells , the reduction in sup2 pressor T cells , and the increment in activated T cells may lead to excessive production of autoantibodies in RA patients. Key words Rheumatoid arthritis T lymphocyte subsets Immunoglobulin Flow cytometry
n
Normal RA
P
12 11
CD3 62. 79 ± 6. 35 60. 69 ± 7. 22 > 0. 05
CD4 46. 23 ± 6. 12 48. 16 ± 7. 25 > 0. 05
CD8 25. 81 ± 6. 41 20. 50 ± 7. 11 < 0. 05
CD4Π CD8 1. 79 ± 0. 20 2. 34 ± 0. 23 < 0. 01
服用对免疫功能有影响的药物如糖皮质激素等 。 1. 2 主要试剂 CD3 ,CD4 和 CD8 单克隆抗体试剂 由中国医科院基础所单抗室提供 。抗 Tac ,MsIgG12
RD1 ,MsIgG 2FITC ,T42FITCΠ 2H42RD1 单克隆抗体为美
国 Coulter 公司产品 。FITC 标记兔抗鼠 IgG 为卫生 部北京生物制品研究所产品 。免疫球蛋白 IgG、 IgM 和 IgA 单向扩散定量检测板和标准曲线是由北京科
Analysis of 2 H4 T lymphocyte subsets in the peripheral blood of patients with rheu2 matoid arthritis
+
WU Fu2Guo , QIU Cui2E , HAN Xiao2 Lin et al . Department of Biochemistry , Jining Medical College , Shandong 272113
1 材料与方法
1. 1 研究对象 12 例正常对照为本室自愿献血
者 ,男 5 例 ,女 7 例 ,年龄 19～50 岁 , 平均 34 岁 。11 例类风湿性关节炎患者为北京协和医院内科临床免 疫及风湿病学组门诊病人 , 均符合美国风湿病学会
1982 年 RA 的分类标准 , 其中男 3 例 , 女 8 例 , 年龄 24～72 岁 ,平均 46 岁 。均处于活动期 。检测前均未
+ + +
析 上述结果提示 , RA 患者 CD4 T 细胞与对照组 + 比较无明显变化 ,为进一步观察组成 CD4 T 细胞的 两个亚群之间是否有区别 ,用抗 2H4 单抗又分别对 10 例正常人和 10 例 RA 患者外周血淋巴细胞进行 + + 了测定 。结果表明 , RA 患者 CD4 2H4 T 细胞和
① 中国医学科学院基金资助 ② 中国医学科学院基础医学研究所单克隆抗体研究室 ,北京 100005 ③ 北京协和医院内科 ,北京 100730 作者简介 : 吴福国 ,男 ,34 岁 , 副教授 , 硕士研究生 , 主要从事风湿病 的分子发病机制和诊断研究 ; 朱立平 ,男 ,60 岁 , 研究员 , 博士生导师 , 主要从事细胞和 分子免疫学研究 , 特别是淋巴细胞分化抗原的分子生物 学研究
细胞 ,用仪器内装的 MDADS Ⅱ 计算机分析 。
表 1 RA 患者与正常人 T 淋巴细胞亚群检测结果比较( %)
Tab. 1 Cell surface characteristics of T lymphocytes in blood from patients with RA and healthy controls( % )
+ + + + trols. (2) The percentage of CD4 2H4 cells among CD4 cells in PB from patients with RA was markedly decreased ( P < 0. 01) ,but the + + percentage of CD4 4B4 cells was significantly increased ( P < 0. 01) compared with that in PB from healthy controls. (3) Serum IgG con2 + + + + +
n
+
CD4 + 2H4 + T ± 8. 62 22. 87 ± 9. 21 < 0. 01
+
CD4 + 4B4 + T cells CD4 T cells ( %) 57. 59 ± 8. 73 77. 13 ± 8. 87 < 0. 01