邻二氮菲分光光度计法测铁含量文献综述和实验设计
邻二氮菲分光度法测铁的实验报告
邻二氮菲分光度法测铁的实验报告邻二氮菲分光度法测铁的实验报告
一、实验目的
1.学习和掌握邻二氮菲分光度法测定水中铁含量的原理和方法。
2.观察和了解分光度计的使用和操作方法。
3.培养实验操作技能和观察能力，提高分析问题和解决问题的能力。
二、实验原理
邻二氮菲分光度法是一种常用的测定水中铁含量的方法。邻二氮菲是一种有机化合物，能够与Fe2+离子形成稳定的络合物。在波长510 nm处，该络合物具有较高的吸光度，通过测定吸光度可以计算出铁的含量。
该方法的基本原理是：将待测水样加入到含有邻二氮菲和盐酸羟基乙酸内酯的缓冲溶液中，Fe2+离子与邻二氮菲结合形成络合物，该络合物的吸光度与Fe2+离子的浓度成正比。通过比色法测量吸光度，可以得出Fe2+离子的浓度，从而计算出水中铁的含量。
三、实验步骤
1.准备试剂。0.1 mol/L的盐酸羟基乙酸内酯溶液；0.1 mol/L的邻二氮菲溶
液；0.1 mol/L的NaAc溶液；0.1 mol/L的HCl溶液；0.05 mol/L的
FeSO4·7H2O标准溶液；实验用水。
2.配制标准系列。分别取0.00、0.25、0.50、1.00、2.00、
3.00 mL的
FeSO4·7H2O标准溶液，加入25 mL比色管中，再加入10 mL NaAc溶液、5 mL邻二氮菲溶液、10 mL盐酸羟基乙酸内酯溶液，用HCl溶液调节pH至
4.7，最后用水稀释至刻度，摇匀后放置15 min。
3.绘制标准曲线。将标准系列分别倒入一组比色皿中，用分光度计在波长510
nm处测量各标准系列的吸光度，绘制标准曲线。
实验3邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
实验三邻二氮菲分光光度法测定铁的含量一、实验目的 1. 2. 3.学会722S型分光光度计的正确使用了解其工作原理。4.学会数据处理的基本方法。5. 二、实验原理根据朗伯—比耳定律Aεbc当入射光波长λ及光程b一定时在一定浓度范围内有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。只要绘出以吸光度A为纵坐标浓度c为横坐标的标准曲线测出试液的吸光度就可以由标准曲线查得对应的浓度值即未知样的含用分光光度法测定试样中的微量铁可选用的显色剂有邻二氮菲又称邻菲罗啉及其衍生物、磺基水杨酸、硫氰酸盐等。而目前一般采用邻二氮菲法该法具有高灵敏度、高选择在pH29的溶液中Fe2与邻二氮菲phen生成稳定的桔红色配合物Fephen32 此配合物的lgK稳21.3摩尔吸光系数ε510 1.1×104 L·mol-1·cm-1而Fe3能与邻二氮菲生成3∶1配合物呈淡蓝色lgK稳14.1。所以在加入显色剂之前应用盐酸羟胺NH2OH·HCl 将Fe3还原为Fe2 2Fe3 2NH2OH·HCl → 2Fe2 N2 H2O 4H 2Cl- 测定时控制溶液的酸度为pH≈5较为适宜。三、仪器与试剂722S型或721型分光光度计、容量瓶100mL50mL 、铁标准溶液含铁0.1mg/ml。准确称取0.8634g的NH4FeSO42·12H2O 置于烧杯中加入20ml1:1HCl和少量水溶解后定量地转移至升容量瓶中以水稀释之刻度摇匀。、邻二氮菲0.1510-3mol/L新配制的水溶液。、盐酸羟胺10水溶液临用时配制、醋酸钠溶液1mol/L 2NN3Fe2NNNNNNFe 四、实验步骤 1. 1 10μg·mL-1铁标准溶液配制准确称取0.8634g硫酸铁铵NH4FeSO42·12H2O于100mL烧杯中加60mL 3mol·L-1 H2SO4溶液溶解后定容至1L摇匀得100μg·mL-1储备液可由实验室提供。用时吸取10.00mL稀释至100mL得10μg·mL-1工作液。2 系列标准溶液配制取6个50mL容量瓶分别加入铁标准溶液0.002.004.006.008.0010.00mL然后加入1mL盐酸羟胺2.00mL邻二氮菲5mLNaAc溶液为什么每加入一种试剂都应初步混匀。用去离子水定容至刻度充分摇匀放置10min。 2.吸收曲线的绘制选用1cm比色皿以试剂空白为参比溶液为什么取4号容量瓶试液选择440560nm波长每隔10nm测一次吸光度其中500520nm之间每隔5nm测定一次吸光度。以所得吸光度A为纵坐标以相应波长λ为横坐标在坐标纸上绘制A与λ的吸收曲线。从吸收曲线上选择测定Fe的适宜波长一般选用最大吸收波长λmax为测定波长。3.标准曲线工作曲线的绘制用1cm比色皿以试剂空白为参比溶液在选定波长下测定各溶液的吸光度。在坐标纸上以铁含量为横坐标吸光度A为纵坐标绘制标准曲线。4.试样中铁含量的测定从实验教师处领取含铁未知液一份放入50mL容量瓶中按以上方法显色并测其吸依据试液的A值从标准曲线上即可查得其浓度最后计算出原试液中含铁量以μg·mL-1表示。并选择相应的回归分析软件将所得的各次测定结果输入计算机得出相应的分析结果。五.数据处理 1.数据分光光度计型号比色皿厚光源电压1吸收曲线的绘制波长/nm 430 450 470 490 500 510 520 530 550 570 590 吸光度A 2标准曲线的绘制与铁含量的测定容量瓶号标准溶液未知液 1 2 3 4 5 6 7 吸取毫升数0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 5.0 含铁总量/μg·25mL-1 吸光度A 2.绘制以下曲线1吸收曲线2标准曲线3.计算
邻二氮杂菲分光光度法测定铁-实验报告
分析化学实验报告
实验题目：
邻二氮杂菲分光光度法测定铁
学院：
专业：食品科学与工程
班级：
姓名：
学号：
同组者姓名：
一．实验目的
1.了解分光光度法测定物质含量的一般条件及其选定方法
2.掌握邻二氮杂菲分光光度法测定铁的方法
3.了解722型分光光度计的构造和使用方法
二．实验原理
1.光度法测定的条件：分光光度法测定物质含量时应注意的条件主要是 显色反应的条件和测量吸光度的条件。显色反应的条件有显色剂用量、介质的酸
度、显色时溶液温度、显色时间及干扰物质的消除方法等;测量吸光度的条件包括应选择的入射光波长，吸光度范围和参比溶液等。
2.在PH=2-9的条件下，Fe 2+与邻二氮杂菲（o-ph ）生成极稳定的橘红色配合物，反应式如下：
此配合物的lgK 稳 =21.3 摩尔吸收系数ε510 =1.1×104
在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe 2+ 还原成Fe 3+.其反应式如下： 2Fe 3+ +2NH 2 OH · HC1 ＝2Fe 2+ +N 2 ↑+2H 2 O+4H + +2C1-
测定时，控制溶液酸度在PH=5左右较为适宜。酸度过高时，反应进行较慢;酸度太低，则Fe 2+水解，影响显色。
三、实验仪器
分光光度计、容量瓶、移液管、洗瓶
N
N
四、实验步骤
1.条件实验
（1）吸收曲线的测绘准确吸取20 μg·mL-1铁标准溶液5 mL于50 mL容量瓶中，加入5%盐酸羟胺溶液1 mL，摇匀，加入1 mol·L-1NaOAc溶液5 mL和0.1%邻二氮杂菲溶液3 mL。以水稀释至刻度，摇匀。放置10 min，在722型分光光度计上，用1 cm比色皿，以水为参比溶液，波长从570 nm到430 nm为止，每隔10 nm测定一次吸光度。如图1所示，其最大吸收波长为510 nm，故该实验选择测定波长为510 nm。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁
一．实验目的和要求
1、掌握紫外可见分光光度计的基本操作；
2、掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法；
3、掌握吸收曲线绘制及最大吸收波长选择；
4、掌握标准曲线绘制及应用。
二．实验原理
邻二氮菲（1,10—邻二氮杂菲）是一种有机配位剂，可与Fe2+形成红色配位离子
Fe2++3
N
N
N
N
3
Fe
2+
在pH=3~9范围内，该反应能够迅速完成，生成的红色配位离子在510nm波长附近有一吸收峰，摩尔吸收系数为×104，反应十分灵敏，Fe2+ 浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。
实验中，采用pH=的缓冲溶液保持标准系列溶液及样品溶液的酸度；采用盐酸羟胺还原标准储备液及样品溶液中的Fe3+并防止测定过程中Fe2+被空气氧化。
三．实验仪器与试剂
1. 752型分光光度计
2. 标准铁储备溶液（×10-3mol/L）
3. 邻二氮菲溶液（%，新鲜配制）
4. 盐酸羟胺溶液（10%，新鲜配制）
5. 醋酸盐缓冲溶液
6. 50ml容量瓶7个
7. 5ml移液管4只
8．1cm玻璃比色皿2个
9. 铁样品溶液
四．实验步骤：
1、标准系列溶液及样品溶液配制
按照下表配制铁标准系列溶液及样品溶液
2、吸收曲线绘制
用1cm比色皿，以1号溶液作为参比溶液，测定4号溶液在各个波长处的吸光度，在坐标纸上以测定的吸光度为纵坐标，波长为横坐标，绘制吸收曲线，并从吸光曲线上找出最大吸收波长。
绘图如下：
3、标准曲线制作
在选定最大吸收波长处，用1cm比色皿，以1号溶液作为参比溶液，分别测定2至7号溶液的吸光度，在坐标纸上以吸光度平均值为纵坐标，系列标准溶
邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
一. 实验目的
1．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理及方法。
2．学习标准曲线的制作方法。
3．了解721型分光光度计的构造及使用方法。
二．实验原理
在测定微量铁时，通常以盐酸羟胺还原Fe3+为Fe2+，在PH为2—9的范围内，Fe2+与邻二氮菲反应生成稳定的橙红色配合物，其lgK fθ=21.3。该配合物的最大吸收波长为510nm。本方法不仅灵敏度高（摩尔吸光系数ε=1.1×104），而且选择性好。相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO2-3，20倍的Cr3+、Mn2+、V(V)、PO3-4，5倍的Co2+、Cu2+等均不干扰测定。
Fe2+与邻二氮菲在PH=2—9范围内均能显色，但酸度高时，反应较慢，酸度太低时Fe2+易水解，所以一般在PH=5—6的微酸性溶液中显色较为适宜。
邻二氮菲与Fe3+能生成3:1的淡蓝色配合物（lgK fθ=14.1），因此在显色前应先用还原剂盐酸羟胺将Fe3+全部还原为Fe2+
（2Fe3++2NH2OH·HCl=2Fe2++N2↑+2H2O+4H++2Cl-）。
三．仪器与试剂
1. 仪器：
(1) 721型分光光度计。
(2) 50mL容量瓶7只/组。
(3) 10mL、5mL、2mL、1mL移液管。
2. 试剂：
(1)100µg·mL-1的铁标准溶液：准确称取0.8634gNH4Fe(SO4)2·12H2O于烧杯中，加入20mL1:1的HCl和少量水溶解后，定量转移至1升容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。所得溶液含Fe3+100µg·mL-1。
分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量报告
分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量报告
实验目的
邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量
熟悉722N型分光光度计的原理和操作
实验仪器和试剂
722N分光光度计，7个50ml的容量瓶，5只移液管，洗瓶
0.0100g/L铁标准溶液，含铁待测溶液，0.15%邻二氮菲（邻菲罗林）溶液，10%盐酸羟胺溶液，HAc-NaAc缓冲溶液，0.1mol/L NaOH溶液，1:1HCl溶液，蒸馏水
实验原理
邻二氮菲吸光光度法是测定铁含量的常用方法。在PH为2~9的溶液中，Fe2+的显色剂邻二氮菲形成稳定的橘红色络合物，该络合物在508nm波长处有最大吸收。为了消除Fe2+的副反应及其他因素的影响，在微酸溶液进行，且用盐酸羟胺将Fe3+还原为Fe2+。吸光光度法定量分析的依据是朗伯比尔定律A=Ɛbc，当液层厚度b一定时A=Kc，吸光光度法定量分析的方法有直接比较法和标准曲线法，这个实验用标准曲线法。
在标准曲线上查出试液中铁的含量，按下式求出原始待测溶液中铁的含量（ρ表示溶液中铁的含量，mg/L）
ρFe,原始待测溶液=ρFe,标准曲线查得×50/10
实验步骤
1、取出容量瓶和移液管，用蒸馏水清洗容量瓶并用相应的溶液润洗移液管
2、在6个容量瓶中用刻度移液管分别加入0.00,、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL0.0100g/L 铁标准溶液，5mLHAc-NaAc缓冲溶液，1mL10%盐酸羟胺溶液及2mL0.15%邻二氮菲溶液，用水定容。将其分别对应编号为1、2、
3、
4、
5、6号，在上述6个容量瓶中对应的溶液中铁的含量分别为0.00、0.40、0.080、1.20、1.60、2.00mg/L。其中铁含量为0.00mg/L的溶液为空白溶液，其余溶液构成标准系列溶液。并用移液管吸取10.00mL原始待测溶液按与标准系列溶液的配制方法配制溶液，并编号为7。将溶液放置15min左右。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
上海应用技术大学
实验报告
课程名称分析化学实验B 实验项目邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
姓名学号班级（课程序号） 1951926 组别
同组者实验日期指导教师成绩 100
邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
一、实验目的
1．学习722S型分光光度计的使用方法
2．学习测绘吸收曲线的方法
3．掌握利用标准曲线进行微量成分测定的基本方法和有关计算
二、实验原理
微量铁的测定有邻二氮菲法、硫代甘醇酸法、磺基水杨酸法、硫氰酸盐法等。由于邻二氮菲法的选择性高、重现性好，因此在我国的国家标准中，许多冶金产品和化工产品中铁含量的测定都采用邻二氮菲法。邻二氮菲又称邻菲罗啉（简写Phen），在pH值为2—9的溶液中，Fe2+离子与邻二氮菲发生下列显色反应：
Fe2+ + 3Phen = [Fe（Phen）3]2+
生成的橙红色配合物非常稳定，lgK稳=21.3（20℃），其最大吸收波长为510nm，摩尔吸光系数ε510=1.1×104 L••cm-1•mol-1。
显色反应的适宜pH值范围很宽，且其色泽与pH值无关，但为了避免Fe2+离子水解和其它离子的影响，通常在pH值为5的HAc-NaAc缓冲介质中测定。
邻二氮菲与Fe3+离子也能生成淡蓝色配合物，但其稳定性较低，因此在使用邻二氮菲法测铁时，显色前应用还原剂将Fe3+离子全部还原为Fe2+离子。本实验采用盐酸羟胺为还原剂：
4Fe3+ +2NH2OH = 4Fe2+ + 4H++ N2O+ H2O
邻二氮菲与Fe2+离子反应的选择性很高，相当于含铁量5倍的Co2+、Cu2+离子，20倍量的Cr3+、Mn2+、V（Ⅴ）、PO43-离子，40倍量的Al3+、Ca2+、Mg2+、Sn2+、Zn2+、SiO32-离子都不干扰测定。
07实验7 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
作异常，应及时报告指导教师，不得自行处理。
4.注意事项 (1) 测定过程中，不要将参比溶液拿出试样室，应将其随时推入 光路以检查吸
光度零点是否变化。如不为“00.0”，则不要先调节旋钮2，而应将选 择开关3置于“T”档，用100%旋钮调至“100.0”，再将选择开关置 于“A”，这时如不为“00.0”，才可调节旋钮2。
(2) 为了避免光电管长时间受光照射引起的疲劳现象，应尽可能 减少光电管受
用分光光度法测定试样中的微量铁，可选用的显色剂有邻二氮菲 (又称邻菲罗啉)及其衍生物、磺基水杨酸、硫氰酸盐等。而目前一般采 用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消 除等优点。
在pH=2～9的溶液中，Fe2+与邻二氮菲(phen)生成稳定的桔红色配 合物Fe(phen)32+，
此配合物的lgK稳=21.3，摩尔吸光系数ε510 = 1.1×104 L·mol1·cm-1，而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK稳 =14.1。所以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺(NH2OH·HCl)将Fe3+还原 为Fe2+，其反应式如下：
2Fe3+ + 2NH2OH·HCl → 2Fe2+ + N2 + H2O + 4H+ + 2Cl测定时控制溶液的酸度为pH≈5较为适宜。
邻二氮菲分光光度法测铁实验报告
邻二氮菲分光光度法测铁实验报告
二、实验原理
邻二氮菲(Float O-phenanthroline)被广泛用于铁的测定。它是一种紫色有机试剂，呈酮式结构。在水中存在着一个稳定的钢蓝色络合物。当其他二价金属离子存在时，邻二氮菲也能与这些金属形成络合物。有机试剂比无机试剂具有更好的选择性和灵敏度，加之其理化性质的优越性能使得邻二氮菲分析法成为测定铁和其他金属离子常用的方法之一。
1、邻二氮菲与Fe2+ 的络合反应
Fe2+ + 3C12H8N2 → Fe(C12H8N2)32+（β络合物）
铁与邻二氮菲络合反应的平衡常数为10H3（Verma 和 Sharma， 2007）。铁浓度的提高会导致反应向右移，邻二氮菲反应减少。
当采用吸光光度法测定时，铁的浓度与生成的络合物的摩尔吸光度之间呈线性关系。
2、标准曲线的绘制
标准曲线的绘制是邻二氮菲分光光度法测定铁的基础，其目的是测量标准溶液和样品中的铁等元素的浓度。针对铁离子的反应是可逆的，假定完全反应的基础上定量。令Fe的质量为m（mg），溶液中邻二氮菲的体积为V(ml)，Fe(NO3)3的浓度为C(mg/L)。
则根据化学计量学的知识可知：1mmol的Fe2+可以生成1mmol的Fe(C12H8N2)32+
即：m mmol Fe2+ = m mmol Fe(C12H8N2)32+ = M2 V （其中M2为Fe2+的摩尔浓度）
为绘制标准曲线，应根据已知的Fe(NO3)3中的Fe浓度和对应的水溶液吸光值，计算生成的络合物的摩尔吸光度。实验中，制备含5-50μg/mL的标准解，并用邻二氮菲分光光度法分析铁标准解测定光吸光度，并绘制标准曲线。
邻二氮菲分光光度计法测铁含量文献综述和实验设计
可见分光光度法测定铁的条件实验
可见分光光度法测定铁的条件实验文献综述和实验设计
院系：检验学院
班级：12 级生物技术班
指导老师：**
小组成员：沈艳林、田赋、邓纯纯、
郑祥、谭诗航、苏曼、
邱丽莎、殷良俊、易柳
摘要 (1)
引言 (2)
正文 (3)
1 分光光度技术 (3)
2 分光光度法测定元素铁含量的研究概况 (3)
3 分光光度法测定铁的6种方法 (3)
3.1 邻二氮菲分光光度法 (3)
3.1.1 方法原理 (3)
3.1.2 化学反应式 (3)
3.2 BPT-OP分光光度法 (3)
3.3 硫氰酸盐分光光度法测铁含量 (3)
3.3.1 方法提要 (3)
3.3.2 主要反应 (3)
3.4 磺基水杨酸分光光度法测铁含量 (3)
3.4.1 方法原理 (3)
3.5 固相萃取分光光度法测铁含量 (3)
3.5.1 方法原理 (4)
3.6 用火焰原子吸收分光光度法测铁含量 (4)
3.6.1 方法原理 (4)
4 邻二氮菲分光光度法测铁含量 (4)
4.1 邻二氮菲法简介 (4)
4.2 邻二氮菲法的优点 (4)
5 邻二氮菲分光光度法测铁含量最适条件的选择 (4)
5.1 如何确定适宜的条件 (4)
5.2 最适波长的选择 (4)
5.3 显色剂用量的选择 (4)
5.4 显色时间的选择 (4)
5.5 溶液pH的选择 (4)
5.6 显色温度的选择 (5)
6 对邻二氮菲分光光度法测铁含量实验改进 (5)
参考文献 (6)
实验设计部分 (7)
本文主要研究用邻二氮菲分光光度法测定新血宝胶囊中总铁含量的分析方法。采用了邻二氮菲作显色剂、盐酸羟胺作还原剂，以工作曲线法测定总铁含量，对邻二氮菲分光光度法测定铁主要测量条件如测量波长、显色剂用量及显色时间等进行研究确定，提高分析检测的灵敏度，且讨论了测定的最佳条件，找出处理方法的良好条件和良好效果。本法灵敏、可靠，便于推广。
实验五邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
实验五 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
一、实验目的
1．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法; 2．了解分光光度计的构造、性能及使用方法。 二、实验原理
邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的较好试剂，在pH=2～9的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。配合物的稳K lg ＝21.3，摩尔吸光系数510 ＝11000 L·mol -1·cm -1。
在显色前，用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子。 4Fe 3+＋2NH 2OH →4Fe 2+ ＋ N 2O ＋ 4H ＋＋ H 2O
测定时，控制溶液pH ＝3较为适宜，酸度高时，反应进行较慢，酸度太低，则二价铁离子水解，影响显色。
用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钴、镍、铜、铅与试剂形成有色配合物；钨、铂、镉、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的pH 范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用。
三、仪器与试剂 1．醋酸钠：l mol·L -1； 2．氢氧化钠：0.4 mol·L -1； 3．盐 酸：6 mol·L -1；、
4．盐酸羟胺：100g·L -1（临时配制）；
5．邻二氮菲（1.5g·L -1）：0.l5g 邻二氮菲溶解在100mL1:1乙醇溶液中。 6．铁标准溶液
(1)100μg ·mL -1铁标准溶液：准确称取0.8634gNH 4Fe （SO 4）2·12H 20于200ml 烧杯中，用6 mol·L -1盐酸20 mL 溶解，移至1 L 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
邻二氮菲分光光度法测定微量铁
一、实验目的
1.学习确定实验条件的方法和测定微量铁的分光光度法；
2.掌握TU—1901型双光束紫外可见分光光度计的使用方法。
二、实验原理
1.在可见光分光光度法测定无机物时，通过显色反应生成吸光系数较大的有色物质进行测。
2.确定适宜实验条件：改变其中一个影响因素，暂时固定其它影响因素，测吸光度，通过吸光度—该因素的曲线确定最适宜的显色条件。其他因素的确定也照此方法。
3.本实验以邻二氮菲（phen）为显色剂，是光度法测定微量铁的优良试剂，pH在2~9时（pH=5~6），
Fe2+ + 3phen [Fe(phen)3]2+(稳定的红色配合物)
lgK稳=21.3，λmax=510nm,ε510=1.1×104L·cm-1·mol-1
用盐酸羟胺将Fe（Ⅲ）还原为Fe（Ⅱ），以邻二氮菲做显色剂可测定试样中铁含量。本方法选择性高，杂离子难以干扰。
三、仪器与试剂
TU—1901型双光束紫外可见分光光度计，1cm比色皿，10mL 吸量管，50mL 比色管。
1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液，100μg·mL-1铁标准溶液，0.15%phen水溶液，10%盐酸羟胺溶液，1 mol·L-1醋酸钠溶液，工业盐酸（试样）。
四、实验操作
1.吸收曲线的绘制和测量波长的选择
用吸量管吸取2.00mL1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液注入50mL比色管中，再加入 1.00mL10%盐酸羟胺溶液，摇匀后，加入2.00mL0.15%phen水溶液和5.00mL1 mol·L-1醋酸钠溶液，稀释至刻度线，摇匀。
邻二氮杂菲分光光度法测定铁-实验报告
分析化学实验报告
实验题目：
邻二氮杂菲分光光度法测定铁
学院：
专业：食品科学与工程
班级：
姓名：
学号：
同组者姓名：
一．实验目的
1.了解分光光度法测定物质含量的一般条件及其选定方法
2.掌握邻二氮杂菲分光光度法测定铁的方法
3.了解722型分光光度计的构造和使用方法
二．实验原理
1.光度法测定的条件：分光光度法测定物质含量时应注意的条件主要是 显色反应的条件和测量吸光度的条件。显色反应的条件有显色剂用量、介质的酸
度、显色时溶液温度、显色时间及干扰物质的消除方法等;测量吸光度的条件包括应选择的入射光波长，吸光度范围和参比溶液等。
2.在PH=2-9的条件下，Fe 2+与邻二氮杂菲（o-ph ）生成极稳定的橘红色配合物，反应式如下：
此配合物的lgK 稳 =21.3 摩尔吸收系数ε510 =1.1×104
在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe 2+ 还原成Fe 3+.其反应式如下： 2Fe 3+ +2NH 2 OH · HC1 ＝2Fe 2+ +N 2 ↑+2H 2 O+4H + +2C1-
测定时，控制溶液酸度在PH=5左右较为适宜。酸度过高时，反应进行较慢;酸度太低，则Fe 2+水解，影响显色。
三、实验仪器
分光光度计、容量瓶、移液管、洗瓶
N
N
四、实验步骤
1.条件实验
（1）吸收曲线的测绘准确吸取20 μg·mL-1铁标准溶液5 mL于50 mL容量瓶中，加入5%盐酸羟胺溶液1 mL，摇匀，加入1 mol·L-1NaOAc溶液5 mL和0.1%邻二氮杂菲溶液3 mL。以水稀释至刻度，摇匀。放置10 min，在722型分光光度计上，用1 cm比色皿，以水为参比溶液，波长从570 nm到430 nm为止，每隔10 nm测定一次吸光度。如图1所示，其最大吸收波长为510 nm，故该实验选择测定波长为510 nm。
综合实验报告 邻二氮菲分光光度法测定微量铁
邻二氮菲分光光度法测定微量铁（一）
一、实验目的
⒈学习确定实验条件的方法，掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理；
⒉掌握721型分光光度计的使用方法，并了解此仪器的主要构造。
二、实验原理
⒈确定适宜的条件的原因：在可见光分光光度法的测定中，通常是将被测物与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。因此，显色条件的完全程度和吸光度的测量条件都会影响到测量结果的准确性。为了使测定有较高的灵敏度和准确性，必须选择适宜的显色反应条件和仪器测量条件。通常所研究的显色反应条件有显色温度和时间，显色剂用量，显色液酸度，干扰物质的影响因素及消除等，但主要是测量波长和参比溶液的选择。对显色剂用量和测量波长的选择是该实验的内容。
⒉如何确定适宜的条件：条件试验的一般步骤为改变其中一个因素，暂时固定其他因素，显色后测量相应溶液吸光度，通过吸光度与变化因素的曲线来确定适宜的条件。
⒊本试验测定工业盐酸中铁含量的原理：根据朗伯－比耳定律：A=εbc。当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的曲线，测出试液的吸光度，就可以由曲线查得对应的浓度值，即工业盐酸中铁的含量。
⒋邻二氮菲法的优点：用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。
⒌邻二氮菲法简介：邻二氮菲为显色剂，选择测定微量铁的适宜条件和测量条件，并用于工业盐酸中铁的测定。
邻二氮菲分光光度测定铁的含量
邻二氮菲分光光度法测定铁的含量实验报告
班级姓名学号成绩：
一、实验预习
（一）实验目的
1、熟悉可见分光光度计的工作原理及操作规程；
2、能够运用邻二氮菲分光光度法测定铁的含量。
（二）实验原理
从光源钨灯发出的光，经单色器分出一组平行单色光。当单色光通过待测溶液时，被溶液中具有一定特征吸收的化合物吸收，吸收大小与溶液中待测物浓度的关系符合朗伯—比尔定律：
A= logI0/I=KCL
式中：A—吸光度
I0—入射光强度
I—透射光强度
K—吸收系数
L—光路长度
C—溶液中待测物浓度
邻二氮菲和Fe2+在pH=3～9的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合，为其吸收曲线如图a所示。显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe3+全部还原为Fe2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。有关反应式如下：
2Fe3+ + 2NH2OH·HCl = 2Fe2+ + N2 ↑+ 2H2O + 4H+ + 2Cl-
图a 最大吸收曲线
用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度（A），以标准溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。在同样实验条件下，测定待测溶液的吸光度，根据测得吸光度值从标准曲线上查出相应的浓度值，即可计算试样中被测物质的质量浓度。
（三）实验用仪器和试剂
仪器：可见分光光度计、电子天平、5mL量筒、50mL 量筒、50mL容量瓶、100ml烧杯、250mL烧杯
试剂：铁标准溶液、10%盐酸羟胺溶液、0.15%邻二氮菲、CH3COONa·3H2O （四）实验步骤
邻二氮菲分光光度法测定微量铁含量实验报告
邻二氮菲分光光度法测定微量铁含量实验报告邻二氮菲分光光度法测定微量铁含量实验报告
一、实验目的
本实验的目的是使用邻二氮菲分光光度法来测定微量金属铁的
含量。
二、实验原理
邻二氮菲分光光度法是利用铁离子与邻二氮菲溶液反应生成一
种具有特定波长的黄色螯合物，该波长可以有效反映铁离子浓度的变化。铁与邻二氮菲反应生成黄色螯合物的反应式如下：
Fe2+ + 2 para-dimethylaminobenzaldehyde（pDMnB）→ Fe （pDMnB）2+
该反应的波长为555 nm，可以在此处测得离子浓度。由于邻二氮菲螯合反应是多步反应，在受铁离子影响的情况下，将系中存在的其它配体离子换去，导致螯合反应降解，因而使电导率降低。因此，可以使用该方法来测定微量金属铁含量。
三、实验步骤
1、向容量瓶中加入水样溶液，加至容量瓶的刻度线处，用操作标准液（1000ppm Fe）与水样溶液混匀，在混匀的情况下加入邻二氮菲反应液，搅拌使混合物中的邻二氮菲反应液均匀溶解；
2、在光度计中将比较程序设置为“比较”，将比较器设置为“测定”，并将调控器拨至“泻出”位置；
3、在操作标准液容器中取1ml操作标准液，根据调控器位置，
从容量瓶中泻出0.10ml，将其放入操作标准液容器中，混合使标准液内的铁离子与邻二氮菲反应液反应，谐解效应；
4、使用光度计测定该混合液的光度，记下读数；
5、将上述步骤重复5次；
6、计算出每次实验的平均值并记录，并用它来测定样品中的铁离子浓度。
四、实验结果
1、实验数据如下：
操作标准液测试：
第一次测试第二次测试第三次测试第四次测试
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可见分光光度法测定铁的条件实验
可见分光光度法测定铁的条件实验文献综述和实验设计
院系：检验学院
班级：12 级生物技术班
指导老师：**
小组成员：沈艳林、田赋、邓纯纯、
郑祥、谭诗航、苏曼、
邱丽莎、殷良俊、易柳
摘要 (1)
引言 (2)
正文 (3)
1 分光光度技术 (3)
2 分光光度法测定元素铁含量的研究概况 (3)
3 分光光度法测定铁的6种方法 (3)
3.1 邻二氮菲分光光度法 (3)
3.1.1 方法原理 (3)
3.1.2 化学反应式 (3)
3.2 BPT-OP分光光度法 (3)
3.3 硫氰酸盐分光光度法测铁含量 (3)
3.3.1 方法提要 (3)
3.3.2 主要反应 (3)
3.4 磺基水杨酸分光光度法测铁含量 (3)
3.4.1 方法原理 (3)
3.5 固相萃取分光光度法测铁含量 (3)
3.5.1 方法原理 (4)
3.6 用火焰原子吸收分光光度法测铁含量 (4)
3.6.1 方法原理 (4)
4 邻二氮菲分光光度法测铁含量 (4)
4.1 邻二氮菲法简介 (4)
4.2 邻二氮菲法的优点 (4)
5 邻二氮菲分光光度法测铁含量最适条件的选择 (4)
5.1 如何确定适宜的条件 (4)
5.2 最适波长的选择 (4)
5.3 显色剂用量的选择 (4)
5.4 显色时间的选择 (4)
5.5 溶液pH的选择 (4)
5.6 显色温度的选择 (5)
6 对邻二氮菲分光光度法测铁含量实验改进 (5)
参考文献 (6)
实验设计部分 (7)
本文主要研究用邻二氮菲分光光度法测定新血宝胶囊中总铁含量的分析方法。采用了邻二氮菲作显色剂、盐酸羟胺作还原剂，以工作曲线法测定总铁含量，对邻二氮菲分光光度法测定铁主要测量条件如测量波长、显色剂用量及显色时间等进行研究确定，提高分析检测的灵敏度，且讨论了测定的最佳条件，找出处理方法的良好条件和良好效果。本法灵敏、可靠，便于推广。
【关键词】邻二氮菲；分光光度法；新血宝胶囊；铁含量
引言
铁元素为人体重要元素之一，人体缺血容易导致一些贫血症状甚至疾病，人体缺血会影响血红蛋白，肌红蛋白的合成，是某些酶的活性降低，引起人体某些生理上的变化，从而导致免疫力降低，智力降低，机体抵抗力降低而引起一系列疾病产生。
新血宝胶囊为一种胶囊剂，内容物为一种棕黄色的粉末，每粒装0.25克；气香，味微苦、甘，有铁腥味。为内科虚证类非处方药药品。功能主治：补血益气，健脾和胃；用于痔疮出血、月经过多、偏食等原因所致的缺铁性贫血。成分为鸡血藤，黄芪，大枣，当归，白术，陈皮，硫酸亚铁。
测定新血宝胶囊的铁含量对人体健康有重要的意义。本实验采用邻二氮菲分光光度法测定新血宝胶囊的铁含量，该法操作简单，灵敏度较高。但是采用此种方法将受到很多因素的影响，根据查找的文献可知，目前有硫氰酸盐分光光度法测铁含量、磺基水杨酸分光光度法测铁含量、固相萃取分光光度法测铁含量、用火焰原子吸收分光光度法测铁含量、邻二氮菲分光光度法测铁含量这几种方法，我们选取邻二氮菲分光光度法进行研究。影响的因素有吸收波长，显色剂的用量，显色的反应时间，溶液的pH，盐酸羟胺的用量，显色温度，溶剂种类的选择等。本实验主要讨论其中5个条件：①最适波长的选择、②显色剂用量的选择、③显色时间的选择、④溶液pH的选择、⑤显色温度的选择。并在此基础上加以改进，加入表面活性剂曲拉通X-100，对Fe2+与邻二氮菲的显色反应具有增敏作用。
正文
1 分光光度技术
有色溶液对光线有选择性的吸收作用，不同物质由于其分子结构不同，对不同波长线的吸收能力也不同，因此，每种物质都具有其特异的吸收光谱。有些无色溶液，光虽对可见光无吸收作光光度技术吸收用，但所含物质可以吸收特定波长的紫外线或红外线。分光谱来鉴定物质性质及含量的技术，其理论依据是（分光光度法）主要是指利用物质特有的Lambert和Beer定律。
2 分光光度法测定元素铁含量的研究概况
微量元素是维持人体新陈代谢的重要元素，人体对微量元素摄人量过低或过高都不利于健康，严重者甚至会危及生命【1】。因此，在食品、医药(尤其是中药)、卫生等方面对微量金属元素的含量测定均有严格要求，对微量金属元素的测定方法进一步深入研究具有重大意义。目前，测定微量金属元素的方法有原子吸收分光光度法、ICP—AES法、容量法、分光光度法等，其中分光光度测定方法简便、快速、准确，具有推广和普及的价值。根据近年国内外有关文献的报道，就铁金属元素的分光光度测定方法的研究现状进行概述。
3 分光光度法测定铁的6种方法
3.1 邻二氮菲分光光度法
3.1.1方法原理：
在pH＜5．0，以邻二氮菲(phen)作显色剂，与二价铁形成红色二元络合物，最大吸收波长为510 nm。测定时，在pH=2．0—9．0的条件下，用盐酸羟胺将三价铁还原为二价铁，邻二氮菲与二价铁生成稳定的桔红色配合物
（（Fe(phen)3）2+）。此后用分光光度法测定可得到总铁量。
3.1.2 化学反应式：
2 Fe3+ + 2 NH2OH·HCl == 2 Fe2+ + N2↑ + 2 H2O + 4 H+ + 2 Cl-
盐酸羟胺将Fe3+还原为Fe2+
3.2 BPT-OP分光光度法
BPT(4，7—二苯基—1，10—邻二氮菲)是一种与联吡啶、邻二氮菲(又名邻二氮菲)性质相似，但显色作用更灵敏的显色剂。在HAc—NaAc(最佳pH=4．O—5.0)缓冲溶液中加入乳化液OP，Fe3+—BPT迅速转变为Fe2+—BPT，最大吸收波长位于530 nm处，线性范围是0．00--0．35 mg/L。其灵敏度很高，常用于粮食、蔬菜等食品中微量铁的测定【2】。
3.3 硫氰酸盐分光光度法测铁含量（铝及铝合金化学分析方法--铁的测定）
3.3.1方法原理：
在酸性溶液中，铁与硫氰酸盐形成橙红色硫氰酸铁。
3.3.2主要反应：
Fe(NO3)3+3NaSCN=Fe(SCN)3+3NaNO3【3】
3.4 磺基水杨酸分光光度法测铁含量
3.4.1方法原理：
磺基水杨酸是一种光度分析中的常用试剂,在PH=1.8—2.5时与铁生成紫红色络合物,在PH=4—8时与铁生成红色络合物,在PH=8—11.5时与铁生成黄色络合物本方法采用黄色络合物进行检测,该络合物的最大吸收波长为420nm。