邻二氮菲分光光度计法测铁含量文献综述和实验设计
实验--邻二氮菲分光光度法测定Fe的含量--cab
邻二氮菲分光光度法测定Fe的含量一、实验目的1. 掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理及操作方法2. 掌握721型分光光度计和吸量管的使用方法3. 熟悉标准曲线的绘制方法二、实验原理邻二氮菲（又称邻菲罗啉，简写为phen），是测定微量铁的较好试剂，在pH=2～9的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。
Fe(phen) 32+，其lgK=21.3，κ508=1.1 ×104 L·mol-1·cm-1，铁含量在0.1～6μg·mL-1范围内遵守比尔定律。
其吸收曲线如图1-1所示。
显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe3+全部还原为Fe2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。
有关反应如下：4 Fe3+＋2 NH2OH→4 Fe2+＋N2O＋4H＋＋H2O图1-1 邻二氮菲一铁(Ⅱ)的吸收曲线本方法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。
用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度(A)，以溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
在同样实验条件下，测定待测溶液的吸光度，根据测得吸光度值从标准曲线上查出相应的浓度值，即可计算试样中被测物质的质量浓度。
实验器材1.仪器721型分光光度计、容量瓶、移液管、分析天平2.药品硫酸铁铵（配制方法查阅分析化学实验书P229-P231）、HCl(6 mol/L)、5 % 盐酸羟胺(新鲜配制)、0.1 %邻二氮菲溶液(新鲜配制)、1 mol/L NaAc三、实验步骤1. 绘制吸收曲线用吸量管吸取铁标准溶液（10 ug/mL）0.00 mL、1.00 mL、2.00 mL、3.00mL、4.00 mL、5.00 mL分别置入25 mL容量瓶中，各加入0.5 mL 5% 盐酸羟胺溶液，摇匀。
再加1.0 mL 0.1%邻二氮菲溶液和2.5 mL 1 mol/L NaAc溶液，加蒸馏水稀释至刻度，充分摇匀，放置30 min。
11邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
五、实验结果与数据处理
1、记录分光光度计的型号及比色皿厚度，绘制吸光曲线和标准曲线。
2、计算未知液中铁的含量，以每升未知液中含铁多少克表示（g/L）。
《XXXXXXXXXXXX》实验报告
专业班级：********宋体四号
学生学号：********宋体四号
学生姓名：********宋体四号
实验教师:********宋体四号
开课学期：20 ~20 -学期
实验序号
11
项目名称
邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
学生学号
学生姓名
专业班级
实验教师
实验时间
2019.5.16
2、测定条件的选择
（1）氮菲与铁的配合物的稳定性，按照上面容量的配置方法重新配置溶液，在确定的最大吸收波长处以试剂空白为参比，从加入显示器后立即测定一次习惯镀晶五分钟，十分钟，20分钟，30分钟，60分钟，120分钟后个测一次吸光度已确定时间t为横坐标。吸光度a为纵坐标，绘制ad曲线，从曲线上判定配合物稳定的情况。
（2）显示剂浓度的影响
取50mL容量瓶8个，用吸量管准确吸取10.00ug/mL铁标准溶液10.00mL于各容量瓶中，加入10%盐酸羟胺溶液1mL，摇匀，分别加入0.15%邻二氮菲溶液0.0mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、6.0mL和8.0mL，再加入醋酸钠溶液5mL，以水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上最大吸收波长处，用1cm比色皿，以试剂空白为参比测定不同显色剂用量的吸光度。然后以加入邻二氮菲试剂的体积为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制A-V曲线，由曲线确定显色剂的最佳加入量。
实验3邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
实验三邻二氮菲分光光度法测定铁的含量一、实验目的 1. 2. 3.学会722S型分光光度计的正确使用了解其工作原理。
4.学会数据处理的基本方法。
5. 二、实验原理根据朗伯—比耳定律Aεbc当入射光波长λ及光程b一定时在一定浓度范围内有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。
只要绘出以吸光度A为纵坐标浓度c为横坐标的标准曲线测出试液的吸光度就可以由标准曲线查得对应的浓度值即未知样的含用分光光度法测定试样中的微量铁可选用的显色剂有邻二氮菲又称邻菲罗啉及其衍生物、磺基水杨酸、硫氰酸盐等。
而目前一般采用邻二氮菲法该法具有高灵敏度、高选择在pH29的溶液中Fe2与邻二氮菲phen生成稳定的桔红色配合物Fephen32 此配合物的lgK稳21.3摩尔吸光系数ε510 1.1×104 L·mol-1·cm-1而Fe3能与邻二氮菲生成3∶1配合物呈淡蓝色lgK稳14.1。
所以在加入显色剂之前应用盐酸羟胺NH2OH·HCl 将Fe3还原为Fe2 2Fe3 2NH2OH·HCl → 2Fe2 N2 H2O 4H 2Cl- 测定时控制溶液的酸度为pH≈5较为适宜。
三、仪器与试剂722S型或721型分光光度计、容量瓶100mL50mL 、铁标准溶液含铁0.1mg/ml。
准确称取0.8634g的NH4FeSO42·12H2O 置于烧杯中加入20ml1:1HCl和少量水溶解后定量地转移至升容量瓶中以水稀释之刻度摇匀。
、邻二氮菲0.1510-3mol/L新配制的水溶液。
、盐酸羟胺10水溶液临用时配制、醋酸钠溶液1mol/L 2NN3Fe2NNNNNNFe 四、实验步骤 1. 1 10μg·mL-1铁标准溶液配制准确称取0.8634g硫酸铁铵NH4FeSO42·12H2O于100mL烧杯中加60mL 3mol·L-1 H2SO4溶液溶解后定容至1L摇匀得100μg·mL-1储备液可由实验室提供。
仪器分析实验邻二氮菲分光光度法测定铁
组成部分：光源，单色器，吸收池，检测器，显示装置 可见光区采用钨灯光源，玻璃吸收池，单色器为光栅
四、实验步骤：
1．显色标准溶液的配制 在序号为1～6的6只50 mL容量瓶中，用吸量管分别加入0， 0.20，0.40，0.60，0.80，1.0 mL铁标准溶液(含铁0.1 g· L-1)， 分别加入1 mL 100 g· L-1盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min， 再各加入2 mL 1.5 g· L-1邻二氮菲溶液、5 mL 1.0 mol· L-1乙酸 钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。 2．吸收曲线的绘制 在分光光度计上，用1 cm吸收池，以试剂空白溶液(1号)为参 比，在440～560 nm之间，每隔10 nm测定一次待测溶液(5号) 的吸光度A，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收 曲线，从而选择测定铁的最大吸收波长。 比色皿的使用中，每改变一次试液浓度，比色皿都要洗干净
四、实验步骤：
3．显色剂用量的确定 在7只50 mL容量瓶中，各加2.0 mL 10-3 mol· L-1铁标准溶液 和1.0 mL 100 g· L-1盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min。分别 加入0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，2.0，4.0 mL 1.5 g· L-1邻二氮 菲溶液，再各加5.0 mL1.0 mol· L-1 乙酸钠溶液，以水稀释 至刻度，摇匀。以水为参比，在选定波长下测量各溶液的 吸光度。以显色剂邻二氮菲的体积为横坐标、相应的吸光 度为纵坐标，绘制吸光度－显色剂用量曲线，确定显色剂 的用量。
用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即 配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标 准溶液的吸光度(A)，以溶液的浓度为横坐标，相应的吸 光度为纵坐标，绘制标准曲线。在同样实验条件下，测定 待测溶液的吸光度，根据测得吸光度值从标准曲线上查出 相应的浓度值，即可计算试样中被测物质的质量浓度。
分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量报告
分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量报告实验目的邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量熟悉722N型分光光度计的原理和操作实验仪器和试剂722N分光光度计，7个50ml的容量瓶，5只移液管，洗瓶0.0100g/L铁标准溶液，含铁待测溶液，0.15%邻二氮菲（邻菲罗林）溶液，10%盐酸羟胺溶液，HAc-NaAc缓冲溶液，0.1mol/L NaOH溶液，1:1HCl溶液，蒸馏水实验原理邻二氮菲吸光光度法是测定铁含量的常用方法。
在PH为2~9的溶液中，Fe2+的显色剂邻二氮菲形成稳定的橘红色络合物，该络合物在508nm波长处有最大吸收。
为了消除Fe2+的副反应及其他因素的影响，在微酸溶液进行，且用盐酸羟胺将Fe3+还原为Fe2+。
吸光光度法定量分析的依据是朗伯比尔定律A=Ɛbc，当液层厚度b一定时A=Kc，吸光光度法定量分析的方法有直接比较法和标准曲线法，这个实验用标准曲线法。
在标准曲线上查出试液中铁的含量，按下式求出原始待测溶液中铁的含量（ρ表示溶液中铁的含量，mg/L）ρFe,原始待测溶液=ρFe,标准曲线查得×50/10实验步骤1、取出容量瓶和移液管，用蒸馏水清洗容量瓶并用相应的溶液润洗移液管2、在6个容量瓶中用刻度移液管分别加入0.00,、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL0.0100g/L 铁标准溶液，5mLHAc-NaAc缓冲溶液，1mL10%盐酸羟胺溶液及2mL0.15%邻二氮菲溶液，用水定容。
将其分别对应编号为1、2、3、4、5、6号，在上述6个容量瓶中对应的溶液中铁的含量分别为0.00、0.40、0.080、1.20、1.60、2.00mg/L。
其中铁含量为0.00mg/L的溶液为空白溶液，其余溶液构成标准系列溶液。
并用移液管吸取10.00mL原始待测溶液按与标准系列溶液的配制方法配制溶液，并编号为7。
将溶液放置15min左右。
3、接通722N分光光度计电源，调节分光光度计的透光度T示数为100.0（即T%=100%）发现此时吸光度A的示数位0.000，波长调节至510nm条件下。
邻二氮菲分光光度计法测铁含量文献综述和实验设计要点
可见分光光度法测定铁的条件实验可见分光光度法测定铁的条件实验文献综述和实验设计院系：检验学院班级：12 级生物技术班指导老师：杨琴小组成员：沈艳林、田赋、邓纯纯、郑祥、谭诗航、苏曼、邱丽莎、殷良俊、易柳摘要 (1)引言 (2)正文 (3)1 分光光度技术 (3)2 分光光度法测定元素铁含量的研究概况 (3)3 分光光度法测定铁的6种方法 (3)3.1 邻二氮菲分光光度法 (3)3.1.1 方法原理 (3)3.1.2 化学反应式 (3)3.2 BPT-OP分光光度法 (3)3.3 硫氰酸盐分光光度法测铁含量 (3)3.3.1 方法提要 (3)3.3.2 主要反应 (3)3.4 磺基水杨酸分光光度法测铁含量 (3)3.4.1 方法原理 (3)3.5 固相萃取分光光度法测铁含量 (3)3.5.1 方法原理 (4)3.6 用火焰原子吸收分光光度法测铁含量 (4)3.6.1 方法原理 (4)4 邻二氮菲分光光度法测铁含量 (4)4.1 邻二氮菲法简介 (4)4.2 邻二氮菲法的优点 (4)5 邻二氮菲分光光度法测铁含量最适条件的选择 (4)5.1 如何确定适宜的条件 (4)5.2 最适波长的选择 (4)5.3 显色剂用量的选择 (4)5.4 显色时间的选择 (4)5.5 溶液pH的选择 (4)5.6 显色温度的选择 (5)6 对邻二氮菲分光光度法测铁含量实验改进 (5)参考文献 (6)实验设计部分 (7)本文主要研究用邻二氮菲分光光度法测定新血宝胶囊中总铁含量的分析方法。
采用了邻二氮菲作显色剂、盐酸羟胺作还原剂，以工作曲线法测定总铁含量，对邻二氮菲分光光度法测定铁主要测量条件如测量波长、显色剂用量及显色时间等进行研究确定，提高分析检测的灵敏度，且讨论了测定的最佳条件，找出处理方法的良好条件和良好效果。
本法灵敏、可靠，便于推广。
【关键词】邻二氮菲；分光光度法；新血宝胶囊；铁含量引言铁元素为人体重要元素之一，人体缺血容易导致一些贫血症状甚至疾病，人体缺血会影响血红蛋白，肌红蛋白的合成，是某些酶的活性降低，引起人体某些生理上的变化，从而导致免疫力降低，智力降低，机体抵抗力降低而引起一系列疾病产生。
邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
邻二氮菲分光光度法测定铁的含量邻二氮菲分光光度法测定铁的含量一. 实验目的1．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理及方法。
2．学习标准曲线的制作方法。
3．了解721型分光光度计的构造及使用方法。
二．实验原理在测定微量铁时，通常以盐酸羟胺还原Fe3+为Fe2+，在PH为2—9的范围内，Fe2+与邻二氮菲反应生成稳定的橙红色配合物，其lgK fθ=21.3。
该配合物的最大吸收波长为510nm。
本方法不仅灵敏度高（摩尔吸光系数ε=1.1×104），而且选择性好。
相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO2-3，20倍的Cr3+、Mn2+、V(V)、PO3-4，5倍的Co2+、Cu2+等均不干扰测定。
Fe2+与邻二氮菲在PH=2—9范围内均能显色，但酸度高时，反应较慢，酸度太低时Fe2+易水解，所以一般在PH=5—6的微酸性溶液中显色较为适宜。
邻二氮菲与Fe3+能生成3:1的淡蓝色配合物（lgK fθ=14.1），因此在显色前应先用还原剂盐酸羟胺将Fe3+全部还原为Fe2+（2Fe3++2NH2OH·HCl=2Fe2++N2↑+2H2O+4H++2Cl-）。
三．仪器与试剂1. 仪器：(1) 721型分光光度计。
(2) 50mL容量瓶7只/组。
(3) 10mL、5mL、2mL、1mL移液管。
2. 试剂：(1)100µg·mL-1的铁标准溶液：准确称取0.8634gNH4Fe(SO4)2·12H2O于烧杯中，加入20mL1:1的HCl和少量水溶解后，定量转移至1升容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。
所得溶液含Fe3+100µg·mL-1。
(2) 10µg·ml-1的铁标准溶液：准确移取25.0mL 100µg·mL-1的铁标准溶液于250mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。
07实验7 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
722S型或721型分光光度计、容量瓶(100mL,50mL)、吸量管 １、铁标准溶液：含铁0.1mg/ml。 准确称取0.8634g的NH4Fe(SO4)2·12H2O，置于烧杯中，加入 20ml1:1HCl和少量水,溶解后,定量地转移至１升容量瓶中，以水稀释之 刻度，摇匀。 ２、邻二氮菲：0.15％(10-3mol/L)新配制的水溶液。 ３、盐酸羟胺： 10％水溶液（临用时配制） ４、醋酸钠溶液 1mol/L
实验七 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
一、实验目的
1.学会吸收曲线及标准曲线的绘制，了解分光光度法的基本原理。
2.掌握用邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。 3.学会722S型分光光度计的正确使用，了解其工作原理。 4.学会数据处理的基本方法。 5.掌握比色皿的正确使用。
二、实验原理
根据朗伯—比耳定律：A=εbc，当入射光波长λ及光程b一定时， 在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。只要 绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光 度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。同时，还 可应用相关的回归分析软件，将数据输入计算机，得到相应的分析结 果。
选用1cm比色皿，以试剂空白为参比溶液(为什么?)，取4号容量瓶 试液，选择440～560nm波长，每隔10nm测一次吸光度，其中500～520nm 之间，每隔5nm测定一次吸光度。以所得吸光度A为纵坐标，以相应波长 λ为横坐标，在坐标纸上绘制A与λ的吸收曲线。从吸收曲线上选择测 定Fe的适宜波长，一般选用最大吸收波长λmax为测定波长。
用分光光度法测定试样中的微量铁，可选用的显色剂有邻二氮菲 (又称邻菲罗啉)及其衍生物、磺基水杨酸、硫氰酸盐等。而目前一般采 用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消 除等优点。
邻二氮菲分光光度法测定铁的实验报告
邻二氮菲分光光度法测定铁的实验报告
实验名称：邻二氮菲分光光度法测定铁
一、实验目的
本实验以邻二氮菲分光光度法，测定水样中含铁量的量。
二、实验原理
邻二氮菲分光光度法是一种基于反应物之间形成有效络合的可逆的配位反应，利用反应产物的吸收光谱率，在指定波长处测定样品中某物质的浓度，从而计算出样品中含量。
三、实验器材
此实验所用仪器为分光光度计和移液器，其他耗材为吸管、量筒、大瓶、过滤器等。
四、试剂
含氧水，硅砂，邻二氮菲溶液，硫酸铁标准溶液，柠檬酸水行。
五、步骤
（1）在清洁明了的200mL大瓶中加入含氧水生成调节液，并加入硅砂使其混合均匀；
（2）将样品滴入到移液器中，并且加入适量的邻二氮菲溶液；
（3）将步骤（2）中的混合物滴入200ml大瓶中，然后加入柠檬酸水行；
（4）在分光光度计的520nm处，根据标准曲线法测定样品中的铁量，再根据标准曲线求出样品中铁浓度。
六、实验结果
实验按照步骤进行，通过标准曲线法测出样品中的铁量，结果如下表所示：
样品编号 | 样品中铁量/μg/g
A | 0.25
B | 0.17
C | 0.23
七、实验结论
本次实验通过分光光度法，测试了三个样品中铁量的含量，结果表明样品A中的铁量为0.25μg/g，样品B中的铁量为0.17μg/g，样品C中的铁量为0.23μg/g。
通过本次的实验，说明邻二氮菲分光光度法是一种可靠的测定铁含量的方法。
邻二氮菲分光光度法测铁实验报告
邻二氮菲分光光度法测铁实验报告二、实验原理邻二氮菲(Float O-phenanthroline)被广泛用于铁的测定。
它是一种紫色有机试剂，呈酮式结构。
在水中存在着一个稳定的钢蓝色络合物。
当其他二价金属离子存在时，邻二氮菲也能与这些金属形成络合物。
有机试剂比无机试剂具有更好的选择性和灵敏度，加之其理化性质的优越性能使得邻二氮菲分析法成为测定铁和其他金属离子常用的方法之一。
1、邻二氮菲与Fe2+ 的络合反应Fe2+ + 3C12H8N2 → Fe(C12H8N2)32+（β络合物）铁与邻二氮菲络合反应的平衡常数为10H3（Verma 和 Sharma， 2007）。
铁浓度的提高会导致反应向右移，邻二氮菲反应减少。
当采用吸光光度法测定时，铁的浓度与生成的络合物的摩尔吸光度之间呈线性关系。
2、标准曲线的绘制标准曲线的绘制是邻二氮菲分光光度法测定铁的基础，其目的是测量标准溶液和样品中的铁等元素的浓度。
针对铁离子的反应是可逆的，假定完全反应的基础上定量。
令Fe的质量为m（mg），溶液中邻二氮菲的体积为V(ml)，Fe(NO3)3的浓度为C(mg/L)。
则根据化学计量学的知识可知：1mmol的Fe2+可以生成1mmol的Fe(C12H8N2)32+即：m mmol Fe2+ = m mmol Fe(C12H8N2)32+ = M2 V （其中M2为Fe2+的摩尔浓度）为绘制标准曲线，应根据已知的Fe(NO3)3中的Fe浓度和对应的水溶液吸光值，计算生成的络合物的摩尔吸光度。
实验中，制备含5-50μg/mL的标准解，并用邻二氮菲分光光度法分析铁标准解测定光吸光度，并绘制标准曲线。
三、实验操作3.1 试剂和仪器试剂：Fe(NO3)3·9H2O, C2H5OH，邻二氮菲(外观为棕色-红色结晶体)仪器：分光光度计、电子天平、量筒、滴定管、试管等。
3.2 实验步骤3.2.1 配制标准铁溶液将Fe(NO3)3·9H2O称重0.1000g，转移到精密容量瓶中，用去离子水定容至100mL，摇匀，得到0.100mg/mL的Fe(NO3)3标准溶液。
邻二氮菲分光光度计法测铁含量文献综述和实验设计
可见分光光度法测定铁的条件实验可见分光光度法测定铁的条件实验文献综述和实验设计院系：检验学院班级：12 级生物技术班指导老师：**小组成员：沈艳林、田赋、邓纯纯、郑祥、谭诗航、苏曼、邱丽莎、殷良俊、易柳摘要 (1)引言 (2)正文 (3)1 分光光度技术 (3)2 分光光度法测定元素铁含量的研究概况 (3)3 分光光度法测定铁的6种方法 (3)3.1 邻二氮菲分光光度法 (3)3.1.1 方法原理 (3)3.1.2 化学反应式 (3)3.2 BPT-OP分光光度法 (3)3.3 硫氰酸盐分光光度法测铁含量 (3)3.3.1 方法提要 (3)3.3.2 主要反应 (3)3.4 磺基水杨酸分光光度法测铁含量 (3)3.4.1 方法原理 (3)3.5 固相萃取分光光度法测铁含量 (3)3.5.1 方法原理 (4)3.6 用火焰原子吸收分光光度法测铁含量 (4)3.6.1 方法原理 (4)4 邻二氮菲分光光度法测铁含量 (4)4.1 邻二氮菲法简介 (4)4.2 邻二氮菲法的优点 (4)5 邻二氮菲分光光度法测铁含量最适条件的选择 (4)5.1 如何确定适宜的条件 (4)5.2 最适波长的选择 (4)5.3 显色剂用量的选择 (4)5.4 显色时间的选择 (4)5.5 溶液pH的选择 (4)5.6 显色温度的选择 (5)6 对邻二氮菲分光光度法测铁含量实验改进 (5)参考文献 (6)实验设计部分 (7)本文主要研究用邻二氮菲分光光度法测定新血宝胶囊中总铁含量的分析方法。
采用了邻二氮菲作显色剂、盐酸羟胺作还原剂，以工作曲线法测定总铁含量，对邻二氮菲分光光度法测定铁主要测量条件如测量波长、显色剂用量及显色时间等进行研究确定，提高分析检测的灵敏度，且讨论了测定的最佳条件，找出处理方法的良好条件和良好效果。
本法灵敏、可靠，便于推广。
【关键词】邻二氮菲；分光光度法；新血宝胶囊；铁含量引言铁元素为人体重要元素之一，人体缺血容易导致一些贫血症状甚至疾病，人体缺血会影响血红蛋白，肌红蛋白的合成，是某些酶的活性降低，引起人体某些生理上的变化，从而导致免疫力降低，智力降低，机体抵抗力降低而引起一系列疾病产生。
实验五邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
实验五 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量一、实验目的1．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法; 2．了解分光光度计的构造、性能及使用方法。
二、实验原理邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的较好试剂，在pH=2～9的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。
配合物的稳K lg ＝21.3，摩尔吸光系数510 ＝11000 L·mol -1·cm -1。
在显色前，用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子。
4Fe 3+＋2NH 2OH →4Fe 2+ ＋ N 2O ＋ 4H ＋＋ H 2O测定时，控制溶液pH ＝3较为适宜，酸度高时，反应进行较慢，酸度太低，则二价铁离子水解，影响显色。
用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钴、镍、铜、铅与试剂形成有色配合物；钨、铂、镉、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的pH 范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用。
三、仪器与试剂 1．醋酸钠：l mol·L -1； 2．氢氧化钠：0.4 mol·L -1； 3．盐 酸：6 mol·L -1；、4．盐酸羟胺：100g·L -1（临时配制）；5．邻二氮菲（1.5g·L -1）：0.l5g 邻二氮菲溶解在100mL1:1乙醇溶液中。
6．铁标准溶液(1)100μg ·mL -1铁标准溶液：准确称取0.8634gNH 4Fe （SO 4）2·12H 20于200ml 烧杯中，用6 mol·L -1盐酸20 mL 溶解，移至1 L 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。
(2)10 μg·mL -1（即0.01 mg·mL -1）铁标准溶液：用移液管吸取10ml100μg ·mL -1铁标准溶液于100ml 容量瓶中，加入2ml 6 mol·L -1盐酸，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
邻二氮杂菲分光光度法测定铁的含量
邻二氮杂菲分光光度法测定铁的含量（四川农业大学生命科学与理学院四川雅安625014王雨20096824）摘要探讨邻二氮杂菲分光光度法测定未知液及茶叶灰中的铁含量的方法。
在pH2~9范围中，邻二氮杂菲与二价铁离子形成橘红色的配合物。
本实验探讨了该配合物的最大吸收峰、稳定性、显色剂浓度的影响、酸度的影响。
然后在得到的最佳条件下测定了给定未知液和茶叶灰中铁的含量，分别为3.75 mg·L-1、6.5×10-3%，其回收率为96.70%，结果可靠。
关键词邻二氮杂菲分光光光度法铁1引言铁是人体内必需的微量元素，它能改善人体的血液循环，防止人体贫血，并参与机体的血红蛋白、肌体蛋白、血红素酶类辅助因子的构成。
目前，铁含量的测定方法有很多种。
对铁含量大于5%的测定方法中，国家标准的重铬酸钾滴定法，这种方法操作简便，结果准确，但是HgCl2剧毒，造成严重的环境污染，近年来推广采用不用汞盐的测铁方法，例如：SnCl2-TiCl3联合还原铁[1]，还有EDTA滴定法、高锰酸钾滴定法、铈量法和碘量法等。
国内外用于微量铁含量测定的方法主要有可见分光光度法，原子吸收光谱法[2]、X射线荧光光谱仪熔融法[3]、沙枣皮色素荧光光度法[4]等。
可见分光光度法以其设备简单、操作快捷、灵敏度高、结果直观的优点，深受欢迎。
而在可见分光光度法中，测定微量铁的显色剂邻菲螺啉、磺基水杨酸、硫氰酸盐、邻二氮杂菲等[5]。
本实验用邻二氮杂菲分光光度法测定铁含量。
在pH2~9的范围内，Fe2+与邻二氮杂菲反应生成稳定的橘红色配合物[Fe(phen)3]2+，其lgK稳=21.3(20℃)，反应式如下：N N +Fe2+NNNN NNFe2+该配合物的最大吸收峰在510 nm处，摩尔吸收系数κ510=1.1×104 L·mol-1·cm-1。
Fe3+与邻二氮杂菲也能生成3:1的淡蓝色配合物，其lgK稳=14.1。
04实验四邻二氮菲分光光度法测定铁的含量-教案
04实验四邻二氮菲分光光度法测定铁的含量-教案实验四邻二氮菲分光光度法测定铁的含量教案课程名称:分析化学实验B教学内容:邻二氮菲分光光度法测定铁的含量实验类型:验证教学对象:化工、环境工程、药学、生物科学、应用化学、医学检验、制药、复合材料、生物工程、生物技术授课地点:中南大学南校区化学实验楼401授课学时:4学时一、教学目的与要求1、练习巩固吸量管、比色管(容量瓶)、比色皿的正确使用;2、了解分光光度法的基本原理，学会吸收曲线测绘及选择测定波长和标准曲线的绘制;3、掌握用邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理、方法和计算;4、学习掌握722S型分光光度计的正确使用，了解其工作原理;5、掌握利用标准曲线法进行定量分析的操作与数据处理方法。
二、知识点分光光度法、朗伯—比耳定律、配位反应、显色反应、标准溶液、吸收曲线、最大吸收波长、标准曲线、吸量管、比色管、比色皿、实验报告的撰写(数据处理三线表表格化)、有效数字三、技能点玻璃器皿的洗涤、吸量管的使用、标准系列溶液的配制、比色皿的使用、分光光度计的使用四、教学重点及难点重点:邻二氮菲分光光度法测定微量铁的基本原理和操作方法难点:722s型分光度计的操作五、教学方法任务驱动法、分组讨论法、阅读指导法、现场讲解指导等六、复习引入1、复习分光光度法有关知识，提问学生:(1) 分光光度法测定对象是什么,(有色溶液物质)(2) 在用分光光度法测定微量铁中，以什么试剂作显色剂,(邻二氮菲) (3) 测定波长如何选择,(吸收曲线)[引入] 分光光度法的应用:邻二氮菲分光光度法测定微量铁-标准曲线法[引言] 铁是最重要的基本结构材料，铁合金用途很广，国防和战争更是钢铁的较量，钢铁的年产量代表一个国家的现代化水平，因而，对各种样品中所含的铁进行测定，有助于对产品的生产进行监督。
测定铁的方法很多，选择不同方法主要是看不同样品中铁的含量，含量高的含铁试样采用滴定分析法测定，含量低的含铁试样采用仪器分析方法测定。
实验一 邻二氮菲分光光度法测定微量铁
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、目的要求1．学习723型分光光度计的使用方法。
2．学习测绘吸收曲线的方法。
3．掌握利用标准曲线进行微量成分测定的基本方法和有关计算。
二、实验原理微量铁的测定有邻二氮菲法、硫代甘醇酸法、磺基水杨酸法、硫氰酸盐法等。
由于邻二氮菲法的选择性高、重现性好，因此在我国的国家标准（GB）中，许多冶金产品和化工产品中铁含量的测定都采用邻二氮菲法。
邻二氮菲又称邻菲罗啉（简写Phen），在pH值为2—9的溶液中，Fe2+离子与邻二氮菲发生下列显色反应：Fe2+ + 3Phen = [Fe（Phen）3]2+生成的橙红色配合物非常稳定，lgK稳=21.3（20℃），其最大吸收波长为510nm，摩尔吸光系数ε510=1.1×104 L•cm-1•mol-1。
显色反应的适宜pH值范围很宽，且其色泽与pH值无关，但为了避免Fe2+离子水解和其它离子的影响，通常在pH值为5的HAc-NaAc缓冲介质中测定。
邻二氮菲与Fe3+离子也能生成淡篮色配合物，但其稳定性较低，因此在使用邻二氮菲法测铁时，显色前应用还原剂将Fe3+离子全部还原为Fe2+离子。
本实验采用盐酸羟胺为还原剂：4Fe3+ +2NH2OH = 4Fe2+ + 4H++ N2O+ H2O邻二氮菲与Fe2+离子反应的选择性很高，相当于含铁量5倍的Co2+、Cu2+离子，20倍量的Cr3+、Mn2+、V（Ⅴ）、PO43-离子，40倍量的Al3+、Ca2+、Mg2+、Sn2+、Zn2+、SiO32-离子都不干扰测定。
利用分光光度法进行定量测定时，通常选择吸光物质（即经显色反应后产生的新物质）的最大吸收波长作为入射光波长，这样测得的摩尔吸光系数ε值最大，既测定的灵敏度最高。
为了找出吸光物质的最大吸收波长需绘制吸收曲线。
测定吸光物质在不同波长下的吸光度A值，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，描点绘图即得吸收曲线，曲线最高点所对应的波长为该吸光物质的最大吸收波长。
实验3 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
实验三 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量一、实验目的1.学会吸收曲线及标准曲线的绘制，了解分光光度法的基本原理。
2.掌握用邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。
3.学会722S 型分光光度计的正确使用，了解其工作原理。
4.学会数据处理的基本方法。
5.掌握比色皿的正确使用。
二、实验原理根据朗伯—比耳定律：A=εbc ，当入射光波长λ及光程b 一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A 与该物质的浓度c 成正比。
只要绘出以吸光度A 为纵坐标，浓度c 为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。
同时，还可应用相关的回归分析软件，将数据输入计算机，得到相应的分析结果。
用分光光度法测定试样中的微量铁，可选用的显色剂有邻二氮菲(又称邻菲罗啉)及其衍生物、磺基水杨酸、硫氰酸盐等。
而目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。
在pH=2～9的溶液中，Fe 2+与邻二氮菲(phen)生成稳定的桔红色配合物Fe(phen)32+，此配合物的lgK 稳=21.3，摩尔吸光系数ε510 = 1.1×104 L ·mol -1·cm -1，而Fe 3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK 稳=14.1。
所以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺(NH 2OH ·HCl)将Fe 3+还原为Fe 2+，其反应式如下：2Fe 3+ + 2NH 2OH ·HCl → 2Fe 2+ + N 2 + H 2O + 4H + + 2Cl -测定时控制溶液的酸度为pH ≈5较为适宜。
三、仪器与试剂722S 型或721型分光光度计、容量瓶(100mL,50mL)、吸量管 １、铁标准溶液：含铁0.1mg/ml 。
准确称取0.8634g 的NH 4Fe(SO 4)2·12H 2O ，置于烧杯中，加入20ml1:1HCl 和少量水,溶解后,定量地转移至１升容量瓶中，以水稀释之刻度，摇匀。
分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量报告
分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量报告实验目的邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量熟悉722N型分光光度计的原理和操作实验仪器和试剂722N分光光度计，7个50ml的容量瓶，5只移液管，洗瓶0.0100g/L铁标准溶液，含铁待测溶液，0.15%邻二氮菲（邻菲罗林）溶液，10%盐酸羟胺溶液，HAc-NaAc缓冲溶液，0.1mol/L NaOH溶液，1:1HCl溶液，蒸馏水实验原理邻二氮菲吸光光度法是测定铁含量的常用方法。
在PH为2~9的溶液中，Fe2+的显色剂邻二氮菲形成稳定的橘红色络合物，该络合物在508nm波长处有最大吸收。
为了消除Fe2+的副反应及其他因素的影响，在微酸溶液进行，且用盐酸羟胺将Fe3+还原为Fe2+。
吸光光度法定量分析的依据是朗伯比尔定律A=Ɛbc，当液层厚度b一定时A=Kc，吸光光度法定量分析的方法有直接比较法和标准曲线法，这个实验用标准曲线法。
在标准曲线上查出试液中铁的含量，按下式求出原始待测溶液中铁的含量（ρ表示溶液中铁的含量，mg/L）ρFe,原始待测溶液=ρFe,标准曲线查得×50/10实验步骤1、取出容量瓶和移液管，用蒸馏水清洗容量瓶并用相应的溶液润洗移液管2、在6个容量瓶中用刻度移液管分别加入0.00,、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL0.0100g/L 铁标准溶液，5mLHAc-NaAc缓冲溶液，1mL10%盐酸羟胺溶液及2mL0.15%邻二氮菲溶液，用水定容。
将其分别对应编号为1、2、3、4、5、6号，在上述6个容量瓶中对应的溶液中铁的含量分别为0.00、0.40、0.080、1.20、1.60、2.00mg/L。
其中铁含量为0.00mg/L的溶液为空白溶液，其余溶液构成标准系列溶液。
并用移液管吸取10.00mL原始待测溶液按与标准系列溶液的配制方法配制溶液，并编号为7。
将溶液放置15min左右。
3、接通722N分光光度计电源，调节分光光度计的透光度T示数为100.0（即T%=100%）发现此时吸光度A的示数位0.000，波长调节至510nm条件下。
分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量报告
分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量报告实验目的邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量熟悉722N型分光光度计的原理和操作实验仪器和试剂722N分光光度计，7个50ml的容量瓶，5只移液管，洗瓶0.0100g/L铁标准溶液，含铁待测溶液，0.15%邻二氮菲（邻菲罗林）溶液，10%盐酸羟胺溶液，HAc-NaAc缓冲溶液，0.1mol/L NaOH溶液，1:1HCl溶液，蒸馏水实验原理邻二氮菲吸光光度法是测定铁含量的常用方法。
在PH为2~9的溶液中，Fe2+的显色剂邻二氮菲形成稳定的橘红色络合物，该络合物在508nm波长处有最大吸收。
为了消除Fe2+的副反应及其他因素的影响，在微酸溶液进行，且用盐酸羟胺将Fe3+还原为Fe2+。
吸光光度法定量分析的依据是朗伯比尔定律A=Ɛbc，当液层厚度b一定时A=Kc，吸光光度法定量分析的方法有直接比较法和标准曲线法，这个实验用标准曲线法。
在标准曲线上查出试液中铁的含量，按下式求出原始待测溶液中铁的含量（ρ表示溶液中铁的含量，mg/L）ρFe,原始待测溶液=ρFe,标准曲线查得×50/10实验步骤1、取出容量瓶和移液管，用蒸馏水清洗容量瓶并用相应的溶液润洗移液管2、在6个容量瓶中用刻度移液管分别加入0.00,、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL0.0100g/L 铁标准溶液，5mLHAc-NaAc缓冲溶液，1mL10%盐酸羟胺溶液及2mL0.15%邻二氮菲溶液，用水定容。
将其分别对应编号为1、2、3、4、5、6号，在上述6个容量瓶中对应的溶液中铁的含量分别为0.00、0.40、0.080、1.20、1.60、2.00mg/L。
其中铁含量为0.00mg/L的溶液为空白溶液，其余溶液构成标准系列溶液。
并用移液管吸取10.00mL原始待测溶液按与标准系列溶液的配制方法配制溶液，并编号为7。
将溶液放置15min左右。
3、接通722N分光光度计电源，调节分光光度计的透光度T示数为100.0（即T%=100%）发现此时吸光度A的示数位0.000，波长调节至510nm条件下。
邻二氮菲分光光度法测定铁
邻二氮菲分光光度法测定铁一．[实验目的]1、了解分光光度法测定物质含量的一般条件及其选定方法。
2、掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法。
3、了解721型（或722型）分光光度计的构造和使用方法。
二、[实验原理]Fe2+与邻二氮菲反应生成红色配合物，在波长510nm （最大吸收波长）处，其吸光度的高低与浓度的关系符合朗伯—比尔定律Fe2+与邻二氮菲在PH 为2—9范围都能形成稳定的红色配合物，但在5—6时最佳。
铁必须是以Fe2+形式反应，因此显色前要加入还原剂，通常用盐酸羟胺作为还原剂，反应式如下：4Fe3+＋2NH2OH = 4Fe2+＋N2O↑＋4H+＋H2O Fe2+与邻二氮菲的反应式如下：三、[试剂和仪器]试剂：0.1mg/mL 标准铁溶液：准确称取0.8634g 分析纯铁铵矾［NH4Fe （SO4）2·12H2O］置于烧杯中加入20mL6mol·L -1的HCl 溶液，溶解后转入1000mL 容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
0.1%邻二氮菲溶液（新配） 10%盐酸羟铵溶液（新配） 1mol·L -1NaAc 溶液0.1mol·L -1NaOH 溶液2、仪器 721（或722）型分光光度计一台（包括比色皿一套）、50mL 容量瓶8只、5mL 吸量管2支其它辅助器皿 [实验步骤] 工作条件试验1、吸收曲线的绘制 用吸量管吸取2mL 标准铁溶液，注入50mL 容量瓶中，依次加入1mL 盐酸羟铵溶液（摇匀）、3mL 邻二氮菲溶液、5mL1mol/LNaAc 溶液，定容至刻度，摇匀。
在721（或722）型分光光度计上，用1cm 比色皿，一试剂空白为参比溶液在波长为440～860nm 间，间隔10nm 测定一次吸光度（在最大吸收波长附近，每隔2nm 测定一次）。
以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，选择吸收峰最高点所对应的波长为工作波长。
用8个50mL 容量瓶中，分别按下表的用量加入各种试剂，再用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
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可见分光光度法测定铁的条件实验可见分光光度法测定铁的条件实验文献综述和实验设计院系：检验学院班级：12 级生物技术班指导老师：**小组成员：沈艳林、田赋、邓纯纯、郑祥、谭诗航、苏曼、邱丽莎、殷良俊、易柳摘要 (1)引言 (2)正文 (3)1 分光光度技术 (3)2 分光光度法测定元素铁含量的研究概况 (3)3 分光光度法测定铁的6种方法 (3)3.1 邻二氮菲分光光度法 (3)3.1.1 方法原理 (3)3.1.2 化学反应式 (3)3.2 BPT-OP分光光度法 (3)3.3 硫氰酸盐分光光度法测铁含量 (3)3.3.1 方法提要 (3)3.3.2 主要反应 (3)3.4 磺基水杨酸分光光度法测铁含量 (3)3.4.1 方法原理 (3)3.5 固相萃取分光光度法测铁含量 (3)3.5.1 方法原理 (4)3.6 用火焰原子吸收分光光度法测铁含量 (4)3.6.1 方法原理 (4)4 邻二氮菲分光光度法测铁含量 (4)4.1 邻二氮菲法简介 (4)4.2 邻二氮菲法的优点 (4)5 邻二氮菲分光光度法测铁含量最适条件的选择 (4)5.1 如何确定适宜的条件 (4)5.2 最适波长的选择 (4)5.3 显色剂用量的选择 (4)5.4 显色时间的选择 (4)5.5 溶液pH的选择 (4)5.6 显色温度的选择 (5)6 对邻二氮菲分光光度法测铁含量实验改进 (5)参考文献 (6)实验设计部分 (7)本文主要研究用邻二氮菲分光光度法测定新血宝胶囊中总铁含量的分析方法。
采用了邻二氮菲作显色剂、盐酸羟胺作还原剂，以工作曲线法测定总铁含量，对邻二氮菲分光光度法测定铁主要测量条件如测量波长、显色剂用量及显色时间等进行研究确定，提高分析检测的灵敏度，且讨论了测定的最佳条件，找出处理方法的良好条件和良好效果。
本法灵敏、可靠，便于推广。
【关键词】邻二氮菲；分光光度法；新血宝胶囊；铁含量引言铁元素为人体重要元素之一，人体缺血容易导致一些贫血症状甚至疾病，人体缺血会影响血红蛋白，肌红蛋白的合成，是某些酶的活性降低，引起人体某些生理上的变化，从而导致免疫力降低，智力降低，机体抵抗力降低而引起一系列疾病产生。
新血宝胶囊为一种胶囊剂，内容物为一种棕黄色的粉末，每粒装0.25克；气香，味微苦、甘，有铁腥味。
为内科虚证类非处方药药品。
功能主治：补血益气，健脾和胃；用于痔疮出血、月经过多、偏食等原因所致的缺铁性贫血。
成分为鸡血藤，黄芪，大枣，当归，白术，陈皮，硫酸亚铁。
测定新血宝胶囊的铁含量对人体健康有重要的意义。
本实验采用邻二氮菲分光光度法测定新血宝胶囊的铁含量，该法操作简单，灵敏度较高。
但是采用此种方法将受到很多因素的影响，根据查找的文献可知，目前有硫氰酸盐分光光度法测铁含量、磺基水杨酸分光光度法测铁含量、固相萃取分光光度法测铁含量、用火焰原子吸收分光光度法测铁含量、邻二氮菲分光光度法测铁含量这几种方法，我们选取邻二氮菲分光光度法进行研究。
影响的因素有吸收波长，显色剂的用量，显色的反应时间，溶液的pH，盐酸羟胺的用量，显色温度，溶剂种类的选择等。
本实验主要讨论其中5个条件：①最适波长的选择、②显色剂用量的选择、③显色时间的选择、④溶液pH的选择、⑤显色温度的选择。
并在此基础上加以改进，加入表面活性剂曲拉通X-100，对Fe2+与邻二氮菲的显色反应具有增敏作用。
正文1 分光光度技术有色溶液对光线有选择性的吸收作用，不同物质由于其分子结构不同，对不同波长线的吸收能力也不同，因此，每种物质都具有其特异的吸收光谱。
有些无色溶液，光虽对可见光无吸收作光光度技术吸收用，但所含物质可以吸收特定波长的紫外线或红外线。
分光谱来鉴定物质性质及含量的技术，其理论依据是（分光光度法）主要是指利用物质特有的Lambert和Beer定律。
2 分光光度法测定元素铁含量的研究概况微量元素是维持人体新陈代谢的重要元素，人体对微量元素摄人量过低或过高都不利于健康，严重者甚至会危及生命【1】。
因此，在食品、医药(尤其是中药)、卫生等方面对微量金属元素的含量测定均有严格要求，对微量金属元素的测定方法进一步深入研究具有重大意义。
目前，测定微量金属元素的方法有原子吸收分光光度法、ICP—AES法、容量法、分光光度法等，其中分光光度测定方法简便、快速、准确，具有推广和普及的价值。
根据近年国内外有关文献的报道，就铁金属元素的分光光度测定方法的研究现状进行概述。
3 分光光度法测定铁的6种方法3.1 邻二氮菲分光光度法3.1.1方法原理：在pH＜5．0，以邻二氮菲(phen)作显色剂，与二价铁形成红色二元络合物，最大吸收波长为510 nm。
测定时，在pH=2．0—9．0的条件下，用盐酸羟胺将三价铁还原为二价铁，邻二氮菲与二价铁生成稳定的桔红色配合物（（Fe(phen)3）2+）。
此后用分光光度法测定可得到总铁量。
3.1.2 化学反应式：2 Fe3+ + 2 NH2OH·HCl == 2 Fe2+ + N2↑ + 2 H2O + 4 H+ + 2 Cl-盐酸羟胺将Fe3+还原为Fe2+3.2 BPT-OP分光光度法BPT(4，7—二苯基—1，10—邻二氮菲)是一种与联吡啶、邻二氮菲(又名邻二氮菲)性质相似，但显色作用更灵敏的显色剂。
在HAc—NaAc(最佳pH=4．O—5.0)缓冲溶液中加入乳化液OP，Fe3+—BPT迅速转变为Fe2+—BPT，最大吸收波长位于530 nm处，线性范围是0．00--0．35 mg/L。
其灵敏度很高，常用于粮食、蔬菜等食品中微量铁的测定【2】。
3.3 硫氰酸盐分光光度法测铁含量（铝及铝合金化学分析方法--铁的测定）3.3.1方法原理：在酸性溶液中，铁与硫氰酸盐形成橙红色硫氰酸铁。
3.3.2主要反应：Fe(NO3)3+3NaSCN=Fe(SCN)3+3NaNO3【3】3.4 磺基水杨酸分光光度法测铁含量3.4.1方法原理：磺基水杨酸是一种光度分析中的常用试剂,在PH=1.8—2.5时与铁生成紫红色络合物,在PH=4—8时与铁生成红色络合物,在PH=8—11.5时与铁生成黄色络合物本方法采用黄色络合物进行检测,该络合物的最大吸收波长为420nm。
3.5 固相萃取分光光度法测铁含量3.5.1方法原理：用Sep-pak C18柱在采样现场萃取Fe2+与显色剂形成的有色络合物,在实验室洗脱吸附在Sep-pak C18柱上的有色络合物,用分光光度法测定Fe2+质量浓度【5】。
3.6 用火焰原子吸收分光光度法测铁含量3.6.1 方法原理：原子吸收光谱是利用铁元素的基态原子对特征辐射线的吸收程度进行定量分析的方法。
试样中铁元素的化合物在高温中被解离成基态原子，光源发射出的特征辐射线经过原子蒸汽时，被基态原子吸收。
在一定条件下，被吸收的程度与基态原子的数目成正比。
通过检测器检测特征辐射线被吸收的程度，就可以测得试样中被测铁元素的含量【6】。
4 邻二氮菲分光光度法测铁含量4.1 邻二氮菲法简介：邻二氮菲为显色剂，选择测定微量铁的适宜条件和测量条件，并用于工业盐酸中铁的测定。
4.2 邻二氮菲法的优点：用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。
5 邻二氮菲分光光度法测铁含量最适条件的选择5.1 如何确定适宜的条件：条件试验的一般步骤为改变其中一个因素，暂时固定其他因素，显色后测量相应溶液吸光度，通过吸光度与变化因素的曲线来确定适宜的条件。
5.2 最适波长的选择：准确移取1.5ml 50ug/ml标准铁Fe2+溶液，置于 50ml容量瓶中，加入1.0ml 10%盐酸羟胺溶液、10ml乙酸铵缓冲液、加2.0ml 0.1%啉菲啰啉溶液，以水稀释至刻度，摇匀，用分光光度计，在400至600nm之间，每10nm记录一次吸光度，如图1所示，其最大吸收波长为510nm.5.3 显色剂用量的选择：准确移取1.5ml 50ug/ml标准铁Fe2+溶液，分别加入8个50ml具塞比色管中，加入1.0ml 10%盐酸羟胺溶液、10ml乙酸铵缓冲液、加0.3，0.5，1.0，1.25，1.5，2.0，3.0，4.0ml 0.1%啉菲啰啉溶液，以水稀释至刻度，在波长为510nm 处分别测其吸光度A，以啉菲啰啉的体积为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度-试剂用量曲线，从而确定出最佳显色剂用量为2ml最佳【7】。
5.4显色时间的选择：取50ml容量瓶加入2ml铁标准液，1ml盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2min，加入2ml邻二氮菲溶液，5ml醋酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀，在分光光度计上，以510nm处，用1cm吸收池，以去离子水为空白溶液做参比溶液，测定吸光度，以后每隔半小时测定一次。
5.5溶液pH的选择：取6个50ml容量瓶，每个加入2ml铁标准液，1ml盐酸羟胺溶液，摇匀，放置2min，再加入2ml邻二氮菲溶液，摇匀。
分别从滴定管中加入10ml，12ml，16ml，18ml，20ml的0.1mol／l的NaOH溶液。
以去离子水稀释至刻度线，摇匀，在510nm处，以去离子水为空白，测定各溶液的吸光度。
5.6显色温度的选择：取6个50ml容量瓶，各加铁标准液2ml，1ml盐酸羟胺溶液，摇匀，分别放入恒温箱（5,10,15,20,25,30,35度），放置2min，同时将2ml邻二氮菲溶液分别放入相应的恒温箱2min，同温度的亚铁离子与邻二氮菲混合，用水稀释至刻度后，摇匀，放入恒温箱2min，用1cm吸收池，在510nm处，测定吸光度。
6 对邻二氮菲分光光度法测铁含量实验改进在缓冲溶液(pH=5．0)存在下，以邻二氮菲(phen)作显色剂，加入表面活性剂曲拉通X-100，对Fe2+与邻二氮菲的显色反应具有增敏作用，形成的Fe2+一phen—Triton三元络合物呈红色，络合物的最大吸收波长为510nm，表观摩尔吸光系数为1．2×105mol/(L/cm)，可使灵敏度、选择性大为提高【8】。
参考文献【1】陈杰，张欣荣，等．微量元素与人体健康关系研究的回顾与展望[J]．生命科学仪器，2003，1(1)：41—44．【2】吴方琼.BPT-OP分光光度法测定食品中的微量铁[期刊论文]-西南民族学院学报(自然科学版) 2003(01).【3】工厂化学检验手册P198页.（国标GB/T 6789.4--2001 邻二氮菲分光光度法）【4】GB/T11911-1989.水质,铁、锰的测定,火焰原子吸收分光光度法.【5】《环境监测管理与技术》 2007年06期【6】张国文.原子吸收分光光度法测定食品中微量元素[J].粮油食品科技，2002,10（6）:34．【7】分析技术与操作（Ⅴ）-电化学与光谱分析及操作，化学工业出版社；曾祥燕、丁佐宏主编.【8】梁国柱．表面活性剂增敏光度法测定水样中的微量铁[J]．南通职业大学学报，2005，19(2)：29—31．设计性实验分光光度法测铁含量条件实验实验设计一、实验目的1、了解分光光度法测铁的方法2、熟悉显色反应条件与测量条件的选择方法3、熟悉实验设计的基本内容与方法4、掌握分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量二、实验原理亚铁离子在pH=3—9之间的溶液中，与邻二氮菲生成稳定的橙色络合物，其反应式为：Fe2++3C12H8N2==[Fe(C12H8N2)]2+若用还原剂将Fe3+还原为Fe2+，则本法测得为总铁。