亚甲蓝病毒灭活新鲜冰冻血浆制备冷沉淀的有效成分分析
病毒灭活FFP提取冷沉淀凝血因子中主要成分含量分析
型大容餐 低温血液成分离心机 (3800 dmin,10 m 分 离出血浆 (200mY袋 ),每袋再平均分 为 100 ml两袋 ,分别作为对照组液体血浆和试 验组液 体血
浆。对照组 (FFP组 )立 即置于低温血浆 速冻机中速冻保存备用 ;实验组 (病 毒灭活 FFP组 )用亚 甲蓝 ,光 化学法 进行病 毒灭 活后 ,再 速冻保存备 用。
四川 医 学 ,2012,4(15):110—111. (收稿 日期 :2013—04—02) (编辑 :韩珊珊 )
冷沉淀凝血 因子是 FFP在 4 oC条件 下水浴 中解冻 ,收集 到的 采集 45袋 400 ml全 血 ,然 后用 CR一7型大容量低温血液成分离
不溶冷沉淀物 ,其主要成分为凝血 因子Ⅷ Ⅷ )、纤维蛋 白原 ( 等 ,是局部 止血药纤维蛋 白胶的主要成分。广泛应用于 FⅧ和 Fg 等凝血因子缺乏的疾病 ,如因 FⅧ缺乏或活性下降的甲型血友病 、 vwF缺乏或分子结构异常的血管 l生血友病、凝血 因子 I(Fg)缺乏症 等 。对于 以上患者 ,输注的冷沉淀凝血 因子 中凝血 因子Ⅷ 、纤 维 蛋 白原的活性对治疗效果产生重要影响 『1]。在亚甲蓝 /光化学法病
把 对照 组和实 验组 的冷 沉淀凝 血 因子按 5袋 为一批 取 出 ,
别对实验组 FFP和对照组 FFP提取 的冷沉淀凝血因子 中凝血因子 整批完全放入 37℃恒温循环水浴箱中解冻 ,然后分别 留样 5 ml,
荆门市人民政府关于2014-2015年度科学技术奖励的决定
荆门市人民政府关于2014-2015年度科学技术奖励的
决定
文章属性
•【制定机关】荆门市人民政府
•【公布日期】2016.09.02
•【字号】荆政发〔2016〕28号
•【施行日期】2016.09.02
•【效力等级】地方规范性文件
•【时效性】现行有效
•【主题分类】科技奖励
正文
市人民政府关于2014-2015年度科学技术奖励的决定
荆政发〔2016〕28号
各县、市、区人民政府,漳河新区,屈家岭管理区,荆门高新区,大柴湖开发区,市政府各部门:
近年来,全市广大科学技术人员认真贯彻党的十八大和十八届三中、四中、五中全会精神,大力实施创新驱动发展战略,加快建设创新型荆门,在科学研究、新产品开发、技术改造、科技成果转化和推广应用等方面取得了重要成果,为推进全市科技事业进步和经济社会发展作出了积极贡献。为激发全市广大科学技术人员创新创业创造热情和活力,根据《荆门市科学技术奖励办法》的规定,经市科学技术奖励评审委员会评审和市科学技术奖励委员会审定,市人民政府决定:授予彭爱国同志荆门市科学技术突出贡献奖。
授予“轻型水陆两栖飞机水动性能实机试飞技术”等1项成果为荆门市技术发明一等奖;“一种瓦楞纸板生产线胶雾分离装置”等1项成果为荆门市技术发明二等奖;“含多硅的甲基丙烯酸脂和丙烯酸酯类单体及合成方法”等3项成果为荆门市技术发明三等奖。
授予“大型高效LNG公路运输装备的关键技术及应用”等4项成果为荆门市科学技术进步一等奖;“低品位磷矿资源化利用技术研究”等9项成果为荆门市科学技术进步二等奖;“实物资产管理信息系统的开发及应用”等34项成果为荆门市科学技术进步三等奖。
影响冷沉淀质量的关键因素分析
影响冷沉淀质量的关键因素分析
冷沉淀(cryoprecipitate)是新鲜冰冻血浆(FFP)在低温(约0~4℃)解冻后沉淀的白色絮状物,是FFP的部分凝血因子浓集制品,其中主要成分有:Ⅷ因子、纤维蛋白原以及血管性血友病因子,纤维结合蛋白、ⅩⅢ因子等。冷沉淀因其制作工艺简单、价格低廉,临床应用广泛。适用于先天性或获得性纤维蛋白原缺乏症及Ⅷ因子缺乏症患者,血管性血友病(vWD)、儿童及成年人轻型甲型血友病患者,DIC及大出血患者的替代治疗等。因冷沉淀中的Ⅷ因子为不稳定凝血因子,受多种因素影响,所以每袋冷沉淀Ⅷ因子含量各不相同,通过查阅相关资料及跟踪验证,对影响冷沉淀质量的关键因素分析,现报告如下:
1 冷沉淀的制备方法
冷沉淀制品是以新鲜冰冻血浆为原料,近年来因多联采血袋的广泛应用,冷沉淀的制作工艺更加简单,安全性更强,各地中心血站均能生产。目前国内冷沉淀的制备常用两种方法[1]:
1.1 离心法
取出待制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆(FFP),置室温中约5分钟,待双联袋导管(连接管)变软后,将血浆置入2~6℃水浴箱中融化。当血浆基本融化时,取出血浆,在2±2℃的环境下重离心,使冷沉淀凝血因子下沉于塑料袋底部。将上清分入空袋内,血袋底部的沉淀内大约含有20~30ml血浆,即为冷沉淀凝血因子。
1.2 虹吸法
取出待制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆(FFP),置室温中约5分钟,待双联袋导管(连接管)变软后,将新鲜冰冻血浆袋置于2~6℃水浴箱中,另一空袋悬于水浴箱外且位置低于血浆袋,两袋形成一定的高度落差。新鲜冰冻血浆融化时,上清血浆随时被虹吸入空袋中,冷沉淀遗留在新鲜冰冻血浆袋中。在融化过程中控制水浴温度在2~6℃。待新鲜冰冻血浆融化至约40~50ml时,即为冷沉淀凝血因子。
亚甲蓝光化学病毒灭活血浆的质量控制与主要质量指标观察
标 本 2m 左 右 , 血 浆 中不 稳 定 凝 血 因 子 ( 、 ) 血 浆 总蛋 白 的 含 量 进 行 测 定 。 结 果 亚 甲蓝 光 照 病 毒 灭 活 后 新 鲜 冰 冻 血 浆 中 主 l 对 V Ⅷ 及
要凝 血 因子及 血 浆 总 蛋 白浓 度 含 量 测 定分 别 为 F : 13 Ⅷ ( .2±04 )I / lF : 10 0 3 )I / l血 浆 总蛋 白 ( 7 8 ±6 2 )g L . 5 U m , V ( . 3± .6 U m , 6.l .2 / ;
对应流程操作 的岗位 职责 , 使产 品制备 过程各项 操作 规范有 序 ,
合, 在可见光的作用下发生光化学反应 , 病毒核酸断裂 、 使 包膜 破
损 , 有 效 灭 活 血 浆 中的 脂 质 包 膜 病 毒 和 部 分 非 脂 质 包 膜 病 毒 , 能
集 时 间 小 于 6m n新 鲜 血 浆 6h 内制 备 完 成 。 病 毒 灭 活 后 血 浆 i, 控 制 在 采 血 后 8h内 完成 速 冻 。 13 3 病 毒 灭 活 输 血 过 滤 器 的选 择 .. 必 须 根 据 单 袋 血 浆 量 规 格
无 输 血 不 良反 应 的 发 生
【 关键 词 】 亚 甲蓝 ; 病毒灭活 ; 血浆 ; 质量控制 ; 质量指标
随着 输 血 医疗 技 术 水 平 的 不 断 提 高 , 血 安 全 问 题 , 来 越 输 越 受 到 重 视 和关 注 。 由 于病 毒 标 记 物 检 测 技 术 的 局 限 性 、 测 病 毒 检 13 过 程 质 量 控 制 关 键 要 点 . 13 1 建 立 控 制 程 序 . . 记 录完 整 , 追 溯 。 可 13 2 新 鲜 血 浆 制 备 要 求 .. C D —A 方 保 存 液 全 血 ,0 l P 4 0m 采 建 立 亚 甲蓝 光化 学病 毒 灭 活 血 浆 S P及 O
MB-P对病毒灭活血浆有效成分的影响
( 收稿 日期 :2 — 9 ) 0 0 一l 01 5
【】 林傧 , 7 陈俊杰 , 林建 武. 复方酮康唑乳膏治疗外耳道 真菌病疗效观察 [ . J 中国医药导报 , 0 6 3( 4) 1 20 , 2 .
51 .
【 杨富灵 , 8 】 刘晓君, 制霉菌素粉剂涂布疗法治疗真 等.
者则会有一定影响。
【 关键 词 】 亚 甲蓝 ;病毒 灭 活 ;血浆
Efe to t y e e me h ln l e b u h tc e c lmf rViu iu n ci ai n i n fc fMeh ln t y e e B u l e p o o h mia o r sv r s I a tv to o
b fr e vr s n c ia in o ef s o e ls . h r sn r a f c nt e p t n sw on e e et i a t t t e h f z np a ma T e ei og e t f t a i t h e d o h u i v o f h l r ee o h e
亚甲蓝光化学法病毒灭活对新鲜冰冻血浆有效成分的影响
亚甲蓝光化学法病毒灭活对新鲜冰冻血浆有效成分的影响
黄象娟;黄象艳
【期刊名称】《山东医药》
【年(卷),期】2011(051)051
【摘要】目的了解亚甲蓝光化学法病毒灭活对新鲜冰冻血浆有效成分的影响,为
临床治疗提供依据.方法取50袋(400 ml/袋)新鲜无偿献血者血液,在6h内完成血浆分离,并立即行亚甲蓝光化学法病毒灭活(灭活条件为光照度35 000 LUX、温度4℃、作用时间30 min),灭活前后留取小辫,贴好标签后立即置速冻冰箱冻存;冻存1周后37℃依次解冻,采用凝固法检测Ⅷ因子含量、双缩脲法检测总蛋白含量,以灭活后含量/灭活前含量计算有效成分保有率.结果亚甲蓝光化学法病毒灭活前后血
浆Ⅷ因子及总蛋白含量均较灭活前显著降低(P均<0.05),其保有率分别为80.88%、95.69%.结论对血浆进行亚甲蓝光化学法病毒灭活可导致Ⅷ因子含量减低;由新
鲜冰冻血浆和普通冰冻血浆制备的病毒灭活血浆需考虑用于不同患者.
【总页数】2页(P80-81)
【作者】黄象娟;黄象艳
【作者单位】山东省医学高等专科学校济南校区,济南250002;济南军区总医院【正文语种】中文
【中图分类】R457.1
【相关文献】
1.研究亚甲蓝光化学法病毒灭活对血浆有效成分的影响 [J], 何锐洪
2.乳糜血对亚甲蓝光化学法制备病毒灭活血浆的影响 [J], 刘静;李红心;肖玮
3.亚甲蓝光化学法病毒灭活对血浆成分及白细胞残留量的影响 [J], 王超英
4.亚甲蓝光化学法病毒灭活对血浆质量的影响分析 [J], 徐国胜
5.亚甲蓝病毒灭活新鲜冰冻血浆制备冷沉淀的有效成分分析 [J], 宋雪梅;孙庶丽;王明静
新鲜冰冻血浆的病毒灭活方法及其应用
新鲜冰冻血浆的病毒灭活方法及其应用
新鲜冰冻血浆的病毒灭活方法及其应用
新鲜冰冻血浆(FFP)几乎含有全部凝血因子,主要用于多种凝血因子缺乏伴有严重贫血的患者,也用于大量失血或凝血试验异常而需要施行侵入性操作的患者以预防出血。虽然对FFP供者进行了严格的筛选和实验室病毒检测,但经血传播病毒的危险性仍然存在,原因在于:1)检测方法灵敏度有限;2)“窗口期”问题;3)新病毒的出现;4)目前我国检测病毒的种类仅为
HIV1/2、HBV、HCV;因此,检测结果阴性并不能排除病毒感染的可能。据估计,输用血浆的危险程度为10 000 U可发生75次不良反应,每1 000名患者有37起不良反应发生。1项研究在分析了48年来应用未经病毒灭活血浆和经病毒灭活血浆后发生不良反应需要救治的花费,发现应用病毒灭活血浆至少每年为美国节约200万美元,如果考虑非感染性并发症,如输血相关性急性肺损伤(TRALI),可以为英国每年节约5万英镑[1]。目前欧洲各国都已禁止使用未经病毒灭活的血浆,国内应用FFP非常广泛,但病毒灭活尚未普遍进行。目前国内外几种病毒灭活技术正
在临床应用,血浆成分及其衍生物主要采用有机溶剂去污剂法(SD)和亚甲兰加可见光法(MBR),补骨脂素加光照血浆(PLT)已经在欧洲应用。核黄素加光照(PRT)对血浆、红细胞和血小板3种成分中的病毒可能均有灭活作用,但仍处于研发阶段;除SD法外其它灭活剂的作用都是针对病毒核酸的[2]。现就血浆病毒灭活的方法和应用作一简介。
1 SD法
1.1 灭活方法SD法由纽约血液中心发明,通常用磷酸3N丁酯(TNBP)和吐温-80或胆酸钠,二者协同作用可以溶解和去除病毒的脂包膜而使其灭活。SD法处理血浆是将<2 500人份的同型、融化的FFP混合与1%TNBP和1%去污剂TritonX100,在37℃孵育4h,用蔬菜油浸出液萃取之后,用C18层析柱清除溶剂和去污剂。由此制备的血浆经无菌过滤,200ml分装,再次于-30℃冰冻保存。该法约使血浆稀释10倍,残留的微量TNBP(
亚甲蓝病毒灭活血浆的质量测定
深层过滤 离子交换色谱和亲和层析色谱 纳米膜过滤 纳米膜过滤技术
单一的病毒灭活/去除方法虽然能较好的起到处理病毒 效果,但是无法灭活和去除所有病毒,如细小病毒B19、 VIR918、PARV4、SV40和PrPSc。
血浆病毒灭活方法
有机溶剂/去污剂(S/D)法
热处理 终端干热法 蒸汽处理法
输血引起艾滋病病毒(HIV、HCV、HBV)的风险尚 不能完全杜绝;不常见的病毒如人类T淋巴细胞白血病病 毒(HTLV)、西尼罗病毒(WNV)、EB病毒等在大多数 国家均未被列入血液常规检测。现有的检测手段不能完全 排除血浆中可能存在的未知病毒。
血浆制品病毒去除方法: 主要在血浆蛋白分离工艺中应用
乙醇沉淀深层过滤离子交换色谱和亲和层析色谱纳米膜过滤纳米膜过滤技术单一的病毒灭活去除方法虽然能较好的起到处理病毒效果但是无法灭活和去除所有病毒如细小病毒b19vir918parv4sv40和prpsc主要在血浆蛋白分离工艺中应用血浆病毒灭活方法有机溶剂去污剂s热处理蒸汽处理法以上方法多用于从原料血浆生产血浆蛋白制品均需要将大量的不同人份的血浆混合处理不但容易增加某些不能被灭活病原体如朊病低ph孵放法辛酸处理法亚甲蓝病毒灭活的技术原理亚甲蓝又名美蓝分子量319185是一种光敏剂吩噻嗪类染料其最大吸收峰为670nm临床上常作为解毒剂用于治疗亚硝酸盐中毒引起的高铁血红蛋白血症和氰化物中毒
冷沉淀制备方法临床输注论文
冷沉淀的制备方法及临床输注
[关键词] 血浆;冷沉淀;输血
[中图分类号] r457.1+4[文献标识码] a[文章编号] 1005-0515(2011)-07-309-01
20世纪60年代冷沉淀被pooi博士发现,1964年首先应用冻融沉淀法,从血浆中提取其含有丰富的凝血因子ⅷ(fⅷ),而被称为冷沉淀[1]。冷沉淀是存在于血液中的一种功能性成分,具有广泛的生理功能和很高的临床应用价值。近年来,随着输血技术的快速发展冷沉淀的应用已突破传统的用于甲型血友病、纤维蛋白原及凝血因子缺乏所致的出血性疾病的治疗, 也用于手术后出血、严重外伤及弥散性血管内凝血(dic)、深度烧伤、黏膜和皮肤疾病等病人的替代治疗等,现将冷沉淀的制备方法及临床输注注意事项及护理等综述如下,以便使冷沉淀制品能更好更广地用于临床。
1 冷沉淀的制备
1.1 冷沉淀的制备剂量国外把450ml全血分离的血浆制成的冷沉淀作为1单位,国内把400ml全血分离的血浆制成的冷沉淀为1单位,也有少数血站把200ml全血分离血浆制备成的冷沉淀为1单位。
1.2 冷沉淀的制备方法从献血者的全血(400ml)获得的血浆制备的。近年来,随着输血技术的快速发展,几乎所有在临床上已经使用的血液成分都有人在不断研究改进它的制备方法。目的是使这些血液成分用于临床更为安全和更加有效。如多联采血袋的广泛
应用,使冷沉淀的制作工艺更加简单,操作方便,安全性更强。目前国内冷沉淀的制备常用两种方法[2]:数控水浴融化离心法和数控水浴融化虹吸法。
1.2.1 数控水浴融化离心法运用数字控制水浴式血浆融化箱
病毒灭活血浆中主要质量指标及亚甲蓝残留量的检测分析
mo l / L ) 。结论
MB - P病 毒 灭 活前 、 后血浆各项主要质量指标接 近, MB残 留 量 符 合 质 量 要 求 , MB - P病 毒 灭 活 血 浆 是 一 种 安 全
的血 液 制 品 , 可 有 效 降低 输 血 风 险 , 保障受血者身体健康 。
关键 词 : 亚 甲蓝 ; 病 毒 灭 活 ; 光化 学 ; 输 血 D O I : 1 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 6 7 3 — 4 1 3 0 . 2 0 1 3 . 1 4 . 0 1 6 文献标识码 : A 文章编号 : 1 6 7 3 — 4 1 3 0 ( 2 0 1 3 ) 1 4 — 1 8 l 1 一 O 2
Che n Ai hua , Li u Yo ngm e i
( S h e n z h e n c i t y Ba o a n Di s t r i c t c e n t r a l b l o o d s t a t i o n q u a l i t y c o n t r o l o ff i c e , 5 1 8 1 0 1 ) Ab s t r a c t : 0b j e c t i v e To u n d e r s t a n d t h e c h a n g e s o f me t h y l e n e b l u e p h o t o c h e mi c a l( MB- P)i n a c t i v a t e d v i r u s b e f o r e a n d a f t e r
病毒灭活血浆与新鲜冰冻血浆在血浆置换治疗中的效果分析
病毒灭活血浆与新鲜冰冻血浆在血浆置换治疗中的效果分析
作者:丁琪
来源:《中国当代医药》2013年第14期
[摘要] 目的探讨血浆置换中应用病毒灭活血浆与新鲜冰冻血浆的效果差异。方法 2012年1~6月洛阳市26例进行血浆置换患者分别采用新鲜冰冻血浆及病毒灭活血浆治疗,并对两组治疗前后的血凝、蛋白等指标进行比较。结果应用病毒灭活血浆组治疗后患者PT、APTT与治疗前比较差异有统计学意义(P < 0.05),两组治疗前后清蛋白检测差异无统计学意义(P > 0.05)。结论大量应用血浆制品时,病毒灭活血浆安全性仍较高,但若患者有出血倾向则易选用新鲜冰冻血浆(FFP)做置换液,临床效果更佳。
[关键词] 病毒灭活血浆;新鲜冰冻血浆;血浆置换;效果
[中图分类号] R457.1+4 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2013)05(b)-0062-02
亚甲蓝光化学(MB)法灭活血浆中的病毒是一种最安全、有效的适合于临床用单袋血浆病毒灭活的方法,其灭活效果已被大量实验证实[1-2],输注病毒灭活血浆成为当前国内外预防输注血浆制品传播传染病的有效措施,MB法病毒灭活血浆技术,已被推广应用于全国部分血站。对于MB法病毒灭活血浆后,对于血浆内有效成分的影响国内各家血站报道不一,但是都一致显示MB法病毒灭活后的血浆有效成分有所改变[3-4]。但是这些或多或少的改变是否影响临床应用效果,尤其是在血浆置换中大量应用血浆时是否有影响,国内目前尚无报道。笔者对此情况进行了研究,具体如下:
1 资料与方法
病毒灭活冰冻血浆与新鲜冰冻血浆临床应用价值对比分析
病毒灭活冰冻血浆与新鲜冰冻血浆临床应用价值对比分析
目的:分析病毒灭活冰冻血浆与新鲜冰冻血浆临床应用价值。方法:选取2015年1月至2015年6月之间于我院接受输血治疗的患者400例,将其随机均分为两组。采用病毒灭活冰冻血浆治疗对照组患者,采用新鲜冰冻血浆治疗观察组患者,分别检测两种血浆的血浆蛋白值与凝血相,并观察患者的不良反应情况。结果:两组的ALB与TP比较无显著差异,对照组的G、FIB高于观察组,A/G、TT、APTT与PT均低于观察组,差异显著,P<0.05;输血治疗期间与治疗后,对照组的不良反应发生率为0,低于观察组,但是无显著差异,P>0.05。结论:在治疗需要输血的患者时,输注病毒灭活冰冻血浆风险较低,不容易发生输血反应或传播疾病,但是新鲜冰冻血浆补充凝血因子的效果较好,可改善患者的凝血障碍,所以应结合患者的具体情况选择合适的血浆。
标签:病毒灭活冰冻血浆;新鲜冰冻血浆;应用价值;不良反应
近几年,临床上开始广泛应用成分血进行输注,其中,在输注血浆时,主要是采用病毒灭活冰冻血浆(当地血站制作)治疗。虽然这种血浆可以灭活血浆中的有害物质,如病毒等,使血浆输注导致的输血反应与有关风险降低,但是也会造成补充凝血因子的效果降低,从而导致患者无法获得理想的质量效果[1]。笔者对比分析了病毒灭活冰冻血浆与新鲜冰冻血浆临床应用价值,现进行如下报道。
1 资料与方法
1.1 临床资料
选取2015年1月至2015年6月之间于我院接受输血治疗的400例患者作为研究对象,将其随机分为两组,每组各200例。对照组包括男性121例,女性79例;年龄20~66岁,平均(42.5±3.8)岁。观察组包括男性119例,女性81例;年龄21~65岁,平均(42.7±3.5)岁。年龄、性别等一般资料在两组患者之间无显著差异,P>0.05,无统计学意义,可以进行对比。本次研究排除存在无法耐受治疗者、存在认知障碍者、重要脏器严重功能不全者、心血管疾病患者。
亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒对血浆成分的影响
亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒对血浆成分的影响
作者:王艳芳
来源:《健康周刊》2018年第02期
【摘要】血浆病毒灭活是指利用物理化学手段对血浆进行处理,使病毒蛋白的结构受到损害,这样血浆中的病毒就会失去活性,变得没有致病和繁殖能力。临床输血是救治病患的必要手段,但是血浆在运输和存储的过程中有一定程度的病毒传播风险,尽管在采集鲜血时会对各个步骤进行严密控制,但是病毒感染血液的情况确实无法完全避免。亚甲蓝光化学法是一种用于单袋血液病毒灭活的技术,是近几年研发的新型血浆病毒灭活技术,具有安全、高效的特点,不过也存在一些未解决的弊端,比如缺少灭活后血浆的各项质控指标。为了强化亚甲蓝光化学法的作用,需要对其血浆病毒灭活对血浆成分的影响进行研究,通过临床分析,得出有效结论,在下一步的工作中科学的使用亚甲蓝光化学法。
【关键词】亚甲蓝光化学法血浆病毒灭活血浆成分
一、亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒研究的必要性
亚甲蓝又称为亚甲基蓝和次甲蓝,是一种芳香杂环化合物,通常被用作化学领域,亚甲蓝的水溶液在氧化性环境中会变成蓝色,在氨水等还原剂中会变成无色状态,根据其不同的性状可进行不同的功用。从化合物信息上看亚甲蓝又是一种解毒药,能将高铁还原型蛋白还原成血红蛋白。在临床治疗中,血液输注是必要环节,它能通过各个采血机构传递来的血液帮助重症危急病患缓解痛苦。但是由于各种检测方法、检测试剂等原因,无法做到血液处理的健全,因此,选择合适的病毒灭活方法非常重要。经过十几年的发展,血浆病毒灭活技术有了很大进步,但是也存在不少争议。一方面通过血浆病毒灭活有效控制各种病毒性细菌和艾滋病毒,另一方面该技术还在不断研发中,需要更精确的论证和更有力的证据说明它的有效性,所以亚甲蓝光化学法对血浆病毒灭活问题的处理还有待商榷和进步。因此对其的研究具有十分重要的价值意义,笔者结合自己的工作经验,在临床实验的基础上对亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒对血浆成分的影响进行了研究。
影响冷沉淀质量的关键因素分析
影响冷沉淀质量的关键因素分析
冷沉淀(cryoprecipitate)是新鲜冰冻血浆(FFP)在低温(约0~4℃)解冻后沉淀的白色絮状物,是FFP的部分凝血因子浓集制品,其中主要成分有:Ⅷ因子、纤维蛋白原以及血管性血友病因子,纤维结合蛋白、ⅩⅢ因子等。冷沉淀因其制作工艺简单、价格低廉,临床应用广泛。适用于先天性或获得性纤维蛋白原缺乏症及Ⅷ因子缺乏症患者,血管性血友病(vWD)、儿童及成年人轻型甲型血友病患者,DIC及大出血患者的替代治疗等。因冷沉淀中的Ⅷ因子为不稳定凝血因子,受多种因素影响,所以每袋冷沉淀Ⅷ因子含量各不相同,通过查阅相关资料及跟踪验证,对影响冷沉淀质量的关键因素分析,现报告如下:
1 冷沉淀的制备方法
冷沉淀制品是以新鲜冰冻血浆为原料,近年来因多联采血袋的广泛应用,冷沉淀的制作工艺更加简单,安全性更强,各地中心血站均能生产。目前国内冷沉淀的制备常用两种方法[1]:
1.1 离心法
取出待制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆(FFP),置室温中约5分钟,待双联袋导管(连接管)变软后,将血浆置入2~6℃水浴箱中融化。当血浆基本融化时,取出血浆,在2±2℃的环境下重离心,使冷沉淀凝血因子下沉于塑料袋底部。将上清分入空袋内,血袋底部的沉淀内大约含有20~30ml血浆,即为冷沉淀凝血因子。
1.2 虹吸法
取出待制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆(FFP),置室温中约5分钟,待双联袋导管(连接管)变软后,将新鲜冰冻血浆袋置于2~6℃水浴箱中,另一空袋悬于水浴箱外且位置低于血浆袋,两袋形成一定的高度落差。新鲜冰冻血浆融化时,上清血浆随时被虹吸入空袋中,冷沉淀遗留在新鲜冰冻血浆袋中。在融化过程中控制水浴温度在2~6℃。待新鲜冰冻血浆融化至约40~50ml时,即为冷沉淀凝血因子。
血浆血浆冷沉淀物的知识点
血浆、血浆冷沉淀物的知识点!
——
1、血浆是临床常用的血液成分之一,分为新鲜冰冻血浆和冰冻血浆。
2、规格:100ml、150ml、200ml血浆分别从200ml、300ml和400ml全血制备。
3、储存条件:-20℃以下冷冻保存。使用时放37℃水温箱融化。
在临床上应用较广泛的是新鲜冰冻血浆和冰冻血浆。
新鲜冰冻血浆
采血后6-8h内将全血离心后血浆分离出来并速冻成块。含有全部凝血因子。血浆蛋白含量≥50g/L,Ⅷ因子
≥0.7IU/ml。容量:50-200ml多种规格。保存期一年。适用于:
①血浆凝血酶原时间(PT)或活化部分凝血酶原时间(APTT)>正常1.5倍,创面弥散性渗血。
②患者急性大出血输入大量库存全血或浓缩红细胞后(出血量或输血量相当于患者自身血容量)。
③病史或临床过程表现有先天性或获得性凝血功能障碍。
④紧急对抗华法林的抗凝血作用(FFP5-8ml/kg)
冰冻血浆
主要包括从保存期已经超过6-8小时的全血中分离出来的血浆、全血的有效期以内分离出来的血浆、保存期满
一年的FFP冰冻呈固态而制成。血浆蛋白含量≥50g/L。保存期5年。作用:补充稳定的凝血因子和血浆蛋白。适用于:
①主要用于补充稳定的凝血因子缺乏,如Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ因子缺乏。
②手术、外伤、烧伤、肠梗阻等大出血或血浆大量丢失。
主要包括从保存期已经超过6-8小时的全血中分离出来的血浆、全血的有效期以内分离出来的血浆、保存期满一年的FFP
主要区别:FFP保存了新鲜血浆中的各种成分,特别是含有所有的凝血因子,包括不稳定的凝血因子五和八。
新鲜冰冻血浆的病毒灭活方法及其应用
新鲜冰冻血浆的病毒灭活方法及其应用
新鲜冰冻血浆(FFP)几乎含有全部凝血因子,主要用于多种凝血因子缺乏伴有严重贫血的患者,也用于大量失血或凝血试验异常而需要施行侵入性操作的患者以预防出血。虽然对FFP供者进行了严格的筛选和实验室病毒检测,但经血传播病毒的危险性仍然存在,原因在于:1)检测方法灵敏度有限;2)“窗口期”问题;3)新病毒的出现;4)目前我国检测病毒的种类仅为HIV1/2、HBV、HCV;因此,检测结果阴性并不能排除病毒感染的可能。据估计,输用血浆的危险程度为10 000 U可发生75次不良反应,每1 000名患者有37起不良反应发生。1项研究在分析了48年来应用未经病毒灭活血浆和经病毒灭活血浆后发生不良反应需要救治的花费,发现应用病毒灭活血浆至少每年为美国节约200万美元,如果考虑非感染性并发症,如输血相关性急性肺损伤(TRALI),可以为英国每年节约5万英镑[1]。目前欧洲各国都已禁止使用未经病毒灭活的血浆,国内应用FFP非常广泛,但病毒灭活尚未普遍进行。目前国内外几种病毒灭活技术正在临床应用,血浆成分及其衍生物主要采用有机溶剂去污剂法(SD)和亚甲兰加可见光法(MBR),补骨脂素加光照血浆(PLT)已经在欧洲应用。核黄素加光照(PRT)对血浆、红细胞和血小板3种成分中的病毒可能均有灭活作用,但仍处于研发阶段;除SD法外其它灭活剂的作用都是针对病毒核酸的[2]。现就血浆病毒灭活的方法和应用作一简介。
1 SD法
1.1灭活方法SD法由纽约血液中心发明,通常用磷酸3N丁酯(TNBP)和吐温-80
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2012年12月第50卷第36期
·检验与临床·
CHINA MODERN DOCTOR 中国现代医生冷沉淀因富含凝血因子Ⅷ(F Ⅷ)、纤维蛋白原(Fbg)、瑞斯托霉素因子(vWF )、纤维蛋白稳定因子(F ⅩⅢ)、纤维结合蛋白(Fn )等有效成分,被广泛用于出血性疾病的治疗。但因冷沉淀易造成输血传染性疾病的发生,在所有血液制品中,输注冷沉淀传染病毒的风险高于血浆及红细胞和血小板[1]。因此,冷沉淀的输注安全与输注有效性缺一不可,采取有效措施两者兼顾尤为重要。本课题通过比较同源新鲜冰冻血浆在灭活前后制备冷沉淀的质量评价分析血浆灭活后制备冷沉淀的可行性,现报道如下。
1材料与方法1.1设备与试剂
日本CA530血凝仪;试剂包括乏F Ⅷ批号:546545、APTT 批号:547118、CaCl2批号:549448;正常参比血浆批号:503222A ;Fbg 批号:40938、FN 批号:201205;F ⅩⅢ批号:201205;vWF 批号:201205;威高WG-LRH-I 型低温融化箱;
日立大容量离心机;亚特斯全自动酶免仪;上海医用病毒灭活柜及配套病毒灭活袋。
1.2方法
1.2.1原料血浆的制备采用Q-400血袋采集CPDA-1抗凝血液400mL ,尽快分离新鲜血浆。随机抽取新鲜血浆20袋,每袋均分为100mL ×2,分别作为新鲜冰冻血浆组(甲组)和病毒灭活新鲜冰冻血浆组(乙组)。甲组快速置于-50℃速冻机中速冻,-30℃冰柜保存备用;乙组用MB/光化学法进行病
毒灭活后,采用与甲组相同的方式速冻并保存备用。所有操作在采血后6h 内完成。
1.2.2冷沉淀的制备将上述两组冰冻后血浆在完全相同的条件下制备甲、乙两组冷沉淀,快速置于-50℃速冻机中速冻,-30℃冰柜保存备用。
1.2.3留样与检测将上述两组冷沉淀取出,37℃融化并称重,混匀后留样5mL ,分别检测F Ⅷ、Fbg 、vWF 、F ⅩⅢ、Fn 的含量。1.3统计学处理
应用SPSS11.5统计软件对数据进行统计处理,采用t 检验对两样本均数进行比较,P <0.05具有统计学意义。
亚甲蓝病毒灭活新鲜冰冻血浆制备冷沉淀的有效
成分分析
宋雪梅
1
孙庶丽
2
王明静
3
1.山东省威海市中心血站,山东威海264200;
2.山东省威海市中心血站质量管理科,山东威海
264200;
3.山东省威海市中心血站业务科,山东威海264200
[摘要]目的探讨亚甲蓝灭活后新鲜冰冻血浆制备冷沉淀的可行性。方法通过比较同源新鲜冰冻血浆在灭活前后制备的冷沉淀的质量得出结论。结果亚甲蓝灭活后新鲜冰冻血浆制备的冷沉淀,F Ⅷ、Fbg 含量均有所降低,其中F Ⅷ留存率为(62.5±8.8)%,Fbg 留存率(62.0±11.7)%,而vWF 、F ⅩⅢ、Fn 与同源未灭活新鲜冰冻血浆制备的冷沉淀比较,差异无统计学意义。结论用亚甲蓝灭活后新鲜冰冻血浆制备的冷沉淀,两种主要成分F Ⅷ和Fbg 含量均有
损失,如果从降低输注冷沉淀传染病毒风险的角度考虑,则应对病毒灭活冷沉淀降低标准,加大临床输血量。
[关键词]亚甲蓝;病毒灭活;冷沉淀;可行性[中图分类号]R457[文献标识码]B
[文章编号]1673-9701(2012)36-0101-02
Analysis of the active component in cryoprecipitate made from fresh frozen plasma methylene blue treated and removed
SONG Xuemei 1SUN Shuli 2WANG Mingjing 3
1.Weihai Blood Center ,Weihai 264200,China;
2.Quality Control Department of Weihai Blood Center ,Weihai 264200,China;
3.Integrated Services Office of Weihai Blood Center ,Weihai 264200,China
[Abstract]Objective To analyze the feasibility of preparing cryoprecipitate prepared from fresh frozen plasma methylene blue treated and removed.Methods Conclusion was made by comparing a variety of the effective component in cryoprecip -itate before and after methylene blue treated and removed.Results The content of F Ⅷ、Fbg decreased in cryoprecipitate prepared from fresh frozen plasma methylene blue treated and removed,while F Ⅷretention ’s RT was (62.5±8.8)%,Fbg re tention ’s RT was (62.0±11.7)%,however comparison of vWF 、F ⅩⅢand Fn retention had no statistical significance.Con -clusion The content of F Ⅷ、Fbg decreased in cryoprecipitate prepared from fresh frozen plasma methylene blue treated and removed.With the aim of reducing the risk of transmission of the virus,we should lower the standard requirements and in -crease the clinical transfusion volume.
[Key words]Methylene blue;Virus inactivation;Cryoprecipitate;Feasibility
[基金项目]山东省威海市科技发展计划项目(2011-2-92)
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