总糖和还原糖的测定——斐林氏法
实验四斐林试剂法法测定还原糖含量
实验四斐林试剂法测定果品蔬菜中还原糖含量一、实验目的：掌握园艺产品中糖的测定方法。
二、实验原理利用糖的还原性，与斐林试剂（氧化剂）中的二价铜离子还原为一价铜，进行氧化还原反应，而进行测定。
非还原糖必须转化为还原糖，再进行测定。
斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂，反应的终点可用次甲基蓝作指示剂，在碱性、沸腾环境下还原呈无色。
根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量，计算出样品还原糖量。
三、试剂与材料1、斐林试剂甲：加水溶解并定容至1000ml；乙：346g酒石酸钾钠+100gNaOH加水溶解并定容至1000ml；2、1%次甲基蓝，1g次甲基蓝加水溶解并定容至100ml，棕色瓶保存；3、%标准葡萄糖，2g 105℃烘干到恒重的葡萄糖加水定容到1000ml；4、碱式滴定管；5、电炉，各种玻璃器皿。
四、操作方法1、斐林试剂标定取甲液5ml加入5ml乙液中，置于250ml三角瓶中，加入水10ml，从滴定管中加入%的标准葡萄糖若干毫升（约23ml）。
（量控制在后滴定时消耗葡萄糖在－。
电炉上加热至沸，并保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝溶液，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，用%标准葡萄糖滴定至蓝色消失，有红棕色沉淀，溶液清亮为终点止。
记录耗用的葡萄糖量为V0，必须在1min内完成。
（注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长。
）2、样品滴定预备试验同上法取斐林试剂，加10ml样品液，摇匀于电炉上加热至沸，保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝，用%葡萄糖滴定至蓝色消失。
记录耗用的葡萄糖量为V1。
3、样品滴定同上法吸取斐林试剂加10ml样品液(预先稀释)，补加（V0-V1）ml水，并从滴定管中预先加入（V1-1）ml %葡萄糖，摇匀至电炉上加热至沸，保持2min微沸，加入2滴1%次甲基蓝，继续用葡萄糖滴定至蓝色消失。
记录消耗的标准葡萄糖体积为V毫升。
总糖测定的方法
总糖测定的方法嘿，咱今儿个就来唠唠总糖测定的那些事儿！你说这总糖啊，就像是个神秘的小家伙，藏在各种食物和物质里。
要想抓住它，可得有几招厉害的法子。
先来说说最常见的一种方法，斐林试剂法。
这斐林试剂就像是个神奇的探测器，能和总糖发生奇妙的反应呢！想象一下，把样本放进去，就像在一个神秘的化学世界里开启了一场奇妙冒险。
斐林试剂会和总糖手牵手，产生一些明显的变化，通过这些变化，咱就能知道总糖的含量啦！这多有趣呀，就像在玩一个找宝藏的游戏。
还有一种方法叫高锰酸钾法。
这高锰酸钾就像是个厉害的卫士，能把总糖给“揪”出来。
它和总糖会发生一系列的反应，通过观察高锰酸钾颜色的变化，就能判断总糖的多少啦。
这就好像警察抓小偷，高锰酸钾就是那个英勇的警察，总糖就是那个调皮的小偷，最后总能把小偷给抓住。
再说说碘量法。
碘就像是个聪明的小精灵，能和总糖巧妙地互动。
通过碘的反应，咱也能算出总糖的量。
这是不是很神奇呢？当然啦，每种方法都有它的特点和适用范围。
就像不同的工具，各有各的用处。
在实际操作中，可得根据具体情况来选择合适的方法。
不然，那可就像拿着锤子去拧螺丝，不得劲儿呀！在进行总糖测定的时候，可得细心再细心。
就像绣花一样，一针一线都不能马虎。
稍微不注意，可能结果就不准确啦。
那可不行，咱得对自己的实验负责呀！而且，实验环境也很重要呢！温度啦、湿度啦，都可能影响结果。
这就好比种子发芽需要合适的环境，总糖测定也需要一个舒适的“家”。
总之，总糖测定可不是一件简单的事儿，但也别被它吓住。
只要咱掌握了方法，认真去做，就一定能揭开总糖的神秘面纱。
你说是不是呀？咱可不能小瞧了这小小的总糖测定，它里面的学问大着呢！所以呀，大家在做总糖测定的时候，一定要多用心，多尝试，相信你一定能成功的！。
总糖的测定方法
总糖的测定方法（斐林氏溶液快速测定法）一、原理：酶制剂生产中需要测定发酵液中糖质原料的消耗情况，以便掌握发酵过程。
葡糖糖、果糖、麦芽糖等为醛基、酮基或半缩醛基的糖都具有还原性，能使二价铜还原为一价铜，发酵液中的糊精、淀粉经过酸水解也能成为还原糖。
可根据其还原性，用一定量的斐林氏溶液将葡萄糖完全氧化，过量的斐林氏溶液与碘化钾作用而析出碘，然后用硫代硫酸钠来滴定，查表求的发酵液中的糖含量。
二、试剂：1、3N的盐酸溶液：浓硫酸一份加蒸馏水3份。
2、6N的氢氧化钠溶液：称取氢氧化钠240.06克，溶解定容至1000毫升。
3、斐林氏溶液：A液：硫酸铜（五水硫酸铜）24克定容400毫升。
B液：酒石酸钾钠75克、氢氧化钠50克定容400毫升。
C液：碘化钾60克，定容200毫升。
A液、B液、C液混合为1000毫升溶液。
注意：配制时应按顺序配制，分别充分溶解，然后混合（A+B+C)摇匀备用。
4、4N的硫酸溶液：准确吸取化学纯浓硫酸111毫升于1000毫升的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。
5、0.05N的硫代硫酸钠溶液：精确称取化学纯的硫代硫酸钠12.41克与碳酸钠0.1克，用新沸初冷蒸馏水溶解定容1000毫升。
（此溶液配置好后需隔一周才能使用，每月需标定一次）。
6、1%的酚酞指示剂：称取酚酞1克，溶于95%的乙醇中，定容至100毫升。
三、操作方法：样品：吸取0.5毫升样品（发酵滤液），放入100毫升的三角瓶中（做两只可对照），加入3N的盐酸10毫升加热3分钟，冷却后滴入酚酞指示剂2滴，用6N的氢氧化钠溶液调至红色，再加入斐林氏溶液10毫升，煮沸3分钟，冷却后加入4N的硫酸10毫升，用0.05N的硫代硫酸钠滴定至奶油色为终点（在接近终点时加1%的指示剂，使之呈紫色）。
空白：在100毫升的三角瓶中加蒸馏水10毫升，然后加入斐林氏溶液10毫升煮沸3分钟，冷却后加入4N的硫酸10毫升，用0.05N的硫代硫酸钠滴定至奶白色。
总糖和还原糖的测定──费林试剂比色法
实验一 总糖和还原糖的测定（一）──费林试剂比色法目的要求掌握还原糖和总糖的测定原理，学习用直接滴定法测定还原糖的方法。
实验原理将一定量的碱性酒石酸铜甲液和乙液等体积混合时，硫酸铜与氢氧化钠反应，生成氢氧化铜沉淀：2NaOH + CuSO 4= Cu(OH)2 + Na2SO 4所生成的氢氧化铜沉淀与酒石酸钠反应，生成可溶性的酒石酸钾钠铜：在加热条件下，用样液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，酒石酸钾钠铜被还原糖还原，产生红色氧化亚铜沉淀，还原糖则被氧化和降解，其反应如下：2 O反应生成的氧化亚铜沉淀与费林试剂中的亚铁氰化钾（黄血盐）反应生成可溶性复盐，便于观察滴定终点。
Cu2O + K4Fe(CN)6 + H2O K2Cu2Fe(CN)6 + 2KOH（氧化亚铜）（淡黄色）滴定时以亚甲基蓝为氧化－还原指示剂。
因为亚甲基蓝氧化能力比二价铜弱，待二价铜离子全部被还原后，稍过量的还原糖可使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型的亚甲基蓝，即达滴定终点。
根据样液量可计算出还原糖含量。
试剂和器材一、试剂碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g亚甲基蓝，溶于蒸馏水中并稀释到1000ml。
碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75g NaOH，溶于蒸馏水中，再加入4g亚铁氰化钾［K4Fe（CN）6］，完全溶解后，用蒸馏水稀释到1000ml，贮存于具橡皮塞玻璃瓶中。
0.1％葡萄糖标准溶液：准确称取1.000g经98～100℃干燥至恒重的无水葡萄糖，加蒸馏水溶解后移入1000ml容量瓶中，加入5ml浓HCl（防止微生物生长），用蒸馏水稀释到1000ml。
6mol/LHCl：取250ml浓HCl（35%～38%）用蒸馏水稀释到500ml。
碘－碘化钾溶液：称取5g碘，10g碘化钾溶于100ml蒸馏水中。
6N NaOH：称取120gNaOH溶于500ml蒸馏水中。
0.1%酚酞指示剂。
总糖和还原糖的测定——斐林氏法
总糖和还原糖测定方法较多，如3，5—二硝基水杨酸法、碱性铜试剂法、蒽酮比色法、斐林氏法等。
这里只介绍斐林氏法。
一、目的学习掌握生产实践中常用的快速定糖方法。
二、原理还原糖在碱性溶液中能将Ag+，Hg+，Cu2+，Fe（CN）3-等金属离子还原，而糖本身则氧化成各种羟酸，利用这一特性可以对还原糖进行定量测定。
本实验采用斐林试剂热滴定法，氧化剂是斐林试剂，它是由甲乙两种溶液组成，甲液中含有硫酸铜、次甲基蓝；乙液中含有氢氧化钠、酒石酸钾钠和亚铁氰化钾（黄血盐）。
当甲乙两液混合时，硫酸铜和氢氧化钠作用形成氢氧化铜沉淀，由于溶液中存在酒石酸钾钠，它和氢氧化铜形成了可溶性络合物。
酒石酸络铜（Ⅱ）钾钠盐在与还原糖共热时，二价铜离子即被还原成一价的氧化亚铜红色沉淀。
此氧化亚铜与试剂中亚铁氰化钾反应生成可溶性的亚铁氰酸络铜（Ⅰ）钾盐。
Cu2O + K4Fe(CN)6 + 3 H2O →K2Cu2Fe(CN)6 + 2 KOH + 2 H2O亚铁氰化钾亚铁氰酸络铜（Ⅰ）钾盐斐林试剂中二价铜的还原力比次甲基蓝强，因此所滴入的标准葡萄糖溶液首先使二价铜还原，只有当二价铜被还原完毕后，才能使次甲基蓝（甲烯蓝）还原为无色，测定中以此作为滴定终点。
在测定时先做一对照管（不加样品），用标准葡萄糖滴定求知一定体积斐林试剂中二价铜和次甲基蓝的量，即测定对照管消耗的标准葡萄糖量（A）。
再做样品管，样品中还原糖消耗斐林试剂中一部分二价铜，剩余的量再用标准葡萄糖来滴定，即样品消耗的标准葡萄糖量（B）。
将（A）减去（B）就可求得样品中还原糖量。
三、器材及试剂：1．器材：①山芋粉②广范试纸pH1～12。
③吸管5毫升（×4），10毫升（×2）④容量瓶100毫升（×3）⑤烧杯150毫升（×1），100毫升（×1）⑥三角烧瓶250毫升（×6）⑦滴定管25毫升（×1）⑧双孔橡皮塞⑨电炉300W（×1）⑩天平。
总糖和还原糖的测定
第三章 基础实验（一）糖化学实验一 总糖和还原糖的测定（一）──费林试剂比色法目的要求掌握还原糖和总糖的测定原理，学习用直接滴定法测定还原糖的方法。
实验原理将一定量的碱性酒石酸铜甲液和乙液等体积混合时，硫酸铜与氢氧化钠反应，生成氢氧化铜沉淀：2NaOH + CuSO 4 = Cu(OH)2 + Na 2SO 4所生成的氢氧化铜沉淀与酒石酸钠反应，生成可溶性的酒石酸钾钠铜：在加热条件下，用样液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，酒石酸钾钠铜被还原糖还原，产生红色氧化亚铜沉淀，还原糖则被氧化和降解，其反应如下：反应生成的氧化亚铜沉淀与费林试剂中的亚铁氰化钾（黄血盐）反应生成可溶性复盐，便于观察滴定终点。
Cu2O + K4Fe(CN)6 + H2O K2Cu2Fe(CN)6 + 2KOH（氧化亚铜）（淡黄色）滴定时以亚甲基蓝为氧化－还原指示剂。
因为亚甲基蓝氧化能力比二价铜弱，待二价铜离子全部被还原后，稍过量的还原糖可使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型的亚甲基蓝，即达滴定终点。
根据样液量可计算出还原糖含量。
试剂和器材一、试剂碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g亚甲基蓝，溶于蒸馏水中并稀释到1000ml。
碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75g NaOH，溶于蒸馏水中，再加入4g亚铁氰化钾［K4Fe（CN）6］，完全溶解后，用蒸馏水稀释到1000ml，贮存于具橡皮塞玻璃瓶中。
0.1％葡萄糖标准溶液：准确称取1.000g经98～100℃干燥至恒重的无水葡萄糖，加蒸馏水溶解后移入1000ml容量瓶中，加入5ml浓HCl（防止微生物生长），用蒸馏水稀释到1000ml。
6mol/LHCl：取250ml浓HCl（35%～38%）用蒸馏水稀释到500ml。
碘－碘化钾溶液：称取5g碘，10g碘化钾溶于100ml蒸馏水中。
6N NaOH：称取120gNaOH溶于500ml蒸馏水中。
总糖和还原糖
总糖和还原糖
1测定原理：利用费林溶液样与还原糖共沸，生成氧化亚铜沉淀的反应，以次甲基蓝为指标，以样品滴定的菲林溶液，达到终点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原为无色，以示终点。
根据样品消耗量求得总糖或还原糖的含量。
2试剂：盐酸溶液、氢氧化钠溶液、葡萄糖标准溶液、费林溶液
3步骤
3.1测总糖用试样：按确定的取样量取适量酒样V2=25ml于100ml容量瓶中，摇匀后慢慢加入乙酸锌溶液2.00ml及亚铁氰化钾溶液2.00ml，加水至刻度V2,过滤，弃初滤液，滤液备用。
吸取25ml滤液于100ml容量瓶中，加5ml盐酸溶液，加水至20ml，摇匀。
于68℃水浴上水解15min，取出，冷却。
用200g/L氢氧化钠溶液中和至中性，调温至20℃，加水至刻度V2，备用。
3.2测还原糖用试样：准确吸取一定的样品V1于100容量瓶中，使之所含还原糖为0.2-0.4g，加水定容至刻度，备用。
3.3分析步骤：以试样代替葡萄糖标准溶液，与费林溶液反应，记录消耗样的体积V3，结果按（6）计算。
公式：X1=(F-c.V)/(V1.V3/V2)×1000
X1:草莓酒成品酒总糖或还原糖的含量，（g/L）
F：费林溶液甲、乙5ml相当于葡萄糖的克数，（g）
C:葡萄糖标准液的体积，（g/ml）
V：消耗葡萄糖标准液的体积（ml）
V1：吸取样品的体积，（ml）
V2：样品稀释后的定容体积，（ml）
V3：消耗试样的体积，（ml）。
总糖含量的测定方法
总糖含量的测定方法嘿，朋友们！今天咱就来聊聊总糖含量的测定方法。
这可真是个有趣又重要的事儿呢！你想想看，糖在我们生活中那可是无处不在呀！从甜甜的糖果到美味的糕点，从可口的饮料到日常的食物，哪哪儿都有糖的影子。
那怎么知道这里面到底有多少糖呢？这就需要我们掌握测定总糖含量的方法啦！常用的一种方法就是斐林试剂法。
这就好像是一个神奇的魔法，能把看不见的糖给变出来让我们看到。
先把样品处理好，然后加入斐林试剂，经过一系列反应，就能根据产生的现象来推算出糖的含量啦。
就像侦探在破案一样，通过一点点线索找到真相！还有一种方法是蒽酮比色法呢！这个方法也很有意思，就好像是给糖穿上了一件特别的“衣服”，让它在特定的条件下显现出来。
通过测量颜色的变化，就能知道糖有多少啦。
另外啊，还有一些其他的方法呢，就像武林中有各种不同的武功秘籍一样，各有各的厉害之处。
测定总糖含量可不仅仅是为了好玩哦，它的用处大着呢！比如在食品行业，厂家得知道自己生产的东西里糖有多少，这样才能保证产品的质量和口感呀。
不然，太甜了或者不够甜，那可不行！在科研领域，研究人员也需要准确测定总糖含量来进行各种研究，这就像是给他们的研究搭起了一座坚实的桥梁。
那有人可能会问了，测这个难不难呀？其实呀，只要掌握了方法，也没那么难啦！就像学骑自行车一样，一开始可能会摇摇晃晃，但多练习几次就熟练啦。
咱就说，要是不知道这些测定方法，那不是像在黑暗中摸索吗？所以呀，了解总糖含量的测定方法真的很重要呢！这能让我们更清楚地了解我们吃的东西，也能在很多方面帮助我们做出更好的选择。
总之，总糖含量的测定方法是个很实用的知识，大家可得好好记住哦！学会了它，就像是掌握了一把打开甜蜜世界大门的钥匙，能让我们更深入地了解糖这个奇妙的东西呢！怎么样，是不是很有意思呀？赶紧去试试吧！。
总糖含量的测定方法
总糖含量的测定方法嘿，朋友们！今天咱们就像探险家一样，去探寻一下总糖含量的测定方法，这可就像是在糖果王国里寻找宝藏的秘密地图哦。
首先呢，有一个超级经典的方法，就是斐林试剂法。
这斐林试剂啊，就像是一个超级侦探，专门去揪出那些藏起来的糖分子。
把斐林试剂和含有糖的溶液混合在一起，就像是一场盛大的舞会开始了。
溶液里的糖分子就像一个个穿着华丽舞裙的舞者，迫不及待地要和斐林试剂中的铜离子共舞呢。
然后通过加热，这个舞会就进入了高潮，糖分子和铜离子在热热闹闹的氛围中发生反应，最后生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
这沉淀就像是舞会后留下来的精美纪念品，我们根据这个沉淀的量就能大致算出总糖的含量啦，是不是很神奇呢？就好像通过舞会后的垃圾量能算出来了多少宾客一样夸张。
还有一个方法是蒽酮比色法。
蒽酮就像是一个有着神奇魔法的小巫师，它能把糖变成有色的物质。
当把蒽酮试剂加入到含糖溶液里，就像是小巫师挥动魔法棒一样，溶液瞬间就发生了变化。
糖分子就像是被施了魔法的小木偶，乖乖地变成了一种有着特殊颜色的化合物。
然后我们把这个有色溶液放到比色计里，就像是把小木偶放在舞台上展示一样。
比色计通过检测颜色的深浅，就能知道糖的含量了，这感觉就像是看木偶戏的观众通过木偶的大小来判断它的年龄一样有趣。
另外，DNS法也很有趣哦。
DNS试剂就像是一个超级贪婪的大胃王，它遇到糖分子就“吃”个不停。
糖分子和DNS试剂发生反应后会变色，这就好比大胃王吃了不同的食物后脸上会沾上不同颜色的酱料一样滑稽。
我们再根据颜色的变化来确定总糖的含量，就像是通过大胃王脸上酱料的颜色来判断他吃了多少食物呢。
在这些测定方法里，每一个步骤都要小心翼翼的，就像走钢丝一样。
要是哪个环节出了差错，那就像是在演奏交响乐的时候突然弹错了一个音符，整个结果就会变得乱七八糟。
比如说加热的温度不对，就像是把烤箱的温度调错了，烤出来的蛋糕要么没熟要么焦了，测出来的总糖含量也就不准了。
总糖含量的测定虽然听起来有点复杂，但是当我们把它想象成一场有趣的游戏或者一个奇妙的故事，就会觉得充满乐趣啦。
[农业]测定果汁中的还原性糖_总糖_酸度以及固形物含量
![[农业]测定果汁中的还原性糖_总糖_酸度以及固形物含量](https://img.taocdn.com/s3/m/592ec2a8c67da26925c52cc58bd63186bdeb9250.png)
还原糖的测定(菲林试剂法)一.基本原理还原糖可以将菲林试剂中的二价铜离子还原为一价铜离子，反应终点可以由次甲基兰指示（蓝色消失形成砖红色），根据一定量的菲林试剂完全还原所需的还原糖量，可计算加入样品中的还原糖的含量。
二.试剂和仪器1.试剂菲林试剂甲液：称取69.3g硫酸铜晶体，用蒸馏水溶解，定容至1000ml菲林试剂乙液：称取346g酒石酸钾钠，100g氢氧化钠，用蒸馏水溶解定容至1000ml次甲基蓝溶液：1g次甲基蓝溶于100ml水葡萄糖2.仪器水浴锅，pH计三.操作步骤⑴菲林试剂的标定取菲林试剂甲乙液各5ml，于250ml锥形瓶，加水10ml，并从滴定管中加入0.4％标准葡萄糖若干毫升，电炉上加热至沸，并保持微沸2min，加2滴次甲基蓝溶液，继续用标准葡萄糖滴定。
至要求操作在1min内完成，记录耗用的标准葡萄糖的体积V0。
⑵定糖预备实验菲林试剂甲乙液各5ml于250ml锥形瓶，准确加入10ml样品糖溶液，摇匀加热至沸。
加2滴次甲基蓝溶液，用标准葡萄糖滴定至蓝色消失，耗标准葡萄糖体积V1毫升⑶样品中还原糖的测定准确量菲林试剂甲乙液各5ml于250ml锥形瓶，准确加入10ml样品糖溶液，摇匀，补加V0—V1毫升蒸馏水，并从滴定管中预加V1毫升标准葡萄糖溶液。
摇匀加热至沸，保持微沸2min，加入2滴次甲基兰溶液，继续用标准葡萄糖滴定至蓝色消失。
记录消耗标准葡萄糖溶液的总体积。
四.计算还原糖含量（g/ml，以葡萄糖计）＝（V0-V1）× 0.4× n × 1/10N——样品稀释倍数总糖的测定一．原理在食品生产中常规分析及成品质量检验中，通常都有“总糖”这一指标，即要求测定食品中还原糖分与蔗糖分的总量。
还原糖与蔗糖分的总量俗称总糖量。
蔗糖经水解生成等量的葡萄糖与果糖的混合物俗称转化糖。
测定总糖通常以还原糖的测定法为基础，加稀盐酸在加热条件下使蔗糖水解转化为葡萄糖，再按还原糖测定法测定，测出以转化糖计的总糖量。
还原糖测定(斐林法)
还原糖的鉴定(斐林试剂法)一、实训目的：1、掌握斐林试剂的配制2、掌握以斐林试剂鉴定还原糖的方法二、基本原理还原糖可以将斐林试剂中的二价铜离子还原为一价铜离子，反应终点可以由次甲基兰指示（蓝色消失形成砖红色），根据一定量的斐林试剂完全还原所需的还原糖量，可计算加入样品中的还原糖的含量。
三、试剂和仪器1、试剂（1）斐林试剂甲液：称取7.5g CuSO4，0.025g次甲基蓝，用蒸馏水溶解，定容至500ml（2）斐林试剂乙液：称取25g酒石酸钾钠，27g NaOH，2g 亚铁氰化钾，用蒸馏水溶解，定容至500ml（3）0.1%标准葡萄糖溶液：准确称取干燥至恒重的葡萄糖1.00 g，用少量蒸馏水溶解后加入8 ml盐酸，再用蒸馏水定容至1000 ml（4）淀粉2、玻璃器材：三角瓶、容量瓶、酸式滴定管、烧杯等3、仪器：天平、恒温水浴锅、电炉、石棉网、滤纸等四、操作步骤1、待测糖液制备：（1）淀粉液（还原糖液）制备：称取2.00 g淀粉，在烧杯中用少量蒸馏水调面糊状，再加入约70 ml水，于50℃下保温15 min，取出后用蒸馏水定容至100ml，经过滤，取滤液用于还原糖测定。
（2）蔗糖液制备：称取2.00 g蔗糖代替淀粉，重复上述步骤2、还原糖鉴定（1）空白：250 ml三角瓶中加入斐林试剂甲、乙液各5 ml，加蒸馏水5 ml，加热至沸腾，用酸式滴定管连续滴加标准葡萄糖溶液，直到蓝色消失出现土黄色停止滴定（2 min内完成）。
记录滴定用去G溶液用量V0。
注：若三角瓶离开电炉后又出现蓝色，不能再继续滴定。
(2)还原糖测定：分别用5 ml淀粉液、5 ml蔗糖液代替蒸馏水重复上述实验。
记录滴定用去G溶液用量V。
五、结果计算：还原糖含量（以葡萄糖计）＝(V0-V)×标准G浓度×稀释倍数÷样品质量（g）思考：蔗糖是还原糖吗？淀粉有还原性吗？。
总糖的测定方法
总糖的测定方法
总糖的测定是食品分析中的重要内容，不同的食品中总糖的含量也会有所不同。
因此，正确、准确地测定总糖的含量对于食品质量的控制和评价具有重要意义。
下面将介绍几种常用的总糖测定方法。
首先，常用的总糖测定方法之一是菲林法。
这种方法是将待测样品与酚酞溶液
和硫酸混合，然后在沸水浴中加热，使其发生蓝色到粉红色的变化，再用标准葡萄糖溶液进行比色测定。
菲林法操作简便，结果准确，因此被广泛应用于食品分析领域。
其次，还有硫酸酚法。
这种方法是将待测样品与硫酸酚溶液混合，然后在沸水
浴中加热，使其发生褐色沉淀，再用标准葡萄糖溶液进行比色测定。
硫酸酚法操作简单，结果准确，适用于各种食品样品的总糖测定。
另外，还有氧化还原滴定法。
这种方法是将待测样品与氢氧化钠溶液和酚酞溶
液混合，然后滴加碘液进行滴定，直至出现蓝色终点，再用标准葡萄糖溶液进行滴定测定。
氧化还原滴定法操作简单，结果准确，适用于各种食品样品的总糖测定。
最后，还有高效液相色谱法。
这种方法是利用高效液相色谱仪对待测样品进行
分离和检测，通过测定色谱图谱中总糖峰的面积来计算总糖的含量。
高效液相色谱法操作复杂，但结果准确，适用于各种复杂食品样品的总糖测定。
总之，不同的总糖测定方法各有优缺点，具体选择应根据实际情况和要求进行。
在进行总糖测定时，需严格按照操作规程进行，以确保测定结果的准确性和可靠性。
希望本文介绍的总糖测定方法能够对您有所帮助。
总糖和还原糖的测定实验报告
总糖和还原糖的测定实验报告实验目的，通过对食品中总糖和还原糖的测定，了解食品中糖的含量，为食品质量的控制提供依据。
实验原理，总糖是指食品中所有可被酶解的糖的总和，包括还原糖和非还原糖。
还原糖是指具有还原性的糖，如葡萄糖、果糖等。
本实验采用菲林试剂法测定总糖含量，采用费林试剂还原糖法测定还原糖含量。
实验仪器，分光光度计、恒温水浴器、移液器、比色皿等。
实验步骤：1. 样品制备，将食品样品加入适量蒸馏水中，搅拌均匀后，过滤得到样品溶液。
2. 总糖测定，取一定量样品溶液，加入菲林试剂，放入恒温水浴器中加热，使其发生显色反应。
待溶液冷却至室温后，用分光光度计测定吸光度，计算出总糖含量。
3. 还原糖测定，取一定量样品溶液，加入费林试剂，放入恒温水浴器中加热，使其发生显色反应。
待溶液冷却至室温后，用分光光度计测定吸光度，计算出还原糖含量。
实验结果：经过实验测定，样品A总糖含量为10g/100g，还原糖含量为8g/100g；样品B总糖含量为15g/100g，还原糖含量为12g/100g。
实验结论：通过本次实验，我们成功测定了食品样品中的总糖和还原糖含量。
可以看出，样品B的总糖和还原糖含量均高于样品A，说明样品B中的糖分含量较高。
这对于食品生产企业来说，可以根据实验结果进行产品质量的控制和调整，确保产品符合标准。
总结：本实验通过菲林试剂法和费林试剂还原糖法测定了食品样品中的总糖和还原糖含量，为食品质量控制提供了重要依据。
同时，本实验还展示了分光光度计在食品分析中的重要应用，为食品科学研究提供了参考。
通过本次实验，我们对总糖和还原糖的测定方法有了更深入的了解，也为今后的实验研究提供了宝贵的经验。
希望在今后的实验中能够继续努力，不断提高实验技能，为科学研究贡献自己的力量。
总糖测定方法之斐林试剂法
Key words：Fehling’s reagent; Total sugar; Food
中图分类号：TS207.3
总糖是指具有还原性的葡萄糖、果糖、乳糖、戊 糖和在测定条件下能水解为还原性单糖的蔗糖、麦芽 糖和可能部分水解的淀粉 [1]。碳水化合物也称总糖。 适量的总糖有助于人体健康 [2]。测试总糖的方法有很 多，最常见的为斐林试剂法。本文对用斐林试剂法测 定样品的总糖进行汇总，以供同行参考。
1 食品中总糖的测试
1.1 肉制品、冷冻饮品和豆奶粉中总糖的测定 GB/T 9695.31-2008[3]、GB/T 31321-2014[4] 和
GB/T 18738-2006[5] 方法中测定总糖的斐林甲、乙液， 葡萄糖标准溶液的配制一致，可归为一类。斐林甲、 乙液混合后，得到酒石酸钾钠铜复杂化合物，此化合 物与还原糖共沸，生成红色氧化亚铜，氧化亚铜再与 亚铁氰化钾反应生成可溶性的无色络合物，之后稍微
实验二 总糖和还原糖的测定1
实验二总糖和还原糖的测定1实验目的：通过化学反应，定量测定果汁、蜂蜜和其他实验样品中的总糖和还原糖含量。
实验原理：总糖是指以糖为主要成分的物质。
而还原糖是指那些具有还原性质，并能够将还原铜离子还原为沉淀的单糖和双糖类糖分。
还原糖在碱性溶液中容易还原铜离子，产生还原铜沉淀，这种化学反应叫做费林试剂反应。
2.费林试剂反应原理费林试剂是由铜离子(Cu2+)、草酰肼和钠碱组成的混合物。
在碱性条件下，草酰肼被还原成草酸，同时将 Cu2+ 还原为 Cu+ 并生成棕色的沉淀。
当样品中加入碱性费林试剂时，还原性糖分（如果糖、葡萄糖等）能够将 Cu2+ 还原为 Cu+，从而生成棕色的沉淀。
这个过程是一个可以定量的过程，衡量沉淀的多少就能够推算出溶液中还原性糖分的含量。
另外，总糖含量的计算是通过使用苏丹III试剂实现的。
实验器材：1.量筒2.移液管3.试管4.洗瓶5.恒温摇床6.温度计1.果汁2.蜂蜜3.标准葡萄糖溶液4.碳酸钠5.草酰肼6.苏丹III试剂7.浓硫酸实验步骤：1.总糖的测定：取一定量的果汁样品，用量筒量取 10 毫升到试管中，再加入 2 - 3 滴苏丹III 试剂，晃动均匀。
在搅拌下加入 5 - 10 滴浓硫酸，并再次使试管均匀地摇晃。
静止 5 分钟，颜色稳定后，在光谱计中读取样品的吸光度。
取一定量的果汁样品，用量筒量取 10 毫升入 50 毫升锥形瓶中，再加入 15 毫升碳酸钠。
轻轻振摇均匀后，再将 5 毫升草酰肼溶液滴入锥形瓶中。
接下来，用标准葡萄糖溶液调节光密度值，以达到与实验样品相同的吸光度比值。
从光谱计中记录每个样品反应的吸光度。
实验注意事项：1.实验操作要认真，保证实验片刻的稳定，确保实验数据的准确。
2.注意光源是光谱计的重要组成部分，因此要记得把光源打开，以确保性能。
总结：通过总糖和还原糖的测定，我们可以测定样品的果糖、葡萄糖等还原糖分的含量，以及样品中糖类总含量的含量。
这对于分析果汁和蜂蜜等样品非常有用，也为食品行业提供了重要的检测方法和标准。
斐林法测还原糖实验报告
一、实验目的1. 熟悉斐林试剂的配制方法。
2. 掌握斐林试剂检测还原糖的原理及操作步骤。
3. 学会使用斐林试剂测定食品中还原糖的含量。
二、实验原理还原糖是指具有还原性的糖类，如葡萄糖、果糖、乳糖等。
斐林试剂是一种用于检测还原糖的氧化剂，其原理是还原糖可以将斐林试剂中的二价铜离子还原为一价铜，生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
根据氧化亚铜沉淀的颜色深浅，可以判断还原糖的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：葡萄糖标准溶液、梨汁、斐林试剂、氢氧化钠、硫酸铜、酒石酸钾钠、蒸馏水等。
2. 实验仪器：电子天平、移液管、滴定管、试管、烧杯、水浴锅、酒精灯、比色皿等。
四、实验步骤1. 斐林试剂的配制（1）称取34.6g酒石酸钾钠，100g氢氧化钠，溶于500ml蒸馏水中，定容至1000ml，得到斐林试剂乙液。
（2）称取0.05g硫酸铜，溶于500ml蒸馏水中，加0.5ml硫酸，得到斐林试剂甲液。
2. 还原糖的测定（1）取10ml梨汁于试管中，加入5ml斐林试剂甲液和5ml斐林试剂乙液，混匀。
（2）将试管放入水浴锅中加热，观察颜色变化。
（3）记录溶液颜色变化过程，根据颜色变化判断还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 实验结果根据实验观察，梨汁溶液在加热过程中，由蓝色变为棕色，最后出现砖红色沉淀。
2. 结果分析梨汁中含有还原糖，如葡萄糖、果糖等。
在斐林试剂的作用下，还原糖将二价铜离子还原为一价铜，生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
根据颜色变化，可以判断梨汁中还原糖的含量。
六、实验结论通过斐林法测定梨汁中的还原糖含量，结果表明梨汁中含有还原糖。
斐林法是一种简单、灵敏的检测还原糖的方法，适用于食品、药品等领域中还原糖含量的测定。
七、实验讨论1. 斐林试剂的配制过程中，注意准确称取试剂，避免误差。
2. 实验过程中，加热温度和时间要控制得当，以免影响实验结果。
3. 斐林试剂检测还原糖时，可根据溶液颜色变化，对比标准曲线，准确判断还原糖的含量。
还原糖和总糖的测定
还原糖和总糖的测定
还原糖和总糖的测定是食品分析中常用的方法之一。
还原糖是指能够被还原剂还原成相应糖醇的单糖和少量的双糖，如葡萄糖、果糖、麦芽糖等。
而总糖则包括还原糖和不可还原糖，如蔗糖、乳糖、淀粉等。
还原糖的测定方法主要是利用还原剂将还原糖还原成相应的糖醇，然后用比色法或滴定法测定还原糖的含量。
其中，最常用的还原剂是菲林试剂，它能够将还原糖还原成蓝色的菲林铁络合物。
而比色法则是利用分光光度计测定菲林铁络合物的吸光度，从而计算出还原糖的含量。
总糖的测定方法则需要先将不可还原糖水解成还原糖，然后再进行还原糖的测定。
水解方法主要有酸水解和酶水解两种。
其中，酸水解是将样品加入稀酸中，加热反应，使不可还原糖水解成还原糖。
而酶水解则是利用相应的酶将不可还原糖水解成还原糖。
常用的酶有葡萄糖酸酶、乳糖酶等。
总糖的测定方法也可以利用比色法或滴定法进行测定。
其中，滴定法是将样品加入酸性溶液中，加入菲林试剂，然后用氢氧化钠溶液滴定至蓝色消失，从而计算出总糖的含量。
而比色法则是将样品加入酸性溶液中，加入菲林试剂，然后用分光光度计测定菲林铁络合物的吸光度，从而计算出总糖的含量。
还原糖和总糖的测定方法是食品分析中常用的方法之一。
通过这些方法，可以准确地测定食品中的糖类含量，为食品质量控制和营养评价提供重要的依据。
总糖的测定
2.3.2 样品溶液正式测定：吸取5.0mL斐林氏甲
液 及 5.0mL 乙 液 ( 先 加 乙 液 再 加 甲 液 ) ， 置 于
150mL锥形瓶中，加蒸馏水25mL，从滴定管中
滴加比预测体积少1~2mL的样品溶液，加入玻
璃珠3~5粒，控制在2min内加热至沸，然后趁沸
继续以每2秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色褪去，
4.变色过程：
样液由深蓝色→蓝紫色→紫红色→红 色 或由深蓝色→蓝紫色→黄绿色→黄红 色 如果滴定后样品液的颜色变浅后又再 变深，说明滴定过量，需重新滴定。
5.滴定时反应液不变色的原因及处理：
可能是样液含糖量过少或斐林试剂太 浓； 应加大称样量；
或减少稀释倍数； 或减少斐林试剂的用量，可各取1～ 3mL， 计算时按比例折算。
实验一 总糖的测定
1. 实验原理
斐林试剂法是利用斐林试剂的甲、乙液混合后， 甲液的硫酸铜与乙液的氢氧化钠作用生成天蓝色的氢 氧化铜沉淀，该沉淀在碱性溶液中与乙液的酒石酸钾
钠反应生成复杂的化合物（酒石酸钾钠铜）。酒石酸
钾钠铜是一种氧化剂，糖类的水解物都含有具还原性 的醛基或是酮基，在碱性条件下煮沸能使斐林试剂中 的二价铜离子还原为一价的氧化亚铜。根据斐林试剂 完全还原所需的糖量，计算出样品的总糖含量。
2. 操作方法
2.1 样品处理：将样品在组织捣碎机中捣成匀浆，称取约10--
-20g样品，溶解后置于250mL容量瓶中，加蒸馏水至刻度，
混匀，静置,过滤60-70mL。 2.2 样品转化：吸取处理好的样液50mL于100mL容量瓶中， 加盐酸5mL，摇匀。置水浴中加热，使溶液在2~2.5min内升 温至70℃，保持7.5~8min，使全部加热时间为10min。取出
826-实验三食品中还原糖的测定——费林氏容量法
实验三食品中还原糖的测定——费林氏容量法一、实验内容用直接滴定法（费林氏容量法）测定食品中的还原糖含量。
二、实验目的通过本实验，加深用直接滴定法（费林氏容量法）测定食品中的还原糖含量的原理的理解；掌握其操作要点，熟练基本操作技术。
三、实验原理样品经除去蛋白质后，在加热条件下，直接滴定已标定过的费林氏液（碱性酒石酸铜溶液），费林氏液（碱性酒石酸铜溶液）被还原析出氧化亚铜。
以次甲基蓝为指示剂，在终点稍过量的还原糖立即将氧化型蓝色的次甲基蓝还原为无色的还原型次甲基蓝。
根据样品消耗体积，计算还原糖量。
GB5009.7-85，本方法适用于所有食品中还原糖的检测。
检出限0.1mg。
四、仪器和试剂（一）仪器：100mL、250mL烧杯，1000mL、250mL容量瓶，25mL酸碱滴定管，250mL锥形瓶，滤纸，玻璃珠，电炉，铁架台，漏斗等。
（二）试剂除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。
1．费林甲液（碱性酒石酸铜甲液）2．费林乙液（碱性酒石酸铜乙液）3．乙酸锌溶液4．亚铁氰化钾溶液5．盐酸6．葡萄糖标准溶液五、实验步骤（一）试剂配置1．费林甲液（碱性酒石酸铜甲液）称取15 g硫酸铜（CuSO4·5H2O），及0.05 g次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000mL。
2．费林乙液（碱性酒石酸铜乙液）称取50 g酒石酸钾钠与75 g氢氧化钠，溶于水中，再加入4 g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000mL，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
3．乙酸锌溶液称取21.9 g乙酸锌，加3 mL冰乙酸，加水溶解并稀释至100 mL。
4．亚铁氰化钾溶液称取10.6g亚铁氰化钾，用水溶解并稀释至100mL。
5．葡萄糖标准溶液精密称取1.000 g经过80 ℃干燥至恒量的葡萄糖（纯度在99%以上），加水溶解后加入5mL盐酸（如果即配即用就不加），并以水稀释至1000mL。
此溶液相当于1 mg/mL葡萄糖。
（二）样品处理：吸取20mL液体样品，置于250mL容量瓶中，加50mL蒸馏水，摇匀后慢慢加入5mL乙酸锌及5mL亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀，静置0.5h。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
总糖和还原糖测定方法较多，如3，5—二硝基水杨酸法、碱性铜试剂法、蒽酮比色法、斐林氏法等。
这里只介绍斐林氏法。
一、目的
学习掌握生产实践中常用的快速定糖方法。
二、原理
还原糖在碱性溶液中能将Ag+，Hg+，Cu2+，Fe（CN）3-等金属离子还原，而糖本身则氧化成各种羟酸，利用这一特性可以对还原糖进行定量测定。
本实验采用斐林试剂热滴定法，氧化剂是斐林试剂，它是由甲乙两种溶液组成，甲液中含有硫酸铜、次甲基蓝；乙液中含有氢氧化钠、酒石酸钾钠和亚铁氰化钾（黄血盐）。
当甲乙两液混合时，硫酸铜和氢氧化钠作用形成氢氧化铜沉淀，由于溶液中存在酒石酸钾钠，它和氢氧化铜形成了可溶性络合物。
酒石酸络铜（Ⅱ）钾钠盐在与还原糖共热时，二价铜离子即被还原成一价的氧化亚铜红色沉淀。
此氧化亚铜与试剂中亚铁氰化钾反应生成可溶性的亚铁氰酸络铜（Ⅰ）钾盐。
Cu2O + K4Fe(CN)6 + 3 H2O →K2Cu2Fe(CN)6 + 2 KOH + 2 H2O
亚铁氰化钾亚铁氰酸络铜（Ⅰ）钾盐
斐林试剂中二价铜的还原力比次甲基蓝强，因此所滴入的标准葡萄糖溶液首先使二价铜还原，只有当二价铜被还原完毕后，才能使次甲基蓝（甲烯蓝）还原为无色，测定中以此作为滴定终点。
在测定时先做一对照管（不加样品），用标准葡萄糖滴定求知一定体积斐林试剂中二价铜和次甲基蓝的量，即测定对照管消耗的标准葡萄糖量（A）。
再做样品管，样品中还原糖消耗斐林试剂中一部分二价铜，剩余的量再用标准葡萄糖来滴定，即样品消耗的标准葡萄糖量（B）。
将（A）减去（B）就可求得样品中还原糖量。
三、器材及试剂：
1．器材：
①山芋粉②广范试纸pH1～12。
③吸管5毫升（×4），10毫升（×2）④容量瓶100毫升（×3）
⑤烧杯150毫升（×1），100毫升（×1）⑥三角烧瓶250毫升（×6）
⑦滴定管25毫升（×1）⑧双孔橡皮塞
⑨电炉300W（×1）⑩天平。
2．试剂
①斐林氏甲液：15克硫酸铜、0.05克次甲基蓝溶于1升蒸馏水中。
②斐林氏乙液：50克酒石酸钾钠、54克氢氧化钠、4克亚铁氰化钾溶于1升蒸馏水中。
③0.1%标准葡萄糖溶液：准确称取干燥恒重的葡萄糖1.00克，加入少量蒸馏水溶解后，再加8毫升浓盐酸（防止微生物生长），蒸馏水定容至1升。
④6mol·L-1盐酸；
⑤6 mol·L-1氢氧化钠。
四、操作步骤
1．还原糖提取：称取2.00克山芋粉，在小烧杯中先用少量水调成糊状，再加入70毫升水，50℃保温15分钟，取出后定容至100毫升，经过滤，取滤液进行还原糖测定。
2．总糖水解：称取1.00克山芋粉在小烧杯中，加6mol·L-1盐酸10毫升，蒸馏水15毫升，在沸水浴上加热半小时，取出后用6mol·L-1氢氧化钠中和至中性，然后定容至100毫升，经过滤，取滤液10毫升稀释至100 毫升，即为稀释1000倍的总糖水解液。
3．糖的定量测定：按图1-1装置热滴定仪器。
在三角瓶中按下表加入各试剂。
在加入斐林试剂甲液和乙液后，为了保证处于沸腾状态下快速滴定（整个滴定时间在三分钟内完成），在滴定前先从滴定管中加入适量的葡萄糖液，然后在沸腾状态下以4～5秒一滴的速度，继续自滴定管加入葡萄糖液，直至蓝色消失停止滴定。
由于还原型的次甲基蓝遇到空气后又能转为氧化型，而恢复蓝色，因此当滴定到蓝色刚消失，出现黄色时应立即停止滴定，如果再现蓝色切勿继续滴定。
五、计算：。