茶树菇氨基酸提取工艺优化及组成成分的HPLC分析_詹忠根
茶树菇营养成分的提取与检测研究进展
茶树菇营养成分的提取与检测研究进展摘要综述茶树菇营养成分的提取与检测的研究进展,包括多糖、矿物质、氨基酸、脂肪和脂肪酸、抗氧化活性物质等方面内容,以为茶树菇的综合开发利用提供参考。
关键词茶树菇;营养成分;提取;检测茶树菇(Agrocybe cylindracea)属担子菌亚门层菌纲伞菌目粪锈伞科田头菇属,是一种木生食用菌,又名柱状田头菇、杨树菇、茶薪菇、柱状环绣伞等,生长于温带至亚热带地区,其味道鲜美,气味香浓,营养丰富,为食用价值很高的食用菌。
茶树菇还有很好的药用价值,有清热、平肝、明目、利尿、健脾之功效,因而有“中华神菇”之称。
人们对茶树菇进行了广泛的研究,现就其营养成分的提取与检测研究进展综述如下。
1多糖茶树菇中含有丰富、活性独特的多糖[1],约占43.6%,其子实体多糖含量为4.7 g/100g干重,深层发酵菌丝体胞内含量为3.0 g/100g干重,发酵滤液中含有22 g/L 胞外多糖。
从茶树菇子实体中提取纯化出一种称为“Cylinda”的糖蛋白和2种多糖,一种为高分子质量的AG-HN1;另一种为低分子质量的异型多糖AG-HN2,AG-HN1有显著地降血糖作用。
茶树菇中的真菌水溶性多糖[2],分别是AP1、AP2、AP3、AP4、AP5,其中AP2含量最高,是由D-葡萄糖、D-甘露糖、D-木糖和半乳糖醛酸组成的酸性多糖,AP2为白色结晶,易吸潮,不溶于有机溶剂,易溶于水,水溶液呈透明粘稠状。
通过单因素及正交试验探讨纤维素酶酶解辅助提取茶树菇子实体多糖最佳工艺条件为:料液比1∶80,酶浓度1.5%,提取液pH 值6.0,提取温度50 ℃,这种方法的提取率比普通水浴法高出70.47% [3]。
使用微波辅助提取多糖,得出影响因素的顺序依次为料液比>微波时间>微波功率,通过统计分析得到微波提取多糖回归方程Y=3.363 3+0.507 5 X1+0.250 0 X2-0.277 5 X3+0.372 1 X12+0.192 5 X1X2-0.007 5 X2X3-0.097 9 X22-0.1675 X2X3+0.712 1 X32,线性相关系数为0.995 4。
茶树菇营养成分的提取与检测研究进展
基 酸 组成 分析 结 果表 明 ， 丝体 和子 实 体均 含 有 ｌ 菌 ６种 氨 基
酸 ， 含 ８种 人 体 必 需 的氨 基 酸 ， 别 占总 量 的 ３ ．％和 富 分 ４８
３ ． ％。 中对儿 童 生 长发 育和 智 力 开发 有 促进 作 用 的 赖 ２７ 其 ９
氨 酸 和 精 氨 酸 分 别 占总 量 的 ９４ １８７ 。 过 对 茶 树 菇 ．％￣ ．％ 通 Ｊ
Ｙ 一 Ｗ ２液 体 深 层 培 养 的 优 化 条 件 及 其 子 实 体 氨 基 酸 成 分 进 行 分 析 ． 现 野 生 茶 树 菇 含 有 ９种 非 必 需 氨 基 酸 和 ７种 必 发 需氨基 酸 。
现 代农 业科 技
２１ ０ ０年第 ２ ０期
食品科 学
茶 树菇 营养 成 分 的提 取 与检 测 研 究 进展
王建 伟 陈武 强 杨海 文 田光 辉
（ 两理 工学 院 化 学 与 环 境 科 学 学 院 ， 西 汉 中 ７ ３０ ） 陕 陕 ２０ １
摘 要 综述 茶树 菇 营 养成 分 的提取 与检 测 的研 究进展 ， 包括 多糖 、 物质 、 基 酸 、 肪和 脂 肪 酸 、 氧化 活性 物质 等 方 面 内容 ， 矿 氨 脂 抗 以为 茶树菇 的 综合 开发利 用提 供参 考 。 关 键词 茶树 菇 ； 营养 成分 ； 提取 ； 测 检 中 图 分 类 号 ￥ ４ ．９；Ｓ ７ 文 献 标 识 码 Ａ ６ ６１ Ｔ ２ ０ 文 章 编 号 １０ — ７ ９（０ ０）０ ０ ３ — １ ０ ７ ５ ３ ２ １ ２ — ３ ５ ０
茶 树 菇 （ ｇｏｙ ｅｃ ｌ ｄａ ｅ ） 担 子 菌 亚 门层 菌 纲 伞 Ａ ｒｃ ｂ ｙｉ ｒｃ ａ 属 ｎ 菌 目粪锈伞 科 田头 菇 属 ， 一种 木 生食 用菌 ， 是 又名 柱状 田头 菇 、 树 菇 、 薪菇 、 状 环绣 伞 等 ， 长于 温带 至 亚热 带 地 杨 茶 柱 生 区 ， 味道 鲜 美 ， 味香 浓 ， 养 丰富 ， 其 气 营 为食 用价 值 很 高 的食
茶树菇粗多糖水提醇沉工艺优化研究
茶树菇粗多糖水提醇沉工艺优化研究【摘要】：目的：优化筛选茶树菇粗多糖水提醇沉工艺。
方法：以茶树菇多糖得率为考察指标，采用正交设计法对提取工艺中水提取次数、提取时间、提取次数三个因素进行优化研究；再对醇沉的工艺中醇沉液的乙醇浓度三个因素进行优化研究。
结果：茶树菇粗多糖提取以加水量10倍、提取时间2小时，提取次数3次为最优化工艺；醇沉液的乙醇浓度为85%时醇沉效果最佳。
【关键词】：茶树菇；粗多糖；水提醇沉；工艺优化茶树菇(Agrocybe aegerita)隶属于担子菌门、层菌纲、伞菌目、粪锈伞科、田蘑属，又名柱状田头菇。
中医学认为茶树菇性平甘温，有祛湿、利尿、健脾胃等功效。
其主要成分多糖，具有抗衰老，降低胆固醇，增强免疫作用，防癌和抗癌等功效，是一种极具开发潜力的真菌[1]。
但目前，对其多糖提取分离方法的系统研究报道极少，因此文章对茶树菇粗多糖的提取分离方法的工艺流程进行了系统的考察。
1．仪器与材料仪器：751G分光光度计（上海分析仪器厂）；电子天平（上海精科天平厂）；旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）等。
材料：茶树菇（自购）；葡萄糖标准品（上海化学试剂公司）；苯酚（成都化学试剂厂）；其它试剂均为分析纯。
2．方法与结果2.1 多糖含量测定方法的确定2.1.1 葡萄糖标准溶液的配制取葡萄糖0.25g，精密称定，加蒸馏水定容于250ml容量瓶中，摇匀，精密吸取10ml置100ml容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，作为对照品溶液。
2.1.2 标准曲线的绘制分别精密吸取对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml置干燥具塞试管中，分别加水使成2.0ml，再分别加人4％苯酚溶液1.0ml摇匀，最后迅速加入浓硫酸7.Oml，充分振摇，在4O℃水浴中加热30min，取出置冷水浴中放5min，在490nm处进行比色测定，同时做空白对照，测定吸光度。
以吸光度对葡萄糖浓度作线性回归,得回归方程：y=5.64x-0.0522 （R=0.9997）。
茶树菇中氨基酸的HPLC分析
Ｓｃｉ ｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎ Ｏ Ｉ ｎｏｖ ｉ Ｈｅｒ ｌ Ｏ１ ｇｙ ｎ ａｔ ｏｎ ａｄ
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农 业 科 技
茶树菇 中氨基酸的 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ分析
、
． １
詹 忠根 （ 浙江经贸职 业技术学院 浙 江杭 州 ３ １ ） １ ０ ０ ８
摘 要： 本文采 用 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ对茶树 菇中氨鲞酸的组成及含量作 了曩 定分析 ， ｊ 结果表 明： 茶树菇中氨基酸总含量 为 １ ８ ４ ／ ｇ 其 中非必需氨基 ．ｇ ｋ ， ５
酸 １ ， 量 为 ９ ． ｇ ｇ， 占整 个 疆 试 组 分 的 ５ ． ７ 必 需 氨 基 酸 ７种 ， 量 为 ６ ． Ｏ ／ｋ 占整个 测试 组 分 的 ４ ． ３ ０种 含 １ ５ ／ｋ ｊ ７ ７ ％， 含 ６ ９ ｇ ｇ， ２ ２ ％。
５ ．ｍｌ ００ 。进样 前用 ０ ４ｕ 滤膜滤过 ， ．５ ｒ ｎ 采用邻 苯二 甲醛柱前 衍生化处理 。
氯 基聚 名栋 含量 ｋ ） 氨 基 酸 名 称 ｇ 爸 氮 酸
ｌ １ ２ ００
含重《 ｋ
， ６
苯 丙 氨酸
Ｐｈ ｅ
３结果与分析
３ １工作 曲线制作 ． 将标准氦基酸溶液配置成不同浓度的标准 系￣ （Ｏ ，０ ，０ ，０ ８０ ｌ０ ｍｏ／Ｌ ，等 ｆ１Ｏ ２０ ４ ０ ６０，０ ，Ｏ Ｏｕ ｌ ） Ｊ 体积（Ｏ１ １ｕ） 准确进样 ， 到标准品色谱 图（ １， 得 图 ） 以峰面 积为纵坐标 ， 以浓 度为横坐标做标 准曲
Ｉ 甘氨酸 硼、 ｔ
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１ １ ０
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茶树菇提取物的组分分析_徐静娟
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&7 鼠 李 糖 ； +7 阿 拉 伯 糖 ； ’7 木 糖 ； 57 甘 露 糖 ； 17 葡 萄 糖 ； /7 半 乳 糖； $7肌醇
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食品工业科技
食品营养
表* 单糖 鼠李糖 阿拉伯糖 木糖 甘露糖 葡萄糖 半乳糖 茶树菇多糖中单糖组成 相对质量分数（ \） 质量分数（ \）
摘
构成茶树菇多糖的单糖为葡 白多糖， 分子量 /&(012 ， 萄糖、 半乳糖、 阿拉伯糖、 甘露糖、 鼠李糖、 木糖等单 糖， 基本结构以 ") （ &!+ ） ) 支链（ &!* ） )")1) 葡聚糖 为主链 3&4&&5。
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材料与方法
材料与仪器
茶树菇 浙江金元真菌多糖制品有限公司提
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茶树菇中营养成分分析
广 东 化 工
ＷＷＷ． ｇ ｄ ｃ ｈ ｅ ｌ ｎ． Ｃ Ｏ Ｉ Ｙ ｌ １ ２ ３
第４ ４卷 总第 ３ ５ Ｉ 期
茶树菇 中营养成分分析
张 瑶 ，李 风 ，罗 婷 ， 肖骆 敏 ， 区婉 澄
（ 林 久。 ’ ： 球 院 化学 与药 学 系．ｒ 尔 珠河 ５ １ ９ ０ ４ １ ）
Ａ ｎａ ｌ ｙｓ ｉ ｓ ｏ ｆ Ｎｕ ｔ ｒ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎａ ｌ Ｃｏｍ ｐｏ ｎｅ ｎｔ ｓ ｉ ｎ Ａｇ ｒ ｏ ｃ ｙ ｂｅ Ａｅ ｇ ｉ ｒ ｉ ｔ
Ｚｈ ａ ｎ ｇ Ｙａ ｏ Ｌ ｉ Ｆ ｅ ｎ ｇ ， Ｌ ｕ ｏ Ｔ ｉ ｎ ｇ ， Ｘｉ ａ ｏ Ｌ ｕ ｏ ｍｉ ｎ ． Ｑｕ Ｗａ ｎ ｃ ｈ ｅ ｎ ｇ
（ Ｄｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ Ｏｆ （ 、 ｈ ｅ ｍｉ ｓ ｔ ｒ ｙ Ａｎ ｄ Ｐｈ ａ ｌ ｍａ ｃ ｙ Ｚｈ ｕ ｈ ａ ｉ Ｃｏｌ ｌ ｅ ｇ ｅ Ｏｆ Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ Ｕｎｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ． Ｚｈ ｕ ｈ ａ ｉ ５Ｉ ９ ０ ４ｌ ， Ｃｈｉ ｎ ａ ） Ａｂｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：Ｔｈ ｉ ｓ ｐ ａ ｐ ｅ ｒ ｓ ｕ ｎ ｌ ｎ ｌ ａ ｒ ｉ ｚ ｅ ｄ ｔ ｈｅ ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ｏ ｒ ｔ ｈ ｅ ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ Ｏｉ ｌ ｔ ｈ ｅ ｄｏ ｍｅ ｓ ｔ ｉ ｃ ａ ｎ ｄ ｆ ｏｒ ｅｉ ｇ ｎ ｓ ｃ ｈ ｏｌ ａ ｒ ｓ ｏｆ Ａｇ ｒ ｏ ｃ ｙ ｂｅ Ａｅ ｇ ｉ ｒ ｉ ｔ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｚ ｅ ｔ ｈ ｅ ｎｕ ｔ ｒ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎａ ｌ ｃ ｏ ｍｐ ｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏｆ Ａｇｒ ｏｃ ｙｂ ｅ Ａｅ ｇｉ ｒ ｉ ｔ ， ｌ ｉ ｓ ｔ ｔ ｈ ｅ ｎ ｌ ａ ｉ ｉ ｌ ｒ ｍｔ ｒ ｉ ｅ ｎ ｔ ｓ ｏｆ Ａｇ ｒ ｏ ｃ ｙ ｂ ｅ Ａｅ ｇ ｉ ｒ ｉ ｔ ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｅ ｆｅ ｃ ｔ ｏｆ ｃ ｏｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ， ｐｒ ｏ￣ ｉ ｄｅ ｔ ｈ ｅ ｂａ ｓ ｉ ｓ ｉ ｂｒ ｌ ｆ ｉ ｒ ｔ ｈ ｅ ｒ ｄ ｅ ｖ ｅ ｌ ｏ ｐｍｅ ｎ ｔ ａ ｎ ｄ ｕｔ ｉ ｌ ｉ ｚ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏｆＡｇ ｒ ｏ ｃ ｙ ｂ ｅ ａ ｅ ｇｉ ｒ ｉ ｔ ． Ｋｅ ｙ ｗｏｒ ｄｓ ： Ａｇ ｒ ｏ ｃ ｙ ｂ ｅ Ａｅ ｇｉ ｒ ｉ ｔ ： Ｎｕ ｔ ｒ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎａ ｌ ｃ ｏ ｍｐ ｏ ｎ ｅ ｎ ｔ ｓ ； Ａｎ ａ ｌ ｙｓ ｉ ｓ
高效液相色谱法测定高酰基结冷胶中乙酰基和甘油酰基含量
高效液相色谱法测定高酰基结冷胶中乙酰基和甘油酰基含量曹琳;朱莉;詹晓北;郑志永;吴剑荣【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2015(036)014【摘要】建立高效液相色谱分别测定结冷胶中乙酰基和甘油酰基含量的方法.通过水解方法将酰基从结冷胶分子中游离出来,酸化为乙酸和甘油酸(或酸根离子),醇沉将结冷胶除去,高效液相色谱检测有机酸的含量,再根据有机酸与相应酰基的分子质量关系,用内标法,并以丙酸作为内标物,计算得到2种酰基的含量.使用HPX-87H色谱柱,以5 mmol/L硫酸溶液作为流动相,在柱温35℃,流速0.6 mL/min条件下,利用紫外检测器进行检测,检测波长210nm.结果表明,此方法可同时定量2种目的物,20 min内可完成测定,且灵敏度高,重复性和稳定性良好.实验测得本实验室生产的结冷胶中甘油酰基和乙酰基的质量分数分别为9.94％、3.29％,甘油酰基加标回收率为97.76％,相对标准偏差为0.59％,乙酰基加标回收率为93.49％,相对标准偏差为1.29％.【总页数】6页(P59-64)【作者】曹琳;朱莉;詹晓北;郑志永;吴剑荣【作者单位】江南大学生物工程学院,糖化学与生物技术教育部重点实验室,江苏无锡 214122;江苏瑞光生物科技有限公司,江苏无锡 214125;江南大学生物工程学院,糖化学与生物技术教育部重点实验室,江苏无锡 214122;江南大学生物工程学院,糖化学与生物技术教育部重点实验室,江苏无锡 214122;江南大学生物工程学院,糖化学与生物技术教育部重点实验室,江苏无锡 214122【正文语种】中文【中图分类】TS227;O657.72【相关文献】1.高效液相色谱法测定椰油酰基谷氨酸钠中的月桂酰基谷氨酸含量 [J], 李忠军;黄芳;吴惠勤;孟巨光2.高效液相色谱法测定去乙酰基-7-氨基头孢烷酸的含量 [J], 丁海平;刘媛媛;朱科;郭云英3.气相色谱-质谱法测定食品中3-乙酰基-2,5-二甲基噻吩的含量 [J], 简德威; 熊含鸿; 郑悦珊; 洪泽淳; 陈科4.高效液相色谱法测定化妆品中乙酰基六肽-8的含量 [J], 毛善巧; 谢佳爱; 黄春青; 罗梦活5.高效液相色谱法测定2-氯-4-硝基苯基-β-D-半乳糖苷和2-氯-4-硝基苯基-N-乙酰基-β-D-氨基葡萄糖苷含量及其稳定性的研究 [J], 王玉洁;张莉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC_ELSD法快速检测白茶等3种茶叶中L_茶氨酸的含量
HPLC-ELSD 法快速检测白茶等3种茶叶中L-茶氨酸的含量王汉领1，宗素艳2，陆斌2，万红贵1*（1．南京工业大学生物与制药工程学院，江苏南京210009；2．南京同凯兆丰生物科技有限公司，江苏南京210009）摘要［目的］为L-茶氨酸提取制备提供可靠的检测手段。
［方法］采用高效液相色谱蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD ）快速定量测定白茶、碧螺春、翠竹中L-茶氨酸的含量。
［结果］试验表明，在反相C 18色谱柱上，以0．15%三氟乙酸（含0．06%七氟丁酸）水溶液－乙腈溶液（88ʒ12）作为流动相，能有效检测L-茶氨酸，L-茶氨酸浓度在0．2 1．0mg /ml 时，其峰面积（Y ）与相应的浓度（X ）呈线性关系，线性方程为Y =2ˑ10－7X +0．0057，相关系数为0．9996。
L-茶氨酸的平均回收率为99．55% 100%，相对标准偏差为0．39% 1．00%。
［结论］该方法精密度、准确度好，稳定性高，能简便、快速、准确地测定茶叶中L-茶氨酸的含量。
关键词HPLC-ELSD ；七氟丁酸；L-茶氨酸；茶叶中图分类号S37文献标识码A 文章编号0517－6611（2011）34－21323－02Rapid Detection of L-theanine in Three Kinds of Tea with HPLC-ELSDWANG Han-ling et al （College of Life Science and Pharmacy ，Nanjing University of Technology ，Nanjing ，Jiangsu 210009）Abstract ［Objective ］To provide reliable detection methods for extracting and preparing L-theanine．［Method ］High Performance Liquid Chromatography-Evaporative Light Scattering Detection （HPLC-ELSD ）was used to quantitatively detect the L-theanine content in white tea ，Biluochun and Cuizhu．［Result ］On the C 18column in reversed phase column ，with 0．15%trifluoroacetic acid （containing 0．06%heptaflu-orobutyric acid ）in aqueous solution-acetonitrile （88ʒ12）as mobile phase ，L-theanine could be effectively detected．The detection limit concen-trations of L-theanine was 0．2－1．0mg /ml ，the corresponding concentration （Y ）and peak area （X ）were linear related ，the linear equationwas Y =2ˑ10－7X +0．0057，the correlation coefficient was 0．9996，the average recoveries of L-theanine was 99．55%to 100%and relative standard deviation was 0．39%－1．00%．［Conclusion ］The method was precise ，accurate ，highly stable ，simple ，convenient and rapid for the quantitative determination of L-theanine form the extracted liquid of teas．Key words HPLC-ELSD ；Heptafluorobutyric acid ；L-theanine ；Tea作者简介王汉领（1984－），男，安徽临泉人，助理工程师，硕士，从事微生物发酵酶转化法生产L-茶氨酸工艺等的研究，E-mail ：wanghanling31232@163．com 。
茶树菇核苷酸提取工艺优化及氧化伤害防护效应研究
茶树菇核苷酸提取工艺优化及氧化伤害防护效应研究茶树菇(Agrocybe cylindracea)是一种集保健食疗于一身的天然食用菌。
研究表明,茶树菇不仅含有各种人体必需的氨基酸,还含有丰富的B族维生素和多种矿物质,具有抗氧化、治疗高血压的作用。
近年来还发现茶树菇含有增强人体免疫、抗癌能力的活性物质。
本文以茶树菇子实体为原料,对其核苷酸分离提取工艺、体外抗氧化及抗辐射活性进行了研究。
采用超声波辅助提取核苷酸,利用正交实验优化提取工艺,得到茶树菇核苷酸的最佳提取条件为:超声功率140 W,超声时间25 min,液料比30:1,水浴时间2.0h,核苷酸得率为4.80 %。
采用微波辅助提取核苷酸,响应面分析法优化提取工艺,得到茶树菇核苷酸的最佳提取条件为:微波功率495W,微波时间7min,液料比18:1,水浴浸提时间2.0h,核苷酸得率为4.53 %。
采用研磨珠辅助提取核苷酸,响应面分析法优化提取工艺,得到茶树菇核苷酸的最佳提取条件为:研磨时间为12 min ,液料比为51:1,研磨珠装载量为12.5 %,核苷酸得率为6.94 %。
以核苷酸得率为指标,对几种提取工艺进行比较,可知研磨珠法辅助提取核苷酸得率最高。
对茶树菇核苷酸进行总还原力、清除羟基自由基(·OH)能力、清除超氧阴离子(·O2-)能力等抗氧化指标进行研究。
结果发现,茶树菇核苷酸具有较强的抗氧化活性。
建立由紫外辐射引起脂质过氧化损伤模型,进行茶树菇核苷酸抗脂质过氧化能力的研究,结果发现茶树菇核苷酸对由紫外辐射引起脂质过氧化有较强的抑制作用。
在此基础上,以结肠癌细胞HT-29为载体,建立体外辐射模型,研究茶树菇核苷酸的体外抗辐射能力。
结果表明茶树菇核苷酸有一定的辐射防护功能。
同时还发现茶树菇核苷酸与辐射伤害对HT-29的抑制具有协同作用。
针对茶树菇这些特点,选取几种常见的食用菌:茶花菇、金钱菇、山元菇、鸡腿菇、榛蘑提取核苷酸,进行总还原能力及清除ABTS自由清除能力、抗辐射功能的研究。
茶树菇中降压活性蛋白提取工艺优化_伍善广
其中，IP 为 浸 提 液 对 ACE 的 活 性 抑 制 率 ，A0 为 反应空白组马尿酸 的 含 量 ，A1 为 加 入 浸 提 产 物 后 反 应体系中马尿酸的含量。
酶活单位定义：1 单位酶活定义为在 37 ℃、1 min 内催化 HHL 形成 1 μmol 马尿酸的酶量。
EP%= m1 ×100 m2
其中，EP 为提取率，m1、m2 分别为浸提液和原料 中蛋白质的质量。 1.2.3 HPLC 分 析 茶 树 菇 蛋 白 质 提 取 液 对 ACE 的 抑 制 效 果 ACEI 的 体 外 活 性 是 根 据 Cushman 和 Cheung 提 出 的 检 测 原 理 ［7］， 即 利 用 ACE 与 三 肽 Hip-His-Leu 反应生成的马尿酸（Hip）和二肽 His-Leu 来定量，其中大多以马尿酸的生成量来定量。 本文采 用 HPLC 法分析茶树菇提取液的体外活性［8］。 ACE、 HHL 底物用 pH=8.3 的硼酸缓冲液溶解。 实验在 1.5 ml 离心管中进行，每次测试的总体积为 200 μl，其中 含有适量样品提取液、硼酸缓冲液和适量 ACE 溶液， 在 37 ℃恒温水浴保温 10 min，随后加入 5 mmol HHL 开始反应，在 37 ℃恒温水浴中保温 40 min，加入 200 μl （HCl）=1 mol/L 的盐酸中止反应， 反应液离心 15 min 后， 取上清液用 HPLC 分析浸提液对 ACE 的抑 制活性。
1 材料和方法 1.1 材料和仪器
茶树菇干品（农贸市场购买，福建产），马尿酰组 氨 酰 亮 氨 酸 （Hip-His-Leu，HHL）、 血 管 紧 张 素 转 化 酶 （ACE）、马尿酸（HA）均购于 Sigma 公司，其他化学试 剂为国产分析纯。高速离心机（Sigma）；高速万能粉碎 机 （FW100， 天 津 市 泰 斯 特 仪 器 有 限 公 司 ）； 恒 温 水 浴
中药渣栽培食用菌中氨基酸含量的测定与分析
中药渣栽培食用菌中氨基酸含量的测定与分析金茜;曾启华;李华刚;文光均;张素英【摘要】研究了中药渣栽种的食用菌中氨基酸的成分及含量。
食用菌样品经酸水解蛋白质技术预处理后，采用氨基酸自动分析仪进行检测分析，结果表明：中药渣栽种的食用菌中氨基酸种类齐全，氨基酸总量达21.34 g/100g，其中必需氨基酸的含量为9.01g/100g，含量最高的是亮氨酸（1.77g/100g），以后依次是缬氨酸（1.43 g/100g）、赖氨酸（1.21g/100g）、苯丙氨酸（1.18g/100g）；用药渣栽种的食用菌中游离氨基酸的含量高达20.70g/100g，谷氨酸含量高达3.33g/100g，天冬氨酸达2.17g/100g，丰富多样的氨基酸的检出可为深入探讨食用菌独特的风味提供重要参考。
%Components and contents of Amino Acids in edible fungi planted with Chinese medicine residue were researched in this ar-ticle. Detection and analysis were achieved by Automatic amino acid analyzer, after pretreatment of edible fungi samples, using Tech-nology of acid-hydrolysis amino acid. According to the results, the amino acids in edible fungi are very rich, totaled 21.34 g/100g, in which the content of essential amino acids were 9.01 g/100 g, such as leucine has the maximum content with 1.77g/100g;the second is valine with 1.43 g/100g;then lysine and phenylalanine with 1.21and 1.18 g/100g respectively. Free amino acids Totaled 20.70g/100g, glutamate and aspartic acid were 3.33 and2.17g/100g.It could provide very useful conference for studying the special fla-vor from the edible fungi.【期刊名称】《遵义师范学院学报》【年(卷),期】2015(000)001【总页数】3页(P103-105)【关键词】中药渣;食用菌;氨基酸【作者】金茜;曾启华;李华刚;文光均;张素英【作者单位】遵义师范学院黔北特色资源应用研究实验室;遵义师范学院黔北特色资源应用研究实验室;遵义师范学院黔北特色资源应用研究实验室;贵州百花医药股份有限公司贵州遵义563000;遵义师范学院黔北特色资源应用研究实验室【正文语种】中文【中图分类】S646食用菌是一种可供食用的大型真菌，为侧耳属[1]，含有多种矿物质，营养价值较高。
HPLC对酸茶中儿茶素及游离氨基酸组分含量的测定
HPLC对酸茶中儿茶素及游离氨基酸组分含量的测定肖秀丹;黄友谊;钟家成;黄延政【摘要】采用高效液相色谱法对腌制型酸茶中的儿茶素组分及游离氨基酸组分进行了研究.结果表明,酸茶中儿茶素单体的相对含量变化与其他发酵类茶产品中的儿茶素单体变化不一样,酸茶中EC、EGC、ECG、EGCG、GCG、GA发酵后最高含量分别为24.29、72.78、15.8、41.04、7.82、25.71 g∕kg.经过发酵,酯型儿茶素含量下降,非酯型儿茶素含量上升,GA含量大幅增加.检测结果显示,酸茶中的游离氨基酸组分和含量发生了不同程度的变化,18种氨基酸中绝大部分种类含量增加,7种人体必需氨基酸含量均增加,2种鲜味氨基酸含量也增加.通过对酸茶的部分内含成分进行分析,希望能为酸茶产品的开发提供参考.%The catechins and free amino acids of acid tea by anaerobic solid-state fermentation were determined by using HPLC. The results show that the change of relative contents of catechins in acid tea is different from that in other fermented tea products. The contents of EC,EGC,ECG,EGCG,GCG and GA in acid tea were 24.29g∕kg,72.78 g∕kg,15.8 g∕kg,41.04 g∕kg,7.82 g∕kg,25.71 g∕kg respectively. By anaerobic solid-state fermentation,the content of ester catechins decreased, the content of non esterified catechins increased and the content of GA increased significantly. The result showed the components and contents of free amino acids have changed differently. The contents of 18 kinds of amino acids and 7 essential amino acids increased. The content of 2 flavor amino acids also increased. Based on the analysis of some components of acid tea, the paper want to offer some help for the development of acid tea products.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2018(057)009【总页数】5页(P92-96)【关键词】HPLC;酸茶;儿茶素;游离氨基酸【作者】肖秀丹;黄友谊;钟家成;黄延政【作者单位】湖北省宜昌市夷陵区特产技术推广中心/国家茶叶产业技术体系宜昌综合试验站,湖北宜昌443100;华中农业大学园艺林学学院园艺植物生物学重点实验室,武汉430070;湖北省宜昌市夷陵区特产技术推广中心/国家茶叶产业技术体系宜昌综合试验站,湖北宜昌443100;湖北省宜昌市夷陵区特产技术推广中心/国家茶叶产业技术体系宜昌综合试验站,湖北宜昌443100【正文语种】中文【中图分类】O657.7+2;S571.1酸茶作为一种独特的茶产品，一直以来在中国、泰国和缅甸等国家被人们食用或饮用。
茶树菇提取物抗氧化性的研究
茶树菇 ( Agrocybe cylindracea) 又名杨树菇 ,是一种食用价 值很高、 兼有药用价值的伞菌 ,具有调节人体免疫作用、 抗肿 瘤、 抗氧化、 降血糖等多重功效
[1 ]
照 20 min ,核黄素即因光化反应产生 O2 - ・。然后在此体系中 加入 NBT ,使其浓度达到 1 × 10 - 4 mol/ L 。光照核黄素产生的
发生器 ;ZF21 型三用紫外分析仪 ;LD422A 型离心机 ; 电热恒 温水浴锅 ( 北京长安科学仪器厂) ; ZDS210 型光照度计 ( 上海 嘉定学联仪表厂) ;反应暗箱 ( 自制) 。③ 试剂。无水乙醇 ,抗 坏血酸 (Vc) ,磷酸氢二钠 ,磷酸二氢钠 ,硫酸铜 ,过氧化氢 ,三 氯乙酸 ( 所有试剂均分析纯) ; 核黄素 , 甲硫氨酸 , 氮蓝四唑
摘要 为更好地开发利用茶树菇。采用氮蓝四唑 (NBT) 光化还原法、 抗坏血酸 - Cu 2 + - H2O2 体系法和亚油酸体系法 , 研究茶树菇提取 - ・ 物清除超氧自由基 O2 、 羟基自由基・ OH 和脂过氧自由基 ROO・ 的效果。在配制的不同质量浓度的茶树菇提取物溶液中 ,在一定的浓度 范围内 ,茶树菇提取物对超氧自由基 O2 - ・、 羟基自由基・ OH 和脂过氧自由基 ROO・ 的清除率随着浓度的升高呈上升趋势。质量浓度分别 为 17. 78 、 4. 67 、 12. 82 mg/ ml 时 ,茶树菇提取物对 O2 - ・、 ROO・ 和・ OH 的清除率最高 ,依次为 69. 29 % 、 63. 59 % 、 90. 26 % 。茶树菇提取物有较 强的抗氧化能力 ,作为天然的抗氧化剂具有良好的开发前景。 关键词 茶树菇 ; 提取物 ; 抗氧化性 中图分类号 Q946 文献标识码 A 文章编号 0517 - 6611 (2007) 30 - 09683 - 02
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表 ２ 茶树菇游离氨基酸浸提条件筛选直观分析表
实验号
１ ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８ ９ Ｋ１ Ｋ２ Ｋ３ Ｐ１ Ｐ２ Ｐ３ Ｒ
Ａ １ １ １ ２ ２ ２ ３ ３ ３ ３４．４５ ３５．４６ ３５．９０ １１．４８３ １１．８２０ １１．９６７ ０．３３７
因素
Ｂ
Ｃ
１
１
２
２
３
３
１
２
２
３
３
１
１
３
２
１
３
２
３６．０２ ３３．６２
１１．１１３
１１．７４７
１２．４１０
１．２９７
１８２ Ｎｏ． １０． ２００８
细胞内氨基酸易与溶液中的氨基酸浓度达到动态平 衡， 且起催化作用的酸少， 从而使氨基酸提取率降 低， 而料液比过大时， 过量的酸会使蛋白质水解生
０．０
２．０ ２．４５０
３．３２３
４．０
３．９９６
４．６８０
６．０ ５．２９２ ５．８１３
相关系数 ｒ ０．９９７５ ０．９９８４ ０．９９９６ ０．９９４６ ０．９９８０ ０．９９８０ ０．９９８５ ０．９９１４ ０．９９８９ ０．９９９７ ０．９９８０ ０．９９８２ ０．９９８２ ０．９９８６ ０．９９８５ ０．９９９８
Ｋｅｙ ｗｏｒ ｄｓ： Ａｇｒｏｃｙｂｅ Ｃｈａｘｉｎｇｕ； ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ； ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ； ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｂｙ ＨＰ ＬＣ
茶树菇（Ａｇｒｏｃｙｂｅ Ｃｈａｘｉｎｇｕ）是一种具有 较 高 营 养 价值的珍稀食用菌， 历来被认为是延年益寿的上品， 具有抗衰老、美容、补肾滋阴、健脾胃、提高人体免
［１７］ 娄在祥，张有林，王 洪 新．超 声 波 协 同 酶 法 提 取 黑 木 耳 多 糖食品工业．２００７（１）：２９－ ３１
［１８］ 刘富梁，金卫根，梁华正，等．酶法在中药提取中的研究进 展［Ｊ］．时珍国医国药，２００６，１７（７）：１１５２－ １１５３
Ｎｏ． １０． ２００８ １８１
提取物与应用
关键词： 茶树菇； 氨基酸； 提取 ＨＰＬＣ 分析
中图分类号： ＴＳ ２０１．１
文献标志码： Ａ
文章编号： １００５－ ９９８９（２００８）１０－ ０１８１－ ０３
Ｓ ｔｕｄｙ ｏｎ ｅ ｘｔｒａ ｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ａ ｎｄ ｄｅ ｔｅ ｒｍｉｎａ ｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｍｉｎｏ ａ ｃｉｄｓ ｉｎ ａ ｇｒｏｃｙｂｅ ｃｈａ ｘｉｎｇｕ ｂｙ ＨＰ ＬＣ
Ａｒｇ Ａ＝１３９３８．２３Ｃ＋３３５８４４．３
Ｔｈｒ Ａ＝５６９８２．４１Ｃ＋１１０５９０．１
Ａｌａ Ａ＝３９０６８．４４Ｃ＋２６９２３４．４
Ｐｒｙ Ａ＝４５９２７．８９Ｃ＋７９３２７．１７
Ｔｙｒ Ａ＝６００６６．４８Ｃ－ ２２２４５．４
Ｖａｌ Ａ＝５２２５１．１７Ｃ＋１２８１６５．６
Ｍｅｔ Ａ＝６１４７４．１８Ｃ－ ３３６０８
２ 结果与分析
２．１ 茶树菇游离氨基酸最佳浸提条件筛选 ２．１．１ 标 准 曲 线 制 作 分 别 吸 取 ０、 ０．２、 ０．４、 ０．６、 ０．８、１．０ ｍＬ 标 准 氨 基 酸 溶 液 于 ６ 支 试 管 中 ， 用 蒸 馏 水补足至 １ ｍＬ， 再加入 １ ｍＬ 乙酸－ 乙酸钠缓冲溶液， １ ｍＬ 茚 三 酮 显 色 液 ， ０．１ ｍＬ ０．１％的 抗 坏 血 酸 溶 液 ， 充 分 混 匀 后 盖 住 试 管 口 ， 于 １００ ℃沸 水 浴 中 加 热 １５ ｍｉｎ， 取出后迅速用自来水冷却， 静置 ５ ｍｉｎ， 加入 ３ ｍＬ ６０％乙醇稀释， 并充分摇匀， 最后于 ５７０ ｎｍ 处测 其 吸 光 度 ， 以 Ａ５７０ 为 纵 坐 标 ， 氨 基 酸 含 量 为 横 坐 标， 作标准曲线， 得回归方程： Ｙ＝２．１５２Ｘ－ ０．０２４， ｒ＝ ０．９８６７。 ２．１．２ 茶 树 菇 游 离 氨 基 酸 最 佳 浸 提 条 件 筛 选 氨 基 酸提取正交实验的各因素直观分析结果表明： 影响 氨基酸提取因素的顺序为提取温度＞乙酸浓度＞液料 比 ＞提 取 时 间 ， 最 佳 提 取 条 件 为 Ａ３Ｂ３Ｃ２Ｄ３， 即 在 ９０ ℃下 ， 以 １∶２０ 的 料 液 比 用 １０％乙 酸 提 取 ５ ｈ。 分 析 其原因是： 温度高低影响到分子运动的剧烈程度， 高温使蛋白质的肽键易于发生断裂； 乙酸浓度低， 蛋白质水解不充分， 但浓酸会造成提取物的破坏使 氨基酸提取率降低， 故应慎重选择； 料液比太小，
７５２ 型紫外可见分光光度计： 上海分析仪器厂生 产； 精密分析天平（０．００１）， ＳＰＤ－ １０ＡＶ 高效液相色谱 仪： 日本岛津， 包括四元泵， 真空脱气机， 自动进样 器， 柱温箱， 紫外检测器。 １．３ 茶树菇中氨基酸提取条件优化 １．３．１ 氨基酸标准溶液制备 称取 ８０ ℃下 烘 干 的 亮 氨 酸 ２８．０８ ｍｇ， 溶 于 少 量 １０％异 丙 醇 中 ， 用 １０％异 丙醇定容至 １００ ｍＬ， 混 匀 ， 制 备 标 准 曲 线 时 ， 取 此 溶 液 ５ ｍＬ 用 蒸 馏 水 稀 释 至 ５０ ｍＬ， 即 得 浓 度 为 ３ ｍｍｏｌ／Ｌ 标准氨基酸溶液。 １．３．２ 游离氨基酸提取 通过改变浸提时间、乙酸溶 液的浓度、料液比及浸提温度， 采用 Ｌ９（３４）正 交 设 计 实验对茶树菇游离氨基酸的最佳浸提条件进行筛选 （表 １）。方法是： 将茶树菇于 ６０ ℃干燥箱中烘至恒质 量， 粉碎， 过 ８０ 目筛， 用乙酸溶液提取氨基 酸， 将 提取液离心后用茚三酮显色法检测游离氨基酸的含 量， 提取条件的比较即以茚三酮显色分光光度法测 定的吸光度值以及由吸光度得出的含量为根据。
３３．３２ ３７．４５
３６．４７ ３４．８４
１２．００７ １１．２０７
１１．１０７ １２．４８３
１２．１５７ １１．５８０
１．０４０ １．２７６
提 取 率 ／％ Ｄ
１
１０．５４
２
１１．５５
３
１２．３６
３
１３．４５
１
１０．３５
２
１１．６６
２
１２．０３
３
１１．４２
１
１２．４５
３３．３４
３５．２４
３７．２３
取 ５ ｈ。通过 ＨＰＬＣ 对氨基酸的组成及含量分析表明： 茶树菇中含有 １７ 种氨基酸， 总含量为 １５８．４ ｇ／
ｋｇ， 其中非必需氨基酸 １０ 种， 含量为 ９１．５ ｇ／ｋｇ， 占整个测试组分的 ５７．７７％， 必需氨基酸 ７ 种， 含量
为 ６６．９０ ｇ／ｋｇ， 占整个测试组分的 ４２．２３％。
表 １ 游离氨基酸最佳浸提条件筛选因子和水平
因素
水
平 浸提时间／ｈ 乙酸溶液的浓度／％ 料液比 浸提温度／℃
Ａ
Ｂ
Ｃ
Ｄ
１
３
５
１∶１０
７０
２
４
７．５
１∶２０
８０
３
５
１０
１∶３０
９０
１．４ 游离氨基酸组成及含量测定 １．４．１ 色 谱 条 件 高 效 液 相 色 谱 仪（日 本 岛 津 ： ＳＰＤ－ １０ＡＶ， 包括四 元 泵 ， 真 空 脱 气 机 ， 自 动 进 样 器 ， 柱 温 箱 ， 紫 外 检 测 器 ， Ｃ１８ 色 谱 柱）； 流 动 相 ： 水∶甲 醇∶ 乙腈（４２∶２０∶３８）； 流速 １．０ ｍＬ／ｍｉｎ； 柱温 ３０ ℃； 检 测 波长 ２６０ ｎｍ。 １．４．２ 工作曲线制作 将氨基酸标样配置成浓度分别 为 １００、２００、４００、６００、８００、１０００ μｍｏｌ／Ｌ 的溶液，
DOI:10.13684/ki.spkj.2008.10.067
提取物与应用
茶树菇氨基酸提取工艺优化及 组成成分的 ＨＰＬＣ 分析
詹忠根 （浙江经贸职业技术学院， 杭州 ３１００１８）
摘要： 正交实验表明， 茶树菇氨基酸的最佳提取条件是： 在 ９０ ℃下， 以 １∶２０ 的料液比用 １０％乙酸提
疫力、抗癌等功效。有关茶树菇多糖的分离、纯化与 签 定 的 研 究［１－ ２］， 在 国 内 外 已 有 许 多 报 道 ， 但 未 见 关 于茶树菇氨基酸提取工艺优化、氨基酸组成及含
收稿日期： ２００８－ ０１－ ０６ 基金项目： 湖南省科技厅重点资助项目（２００６ＮＹ２００６）。 作者简介： 詹忠根（１９７１—）， 浙江江山人， 副教授， 主要从事天然产物化学方面的研究。
ＺＨＡＮ Ｚｈｏｎｇ－ ｇｅｎ
（Ｚｈｅ ｊｉａ ｎｇ Ｅｃｏｎｏｍｉｃ ＆ Ｔｒａ ｄｅ Ｐ ｏｌｙｔｅ ｃｈｎｉｃ， Ｈａ ｎｇｚｈｏｕ ３１００１８）
Ａｂｓｔｒ ａｃｔ： Ｔｈｅ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓ ｉｇｎ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｕｓ ｅｄ ｔｏ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ， ｒｅｓ ｕｌｔ ｓ ｈｏｗｓ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ
７．０１０ ８．０
８．７９７ ８．８７６
１０．０
９．８３０ ９．９４１
Байду номын сангаас
９．５４３
１０．３５４ １０．７７２ １０．９２３
１２．０
１１．６９３
１３．０８５
１４．０ １３．７７５
１４．３８９
１５．１５８
１６．０
１６．５４１ １７．２１０
１７．０３８
１８．０
１８．４４６
２０．０
１６．０００
１７．６６１ １７．９０６ １９．３４０
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｉｓ ｔｈｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｆ ９０ ℃ ， ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ｏｒ １０％ ， ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ ｌｉｑｕｉｄ ｔｏ ｓ ｏｌｉｄ ｏｆ ２０ ∶１， ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｏｆ ５ ｈ． Ａｄｄｉｔｉｏｎａｌ， ｔｈｅ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｉｎ Ａｇｒｏｃｙｂｅ Ｃｈａｘｉｎｇｕ ｉｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ＨＰ ＬＣ． Ｔｈｅｒｅ ａｒｅ １７ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ａｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｉｎ Ａｇｒｏｃｙｂｅ Ｃｈａｘｉｎｇｕ， ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｓ １５８．４ ｇ／ｋｇ， ｗｈｉｃｈ ｃｏｎｓ ｉｓ ｔ ｏｆ １０ ｎｏｎｅｓ ｓ ｅｎｔｉａｌ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ（９１．５ ｇ／ｋｇ， ５７．７７％） ａｎｄ ７ ｅｓ ｓ ｅｎｔｉａｌ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ（６６．９０ ｇ／ｋｇ， ４２．２３％）．