CK-MB使用说明书

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CK-MB测定作业指导书

CK-MB测定1 测定方法酶动力学法。

2 测定原理磷酸肌酸＋ ADP（二磷酸腺苷）肌酸激酶肌酸＋ ATPATP ＋葡萄糖己糖激酶葡萄糖-６-磷酸＋ ADP葡萄糖-６-磷酸＋ NADP＋葡萄糖－6－磷酸脱氢酶果糖-６-磷酸＋NADPH ＋ H＋3 标本血清，肝素或EDTA抗凝血浆，处理方法见标本处理程序。

稳定性：20-25℃稳定2天4－8℃稳定7天-20℃稳定4周4 试剂4.1试剂来源：ROCHE配套试剂（详见试剂说明书）。

贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃储存至效期末R1：打开后机上稳定14天R2：打开后机上稳定14天准备：a. R1:将试剂R1与1a互溶后使用。

b. R2:将试剂R2与2a互溶后使用。

4.2 校准物来源：ROCHE配套校准物,具体如下：S1：0.9％的NaClS2: C.f.a.s ck-mb贮存条件：校准物在2-8℃保存可保存至有效期。

准备:直接使用。

定标频率：A试剂盒在仪器上放置28天后 B 试剂批号更换 C 由质控结果决定4.3 质控物来源：Precinorm ck-mb (罗氏正常值质控)Precipath ck-mb (罗氏病理值质控)其它适合的质控品贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。

准备：直接使用。

质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。

质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。

5 仪器ROCHE MODULAR P生化分析仪。

6 上机操作见仪器作业指导书，参数设置见附表。

7 参考范围<24IU/l8 性能指标本法线性范围为5-1500U/L，不准确度允许范围X±20%，不精密度CV=3.7%，灵敏度5 U/L。

9 注意事项9.1 广泛存在于各种组织中的腺苷酸激酶（AK）催化ADP产生ATP，干扰同工酶结果的测定。

9.2 血清CK的活力随温度的升高而增加。

9.3 血清标本出现脂血或黄疸的干扰情况参见抗干扰能力。

CK-MB

美康试剂标准操作程序目录1实验原理和检验目的2标本采集和处理2.1标本种类和采集方法2.2标本处理方法3试剂3.1试剂组成和包装3.2试剂准备3.3试剂稳定性4校准4.1校准品4.2校准品准备4.3校准品稳定性4.4试剂校准周期5质控5.1质控品5.2可接受性判断5.3质控操作6操作7.计算方法8参考值9操作性能9.1精密度9.2线性范围10 结果处理11方法局限性12注意事项13参考文献14 技术服务1实验原理和检验目的本试剂用于人血清或血浆中肌酸激酶同工酶(CKMB)的体外定量测定。

CK 由M和B二个亚单位组成三种的二聚体，CK1（BB）、CK2（MB）、CK3（MM）主要存在于胞浆中，另外血清中还有少量的线粒体同功酶（CKm）。

心肌中CK活力较高（仅次于骨骼肌），其中CK-MB约占13～22%（骨骼肌中＜1%，因此其作为心肌损伤的指标具有特异性。

本试剂盒采用免疫抑制法，用抗人M血清，抑制M亚单位，然后测定剩余的B亚单位活性，乘2即得CK-MB活力。

CK磷酸肌酸+ ADP ———→肌酸+ ATPHKATP+葡萄糖———→葡萄糖-6-磷酸+ADPG-6PDH葡萄糖-6-磷酸+ NADP+ ———→6-磷酸葡萄糖酸+ NADPH340nm测定NADPH的生成速率，计算出CK-MB活力。

2标本采集和处理2.1标本种类和采集方法标本：新鲜无溶血血清。

受检者（体检对象或病人）的准备：对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯。

静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布。

2.2标本处理方法标本要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。

样品采集后要离心标本，吸出血清。

标本应立即测定。

处理样品时要将其当成生物污染品。

3试剂3.1试剂组成3.2试剂准备试剂为液体双试剂，开瓶即可使用，用后及时置于2～8℃避光保存。

3.3试剂稳定性试剂盒贮存2～8℃稳定一年，试剂开盖稳定2周；R1和R2以4:1混匀，即为单一工作试剂。

CK-MB

此文档存档期 1 年保留期 5 年文档编号 ZQZYY-JYK-SH-D-07肌酸激酶同工酶（CKMB）试剂性能分析报告时间: 仪器：操作者：2011-10-20~2011-11-20 日立 7600-020 李洪伟章丘市中医医院正确度评价实测数据标准要求结果利德曼定值血清不同浓度实测均值与靶值之间的偏差最大为 3.92% 利德曼高、低两个水平质控血清实测均值与靶值的偏差<±5%符合要求批内精密度验证实测数据标准要求结果测定高值、低值两个水平质控的日内精密度为：2.77%、0.75%。

厂家说明书中批内精密度最大限为：5%。

符合要求批间精密度验证实测数据标准要求结果测定高值、低值两个水平质控的批间精密度为：1.84%、1.12%。

厂家说明书中批间精密度最大限为：6%。

符合要求线性评价实测数据标准要求结果R2=0.999；呈现良好线性关系。

在 0-1000U/L 浓度范围内，R2>0.996线性范围：0-1000U/L 灵敏度评价实测数据标准要求结果采用蒸馏水作为标本，重复测定 20 次,计算分析灵敏度是 0.00mg/dL 厂家说明书要求分析灵敏度是 0.00mg/dL CK 的分析灵敏度是 0.00U/L特异性评价实测数据标准要求结果当抗坏血酸 <50mg/dl 、直接胆红素 <40mg/dl 、总胆红素 <40mg/dl 、溶血 <100mg/dl、乳糜<1.60%。

肝素抗凝血浆对测试结果无影响。

厂家说明书要求：抗坏血酸 <50mg/dl 、直接胆红素 <40mg/dl 、总胆红素 <40mg/dl、溶血<100mg/dl、乳糜<1.60%。

肝素抗凝血浆对测试结果无影响符合要求系统比对实测数据标准要求结果利德曼试剂与威特曼试剂的相关性是 R2>0.971 利德曼与威特曼试剂的相关性 R2>0.96 二者相关性良好，符合要求第1页共 13 页一、实验材料 ………………………………………………… 3二、实验方案 ………………………………………………… 42.1 正确度 ………………………………………………………… .4 2.2 批内精密度 … ………………………………………………….4 2.3 批间精密度 …………………………………………………… 5 2.4 线性评价 ………………………………………………………..5 2.5 灵敏度评价 …………………………………………………… 5 2.6 特异性评价………………………………………………………5 2.7 系统比对…………………………………………………………5三、实验数据 ………………………………………………… 63.1 正确度 ………………………………………………………… 6 3.2 批内精密度 … ………………………………………………….6 3.3 批间精密度 …………………………………………………… 7 3.4 线性评价 ………………………………………………………..8 3.5 灵敏度评价 …………………………………………………… 9 3.6 特异性评价………………………………………………………10 3.7 系统比对…………………………………………………………11四、结论 ……………………………………………………… 13五、附录 A （利德曼校准液溯源性说明以及企业标准）附录 B （总蛋白临床意义）附录 C （利德曼总蛋白试剂盒、校准液、质控液说明书）附录 D （利德曼总蛋白试剂盒 SOP 文件）附录 E （利德曼总蛋白试剂盒日立 7600 配套参数表）附录 F （总蛋白试剂盒与校准液注册证）附录 G （实验原始数据）第2页共 13 页生化试剂盒：北京利德曼生化股份有限公司肌酸激酶同工酶（CKMB）试剂盒批号：质控血清：北京利德曼生化股份有限公司 CKMB 质控品批号：测定仪器：日立 7600-020 全自动生化分析仪第3页共 13 页2.1 正确度按实验室常规操作程序，进行 CKMB 项目定标，然后按照常规样本血清检测程序测定利德曼高、低两个水平质控品，使用前充分混匀，每份质控品重复测定 3 次，计算 3 次重复测定的均值。

心肌同工酶(CK-MB)测定操作规程(SOP)

心肌同工酶(CK-MB)测定操作规程（SOP）一、用途本产品用于体外定量测定血清样品中肌酸激酶同工酶（CKMB）的活性。

二、临床意义（一）概述肌酸激酶是由M型和B型两种亚基组成的二聚体，结合形成三种CK同工酶：CK-BB、CK-MB、CK-MM。

骨骼肌中大多数为CK-MM；胃肠道和脑组织中以CK-BB为主；心肌中以CK-MB为主。

当心肌损害，特别是发生心肌梗塞时，血液中CK-MB水平升高。

胸疼发生后4-6小时CK-MB水平开始升高，12-24小时到达高峰，48小时后回到基质水平。

（二）临床意义CK－MB主要存在于心肌中，约为心肌总CK的１4％,血清CK-MB上升先于总活力的升高，24小时达峰值，36小时内其波动曲线与总活力相平行，至48小时消失。

（三）医学决定水平15U/L: 高于此值，且有持续性临床表现（胸痛、心电图显示特异性改变等），提示为急性心肌梗塞，应及时进行治疗。

90U/L: 高于此值多由于非心肌性CK-MB释放，如恶性肿瘤，应采取其他有关诊断方法，予以确诊。

三、检验原理磷酸肌酸 + ADP −−→−-B CK肌酸 + ATP ATP + 葡萄糖−−→−HK葡萄糖-6-磷酸 + ADP葡萄糖-6-磷酸 + NADP −−−−→−PDH G 66-磷酸-葡萄糖 + NADPH + H+用特异的抗CK-M 抗体抑制CK-M 的活性，在340nm 波长处，通过连续监测吸光度的上升速率(△A ／min)，测定CK-B 的活性，将CK-B 活性测定值乘以2，即可计算出样品中CK-MB 的活性。

四、样品血液样品原则上采集晨起空腹血（禁食12小时）；患者处于平静、休息状态，减少患者由于运动、饮食带来的影响；静脉采血时患者应取坐位或卧位；止血带使用后1分钟内采血，回血后立即松开；正确使用抗凝剂；防止溶血；防止过失性采样。

样品运送过程中应防止过度振荡、防止样品容器的破损、防止样品被污染、防止样品及唯一性标志的丢失和混淆，防止样品对环境的污染、水分蒸发。

CKMB

肌酸激酶同工酶MB（CKMB）的检测一、项目名称、检验方法名称1. 项目名称：肌酸激酶同工酶MB（CKMB）的检测2. 检验方法名称：化学发光法二、方法学原理：肌酸激酶同工酶MB测定采用双位点夹心化学发光免疫分析法，其采用的技术原理如下：第一步：将样本与包被着CK-MB单克隆抗体的超顺磁性磁微粒（磁珠）以及CK-MB单克隆抗体-碱性磷酸酶标记物添加到反应管中，经过孵育，样本中的CK-MB和包被在磁珠上的CK-MB单克隆抗体结合，同时CK-MB单克隆抗体-碱性磷酸酶标记物与样本中CK-MB另一位点结合。

反应完成后，磁场吸住磁珠，洗去未结合的物质。

第二步：将化学发光底物（3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧环乙烷，AMPPD）添加到反应管内，发光底物AMPPD能有效地被碱性磷酸酶所分解, 脱去一个磷酸根基团，生成不稳定的中间产物，该中间产物通过分子内电子转移产生间氧苯甲酸甲酯阴离子，处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子从激发态返回基态时，产生化学发光，由光电倍增管对反应所产生的光子数进行测量，所产生的光子数与样本内CK-MB的浓度成正比。

样本内分析物的量由定标曲线来确定。

三、试剂品牌、代号、包装规格、内含物1、试剂品牌：深圳迈瑞2、包装规格：2*503、内含物：Ra试剂：包被着抗CK-MB抗体的超顺磁性微粒，0.2 g/L；Tris缓冲液，50 mmol/L；ProClin 300，0.5 g/L；叠氮钠，0.9 g/L；Rb试剂：抗CK-MB抗体-碱性磷酸酶标记物，3 mg/L；MES缓冲液，50 mmol/L；ProClin 300，0.5 g/L；叠氮钠，0.9 g/L4、储存条件及有效期：2~8℃保存，有效期365天。

上机使用后，在2~8℃的贮存环境下有效期为28天四、仪器品牌、型号：迈瑞CL1000i五、具体操作步骤（包括主要的仪器测定参数）5.1校准：5.1.1校准品来源：试剂厂家的标准液。

肌酸激酶同工酶(CK—MB)测定试剂盒(胶乳免疫比浊法) 产品技术要求上泰

肌酸激酶同工酶（CK-MB）测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）1.性能指标1.1外观外观应符合以下要求：a）试剂盒应组分齐全，完整，液体无渗漏；包装标签文字符号应清晰。

b）R1：无色至淡黄色液体。

c）R2：乳白色液体。

d）校准品/质控品：淡黄色冻干粉，复溶后为淡黄色透明溶液，无浑浊、无未溶解物。

1.2装量液体试剂装量要求净含量不低于标示量。

1.3水分含量校准品、质控品的水分含量应不超过5%。

1.4空白限空白限不高于1.00 ng/mL。

1.5检出限检出限应不高于3.00 ng/mL。

1.6分析灵敏度试剂盒测试浓度为25.00 ng/mL被测物时，吸光度差值ΔA≥0.05。

1.7线性范围1.7.1试剂盒在[3.00,180.00] ng/mL区间内，线性相关系数∣r∣≥0.990。

1.7.2在[3.00,30.00] ng/mL区间内，线性绝对偏差应不超过±3.00 ng/mL；在(30.00，180.00] ng/mL范围内，线性相对偏差应不超过±10%。

1.8重复性批内变异系数（CV）应≤8%。

1.9批间差批间相对极差（R）应≤10%。

1.10准确度回收率应在90%～110%。

1.11分析特异性1.11.1交叉反应1）含浓度不低于500 ng/ mL CK-MM的零浓度CK-MB样本，检测结果不高于3.00 ng/mL。

2) 含浓度不低于100 ng/ mL CK-BB的零浓度CK-MB样本，检测结果不高于3.00 ng/mL。

1.11.2干扰物质当胆红素≤40 mg/dL、血红蛋白≤200 mg/dL、脂肪乳剂≤0.5%、类风湿因子≤130 IU/mL时，对试剂检测结果的偏差影响在±10%以内。

1.12量值溯源应明确分析物的量值溯源。

1.13校准品赋值结果及其不确定度的表示方式应使用规范的表示方式，主要表示方式可选择：a）赋值结果±扩展不确定度；b）赋值结果，扩展不确定度。

CK-MB试剂盒说明书(罗氏)

11821598 322 100测试主要用途用免疫学方法定量测定人血清或血浆中肌酸激酶同工酶MB含量。

电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys和cobas e免疫测定分析仪。

临床应用1、2、3肌酸激酶（CK）是一种二聚体酶，它有四种不同的形式：线粒体同工酶和胞浆同工酶CK-MM （肌型）、CK-BB（脑型）和CK-MB。

血清中CK-MB的测定值是诊断心肌缺血（例如急性心肌梗塞、心肌炎等）的重要指标。

CK-MB 在心脏症状出现3－8小时后即可检出并且可持续较长时间，这取决于病情经过。

CK-MB还可出现在其它临床条件下，例如横纹肌溶解症和中风。

实验室诊断方面，测定总体CK、肌钙蛋白T和/或肌红蛋百有助于鉴别这些临床疾病。

CK-MB测定的灵敏度与取样时间有关。

因此跟踪测定非常有意义。

Elecsys Ck-MB测定法采用了两种不同的直接对抗人CK-MB的单克隆抗体。

检测原理双抗体夹心法，总检测时间：18分钟●第一次孵育：15μl标本、生物素化的抗CK-MB单克隆抗体和钌（Ru）a标记的CK-MB特异性单克隆抗体一起反应生成抗原抗体夹心复合物。

●第二次孵育：添加包被链霉亲和素的磁珠微粒后，该复合物通过生物素和链霉素之间的反应结合到微粒上。

●将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。

未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。

给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。

●仪器自动通过2点校正的定标曲线计算得到检测结果。

a)Tris(2,2’-bipyridyl) ruthenium(II)-complex (Ru(bpy){23}三联吡啶钌试剂－工作溶液M 包被链霉亲和素的磁珠微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml；包被链霉亲和素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐剂。

R1 生物素化的抗CK-MB抗体（灰盖），1瓶，10mL：生物素化抗CK-MB单克隆抗体（小鼠）1.2mg/L；磷酸盐缓冲液100mmol/L，pH值7.0；防腐剂。

肌酸激酶MB型同工酶测定方法操作规程

肌酸激酶MB型同工酶（CK-MB）测定方法操作规程【产品名称】通用名称：肌酸激酶MB型同工酶（CK-MB）测定试剂盒（免疫抑制法）使用说明书【预期用途】该试剂盒采用免疫抑制法，用于体外定量测定人血清中肌酸激酶MB型同工酶的活力。

【检验原理1CK-MB由CK-M和CK-B亚单位组成。

抗CK-M 抗体完全抑制了CK-MM （肌酸激酶的主要活性局部）和CK-MB 中的CK-M亚单位的活性。

再检测CK的活性为余下的CK-B的活性，相当于一半CK-MB活性。

所以将结果乘以2,为CK-MB 的活性。

【主要组成成份】Ri：咪哩缓冲液100 mmol/L葡萄糖20 mmol/LN-乙酰半胱氨酸（NAC）0.2 mmol/L乙酸镁10 mmol/LEDTA 2 mmol/LNADP 2 mmol/LAMP5 mmol/L己糖激酶>4 U/mL羊抗人多克隆抗体2000U/LCK-MM R2：磷酸肌酸30 mmol/L2 mmol/LADPG-6-PDH >2.8U/mL*不同批号试剂盒各组分请勿混用。

【储存条件与有效期】未开启的试剂盒在2〜8°C保存有效期为一年。

试剂开瓶后应避光保存，在2°C~8°C可稳定30天。

试剂不可冰冻。

【适用仪器】迈瑞BS系列全自动生化分析仪、日立7180型全自动生化分析仪、日立7060型全自动生化分析仪、日立7600P自动生化分析仪、奥林巴斯AU400型全自动生化分析仪、奥林巴斯AU2700型全自动生化分析仪、贝克曼库尔特AU680 型全自动生化分析仪。

假设需自动生化分析仪应用参数，请随时和公司联系。

建议用户在不同仪器上使用本产品时，根据实验室情况进行验证。

【样本要求】新鲜血清或血浆，采集后及时测定，应防止溶血和污染。

样本在2°C ~8 °C保存7天内或25 °C保存24小时活性损失2%。

【检验方法】试剂准备R1：即用液体试剂R2：即用液体试剂测定条件样本管一空白管*试剂和样本量可根据不同生化分析仪要求按比例适当增减。

肌酸激酶同工酶(CK-MB)测定试剂盒(免疫抑制法)产品技术要求beihuakangtai

肌酸激酶同工酶（CK-MB）测定试剂盒（免疫抑制法）适用范围：本试剂盒用于定量检测人体血清样本中肌酸激酶同工酶的活性。

1.1产品型号试剂1：80ml×1；试剂2：20ml×1。

试剂1：80ml×2；试剂2：20ml×2。

试剂1：80ml×3；试剂2：20ml×3。

试剂1：80ml×4；试剂2：20ml×4。

试剂1：60ml×1；试剂2：15ml×1。

试剂1：60ml×2；试剂2：15ml×2。

试剂1：60ml×3；试剂2：15ml×3。

试剂1：60ml×4；试剂2：15ml×4。

试剂1：40ml×1；试剂2：10ml×1。

试剂1：40ml×2；试剂2：10ml×2。

试剂1：40ml×3；试剂2：10ml×3。

试剂1：40ml×4；试剂2：10ml×4。

2.1 外观：均为澄清溶液，外包装完整。

2.2 净含量：不少于标示值。

2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度：A≤0.60。

（在37℃、340nm波长、1cm光径条件下）2.3.2试剂空白吸光度变化率：△A/min≤0.01。

（在37℃、340nm波长、1cm光径条件下）2.4 分析灵敏度：浓度为400U/L时,吸光度变化率△A/min在0.01～0.2范围内。

2.5 线性区间2.5.1线性相关系数：[1，800]U/L范围内，线性相关系数r≥ 0.990。

2.5.2线性偏差：[1，100] U/L时，绝对偏差不超过±10U/L；（100,800] U/L 时，相对偏差不超过±10%。

2.6 精密度2.6.1 重复性：变异系数（CV）≤10%。

2.6.2 批间差：相对极差≤10%。

2.7 准确度：采用比对试验，相关系数r2≥0.95，[1，100] U/L时，绝对偏差不超过±10U/L；（100,800] U/L时，相对偏差不超过±10%。

肌酸激酶同工酶MB测定试剂盒说明书

肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）说明书【产品名称】通用名称：肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）英文名称：Creatine kinase MB（CLIA）【包装规格】2×30 人份/盒、2×50 人份/盒、2×100 人份/盒【预期用途】用于体外定量测定人体血清或（和）血浆中肌酸激酶同工酶MB 的含量。

肌酸激酶主要催化高能磷酸键从ATP 转移到肌酸，生成磷酸肌酸。

肌酸激酶是二聚体酶，包括骨骼肌CK-MM，脑组织CK-BB，心肌CK-MB 和线粒体肌酸激酶等四种同工酶形式。

CK-MB 分子量80,000，由两个亚单位组成(每个亚基MW= 40000)：亚单位M 表示肌肉型，亚单位B 表示脑型。

CK-MB 主要存在于心肌组织，占CK 总活性的20%，骨骼肌中也有微量分布。

血清中CK-MB 含量对诊断急性心肌梗死、心肌炎等心肌缺血性疾病有重要意义。

CK-MB 在心肌损伤早期即可出现于循环血中，于心肌损伤后2-6 小时开始升高，在12-24 小时内达到峰值，之后降至正常水平(36–72 小时)，CK-MB 测值的升降伴随ECG 演变和胸痛病史。

CK-MB 含量和时间变化，对评估心肌损伤发病时间、梗死体积以及再灌注后损伤有重要意义。

此外，骨骼肌损伤、横纹肌溶解症及中风等疾病中，也伴随有CK-MB 含量升高。

临床诊断上，CK-MB 经常与肌红蛋白和肌钙蛋白I 联合检测。

在心肌损伤相关疾病诊断上，肌钙蛋白I 特异性强，肌红蛋白和CK-MB 早期敏感性高，三者联合检测可以提高诊断的特异性、敏感性。

【检验原理】肌酸激酶同工酶MB 测定采用双位点夹心化学发光免疫分析法，其采用的技术原理如下：第一步：将样本与包被着CK-MB 单克隆抗体的超顺磁性磁微粒（磁珠）以及CK-MB 单克隆抗体-碱性磷酸酶标记物添加到反应管中，经过孵育，样本中的CK-MB 和包被在磁珠上的CK-MB 单克隆抗体结合，同时CK-MB 单克隆抗体-碱性磷酸酶标记物与样本中CK-MB 另一位点结合。

人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)说明书

人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，组织及相关液体样本中肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)的活性。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)水平。

用纯化的人肌酸激酶同工酶MB抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入CK-MB，再与HRP标记的CK-MB抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的CK-MB呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)浓度。

试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：135U/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

肌酸激酶同工酶(CK-MB)测定标准操作规程

肌酸激酶同工酶（CK-MB ）测定标准操作规程1.检验原理：（免疫抑制法）用抗人CK-M 抗体与病人血清共同温育，血清中的CK-M 亚单位全部被抑制，再用测定空白扣除血清中残余的腺苷激酶（AK ），测定剩余的非M-CK 活力，即代表C-BB 和CK-MB 中的B-亚基活力。

由于健康人和心脏、肌肉疾患病人血清中CK-BB 的含量极低，一般忽略不计，此等病人的非M-CK 活力实际上代表CK-MB 中的B 亚基活力。

非M-CK 活力测定方法如下：在抑制CK-M 亚单位后，磷酸肌酸和腺苷-5-二磷酸二钠（ADP.2a N ）在肌酸激酶作用下，生成肌酸和腺苷-5-三磷酸二钠（ATP.2a N ）。

ATP 和葡萄糖在己糖激酶（HK ）催化下，生成6-磷酸葡萄糖（G6P ）.G6P 在6-磷酸葡萄糖脱氢酶作用下脱氢，同时使氧化型辅酶Ⅰ（+NAD ）还原成还原型辅酶Ⅰ（NADH ），后者引起340nm 吸光度的增高。

在340nm 监测NADH 的生成量，即可计算出非M-CK 的活力。

CK-M 亚单位+抗人CK-M 抗体−→−抗体-抗原复合物磷酸肌酸+ADP −−−→−-CKM 非肌酸+ATP ATP+葡萄糖−−−→−己糖激酶ADP+6-磷酸葡萄糖 6-磷酸葡萄糖++NAD −−−→−PDHG 66-磷酸葡萄糖酸+NADH++H 2.试剂主要组成成分3.样本要求：静脉采血后立即分离血清。

新鲜无溶血血清。

在22～25℃保存8小时，2～8℃保48小时，-20℃可保存1年。

样本不可反复冻融！4.检验方法；仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5参考范围：6.检验结果的解释：6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V）的氯化钠溶液稀释样本。

建议最大稀释不超过10倍10-6.2.单位换算：ukat/L=U/L×16.67×37.检验结果的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。

艾威德 AS-420 AS-660 AS-1200 肌酸激酶同工酶(CK-MB)测定试剂盒（免疫抑制

肌酸激酶同工酶(CK-MB)测定试剂盒（免疫抑制法）说明书【产品名称】肌酸激酶同工酶(CK-MB)测定试剂盒（免疫抑制法）【包装规格】a)试剂1：2×40mL试剂2：1×20mLb)试剂1：4×60mL试剂2：2×30mLc)试剂1：2×80mL试剂2：2×20mLd)试剂1：6×40mL试剂2：2×30mL【预期用途】用于体外定量测定人血清中肌酸激酶MB型同工酶的活性。

血清中CK-MB是心肌特异性酶，用于心肌梗死早期诊断。

另外还见于各类型的心脏术后、进行性肌营养不良等。

目前在临床上测定肌酸激酶同工酶主要用于诊断心肌梗塞的辅助诊断[1]。

【检验原理】试剂中加入CK-M的抗体，它能完全抑制CK-M亚基而不影响CK-B亚基的活性。

利用CK的测定原理进行检测即：肌酸磷酸与腺苷二磷酸在肌酸激酶的作用下生成肌酸和腺苷三磷酸，腺苷三磷酸与葡萄糖在己糖激酶的作用下生成葡萄糖－6－磷酸和腺苷二磷酸，葡萄糖－6－磷酸与氧化型辅酶Ⅱ在葡萄糖－6－磷酸脱氢酶作用下生成6－磷酸葡萄糖酸和还原型辅酶Ⅱ。

还原型辅酶Ⅱ在340nm处有特异吸收，通过测定还原型辅酶Ⅱ生成的速率可计算出CK－B亚基的活性。

其结果乘以2即可得出CK-MB的活性。

【主要组成成分】试剂1主要组分缓冲液100mmol/L HK（己糖激酶）≥2KUG-6-PDH（葡萄糖-6-磷酸脱氢酶）≥1.5KU NADP+（氧化型辅酶）2mmol/L NAC（N乙酰半胱氨酸）20mmol/L ADP（腺苷二磷酸钾）2mmol/L二腺苷-5-磷酸10μmol/L葡萄糖20mmol/L抑制CK-MM的抗体≥2KU试剂2主要组分缓冲液100mmol/L肌酸磷酸30mmol/L葡萄糖20mmol/L注：不同批号试剂盒中各组分未经试验不可互换。

【储存条件及有效期】1.试剂原包装在2～8℃储存，有效期为18个月，生产日期、有效期见标签。

CK-MB使用说明书

CK-MB使⽤说明书迈克试剂标准操作程序⽬录1、临床意义2、检测原理3、样品准备4、试剂4.1、试剂盒组成4.2、试剂准备4.3、试剂稳定性4.4、试剂规格5、操作6、校准6.1、校准品6.2、校准品准备6.3、校准品稳定性6.4、校准周期6.5、校准品定值溯源性与不确定度7、质量控制8、分析性能确认8.1、精密度8.2、可报告范围8.3、抗⼲扰能⼒8.4、⽅法学⽐较8.5、参考范围9、安全和警告10、参考⽂献（略）1、临床意义⾎清中肌酸激酶同⼯酶（CKMB）活⼒升⾼是公认的诊断急性⼼肌梗死和确定有⽆⼼肌坏死的重要指标。

特别是对于⼼电图⽆Q波的急性⼼肌梗死和再发性⼼肌梗死，⾎清中CKMB升⾼具有决定诊断的作⽤。

2、检测原理肌酸激酶（CK）主要的同⼯酶包括CKMB、CKBB、CKMM，因为正常⾎清中⼏乎⽆CKBB，抗M亚单位的抗⾎清可以和CKMM及CKMB中的M亚单位形成抗原抗体复合物，从⽽完全抑制M亚单位的酶活性，，将测得的CK 活性值乘以2则代表CKMB的活性。

肌酸激酶（CK）活性的检测原理是：CK催化磷酸肌酸与⼆磷酸腺苷(ADP)反应产⽣三磷酸腺苷(ATP)与肌酸；偶联⼰糖激酶(HK)及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)的催化反应。

HK催化葡萄糖与ATP反应，形成葡萄糖-6-磷酸，G6PDH催化葡萄糖-6-磷酸氧化，形成6-磷酸葡萄糖内酯及NADPH。

NADPH⽣成的速率代表CK活⼒。

磷酸肌酸 + ADP?CK肌酸 + ATP→ATP + 葡萄糖?HK葡萄糖-6-磷酸 + ADP→G66-磷酸-葡萄糖 + NADPH + H+葡萄糖-6-磷酸 + NADP??PDH→3、样品准备样品为空腹⾎清样品稳定性：样品应在低温条件下运输保存，样品中肌酸激酶同⼯酶在2～8℃密闭可稳定2天。

样品要求⽆溶⾎。

样品不宜反复冻融，以免影响酶活性4、试剂4.1、试剂组成R1：检测试剂1咪唑缓冲液（pH6.7） 100.0mmol/L醋酸镁 10.0mmol/LN-⼄酰半胱氨酸 20.0mmol/L磷酸肌酸 30.0mmol/LADP 2.0mmol/LEDTA 2.0mmol/LAMP 5.0mmol/LG-6-PDH >1.5KU/LHK >2.5KU/L⽺抗⼈CK-M抗体（抑制能⼒>2KU/L）R2：检测试剂2NADP 2.0mmol/L葡萄糖 20.0mmol/L4.2、试剂准备R1试剂为即⽤型液体试剂,开瓶装载即可使⽤。

Daudit肌酸激酶同工酶MB（CKMB）（学习资料）

肌酸激酶同工酶MB （CK-MB ）测定试剂盒（免疫抑制法）说明书【产品名称】通用名：肌酸激酶同工酶MB （CK-MB ）测定试剂盒（免疫抑制法）英文名：Creatine Kinase Isoenzymes MB （CK-MB ）Assay Kit （Immuno-inhibition Method ）【包装规格】a) R1：2×50ml ，R2：2×10ml ；b) R1：3×50ml ，R2：3×10ml ；c) R1：4×60ml ，R2：4×12ml ；d) R1：2×60ml ，R2：2×12ml ；e ）R1：6×21ml ，R2：2×14.6ml ；f ）R1：4×60ml ，R2：4×15ml ；g ）R1：4×25ml ，R2：4×5ml ；h ）R1：1×50ml ，R2：1×10ml ；i ）R1：12×20ml ，R2：12×4ml ；j ）R1：2×200ml ，R2：2×40ml ；k ）R1：1×45ml ，R2：1×9ml 。

【预期用途】本试剂盒属于体外诊断试剂，用于定量检测人血清或血浆中肌酸激酶同工酶MB （CK-MB ）活性。

【检验原理】肌酸激酶（CK ）同工酶根据亚单元的不同，可分为CK-MB 、CK-MM 等，用特殊的抗CK-M 的抗体使血清中CK-M 亚单位全部被抑制，但不影响B 亚单位的活性。

样本中CK 的B 亚单位可催化磷酸肌酸（CrP ）转变为肌酸（Cr ），同时ADP 磷酸化为A TP ，然后进行酶偶联反应，最终使NADP +转变成NADPH ，通过监测NADPH 上升的速率，计算样品中CK-MB 的活性。

CrP + ADP−→−CK Cr + A TPA TP + 葡萄糖 −→−HK 葡萄糖-6-磷酸 + ADP葡萄糖-6-磷酸 + NADP + −−→−G6PD 6-磷酸葡萄酸 + NADPH + H + 【主要组成成份】原包装的试剂盒在2℃～8℃避光保存，有效期为18个月。

CK-MB

CK-MB检测1检测目的、原理目的：检测患者体内CK-MB 的含量，辅助临床治疗诊断。

原理：Access CK-MB检测采用双位点酶免法检测(“双抗体夹心法”)。

样品、标记了碱性磷酸酶的大鼠抗人CK-MB抗体（酶结合物）以及包被了大鼠抗CK-BB抗体的磁性颗粒被一起加入到反应管中，样品中的CK-MB和固相在磁性颗粒表面的CK-BB抗体的B亚单位（与CK-BB 和 CK-MB为同分异构体）抗原结合点进行反应，同时酶结合物特异性的与血清或血浆中的CK-MB相结合（不与CK-BB 和CK-MB同分异构体反应）。

孵育后，反应管被传送到磁性分离区域进行多次冲洗，去处未和固相结合的其它成分。

最后在反应管中加入化学发光底物（Lumi-Phos* 530）, 已与固相结合的碱性磷酸酶会使该底物发出光子并被光电比色计所检测。

最后，对照仪器中储存的多点定标曲线中所描述的光量子与标准品CK-MB的对应关系而计算出样品中的CK-MB浓度，反应产生的光子与样品中CK-MB的含量成正比。

2方法性能参数不精密度：小于等于8%分析灵敏度：小于0.1ng/ml3样本采集及处理A.血清或肝素抗凝血浆是推荐的样品。

B.遵循国家委员会制定的临床实验室标准推荐的以下标本处理、运行和储存步骤：1.用真空采样管采集所有血液标本时须遵守常规注意事项。

2.离心前使标本完全自然形成凝块。

3.全程保证样品管的密闭状态。

4.离心获得血清后的两小时内，至少将500 l血清或血浆转移到一个密闭的储存试管中备用。

5.储存样品，保持样品管完全密闭，在室温(15 到30°C)条件下不超过8小时。

6.如果8小时内不能完成检测即应将标本放入2 到8°C冰箱冷藏。

7.如果24小时内不能完成检测即应将标本放入-20°C冰箱冻藏。

8. 标本只能复融一次。

C.样品中至多含有35mg/L (3.5mg/dl) 的胆红素、50 U/mL的肝素和脂血标本中含有相当于6g/L (600mg/ml)的甘油三脂及溶血标本含有最多5mg/ml(500mg/Dl)的血红蛋白外不影响CK-MB检测的结果。

CK-MB中文说明书

用途：用免疫学方法定量测定人血清或血浆的肌酸磷酸激酶同功酶（ＭＢ）的含量。

电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Ｅｌｅｃｓｙｓ１０１０、２０１０，Ｅ１７０免疫测定分析仪。

概述：肌酸磷酸激酶（ＣＫ）是含有两个亚单位的酶。

有四种形式：线粒体同功酶和细胞溶质同功酶ＣＫ－ＭＭ（肌型）、ＣＫ－ＢＢ（脑型）和ＣＫ－ＭＢ。

检测血清ＣＫ－ＭＢ质量是诊断心肌缺血性损伤的重要指标，如急性心肌梗死、心肌炎等。

症状发生３－８小时就可在血中测到ＣＫ－ＭＢ，并可根据病情维持可测水平至较长一段时间。

其它一些临床情况，如横纹肌溶解和中风，ＣＫ－ＭＢ也可升高。

就实验室诊断而言，检测总ＣＫ、ＴｎＴ和／或肌红蛋白就能够对以上疾病作鉴别诊断。

ＣＫ－ＭＢ检测的敏感度取决于标本采集的时间，因此，系列动态检测具有实际意义。

Ｅｌｅｃｓｙｓ　ＣＫ－ＭＢ测定法采用了两株不同的抗ＣＫ－ＭＢ单克隆抗体。

原理：采用双抗体夹心法，整个过程１８分钟完成。

・　第１步：１５　µl 标本、生物素化的抗ＣＫ－ＭＢ　单克隆抗体和钌（Ｒｕ）标记的抗ＣＫ－ＭＢ单抗混匀，形成夹心复合物。

・　第２步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。

・　第３步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。

・检测结果由机器自动从标准曲线上查出。

此曲线由仪器通过２点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。

试剂：Ｍ：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），１瓶，６．５ｍｌ。

粒子浓度０．７２ｍｇ／ｍｌ，生物素结合能力：　４７０ｎｇ生物素／ｍｇ粒子。

含防腐剂。

Ｒ１：生物素化的抗ＣＫ－ＭＢ单克隆抗体（灰盖），１瓶，１０ｍｌ。

浓度１．２ｍｇ／ｌ，磷酸缓冲液　１００ｍｍｏｌ／ｌ，ｐＨ７．０。

含防腐剂。

Ｒ２：钌（Ｒｕ）标记的抗ＣＫ－ＭＢ单克隆抗体（黑盖），１瓶，１０ｍｌ。