粪大肠杆菌检测

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GBT 肥料中粪大肠菌群的测定

GB/ 肥料中粪大肠菌群的测定1 范围本标准规定了肥料中粪大肠菌群的测定方法。

2 定义粪大肠菌群 fecal coliforms系指一群在℃±℃条件能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。

粪大肠菌群数为每克（毫升）肥料样品中粪大肠菌群的最可能数（MPN）。

3 设备和材料（内容略）4 培养基和试剂培养基：遵照附录A的规定。

革兰氏染色液：遵照附录B的规定（略）。

5 检验步骤样品稀释在无菌操作下称取样品g或吸取样品10mL，加入到带玻璃珠的90 mL无菌水中，置于摇床上200 r/min 充分振荡30min，即成10-1稀释液。

用无菌移液管吸取 mL上述稀释液加入到45 mL无菌水中，混匀成10-2稀释液。

这样依次稀释，分别得到10-3，10-4等浓度稀释液（每个稀释度须更换无菌移液管）。

乳糖发酵试验选取三个连续适宜稀释液，分别吸取不同稀释液mL加入到乳糖胆盐发酵管内，每一稀释度接种3支发酵管，置℃±℃恒温水浴或隔水式培养箱内，培养24h±2h。

如果所有乳糖胆盐发酵管都不产酸不产气，则为粪大肠菌群阴性；如果有产酸产气或只产酸的发酵管，则按进行。

分离培养从产酸产气或只产酸的发酵管中分别挑取发酵液在伊红美蓝琼脂平板上划线，置36℃±1℃条件下培养18h～24h。

证实试验从分离平板上挑取可疑菌落，进行革兰氏染色。

染色反应阳性者为粪大肠菌群阴性；如果为革兰氏阴性无芽胞杆菌则挑取同样菌落接种在乳糖发酵管中，置℃±℃条件下培养24h ±2h。

观察产气情况，不产气为粪大肠菌群阴性；产气为粪大肠菌群阳性。

结果证实实验为粪大肠菌群阳性的，根据粪大肠菌群阳性发酵管数，查MPN检索表，得出每克（毫升）肥料样品中的粪大肠菌群数。

附录 A（规范性附录）培养基乳糖胆盐发酵培养基蛋白胨g猪胆盐g乳糖g%溴甲酚紫水溶液m L蒸馏水1000m LpH值～制法：将蛋白胨、猪胆盐及乳糖溶解于蒸馏水中，校正pH，加入溴甲酚紫水溶液，然后分装试管，每管9mL，并放入一支倒置的小套管，高压灭菌115℃15min。

分离鉴定粪便中的大肠杆菌的实验流程

分离鉴定粪便中的大肠杆菌的实验流程鉴定粪便中的大肠杆菌是一项十分重要的实验，它可以帮助我们评估肠道健康状况，检测是否存在致病性大肠杆菌的感染，对于疾病的防控具有重要意义。

下面，我将详细介绍一下分离鉴定粪便中的大肠杆菌的实验流程。

我们需要准备实验所需的材料和试剂。

材料包括培养皿、接种环、培养基等，而试剂包括洗涤剂、生理盐水、大肠杆菌特异性培养基等。

在实验开始前，我们需要确保实验器具和培养基无菌，并且消毒实验台面和使用的工具，以避免外界微生物的干扰。

我们需要进行样品的处理和制备。

取一定量的粪便样品，并将其进行振荡或均匀搅拌，使其中的微生物均匀分布。

我们将取一小部分样品进行稀释，目的是为了在培养皿上获得适当的菌落数，方便观察和鉴定。

接着，我们把经稀释处理后的样品加入到培养基中，使细菌能够在适宜的温度下进行培养。

大肠杆菌通常在37摄氏度下培养，因此我们需要将培养皿放入恒温箱中，在一定的时间后进行观察。

在培养的过程中，我们需要定期检查培养皿的状态，观察是否有典型的大肠杆菌形态的菌落出现。

除了观察菌落形态之外，我们还可以利用生化试剂进行鉴定。

通过添加特定的生化试剂，如甲酚红葡萄糖琼脂培养基、大肠杆菌的IMViC生化试剂等，可以帮助我们鉴定大肠杆菌。

这些试剂可以根据大肠杆菌的代谢特点，进行色素反应或气体产生反应，从而帮助我们确认目标菌株的身份。

我们需要进行进一步确认。

在鉴定出大肠杆菌后，我们可以利用进化树分析等生物信息学方法，对其遗传特征进行分析，以确保其准确性。

我们还可以进行致病性检测，通过PCR等分子生物学技术检测目标菌株是否携带致病因子，从而评估其致病性。

通过以上的实验流程，我们可以较为准确地分离鉴定粪便中的大肠杆菌。

这项实验的结果将为我们提供重要的信息，有助于评估肠道健康状况，及时发现致病性大肠杆菌的感染，为疾病的预防和控制提供重要依据。

粪大肠菌群的测定

粪大肠菌群的测定1 卫生学意义粪大肠菌群测定的卫生学意义：一、与大肠菌群相比，粪大肠菌群在人和动物粪便中所占的比例较大，而且在自然界容易死亡。

因此，粪大肠菌群的存在表明食品近期内可能直接或间接的受到了粪便的污染；二、作为粪便污染指标评价食品的卫生状况，推断食品中肠道致病菌污染的可能性；三、常用做贝类和贝类养殖用水的卫生指标。

2 检验方法2.1 术语与定义一群在44.5℃培养24h-48h能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。

卫生学概念，又称为耐热大肠菌群，主要是大肠杆菌，但也包括克雷伯氏菌属等。

2.2 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：（1）恒温培养箱：36℃±1℃。

（2）冰箱：2℃～5℃。

（3）恒温水浴箱：46℃±1℃。

（4）天平：感量0.1g。

（5）无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头。

（6）无菌锥形瓶：容量500mL。

（7）无菌培养皿：直径90mm。

（8）pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。

2.3 培养基和试剂（1）月桂基硫酸盐胰蛋白胨（Lauryl Sulfate Tryptose，LST）肉汤：1）成分：胰蛋白胨或胰酪胨：20.0g；氯化钠：5.0g；乳糖：5.0g；磷酸氢二钾（K2HPO4）：2.75g；磷酸二氢钾（KH2PO4）：2.75g；月桂基硫酸钠：0.1g；蒸馏水：1000mL；pH：6.8±0.22）制法：将上述成分溶解于蒸馏水中，调节 pH。

分装到有玻璃小倒管的试管中，每管10 mL。

121 ℃高压灭菌15 min。

（2）EC肉汤（E.coli，BGLB）：1）成分：胰蛋白胨或胰酪胨：20.0 g；3号胆盐或混合胆盐：1.5 g；乳糖：5.0g；磷酸氢二钾（K2HPO4）：4.0g；磷酸二氢钾（KH2PO4）：1.5g；氯化钠：5.0g；蒸馏水：1000mL；pH：6.9±0.1。

粪大肠杆菌检测结果标准

粪大肠杆菌检测结果标准粪大肠杆菌是一种常见的细菌，它存在于人和动物的肠道中，同时也可以存在于环境中。

尽管大多数的粪大肠杆菌对人体无害，但是一些特定的菌株可能会引起食物中毒和其他疾病。

因此，对粪大肠杆菌的检测和监测就显得尤为重要。

下面我们将介绍粪大肠杆菌检测结果的标准。

首先，粪大肠杆菌检测结果的标准通常是以CFU/g（菌落形成单位/克）来表示的。

这是一种衡量细菌数量的常用单位，它表示在一克样品中的细菌数量。

根据世界卫生组织的标准，食品中粪大肠杆菌的标准限量为1000CFU/g。

超过这个限量的食品可能会对人体健康造成威胁。

其次，粪大肠杆菌检测结果的标准还包括对不同食品的不同限量要求。

例如，对于生肉制品和奶制品来说，粪大肠杆菌的标准限量可能会更为严格，因为这些食品更容易受到细菌的污染。

而对于干燥食品和加工食品来说，限量可能会相对宽松一些。

另外，粪大肠杆菌检测结果的标准还会根据不同地区和国家的法规和标准进行调整。

不同地区对于食品安全的要求可能会有所不同，因此粪大肠杆菌的标准限量也会有所差异。

在进行检测时，需要根据当地的法规和标准来确定检测结果是否合格。

此外，粪大肠杆菌检测结果的标准还会受到食品生产和加工过程中的卫生控制措施的影响。

如果食品生产和加工过程中严格遵守卫生规定，并采取了有效的控制措施，那么粪大肠杆菌的检测结果很可能是合格的。

因此，食品生产企业需要加强对卫生控制的管理，以确保产品的安全性。

总的来说，粪大肠杆菌检测结果的标准是非常重要的，它直接关系到食品的安全性和人体健康。

通过严格监测和控制粪大肠杆菌的数量，可以有效预防食品中毒和其他疾病的发生。

因此，食品生产企业和监管部门都应该高度重视粪大肠杆菌检测结果的标准，加强对食品安全的管理和监测，保障消费者的健康和权益。

化妆品检测项目中粪大肠菌群的检测

化妆品检测项目中粪大肠菌群的检测
化妆品检测项目中粪大肠菌群的检测流程：
10g/mL样品+90mL灭菌生理盐水→10mL+10mL双倍乳糖胆（含中和剂）培养基→粪大肠菌群44.5℃，48h培养
注：在化妆品检测项目中，如果样品含有油脂性的成分，如精油，在样品前处理中需加入液体石蜡、吐温80、生理盐水进行均质，使样品能够均匀分散开来。

粪大肠菌群又是一个什么样的微生物呢？下面我们来详细介绍下：
大肠菌群：大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。

定义（GB2010）：在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。

粪大肠菌群：大肠菌群的一种，又称耐热大肠菌群，培养温度：44.5±0.5℃，粪大肠菌群是化妆品检测项目中必检的微生物项目。

大肠埃希氏菌：（(Escherichia. coli )通常称为大肠杆菌。

根据不同的生物学特性将致病性大肠杆菌分为5类：
致病性大肠杆菌(EPEC)、
肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、
肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)、
肠出血性大肠杆菌(EHEC)、
肠黏附性大肠杆菌(EAEC)。

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酶底物法测粪大肠菌群标准

酶底物法测粪大肠菌群标准
摘要：
I.引言
A.酶底物法简介
B.粪大肠菌群检测的重要性
II.酶底物法测粪大肠菌群的标准方法
A.仪器和材料
B.实验步骤
1.准备工作
2.样品处理
3.酶底物反应
4.结果分析
III.酶底物法与其他检测方法的比较
A.纸片快速法
B.固定底物酶底物法
IV.应用案例
A.实际水样检测
B.检测结果比较
V.结论
A.酶底物法的优点
B.未来发展方向
正文：
酶底物法是一种常用于测定粪大肠菌群的方法，具有操作简便、结果准确等优点。

粪大肠菌群检测是环境监测的重要指标，对于评估水体污染程度、保障饮水安全具有重要意义。

酶底物法测粪大肠菌群的标准方法主要包括以下步骤：首先，准备所需的仪器和材料，如高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、程控定量封口机、紫外灯、移液管等。

然后，进行样品处理，包括采集水样、添加抑制剂等。

接下来，进行酶底物反应，将酶底物加入反应液中，观察其变化。

最后，对结果进行分析，计算粪大肠菌群的数量。

酶底物法与其他检测方法相比，如纸片快速法和固定底物酶底物法，具有较高的准确性和灵敏度。

在实际应用中，酶底物法已被广泛用于环境监测领域，取得了良好的效果。

例如，在检测实际水样中的粪大肠菌群时，采用酶底物法可以获得较为准确的结果，有助于评估水体的污染状况。

总之，酶底物法作为一种有效、可靠的粪大肠菌群检测方法，在环境监测领域具有广泛的应用前景。

然而，在实际操作中仍需注意一些问题，如避免实验操作过程中的污染、选择合适的酶底物等，以提高检测结果的准确性。

粪大肠杆菌排放标准

粪大肠杆菌排放标准粪大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道细菌，广泛存在于人类和动物的肠道中。

尽管大多数大肠杆菌对人类无害，但某些株系可以引起严重的食物中毒和肠道感染。

因此，为了保障公众健康和食品安全，各国都制定了粪大肠杆菌排放标准。

粪大肠杆菌排放标准主要涉及以下几个方面：监测方法、排放限值和处置要求。

首先是监测方法，通过有效的监测方法可以准确测量粪大肠杆菌的浓度。

常用的监测方法包括培养方法、PCR方法和流式细胞术等。

这些方法能够快速、准确地检测粪大肠杆菌的存在与浓度，为排放标准的制定和实施提供了可靠的数据支持。

其次是排放限值，即规定了粪大肠杆菌在排放物中的最大浓度。

排放限值的制定应综合考虑公共卫生和环境保护的需求，确保排放物不会对周围的水体和土壤造成污染。

不同国家和地区制定的排放限值可能有所不同，但都应符合国际卫生标准和环境保护法规的要求。

在制定排放限值时，还需考虑到不同场所和用途的差异。

例如，对于饮用水源地附近的排放口，排放限值应更为严格，以确保饮用水的安全性。

而对于农田灌溉用水的排放口，则应根据土壤的吸附能力和农作物的要求确定相应的限值。

最后是处置要求，即对于超过排放限值的排放物应如何处理。

一般情况下，超过排放限值的排放物不能直接排入环境，而需要经过适当的处理和处理设施。

常见的处理方法包括化学消毒、物理过滤和生物处理等。

通过合理选择和使用处理方法，可以有效去除或灭活粪大肠杆菌，降低其对环境和人类健康的潜在风险。

除了上述主要内容，粪大肠杆菌排放标准还应包括监督管理和处罚措施。

监督管理是指对排放口进行定期检查和监测，以确保排放符合标准要求。

对于违反排放标准的行为，应有相应的处罚措施，以强化法律法规的执行力度。

粪大肠杆菌排放标准是保障公众健康和食品安全的重要措施。

通过制定合理的监测方法、排放限值和处置要求，可以有效防止粪大肠杆菌的污染和传播，保护环境和人类健康。

各国应加强合作，共同制定和实施粪大肠杆菌排放标准，为全球公共卫生和环境保护作出贡献。

GB18466粪大肠菌群验证报告

方法验证报告项目名称：粪大肠菌群的测定方法名称：GB 18466-2005粪大肠菌群的检测方法报告编写人：参加人员：审核人员：报告日期：1 实验室基本情况1.1人员情况表1参加验证的人员情况登记表1.2 检测仪器/设备情况表2使用仪器情况登记表1.3 检测用试剂情况表3使用试剂登记表1.4 环境设施和条件情况实验室具有检定合格的温湿度计，环境可以控制在温度18⁓26℃，湿度45%⁓65%的要求范围内，满足检测环境条件，实验室人员每天对环境条件进行监控。

另外实验室配备了洗眼器、喷淋设施、护目镜、灭火器等的安全防护措施，符合实验室安全内务的要求。

2 实验室检测技术能力2.1样品采集与保存按照HJ 91.1的相关规定进行水样的采集。

采集样品时，采样瓶不得用样品洗涤，采集样品于灭菌的采样瓶中。

水体采样量不低于200 ml。

样品采集完毕后，迅速扎上无菌包装纸。

采集废水样品及一定深度的样品时，也可使用灭菌过的专用采样装置采样。

如果采集的是含有活性氯的样品，需在采样瓶灭菌前加入硫代硫酸钠溶液，以除去活性氯对细菌的抑制作用（每125mL容积加入0.1g/ml的硫代硫酸钠0.1mL）。

采样后应在2 h内检测，否则，应10⁓以下冷藏但不得超过6 h。

实验室接样后，不能立即开展检测的，将样品于4⁓以下冷藏并在2 h内检测。

2.2 检测步骤2.2.1样品准备污水样品至少取200ml，使用前应充分混匀。

根据预计的污水样品中粪大肠菌群数确认污水样品接种量。

粪大肠菌群数量相对较少的接种量一般为10、1、0.1ml。

粪大肠菌群较多时接种量为1、0.1、0.01ml或0.1、0.01、0.001ml等。

接种量少于1ml时，水样应制成稀释样品后供发酵实验使用。

接种量为0.1、0.01ml时，取稀释比分别为1:10、1:100.其他接种量的稀释比依此类推。

1:10稀释样品的制作方法为：吸取1ml水样，注入盛有9ml灭菌水的试管中，混匀，制成1:10稀释样品。

GBT肥料中粪大肠菌群的测定

G B T肥料中粪大肠菌群的测定Document serial number【LGGKGB-LGG98YT-LGGT8CB-LGUT-GB/ 肥料中粪大肠菌群的测定1 范围本标准规定了肥料中粪大肠菌群的测定方法。

2 定义粪大肠菌群 fecal coliforms系指一群在℃±℃条件能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。

粪大肠菌群数为每克（毫升）肥料样品中粪大肠菌群的最可能数（MPN）。

3 设备和材料（内容略）4 培养基和试剂培养基：遵照附录A的规定。

革兰氏染色液：遵照附录B的规定（略）。

5 检验步骤样品稀释在无菌操作下称取样品g或吸取样品10mL，加入到带玻璃珠的90 mL无菌水中，置于摇床上200r/min充分振荡30min，即成10-1稀释液。

用无菌移液管吸取 mL上述稀释液加入到45 mL无菌水中，混匀成10-2稀释液。

这样依次稀释，分别得到10-3，10-4等浓度稀释液（每个稀释度须更换无菌移液管）。

如果所有乳糖胆盐发酵管都不产酸不产气，则为粪大肠菌群阴性；如果有产酸产气或只产酸的发酵管，则按进行。

分离培养从产酸产气或只产酸的发酵管中分别挑取发酵液在伊红美蓝琼脂平板上划线，置36℃±1℃条件下培养18h～24h。

证实试验从分离平板上挑取可疑菌落，进行革兰氏染色。

染色反应阳性者为粪大肠菌群阴性；如果为革兰氏阴性无芽胞杆菌则挑取同样菌落接种在乳糖发酵管中，置℃±℃条件下培养24h ±2h。

观察产气情况，不产气为粪大肠菌群阴性；产气为粪大肠菌群阳性。

结果证实实验为粪大肠菌群阳性的，根据粪大肠菌群阳性发酵管数，查MPN检索表，得出每克（毫升）肥料样品中的粪大肠菌群数。

粪大肠杆菌群测定方法

水质粪大肠菌群的测定℃温度下能发展并发酵乳糖产酸产气的大肠菌群称为粪大肠菌群.用进步造就温度的办法,造成晦气于来自天然情形的大肠菌群发展的前提,使造就出来的菌重要为来自粪便中的大肠菌群,从而更精确地反应出水质受粪便污染的情形.粪大肠菌群的测定可以用多管发酵法和滤膜法.第一篇多管发酵法1. 实用规模本尺度实用于地表水.地下水及废水中粪大肠菌群的测定.2. 道理多管发酵法是以最可能数（most probable number）简称MPN来暗示实验成果的.现实上它是依据统计学理论,估量水体中的大肠杆菌密度和卫生质量的一种办法.假如从理论上斟酌,并且进行大量的反复检定,可以发明这种估量有大于现实数字的偏向.不过只要每一稀释度试管反复数量增长,这种差别便会削减,对于细菌含量的估量值,大部分取决于那些既显示阳性又显示阴性的稀释度.是以在实验设计上,水样磨练所请求反复的数量,要依据所请求数据的精确度而定.3. 造就基和试剂本尺度所用试剂除尚有注明外,均为相符国度尺度的剖析纯化学试剂;实验用水为新制备的去离子水.3.1单倍乳糖蛋白胨造就液：成分：蛋白胨 10g牛肉浸膏 3g乳糖 5g氯化钠 5g1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1mL蒸馏水 1000mL制法：将蛋白胨.牛肉浸膏.乳糖.氯化钠加热消融于1000mL 蒸馏水中,调节pH为7.2～7.4,再参加 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL,充分混匀,分装于含有倒置的小玻璃管的试管中,于高压蒸汽灭菌器中,在115℃灭菌20min,贮存于暗处备用.3.2 三倍乳糖蛋白胨造就液：按上述配方比例三倍（除蒸馏水外）,配成三倍浓缩的乳糖蛋白胨造就液,制法同上.3.3 EC造就液：成分：胰胨 20g乳糖 5g胆盐三号 1.5g磷酸氢二钾（K2HPO4） 4g磷酸二氢钾（KH2PO4） 1.5g氯化钠 5g蒸馏水 1000mL制法：将上述成分加热消融,然后分装于含有玻璃倒管的试管中.置高压蒸汽灭菌器中,115℃灭菌20min.灭菌后pH应为6.9.3.4 造就基的存放在密封瓶中的脱水造就基成品要存放在大气湿度低.温度低于30℃的暗处,存放时应防止阳光直接照耀,并且要防止杂菌侵入和液体蒸发.当造就液色彩变更,或体积变更显著时放弃不必. 4. 步调4.1 水样接种量将水样充分混匀后,依据水样污染的程度肯定水样接种量.每个样品至罕用三个不合的水样量接种.统一接种水样量要有五管.相对未受污染的水样接种量为10mL.1mL.0.1mL.受污染水样接种量依据污染程度接种1mL.0.1mL.0.01mL或0.1mL.0.01mL.0.001mL等.应用的水样量可参考下表1.表1 接种用水量参考表＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿接种量(mL）水样种类检测办法 100 50 10 1 0.1 10-210-310-4 10-5井水多管发酵法×××河水.塘水多管发酵法×××湖水.塘水多管发酵法×××城市原污水多管发酵法×××＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿如接种体积为10mL,则试管内应装有三倍浓度乳糖蛋白胨造就液5mL;如接种量为1mL或少于 1mL,则可接种于通俗浓度的乳糖蛋白胨造就液10mL中.4.2 初发酵实验将水样分离接种到盛有乳糖蛋白胨造就液的发酵管中.在37℃±℃下造就24h±2h.产酸和产气的发酵管标明实验阳性.如在倒管内产气不显著,可轻拍试管,有吝啬泡升起的为阳性.4.3 复发酵实验℃±℃温度下造就24h±2h（水浴箱的水面应高于试管中造就基液面）.接种后所有发酵管必须在30min内放进水浴中.造就后立刻不雅察,发酵管产气则证实为粪大肠菌群阳性.5．成果的盘算依据不合接种量的发酵管所消失阳性成果的数量,从表2或表3中查得每升水样中的粪大肠菌群.接种水样为100mL2份.10mL10份.总量300mL时,查表2可得每升水样中的粪大肠菌群;接种5份10mL水样.5份1mL水样.5份0.1mL水样时,查表3求得MPN指数,MPN值再乘10,即为1L水样中的粪大肠菌群.。

粪大肠杆菌的测定方法

粪大肠杆菌的测定方法1. 引言粪大肠杆菌是一种常见的肠道细菌，它存在于人和动物的肠道中，也是一种重要的食品和水源污染指标。

因此，准确测定粪大肠杆菌的方法对于判断水质和食品安全具有重要意义。

本文将就粪大肠杆菌的测定方法进行详细介绍。

2. 测定方法2.1. 传统培养法传统的粪大肠杆菌测定方法主要基于培养方法，通过将水样或食品样本接种于选定的培养基，并在适当条件下进行培养，从而使得粪大肠杆菌能够生长并形成可见的菌落。

常用的培养基有大肠杆菌选培养基和勃氏培养基等。

2.1.1. 大肠杆菌选培养基大肠杆菌选培养基是一种包含了特定营养物质的培养基，能够促进粪大肠杆菌的生长，并抑制其他细菌的生长。

根据国家标准，大肠杆菌选培养基中的主要组分有葡萄糖、酵母浸出物、酵母粉、氯化钠等。

使用该培养基时，样本需要经过适当的稀释以保证菌落的分离。

接种后，将培养皿放入恒温培养箱中，在37°C下培养16-24小时后，观察培养皿上是否有大肠杆菌的典型菌落，计数并记录。

2.1.2. 勃氏培养基勃氏培养基也是一种常用的粪大肠杆菌测定培养基。

它采用了阳离子、有机氮和碳源等成分，能够促进粪大肠杆菌的生长。

其优势在于可以同时检测肠道埃希氏菌、沙门氏菌等其他肠道细菌。

使用该培养基时，样本也需要进行适度稀释。

接种后，将培养皿放入恒温培养箱中，在37°C下培养16-24小时后，观察培养皿上的菌落情况，计数并记录。

2.2. 分子生物学方法除了传统的培养方法外，分子生物学方法也被广泛应用于粪大肠杆菌的测定。

这些方法不依赖于菌落的形成，而是通过检测菌体中的特定基因序列来确定粪大肠杆菌的存在。

2.2.1. PCR法PCR法是一种常用的分子生物学方法，用于扩增粪大肠杆菌特定的DNA片段。

该方法基于PCR反应，使用特定的引物选择性扩增粪大肠杆菌的16S rRNA基因序列。

扩增后的产物可以通过电泳分离，并通过特定的探针或染料进行检测。

PCR法具有高度的灵敏度和特异性，并且可以在短时间内得到结果。

GBT肥料中粪大肠菌群的测定

G B T肥料中粪大肠菌群的测定集团标准化工作小组 #Q8QGGQT-GX8G08Q8-GNQGJ8-MHHGN#GB/ 肥料中粪大肠菌群的测定1 范围本标准规定了肥料中粪大肠菌群的测定方法。

2 定义粪大肠菌群 fecal coliforms系指一群在℃±℃条件能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。

粪大肠菌群数为每克（毫升）肥料样品中粪大肠菌群的最可能数（MPN）。

3 设备和材料（内容略）4 培养基和试剂培养基：遵照附录A的规定。

革兰氏染色液：遵照附录B的规定（略）。

5 检验步骤样品稀释在无菌操作下称取样品g或吸取样品10mL，加入到带玻璃珠的90 mL无菌水中，置于摇床上200r/min充分振荡30min，即成10-1稀释液。

用无菌移液管吸取 mL上述稀释液加入到45 mL无菌水中，混匀成10-2稀释液。

这样依次稀释，分别得到10-3，10-4等浓度稀释液（每个稀释度须更换无菌移液管）。

如果所有乳糖胆盐发酵管都不产酸不产气，则为粪大肠菌群阴性；如果有产酸产气或只产酸的发酵管，则按进行。

分离培养从产酸产气或只产酸的发酵管中分别挑取发酵液在伊红美蓝琼脂平板上划线，置36℃±1℃条件下培养18h～24h。

证实试验从分离平板上挑取可疑菌落，进行革兰氏染色。

染色反应阳性者为粪大肠菌群阴性；如果为革兰氏阴性无芽胞杆菌则挑取同样菌落接种在乳糖发酵管中，置℃±℃条件下培养24h ±2h。

观察产气情况，不产气为粪大肠菌群阴性；产气为粪大肠菌群阳性。

结果证实实验为粪大肠菌群阳性的，根据粪大肠菌群阳性发酵管数，查MPN检索表，得出每克（毫升）肥料样品中的粪大肠菌群数。

粪大肠菌群检测的结果偏差及影响因素

粪大肠菌群检测的结果偏差及影响因素摘要：介绍了目前城镇污水处理消毒后的出水中粪大肠菌群指标的检测方法原理，对检测结果偏差产生的原因进行了分析和阐述，提出了检测过程中的质量保证措施，对基层实验室提高粪大肠菌群检测结果的精确性具有实际指导意义。

关键词：粪大肠菌群；质控；影响因素；偏差目前，粪大肠菌群的检测作为城镇污水处理厂排放标准的重要指标之一，经常被环保督查部门抽检。

而各厂在进行日常出水检测时，也存在着实验室内及实验室间实验结果差异性较大的问题。

由于微生物检测技术、方法、水样等的特殊性，导致影响其检测数值偏差大的因素较多，本文结合实际检测工作，从实验方法、培养基的质量控制、检测环境条件及现场采样等多方面进行分析，阐述这些因素的影响及质控措施。

目前，污水类的粪大肠菌群的检测，常采用多管发酵法、滤膜法和酶底物法。

三种方法的生物学培养机理是相同的，由于使用的培养基成分、培养介质和菌落形成的特征和方式的不同，最终导致了粪大肠菌群检测结果的差异，这是由于检测方法导致的偏差。

下面简单介绍一下这三种常用方法：1 常用粪大肠菌群的检测方法1.1 多管发酵法多管发酵法是以最可能数来表示试验结果的。

实际上它是根据统计学理论估计水体中大肠杆菌密度和卫生质量的一种方法。

如果从理论上考虑，并且进行大量的重复检定，可以发现这种估计有大于实际数字的倾向。

不过只要每一稀释度试管重复数目增加，这种差异便会减少，对于细菌含量的估计值，大部分取决于那些既显示阴性又显示阳性的稀释度。

因此在实验设计上，水样检验所要求重复的数目，要根据所要求数据的准确度而定。

多管发酵法是先在37度下培养，产酸产气则为阳性，也就是总大肠菌群。

然后再进行复发酵，从37℃培养出来的总大肠菌群，再接种到EC培养基中，45℃下产酸产气的则为粪大肠菌群。

1.2 滤膜法滤膜是一种微孔性薄膜。

将水样注入已被灭菌的放有滤膜（孔径0.45μm）的抽滤器中，经过抽滤，细菌即被截留在膜片上，然后将滤膜贴于M-FC培养基上，在44.5℃温度下恒温培养，对微生物细胞染色后，对滤膜上生长的此特性菌落进行计数，计算出每1L水样中含有粪大肠菌群的个数。

粪大肠菌群检测标准

粪大肠菌群检测标准
粪大肠菌群检测是检测粪便中大肠杆菌的数量和种类的方法，常用于评估肠道健康和消化系统功能。

粪大肠菌群检测一般包括以下几个方面的标准：
1. 纯度：检测的样本应该是纯净的，没有其他细菌、病毒或真菌的污染。

2. 可培养指数：通过培养方法，测定粪便中大肠菌群的数量。

3. DNA提取：将粪便中的细菌DNA提取出来，用于进一步的分析。

4. DNA测序：对提取的DNA进行测序，确定大肠杆菌的种类和数量。

5. 数据分析：根据测序结果，进行数据分析，包括群落结构、种类丰度等等。

需要注意的是，粪大肠菌群检测的标准可能会因不同实验室或机构而有所差异，因此具体的方法和标准可能会有所不同。

这些标准旨在确保检测结果的准确性和可靠性。

粪大肠菌群(MPN法)测定结果的评价方法比较

HUANJINGYUFAZHAN 73 V
/环境与发展
HUANJINGYINGXIANGPINGJIA
布。该考核样品标准值为31. lcfu,样品计数体均数的置信区间(95%概率)下限值21.0,上於31,经查poisson(泊松)分布可信区间表问，总限值44.0,用该置信区间进行结果评价。
实验室编号
用公式（4）计算,En=En（f）；然后再按照2. 3. 2 进行En值评价。
3结果评价
3. 1 Grubbs检验法评价结论 8家实验室的结果最大值和最小值的Gn<
G。. 95（8），因此判定8家实验室无异常值，均合格, 详见表2。
表2 Grubbs检验法结果评价
实验室编号
1 2 3 4 5 6 7 8 平均值2
Key WO rds： Fecal coliform;most probable numbers; MPN;En value 最大可能数(MPN)法R］很早就应用于总大方法是生态环境监测领域多管发酵法问和酶底肠菌群和粪大肠菌群等微生物指标分析。该物法⑴的理论基础,也在卫生检验、食品检验领
k 72 HUANJINGYUFAZHAN
Abstract： Objective: Explore an evaluation method of fecal coliform (MPN) detection results of 8 laboratories.
Method: Grubbs test method, Poisson distribution confidence interval method and improved en value method were used to evaluate the test results. Combined with the "unqualified" or "Unsatisfactory” laboratory problem tracking re sults, the evaluation conclusions of the three methods were compared.Result : Compared with the other two methods, the improved en value evaluation method considered not only the uncertainty of standard quantitative strains and MPN method, but also their distribution characteristics. The evaluation conclusion is more in line with the actual situ ation and more scientific and reasonable. Conclusion: This method was suitable for the accuracy evaluation of MPN method, which can not only evaluate the ability verification or ability examination results, but also evaluate the accura cy of routine quality control samples.

大肠菌群、粪大肠、大肠埃希氏菌检验的相关知识总结

大肠菌群、粪大肠、大肠埃希氏菌检验的相关知识总结1、大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌检验方法（1）大肠菌群（colifoms）在36°C培养48h可发酵乳糖产酸产气、需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。

该菌主要来源自人畜粪便，作为粪便污染指标评价食品的卫生状况，推断食品中肠道致病菌污染的可能。

（2）粪大肠菌群（Fecal colifoms）也称耐热大肠菌群。

指大肠菌群中能在44.5℃生长、发酵乳糖产生气体的一群细菌。

与大肠菌群一样，并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某-一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的-组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。

食品卫生学意义：作为粪便污染食品的指标菌，MPN值愈低则说明食品受粪便污染程度及对人体健康危害程度愈低。

作为肠道致病菌污染食品的指针，大肠菌群数量越多则肠道致病菌存在的可能性就越高，但两者之间并不总是呈平行关系。

（3）大肠埃希氏菌（Escherichia coli）分类学概念：肠杆菌科、埃希氏菌属。

是人和温血动物肠道内普遍存在的细菌，是粪便中的主要菌种。

一般生活在人大肠中并不致病，但它侵入人体一些部位时，可引起感染。

主要有：O抗原(菌体抗原，150个)；K抗原(荚膜抗原，90个)；H抗原( 鞭毛抗原，50个)（4）致泻性大肠埃希氏菌能侵入肠粘膜上皮细胞,引起食物中毒的大肠埃希氏菌。

产毒性大肠埃希氏菌(ETEC)-肠胃炎、旅行性腹泻。

致病性大肠埃希氏菌(EPEC)-婴儿腹泻；肠出血性大肠埃希氏菌(EHEC)--出血性结肠炎；(O157：H7；O104：H4；O111；O126等)侵袭性大肠埃希氏菌(EIEC)—杆菌性痢疾；粘附性大肠埃希氏菌(EAEC)—急慢性腹泻。

2、大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌的关系3、相关检验方法标准GB4789.3-2016食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数GB 4789.38-2012食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数GB 4789.39- -2013食品安全国家标准食品微生物学检验粪大肠菌群计数GB4789.6- 2016 食品安全国家标准食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验GB4789.36-2016食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏O157:H7/NM检验。

大肠杆菌的检验注意事项

大肠杆菌的检验注意事项大肠杆菌是一种存在于人和动物的肠道中的细菌，虽然在正常情况下不会对人体造成危害，但一旦进入食物或饮水中，可能引起食源性疾病。

因此，对大肠杆菌的检验显得十分重要。

以下是大肠杆菌检验注意事项。

1. 检验标本的采集：大肠杆菌的检验通常需要使用粪便和食物等标本进行检测。

在采集粪便标本时，应避免混入尿液，最好在清洁的容器中收集。

而对于食物等标本，需要注意避免污染和保存合适。

2. 仪器与设备的维护：对于进行大肠杆菌检验的仪器和设备，需要定期进行维护和保养，以确保其准确性和可靠性。

在使用前需要对仪器进行校准，并在使用过程中进行质控检验。

3. 检验环境的清洁：在进行大肠杆菌检验时，需要确保检验环境的清洁和卫生。

避免交叉污染，减少误差的发生。

4. 检验人员的培训：进行大肠杆菌检验的人员需要接受专业的培训，掌握操作技能和检验流程，了解常见的检验误差和处理方法。

5. 检验流程的规范：在进行大肠杆菌检验时，需要按照标准的检验流程进行，严格遵守操作规程，确保检验结果的准确性和可靠性。

6. 质控的执行：在进行大肠杆菌检验时，需要执行严格的质控程序，包括使用质控品进行校准和验证，监测每一批检验样本的质量控制结果，以及对异常结果的处理和追踪。

7. 结果的解释：对于大肠杆菌检验结果的解释需要慎重，需要结合临床病史和其他相关检验结果进行综合分析，避免误诊或漏诊的发生。

8. 结果的报告：对于大肠杆菌检验结果的报告，需要确保结果准确、清晰、及时，帮助临床医生进行诊断和治疗决策。

综上所述，对大肠杆菌的检验需要严格遵守操作规程和质控要求，确保检验结果的准确性和可靠性，为临床诊断和治疗提供可靠的支持。

水质粪大肠菌群的测定

将10g蛋白胨、3g牛肉寖膏、5g乳糖和5g氯化钠加热溶解于1000mL蒸馏水中，调节溶液pH为7.2—7.4，再加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL，充分混匀，分装于含有倒置的小玻璃管的试管中，于115℃高压灭菌器中灭菌 20min，贮存于冷暗处备用。 (此溶液用于检验大肠菌群)
1.6%溴甲酚紫乙醇溶液：1.6g溴甲酚紫用无水乙醇定容到100mL。
3.从龙头装置采集样品时,不要选用漏水龙头，采水前将龙头打开至最大, 放水3~5min,然后将龙头关闭，用火焰灼烧约3min灭菌或用70%~ 75%的酒精对龙头进行消毒，开足龙头，再放水1min，以充分除去水管中的滯留杂质。采样时控制水流速度，小心接入瓶内。
4. 采集地表水、废水样品及一定深度的样品时，也可使用灭菌过的专用采样装置采样。在同一采样点进行分层采样时，应自上而下进行，以免不同层次的搅扰。
无论是哪一种方法，都是利用其可在高温生长并发酵乳糖产酸、产气的特点，所以实验过程最终要的环节是严格地控制好温度。
(1) 初发酵
将样品加入
培养基的试管中，37℃初发酵富集培养，大肠
菌群在培养基中生长繁殖分解乳糖产酸、产气，产生的酸使溴甲酚紫指
示剂由紫色变为黄色，产生的气体进入倒管中，指示产气。 (
③耐热，在44-44.5℃的高温条件下仍可生长繁殖。 (耐热大肠菌群)
粪大肠菌群是大肠菌群的一种，是生长于人和温血动物肠道中的一组肠道细菌，随粪便排出体外，约占粪便干重的1/3以上，故称为粪大肠菌群。
受粪便污染的水、食品、化妆品和土壤等物质均含有大量的这类菌群。若检出粪大肠菌群即表明已被粪便污染。
1.
将水样充分混匀后，根据水样污染的程度确定水样接种量。
每个样品至少用