生物工业总复习

绪论第一章1生物制品的一般分析程序生物样品的采集制备和保存样品的预处理成分分析分析数据处理撰写分析报告2准确度与精密度关系准确度：测定值与真实值符合程度，以误差来表示。

精密度：测定值与平均值符合程度，以偏差来表示。

准确度高，实验准确。

精密度高，实验方法稳定，平行数据接近，重复性好。

3准确度高，精密度一定高，而精密度高，准确度不一定高。

第二章1采集样品中应该遵循的两个原则⑴采集的样品要均匀具有代表性，能反映全部被检样品的组成，质量及卫生状况；⑵采样中避免成分逸散或引入杂质，应保持原有的理化指标。

2固体物料采集的一般程序为采样→粉碎→过筛→混匀→缩分→装瓶贴标3液体的采集大的罐体应该在不同的深度采集，气体的采集只需要可以用液体吸收剂或是量压计测定4样品的预处理方法有机物破碎法（干法灰化湿法消化）蒸馏法溶剂提取法色层分析法5中型乙酸铅和酸性乙酸铅是澄清剂除铅除钙用的是磷酸氢二钠和草酸钠或是草酸钾的混合液蒸馏法中最常用的有常压蒸馏减压蒸馏水蒸气蒸馏分馏和扫集共蒸馏6干法灰化时间长需要过夜完成，但是无需人经常看管，试剂用量少但是对挥发性物质损失比较大。

湿法消化时间短需要工作人员经常的看管，实际用量较大，挥发性物质损失较少，溶液纯净7中型乙酸铅澄清、脱色能力差，它不能把深色糖液完全澄清，但澄清时对还原糖的吸附少，故适于还原糖测定的样液中。

碱性乙酸铅其澄清能力强，能除去很多混浊的胶体与色素，常用于废糖蜜的分析中。

但因沉淀疏松，能吸附还原糖，故测还原糖时不能使用。

第三章1水分可分为前水分（原料或是样品风干后所失去的水分）和后水分（风干原料（出去前水分的原料））中所含的水分。

化合水育原料中的化合物以化学键结合的水分。

常用的测定水分的方法有常压干燥法减压干燥法红外线干燥法2测定水分应注意的事项（1）测定水分时，称重恒重指试样连续两次干燥后，称重之差不超过2mg。

（2）原料水分一般用烘干法，若用其他方法，必须以烘干法做对照。

（3）对生产过程中的水分要求快速测定以利指导生产，可以在较高温度（120-140℃）红外线干燥。

（4）当样品水分大于17%时，在粉碎过程中水分显著损失，因此需在60℃左右预先干燥3～4h，使水分降至12～14%。

测得的为前水分。

再将试样粉碎，准确测其水分，此时测得的为后水分。

试样的总水分为：总水分（%）=[1-1（1-后水分%）（1-前水分%）]×100% （5）样品如是液态的，先在水浴上浓缩，然后用烘箱干燥3减压干燥法时间较常压法短适用于易分解易挥发的物质的水分的测定4非还原性的糖的测定，是用氧化还原反应把费还原性的糖转化成还原性的糖，转化比是0.9比15方法有酸解法（适用半纤维素含量较低的原料，时间短但是副产物很多，糖分破坏程度大只可作为原料中粗淀粉含量的测定）酶解法（适用于半纤维素含量较高的原料，时间长反应条件温和副产物少，作为纯淀粉含量的测定）6应注意的是A．斐林试剂甲、乙液平时分别储存，用时混合B．斐林试剂吸取量一定要准确，尤其是甲液。

C．滴定过程应该始终保持在微沸状态下。

沸腾后继续滴定至终点的时间应在一分钟之内。

D平行测定的滴定毫升数相差应不超过0.1毫升E注意样品的还原糖浓度，不可太高。

F滴定至终点蓝色退去后就不要在滴定了，因为次甲基蓝指示剂被还原后当接触到空气又会还原到蓝色，G二者之间没有严格的定量关系7 氨基氮的测定可以用甲醛滴定法范氏莱科法比色法8 凯氏定氮法中硫酸铜的作用是作为催化剂加速分解反应硫酸钾是提高溶液的沸点加速分解过程浓硫酸使有机物脱水炭化；②氧化有机物（除C、H）；③使蛋白质分解；④吸收氨。

9 半微量法定氮的原理它是以单宁和磷钼酸两种沉淀剂将蛋白质降解物分成三个区分。

A 区：溶解在麦芽汁或啤酒中的高分子蛋白质，在酸性溶液中，易为单宁所沉淀。

它包括全部热凝固性氮和较高分子量的降解产物——蛋白。

B区：磷钼酸可同时沉淀高、中分子含氮物质。

B区是用磷钼酸沉淀的含氮物与用单宁沉淀的含氮物之差，即为中分子含氮物质。

它包括蛋白胨和多肽。

C区：是用单宁和磷钼酸均不能沉淀的含氮化合物，包括短肽链、氨基酸和其他含氮化合物，即为低分子氮。

10半微量发定氮的注意事项①温度对蛋白质沉淀影响很大。

沉淀、定容、过滤均应在20℃条件下进行。

温度低于20℃，则高分子部分比例偏高，低分子部分比例偏底，影响测定结果。

在测定滤液含氮量前应充分摇匀。

②硫酸和钼酸钠（Na2MoO4∙2H2O）作用生成钼酸，再和试样本身存在的磷酸盐作用生成磷钼酸，这样生成的磷钼酸作沉淀剂比市售的磷钼酸还好，因此操作中一般不直接加入磷钼酸，而用硫酸和钼酸钠代替。

③蛋白质胶体沉淀过滤较慢，可用折叠滤纸过滤。

④本法也适用于麦芽、麦芽汁中蛋白质区分。

11斐林试剂由甲、乙液组成，甲液为硫酸铜溶液，乙液为氢氧化钠与酒石酸钾钠溶液12廉-爱侬法、置换法、置换法有何异同？廉-爱侬法和置换法的原理相同，不同的是廉-爱侬法的最终计算是依靠查表，置换法的最终计算是用公式直接计算。

置换法测定还原糖是用的是标准葡萄糖溶液。

廉-爱侬法和快速法的区别是廉-爱侬法与置换法所使用的指示剂不一样，廉-爱侬法使用的是次甲基蓝，置换法不仅加入了次甲基蓝还加入了黄血盐，而且加入指示剂的时间不同，廉-爱侬法是在变色后加入，置换法是在菲林试剂中就加入了，终点的颜色不同，廉-爱侬法是蓝色消失置换法是蓝色变成浅黄。

二者测定含糖量高低不同，廉-爱侬法测定的含糖量高于置换法。

13碘量法测定麦芽糖化力：麦芽糖化力：指麦芽中淀粉酶水解淀粉成为含有醛基的单糖或双糖的能力。

以100g无水麦芽在20℃、pH4.3条件下分解可溶性淀粉30min产生1g麦芽糖为1个维柯（WK）糖化力单位。

原理①淀粉经麦芽浸出液糖化后，水解成麦芽糖，加入过量的碘标准溶液和氢氧化钠溶液后，麦芽糖氧化成相应的酸。

过量未作用的NaIO，在碱性条件下发生歧化反应。

②加入酸，使NaIO3和NaI在酸性条件下发生氧化还原反应,析出过量的碘。

③析出的碘用Na2S2O3标准溶液滴定之。

由反应中加入碘溶液的量和滴定消耗Na2S2O3标准溶液的体积即可计算麦芽糖的含量。

14凯氏定氮法过程是先消化试样与浓硫酸和催化剂一同加热，使有机质破坏，蛋白质分解，其中碳和氢完全被氧化为二氧化碳和水逸去，样品中的有机氮转化为氨并与硫酸结合生成硫酸铵。

然后蒸馏硫酸铵在碱性条件下，释放出氨，通过加热蒸馏，氨随水蒸气蒸出。

再吸收和滴定蒸馏出来的氨，用硼酸溶液吸收生成硼酸铵，然后用盐酸或硫酸标准溶液滴定生成的硼酸铵。

硼酸为极微弱的酸，在滴定中并不影响所用指示剂的变色反应。

根据盐酸溶液消耗的体积，计算总氮含量，再乘以蛋白质系数，即为粗蛋白质的含量。

15 氨基酸态氮的测定原理，氨基酸是同时具有氨基和羧基的两性化合物，他们会相互作用生成分子内盐，故不能使用氢氧化钠标准溶液来滴定，而采取加入甲醛，氨基和甲醛结合，从而碱性消失，而是羧基显示出来，在用氢氧化钠标准溶液滴定，用酚酞指示终点。

第四章1分光光度分析法：利用分光光度计，测量物质对辐射能的吸收，以确定物质含量的方法。

2比色及分光光度分析具有的特点灵敏度高。

准确度高。

操作简单，速度快。

应用广泛。

3朗伯比尔定律、吸光度和透光度的关系当一束平行单色光通过均匀、非散射的稀溶液时，溶液对光的吸收程度（即为吸光度A）与溶液的浓度和液层的厚度的乘积成正比。

即A=KCL A=lg(1/T)=-lgT=lgI0/I4比色分析法目视比色法和光电比色法5吸收曲线：将光源中不同波长的光依次通过固定浓度的待测溶液，分别测出溶液在不同波长下的吸光度，以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制的曲线称为光吸收曲线或吸收光谱曲线。

通常用光吸收曲线来描述待测溶液对各种波长的吸光度。

6标准曲线：在可测定的浓度范围内，配制各种不同浓度的标准溶液，然后选用最大吸收单色光的波长，测出每一标准溶液的光密度，以浓度为横坐标，光密度为纵坐标，绘制的曲线称为标准曲线。

可以利用标准曲线测定样品中物质的浓度。

7亚硫酸品红法测定甲醇时影响因素很多，主要是温度和酒精浓度。

酒精浓度的影响：显色灵敏度随酒精浓度的改变而改变。

以5-6%(V/V)时的酒精浓度显色灵敏度为高，故在操作中试样管与标准系列管中酒精浓度需一致8茚三酮与氨基酸反应非常灵敏，痕迹量的氨基酸也能给结果带来很大误差，故操作中要十分注意：容器必须洗净，手只能接触其外部表面。

玻璃球要以镊子夹取。

吸取溶液要用自动吸管或吸球等。

茚三酮与氨基酸显色反应要求在pH6.7的条件下加热进行，果糖作为还原物质参加显色反应，碘酸钾在稀溶液中氧化茚三酮，已阻止副反应。

各种氨基酸和茚三酮产生的颜色强度不是相同的。

9啤酒中双乙酰含量的测定应注意的事项蒸馏时，加入试样要迅速，勿使测定成分损失，而且应尽快蒸馏，最好在5min内完成。

（b）蒸馏时，应严格控制蒸汽量，勿使泡沫过多而被蒸汽带出而导致蒸馏失败。

如果蒸馏器过小或消泡剂效果较差时，可分两次蒸馏，馏出液接受在同一量筒即可。

（c）显色反应应在暗处进行，否则结果将偏高。

10蛋白酶活力的测定①蛋白酶活力：1克酶粉或1毫升酶液在40℃下每分钟水解酪蛋白产生1μg酪氨酸,定义为1个蛋白酶活力单位。

②基本原理蛋白酶水解酪蛋白，其产物酪氨酸能在碱性条件下使福林—酚试剂还原，生成钼蓝与钨蓝，以比色法测定。

蛋白酶活力的测定的注意事项有对于同一台分光光度计与同一批福林－酚试剂，其工作曲线K值可以沿用，当另配时，工作曲线应重做。

本方法为中性蛋白酶活力的测定方法。

酸性蛋白酶活力的测定可将缓冲溶液改为乳酸—乳酸钠缓冲溶液（pH为2.3），碱性蛋白酶活力的测定可将缓冲溶液改为硼砂—氢氧化钠缓冲溶液（pH为11）。

第五章1相对密度即比重,是指某一温度下物质的质量与同体积某一温度下水的质量之比，以符号d 表示。

真比重物质在T摄氏度时的重量与同体积4摄氏度谁的重量之比。

视比重T摄氏度是物质重量与同温度同体积水的重量之比2液体想退密度测定的方法密度瓶法比重计法比重天平法3比重计分为普通比重计、波美比重计、糖度锤度计、酒精比重计、乳稠计普通比重计是以相对密度值为刻度波美比重计是以波美度为刻度的糖度锤度计测量值直接反应溶液所含纯蔗糖的质量百分数有巴林计和勃利克斯比重计酒精比重剂是酒精体积百分数为刻度4折光法就是通过测定物质的折射率来鉴别物质的组成，确定物质的纯度、浓度及判断物质的品质的分析方法。

5全反射现象：光线从光密介质射入光疏介质时，折射角较入射角大，当入射角逐渐增大至某一角度，其折射线恰好沿两介面的接触面平行射出，不再进入光疏介质，这种现象称为全反射现象，发生全反射所对应的入射角称为临界角。

发生全反射的条件：是光由光密介质射入光疏介质，入射角等于或大于临界角。