脂肪酶的概述及应用

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脂肪酶

脂肪酶

第一章概述

脂肪酶(Lipase,E C.3.1.1.3)是指分解或合成高级脂肪酸与丙三醇形成甘油三酸酯酯键的酶。198年,Klibanov A M 等用脂肪酶粉或其固定化酶在有机溶剂体系中成功地催化合成了一系列有机物, 开始了脂肪酶非水相酶学的研究[1]。随着研究的深入, 发现脂肪酶具有良好的醇解、胺解、酯化和转酯等特性, 可被广泛地应用于有机合成、精细化工、药物中间体合成、手性化合物拆分以及生物能源等诸多领域。近年来,通过对界面酶学和非水相酶学的研究,从而进一步拓展了脂肪酶的应用领域,利用脂肪酶在有机相催化的各种反应可以合成大量高价值的产物,此外,脂肪酶在食品、医药、皮革和洗涤剂等许多工业领域中也有广泛的应用,充分显示了其巨大的应用潜力。

产脂肪酶的微生物种类很多,大约65个属微生物可产脂肪酶,其中细菌28个属、放线菌4个属、酵母菌10个属、其它真菌23个属,而实际上可能更多。脂肪酶产生菌中得到深入研究的主要集中在根霉、曲霉、青霉、毛霉、假单胞菌等具有工业应用价值的菌种以及与医学相关的金黄色葡萄球菌、钩端螺旋体、粉刺状杆菌等。脂肪酶的筛选方法着眼于快速、简捷、准确、选择性强及易于自动化。脂肪酶产生菌主要从自然界中寻找,而脂肪酶高产菌的筛选通常采用含甘油三酯的琼脂平板法,并通过在培养基中添加指示剂如罗丹明B、溴甲酚紫、维多利亚蓝等作为筛选标记,然后采用不同的方法对培养条件进行优化。其筛选的一般过程是:样品分离→富集培养→平板初筛→摇瓶复筛。不同微生物合成脂肪酶的能力不同,因此,要达到工业用脂肪酶生产微生物的要求,首先要筛选和诱导出与所需酶学性质相符的高产菌株,或者构建高表达量的重组基因工程株。

脂肪酶的作用机理

脂肪酶的作用机理

脂肪酶是一类酶类蛋白质,主要作用于脂肪(脂类)底物,促进脂肪水解反应的进行。脂肪酶的作用机理包括以下几个步骤:

1. 底物结合:脂肪酶通过其活性部位与脂肪底物结合,形成酶-底物复合物。

2. 水解作用:脂肪酶通过水解作用,将一个水分子加进到脂肪酯的酯键中,将脂肪酯分解成甘油和脂肪酸。

3. 产物释放:产物(甘油和脂肪酸)从酶活性部位释放出来,使脂肪酶重新对底物产生作用。

脂肪酶的作用使得脂肪分子变得更容易被吸收和利用。在生物体内,脂肪酶在脂肪消化和吸收过程中起着至关重要的作用,帮助机体获取能量和必需脂肪酸。

脂肪酶(LPS)的临床意义

脂肪酶(LPS)的临床意义

脂肪酶(LPS)的临床意义

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脂肪酶( LPS)测定的临床意义

脂肪酶(LPS)是一组特异性较低的脂肪水解酶类,主要来源于胰腺,其次为胃及小肠,能水解多种含长链脂肪酸的甘油酯。通常胰腺以等量分泌脂肪酶及共脂肪酶进入循环,但因共脂肪酶相对分子量较小,可以从肾小球滤出,急性胰腺炎时,共脂肪酶/脂肪酶比例下降。测定方法有滴定法、电极法、比浊法、分光光度计法及荧光光度计法。

1.正常参考值:

比浊法健康成人脂肪酶活性:单侧95%上限为7.9 U/L。

2.临床意义

胰腺是人体LPS最主要来源。血清LPS增高常见于急性胰腺炎及胰腺癌,偶见于慢性胰腺炎。急性胰腺炎时,血清淀粉酶增加的时间较短,而血清LPS活性上升可持续10~15天。腮腺炎未累及胰腺癌时,LPS通常在正常范围。此外,总胆管结石或癌、肠梗阻、十二指肠穿孔等有时LPS亦可增高。

血清脂肪酶对急性胰腺炎的诊断有很大帮助。临床研究证实,其灵敏度为80%~100%,特异性为84%~96%,而淀粉酶的灵敏度为73%~79%,特异性为82%~84%,血清脂肪酶活性测定对急性胰腺炎诊断的灵敏度及特异性均优于淀粉酶活性测定。

脂肪酶检测的临床应用

脂肪酶检测的临床应用
(4)胆红素可增加脂肪酶的活性,血 红蛋白可抑制其活性,故黄疸及溶血时测 定结果有影响。
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三 爱康诊断试剂特点
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三 爱康诊断试剂特点
ü能特异而可靠的检测胰脂肪酶的活力,也不受基体效应的影响。 ü红色染料引起的吸光度上升与样本中的脂肪酶活力成正比。
ü本产品具有快速、敏感、准确的特点。操作快速并且方便, 步骤简单。
(2)正常血液中,仅有少量脂肪 酶,血中脂肪酶易被肾脏清除,当胰 腺分泌亢进,胰管受阻或胰腺受损伤 或坏死时,脂肪酶逆流或直接释入血 液,使血中脂肪酶活力增加。脂肪酶 可由肾小球滤过,并被肾小管全部回 吸收,所以尿中测不到脂肪酶活性。
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一 脂Fra Baidu bibliotek酶概述
(3)虽然脂肪酶对急性胰腺炎诊 断比较特异和灵敏,但以前由于方法学 问题,未得到临床普遍应用。本试剂盒 上市,有利于临床推广应用。
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二 脂肪酶检测的临床意义
(2) 除急性胰腺炎外,其它急腹症如消
化性溃疡穿孔、肠梗阻、肠乳膜血管梗阻时 有淀粉酶升高,但脂肪酶一般不升高,所以 脂肪酶比淀粉酶诊断急性胰腺炎的特异性也 高。但脂肪酶活性也不能反映病情的严重性 。
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二 脂肪酶检测的临床意义
(3) 脂肪酶活性增高还可见于慢性胰 腺炎、胰腺癌或结石致胰腺管阻塞、肝脏 疾病、手术及慢性肾脏病等。鸦片类药物 也可导致脂肪酶的活性升高。

脂肪酶催化三联体

脂肪酶催化三联体

脂肪酶催化三联体

《脂肪酶催化三联体》

一、概述

脂肪酶催化三联体是一种有效的降解脂肪的方法,它可以让饮食中摄入的脂肪更有效地分解利用。脂肪酶催化的三联体由三种不同功能的酶组成:细胞色素P450(CYP)、乙酰辅酶A(CoA)和磷脂酰乙烯酰甘油酯酶(lipase)。这三种酶根据其功能作用而有所不同,但在整个脂肪催化三联体中的联合能够共同作用,达到脂肪高效的分解。

二、细胞色素P450

细胞色素P450(CYP)是一种体内存在的蛋白质,主要负责酶分解过程的第一步,也就是将脂肪酸变成氧化产物。它与乙酰辅酶A(CoA)和磷脂酰乙烯酰甘油酯酶(lipase)结合,可以在体内实现生物氧化作用。

三、乙酰辅酶A

乙酰辅酶A(CoA)参与了脂肪酸的氧化脱氢和分解,将脂肪酸氧化分解为乙酰腰碳酸(acetyl-CoA),并在体内特定的反应中起着关键的作用。当乙酰辅酶A结合细胞色素P450(CYP)和磷脂酰乙烯酰甘油酯酶(lipase)时,能够极大地提高酶的分解速度,有效地分解脂肪。

四、磷脂酰乙烯酰甘油酯酶

磷脂酰乙烯酰甘油酯酶(lipase)是脂肪酶催化三联体中第三

种酶,参与了脂肪分解的最后一步,将乙酰腰碳酸分解为二酰基腰碳酸和甘油,其中甘油可以被体内的糖酵解酶分解,而二酰基腰碳酸可以被某些酶分解为乙醇胺和乙酸,而这些物质最终被体内的酶分解为二氧化碳和水,从而实现可持续的饮食营养和能量管理。

五、结论

脂肪酶催化三联体是一种高效的降解脂肪的方法,它能有效地将脂肪分解成可利用的氧化产物,并将其有效地分解为二氧化碳和水等可利用的物质,从而实现可持续的饮食营养和能量管理,这是一种现代的有效的脂肪摄入控制方法。

脂肪酶综述

脂肪酶综述
中实现表达。
五、脂肪酶的发酵生产及分离纯化
产脂肪酶发酵分两类: 固体发酵和液体发酵法。相对液体发酵法,固体发酵
生产脂肪酶具有简洁,经济的优点 。
影响菌株发酵产脂肪酶的因素有: 氮源、碳源、底物诱导剂、表面活性剂、矿物质、pH,
培养温度、摇床转速、培养时间、接种量等。
(1)发Biblioteka Baidu培养基
有机氮源:
大豆粉、大豆饼粉、大豆蛋白、业麻饼粉、奶粉、酪蛋白、蛋白陈、酵母膏、 牛肉膏、玉米浸汁和无机氮硫酸钱、硫代硫酸钱、氯化氨、磷酸氢氨、磷酸二 氢氨等
(2) 培养方式与发酵调控:
脂肪酶的发酵生产可采用固体培养和液体深层培养两种方法。固体培养设备比较 简单,易十推广,但容易污染杂菌;液体深层培养易于控制,不易染杂菌,生产效率高, 目前生产上常采用液体深层培养法生产脂肪酶。液体深层培养通常采用分批(batch)、 补料分批(fed-batch)或连续(continuance)发酵方式生产脂肪酶。在分批发酵过程中, 所有营养物一次加入发酵罐中,发酵罐必须重复定期清洗、火菌、接种、发酵和收取 酶液,但是分批发酵法便十控制培养条件,酶的产量高,并且有利十阻止杂菌的污染, 是目前最为常用的一种方法。其缺点是周期长、生产效率低。在连续发酵工艺中,培 养液既有流入也有流出,发酵罐中培养液的体积和营养物的浓度保持恒定。采用连续 发酵工艺能够获得更高的产酶效率,减少设备投资,降低产酶成本,但是不足之处是 所产酶的浓度较低。目前脂肪酶最常用的生产方法是补料分批发酵法。此法是分批发 酵中间歇地或连续地补加新鲜培养基的培养方法,是介十分批发酵和连续发酵之间的 过渡类型。此法一方面可以避免某种营养物质成分初始浓度过高出现底物抑制现象, 另一方面能防止某些限制性营养成分在培养过程中被耗尽,影响细胞的生长和产物的 形成。补料分批发酵法兼有分批发酵和连续发酵的优点,克服了两者的缺点,是目前 发酵工业中较有代表性的一种发酵工艺,已广泛应用于抗生素、氨基酸、酶制剂、有 机酸等发酵领域。 从已有报道的研究结果来看,采用补料发酵的脂肪酶活远高于分批 发酵工艺。

脂肪酶ppt课件

脂肪酶ppt课件

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②溴甲酚紫平板筛选法
筛选原理:溴甲酚紫作为一种显色剂,其 pH变色为5.2—6.8,在碱性条件下显紫色, 在酸性条件下显黄色,脂肪在脂肪酶的催化 作用下生成的脂肪酸会使培养基的pH降低, 产脂肪酶菌株的周围会出现黄色的透明圈, 根据透明圈的有无和大小来筛选产脂肪酶的 菌株,透明圈越大说明产脂肪酶活力越强。
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五 蜡脂的生产过程
• 利用固定化脂肪酶酶膜,使用价格低廉的大豆油为原料,
在无溶剂体系中催化大豆油和十六醇转酯化反应合成不饱 和的蜡脂。
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六 影响蜡脂产率的因素
• 1固定化酶用量对产率的影响
随固定化酶用量增加,反应产率也逐渐 增加到一个极致保持稳定。
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• 2底物摩尔比对产率的影响
蜡脂的产率随醇油摩尔比的增加而增加
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➢ 真菌脂肪酶
真菌脂肪酶具有温度和pH 稳定性、底物特异性以及在有机 溶剂中具有高活性,且提取成本比较低等优点,因而发展迅 速。
商业化的真菌脂肪酶主要有: 黑曲霉, 米曲霉等。
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三、脂肪酶的催化机理
• 脂肪酶的活性中心是丝氨酸(Ser)残基, Ser与天冬氨
酸(Asp)、组氨酸(His)组成的三元组催化中心,正常 情况下,该中心埋在一个或数个 –螺旋结构的“盖子”下 面,受 –螺旋的保护。“盖子”的疏水集团与这个三元组 的疏水区域相结合。这个带有色氨酸(Trp)的盖子具有

脂肪酶的检测方法

脂肪酶的检测方法

脂肪酶的检测方法

1. 引言

脂肪酶是一类能催化脂肪酯的水解反应的酶。脂肪酶在食品工业、医学领域等具有重要的应用价值。为了准确、快速地检测脂肪酶的活性和浓度,科学家们开发了多种检测方法。本文将详细介绍脂肪酶的相关概念以及常用的检测方法,并对其优缺点进行比较分析。

2. 脂肪酶的概述

脂肪酶是一种水解酶,主要催化脂肪酯的水解反应,将脂肪酯分解为甘油和脂肪酸。脂肪酶广泛存在于动植物的组织中,如胃液、胆汁、胰液等。脂肪酶的作用对于人体的脂肪消化和吸收至关重要,但过高或过低的脂肪酶活性都可能对人体健康产生不良影响。

3. 脂肪酶的检测方法概述

常见的脂肪酶检测方法包括传统的酶活性测定法、光谱法、电化学法、电镜法等。下面将分别介绍这些方法的原理、步骤以及优缺点。

3.1 传统的酶活性测定法

•原理:该方法通过测定脂肪酶对底物的水解反应,间接反映脂肪酶的活性。•步骤:

1.准备含有脂肪酶的样品和底物溶液。

2.混合样品和底物溶液,并控制反应条件(温度、pH等)。

3.反应一段时间后停止反应。

4.使用比色法、比浊法等方法来测定反应产物(如甘油)的含量。

•优点:方法简单、成本低廉。

•缺点:测定结果受其他干扰物影响较大,灵敏度相对较低。

3.2 光谱法

•原理:该方法利用脂肪酶催化反应过程中底物或产物的光学性质变化来检测脂肪酶活性。

•步骤:

1.准备含有脂肪酶的样品和底物溶液。

2.在一定时间内记录底物或产物的光谱变化。

3.分析光谱数据,计算脂肪酶活性。

•优点:结果准确、灵敏度较高。

•缺点:需要专用的光谱仪器,成本相对较高。

3.3 电化学法

脂肪酶溶于水-概述说明以及解释

脂肪酶溶于水-概述说明以及解释

脂肪酶溶于水-概述说明以及解释

1.引言

1.1 概述

概述

脂肪酶是一种重要的酶类,在生物体内起着关键的作用。它能催化脂肪的水解反应,将脂肪分解成脂肪酸和甘油。在工业上,脂肪酶也被广泛应用于食品加工、洗涤剂制造以及环境保护等领域。然而,在传统观念里,脂肪酶常常被认为是在油脂中活动的酶类。

然而,最近的研究发现,脂肪酶实际上也能在水中进行活动。这一发现引起了科学界的广泛关注,并引发了对脂肪酶在水中溶解性的研究。了解脂肪酶在水中溶解性的特性对于更好地理解其催化机制以及应用的拓

展具有重要意义。

本文将对脂肪酶的特性和在水中的溶解性进行详细探讨。首先,将介绍脂肪酶的基本特性,包括其化学结构、催化机制等方面。然后,将重点研究脂肪酶在水中的溶解性。通过对其在水中的溶解行为的研究,有助于揭示脂肪酶与水分子之间的相互作用关系以及其在水中的催化效果。最后,通过实验和数据分析得出结论,总结脂肪酶溶于水的特点以及可能的应用领域。

通过本文的研究,我们有望进一步了解脂肪酶的催化机制和溶解性特性,为其应用的开发和改进提供理论基础。这将有助于推动脂肪酶在工业上的广泛应用,并为相关领域的研究提供新思路和方向。

1.2 文章结构

文章结构部分的内容可以包括以下内容:

文章结构部分旨在介绍整篇文章的组织和内容安排。本文共分为引言、正文和结论三个部分。

引言部分主要有三个子部分:概述、文章结构和目的。

概述部分简要介绍了脂肪酶溶于水这个话题的背景和重要性。可以提到脂肪酶在生物化学、食品科学和医学等领域的应用,并简述脂肪酶溶解性的研究现状。

脂肪酶的用途

脂肪酶的用途

脂肪酶的用途

脂肪酶是一种广泛存在于生物体内的酶类,主要作用是催化脂肪水解反应。脂肪酶的用途非常广泛,从食品加工、制药业到环境工程、生物能源等领域均有重要应用价值。以下将详细介绍脂肪酶的主要应用。

一、食品加工

1. 奶制品:脂肪酶可以用于乳制品加工中的乳脂肪酶解,可以提高奶脂酸值,促进乳脂丰满,改善乳品质地和口感。

2. 油脂加工:脂肪酶在油脂加工中被广泛应用,例如在油脂水解反应中,可以将植物油脂水解为游离脂肪酸和甘油,用于生产酸式脂肪酸盐油和混合脂肪酸盐油;同时,脂肪酶还可以用于改善油脂的质地和口感。

3. 面粉加工:脂肪酶可以用于改善面粉质地,促进面粉的发酵和加工过程。

二、制药业

1. 药物合成:脂肪酶可以用于有机合成中,例如在合成酯类药物时可以作为催化剂,提高反应速率和产率。

2. 药物释放:脂肪酶可以用于缓控释药系统中,例如将药物与脂肪酶结合,通过脂肪酶的作用使药物在特定部位释放,实现药物的定向释放和控制释放。

三、环境工程

1. 污水处理:脂肪酶在污水处理中起到重要作用,可以用于去除污水中的油脂和脂肪类物质,提高污水的处理效果。

2. 生活垃圾处理:脂肪酶可以用于生活垃圾的生物降解过程中,通过降解脂肪类物质,减少垃圾的体积和对环境的污染。

四、生物能源

1. 生物柴油生产:脂肪酶被广泛应用于生物柴油的生产过程中,可以催化植物油脂的酯化反应,将植物油脂转化为生物柴油。

2. 生物氢产生:脂肪酶在生物氢生产中可以作为催化剂,促进底物的水解反应,提高氢气产量。

以上只是脂肪酶的一些主要应用领域,实际上脂肪酶在生物化工、医学、农业等领域也有很多其他的应用价值,例如药物代谢研究、动物饲料添加剂、制浆造纸工业等。鉴于脂肪酶的广泛应用前景,未来还将有更多新的应用领域不断发现和拓展。

脂肪酶_酶比色法_概述说明以及解释

脂肪酶_酶比色法_概述说明以及解释

脂肪酶酶比色法概述说明以及解释

1. 引言

1.1 概述

脂肪酶是一类具有催化作用的酶,在生物体内起着关键的功能。它们能够加速脂肪分子(甘油三酯和脂肪酸)的降解,从而促进脂肪代谢和能量释放。随着对脂肪酶及其应用领域的研究不断深入,人们发现了许多检测和分析脂肪酶活性的方法,其中酶比色法是一种被广泛应用的方法。

1.2 文章结构

本文将对脂肪酶和酶比色法进行详细描述和解释。首先,在“引言”部分,我们将给出本文的背景和目标,并简要概述脂肪酶以及酶比色法的重要性。接下来,将在“脂肪酶”部分介绍其定义、分类、生物学功能以及应用领域。紧接着,在“酶比色法”部分将详细讲解该方法的定义、原理、应用和优势,同时还会列举实验流程和步骤。然后,在“概述说明脂肪酶的工作机制”部分,将探讨脂肪酶的作用方式、反应条件和影响因素,并通过实例及实验结果解读进一步阐述。最后,在“结论”部分,将对本文的主要观点和发现进行总结,并展望和建议未来关于脂肪酶研究的方向。

1.3 目的

本文的主要目的是深入介绍脂肪酶和酶比色法,以提供关于脂肪酶工作机制及其检测方法方面的详尽信息。通过对脂肪酶概念、分类、生物学功能以及应用领域进行说明,读者能够全面了解脂肪酶在生物体内的重要性。此外,详细介绍酶比色法的定义、原理、应用、优势以及实验流程和步骤,有助于读者更好地理解该方法在测定脂肪酶活性方面的价值。最后,通过概述脂肪酶的工作机制并解读相关实验结果,读者将深入了解脂肪酶催化过程中的关键步骤和条件。希望本文能为研究人员提供有价值的信息,并对脂肪酶的研究和应用提供启示和指导。

脂肪酶的概述及应用

脂肪酶的概述及应用

脂肪酶的概述与应用

一脂肪酶概述、

脂肪酶〔Lipase,甘油酯水解酶〕隶属于羧基酯水解酶类,能够逐步的将甘油三酯水解成甘油和脂肪酸。脂肪酶存在于含有脂肪的动、植物和微生物〔如霉菌、细菌等〕组织中。包括磷酸酯酶、固醇酶和羧酸酯酶。脂肪酸广泛的应用于食品、药品、皮革、日用化工等方面脂肪酶广泛的存在于动植物和微生物中。植物中含脂肪酶较多的是油料作物的种子,如蓖麻籽、油菜籽,当油料种子发芽时,脂肪酶能与其他的酶协同发挥作用催化分解油脂类物质生成糖类,提供种子生根发芽所必需的养料和能量;动物体内含脂肪酶较多的是高等动物的胰脏和脂肪组织,在肠液中含有少量的脂肪酶,用于补充胰脂肪酶对脂肪消化的缺乏,在肉食动物的胃液中含有少量的丁酸甘油酯酶。

脂肪酶是一类具有多种催化能力的酶,可以催化三酰甘油酯及其他一些水不溶性酯类的水解、醇解、酯化、转酯化及酯类的逆向合成反响,除此之外还表现出其他一些酶的活性,如磷脂酶、溶血磷脂酶、胆固醇酯酶、酰肽水解酶活性等〔Hara;Schmid〕。脂肪酶不同活性的发挥依赖于反响体系的特点,如在油水界面促进酯水解,而在有机相中可以酶促合成和酯交换。

脂肪酶的性质研究主要包括最适温度与pH、温度与pH稳定性、底物特异性等几个方面。迄今,已别离、纯化了大量的微生物脂肪酶,并研究了其性质,它们在分子量、最适pH、最适温度、pH和热稳定性、等电点和其他生化性质方面存在不同〔Veeraragavan等〕。总体而言,微生物脂肪酶具有比动植物脂肪酶更广的作用pH、作用温度*围,高稳定性和活性,对底物有特异性〔Schmid等;Kazlauskas等〕。

脂肪酶活力测定方法及其比较

脂肪酶活力测定方法及其比较

脂肪酶活力测定方法及其比较

一、本文概述

脂肪酶是一类能够催化脂肪酸酯水解的酶类,广泛存在于动物、植物和微生物中,其在生物体内起着重要的代谢作用。脂肪酶活力测定方法的研究对于了解脂肪酶的催化性质、生物合成、调控机制以及在工业、医药和农业等领域的应用具有重要意义。本文旨在介绍常见的脂肪酶活力测定方法,包括滴定法、比色法、荧光法、高效液相色谱法等,并比较它们的优缺点,以期为读者提供一个全面、系统的脂肪酶活力测定方法参考。通过本文的阐述,读者可以了解各种测定方法的基本原理、操作步骤、适用范围以及注意事项,从而根据自身研究需求选择最合适的测定方法。本文还将探讨脂肪酶活力测定方法的未来发展趋势,以期为相关领域的研究提供有益的参考和启示。

二、脂肪酶活力测定的基本原理

脂肪酶活力测定主要基于脂肪酶水解脂肪酸的特性,通过测量水解产物的生成速率来评估酶的活性。脂肪酶是一种能够催化脂肪酸酯水解的酶,其催化反应可以表述为:脂肪酶 + 脂肪酸酯→脂肪酸 + 醇。在测定脂肪酶活力时,通常使用特定的底物,如三乙酸甘油酯(p-nitrophenyl butyrate)或橄榄油等,这些底物在脂肪酶的作用

下会水解生成相应的脂肪酸和醇。

在测定过程中,通常使用比色法、滴定法或高效液相色谱法等方法来检测水解产物的生成量。例如,当使用p-nitrophenyl butyrate 作为底物时,水解产生的p-nitrophenol在碱性条件下会呈现黄色,其颜色深浅与浓度成正比,因此可以通过比色法来测定其浓度,从而推算出脂肪酶的活力。

米曲酶脂肪酶

米曲酶脂肪酶

米曲酶脂肪酶

米曲酶和脂肪酶都是在生物化学和食品工业中有重要作用的酶。

米曲酶主要用于酿造行业,如米酒、酱油等的制作。它可以将淀粉分解成葡萄糖,从而促进发酵过程。米曲酶还可以用于生产酶制剂、饲料添加剂等。

脂肪酶则主要作用于脂肪,它可以将脂肪分解成脂肪酸和甘油。脂肪酶在食品工业中用于改善食品的口感、质地和风味,例如在乳制品和油脂加工中。此外,脂肪酶也在生物技术、洗涤剂制造和环保等领域有应用。

这些酶的具体用途和效果可能会因酶的来源、特性以及应用场景的不同而有所差异。在实际应用中,需要根据具体需求和条件选择合适的酶制剂,并遵循相关的使用指南和安全规范。

脂肪酶 淀粉酶

脂肪酶 淀粉酶

脂肪酶淀粉酶

脂肪酶和淀粉酶都是消化酶,位于人体消化系统中,帮助分解食物。

脂肪酶主要作用于脂肪类物质,如油脂、植物油等。它能将脂肪分解为甘油和脂肪酸,并使其能够被人体吸收和利用。

淀粉酶主要作用于淀粉和糖类物质。当我们食用含有淀粉的食物时,淀粉酶帮助将淀粉分解为糖分子,如葡萄糖和麦芽糖,使其能被人体吸收和利用。

这两种酶都是在消化过程中发挥重要作用的酶类。

脂肪酶

脂肪酶

②三酰甘油的改性(酯交换反应) 脂肪酶催化油脂改性, 由一种甘油酯生成 另一种甘油酯。 作用:改善食用油的质量 开发食用油的品种 提高食用油的营养价值 , , RCOOR +R”COOR RCOOR+R”COOR
2洗涤工业 3合成精细化学产品 用脂肪酶在有机溶剂中催化合成羧酸酯系列香 精酯、萜烯醇酯、中长链脂肪酸短链醇酯及长 链脂肪酸长链脂肪醇酯等系列产品。 4拆分消旋混合物 脂肪酶对手性化合物如醇、羧酸、酯、酰胺和 胺等均有较好的立体选择性,因此脂肪酶被广泛 地用来拆分外消旋醇和羧酸。拆分的主要途径 为立体选择性水解、酯化或转酯反应。
脂肪酶
生物催化过程
颜嘉辉 王榴圳 冯浩 严鹏 王炼炼 吴勇
一、脂肪酶的概述
• 脂肪酶的定义
脂肪酶( lipase) ,又称甘油酯水解酶 , 是指分解或合成高级 脂肪酸和丙三醇形成 的甘油三酸酯酯键的酶。脂肪酶是一 类特殊的酯键水解酶,只作用于异相系统, 即只在油水界 面上作用,而且只有当底物以微粒、小聚合分散状态或呈乳 化颗粒时, 脂肪酶对底物水解才有显著的催化作用。
• 3水添加量对产率的影响
水少或水多都会影响产率
• 4搅拌转速对产率的影响
转速过低过高都会影响蜡脂产率
• 5酶和十六醇流加对产率的影响
分批流加酶和十六醇可以增加产率
六、脂肪酶的应用
1食品工业 脂肪酶在食品工业中用于改善甘油三酯的结构, 从而使其物理性质发生变化,用于开发一系列 的功能性和营养性油脂食品。 ①三酰甘油的水解 脂肪酶酶促水解三酰甘油法可为食品工业提供 优质的原料,短链脂肪酸还可以改善食品的风 味和香味。(比较三酰甘油的常规水解方法和 酶水解方法)
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脂肪酶的概述与应用

一脂肪酶概述、

脂肪酶(Lipase,甘油酯水解酶)隶属于羧基酯水解酶类,能够逐步的将甘油三酯水解成甘油和脂肪酸。脂肪酶存在于含有脂肪的动、植物和微生物(如霉菌、细菌等)组织中。包括磷酸酯酶、固醇酶和羧酸酯酶。脂肪酸广泛的应用于食品、药品、皮革、日用化工等方面脂肪酶广泛的存在于动植物和微生物中。植物中含脂肪酶较多的是油料作物的种子,如蓖麻籽、油菜籽,当油料种子发芽时,脂肪酶能与其他的酶协同发挥作用催化分解油脂类物质生成糖类,提供种子生根发芽所必需的养料和能量;动物体内含脂肪酶较多的是高等动物的胰脏和脂肪组织,在肠液中含有少量的脂肪酶,用于补充胰脂肪酶对脂肪消化的不足,在肉食动物的胃液中含有少量的丁酸甘油酯酶。

脂肪酶是一类具有多种催化能力的酶,可以催化三酰甘油酯及其他一些水不溶性酯类的水解、醇解、酯化、转酯化及酯类的逆向合成反应,除此之外还表现出其他一些酶的活性,如磷脂酶、溶血磷脂酶、胆固醇酯酶、酰肽水解酶活性等(Hara;Schmid)。脂肪酶不同活性的发挥依赖于反应体系的特点,如在油水界面促进酯水解,而在有机相中可以酶促合成和酯交换。

脂肪酶的性质研究主要包括最适温度与pH、温度与pH稳定性、底物特异性等几个方面。迄今,已分离、纯化了大量的微生物脂肪酶,并研究了其性质,它们在分子量、最适pH、最适温度、pH和热稳定性、等电点和其他生化性质方面存在不同(Veeraragavan等)。总体而言,微生物脂肪酶具有比动植物脂肪酶更广的作用pH、作用温度范围,高稳定性和活性,对底物有特异性(Schmid等;Kazlauskas等)。

脂肪酶的催化特性在于:在油水界面上其催化活力最大,早在1958年Sarda和Desnnelv 就发现了这一现象。溶于水的酶作用于不溶于水的底物,反应是在2个彼此分离的完全不同的相的界面上进行。这是脂肪酶区别于酯酶的一个特征。酯酶(E C3.1.1.1)作用的底物是水溶性的,并且其最适底物是由短链脂肪酸(≤C8)形成的酯。

脂肪酶是重要的工业酶制剂品种之一,可以催化解脂、酯交换、酯合成等反应,广泛应用于油脂加工、食品、医药、日化等工业。不同来源的脂肪酶具有不同的催化特点和催化活力。其中用于有机相合成的具有转酯化或酯化功能的脂肪酶的规模化生产对于酶催化合成精细化学品和手性化合物有重要意义。

脂肪酶是一种特殊的酯键水解酶,它可作用于甘油三酯的酯键,使甘油三酯降解为甘油二酯、单甘油酯、甘油和脂肪酸。

酶是一种活性蛋白质。因此,一切对蛋白质活性有影响的因素都影响酶的活性。酶与底物作用的活性,受温度、pH值、酶液浓度、底物浓度、酶的激活剂或抑制剂等许多因素的影响。

脂肪酶在微生物中有广泛的分布,其产生菌主要是霉菌和细菌。已经公布的适用于甘油三酯加工的不同来源的脂肪酶有33种,其中18种来自霉菌,7种来自细菌。

脂肪酶可将甘油酯(油、脂)水解,在不同阶段可释放出脂肪酸、甘油二酯、甘油单酯及甘油。水解生成的脂肪酸,可以用标准的碱溶液滴定,以滴定值表示酶活力。

二脂肪酶的结构解析

1、分子结构

研究表明, 来源不同的脂肪酶 ,其氨基酸组成数目从 270 ~ 641 不等 , 其分子量为29 000~ 100 000。迄今为止 ,人们已经对多种脂肪酶进行克隆和表达 , 并利用 X-衍射等手段和定向修饰等技术测定了酶的氨基酸组成、晶体结构、等电点等参数, 确定了组成脂肪酶活性中心的三元组(triad)结构。表1列出了几种常见的脂肪酶的结构特征参数。正如下表所示, 多数酶都有变种(如 CCL(A)和CCL(B)、GCL Ⅰ和 GCL Ⅱ等),不过这些不同变种的酶具有绝大多数相同的氨基酸序列, 其氨基酸组成数目完全相同, 不同的只是个别氨基酸的差异。一般而言, 不仅构成活性中心的三元组氨基酸种类相同 , 而且位置不变;其分子量和等电点略有不同。

2、脂肪酶催化中心三元组

研究表明,尽管不同来源的脂肪酶有不同的氨基酸组成(残基数目、分子量、三维空间结构等),但由于生物的同源性和进化过程的保守性 ,其催化中心拥有相似或相同的特征区 His-X-Y-Gly-Z-Ser-W-Gly或 Y-Gly-His-Ser-W-Gly(W 、X、

Y、Z 指非特异性氨基酸)。如图1所示,绝大多数脂肪酶的活性中心都由 Ser 和His 参与组成, His、Ser与另一种氨基酸残基(如 CCL 和 GCL的Glu、RML 和hPL 的 Asp 等)一起构成脂肪酶催化活性中心的三元组(triad)。如图 2 所示

3、立体结构

具体参数方法:

三.脂肪酶的纯化与表达

pPIC9k- mRCL 表达质粒的构建

1.以华根霉基因组DNA为模板使用PCR方法扩增RCL(华根霉脂肪酶全基因)成熟肽,扩增的基因片段纯化后克隆到载体 pMD19-T Vector 中,转化E.coli.DH5α及进行重组质粒的筛选,由此构建重组质粒 pMD19-mRCL 。

2.由质粒 pMD19-mRCL切下目的基因片段,连入表达载体 pPIC9k 构建表达质粒 pPIC9k-mRCL 。

(1)质粒双酶切

克隆的质粒 pMD19-mRCL 和酵母表达质粒 pPIC9k 分别被 Avr

Ⅱ和Not I 双酶切,得到pMD19-mRCL质粒双酶切的 800bb 左右的小片段以及 pPIC9k 质粒的双酶切线性质粒大片段,回收目的条带。(2)连接

载体 DNA 与目的 DNA 片段混合连接。

(3)转化 E.coli.DH5α及重组质粒的筛选

重组质粒pPIC9K-mRCL的构建

重组蛋白在巴斯德毕赤酵母 GS115 中的初步表达

1. 巴斯德毕赤酵母感受态细胞的制备

2. 巴斯德毕赤酵母的电转化

对质粒线性化,回收酶切产物;再与巴斯德毕赤酵母感受态细胞

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