实验七尿淀粉酶活性测定
血、尿液淀粉酶AMS两点法测定-检验科生化室作业书
血、尿液淀粉酶AMS两点法测定1.实验原理VitrosAMS试剂是一种干燥，多涂层的，在聚合物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。
将一滴10ul的患者样品滴于干片上，样品就被分布层均匀地分布并渗透到下面的试剂层。
分布层含有反应所需的染色淀粉底物（与支链淀粉共价化合），样品中的淀粉酶催化该染色淀粉水解成更小的有色糖。
随后这些有色糖进入下面的试剂层。
分别在孵育2.3分钟和5分钟时用反射仪测定试剂层中有色糖的反射强度，两次读数间的差值与样品中的淀粉酶活性成正比。
测定方式：两点法波长：540nm测试时间和温度：37℃约5分钟反应过程：淀粉酶染色支链淀粉——————→有色糖2.标本：2.1病人准备：无特殊。
2.2样品类型：血清；肝素锂/钠抗凝血浆。
定时收集的，稀释后的尿样。
2.3标本采集与处理：2.3.1血清和血浆样品血浆中淀粉酶活性约比血清中高20U/L。
不能使用钙螯合物作抗凝剂，如草酸，枸橼酸和EDTA。
样品采集后4小时内要离心标本，吸出血清。
处理样品时要将其当成生物污染品。
2.3.2尿液样品定时或随时采集的尿液，特别要注意的是：含有冰醋酸，浓盐酸或者防腐剂中有乙二羟化四甲铵和氧化汞的样品不能测淀粉酶。
尿液样品在测试前要冷藏在2～8℃。
处理样品时要将其当成生物污染品。
3.标本的存放：血清、血浆、尿液室温下最多7天；4～8℃冷藏最多1个月；样品不可冷冻保存。
4.标本的运输：样品要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。
5.标本拒收的标准：污染、抗凝剂、防腐剂不符合要求，标本放置时间过长。
6.试验材料：6.1测试AMS所需的物品包括：Vitros化学定标物Kit3；Vitros特制质控液；Vitros7%BSA稀释液。
强生厂家提供原装进口，试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。
6.1.1试剂组成：干片成分：反应成份是染色支链淀粉。
其它成份有染色剂，粘合剂，缓冲剂，表面活性剂，稳定剂和媒染剂。
实验七 淀粉水解试验
3、试剂:卢哥氏碘液。 4、实验用品：平皿,接种环,酒精灯,
试管,接种针等。
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淀粉培养基（pH7.2）
蛋白胨
10g
NaCl
5g
牛肉膏
5g
可溶性淀粉
10g
琼脂
15g
H2Oቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
1000ml
应用少量水先将可溶性淀粉溶解
3、培养:将接种后的平皿置于37 ℃恒温箱培养24h。
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4、检测:取出平板,打开平皿盖, 滴加少量的碘液于平板上,轻轻 旋转,使碘液均匀铺满整个平板. 菌落周围如出现无色透明圈,则 说明淀粉已经被水解,表示该细 菌具有分解淀粉的能力。可以用 透明圈大小说明测试菌株水解淀 粉能力的强弱。
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四、实验步骤
1、准备淀粉培养基平板: 将熔化后冷却至50℃左右 的淀粉培养基倒入无菌平 皿中,待凝固后制成平板。
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2、接种:用记号笔在平板底 部划成两部分,在每部分分别 写上菌名,用接种环取少量的 待测菌,点接在培养基表面的 相对应部分的中心,其中一个 菌种应是枯草杆菌做对照菌。
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五、作业 题
绘图表示淀粉水解试验的实验结果
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实验七 淀粉水解试验
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一、目的要求 1、检测细菌能否产生淀粉酶和 利用淀粉的能力。 2、学习点接法接种。
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二、实验原理 有些细菌具有合成淀粉酶的能力， 可以分泌胞外淀粉酶.淀粉酶可以 使淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖,淀 粉水解后遇碘不再变蓝色。
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三、仪器和材料
1、活材料:大肠杆菌(E. coli),枯草 杆菌(Bacillus subtilis),
实验七 尿淀粉酶活性测定
实验七尿淀粉酶活性测定淀粉酶(AMY或AMS)在体内的主要作用是水解淀粉，它随机地作用于淀粉分子内的α—1，4糖苷键生成葡萄糖、麦芽糖、寡糖及糊精。
血清中的淀粉酶主要有胰型(P型)和唾液型(S型)及其亚型同工酶组成，P型淀粉酶主要来源于胰腺，S型淀粉酶主要来源于唾液腺。
正常淀粉酶因分子量小，故可从肾小球滤过而由尿中排出。
【目的】1、验证淀粉酶的催化作用。
2、观察淀粉及其水解产物分别与碘反应呈现的颜色变化。
【原理】血清及尿中的淀粉酶来源于胰腺和唾液腺，正常血清与尿中有一定活性。
Winslow氏法测定尿和血清中淀粉酶活性是将试样作等比稀释，观察一系列试样在规定的37℃、30分钟的条件下，恰好能将0.1%淀粉溶液1ml水解（指加入碘液后不再呈蓝色）的酶量定为淀粉酶的一个活性单位，乘以尿的稀释倍数，即可得知每项ml尿液中的淀粉酶活性。
【器材】试管（10mm×100mm）、试管架、电热恒温水浴箱、吸管、洗耳球、滴管。
【试剂】1、9%NaCl2、0.3%碘液3、0.1%淀粉溶液【操作】1、准备尿液（自备）。
2、取10支试管，编号，用吸管向管中加入0.9%NaCl 1ml。
3、用1ml吸管（注意应用刻度到头的）向第一管加尿液1ml，混合，再将试管中的液体吸起，然后任其流回试管，如此重复三次，以便全管混匀，并借此冲洗吸管内壁。
吸出此混合液1ml移入第二管中。
4、用同法处理第二管使之混匀，并取出1ml置于第三管中。
依此类推，如此继续稀释至第九管后，吸出1ml混合液弃之，这样既可获得分别含原尿液为1/2ml,1/4ml,1/8ml,……1/512ml的不同浓度的尿稀释液。
第十管不加尿液作为对照管。
5、从第十管起依次向各管迅速准确加入0.1%淀粉液2ml，迅速摇匀（是否充分混匀往往是实验成败的关键！），置37℃水浴中，确保30分钟。
6、取出各管后，立即向各管中加入0.3%碘液2滴，摇匀后观察各管的颜色。
*注：各管依次出现黄到蓝的色序，黄色表明无淀粉存在，浅红色紫色表明有淀粉的水解中间产物，兰色表明有淀粉存在。
淀粉酶活力的测定
收集1管的同学，将0.05 mL稀释到15 mL 收集2管的同学，将0.05 mL稀释到10 mL
1、分别计算0时刻、5 min时刻的A540nm平均值。 2、根据图表中的实验结果，并利用实验 “3,5-二
硝基水杨酸比色法测定糖的含量”中制作的标准 曲线，计算淀粉酶的活力。
需要详细过程。
5 min时刻吸光值
5 min时刻还原糖mg数
0 min时刻吸光值
0 min时刻还原糖mg数
二者相减，计算酶活力。 1 U=1 mg 还原糖/min·mL 酶*稀释倍数
七. 思考题
1、在测定酶活力时应注意哪些反应条件？为什么？ 2、本实验中两次加入NaOH溶液的意义是什么?
八、分析
1.三种酶活力大小顺序是怎样，为什么是这样？ 2.酶液的稀释倍数是否要改变。 3.计算酶液的总活力、回收率。
操作
0号管 0时刻 5min时刻 0时刻 5min时刻 0时刻 5min时刻 B1 B1’ F1 F1’ B2 B2’ F2 F2’ B3 B3’ F3 F3’
淀粉酶液 (ml)
0.3
0.2
0.5
H2O (ml) 3.5 pH 6.8缓冲液 0.3 ％ NaCl
预热
各 1 ml 各 1 ml 摇匀， 37 ℃ 水浴 2 min
实验七 淀粉酶活力的测定
一、实验目的
掌握测定淀粉酶活力的原理和基本方法
二、实验原理
淀粉酶活性的测定
实验七 淀粉酶活性的测定一、目的淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称，按照其水解淀粉的作用方式，可以分成a淀粉酶，b淀粉酶等。
a淀粉酶和b淀粉酶是其中最主要的两种，存在于禾谷类的种子中。
b淀粉酶存在于休眠的种子中，而a淀粉酶是在种子萌发过程中形成的，本实验的目的在于 掌握这两种酶的提取和测定方法。
二、原理a淀粉酶和b淀粉酶，各有其一定的特性，如b淀粉酶b淀粉酶不耐热，在高温下易钝 化，而a淀粉酶不耐酸，在 pH 3.6 以下则发生钝化，在萌发种子的提取液中，这两种淀粉 酶同时存在。
可利用这两种酶的不同特性加以处理，钝化其一，即可测定另一种酶的活性。
测定a淀粉酶活性时，可将提取液加热到 70℃维持 15 分钟以钝化b淀粉酶，而测定b淀粉 酶时，可用 pH 3.6的醋酸缓冲液处理提取液，以钝化a淀粉酶。
淀粉酶水解淀粉生成的麦芽糖，可用 3, 5二硝基水扬酸试剂测定，由于麦芽糖能将后 者还原生成硝基氨基水扬酸的显色基团， 其颜色的深浅与糖的含量成正比， 故可求出麦芽糖 的含量。
常用单位时间内生成麦芽糖的毫克数表示淀粉酶活性的大小。
在实验中要严格控制温度及时间，以减小误差。
并且在酶的作用过程中，四支测定管及 空白管不要混淆。
三、实验材料、仪器和试剂1．实验材料萌发的小麦种子（芽长 1 厘米左右）2．仪器（1）小台秤（2）研钵（3）容量瓶：50ml ´1, 100ml´1（4）具塞刻度试管：15ml ´6（5）试管：8 支（6）刻度吸管：1ml，2ml，10ml（7）离心机（8）恒温水浴（9）分光光度计3．试剂（1） 1%淀粉溶液, 称取1克可溶性淀粉, 加入80ml左右蒸馏水, 在电炉上加热溶解, 等 冷却后, 定容到 100ml。
尿液淀粉酶活力测定实验
实验十五
尿液淀粉酶活力测定 （Winslow）氏法 ）
原理：
临床上通常用Winslow氏法测定尿或血清 氏法测定尿或血清 临床上通常用 中淀粉酶活性。 中淀粉酶活性 。 该法对淀粉酶活性单位的 规定是： 分钟， 规定是：在37℃，30分钟，恰好能将 ℃ 分钟 恰好能将0.1% 淀粉溶液1m1水解 （ 指加入碘液后不再呈 水解（ 淀粉溶液 水解 兰色或红色）的酶量定为一个活力单位。 兰色9%NaC1； ； 2.0.1%淀粉； 淀粉； 淀粉 3.碘化钾一碘溶液 （ 20KI和 10g碘溶于 碘化钾一碘溶液（ 碘化钾一碘溶液 和 碘溶于 100m1水中，使用前稀释 倍）； 水中， 水中 使用前稀释10倍 4.移液管； 移液管； 移液管 5.试管； 试管； 试管 6.恒温水溶锅。 恒温水溶锅。 恒温水溶锅
操作：
1. 取 10 支 试 管 ， 按 次 序 记 上 号 码 ， 各 加 0.9% NaCl 1 m1。 。 2. 用 1m1 移液管 加尿液 加尿液1m1 于第 一管 ， 使其与 0.9%；NaC1混合（若尿液中含淀粉酶过多，应 混合（ ； 混合 若尿液中含淀粉酶过多， 预先将尿液适当稀释） 用移液管吸取， 预先将尿液适当稀释 ） 。 用移液管吸取 ， 然后 任其流出。反复三次，使全管混匀。 任其流出。反复三次，使全管混匀。 从第一管吸出1m1到第二管中，混匀。吸出 到第二管中， 从第一管吸出 到第二管中 混匀。吸出1m1 到第三管……依次类推。到第九管吸出 依次类推。 弃之。 到第三管 依次类推 到第九管吸出1m1弃之。 弃之 这 样 即 可 获 得 分 别 含 有 尿 液 1/2 、 1/4 、 1/8……1/512 m1的不同浓度的尿稀释液 ， 第 10 的不同浓度的尿稀释液， 的不同浓度的尿稀释液 管不加尿液作为对照管。 管不加尿液作为对照管。
实验十七尿液淀粉酶活力测定（winslow）氏法
5.从第 10 管起依次迅速准确加入 0.1%淀粉液 2m1。迅速摇匀。置37℃，保温30分钟 。 6. 保温 30 分钟后，取出各管。向各管中加稀 碘液1-2滴摇匀。观察各管的颜色。各试管中 出现黄到蓝的色序。黄色表明无淀粉存在， 浅红色到紫色表明有淀粉的水解中间产物。 蓝色表明有淀粉或其初期水解产物存在。
尿液淀粉酶活力测定 （Winslow）氏法
实验目的：
掌握酶活力测定的一般思路与方法；
ห้องสมุดไป่ตู้理：
临床上通常用 Winslow 氏法测定尿或血清 中淀粉酶活性。该法对淀粉酶活性单位的 规定是：在 37℃， 30分钟，恰好能将0.1% 淀粉溶液 1m1 水解（指加入碘液后不再呈 兰色）的酶量定为一个活力单位。
【参考值】 （尿）8~64单位；（血清）4~32单位。 【注意事项】 1.试管干净。吸管专管专用。 2.尿液留取中段尿，结果准确。 3.判断试管颜色时要与第十管比较。
【临床意义】 胰腺炎、腮腺炎、胆道疾病时尿淀粉酶活性 增高。
血清及尿淀粉酶来自胰腺和唾液腺的分泌。在正常 情况下，大部分淀粉酶随消化液进入消化道，少量可进 入血液循环。引起血清淀粉酶活性增高有三个方面的原 因： ① 胰腺组织的炎症损伤使酶释放增加； ② 分泌过多； ③ 胰腺等组织排泄受阻。 由于淀粉酶分子量较小，易通过肾小球从尿排出， 所以，血清淀粉酶活性增高也反应在尿中。由此可知， 血和尿淀粉酶检查主要用于诊断胰腺炎。
试剂与器材：
1.0.9%NaC1； 2.0.1%淀粉； 3.0.3%碘溶液; 4.移液管； 5.试管； 6.恒温水溶锅。
操作：
1.留取尿液（中段尿） 2. 取 10 支 试 管 ， 按 次 序 记 上 号 码 ， 各 加 0.9% NaCl 1 m1。 3. 用 1m1 移液管加尿液 1m1 于第一管，使其与 0.9%NaC1混合。用移液管吸取，然后任其流出。 反复三次，使全管混匀。 4. 从第一管吸出 1m1 到第二管中，混匀。吸出 1m1 到第三管 …… 依次类推。到第九管混匀后 , 吸出 1m1 弃之。这样即可获得分别含有尿液 1/2 、 1/4 、 1/8……1/512m1 的不同浓度的尿稀释液， 第10管不加尿液作为对照管。
实验七探索影响淀粉酶活性的条件
实验七(2) 探索影响淀粉酶活性的条件执笔：审阅：审批：一．实验原理：淀粉遇碘后，形成色的复合物。
淀粉酶可以使淀粉逐步，它们遇碘后，不形成的复合物，但能够与斐林试剂发生氧化还原反应，生成砖红色的沉淀。
二．目的要求：1．初步学会探索影响的方法。
2．探索淀粉酶在水解的情况。
三．材料用具：质量分数为新鲜淀粉酶溶液，质量分数为淀粉溶液，质量分数为的盐酸，质量分数为的氢氧化钠溶液，热水，蒸馏水，冰块，碘液，斐林试剂。
四．方法步骤：（一）温度对酶活性的影响1．取3支洁净的试管，编上号，并且分别注入2mL 淀粉溶液。
2．将3支试管分别放入、沸水和中，维持各自的温度。
3．在3支试管中各注入1mL新鲜的溶液，摇匀后，维持。
4．在3支试管中各滴入1滴，然后摇匀。
5．观察这3支试管中溶液颜色的变化是。
（二）PH对酶活性的影响1．取3支洁净的试管，编上号，并且分别按下表中序号l至序号5的要求操作。
2．这3支试管，使试管内的液体混合均匀。
然后，将3支试管的下半部浸到的热水中，保温。
3．在3支试管中各加入2mL ，边加边试管，以便使试管内的物质。
4．将3支试管的放进盛有热水的大烧杯中，用酒精灯加热，煮沸。
5．观察这3支试管中溶液颜色的变化情况，观察结果。
结论：讨论：1．在温度对酶活性影响的实验中，为什么要在加入淀粉酶溶液之前控制好各自的温度?2．在pH对酶活性影响的实验中，能不能按照表格中序号1、5、2、3、4的步骤操作?为什么?例题解析：[例题1]为验证pH对唾液淀粉酶活性的影响，实验如下：1)操作步骤：①在1—5号试管中分别加入0．5％淀粉液2mL。
②加完淀粉液后，向各试管中加入相应的缓冲液3mL，使各试管中反应液的pH依次稳定在5.00、6.20、6.80、7.40、8.00。
③分别向1—5号试管中加入0．5％唾液1 mL，然后进行37℃恒温水浴。
④反应过程中，每隔1min从第3号试管中取出一滴反应液，滴在比色板上，加1滴碘液显色，待呈橙黄色时，立即取出5支试管，加碘液显色并比色，记录结果。
淀粉酶活性测定实验报告
实验七淀粉酶活性的测定一、研究背景及目的酶是高效催化有机体新陈代谢各步反应的活性蛋白，几乎所有的生化反应都离不开酶的催化，所以酶在生物体内扮演着极其重要的角色，因此对酶的研究有着非常重要的意义。
酶的活力是酶的重要参数，反映的是酶的催化能力，因此测定酶活力是研究酶的基础。
二、实验原理萌发的种子中存在两种淀粉酶，分别是α-淀粉酶和β-淀粉酶，β-淀粉酶不耐热，在高温下易钝化，而α-淀粉酶不耐酸，在pH3.6下则发生钝化。
本实验的设计利用β-淀粉酶不耐热的特性，在高温下（70℃）下处理使得β-淀粉酶钝化而测定α-淀粉酶的酶活性。
酶活性的测定是通过测定一定量的酶在一定时间内催化得到的麦芽糖的量来实现的，淀粉酶水解淀粉生成的麦芽糖，可用3,5-二硝基水杨酸试剂测定，由于麦芽糖能将后者还原生成硝基氨基水杨酸的显色基团，将其颜色的深浅与糖的含量成正比，故可求出麦芽糖的含量。
常用单位时间内生成麦芽糖的毫克数表示淀粉酶活性的大小。
然后利用同样的原理测得两种淀粉酶的总活性。
实验中为了消除非酶促反应引起的麦芽糖的生成带来的误差，每组实验都做了相应的对照实验，在最终计算酶的活性时以测量组的值减去对照组的值加以校正。
在实验中要严格控制温度及时间，以减小误差。
并且在酶的作用过程中，四支测定管及空白管不要混淆。
三、材料、试剂与仪器1、实验材料：萌发的小麦种子（芽长1厘米左右）2、仪器：722光栅分光光度计：DK-S24型电热恒温水浴锅：离心机：3、试剂：①1%淀粉溶液（称取1克可溶性淀粉，加入80ml蒸馏水，加热熔解，冷却后定容至100ml）；②pH5.6的柠檬缓冲液：A液（称取柠檬酸20.01克，溶解后定容至1L）B液（称取柠檬酸钠29.41克，溶解后定容至1L）取A液5.5ml、B液14.5ml混匀即为pH5.5柠檬酸缓冲液；③3，5-二硝基水杨酸溶液（称取3，5-二硝基水杨酸1.00克，溶于20ml 1M氢氧化钠中，加入50ml蒸馏水，再加入30克酒石酸钠，待溶解后，用蒸馏水稀释至100ml，盖紧瓶盖保存）；④麦芽糖标准液（称取0.100克麦芽糖，溶于少量蒸馏水中，小心移入100ml容量瓶中定容）；⑤0.4M NaOH四、实验步骤1. 酶液的制备称取2克萌发的小麦种子与研钵中，加少量石英砂，研磨至匀浆，转移到50ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，混匀后在室温下放置，每隔数分钟振荡一次，提取15-20分钟，于3500转/分离心15分钟，取上清液备用。
酶的专一性实验报告
酶的专一性实验报告篇一:实验酶的活性及专一性测定实验七酶的活性及专一性测定一、实验目的通过本实验，了解酶的活性测定方法及其对底物催化的专一性。
二、实验原理唾液淀粉酶能专一的催化淀粉水解，生成一系列水解产物，即糊精、麦芽糖、葡萄糖等。
麦芽糖或葡萄糖都属于还原糖，能使班氏试剂中的二价铜离子还原成亚铜，并生成砖红色的氧化亚铜。
淀粉酶不能催化蔗糖水解，且蔗糖本身不是还原糖，所以不能与班氏试剂作用呈色，以此证明酶催化底物的专一性。
三、器材及试剂1. 器材:试管、试管夹、样品杯、滴瓶、温度计、恒温水浴锅，冰箱等。
2. 试剂:(1)0.5%淀粉溶液(含0.3%NaCl):称取可溶性淀粉0.5g，加5ml蒸馏水调成糊状，徐徐倒入80ml煮沸的蒸馏水中，不断搅拌，待其溶解后，加0.3gNaCl，加蒸馏水至100ml。
此液应新鲜配制，防止细菌污染。
(2)2%蔗糖溶液:称2g蔗糖，加蒸馏水至100ml溶解。
(3)班氏试剂:溶解结晶硫酸铜17.3g于100ml热的蒸馏水中，冷却后加水至150ml为A液。
取柠檬酸钠173g和无水碳酸钠100g，加蒸馏水600ml ,加热溶解，冷却后加水至850ml为B液。
将A液缓慢倒入B液中，混合即可。
(4)稀释唾液:用清水漱口，清除食物残渣。
再含蒸馏水15ml作咀嚼运动，2分钟后将稀释唾液收集于样品杯中备用。
(5)碘-碘化钾溶液:四、实验方法1. 唾液淀粉酶的活性测定唾液的稀释:取10支试管，分别编上号1-6，取1ml唾液加入1号试管，加水稀释10倍后从中取出1ml加入2号试管，依次梯度稀释。
各取上述稀释的唾液各1ml，分别加入相应编号的试管里，然后向6支试管内同时加入1ml的0.5,的淀粉溶液，振荡混匀后放入37? 恒温水浴中，10分钟后取出，滴加2滴碘液，振荡混匀，观察颜色，选取颜色变化适中的一支，记录稀释倍数，计算酶的活性，用于后续实验。
2. 淀粉酶的专一性取3个试管，分别编号，按下表操作，记录实验现象。
实验七 探索影响淀粉酶活性的条件
2ml
煮沸 1mil
有砖红色沉淀
2ml
煮沸 1mil
无砖红色沉淀
2ml
煮沸 1mil
无砖红色沉淀
实验现象
淀粉遇碘后，形成蓝紫色的复合物。淀粉酶可以 使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖。麦芽糖和葡 萄糖遇碘后，不形成蓝紫色的复合物。麦芽糖和 葡萄糖能够与斐林试剂发生氧化还原反应，生成 砖红色的氧化亚铜沉淀。
1、初步学会探索影响酶活性条件的方法。 2、探索理解淀粉酶在不同的温度和PH催化淀粉 水解的情况。
试管，量筒，大、小烧杯，滴管，试管夹,酒精灯， 三脚架，石棉网，温度计，火柴。 质量分数为2%的新鲜淀粉酶溶液，质量分数为 3%的可溶性淀粉溶液，质量分数为5%的盐酸， 质量分数为5%的氢氧化钠溶液，热水，蒸馏水, 冰块, , 碘液,斐林试剂。
1
2
3
2、加蒸馏水1ml
加NaOH1ml
加HCl1ml
1
2
3
3、各加可溶性淀粉溶液2ml
1
2
3
4、放入60º C热水中
5、加斐林试剂2ml
1
2
3
60º C热水
60º C热水 温度条件保持5min
60º C热水
6、煮沸1min
1 2 3
7、实验现象
1
2
3
二、PH对酶活性的影响 ：取三支洁净试管编上号分别按下表中序
取三支洁净试管，编上号，并分别按下表中序 号1至5要求操作。
序 号 1 2 3
项
目
试
管
可溶性淀粉溶液 温度条件 (保持5min) 新鲜淀粉酶溶液 （保持5min）
1 2ml
60º C热水
2 2ml
尿淀粉酶速率法参考范围_解释说明以及概述
尿淀粉酶速率法参考范围解释说明以及概述1. 引言1.1 概述尿淀粉酶速率法是一种常用的临床实验室检测方法，用于评估人体尿液中淀粉酶的活性水平。
淀粉酶是一种消化酶，主要在胰腺和唾液腺中分泌，能够催化淀粉的水解反应。
尿淀粉酶速率法可以通过测量尿液中淀粉酶催化底物反应产生的乙醇所消耗的时间来确定其活性。
1.2 文章结构本文将按照以下结构进行介绍和阐述：引言部分主要对尿淀粉酶速率法进行概述，并描述文章的结构安排；接下来将详细介绍尿淀粉酶速率法的定义、原理、应用领域以及方法步骤；随后将重点探讨参考范围解释说明，包括参考范围的定义与作用、影响参考范围的因素以及解读参考范围时需要注意的事项；接着进行结果分析与案例讨论，总结常见尿淀粉酶速率结果分析，并讨论实际应用场景下的案例；最后，结论部分将总结研究结果并展望未来的研究工作。
1.3 目的本文旨在提供关于尿淀粉酶速率法参考范围的解释说明，并给出对相关结果进行正确解读和分析的指导。
通过深入探讨尿淀粉酶速率法的原理、应用领域和方法步骤，读者能够更好地理解该检测方法，并能够准确评估尿淀粉酶活性水平。
同时，为了帮助临床实验室和医学科研人员更好地利用这一方法，本文还将提供一些常见结果分析与案例讨论以及可能出现的异常情况、原因和处理方法，以期促进尿淀粉酶速率法在临床诊断中的应用。
2. 尿淀粉酶速率法：2.1 定义和原理：尿淀粉酶速率法是一种用于测量尿液中淀粉酶活性的方法。
淀粉酶是一种消化酶，主要存在于胰腺和唾液中，它参与了碳水化合物的消化过程。
尿液中的淀粉酶活性可以反映肾脏和胰腺的功能状态，对于诊断胰腺疾病、肾功能评估以及监测疾病的进展具有重要意义。
该方法基于淀粉酶催化底物（如淀粉）降解产生的产品（如葡萄糖）与染色试剂（如碘化钾溶液）之间的反应。
在适当条件下，所形成的复合物会呈现出特定的颜色。
通过测量产生的颜色强度与标准曲线进行比较，可以确定尿液样品中淀粉酶活性的相对水平。
实验七 淀粉酶动力学分析
实验七 淀粉酶动力学分析（Ⅱ）——淀粉酶解米氏常数测定与阿卡波糖竞争性抑制动力学计算（4学时）第四部分 α-淀粉酶K m 值的测定一、实验目的了解并掌握米氏常数的意义和测定方法。
二、实验原理当底物浓度在较低浓度增加时，酶促反应速度随着底物浓度的增加而迅速增加。
当底物增至一定浓度后，即使再增加其浓度，反应速度也不会增加很快。
这是由于酶浓度限制了所形成的中间络合物浓度的缘故。
Michaelis 和Menten 推导得出底物浓度和酶促反应速度的关系式为：][][max S K S V m +=υ此式称为米氏方程，式中：υ为反应速度，即每升反应体系中每分钟形成葡萄糖的摩尔数（mol/（L·min ））；m ax V 为最大反应速度（mol/（L·min ））；][S 为底物浓度，此实验以反应体中淀粉中葡萄糖残基的摩尔浓度表示（mol/L ），注意！应以反应体系总体积计算底物浓度，如淀粉溶液浓度为1%，反应体系中有3 mL 淀粉溶液和1 mL 淀粉酶液，则淀粉底物浓度应为：[]=+⨯=13316210S 0.0463 mol/L 10——1%的淀粉溶液浓度为10 g/L 180——淀粉中的葡萄糖残基的分子量 3——反应体系中1%淀粉溶液的体积（mL ） 1——反应体系中α-淀粉酶的体积（mL ）m K 为米氏常数，单位与底物浓度相同（mol/L ）。
按此方程，可用作图法求出m K ，常用的方法为双倒数作图法。
取米氏方程的倒数，以υ1对][1S 作图：maxmax 1][11V S V K m +=υ得一直线，其斜率为m ax V K m ，截距为m ax1V ，求出m K 。
三、实验器材与试剂实验器材1-16. 见实验七第一部分17. 化学试剂：见实验七第二部分 实验试剂1. pH5.0的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液2. 1%淀粉溶液：称取1 g 可溶性淀粉的200 mL 烧杯中，用5 mL pH5.0的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液调成糊状。
尿淀粉酶实验报告
尿淀粉酶实验报告尿淀粉酶实验报告引言：尿淀粉酶是一种重要的生化指标，用于检测人体内淀粉酶的活性水平。
淀粉酶是一种消化酶，主要在胰腺中合成，能够分解食物中的淀粉为葡萄糖分子，为身体提供能量。
通过测量尿液中淀粉酶的活性，可以了解人体的胰腺功能和消化系统的健康状况。
本实验旨在通过对尿液样本的检测，分析尿淀粉酶的活性水平，并探讨可能的影响因素。
实验材料与方法：1. 实验材料：- 尿液样本- 淀粉酶试剂盒- 试剂盒使用说明书- 显微镜- 试管- 移液器- 计时器2. 实验步骤：a) 收集尿液样本：使用干净的容器收集新鲜的尿液样本。
b) 操作试剂盒：按照试剂盒使用说明书的指示，准备好所需的试剂。
c) 加入试剂：将尿液样本和试剂按照说明书中的比例加入试管中，充分混合。
d) 反应时间：根据说明书中的要求，将试管放置在恒温水槽中，进行反应。
e) 反应结束：根据说明书中的要求，使用计时器控制反应时间，保证准确性。
f) 检测结果：使用显微镜观察试管中的尿液样本，记录淀粉酶的活性水平。
结果与讨论：根据实验结果，我们可以得出以下结论：1. 尿淀粉酶活性的正常范围：根据临床实践和研究，尿淀粉酶的正常活性范围在一定程度上可以反映人体的胰腺功能和消化系统的健康状况。
正常人的尿淀粉酶活性一般较低，通常在0-20单位之间。
如果尿淀粉酶活性超出正常范围，可能意味着胰腺功能异常或消化系统存在问题。
2. 影响尿淀粉酶活性的因素：尿淀粉酶活性受到多种因素的影响，包括饮食、生活习惯和疾病等。
高蛋白饮食、胰腺炎、胆囊炎等疾病都可能导致尿淀粉酶活性的升高。
此外，酒精、某些药物和吸烟也可能对尿淀粉酶活性产生影响。
因此，在进行尿淀粉酶实验时，需综合考虑患者的饮食和生活习惯等因素，以及其他相关的临床指标。
3. 实验的局限性：尿淀粉酶实验虽然能够提供一定的参考价值，但也有一定的局限性。
尿淀粉酶活性受到多种因素的影响，因此仅仅通过尿淀粉酶的活性水平来判断胰腺功能和消化系统的健康状况是不够全面的。
尿淀粉酶(UAMY)
尿淀粉酶（UAMY）
尿淀粉酶（UAMY）介绍：
淀粉酶为胰腺所分泌的消化酵素，经胰导管随胰液排入十二指肠。
测定尿淀粉酶主要用于胰腺炎的诊断。
尿淀粉酶（UAMY）正常值：
随机尿： 10~490U/L。
(注：具体参考值请根据各实验室而定。
)
尿淀粉酶（UAMY）临床意义：
异常结果：
尿淀粉酶较血清淀粉酶增高较迟，于急性胰腺炎起病后12～24小时始可增高，下降亦较慢(多持续3～10天)。
慢性胰腺炎急性发作时，可有中等程度增高。
此外，胰腺癌、胰腺损伤、急性胆囊炎等，此酶活性亦增高。
需要检测的人群：
出现腹痛、腹胀、恶心、呕吐、发热的人
尿淀粉酶（UAMY）注意事项：
检查前：禁止剧烈运动、重体力劳动，停止服用利尿剂、两性霉素B等药物。
尿淀粉酶（UAMY）检查过程：
收集受检测者的尿液，用免疫法检测。
试验七酶的基本性质
实验七酶的基本性质一、实验目的1．了解酶催化的高效性、专一性；2．pH、温度、抑制剂和激活剂对酶活力的影响。
二、实验原理过氧化氢酶广泛分布于生物体内，能将代谢中产生的有害的H2O2分解成H2O和O2，其催化效率比无机催化剂铁粉高10个数量级。
酶的另一特点是具有高度的特异（专一）性，淀粉酶和蔗糖酶虽然都催化糖苷键的水解，但是淀粉酶只对淀粉起作用，蔗糖酶只水解蔗糖。
通过比较淀粉酶在不同pH、不同温度以及有无抑制剂或激活剂是水解淀粉的差异，说明这些环境因素与酶活性的关系。
三、仪器、试剂和材料1．仪器（1）恒温水浴（37℃,70℃）；（2）沸水浴；（3）冰浴；（4）移液管：1ml，2ml，5ml各2支；（5）量筒：10ml3支；（6）多孔白瓷板。
2．试剂（1）铁粉。
（2）2%H2O2（用时现配）。
（3）唾液淀粉酶溶液：先用蒸馏水漱口，再含10ml左右蒸馏水，轻轻漱动，数分钟后吐出收集在烧杯，用数层纱布或棉花过滤，即的清澈的唾液淀粉酶原液，根据酶活性的高低稀释50-100倍，即为唾液淀粉酶溶液。
（4）蔗糖酶溶液：取1g鲜酵母或干酵母放入研钵中，加入少量石英砂和水研磨，加50ml蒸馏水，静置片刻，过滤即得。
（5）2%蔗糖溶液：用分析纯度蔗糖配置（用时现配）。
（6）1%淀粉溶液：1g淀粉和0.3gNaCl，用5ml蒸馏水悬浮，慢慢倒入60ml 煮沸的蒸馏水中，煮沸1min，冷却至室温，加水到100ml，冰箱储存。
（7）0.1%淀粉溶液：0.1淀粉，以5ml水悬浮，慢慢倒入60ml煮沸的蒸馏水中，煮沸1min，冷却至室温，加水到100ml，冰箱储存。
（8）本乃狄（Benedict）试剂：17.3gCuSO4·5HO，加100ml蒸馏水加热溶解，冷却；173g柠檬酸钠和100gNaCO3·2H2O，以600ml蒸馏水加热溶解，冷却后将CuSO 4溶液慢慢加到柠檬酸钠—碳酸钠溶液中，变加边搅匀，最后定容至1000ml。
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实验七尿淀粉酶活性测定
淀粉酶（AMY或AMS在体内的主要作用是水解淀粉，它随机地作用于淀粉分子内的
a—1, 4糖苷键生成葡萄糖、麦芽糖、寡糖及糊精。
血清中的淀粉酶主要有胰型（P型）和
唾液型（S型）及其亚型同工酶组成，P型淀粉酶主要来源于胰腺，S型淀粉酶主要来源于唾
液腺。
正常淀粉酶因分子量小，故可从肾小球滤过而由尿中排出。
【目的】
1、验证淀粉酶的催化作用。
2、观察淀粉及其水解产物分别与碘反应呈现的颜色变化。
【原理】血清及尿中的淀粉酶来源于胰腺和唾液腺，正常血清与尿中有一定活性。
Winslow 氏法测定尿和血清中淀粉酶活性是将试样作等比稀释，观察一系列试样在规定的
37C、30分钟的条件下，恰好能将0.1%淀粉溶液1ml水解（指加入碘液后不再呈蓝色）的
酶量定为淀粉酶的一个活性单位，乘以尿的稀释倍数，即可得知每项ml 尿液中的淀粉酶活性。
【器材】
试管（10mn X 100mr）、试管架、电热恒温水浴箱、吸管、洗耳球、滴管。
【试剂】
1 、 9%NaCl
2、0.3%碘液
3、0.1%淀粉溶液
【操作】
1 、准备尿液（自备）。
2、取 10支试管，编号，用吸管向管中加入0.9%NaCl 1ml。
3、用1ml吸管（注意应用刻度到头的）向第一管加尿液1ml，混合，再将试管中的液
体吸起，然后任其流回试管，如此重复三次，以便全管混匀，并借此冲洗吸管内壁。
吸出此混合液1ml 移入第二管中。
4、用同法处理第二管使之混匀，并取出1ml 置于第三管中。
依此类推，如此继续稀释
至第九管后，吸出1ml混合液弃之，这样既可获得分别含原尿液为1/2ml,1/4ml,1/8ml, ... 1/512ml 的不同浓度的尿稀释液。
第十管不加尿液作为对照管。
5、从第十管起依次向各管迅速准确加入0.1%淀粉液2ml，迅速摇匀（是否充分混匀往
往是实验成败的关键！）,置37C水浴中，确保 30分钟。
6、取出各管后，立即向各管中加入0.3%碘液 2滴，摇匀后观察各管的颜色。
*注：各管依次出现黄到蓝的色序，黄色表明无淀粉存在，浅红色紫色表明有淀粉的水解中间产物，兰色表明有淀粉存在。
【注意事项】
1、 1-10 号试管顺序勿搞乱。
2、加样速度尽量快。
【结果及计算】
应选择无蓝色管中尿稀释倍数最大的一管来计算。
假设无蓝色管中尿液稀释倍数最大的为第5管（而第六管为蓝色），已知在第5管内含尿液1/32ml,既1/32ml尿液能在37C、30 分钟水解 0.1%淀粉 2ml。
求出 1ml 尿液水解 0.1%淀粉 X ml。
1/32 ：2=1 ： x
x=2/1/32=2 X 32=64
即每 ml 尿液中所含淀粉酶的活性为64 单位。
【参考值】（尿）8〜64单位；（血清）4〜32单位。
【临床意义】
胰腺炎、腮腺炎、胆道疾病时尿淀粉酶活性增高。
【思考与分析】
通过本实验，你可以检验自己使用吸管的技术是否熟练、准确。
你的操作技术过关了吗？。