植物染色体的制片与观察
植物减数分裂制片观察
其他辅助器材
根据实验需求,准备好其他辅助器材,如吸水纸、擦镜纸 、计时器等。
04
制片过程详解
Chapter
取材与固定
选择适当材料
选用分裂旺盛的植物组织,如洋葱根尖、小麦幼穗 等。
固定液选择
常用Carnoy固定液(无水乙醇:冰醋酸=3:1)或FAA 固定液(福尔马林:冰醋酸:50%乙醇=5:5:90)。
显微镜
确保显微镜状态良好,镜头清洁,光源稳定。准备好所需 的目镜和物镜,以及相应的滤光片。
载玻片和盖玻片
选择干净、无划痕的载玻片和盖玻片。在实验前进行清洗 和烘干处理。
滴管、镊子、刀片
准备好滴管、镊子和刀片,用于实验过程中的试剂滴加、 材料夹取和切割等操作。确保这些工具干净、锋利,并妥 善存放以避免污染或受伤。
利用图像处理软件对观察到的图 像进行处理,提高图像质量,便 于后续分析和发表。
数据整理 统计分析 结果解读 图像处理
将观察到的细胞形态、染色体行 为等数据进行整理,形成完整的 观察记录。
根据统计分析结果,对植物减数 分裂过程进行解读,阐述其特点 和规律。
06
实验结果展示与讨论
Chapter
实验结果展示
试剂的配制与准备
染色剂的配制
根据实验需求选择合适的染色剂,如 醋酸洋红、吉姆萨染液等。按照染色 剂的配方,提前准备好所需试剂,并 确保染色剂的质量稳定。
植物细胞染色体标本的制作与观察-教案
植物细胞染色体标本的制作与观察
1. 实验背景与原理
染色体的研究在生物进化、发育、遗传和变异中都有十分重要的作用。因此,染色体标本的制备技术是遗传学、细胞生物学、染色体工程、分类学等众多学科的基本实验技术。物种细胞内染色体数目、形态、长度等信息的总和根据实验的观察和测量绘制成的模式图称为核型(karyotype)。核型分析在物种亲缘鉴定,染色体变异分析,杂种分析,细胞分裂过程分析,孤雌生殖等研究中均有重要的作用。
染色体标本的常规制片方法有切片法、涂片法、压片法、滴片法(空气干燥法)等。压片法操作简单,是常用的植物染色体标本制备的方法。不过,该法在制备中要注意避免压片所造成的染色体的扭曲、变形和丢失的现象。
染色体制备的重要环节如下:
(1)取材:应取分生旺盛的组织或细胞。在植物中通常取根尖,在分裂高峰时取材,可得到大量分裂相细胞。而在动物细胞中通常选取骨髓等分裂活跃的细胞,或是植物血球凝集素等刺激下的淋巴细胞,也可选取分裂旺盛的体外培养的癌细胞或转化细胞等。
(2)预处理:使用秋水仙胺等药品破坏纺锤体形成,不但可得到大量分裂相细胞,而且可使染色体缩短变粗,有利于观察。
(3)固定:渗透力强的固定液将细胞迅速杀死,蛋白质沉淀,并可尽量保持细胞原有状态。
(4)解离或低渗:植物细胞要除去细胞间的果胶层,并使细胞壁软化,从而使细胞得以膨胀,为染色体的分散提供了空间。常用解离方法有酸解法和酶解法。动物细胞无细胞壁,通常不需解离,而是用低渗液使细胞膨胀。
(5)染色体分散:通过压片、滴片等机械力量使染色体分散, 有利于观察。2. 实验目的
植物染色体压片法
第一部分植物染色体压片法
一实验目的
1. 学习并掌握根尖处理、染色、压片及制片观察的方法。
2. 观察有丝分裂各时期染色体的形态变化,了解有丝分裂全过程。
二实验原理
高等植物有丝分裂主要发生在根尖、茎尖生长点及幼叶等器官的分生组织(分生区),其中根尖是最常用的材料:
①根尖取材容易,操作和鉴定也比其它器官与组织方便;
②实验室内采用种子萌发后所长出的新鲜幼嫩根尖,不受植物生长季节的影响和限制,并且可以大量获得;
③对于某些珍贵而又稀少的试验材料,取用自然条件下生长植株的根尖,比取用茎尖、花器等对材料的伤害要小得多;
④采用实验室内种子发根,切取根尖后的种苗通常还可以进行正常种植,利于后续研究进行。
有丝分裂期在整个细胞周期中所占的时间相对较短,有丝分裂制片的主要目的是进行染色体鉴定,希望观察到更多分裂相,尤其是分裂中期相,通常要对材料进行不同的预处理。
预处理主要通过抑制和破坏纺锤丝的形成来获得更多的中期分裂相;同时,预处理还可改变细胞质的粘度,促使染色体缩短和分散,便于压片和观察。常用的预处理有物理法、化学法、混合处理法等。
植物细胞的细胞壁对细胞形态和结构起支撑和保护作用,分生组织的细胞壁结构将分生细胞结合成一个整体,因此在压片之前需要采用适当方法软化或部分分解细胞壁使细胞间易于分离,这一操作称为解离。同时,解离也可适当清除部分细胞质,使细胞质背景趋于透明化,便于观察染色体。常用的解离方法主要有酸解法和酶解法。
酸解法:步骤简便、容易掌握。根尖分生组织经过酸解和压片后,呈单细胞。酸解法广泛用于染色体计数、核型分析和染色体畸变的观察及相关分析。
实验九、 染色体常规制片及观察
五、结 果 前期
中期
模 式 图
后期
末期
间期 在光学显微镜下,只看到均 匀一致的细胞核及许多的丝 状染色质。实质上间期的核 是处于高度活跃的生理生化 的代谢阶段,正为细胞分裂 准备条件。
前期 • 核内染色质逐渐浓缩为细 长而卷曲的染色体,每一 染色体含有两个染色单体, 它们具有一个共同的着丝 点;核仁和核膜逐渐模糊 不明显。
实验九
植物染色体的常规制片
及观察
• 1880年德国生物学家Flemming (1843-1915)在研究动物细胞 分裂时发现,用某些红染料染色, 细胞核中有容易染色的部分,他 把这部分称为染色质。 • 1888年,德国解剖学家Waldeyer (1836--1921)正式引进染色体 (chromosome)一词
七、注意事项
1.酒精和解离液都要清洗干净,并认真吸
干,否则影响染色效果。
2.染色时间10分钟是个参考时间,应以实
际染色效果判断,不太长也不能太短。
3.镊子敲打时,应用力均匀,开始不要太
重,避免细胞挤压在一起。用力太轻不易使细
胞处于同一平面,故应适当控制敲打力度。
八、作业 简绘实际观察到的染色体
四Hale Waihona Puke Baidu实验步骤
• 1.取材 2.预处理 3.固定 4.解离(酸解) 5. 染色 压片 7.镜检
植物根尖细胞染色体制片于有丝分裂过程观察的心得体会
植物根尖细胞染色体制片于有丝分裂过程观察的心得
体会
观察植物细胞有丝分裂是高中时期生物学科的重要实验之一,在实验中能够让我们清楚地观察到植物细胞有丝分裂中不同时期展现
出来的特点,帮助提高我们对于有丝分裂的理解,提高生物学习兴趣。本文分析了植物细胞有丝分裂实验的描述和体会,希望能够让植物细胞有丝分裂实验的变得更加完善和精准。植物细胞的有丝分裂是把母细胞中的遗传物质,通过分裂的方式平均分配到两个字细胞中的过程。母细胞的遗传物质主要是存在于细胞核的染色体上,在有丝分裂过程中,染色体形态并不是固定的,而是连续变化的,因此染色体的有丝分裂分为间期、前期、中期、后期等阶段,不同的是其中染色体的差别比较大,因此通过实验,能够让我们更加清晰的观察和理解植物细胞有丝分裂的变化过程。
实验材料选择
大蒜根尖培养。想要看到染色体的行为变化,选择材料是最关键的一步,材料选择中需要考虑各种因素,例如说洋葱,生长容易受到季节的影响,同时染色体的体积较小,因此在这次试验中我选择了大蒜作为实验材料,大蒜的根尖细胞中染色体的体积比较大,便于观察,同时培养期比较短,不用受到季节的限制。在室内温度 15-26C的环境中,大蒜根部生长速度较快,首先把蒜瓣用铁丝串号,放在装满水的韶破上,这趟能够让大蒜的底部接触到水面同时不会被水淹没,然后把烧杯放到 25C的恒温箱中,每隔六个小时就需要换睡衣次,不
到两天的时间,根部就会长出根尖。必须要注意经常换水,否则容易因为阳气不足导致生长缓慢或者是腐烂。
植物细胞有丝分裂的制片和观察
体特点
(4)移动观察:慢慢移动装片,完整观察各个时期
实用文档
四、实验流程 1.大蒜根尖培养及固定 2.装片制作
解离→漂洗→取材→染色
3.观察
低倍镜观察→高倍镜观察→仔细观察→移动观察
注意:a.观察时应先找到呈矩形的分生区细胞,在
一个视野里观察时,要注意边观察边移动装片, 观察有丝分裂各个时期。 b.显微镜下观察到的都是死细胞,不能看到细 胞分裂的动态变化。 c.在显微镜下观察到间期细胞的数目最多
固定的作用:杀死细胞,固定细胞形态, 维持染色体的完整
性,提 实用文档 高染色效果
四、实验流程
1.大蒜根尖培养及固定
2.装片制作
解离液:1mol/L的HCl 目 的:使组织中的细胞分离开
(1)解离 操作:先用95%的酒精漂洗,在HCL中
60℃水浴5min左右 注意(:a)解离充分是实验成功的必备条件
有丝分裂不同时期
实用文档
三、实验仪器和药品
1.仪器:显微镜、恒温箱、水浴锅、计时器、 烧杯、载玻片、盖玻片、剪刀、 镊子、滴管、刀片、玻璃皿
2.材料:大蒜
3.药品:诺卡氏固定液 1mol/L的HCl作为解 离液、卡宝品红作为染色液
实用文档
四、实验流程
1. 大蒜根尖培养及固定:
实验前3-4d,将大蒜掰成蒜瓣摆在铺 有四层纱布的托盘里放入温度为25℃, 一定湿度的培养箱中培养,每天换 水两次待根长到1~2cm将根剪下用吸 水纸吸干水分,将其放入诺卡氏固定液 (乙醇:冰醋酸=3:1)固定4~24小时。
遗传学实验二有丝分裂染色体压片
实验二、植物染色体压片技术及有丝
分裂的观察
一、实验目的
1 学习植物染色体制片技术,观察有丝分裂过程中不同时期的染色体形态;
2 明确遗传的细胞学基础(微观与宏观);
3 掌握植物染色体玻片标本的制作方法。
二、实验原理
植物根尖的分生细胞的有丝分裂,每天都有分裂高峰时间,此时把根尖固定,经染色和压片,再置于显微镜下观察,可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。
三、实验材料
洋葱根尖,其它植物根尖
四、实验仪器及用具
显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸水纸、解剖针、小烧杯、一次性培养皿
五、药品和试剂
醋酸洋红染液或改良的苯酚品红溶液,70%乙醇,冰醋酸、无水乙醇,
酸解液(浓盐酸:95%酒精=1:1)
卡诺氏固定液(无水乙醇:冰醋酸=3:1)
六、实验步骤
1 取材
待根长至2cm时,上午9时摘下根尖,0.02%和0.1%的秋水仙素分别浸泡3~4小时。
2 固定
经前处理的根尖放到固定液中,固定24 h,转入70%乙醇中待用。
3 解离
酸解,从固定液中取出根尖,用蒸馏水漂洗,放入酸解液(浓盐酸:95%酒精=1:1)中,60度水浴解离10分钟,用蒸馏水漂洗后,放在培养皿中。
4 压片
把根尖放在载玻片上,用解剖针把伸长区部分截去,加少量染液(几滴),染色10-20分钟,盖上盖玻片。用镊子轻轻敲打,使分生组织细胞展成薄薄一层。
5 显微镜观察
先在低倍镜下寻找具分裂相的细胞,然后依次转换到高倍镜,观察减数分裂各个时期染色体的行为和形态特征。
要求有1-2个不同分裂相。
七、实验作业
1. 制作具有丝分裂图象的细胞学片子2-3张。
实验二植物染色体制片及有丝分裂观察
• 2 预处理:将剪取的新鲜材料于0.02%秋水仙素溶 液中室温下处理3-4h。
预处理的目的? 还有其他方法吗?
实验步骤:
3 固定:将经过预处理和未经预处理的材料冲 洗后转移至卡诺氏固定液中,室温下处理24h。水 洗放入70%乙醇中保存。
固定的作用?固定剂的组 成?对固定剂配制的要求?
4 解离:将冲洗后的根尖放入0.1mol/L的HCl 中, 60℃下处理8-10min(可视具体情况而定)。
实验材料
• 洋葱、大蒜的鳞茎,玉米、蚕豆的种子等。本实 验选用大蒜。
实验用品
• 用具:显微镜、剪刀、镊子、解剖针、载玻片、 盖玻片、水浴锅、酒精灯、铅笔、吸水纸等。 • 药品:蒸馏水、卡诺氏固定液、45%醋酸、秋水 仙素、改良苯酚品红染液等。
实验步骤:
• 1根尖培养:将大蒜瓣放在盛有清水的培养皿(烧 杯)中,让根部接触水,在20-25℃光照下培养, 待根尖长到1-2cm时,剪下备用。剪取根尖的时间 以上午9时左右为好。 为什么要限制
然后固定盖玻片用铅笔垂直用力敲击盖片几下将材料压成一层细胞
遗传学实验
植物染色体制片及有丝分裂观察
实验目的:
① 学习并掌握植物染色体玻片标本的制作方法; ② 观察植物细胞有丝分裂过程及各个时期的染色 体行为;
预习要求
实验目的
E2 植物分生区细胞染色体制片观察
9
蚕豆有丝分裂过程(pp:4~5, 12)
农学院生物技术系遗传学课程组
10
蚕豆(V. faba, 2n=12)有丝分裂前期
农学院生物技术系遗传学课程组
11
蚕豆(V. faba, 2n=12)有丝分裂中期
农学院生物技术系遗传学课程组
12
蚕豆(V. faba, 2n=12)有丝分裂后期
农学院生物技术系遗传学课程组
13
蚕豆(V. faba, 2n=12)有丝分裂末期
农学院生物技术系遗传学课程组
14
农学院生物技术系遗传学课程组
7
六、实验结果与分析
1. 交1张制作良好的临时片(标签) 2. 绘制有丝分裂中期染色体图 3. 根据你的观察,本实验所用根尖是否经过预处 理?为什么? 4. 分析自己制片操作中存在的问题
农学院生物技术系遗传学课程组
8
蚕豆(V. faba, 2n=12) 核型
农学院生物技术系遗传学课程组
农学院生物技术系遗传学课程组
6
五、实验步骤
1. 取材:实验室发根取材(p10) 2. 预处理:目的、原理与方法(p10, 11)(注意, p13) 3. 固定:目的与方法(p11) 4. 解离:目的、原理与方法(p10, 11) 5. 染色:要求、方法(p11-12) 6. 压片:操作程序及要点(p12) 7. 镜检:观察要点,问题分析(p12) 8. 临时装片保存与永久片制作(p12, 25-26)
实验七 植物染色体标本的制备与观察
一、实验目的
1.学习植物染色体制片的基本原理和方法。 2.了解细胞周期过程中染色体的动态变化。
二、实验原理
常规压片染色体常不能完全散开,容易重叠、变形 、断裂,影响显带结果,核型分析较困难。 20世纪70年代以来,参照动物染色体标本制备技 术,对植物细胞去壁、低渗、火焰干燥方法,取 得了很好的结果。但操作繁琐,费用较贵。 分散良好的标本片用于染色体计数、组型分析、 显带、显微操作、原位杂交等分子细胞遗传学研 究领域。
解离:取出根尖放入1mol/L HCl(58-60 ℃解离 对比)解离14-15min,软化去除细胞壁及果胶物 质,使细胞易于分散。 染色:倒去热HCl后,用改良苯酚品红染色液染 色5~10min。 漂洗:吸去染色液,用漂洗液换洗2-3次,每次12分钟。
ห้องสมุดไป่ตู้
酶解:在载玻片上切取根尖着色深的部分,浸入 小酒杯内1-2第混合酶液中,室温下酶解40min左 右或在28 ℃温箱中酶解20min左右。
2.分裂时期及染色体形态观察
尽量寻找下列分裂期染色体图像。
前 期
中 期
后 期
末 期
3. 典型染色体标本进行显微照相
洋葱根尖细胞染色体
百合根尖细胞染色体 绿豆根尖细胞染色体
五、实验报告
实验目的 实验用品 实验原理 实验方法 思考题
植物染色体制片与观察实验报告(洋葱组).参考分享
植物染色体制片与观察实验报告(洋葱组).参
考分享
1:根尖细胞处于间期,而间期细胞没有纺锤丝和纺锤体,不能使细胞停留在中期。
2.洋葱根尖秋水仙素处理,卡若固定时间太短或浓度太小,在两个小时内不能达到预期的结果。
3.剪下洋葱根尖的最好时间是正午时分,因为此时洋葱根尖分生区有丝分裂最为活
跃,此时固定,可以观察到最多的分裂相,而我们组因为实验材料培养问题,所以固
定的时间是 10:40 ,且只固定了 2h ,如果固定液浓度不够,就会影响后面的实验结果。
实验方案结果展示如下:
固定 2.5h
酸解
6min
染色 10min
+ / — /++/
— / ++
8min
染色 10min
++++ /
— /++ +/
— /+++
酶解
45min
染色 10min
+ / — /+++ /
— /++
60min
染色 10min
+++ / — /++++ /
— / +++
固定 24h
酸解
8min
染色 8min
+++++
/+++++/
++++/
+++++/ ++++
10min
染色 10min
++++/ ++++
/ +++++/ ++++
/ +++
10min
染色 12min
++++ / +++ / +++ / +++ /++
酶解
45min
染色 10min
++ / ++ / +++ / / ++
60min
染色 10min
+++/ +++ /++++/ +++/
+++
附:本实验共做了 9 种实验方案,结论:对洋葱根尖进行
24 小时,酸解 8 min ,染色
10min 的压片效果最好。
制片效果依次为:细胞松散程度
/ 中期分裂相多寡 /
03实验二 减数分裂染色体制片及观察
• 前期I • 细线期:第一次分裂开始,染色体很细很长,呈细线状在 核内交织成网。每一染色体已经复制为两个染色单体,但 在显微镜下看不出染色体的双重性。(1) • 偶线期:染色体形态与细线期差别不大,染色体比细线期 粗,同源染色体开始配对,形成二价体,每个二价体有一 个着丝点。(2)
• 粗线期:染色体螺旋化,进一步缩短变粗,显微镜下可明 显看到每个染色体的两个姐妹染色单体。二价体由四个姐 妹染色单体和两个着丝点组成,这时非姐妹染色单体间有 可能发生交换( 3.早粗线期;4粗线期;5.晚粗线期)。
正处于分裂期,即可覆盖盖玻片;然后以吸水纸包覆,
用拇指垂直紧压,使细胞平整、染色体散开分布于同
一平面,便于观察和记数;同时吸水纸可吸去盖玻片
周围多余的染液。 应注意勿使盖玻片发生搓动,以免破坏细胞与染色 体的完整性。
6.镜检观察
在低倍镜下寻找适当视野,并正确区分处于减数 分裂各个时期的花粉母细胞、二分体、四分体以及花
双线期:染色体进一步螺旋化,比粗线期变得更为粗短,更为 清晰,二价体中的两条同源染色体相互分开出现交叉现象,出 现交叉末端化,呈“X”、“V”、“O”、“∞”等形状。 终变期: 染色体高度浓缩,染色体均匀地分散在核膜的附近, 此时是检查染色体数的最佳时期,这时核内有多少个二价体就 说明有多少对同源染色体。
特征与染色体的形态结构、数目及行为变化。
染色体标本制作与观察实验报告
染色体标本制作与观察实验报告实验报告:染色体标本制作与观察
一、实验目的
1.掌握染色体标本制作的基本原理和方法。
2.学习并掌握染色体观察的基本技巧和特点。
3.通过实验加深对遗传学基础知识的理解和应用。
二、实验原理
染色体标本制作是生物学实验中的一项基本技术,其目的是将细胞中的染色体以一种可见且易观察的形式展现出来。染色体观察有助于我们了解细胞分裂过程中染色体的行为和变化,进一步理解遗传物质的复制、分离和交换等基本过程。
本实验将通过植物根尖细胞的有丝分裂过程来制作染色体标本,并通过显微镜观察其形态和分布。
三、实验步骤
1.准备试剂和器材:碱性染料(如龙胆紫溶液)、生理盐水、镊子、滴管、载
玻片、盖玻片、显微镜等。
2.选取植物根尖:选择新鲜的植物根尖,长度约为5-10mm。
3.预处理:将根尖放入冰箱冷藏(4℃)约24小时,然后放入25℃的温水中
浸泡约6小时。
4.固定:用镊子将根尖取出,放入卡诺氏液中浸泡0.5-1小时,然后转移到
70%酒精中保存。
5.解离:将根尖放入1N的盐酸盐酸盐酸KOH溶液中,在60℃的水浴中解离10
分钟。
6.漂洗:用镊子取出根尖,用清水冲洗3次,每次5分钟。
7.染色:将根尖放在载玻片上,用滴管吸取龙胆紫溶液滴在根尖上,染色3-5
分钟。
8.制片:盖上盖玻片,避免产生气泡。然后在显微镜下观察。
四、实验结果与讨论
1.实验结果:通过显微镜观察到清晰的染色体形态,可以看到细胞分裂的不同
阶段,如前期、中期和后期。在中期可以看到染色体整齐地排列在赤道板
上,而在后期则可以看到染色体的分离和移动。这证明了实验方法的可行
植物染色体标本的制备和观察
植物染色体标本的制备和观察
摘要:目的1、掌握常规压片法制备植物染色体标本的基本原理和方法;2、学会观察和统计植物细胞的染色体数目;3、了解和学习去壁低渗法进行植物染色体制片的基本原理和方法。方法大蒜的根尖是分裂比较旺盛的,我们可以利用秋水仙素处理根尖使得大蒜根尖的细胞分裂处于分裂中期,然后经固定染色等处理将染色体染色固定,以便观察。结果大蒜的染色体有16条,都被染色成红色的条状或细丝状物质。结论大蒜染色体有16条。
关键词:植物染色体;大蒜;秋水仙素
前言
染色体是遗传物质的载体,本实验便是观察染色体的形态和数目。植物染色体标本的制备,常用分生组织,如根尖、茎尖和嫩叶做材料。常规压片法仍是当今观察植物染色体常用的方法。其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤,即可观察到较多的、处于有丝分裂中期的细胞和染色体。由于现在洋葱发根较难,我们采用的是大蒜根尖进行相关实验。
材料与方法
1.实验材料
大蒜根尖、白姜花的根尖、野百合的根尖等。
2.实验试剂:
0.02%秋水仙素;改良苯酚品红染液;卡诺氏固定液,1N盐酸,浓盐酸:95%乙醇(1:1)解离液。
3. 实验用具
显微镜、剪刀、镊子、刀片、培养皿、吸水纸、滴管、载玻片、盖玻片。
4.实验植物和试剂
大蒜根尖、 0.02%秋水仙素;改良苯酚品红染液;卡诺氏固定液,1N盐酸;70%酒精;95%乙醇;85%乙醇;蒸馏水
5.实验方法和步骤
5.1 取材先将大蒜浸泡若干小时,然后转入一个垫有湿润滤纸的培养皿中,置25℃恒温培养箱中萌发,待幼根长至1~2cm时,于上午9~11时剪下根尖。
实验一植物根尖染色体标本的制备与观察
细胞周期
Cell cycle
分裂间期
interphase
DNA合成前期( Gap1,G1 ) DNA合成期(DNA synthesis, S)
DNA合成后期(Gap2,G2)
前期 (prophase)
核分裂
Nuclear division
前中期 (prometaphase) 中期 (metaphase) 后期 (anaphase)
三、实验用品
• 1、器材: 显微镜、水浴锅、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、烧 杯等。
• 2、试剂: 0.1%秋水仙素;0.002mol/L 8-羟基喹啉(称取0.2901g 8-羟基喹啉定溶于容量瓶中,60℃水浴溶解); Carnoy固定液(3份95%乙醇∶1份冰乙酸); 1mol/L HCL;改良苯酚品红
• 减数分裂:DNA复制一次,细胞连续分裂两次。
– 通常减数分裂I分离的是同源染色体,所以称为异型分裂 ( heterotypic division) 或 减 数 分 裂 ( reductional division)。
– 减数分裂II分离的是姊妹染色体,类似于有丝分裂,所以称 为同型分裂(homotypic division)或均等分裂(equational division)。
五、注意事项
• 1、取材要取分生区,尽量要小,避免细胞紧贴在 一起,致使细胞和染色体没有伸展的余地;
植物细胞有丝分裂染色体制片及观察
一、实验目的
学习和掌握植物根尖细胞有丝分裂染色 体压片技术;观察有丝分裂过程中染色 体的形态特征和动态变化。
二、实验原理
有丝分裂是植物体细胞增殖的主要方式。在有 丝分裂过程中,细胞核内染色体能准确地复制, 并能有规律地均匀分配到两个子细胞中去,使 子细胞遗传组成与母细胞完全一样,从而保证 了性状的发育和遗传的稳定性。 有丝分裂是一个连续的过程,可分为前期、中 期、后期和末期。高等植物的有丝分裂主要发 生在根尖、茎尖及幼叶等部位的分生组织。经 过适当的取材处理、固定、离析、染色、压片 等步骤,可获得清晰的植物细胞有丝分裂染色 体动态变化的装片。以进行有丝分裂和染色体 动态的观察。
六、制作永久玻片
冷冻脱片封片法 酒精一叔丁醇脱水封片法 酒精—二甲苯脱片封片法
七、作业及思考题
1.根据你的实验情况总结出制备好一张优 良的细胞分裂标本应注意哪些问题? 2.常用染料的特点如何? 3.绘制2~3个有丝分裂典型时期简图。
三、实验பைடு நூலகம்料
洋葱(Allium cepa)及蚕豆(Vicia faba) 等
四、实验用具及药品
1.用具:显微镜、水浴锅、剪刀、镊子、 刀片、载玻片、盖玻片、酒精灯等。 2.药品:无水乙醇、70%乙醇、冰乙酸、 饱和对二氯苯水溶液、0.1%秋水仙素、 0.1N盐酸。
五、实验步骤
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植物染色体的制片与观察以及核型分析组员:郑石悦陈雨佳吴俊强
植物染色体的制片与观察
一.实验目的:
1.了解预处理,固定,解离,染色,烤片,及压片的步骤和作用。
2.掌握植物有丝分裂染色体常规制片技术。
3.观察有丝分裂过程中染色体的形态特征以及动态变化。
二.实验原理:
1.植物根尖分生组织的细胞有丝分裂比较旺盛,每天都有分裂高峰时期。
2.不同植物分裂高峰时期是不同的。大蒜和洋葱细胞的有丝分裂高峰时期通常在上午九点到十一点。
3.把分裂时期的根尖用固定液固定,再经染色后压片,在显微镜下进行观察,就能看到处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。
4.预处理可以使染色体缩短变粗,易于计数。同时抑制细胞分裂过程中纺锤丝的形成,使更多细胞停留在分裂中期。这时,染色体分散在整个细胞质中,有利于染色体的形态数目观察。
三.实验材料:
洋葱
实验用具:
显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿,镊子,解剖针,恒温培养箱,恒温水浴箱,棉签,刀片
试剂:
95%乙醇,冰醋酸,盐酸,醋酸洋红染色液,秋水仙素,2甲苯
四.实验步骤:
1.材料的培养:洋葱置于盛有湿沙的托盘中,20~25度培养至根长1~2厘米时取材。取材时使用解剖针及镊子。
2.预处理:
(1)化学药物处理:0.05%~0.2%秋水仙素水溶液在室温条件下处理2~4个小时(注意时间不能过长,过长染色体会变得很短,不利于研究)
(2)冷冻处理:将根尖置于盛有冰雪混合物的烧杯中,保存于1~4度的冰箱20~24个小时(化学药物处理对染色体有破坏。冷冻处理无破坏,对禾本科植物效果良好)
3.固定:将材料再用蒸馏水冲洗两次,转入卡诺氏固定液(乙醇和冰醋酸以三比一混合)中固定24个小时(注意取材和固定时要在有丝分裂高峰期)。
4.解离:将根尖用蒸馏水冲洗后放入已经在60度恒温水浴箱中预热的1mol每升的盐酸中,60度水浴约十分钟,当根尖的伸长区变透明而分生区呈米黄色或乳白色时即可取出,用蒸馏水冲洗后备用。
5.染色及压片:取出根尖,去掉伸长区,留1~2mm的分生组织区滴一滴醋酸洋红染色液,染色2~3分钟,然后盖上盖玻片,在酒精火焰上方加热至手背触摸盖玻片时感到微烫(酒精灯加热的作用是1.软化细胞,易于压片2.使细胞质颜色变浅,使染色体颜色反差加大,利于观察)。在盖玻片上盖上吸水纸,用左手大拇指和二拇指固定盖玻片两端,右手拿棉签垂直敲击盖玻片几下,使材料分散。然后用右手大拇指用以按压盖玻片,将材料压成一层。
6.观察:将压好的片现在低倍镜下观察,找到处于分裂时期的细胞后,再转换到高倍镜下观察染色体的形态特征,观察不同分裂时期的细胞即可了解染色体在整个细胞分裂时期的动态变化特点。
核型分析实验