核桃分心木粗提物抑菌活性的研究

1.3.2.4 固体平板的制备 培养基经高压蒸汽灭菌后，冷却至 50～60℃，在
无菌操作下倒入干热灭菌的培养皿内，每皿约 1 5 ～ 20ml，即培养皿内培养基的厚度约 22.5mm，制备充足 数量(一般为每种提取物准备 54 个培养皿)。
1.3.2.5 不同浓度的核桃分心木各提取液的制备 以提取备用液作为 100% 原液，加蒸馏水稀释配成浓
1.3.3 抑菌效果的测定(滤纸片法) 在无菌条件下，用加样枪在已备好的固体平板培养
皿上分别加入等量的各供试菌的菌悬液(每个培养皿里加 0.1ml)，涂布均匀(对每个稀释浓度和每一种菌做一对平 行实验，最后取平均值) 。然后用无菌镊子取出浸泡在 不同浓度提取物的滤纸片，按无菌操作放在各种含菌平 板上。每个平板内间隔一定的距离贴 2 片，另取浸泡在 青霉素钠和无菌水的滤纸片作阴性和阳性对照，分别记 作 CK1 和 CK2。然后将培养皿倒平板放入 37℃的培养箱 里培养 18～24h，观察有无抑菌作用，并测量其抑菌圈 直径的大小。
phragm against different bacteria
由图 1 可见，核桃分心木乙醇提取物对 4 种供试菌 都有抑制作用，尤其是对大肠杆菌的抑制能力较强。较 高浓度的提取液对各菌都表现出了较好的抑制作用，而 低浓度的提取液对各菌种均未表现出抑制效果(平板上未 形成清晰的抑菌圈) 。
2.1.2 核桃分心木乙醇后水提取物的抑菌结果
※基础研究
食品科学
2008, Vol. 29, No. 11 69
核桃分心木粗提物抑菌活性的研究
高 莉，王艳梅，帕提古丽·马合木提 *
(新疆大学生命科学与技术学院，乌鲁木齐 830046)
摘 要：以核桃分心木的四种粗提取液对几种常见的食品微生物进行抑菌活性监测发现，核桃分心木的四种提取 液都具有不同程度的抑菌活性，对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、产气杆菌都有抑菌活性。其中 乙醇提取液和水后乙醇提取液的抑菌效力较强，最低抑菌浓度(MIC)也较低，其抑菌活性随着提取物浓度的增大而 逐渐增强。这为核桃分心木的开发和利用提供理论依据。 关键词：核桃分心木；四种粗提液；抑菌活性；最低抑菌浓度
1.3.2.2 菌种活化 将 4 种供试菌移接入相应的试管斜面培养，每种重
复接多支。细菌置 37℃恒温培养 16～18h，每种菌取 1 支试用，其余注明日期，置 0 ～4 ℃冰箱冷藏备用。
1.3.2.3 菌悬液的制备 供试菌种接种于普通营养琼脂培养基斜面上，37℃
培养 16～18h，用接种环挑取少许菌体置于装有 9ml 无 菌生理盐水的试管内，振荡均匀，十倍稀释法稀释。 制成 OD 值为 0.010～0.012 的菌悬液(含菌量为相当于 6 × 104～8 × 104 个 /ml)，放好备用。
residue extracted by ethanol against different bacteria
※基础研究
食品科学
2008, Vol. 29, No. 11 71
由图 2 可见，核桃分心木醇后水提取物对各种供试 菌都有抑制作用，尤其是对产气杆菌的抑制能力较强。 高浓度的提取液对各菌都表现出了抑菌作用。而低浓度 的提取液对各菌种均未表现出抑制作用(平板上未形成清 晰的抑菌圈) 。与乙醇提取物相比，此提取物的抑制效 果比较差。
walnut diaphragm.
Key words：walnut diaphragm；solvent extracts；antibacterial activity；MIC
中图分类号：TS201.2
文献标识码：A
文章编号：1002-6630(2008)11-0069-03
核桃学名为(Juglans regia)，胡桃科，胡桃属[1]植 物，世界各地均有栽培。核桃隔膜又名核桃分心木 (Diaphragma juglandis Fructus)。分心木是果实子房室 的膜质中隔，在食用核桃的过程中通常把它当作垃圾丢 弃，但是在维吾尔族民间用它来泡水喝，具有补肾涩 精的功能，对多汗、尿频、遗尿、肾虚遗精、口腔 溃疡、牙龈出血、固牙、小便多等也具有功效。但 对核桃分心木抑菌活性的研究尚未见报道。本实验对核 桃分心木水提取物及水后醇提取物(PWE)，醇提取物及
核桃分心木乙醇后水提取物的制备：制备乙醇提取 物时在试剂瓶里剩下的药渣上再加 900ml 蒸馏水，使药 渣进一步溶解。然后又置于室温下 3 d ，方法同上。
核桃分心木水提取物的制备：再称取 100g 样品， 倒进试剂瓶里，后加 900ml 蒸馏水置于室温下 3d，方 法同上。
核桃分心木水后乙醇提取物的制备：制备水提取物 时，向在试剂瓶里剩下的药渣内再加 900ml 95% 的乙 醇，使药渣进一步溶解。然后又置于室温下 3d，方法 同上。
2.1.4 核桃分心木水后乙醇提取物的抑菌结果
12
10
抑菌圈(mm)
8
6
4
枯草芽孢杆菌
产气杆菌
2Байду номын сангаас
大肠杆菌
金黄色葡萄球菌
0 100 50 25 12.5 6.25 3.125 1.5625 CK1 CK2
提取物浓度(%)
图 4 水提后醇提液抑菌效果
Fig.4 Antibacterial effects of ethanol extract of walnut dia-
从上面的 4 个可以归纳出下面的综合图 5。
提取物浓度(%)
枯草芽孢杆菌
植。
2.1.1 核桃分心木乙醇提取物的抑菌结果
Fig.1
抑菌圈(mm)
16
14
12
10
8
6
4
枯草芽孢杆菌 产气杆菌
2
大肠杆菌
金黄色葡萄球菌
0 100 50 25 12.5 6.25 3.125 1.5625 CK1 CK2
提取物浓度(%)
图 1 醇提液抑菌效果图
Antibacterial effects of ethanol extract of walnut dia-
— 醇后水提取物(PAE)对常见菌 枯草芽孢杆菌、产气杆
菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌活性进行研究， 阐明其抗菌特性，旨在为核桃分心木的综合利用及维吾 尔医药和食品天然防腐剂领域中的开发利用开辟一条新 途径。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
核桃分心木(和田薄皮核桃分心木)购置于乌鲁木齐市 东环市场。
度分别为 100%、50%、25%、12.5%、6.25%、3.125%、 1.5625% 的不同浓度的核桃分心木提取物溶液。
1.3.2.6 含药滤纸片的制备 将厚度 1.5mm 的优质定性滤纸用打孔机制成直径为
6 m m 的小圆片，置于培养皿中，灭菌、烘干。然后 放到不同浓度的提取液中浸泡 2h，贴壁晾干。
1.3.4 最低抑菌浓度(MIC)的测定 所谓的 MIC 是培养基中完全没有菌生长的最低浓度
作为各提取液的最低抑菌浓度。由于本实验中测定提取 物的抑菌效果时用固体平板，因此测定 MIC 时没必要用 液体培养基，可以按各提取物的抑菌结果来表明 MIC。
2 结果与分析
2.1 滤纸片法抑菌效果 本实验中对每一种菌种做了平行实验，最后取平均
phragm residue extracted by water against different bacteria
由图 4 可见，核桃分心木水后乙醇提取物对各种供 试菌都有较好的抑制作用，尤其是对枯草芽孢杆菌的抑 制能力较强。较高浓度的提取液对各菌都表现出了较好 的抑制作用。而低浓度的提取液对各菌种均未表现出抑 制效果(即平板上未形成清晰的抑菌圈)。与前两个提取 物相比，此提取物的抑制效果较好，与乙醇提取物的 抑制效果差不多，形成的抑菌圈也明显。 2.2 各提取物的最低抑菌浓度(MIC)
Abstract：Antibacterial activities of ethanol and water extracts of walnut diaphragm were tested in this study. The results showed
that the antibacterial activities of the extracts are different against different microbes. The antibacterial activity of the ethanol extract
供试菌种为：枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、 大肠杆菌、产气杆菌。
95% 的乙醇、牛肉膏、 蛋白胨、琼脂粉、氯化 钠、葡萄糖等。 1.2 仪器与设备
旋转蒸发仪、电子恒温水浴锅、捣碎机、电子天 平、压力蒸汽灭菌器、西门子冰箱、电热恒温培养箱等。 1.3 方法 1.3.1 培养基的制备
牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养)：牛肉膏 3g； NaCl 5g；蛋白胨 10g；琼脂粉 20 g；水 1000ml；p H 7.2～7.4。
is stronger than that of the water extract,and the minimal inhibitory concentration (MIC) is also lower. The higher concentrations
of the extracts have more significant antibacterial effects. This study is profitable for the further development and utilization of
against different bacteria
由图 3 可见，核桃分心木的水提取物对各种供试菌 都有抑制作用，尤其是对大肠杆菌的抑制能力较强。高 浓度的提取液对各菌都表现出了抑菌作用。而低浓度的 提取液对各菌种均未表现出抑制作用(平板上未形成清晰 的抑菌圈) 。与上述两个提取物相比，此提取物的抑制 效果较差。