花青素测定

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四种原花青素含量测定方法比较

四种原花青素含量测定方法比较

四种原花青素含量测定方法比较一、本文概述原花青素(Procyanidins)是一类广泛存在于植物中的多酚类化合物,因其强大的抗氧化和生物活性,近年来在营养学、食品科学、医药学等领域受到了广泛关注。

其中,四种主要的原花青素——儿茶素(Catechin)、表儿茶素(Epicatechin)、没食子儿茶素(Gallocatechin)和表没食子儿茶素(Epigallocatechin)的含量测定对于评估食品营养价值、研究药物作用机制以及监控产品质量具有重要意义。

本文旨在比较和分析目前常用的四种原花青素含量测定方法,包括高效液相色谱法(HPLC)、紫外可见分光光度法(UV-Vis)、荧光光谱法(Fluorometry)和质谱法(MS),以期为相关领域的研究和实践提供有益的参考。

通过比较这些方法的准确性、灵敏度、操作简便性以及成本效益等方面的优劣,我们期望能为科研人员和企业选择最适合的原花青素含量测定方法提供指导。

二、方法概述原花青素(Procyanidins)是一类广泛存在于植物中的多酚类化合物,具有强效的抗氧化性能,对多种疾病具有预防和治疗作用。

由于其生物活性的重要性,对原花青素含量的准确测定显得尤为重要。

目前,常用的原花青素含量测定方法主要包括高效液相色谱法(HPLC)、紫外可见分光光度法、薄层色谱法(TLC)和毛细管电泳法(CE)。

这些方法各有优缺点,适用于不同的样品类型和实验条件。

高效液相色谱法(HPLC)具有高分辨率、高灵敏度、高重现性等优点,可以同时分离和测定多种原花青素。

但是,该方法需要昂贵的仪器设备和专业的操作人员,且样品处理过程繁琐,分析时间较长。

紫外可见分光光度法是一种简便、快速的测定方法,适用于大量样品的初步筛选。

然而,该方法只能测定总原花青素的含量,无法区分不同种类的原花青素,且易受样品中其他色素的干扰。

薄层色谱法(TLC)是一种基于原花青素在薄层板上的分离和显色进行测定的方法。

花青素检测内容和方法

花青素检测内容和方法

花青素检测内容和方法花青素(Anthocyanins)是一类广泛存在于植物中的天然色素,具有丰富的抗氧化和抗炎特性。

以下是关于花青素检测的50条内容和方法:1. 花青素的检测可以通过分光光度法进行,该方法通过测量样品吸收特定波长的光来确定花青素的含量。

2. 除了分光光度法,高效液相色谱法(HPLC)也是一种常用的花青素检测方法,可以准确测量不同类型的花青素。

3. 在花青素检测中,常用的溶剂包括甲醇、乙腈和水,这些溶剂可以帮助提取样品中的花青素。

4. 还可以使用质谱法(MS)结合色谱法进行花青素的鉴定和定量分析,能够提高检测的精准度和准确性。

5. 花青素的含量可以通过比色法进行测定,该方法通过添加试剂产生有色产物来测量花青素的浓度。

6. 采用高性能液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS)可以对花青素进行定性和定量分析,具有高灵敏度和选择性。

7. 使用紫外-可见分光光度法(UV-Vis)可测定花青素的吸光度,从而推算花青素的浓度。

8. 考虑到植物样品中可能存在其他干扰物质,需要对样品进行预处理,如蛋白质去除和净化,以提高花青素的检测灵敏度和准确性。

9. 对于不同环境下的花青素含量变化调查,可以通过原子吸收光谱分析(AAS)确定植物中金属离子对花青素生成的影响。

10. 考虑到花青素的稳定性,检测前样品处理和存储条件至关重要,如低温保存、光照避免、氧气隔离等。

11. 比较两个或多个样品中花青素的含量,可以通过内标法(Internal standard method)进行定量,以减小实验误差。

12. 回收率试验可以通过添加已知浓度的花青素作为标准品,验证提取方法的效果和准确性。

13. 花青素的结构分析可以使用质谱联用色谱技术(LC-MS)进行,以确定不同花青素的分子结构和质量。

14. 对于不同类型的花青素,还可以使用凝胶层析法(Gel Filtration Chromatography)进行分离和检测。

15. 非离子表面活性剂(Non-ionic surfactants)可以在样品制备中用来改善花青素的提取率和稳定性。

花青素的分离提纯测定实验具体方案

花青素的分离提纯测定实验具体方案

花青素的提取、测定仪器材料试剂:仪器:旋转蒸发仪,真空泵,分光光度计,真空干燥箱,水浴锅,天平材料:新鲜的紫葡萄和青葡萄试剂:无水乙醇,盐酸,铁氰化钾,三氯乙酸,硫酸亚铁实验步骤一、花青素的提取:1、挑选新鲜的紫葡萄薄洗净晾干,分离出果肉、果皮、籽粒2、将分离晾干的紫色葡萄果皮,80℃下干燥1h。

3、称取2g磨成粉末4、用含有1%盐酸的乙醇溶液浸提2次,合并提取液5、讲合并提取液进行抽滤6、60℃减压浓缩7、真空干燥8、得粗提取液二、提取条件的优化:水平A提取温度/℃B乙醇浓度/%C提取时间/minD料液比/(g/ml)1 50 50 60 1:102 60 60 90 1:203 70 70 120 1:30实验序号 A B C D 结果1 1 1 1 12 1 2 2 23 1 3 3 34 2 1 2 35 2 2 3 16 2 3 1 27 3 1 3 28 3 2 1 39 3 3 2 1K1K2K3Q确定最佳提取方案然后对果皮、果肉、籽粒进行提取,测定最佳提取部位。

三、纯化纸层析法提纯1.取准备好的滤纸条(2×20cm),将其一端剪去两侧,中间留一长约1.5cm,宽约0.5cm的窄条,并在滤纸剪口上方折叠出一条直线,作为画滤液细线的基准线。

2.用毛细吸管沾少许滤液在折线上描绘4~5次,注意要画得匀、直、细,每次画完细线要等其自然变干后再画第二根线。

3.在大试管中加入常用的展开剂有V(丁醇)∶V(乙酸)∶V(水)=4∶1∶5,V(正丁醇)∶V(2mol/LHCl)=1∶1,V(乙酸)∶V(浓HCl)∶V(水)=15∶3∶82,1%盐酸,V(浓HCl)∶V(水)=3∶97等(即层析液)。

然后将滤纸条固定于软木塞上,插入试管内,使窄端浸入溶剂中(色素点要略高于液面,滤纸条边缘不可碰到试管壁),盖紧软木塞,直立于阴暗处进行层析。

4.展开后剪下色斑,以酸化甲(乙)醇洗涤、浓缩,即可得到样品。

花青素检测内容和方法

花青素检测内容和方法

花青素检测内容和方法花青素检测是一项重要的化学分析技术,用于测定植物和食品中的花青素含量。

花青素是一类常见的天然色素,具有抗氧化和抗炎作用,因此对其含量进行快速和准确的测定具有重要的科学和应用意义。

以下为50条关于花青素检测内容和方法的详细描述:1. 花青素是一类具有紫、蓝、红等颜色的天然色素,主要存在于植物的花朵、果实和叶子中。

2. 花青素的主要类型包括花色素苷、原花青素和异花青素等,它们在植物中起着色素和抗氧化作用。

3. 花青素检测的方法包括分光光度法、高效液相色谱法、质谱法等,常用的是分光光度法和高效液相色谱法。

4. 分光光度法是利用物质吸收特定波长的光线进行测定,通过比色法或比浊法来测定花青素的含量。

5. 高效液相色谱法是利用高效液相色谱仪进行测定,通过分离和检测样品中的花青素成分来计算含量。

6. 质谱法是利用质谱仪进行测定,通过记录花青素分子的质荷比来确定其含量。

7. 花青素检测常用的标准曲线方法是通过不同浓度的标准品制备标准曲线,再根据待测样品吸光度的测定值来计算含量。

8. 花青素的提取方法包括有机溶剂提取、酸碱水提取、超声波提取等,不同样品可选择合适的提取方法。

9. 有机溶剂提取是利用乙醇、丙酮等有机溶剂将花青素从植物组织中提取出来,然后通过浓缩和干燥得到提取物。

10. 酸碱水提取是利用酸性或碱性水溶液将花青素从植物组织中提取出来,可以有效保留花青素的天然结构。

11. 超声波提取是利用超声波功率促使样品中的花青素溶解在有机溶剂或水中,提高了提取效率。

12. 花青素的测定结果可根据测定方法的不同而有所差异,因此需要在同一实验条件下进行多次重复测定来确保结果的准确性。

13. 在花青素检测过程中,可能会受到样品中其他化合物的干扰,因此需要进行干扰检查和修正。

14. 花青素检测结果可以用于评价植物的品质、食品的营养价值和天然色素的应用价值。

15. 花青素检测在食品工业中具有重要的应用,如在果汁、酒类、饮料等产品中进行质量控制。

花青素含量的测定

花青素含量的测定

花青素含量的测定花青素是一种常见的植物色素,广泛存在于植物中,特别是在花朵和水果中。

花青素不仅赋予植物丰富多彩的颜色,还具有多种生理活性和保健功能。

因此,准确测定花青素含量对于研究植物生长发育以及开发植物资源具有重要意义。

测定花青素含量的常用方法有分光光度法、高效液相色谱法、电化学法等。

其中,分光光度法是一种简单、快速、经济的测定方法,被广泛应用于花青素含量的测定。

分光光度法是基于花青素本身在紫外-可见光区域具有特定的吸收光谱特性。

通常情况下,花青素在紫外区域(200-400nm)和可见光区域(400-700nm)都有吸收峰,峰值波长和吸光度的大小与花青素的结构和浓度有关。

因此,通过测定样品在特定波长下的吸光度,可以间接推算出花青素的含量。

具体的测定步骤如下:1. 样品的制备:将待测样品(如花朵、水果等)剪碎或研磨成细粉,加入适量的提取液(如乙醇、甲醇等),充分摇匀,静置一段时间,使花青素充分溶解在提取液中。

2. 提取:将提取液和样品混合物进行离心或过滤,得到澄清的提取液。

3. 分光光度法测定:取适量的提取液,利用紫外-可见光分光光度计,在特定波长下(通常为紫外区域的吸光峰)测定样品的吸光度。

根据吸光度和标准曲线的关系,可以计算出样品中花青素的含量。

需要注意的是,为了保证测定结果的准确性和可靠性,实验中应该设置空白对照组和标准曲线。

空白对照组是不含花青素的提取液,用于消除其他物质的干扰。

而标准曲线则是利用已知浓度的花青素标准品,根据吸光度和浓度的线性关系建立的,用于计算样品中花青素的含量。

为了提高测定的精确度,还可以对样品进行预处理,如去除杂质、调整pH值等。

同时,在测定过程中要注意操作规范,控制好实验条件,避免误差的产生。

测定花青素含量是研究植物色素和植物生理活性的重要手段。

分光光度法是一种常用而有效的测定方法,通过测定样品在特定波长下的吸光度,可以准确推算出花青素的含量。

通过合理的实验设计和操作,可以获得准确可靠的测定结果,为植物资源的开发和利用提供科学依据。

花青素检测内容和方法 -回复

花青素检测内容和方法 -回复

花青素检测内容和方法-回复花青素检测是一种常用的方法,用于确定食物、植物和其他生物中是否存在花青素化合物。

花青素是一类具有特殊结构和颜色的天然色素,广泛存在于植物中,特别是花朵、水果和蔬菜中。

在这篇文章中,我将详细介绍花青素检测的内容和方法。

第一部分:花青素的概述首先,我们来了解一下花青素的基本概念。

花青素是一类化学物质,属于类黄酮类化合物。

它们是水溶性的,可以通过分光光度法检测其浓度。

花青素具有丰富的生物活性,包括抗氧化、抗炎症和抗癌等特性。

因此,花青素在医药和食品领域具有重要的应用价值。

第二部分:花青素检测的常见方法花青素的检测方法有很多种,其中常见的几种方法包括分光光度法、高效液相色谱法和质谱法。

1. 分光光度法分光光度法是花青素检测中最常用的方法之一。

它利用花青素在特定波长下吸收光线的特性进行测定。

首先,要选择合适的波长进行检测,常用的波长为紫外光谱的510-540纳米范围。

然后,将待测样品制备成溶液,并使用分光光度计测量样品的吸光度。

根据吸光度和标准曲线的关系,可以确定样品中花青素的浓度。

2. 高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)是一种精确测定花青素浓度的分析方法。

它利用花青素在特定条件下与色谱柱相互作用的特性进行分离和测定。

在HPLC方法中,样品经过前处理后注入色谱柱,通过流动相不同的组成进行分离。

然后,使用紫外检测器检测样品中花青素的峰值,并根据峰面积和标准曲线的关系确定含量。

3. 质谱法质谱法是一种高灵敏度和高分辨率的分析技术,可用于花青素的定性和定量分析。

质谱法可以直接测定花青素分子的质量和结构。

通过质谱仪的扫描,可以得到花青素的质谱图,并通过比对已知标准品的质谱图进行分析。

第三部分:花青素检测的样品准备在进行花青素检测之前,需要对样品进行适当的预处理。

首先,要将样品磨碎或切碎,以提高样品暴露表面积。

然后,将样品加入适量的溶剂中,浸泡一段时间,以提取花青素。

提取液中的杂质可以通过滤纸或离心去除。

花青素的测定

花青素的测定

花青素的测定流通环境中花青素的测定主要利用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)的方法。

超高效液相色谱质谱法在花青素测定中被广泛使用,可用于定量和定性地测定水系统中的多种花青素。

UPLC-MS/MS方法因其快速,准确,精确和可靠性而受到欢迎。

它是建立一个准确的定量方法的有效和迅速的手段,在芳香族衍生物的抗氧化活性测定中也得到了应用。

它的优点是可以通过改变条件来进行定性和定量。

UPLC性能优良,分离效率高,检测敏感度高,效率稳定,耐受极高浓度溶液,操作简便,维护方便,拥有快速分辨,节省时间及节约成本的优点,使其成为流通中农药质量安全监测方法的首选。

UPLC-MS/MS 和其他色谱-质谱联用技术提供了快速,准确和灵敏的花青素测定,适用于工程环境中水质的复杂性。

此外,还可以通过改变实验条件和操作方法进行花青素的定性分析,用了紫外/可见光谱法和其他检测方法,如HPLC,LC/MS,LC/MS/MS,GC/MS,等,进行花青素的快速检测,对花青素的含量进行快速,精确,可靠的检测。

外源污染站,即在现有环境中来自其他源的污染物都可以检测出花青素。

一般情况下,需要根据污染物的种类,结合采样方法,把污染物检测出来,并根据样品特性和分析要求选择恰当的分析理论方法进行花青素的分析。

在水体的环境中,如污水处理厂、城市排水系统、给水系统、农田排水等,花青素原料和其他有害物质在水体环境中存在着,可以用UPLC-MS/MS或其他高级色谱技术对其浓度和物性进行检测。

总之,UPLC-MS/MS分析是目前流通环境中花青素的良好检测方法,具有准确,灵敏和可重复性的优势,是一种快速,准确,廉价,耗时少,材料消耗低的分析方法,能够有效应用于抗氧化剂有关的研究。

花青素检测内容和方法

花青素检测内容和方法

花青素检测内容和方法花青素是一类具有强烈吸收红外光的化合物,广泛存在于植物中。

它们赋予了许多植物花朵、水果和蔬菜明亮的颜色。

花青素不仅可以提供视觉上的吸引力,还具有抗氧化和抗炎症等生物活性。

因此,检测花青素的含量和质量对食品、药物和其他相关领域的研究非常重要。

花青素含量的检测方法有许多种,下面将介绍一些常用的方法:1. 分光光度法:分光光度法是一种常见且简便的检测花青素含量的方法。

它基于花青素对特定波长的光有很强的吸收能力。

通过将样品溶解在适合的溶剂中,使用紫外-可见光谱仪测量吸光度,然后根据不同波长下的吸光度值来计算花青素的含量。

这种方法可以测量花青素的总含量。

2. 高效液相色谱法:高效液相色谱法(HPLC)是一种准确测定花青素含量的常用方法。

它基于为花青素分离和检测提供了高分辨能力的高效液相色谱仪。

首先,样品中的花青素会被分离出来,然后通过波长选择性检测器进行定量分析。

这种方法可以同时测量多种不同类型的花青素,并且具有高灵敏度和高选择性。

3. 液相色谱质谱联用法:液相色谱质谱联用法(LC-MS)是一种更为精确的花青素检测方法。

它将高效液相色谱与质谱技术结合起来,可以通过质谱仪的高分辨率和灵敏度来确定花青素的结构和含量。

这种方法对于复杂的样品和低浓度的花青素分析非常有用。

4. 薄层色谱法:薄层色谱法是一种简单快速的花青素分析方法。

它基于花青素在薄层色谱板上迁移的性质,并通过与特定试剂反应形成具有色素的斑点来检测花青素。

该方法不需要复杂的仪器设备,适用于初步评估样品的花青素含量。

5. 酶联免疫吸附测定法:酶联免疫吸附测定法(ELISA)是一种基于抗体-抗原反应的花青素检测方法。

通过使用特异性的抗体来检测花青素,可以实现高灵敏度和高选择性的分析。

这种方法对于复杂样品和低浓度花青素的检测非常有效。

总之,准确测定花青素含量对于食品、药物和化妆品等行业至关重要。

上述介绍的不同方法可以根据实际需要选择合适的进行花青素的检测。

花青素、总酚、类黄酮含量测定

花青素、总酚、类黄酮含量测定

花青素、总酚和类黄酮是植物中重要的生物活性成分,具有抗氧化、抗炎、抗癌等多种生物功能。

因此,测定这些成分的含量对于评估植物的营养价值和药用价值具有重要意义。

花青素是一类天然色素,具有蓝色、紫色等颜色,广泛存在于植物的花、果、叶等部位。

花青素含量的测定方法有多种,其中常用的是分光光度法。

该方法利用花青素在特定波长下的吸收特性,通过测定吸光度来计算花青素的含量。

在实际操作中,需要注意选择合适的提取溶剂、控制提取时间和温度等因素,以保证测定结果的准确性。

总酚是指植物中所有酚类化合物的总量,包括单酚、多酚等。

酚类化合物具有很强的抗氧化活性,对于预防心血管疾病、癌症等疾病具有重要作用。

总酚含量的测定方法有多种,其中常用的是福林-酚法。

该方法利用酚类化合物与福林试剂的氧化还原反应,通过测定反应产物的吸光度来计算总酚的含量。

需要注意的是,福林试剂的浓度和反应时间等因素对测定结果有较大影响,需要进行严格控制。

类黄酮是一类具有黄酮结构的化合物,广泛存在于植物中,具有抗氧化、抗炎、抗过敏等多种生物活性。

类黄酮含量的测定方法有多种,其中常用的是高效液相色谱法。

该方法利用类黄酮在色谱柱上的保留特性,通过测定峰面积或峰高来计算类黄酮的含量。

需要注意的是,样品的处理方法和色谱条件等因素对测定结果有较大影响,需要进行优化和标准化。

综上所述,花青素、总酚和类黄酮是植物中重要的生物活性成分,其含量测定对于评估植物的营养价值和药用价值具有重要意义。

在实际操作中,需要选择合适的方法进行测定,并严格控制各种影响因素,以保证测定结果的准确性和可靠性。

中国药典2015版第一部附录va检测花青素

中国药典2015版第一部附录va检测花青素

我国药典2015版第一部附录va检测花青素一、概述我国药典2015版第一部是我国药典的重要组成部分,其中附录va是对药品的质量标准进行检测的一个重要内容。

花青素是一类具有生物活性的天然色素,广泛存在于植物中,具有抗氧化、抗炎、抗癌等多种生物活性,因此在各种药品中得到了广泛的应用。

对于花青素的含量的检测,不仅可以保证药品的质量,还可以对其生物活性的发挥进行评估,因此在我国药典2015版第一部中对花青素的检测方法作出了详细的规定。

二、检测方法花青素含量的检测方法主要采用分光光度法。

其中包括了试剂的准备、样品的制备、分光光度法的操作步骤等详细内容。

1. 试剂的准备试剂的准备是花青素含量检测的第一步,其中包括了乙醇、激发试剂和稀释试剂的配制方法,需要严格按照我国药典2015版第一部附录va的要求进行制备。

2. 样品的制备样品的制备是花青素含量检测的第二步,其中包括了不同类型的药材、药品的制备方法,需要根据具体的药材、药品种类进行调整。

3. 分光光度法的操作步骤分光光度法是花青素含量检测的关键步骤,其中包括了分光光度法的原理、仪器的操作方法、数据的处理等详细内容。

需要严格按照我国药典2015版第一部附录va的要求进行操作。

三、结果分析花青素含量的检测结果可以通过分光光度法得出,根据我国药典2015版第一部的标准,对花青素的含量进行评估和分析。

根据不同的药材、药品种类,可以对花青素含量的结果进行比较和评定,从而保证药品的质量。

四、质量管理我国药典2015版第一部附录va对花青素含量的检测方法作出了详细的规定,需要严格按照其要求进行操作和管理。

在进行质量管理时,需要关注试剂的质量、仪器的准确性、操作方法的标准性等方面,从而保证花青素含量检测结果的准确性和可靠性。

五、结论我国药典2015版第一部附录va对花青素含量的检测方法进行了详细的规定,分光光度法是主要的检测手段。

在实际操作中,需要严格按照我国药典2015版第一部附录va的要求进行操作,从而保证花青素含量检测结果的准确性和可靠性,为药品的质量提供保障。

花青素的测定国标

花青素的测定国标

花青素的测定国标一、花青素国家标准简介花青素国家标准分为两个部分:GB/T 19531和GB/T 19532。

前者规定了花青素的测定方法,后者则覆盖了花青素专用柱和专用试剂。

二、花青素测定方法根据GB/T 19531标准,以下是花青素测定方法:1.取样。

将20克的样品取出并用磨粉机粉碎。

2.提取。

将粉末样品用乙醇提取30分钟并过滤。

3.干燥。

将提取物在耗氧器中干燥至恒重。

4.溶解。

将样品溶解于乙醇中,并添加适量的甘油。

5.测定。

用紫外分光光度计分别在530nm和657nm波长下进行吸光度测定。

6.计算。

根据溶液比值计算花青素的含量。

三、花青素测定注意事项在花青素的测定过程中,需注意以下几点:1.保持实验室环境恒温,以避免温度波动。

2.样品粉末的粒度应均匀细腻,避免出现不均匀的情况影响实验结果。

3.使用合适的提取溶剂,并保证提取时间和过滤效果。

4.使用质量优良的试剂,以确保稳定和准确的实验结果。

四、花青素的作用花青素有多种功效,包括:1.美容。

花青素可以促进皮肤细胞生长,保护皮肤免受有害氧化物的损伤,增加皮肤的光泽度和弹性。

2.抗氧化。

花青素具有强大的抗氧化作用,能够减缓紫外线和自由基对身体造成的伤害。

3.预防心血管疾病。

花青素可以降低胆固醇、保护血管,减少心血管疾病的发生。

五、使用花青素的注意事项1.不宜过量。

长期摄入过多的花青素可能导致身体不适。

2.注意食用安全。

有些食物中的花青素对某些人可能过敏或引起不适,如对茄子过敏的人应该避免摄入其花青素。

3.选择天然食物。

选择新鲜、天然的花青素食物,避免添加剂和其他化学物质的影响。

总之,花青素的测定在食品工业和医学领域中非常重要。

以上的方法和注意事项,在测定花青素的含量时应被谨慎考虑。

未来,花青素的应用将会继续扩大,助力人类健康和长寿。

花青素的测定

花青素的测定

花青素的测定方法1:原花色素的测定方法(分光光度法)本方法适用于各种植物组织、器官及其制剂(如葡萄子与松树皮提取物)中原花色素含量的测定。

1. 方法提要原花色素(也称缩合单宁)是黄烷-3-醇的寡聚体与多聚体,属多酚类化合物。

与其他酚类化合物不同,黄烷醇(缩合单宁,单体,双体等)在酸性介质中可与香草醛反应,生成在500nm处有最大吸收的有色物质,可通过比色测其含量。

2. 仪器分光光度计。

3. 试剂所用水为去离子水或同等纯度蒸馏水。

(1)香草醛、甲醇、浓盐酸均为分析纯级。

(2)提纯的原花色素或儿茶素。

(3)4%香草醛甲醇液。

(4)标准使用液:将提纯的原花色素溶于蒸馏水,制成1mg/mL 储备液,将储备液稀至浓度为1×10-2mg/mL至1mg/mL的标准使用液。

标准使用液应于测定当天配制。

如无提纯的原花色素,可用儿茶素代替,配制方法同上。

4. 测定步骤(1)样品中原花色素的制备:植物材料经4倍体积丙酮+水(7+3,体积比)或者经60%甲醇提取,40℃以下减压蒸馏去除有机溶剂,水相再经乙醚洗涤后定容。

冰冻干燥的固体原花色素制剂,直接溶于水中(先加少量甲醇助溶)制成原花色素液。

原花色素液于5℃下暗环境中保存备用。

(2)样品测定:用锡箔将试管(14mm×20mm)包裹严,仅留管口用于加样。

向管内加入试样0.5mL,再加3.0mL 4%香草醛甲醇液混合,然后加入1.5mL浓盐酸,彻底混匀,室温下显色15min。

也可在暗环境下进行以上操作。

最后在500nm处比色。

可按以上操作步骤制得标准曲线(即0.1mg原花色素在500nm 处的吸收值为0.55)。

5. 结果计算计算原花色素量的公式,原花色素(1×10-3mg)=A500nm÷0.55×100×V式中V——试样稀释体积(倍数)。

6. 注释(1)本方法的检测范围为(5~500)×10-3mg/0.5mL样液。

花青素含量的测定

花青素含量的测定

花青素是一类具有重要生物活性的天然色素,广泛存在于植物中,并对人体健康有益。

测定花青素含量的方法有多种,以下是其中一种常用的方法:
试剂和仪器:甲醇、乙酸、五氯酚酞溶液、高压液相色谱仪(HPLC)等。

步骤:
1.将待检测的样品(如花瓣、果实等)取适量,冷藏保存。

2.取少量样品,用甲醇将其加以浸泡,使其充分均匀地溶解,形成混合液。

该混合液可放于水浴中加热加速搅拌。

3.通过滤纸将混合液过滤,使其中的杂质分离并去除。

4.将滤过的液体放入离心管并进行离心分离,将上清液取出。

5.将上述上清液加入乙酸及五氯酚酞溶液中,混匀后置于常温下反应15-20
分钟,即可形成浅红色溶液。

6.将步骤5中得到的溶液进行过滤,然后放入样品瓶中,即为待测样品溶
液。

7.通过高压液相色谱仪(HPLC)对待测样品溶液中的花青素成分进行分析
和检测,得到花青素的含量。

注意事项:
1.在操作前应严格遵守操作规程,保持实验环境清洁卫生。

2.在每个步骤中加入足量的试剂以确保精准的测定结果。

3.操作时应小心谨慎,防止操作过程中出现意外。

4.为了得到较为准确的测试结果,最好采用与国家标准接近的检测方法,并
在实验条件允许的情况下重复测试。

ph示差法测定花青素的原理

ph示差法测定花青素的原理

ph示差法测定花青素的原理花青素呀,那可是个很有趣的东西呢。

你知道吗?它是植物里那些让花朵呀、果实呀呈现出各种漂亮颜色的小功臣。

那我们怎么知道它的含量呢?这就轮到pH示差法闪亮登场啦。

咱先来说说花青素的一个小特性,它的颜色可是会随着pH值的变化而变化的哦。

就像一个超级爱换装的小仙子,在不同的酸碱环境下,它就会展现出不一样的色彩。

比如说在酸性环境里,它可能是一种颜色,到了碱性环境呢,又变成了另外一种颜色。

这就是pH示差法能够测定它的一个关键所在。

想象一下啊,我们有两个溶液,一个是酸性环境下的含有花青素的溶液,另一个是碱性环境下的同样含有花青素的溶液。

这两个溶液里的花青素因为所处的酸碱环境不同,颜色的深浅就不一样啦。

酸性环境下的花青素溶液颜色深一点,碱性环境下的颜色浅一点。

这就好比是同一个人,在不同的心情(酸碱环境)下,展现出不同的精神面貌(颜色深浅)。

那怎么根据这个来测定花青素的含量呢?这时候就用到了一个很巧妙的原理。

我们知道啊,溶液的吸光度是和溶液里物质的浓度有关系的。

吸光度这个东西呢,就像是溶液里花青素含量的一个小标签。

在不同pH值下的花青素溶液,它们的吸光度差值就和花青素的含量有着密切的关系。

比如说啊,我们用一个专门的仪器去测量酸性溶液的吸光度,再测量碱性溶液的吸光度。

然后把这两个吸光度相减,得到的这个差值呀,就像是一个密码,这个密码就能告诉我们花青素到底有多少。

如果这个差值比较大呢,就说明花青素的含量比较高;要是差值小呢,那花青素的含量就相对比较低。

这就好像是我们在称东西,重的东西在秤上显示的数字就大,轻的东西显示的数字就小一样。

而且哦,这个方法还有个好处呢。

它不像其他一些测定方法那么复杂,不需要特别复杂的仪器设备,只要能测量吸光度就可以啦。

就像我们做游戏一样,不需要太多复杂的规则和道具,简单又有趣。

不过呢,在做这个pH示差法测定的时候,也有一些小细节要注意。

比如说,这个酸性和碱性环境的pH值要控制得比较准确才行。

测定原花青素含量(硫酸香草醛法)1

测定原花青素含量(硫酸香草醛法)1

香草醛法测定原花青素的含量说明:原花青素的抗氧化性受到聚合物的影响,以乙酸为溶剂,香草只与原花青素中的末端的黄烷-3-醇发生缩合生成红色产物,由红色产物吸光度测定原花青素含量。

通过正交实验和单因素实验考查了硫酸香草醛法测定原花青素含量的合适条件,比色条件为硫酸浓度30%,香草醛浓度1%,反应T为30℃,反应时间为30分钟。

以儿茶素为标准品绘制标准曲线测定原花青素含量。

一、器材/试剂紫外分光光度计恒温水浴锅电子天平儿茶素标准品(浓度>=98%);香草醛 ( 分析纯) ;硫酸 ( 分析纯) ;冰乙酸 ( 分析纯) ;实验用水为二级反渗透去离子水。

二、实验步骤1.配制试剂( 1 )配制儿茶素标准品溶液:称取一定量的儿茶素标准品,分别用去离子水定容至一定体积,配制成物质的量浓度为0.025~0.25 mm o l · mL 的儿茶素标准品溶液;( 2 )配制香草醛乙酸溶液:称取一定量的香草醛,分别用乙酸定容至一定体积,配制成浓度为1 %;( 3 )配制硫酸乙酸溶液:量取一定体积的浓硫酸,分别用乙酸定容至一定体积,配制成浓度为3 0 %的硫酸乙酸溶液。

(4)样品溶液:原花青素溶液以火棘果为原料,按液固比 6:1加入 4 0 %乙醇溶液,4 5 ℃下浸提 1.5 h,问歇搅拌,连提3次,过滤,滤液旋蒸,回收溶剂。

浓缩液经过预处理好的AB一8树脂吸附,用去离子水洗涤、6 0%乙醇溶液洗脱,收集洗脱液,6 0%乙醇洗脱液即为样品溶液。

2、扫描最大吸收波长取0.5mL儿茶素标准品溶液,加入2.5mL30%的硫酸乙酸溶液,2.5mL 1%的香草醛乙酸溶液,混合均匀,30℃水浴中避光反应15min。

以无水乙酸做参比,在可见光区(400~800nm)进行光谱扫描。

确定最大吸收波长,以后在此波长下测定样品的含量。

3、绘制标准曲线(在最大波长吸收处测得吸光度)浓度0.025 0.035 0.045 0.055 0.065 0.075 0.085 0.095A(儿茶素)0.105 0.115 0.125 0.135 0.145 0.155 0.165 0.175A(儿茶素)0.185 0.195 0.205 0.215 0.225 0.235 0.245A(儿茶素)测原花青素样品的吸光度,通过以上标准曲线所得的标准曲线回归线方程计算得样品浓度。

花青素含量测定

花青素含量测定

花青素含量测定实验目的:掌握花青素含量测定的简单方法。

实验原理:花青素又称花色素,是苯并吡喃衍生物,属于多酚类化合物,常与一个或多个葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖等通过糖苷键形成花色苷,是自然界一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素,也是树木叶片中的主要呈色物质,在植物细胞液泡不同的pH 条件下,呈现不同的颜色。

大量研究表明:花色苷具有很强的抗氧化作用,可以清除体内的自由基;降低氧化酶的活性;可以降低高血脂大鼠的甘油脂水平,改善高甘油脂脂蛋白的分解代谢;抑制胆固醇吸收,降低低密度脂蛋白胆固醇含量;抗变异、抗肿瘤、抗过敏、保护胃粘膜等多种功能J。

苹果花青素主要存在于果皮中,是果皮颜色形成的重要物质。

苹果中的花青素由植物次生代谢重要途径一苯丙烷类代谢形成,同位素示踪揭示花青素的碳原子分别来自苯丙氨酸和乙。

苹果中的花青素由矢车菊素的三种糖苷组成,分别是矢车菊素-3一半乳糖苷、矢车菊素-3-阿拉伯糖苷和矢车菊素一7·阿拉伯糖苷J。

苹果中花青素的含量主要受温度、日照等因素影响,特别是紫外光可以明显提高花青素的合成效率,因此苹果的向阳面较背阳面红L4J。

Jerneja等研究表明富士苹果成熟前期是其花青素形成的重要阶段,其中矢车菊素一3一半乳糖苷占总花青素92 %~98%J。

器材与试剂:实验仪器:分光光度计,电子天平,恒温箱,剪刀,烧杯,量筒,移液管实验试剂:0.1mol/L HCL, 矢车菊素一3一半乳糖苷,甲醇,蒸馏水实验材料:苹果实验内容:1、作标准曲线:采用l %盐酸甲醇配置矢车菊素-3-半乳糖苷标准系列溶液,浓度分别为100、20.0、10.0、5.0、2.5、1.0 ~g/m L 。

用分光光度计测出OD值(波长530nm),计算出标准曲线。

2、选2个苹果,把苹果皮削出,称取5g的果皮加入10m L l %盐酸甲醇溶液匀浆,在40 ℃下提取1h,离心后取上清液在波长530nm测出OD值。

3、计算出苹果中花青素的含量。

花青素含量测定方法

花青素含量测定方法

花青素含量测定方法
1.仪器和试剂
采用760CRT型双光束紫外可见光分光光度计。

试剂选用2%盐酸甲醇溶液:浓盐酸:99%甲醇(2:98)。

2. 方法
2.1 样品处理
将含有花青素的树木鲜叶片去脉剪成1~2 mm碎片,随机取样,准确称量0.2 g,置于50 mL烧杯中,加人10 mL 2%盐酸甲醇溶液浸泡,杯口用封口膜扎紧以防挥发,置室温避光处浸提2小时,至肉眼观察叶组织完全变白取出过滤,用2%盐酸甲醇溶液定容至50 mL容量瓶中,于紫外可见分光光度计上分析。

2.2 测定
在紫外可见光分光光度计上全波段扫描2%盐酸甲醇溶液浸提叶片的浸提溶液吸收光谱,结果表明,紫外区最大吸收波长在280砌附近,可见光区域最大吸收波长在500~550砌内[引。

其最大吸收波长在530~535 I]/n处,在此采用波长530 nm条件下定量测定。

用2%盐酸甲醇溶液作为空白对照,在紫外可见光分光光度计上,用1 em厚比色皿,在波长530 nln处测定其吸光度(A)。

花青素检测内容和方法

花青素检测内容和方法

花青素检测内容和方法
花青素是一种广泛存在于植物中的天然色素,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。

下面介绍一些常见的花青素检测内容和方法:
1. 检测内容:
- 花青素的种类和含量:不同植物中的花青素种类和含量不同,通过检测可以了解植物中花青素的组成和相对含量。

- 花青素的稳定性:花青素在不同条件下的稳定性不同,例如温度、酸碱度、光照等。

通过检测可以了解花青素在不同条件下的稳定性,为其保存和应用提供参考。

- 花青素的抗氧化活性:花青素具有很强的抗氧化活性,可以清除体内的自由基,保护细胞免受氧化损伤。

通过检测可以了解花青素的抗氧化活性,为其在保健和医疗领域的应用提供依据。

2. 检测方法:
- 高效液相色谱法(HPLC):这是一种常用的花青素检测方法,可以分离和检测不同种类的花青素。

该方法具有灵敏度高、准确性好、分离效果好等优点。

- 紫外-可见光谱法(UV-Vis):花青素在特定波长下具有吸收峰,可以通过紫外-可见光谱法进行检测。

该方法简单快速,但只能检测总花青素含量,无法区分不同种类的花青素。

- 毛细管电泳法(CE):这是一种高效、快速的分离分析方法,可以用于检测花青素。

该方法具有分离效率高、分析速度快、样品用量少等优点。

- 红外光谱法(IR):花青素的红外光谱具有特征吸收峰,可以通过红外光谱法进行检测。

该方法可以用于花青素的定性分析,但需要较高的仪器设备和技术要求。

总之,花青素的检测内容和方法有很多种,选择合适的检测方法需要根据实际情况进行考虑。

在进行花青素检测时,需要注意样品的处理和保存,以保证检测结果的准确性和可靠性。

花青素测定

花青素测定

花青素的测定目的花青素是类黄酮类色素中最重要的一种,广泛存在于植物花、果实、茎叶中,对这些器官的观赏价值和商品形状有重要价值。

本实验学习花青素的提取及测定方法。

一、实验原理花青素在酸性溶液中呈红色,其颜色的深浅与花青素的浓度成正比。

花青素酸性溶液的吸收高峰波长是530nm,摩尔消光系数为4.62×104,故可用分光光度法测定其含量。

但是一些提取液中常有叶绿素存在,干扰测定。

因此,需同时测定提取液在620nm(可溶性糖)和650nm(叶绿素的吸收值)波长下的光密度值,并用Greey公式准确计算出花青素的光密度值,才能计算花青素的含量。

二、材料、设备及试剂1.材料茶叶2.2. 设备分光光度计、电子天平、水果刀、50ml具塞三角瓶、25ml容量瓶。

3. 试剂0.1 mol·L-1的盐酸乙醇溶液(8.3ml浓盐酸用95%乙醇稀释成1L)。

三、操作方法1. 花青素的提取取0.100g一串红和0.116g红花继木分别放在编号为1、2的三角瓶中,加10ml盐酸乙醇溶液,在60℃水浴中加10ml提取液浸提30min,把溶液倒入25ml容量瓶中,再加5ml提取液浸提15min, 把溶液倒入25ml容量瓶中,再加5ml提取液浸提15min, 把溶液倒入25ml容量瓶中,共浸提1h,最后定溶到25ml。

2. 测定以0.1mol·L-1的盐酸乙醇溶液做参比液,在分光光度计测定提取液在530nm、620nm、650nm波长下的光密度值。

四、实验结果实验结果如下表依据公式1.计算花青素的光密度值ODλ=(OD530-OD620)-0.1(OD650-OD620)2.计算花青素含量=ODλε×V×1000000m花青素含量(nmol/g)ODλ:花青素在530nm波长下的光密度ε:花青素摩尔消光系数4.62×106v:提取液总体积(ml)m:取样质量(g)1000000: 计算结果换算成nmol的倍数由一串红测得结果则有:ODλ=(1.360-0.024)-0.1(0.043-0.024)=1.3341所以,花青素含量(nmol/g)=1.3341/4.62/104×25/0.100×106=7219.156 由红花继木测得结果则有:ODλ=(0.370-0.062)-0.1(0.183-0.062)=0.2959 所以,花青素含量(nmol/g)=0.2959/4.62/104×25/0.116×106=1380.337五、结果分析与讨论从实验实验可以看出,一串红的花青素含量比红花继木的花青素含量高很多。

吸光度法测定花青素含量

吸光度法测定花青素含量

吸光度法测定花青素含量
一、试验器材
1 材料与试剂
花青素标样;体积分数95%的乙醇;盐酸、甲醇、正丁醇、硫酸铁铵,均为分析纯。

2 仪器与设备
超声波细胞粉碎机、微波炉、低速大容量多管离心机、UV—1200 型紫外可见分光度计、pHS—3C型酸度计、RE—52型旋转蒸发仪、电子恒温水浴锅。

二.
1、标准曲线的绘制
准确配制质量浓度为0.50 mg/mL的花青素标准溶液,分别吸取0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5mL置于6支10mL 具塞比色管中,各加入甲醇溶液至1.0mL,然后加入6.0mL正丁醇—盐酸溶液(体积比为95∶5)和0.2mL 质量分数为2%的硫酸铁铵溶液(临用时配制),摇匀后,置沸水浴中加热40 min,然后迅速冷却,在波长400~600 nm处进行扫描,确定其最大吸收波长530nm,于最大吸收波长处测定花青素标准溶液吸光度,得到标准曲线方程。

将待测溶液在最大吸收波长下的吸光度值(平行6次)。

再通过标准曲线得出其浓度。

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四川农业大学Sichuan Agriculture University植物生理实验报吿实验四、花青素的测定一、实验目的花青素是类黄酮类色素中最重要的一种,广泛存在于植物花、果实、茎叶中,对这些器官的观赏价值和商品形状有重要价值。

本实验学习花青素的提取及测定方法。

二、实验原理花青素在酸性溶液中呈红色,其颜色的深浅与花青素的浓度成正比。

花青素酸性溶液的吸收高峰波长是530nm ,摩尔消光系数为4.62×104,故可用分光光度法测定其含量。

但是一些提取液中常有叶绿素存在,干扰测定。

因此,需同时测定提取液在620nm (可溶性糖)和650nm (叶绿素的吸收值)波长下的光密度值,并用Greey 公式准确计算出花青素的光密度值,才能计算花青素的含量。

三、材料、设备及试剂1. 材料 红花檵木叶片2. 设备 分光光度计、电子天平、50ml 具塞三角瓶、25ml 容量瓶、刀片3. 试剂 0.1 mol ·L -1的盐酸乙醇溶液(8.3ml 浓盐酸用95%乙醇稀释成1L )。

四、操作方法1. 花青素的提取 取0.100g 红花檵木,切成1cm 见方的小块,放在三角瓶中,加 0.1 mol ·L -1盐酸乙醇溶液15ml ,在60℃水浴中暗处理,把溶液倒入25ml 容量瓶中,再加5ml 提取液浸提15min, 把溶液倒入25ml 容量瓶中,再加5ml 提取液浸提15min, 把溶液倒入25ml 容量瓶中,共浸提1h ,最后定溶到25ml 。

2. 测定 以0.1 mol ·L -1的盐酸乙醇溶液做参比液,在分光光度计测定提取液在530nm 、620nm 、650nm 波长下的光密度值。

五、实验结果实验结果如下表A 530A 620A 650 0.656 0.085 0.248依据公式1. 计算花青素的光密度值OD λ=(OD 530-OD 620)-0.1(OD 650-OD 620)=(0.656-0.085)-0.1(0.248-0.085)=0.63122. 计算花青素含量=ODλε×V×1000000m花青素含量(nmol/g)=0.6312/4.62×104×25/0.1011×1000000=3378.422ODλ:花青素在530nm波长下的光密度ε:花青素摩尔消光系数4.62×106v:提取液总体积(ml)m:取样质量(g)1000000: 计算结果换算成nmol的倍数六、结果分析与讨论实验注意事项:1.本实验严格按照实验要求操作,在提取过程中谨慎小心,未造成液滴溅出的现象,且用盐酸乙醇反复清洗三角瓶并转移至容量瓶中,保证了实验的准确性。

2.使用分光光度计时,也提前半小时开启预热,排气,提高实验结果的准确性。

实验目的和意义本实验让我们学习和掌握花青素的提取和测定方法,进一步巩固了分光光度计的使用方法。

花青素的种类、结构与特性花青素的基本结构单元是2一苯基苯并吡喃型阳离子,即花色基元。

现已知的花青素有20多种,主要存在于植物中的有:天竺葵色素(Pelargonidin)、矢本菊色素或芙蓉花色素(Cyanidin)、翠雀素或飞燕草色素(Delphindin)、芍药色素(Peonidin)、牵牛花色素(Petunidin)及锦葵色素(Malvidin)。

自然条件下游离状态的花青素极少见,主要以糖苷形式存在,花青素常与一个或多个葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖等通过糖苷键形成花色苷。

已知天然存在的花色苷有250多种。

花青素分子中存在高度分子共轭体系,具酸性与碱性基团,易溶于水、甲醇、乙醇、稀碱与稀酸等极性溶剂中。

不溶于乙醚、氯仿等有机溶剂,遇醋酸铅试剂会沉淀,并能被活性炭吸附。

在紫外与可见光区域均具较强吸收,紫外区最大吸收波长在280 nm附近,可见光区域最大吸收波长在500~550n/n范围内。

花青素类物质的颜色随pH值的变化而变化,pH<7呈红色,pH在7~8时呈紫色,pH>11时呈蓝色。

花青素的功能花青素具有抗氧化、抗突变、预防心脑血管疾病、保护肝脏、抑制肿瘤细胞发生等多种生理功能。

花青素不仅有利于授粉和种子传播、抵抗植物虫害以及预防植物的紫外线照射损伤,同时花青素的生理功能得到了国内外研究人员的关注,主要集中在抗氧化、清除自由基、抑癌、改善血脂、保护肝脏及抗炎、抑菌等方面,因此花青素在食品、保健品、医药等产业方面都有着广阔的应用前景花青素的提取方法1有机溶剂萃取法这是目前国内外最广泛使用的提取方法。

多数选择甲醇、乙酮、丙酮等混合溶剂对材料进行溶解过滤,通过调节溶液酸碱度萃取滤液中的花青素。

国内吴信子等用盐酸一甲醇溶液提取,然后用纸层析法(中号)和柱层析法(聚乙酰胺)进行花色苷的分离。

目前,有机溶剂萃取法已成功地应用于诸如葡萄籽、石榴皮、蓝莓等绝大多数含花青素物质的提取分离。

有机溶剂萃取法的关键是选择有效溶剂,要求既要对被提取的有效成分有较大溶解度,又要避免大量杂质的溶解。

该方法原理简单,对设备要求较低,不足之处是大多数有机溶剂毒副作用大且产物提取率低。

2水溶液提取法有机溶剂萃取的花青素多有毒性残留且生产过程环境污染大,有鉴于此,水溶液提取应运而生。

该方法一般将植物材料在常压或高压下用热水浸泡,然后用非极性大孔树脂吸附;或直接使用脱氧热水提取,再采用超滤或反渗透,浓缩得到粗提物。

它是Duncan和Gilmour(1998)发明的提取花青素的方法,此方法设备要求简单,但产品纯度低。

3超临界流体萃取法超临界流体萃取是利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响进行提取。

这种方法产品提取率高,但设备成本过高。

孙传经采用超临界CO:萃取法从银杏叶、黑加仑籽及葡萄籽中提取花青素工艺进行了研究。

该工艺中CO 和改性剂可循环使用,对环境无污染。

4微波提取法该法于1986年被Ganzlert E9]等人首先用于分离各种类型化合物。

国内李风英探讨了微波技术对葡萄籽中原花青素提取量和分子结构的影响。

为微波在葡萄籽中有效成分浸提方面的研究奠定了基础。

微波提取法是利用在微波场中,吸收微波能力的差异使得基体物质的某些区域或萃取体系中的某些组分被选择性加热,从而使得被萃取物质从基体或体系中分离,进入到具有较小介电常数、微波吸收能力相对较差的萃取溶剂中。

该技术选择性好,萃取率高,速度快,操作简单,废液排放量少。

5超声波提取法超声波在20世纪50年代后逐渐应用于化学化工生产过程之中,且主要集中在植物中药用成分、多糖以及其它功能性成分的提取等研究领域。

超声波提取运用前景好、操作简单、快速高效、生产过程清洁无公害。

2008年时,Corrales12]等人开展的不同提取方法对葡萄中花青素的提取率影响的对比实验结果表明:相同条件下与热浸70~(2提取相比,超声波辅助提取花青素等酚类的效率可以提高50%以上。

6微生物发酵提取法此方法将生物发酵技术应用于花青素的提取之中,是生物科学与化工生产之间的超强渗透与有效结合。

微生物发酵法利用微生物或酶让含有花青素的细胞胞壁降解分离,使细胞胞体内花青素充分溶入到提取液中,从而增加提取的产率与速率。

王振宇I1 采用微生物和纤维素酶降解大花葵细胞壁提取花青素就是可靠的研究实例。

该方法的优点是操作稳定性及可靠性高,环境友好。

7加压溶剂萃取加压溶剂萃取法是通过加压提高溶剂的沸点,进而使被提取物在溶剂中的溶解度增加,从而获得较高的萃取效率。

Arapitsas_】 (2008)等人采用了此技术优化了紫甘蓝中花青素的最佳提取工艺。

该法的优点是提取率高,但经济成本亦较高。

8亚临界水提取技术亚I临界水提取技术是最近几年来的新成果,它的具体做法就是在适度压力下,将水加热到IO0~C以上,临界温度374~C以下的高温,使水的极性随温度的变化而改变,对原材料中的花青素进行提取。

近两年的研究实例有Luque—rodriguez 等人¨采用动态过热流体提取葡萄皮中的花青素,并优化了最佳提取工艺。

对比于其他提取方法,亚临界水提取方法清洁、有效、花青素提取量为传统动态固液萃取的三倍,且产品性能更优,不足之处是工艺条件要求较高。

9其他提取方法包括高压脉冲电场辅助提取、双水相萃取、超高压辅助提取。

前两种可应用于蛋白质、核酸、多糖的提取研究,而超高压辅助提取已成功用于葡萄中花青素的提取之中,且对比发现高压辅助提取花青素等多酚类的效率可以提高近50%¨1 。

种子生活力的快速鉴定实验目的意义种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。

它是决定种子品质和实用价值大小的主要依据,与播种时的用种量直接有关。

测定种子生活力常采用发芽实验,即在适宜条件下,让种子吸水萌发,在规定天数内统计发芽的种子占供试种子的百分数。

可用快速测定法在较短时间内获得结果。

用TCC 法和红墨水染色法来鉴定。

I.TCC法一、实验原理凡有生命活力的种子胚部,在呼吸作用过程中都有氧化还原反应,在呼吸代谢途径中由脱氢酶催化所脱下来的氢可以将无色的 TTC 还原为红色、不溶性三苯基甲( TTF ),而且种子的生活力越强,代谢活动越旺盛,被染成红色的程度越深。

死亡的种子由于没有呼吸作用,因而不会将 TTC 还原为红色。

种胚生活力衰退或部分丧失生活力,则染色较浅或局部被染色。

因此,可以根据种胚染色的部位以及染色的深浅程度来判定种子的生活力。

二、材料、设备及试剂材料:玉米种子设备:恒温箱,刀片,烧杯,镊子,波板。

试剂:0.5% TTC 溶液三、操作方法1. 浸种将待测种子在 30 ~ 35 ℃温水中浸种数小时,以增强种胚的呼吸作用。

2. 显色 取吸胀的种子 30粒,用刀片沿种子胚的中心线纵切为两半,将其中的一半置于 2 只培养皿中,每皿 30个半粒,加入适量的 0.5% TTC 溶液,以覆盖种子为度。

然后置于 30 ℃恒温箱中 1 h 。

观察结果,凡胚被染为红色的是活种子。

四、实验结果种子生活力(%)=100 测定种子总数(粒)活种子数(粒)%=100%II 红墨水染色法一、实验原理有生活力的种子其胚细胞的原生质具有半透性,有选择吸收外界物质能力,某些染料如红墨水中的大红 G 不能进入细胞内,胚部不着色。

而丧失生活力的种子其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收的能力,染料进入细胞内是胚部染色,所以可根据种子胚部是否染色来判断种子的生活力。

二、实验材料、试剂与仪器设备实验材料 :玉米种子试剂 :5% 红墨水。

仪器设备 :培养皿,刀片,烧杯,镊子。

三、实验步骤1 .浸种 同上述 TTC 法。

2 .染色 取已吸胀的种子 200 粒,沿胚的中线切为两半,将一半置于培养皿中,加入 5% 红墨水(以淹没种子为度),染色 10 ~ 15 min (温度高时间可短些)。

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