基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术早期筛查耐万古霉素屎肠球菌

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基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱

基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱在寡糖结构分析中的应用项目完成单位：国家生物医学分析中心项目完成人：刘炳玉谷苗桑志红王鸿丽刘峰魏开华杨松成1.前言寡糖和多糖具有调节抗体水平、增强免疫功能、抗肿瘤、抗感染等作用,在肝炎、风湿病和爱滋病等重大疾病诊疗上应用价值大。

它还具有抗消化性溃疡、降血糖、降血脂、抗血栓、抗辐射、抗毒物损伤、抗晕、祛痰镇咳、诱导干扰素产生、促进血功能恢复以及促进蛋白质和核酸的生物合成等方面的生物活性，在国内外（尤其我国传统医学中）应用十分广泛。

糖类化合物结构比蛋白质和核酸复杂得多，包括单糖及其衍生物、寡糖、多糖、复合多糖和糖苷类，糖链由含多元羟基并顺反异构环状己或戊糖通过苷键连接而成,各单糖有五个手性碳且连接位置和构型多种多样。

要阐明一种糖结构,必须了解: (1) 分子量;(2) 单糖残基组成; (3) 单糖残基间的顺序; (4) 单糖残基在糖苷键中的位置; (5) 环状结构的类型; (6) 糖苷键的构型。

糖的组成复杂,结构相似,没有显色基团,难以不经衍生就进行光谱、色谱分析,但质谱不受此影响。

早期研究糖结构的质谱方法主要是快原子轰击电离质谱（FAB-MS），可以显示碎片离子,但有时候检测不到分子离子峰，而且，FAB-MS的分子量范围小、灵敏度不高[1]。

以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI－TOF－MS) 和电喷雾质谱（ESI-MS）为代表的生物质谱打开了质谱分析研究生物大分子的新领域,并很快发展成为能在多个层次上分析研究生物分子的生物质谱学(Biological Mass Spectrometry , BMS) [2-4]。

近年来，ESI－MS已在糖的结构分析中显示出强大的生命力。

它无需衍生化就能确定寡糖的结构、聚合度及组成，并能精确测定糖蛋白的分子量及其中寡糖的序列及结构均一性，还能区分寡糖是O一还是N－连接的，常被用于糖型（glycoform）的分析[5]。

但是，ESI-MS受样品中的无机盐和溶剂中干扰物的影响比较大，常导致其表观灵敏度不高。

核酸基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在结核病和非结核分枝杆菌病诊断专家共识要点

核酸基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在结核病和非结核分枝杆菌病诊断专家共识要点核酸基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术（MALDI-TOF MS）在结核病和非结核分枝杆菌病（Nontuberculous Mycobacteria, NTM）的诊断中起到了重要的作用。

本文将总结核酸基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在结核病和NTM病诊断方面的专家共识要点。

1.技术原理：MALDI-TOFMS技术通过将分离的菌落直接吸附于基质上，并利用激光解吸和电离的原理对蛋白质进行检测和鉴定。

通过将分子的质荷比与已知数据库中的蛋白质质谱图进行比对，可以快速准确地确定菌株的物种和亚型。

2.结核病诊断：MALDI-TOFMS技术可以用于结核分枝杆菌的识别和鉴定。

结核分枝杆菌是引起结核病的主要致病菌株，通过MALDI-TOFMS技术可以快速准确地识别结核分枝杆菌，有助于早期诊断和治疗。

3.NTM病诊断：NTM是引起非结核分枝杆菌病的致病菌株，与结核分枝杆菌相比，NTM种类繁多，且具有耐药性。

传统的方法对于鉴定NTM菌株的种类和亚型耗时且复杂，而MALDI-TOFMS技术具有快速、准确的优势，可用于鉴定不同种类和亚型的NTM菌株，为临床诊断和治疗提供参考。

4.技术优势：MALDI-TOFMS技术具有快速、高效、准确、经济的特点，可以在几分钟内完成对菌株的鉴定，有效缩短了传统培养方法所需的时间。

此外，该技术还可以对菌株进行分子分型，有助于了解疫情传播链及菌株耐药性情况。

5.限制和挑战：MALDI-TOFMS技术在结核病和NTM病的诊断中存在一定的限制和挑战，例如对于一些高度相似的菌株进行区分可能存在困难，同时对于未知菌株的鉴定可能不够准确。

此外，建立完善的蛋白质数据库也是技术推广和应用的重要挑战。

综上所述，核酸基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在结核病和NTM病的诊断中具有显著的优势和价值，可以快速准确地鉴定不同种类和亚型的致病菌株，为临床诊断和治疗提供重要依据。

jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱

jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱是一种先进的质谱技术，它结合了基质辅助激光解吸电离（MALDI）和飞行时间质谱（TOF-MS）两种技术的优势，能够在分析生物大分子和其他复杂样品时提供高灵敏度和高分辨率的数据。

在MALDI-TOF-MS中，样品与基质混合后通过激光辅助电离，产生一系列的离子，这些离子在一个电场中被加速到一定能量后，根据其质荷比分别飞行到检测器，通常基于TOF-MS的仪器会有高质量的检测结果。

针对这一主题，我们将深入探讨jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱的原理、应用及优势，并探讨其在生物医学研究、生物技术领域的重要意义。

我们将对该技术的未来发展和趋势进行分析和展望，以帮助您更全面地了解jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱。

理解jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱的原理对于深入探讨这一主题至关重要。

这种技术利用了MALDI和TOF-MS两种技术的优势，MALDI能够提高大分子的离子化率，TOF-MS能够提供高分辨率和高灵敏度的分析结果。

jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱可以在保证数据质量的提高分析的速度和效率。

我们将深入探讨jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱在生物医学研究和生物技术领域的应用。

这种技术在生物医学研究中可以用于蛋白质组学和代谢组学的分析，能够帮助科学家更好地理解疾病的发病机制、开发新的药物或者诊断方法。

在生物技术领域，jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱也能够用于生物药物的质量控制和分析，可以提高生物药品的质量和安全性。

我们还将重点分析jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱的优势，比如高分辨率、高灵敏度、高通量等特点，以及与其他质谱技术的比较。

这可以帮助您更好地了解jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱在分析复杂样品时的优势和局限性。

通过对jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱的未来发展和趋势进行分析和展望，我们可以帮助您更好地把握这一技术的发展方向和未来的应用前景，为您在相关领域的研究和应用提供更多的启发和帮助。

基质辅助激光解析电离

1.4统计学分析
所有数据均采用统计学软件SPSS19.0进行统计分析，计量资料采用百分比表示，进行卡方检验，P<0.05表示差异具有统计学意义。
2结果
2.1真菌鉴定种类分布
经过鉴定，300株真菌种类分别为：热带念珠菌、白色念珠菌、阿萨斯酵母菌、烟曲霉米曲霉、宛氏拟青霉、烟草赤星病菌，详细数据见下表。
基质辅助激光解析电离
【摘要】目的探究基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱仪在临床微生物鉴定中的应用，为真菌微生物的鉴定提供临床技术支持。方法选取于2015年3月到2017年2月我院临床采集的真菌作为实验标本，利用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱仪对菌种进行鉴定，分析基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱仪对菌种鉴定的检查效果。结果300株真菌中有290株（96.67%）经鉴定后可以正确归类到种水平，6株（2%）未能给出鉴定成果，4株（1.33%）鉴定结果出现错误，且正确率与传统方法相比差异显著，具有统计学意义（P<0.05）。结论基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱仪稳定性高，可重复性好，并且具有快速准确的优点，是临床鉴定微生物种类的一种快速可靠的高通量方法，可以为临床的微生物鉴定提供一定的技术支持。
3讨论
基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱技术是近年来出现的一种软电离新型有机质谱，这种新的技术手段已经广泛应用于生物、医学行业，是检测和鉴定多肽大分子物质以及蛋白质的有效手段，具有十分高的灵敏度，并且检测的准确率高，操作简单，检测周期短，稳定性高，是十分方便快捷的技术[11-13]。基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱技术可应用于多个领域，其中基于细菌表面蛋白分子量进行细菌鉴定的技术尤为引人注意。通过将微生物和等量的基质分别点加在加样板上形成混合物，然后利用激光的能量使样品解离，通过计算不同物质飞行时间不同来检测离子分子量，然后应用质谱技术对结果进行处理，生成特异性的蛋白质组指纹图，从而进行对比分析，鉴定微生物种类[14-16]。由于这种检测方法是利用蛋白质图谱来进行的，而每种微生物的蛋白组成受遗传因素的影响，不受外界环境等因素的制约，因此相对于其他的检测手法，这种蛋白质图谱法能更为直观准确的进行微生物的鉴定。在本次研究中，我们发现新的基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱技术检查的正确率为96.67%，远远高于传统的检查手法，说明基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱技术具有准确率高的特点，并且在进行实际的操作实验中，传统的实验方法是基于形态学或生理生化特性进行鉴定，需要的时间较长，且操作繁琐，而且对于一些相似的菌种鉴别过程仍然存在一定的困难；但是利用这种新型技术操作的时间就大大减少，首先进行2-3天的菌株培养，等待菌株生长完成后进行样本的制备，该过程仅需花费不到半个小时，因此时间大大的减少。曾有研究表明[17]，基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱技术常见的人畜病原菌检测中具有较好的准确率，对于单增李斯特菌、沙门氏菌、肺炎链球菌等病原菌都有十分高的准确率。Phillips等曾经对对来自病人的437个菌株进行基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱测试，差异结果用16S基因进行分析，结果发现该方法鉴定菌株的正确率高达95.1%[18]。同时对980株来自临床的细菌和酵母菌株进行确认，发现基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱技术鉴定种的正确率（95.34%）明显高于传统的生化鉴定系统（83.1%）。并且，这种新型技术可以直接检测来自医院临床病人的样本，不需要经过纯培养，因此检测时间短，对于患者的临床诊断以及治疗有很大的帮助作用，在急性病原菌感染患者的检测和治疗上均有十分广阔的应用前景[19，20]。

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术在快速鉴定真菌中的临床应用研究

论著
基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术在快速鉴定真菌中的临床应用研究
叶丽艳，郭玲，马艳宁，张樱，赵强，李丰田，王蕊，杨继勇，王成彬，罗燕萍
（解放军总医院微生物科，北京１００８５３）
（ＧｅｎｅｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＰＬＡ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００８５３，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥＴｏｓｕｍｍａｒｉｚｅｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｔｈｅｍａｔｒｉｘａｓｓｉｓｔｅｄｌａｓｅｒｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎｉｏｎｉｚａｔｉｏｎｔｉｍｅ — ｏｆ＿ｆｌｉｇｈｔｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（ＭＡＬＤＩ — ＴＯＦＭＳ）ｉｎｔｈｅｑｕｉｃｋｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｃｌｉｎｉｃａｌｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｆｕｎｇｉＳＯ
９月临床检出真菌进行鉴定，获取真菌全细胞蛋白（主要是核糖体蛋白）质谱，通过与数据库中已知菌质谱进行比较、分析，获得鉴定结果并对数据进行统计分析。结果结论共鉴定出真菌１２５４株，质谱技术鉴定真菌共１１９８株，占９５．５３，未鉴定出真菌占４．４７；应用质谱技术鉴定的真菌中以假丝酵母菌属为主，共１１２５株占９３．９１。ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦＭＳ技术鉴定真菌种类多，操作流程简单、快速，而且还具有很好的可重复性和准确性，是传

评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定临床病原菌的效果

Ｙｕａｎｊｉａｎ，ＸｕＷｅｉｄｏｎｇ．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＳｕｚｈｏｕＨｏｓｐｉｔａｌＡｉｌｆｉａｔｅｄｔｏＮａｎｊｉｎｇＭｅｄｉｃａｌ
杆菌属、伯克霍尔德氏菌属的值分别为２．３０４、０．０００、０．０００、１．１８５、１．３４３、０．６１１、０．０００，沙雷氏菌属、枸橼酸杆菌属、普罗威登斯菌属、窄食单胞菌属均经ｆｌｓｈｅｒ￣ｒ验；Ｐ均＞０．０５）。两系统鉴定结果不一致的８０例菌株经１６ＳｒＲＮＡ￣因测序，有４７株被ＭＡＬＤＩ＿Ｔ０ＦＭＳ正确鉴定，有２８株￣Ｐｈｏｅｎｎｉｚａｔｉｏｎ．ｔｉｍｅｏｆｌｆｉｇｈｔｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ，ＭＡＬＤＩ．ＴＯＦＭＳ）对临床细菌的鉴定能力。方法
年９月至２０１５年１月苏州市立医院门诊和住院患者临床标本中分离出的４５１１株病原菌，包括３７２７株常见细菌，７８４株真菌，３２株少见菌，按标准操作流程分离和培养后，用ＭＡＬＤＩ．ＴＯＦＭＳ和Ｐｈｏｅｎｉｘ．１００分别鉴定所分离菌株，鉴定结果不一致菌株采用细菌１６ＳｒＲＮＡ基因测序技术予以确认；采用ＭＡＬＤＩ．ＴＯＦ
定，且差异有统计学意义＝９．０６０，Ｐ＝０．００３）。ＭＡＬＤＩ．ＴＯＦＭＳ对念珠菌属、酵母菌属以及丝孢酵母菌属的检出率分别为９０．７％、１００％和１００％。３２株临床少见菌ｆ芽孢杆菌属、乳杆菌属、丝孢酵母菌属、莫拉氏菌属、产单核李斯特菌等）经ＭＡＬＤＩ．ＴＯＦＭＳ鉴定均得到可信结果。结论

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱_省略_术在临床微生物鉴定中的应用及价值_顾兵

作者简介：顾兵，1979 年生，男，助理研究员，博士，研究方向为细菌耐药与感染性疾病实验室诊断。
临床检验杂志 2013 年 11 月第 31 卷第 11 期 Chin J Clin Lab Sci，Nov． 2013，Vol． 31，No． 11
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属［40-43］、嗜血杆菌属［44-45］、螺杆菌属［46-48］和奈瑟菌属［49］等。沙门菌属内分型较困难，但可鉴别肠道伤寒沙门菌血清型与其他肠道沙门菌血清型［50-53］。 2． 3 分枝杆菌用 MALDI-TOF MS 技术鉴定分枝杆菌需要采取特殊步骤灭活待检测微生物。在数据库结构下，该技术能鉴定大多数的分枝杆菌。Paul 等［54］研究显示：在鉴定结核分枝杆菌方面，MALDI-TOF MS 尚不能鉴定到菌种水平。对于分枝杆菌属的其他菌种，除玛尔摩分枝杆菌和其他几组紧密联系的菌种，如脓肿分枝杆菌与马赛分枝杆菌、产黏液分枝杆菌与福西亚分枝杆菌、Mycobacterium chimaera 和胞内分枝杆菌外，大部分的分枝杆菌都能用 MALDI-TOF MS 技术准确鉴定。 2． 4 真菌 MALDI-TOF MS 技术鉴定真菌不仅优于一些传统的表型系统，且能区分白念珠菌和杜氏念珠菌［55］，皱落念珠菌和 pararugosa 念珠菌，挪威念珠菌、克鲁斯念珠菌和平常念珠菌，近平滑念珠菌、似平滑念珠菌和热带念珠菌，新生隐球菌及格特隐球菌［56-58］。Anna 等［59］建立了用 MALDI-TOF MS 技术鉴定丝状真菌的数据库，数据库包含了 78 种菌属与 156 个菌种，其中曲霉菌占大部分。在对 421 株丝状真菌的鉴定中，该库在菌种水平鉴定霉菌的准确率达 90% 左右。 2． 5 厌氧菌通过低分子量的蛋白质谱，MALDI-TOF MS 技术可鉴定拟杆菌属、普雷奥菌属、卟啉单胞菌属、梭杆菌属、消化链球菌属和梭状芽孢杆菌属。在一项对 277 株拟杆菌属细菌的研究中，用 MALDI-TOF MS 技术鉴定的符合率为 89． 1% ，增加 4 种 Parabacteroides distasonis 资料进入数据库后，其鉴定符合率上升至 95． 6% 。［60］

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在临床微生物检验的应用进展

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在临床微生物检验的应用进展李　欣　高海军１　张　勤　许建成　（吉林大学第一医院检验科，吉林　长春　１３００２１）〔关键词〕　基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱；微生物；鉴定〔中图分类号〕　Ｒ３７〔文献标识码〕　Ａ〔文章编号〕　１００５－９２０２（２０１６）１３－３３３６－０３；ｄｏｉ：１０畅３９６９／ｊ畅ｉｓｓｎ畅１００５－９２０２畅２０１６畅１３畅１１８１　吉林大学第一医院神经肿瘤外科通讯作者：许建成（１９７６－），男，副教授，副主任医师，主要从事细菌耐药机制的研究。

第一作者：李　欣（１９９０－），女，硕士在读，主要从事临床微生物学研究。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ）是一种新型的质谱技术，具有灵敏度高，样品用量少，分析速度快的特点。

目前，ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ已开始应用于多项微生物的检测，为临床疾病的诊疗提供有效的指导。

１　ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ鉴定微生物的特点及优势ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ系统由基质辅助激光解吸电离离子源（ＭＡＬ－ＤＩ）、飞行时间质量分析器（ＴＯＦ）和检测器组成，属于一种软电离技术，适用于混合物及生物大分子的测定〔１〕。

其原理是利用激光照射待测物与基质形成的共结晶薄膜，通过基质吸收能量并将能量转移至待测物分子，使分子解离成离子，利用离子在电场中运动的性质，按离子质菏比（ｍ／ｚ）的大小顺序进行收集和记录，得到质谱图，与数据库中各种已知微生物的标准图谱进行比对，从而完成对微生物的鉴定。

而直至目前，临床实验室仍然非常依赖传统的微生物鉴定方法，耗时长、灵敏度低，远不能满足临床感染性疾病病原体快速诊断的需要。

在此基础上，１６ＳｒＲＮＡ测序、ＰＣＲ因其快速，精确的优势，对微生物的鉴定起到重要作用，但其操作复杂，价格昂贵〔２，３〕，仍不能满足一般临床微生物鉴定的需求。

ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ这种技术样品预处理简单，无需对样品预评估，样本的预处理仅需３步（挑选菌落、点样、加入基质），３ｍｉｎ内即可完成全部的预处理，所需耗材如乙醇、乙腈、甲酸等为常用试剂，成本低廉。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在临床病原菌鉴定中的应用

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在临
床病原菌鉴定中的应用
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）是一种高性能的质谱技术，近年来在临床病原菌鉴定领域得到了广泛的应用。

以下是基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在临床病原菌鉴定中的应用：
1、快速鉴定病原菌：MALDI-TOF MS可以快速、准确地鉴定临床样本中的病原菌，包括细菌、真菌和酵母等。

通过对临床样本进行适当的处理和提取，然后进行质谱分析，可以得到病原菌的指纹图谱，从而进行鉴定。

2、鉴定疑难菌：对于一些形态学鉴定困难的病原菌，MALDI-TOF MS具有较高的鉴定准确性。

例如，对于一些分枝杆菌的鉴定，传统方法往往需要复杂的生化试验，而MALDI-TOF MS可以直接进行鉴定，大大提高了工作效率。

3、鉴定抗生素敏感性：MALDI-TOF MS可以用于鉴定病原菌的抗生素敏感性。

通过对病原菌进行质谱分析，可以得到其抗生素指纹图谱，从而判断其对抗生素的敏感性，为临床治疗提供依据。

4、监测病原菌的变异：MALDI-TOF MS可以用于监测病原菌的变异。

通过对同一菌株在不同时间点的样本进行质谱分析，可以观察到菌株的变异情况，从而为临床治疗提供实时信息。

5、病原菌的定量分析：MALDI-TOF MS可以对病原菌进行定量分析，有助于临床医生了解感染的程度和治疗效果。

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术在临床微生物鉴定中的应用及发展

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术在临床微生物鉴定中的应用及发展江苏省宜兴市人民医院检验科 214200基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）是近年来发展起来的一种新型的软电离生物质谱，在国外实验室运用较多，对一些疾病如肿瘤、关节炎、阿尔茨海默病提供快速分析诊断，近年来，更把这项技术应用于微生物的鉴定，完全颠覆了传统微生物实验室从接种、孵育、分纯直至生化鉴定最后出结果的漫长过程，弥补了传统方法操作繁琐和检测周期长等缺陷。

目前，MALDI-TOF 质谱技术作为一种快速而准确的检测技术，也被国内越来越多的学者重视，应用于病原微生物的鉴定及耐药研究中。

本文就MALDI-TOF-MS在临床病原微生物鉴定中的应用做一综述。

1 MALDI-TOF-MS检测技术MALDI-TOF-MS主要由三个部分组成：基质辅助激光解析电离离子源（MALDI）、飞行时间质量分析器（TOF）及检测器。

MALDI的原理是用激光照射样品与基质形成的共结晶膜，基质从激光中吸收能量传递给生物分子，使生物分子电离，适用于混合物及生物大分子的测定。

TOF的原理是离子在电场作用下加速通过飞行管道，根据离子质荷比与离子飞行时间成正比，不同离子因到达飞行器的时间不同而被检测到，形成以离子峰为纵坐标，离子质荷比为横坐标的质量图谱，通过对比蛋白指纹库实现微生物种属的区分和鉴定[1]。

MALDI-TOF 质谱仪的这一原理使它能完成多种成分（包括脂类、糖类、蛋白质、DNA、多肽等能被离子化的分子）的分析[，具有高灵敏度、高通量的特点，能耐受一定量的杂质，对样品的纯度要求，可以分析细菌培养液等复杂的生物样品。

2 MALDI-TOF-MS在临床微生物鉴定中的应用2.1鉴定临床纯培养菌株MALDI-TOF-MS对于细菌的鉴定主要是两种，全菌分析法（ICM）和蛋白提取法（PEM）。

研究显示，MALDI-TOF-MS对很多临床常见菌都能准确鉴定，包括葡萄球菌、溶血链球菌、肠杆菌科细菌及非发酵革兰阴性杆菌等。

基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱仪

《基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱仪的应用与发展》一、引言基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱仪（MALDI-TOF MS）是一种高级的质谱分析技术，它已经广泛应用于生物医学、化学和环境科学领域。

本文将从技术原理、应用前景以及发展趋势等方面进行深入探讨，以期为读者提供全面的了解。

二、基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱仪原理MALDI-TOF MS技术是将分析物作为样品与基质混合，并通过激光脉冲进行标记，然后通过电离作用形成离子。

这些离子在电场作用下被加速并以不同的速度飞行，最终通过飞行时间差异进行质量分析。

其原理简单清晰，可以快速、高效地进行多种样品的分析，是一种十分有价值的质谱分析技术。

三、基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱仪的应用1. 生物医学应用MALDI-TOF MS在生物医学领域的应用十分广泛，例如生物分子的鉴定和定量分析、蛋白质组学和代谢组学等研究。

其快速、高灵敏度的特点，使得它在疾病诊断、药物研发以及生物标记物检测等方面有着不可替代的地位。

2. 化学应用在化学领域，MALDI-TOF MS被广泛应用于高分子聚合物、药物分析、环境污染物检测等方面。

其高分辨率和高灵敏度的优势，为化学研究提供了重要的数据支持。

3. 环境科学应用在环境科学领域，MALDI-TOF MS技术可以用于大气、水体和土壤等环境中微量有机物和无机物的检测和分析，为环境监测和治理提供了重要的技术手段。

四、基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱仪的发展趋势随着科学技术的不断发展，MALDI-TOF MS技术也在不断完善和创新。

未来，我们可以预见到以下几个发展趋势：1. 提高分辨率和灵敏度：随着技术的进步，MALDI-TOF MS分辨率和灵敏度将不断提高，为更加精准的分析提供可能。

2. 多样化样品分析：未来的MALDI-TOF MS技术将可以处理更多种类的样品，包括生物分子、有机物、无机物等，从而更全面地应用于各个领域。

基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法

基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述部分的内容：基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法（MALDI-TOF MS）是一种重要的分析技术，广泛应用于生物大分子的定性和定量分析。

该技术的核心原理是利用基质分子将待测样品转化为易于电离的形式，然后通过激光瞬间加热样品，使其产生脱附电离。

接着，离子将通过飞行时间质谱仪进行质量分析，最终得到样品中分子的质谱图谱。

基质辅助激光解吸电离方法具有许多优势。

首先，它可以高效地电离生物大分子，包括蛋白质、核酸和糖类等。

其次，该方法能够在非破坏性条件下进行样品分析，使得样品的原始化学特性能够得到保留。

此外，MALDI-TOF MS还具备高灵敏度、高分辨率和高通量等特点，使其成为生命科学研究和临床诊断领域的重要工具。

然而，基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法也存在一定的局限性。

首先，基质的选择对分析结果有重要影响，不同的基质适用于不同类型的待测分子。

其次，样品含有的杂质可能干扰质谱图谱的分析，因此需要进行样品前处理。

此外，对于高分子量的生物大分子，其离子化效率相对较低，因此需要使用较高能量的激光。

本文将着重介绍基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法的原理、应用领域、优势和局限性，以及实验方法和步骤。

通过对该技术的深入了解，可以更好地理解和应用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法在生命科学和医学领域的潜力，为该领域的进一步研究和应用提供参考依据。

1.2文章结构文章结构部分的内容可以按照如下方式编写：文章结构:本文将按照以下结构来展开对基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法的研究和应用进行探讨：首先，在引言部分概述了基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法的背景和研究意义，以及文章将要讲述的内容。

接着，正文部分将从两个方面对基质辅助激光解吸电离进行探讨，即原理和应用领域。

在原理部分，将介绍基质辅助激光解吸电离的工作原理和相关理论基础；而在应用领域部分，将探讨基质辅助激光解吸电离在不同领域中的具体应用情况和研究进展。

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪在侵袭性真菌感染病原真菌鉴

点，但本次研究的准确率不如传统生化鉴定，也比之前国内外报道的准确率低，可能跟标本的前处理难以统
一
规范以及蛋白提取程序不一致有关。相信随着ＭＡＬＤＩ．ＴＯＦＭＳ技术的统一规范和图谱数据库不断的完
关键词基质辅助激光解析电离；质谱；真菌；快速鉴定
液（ＬｖｓｉｓＢｕｆｆｅｒｆｏｒＭｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｔｏＤｉｒｅｃｔＰＣＲ）、
本研究选取某医院临床分离的３５株无菌体液分离的真菌菌株，采用ＭＡＬＤＩ — ＴＯＦＭＳ技术进行鉴定，同时进行Ｖｉｔｅｋ２全自动微生物鉴定系统鉴定．将两种方法的鉴定结果进行比对，两者鉴定结果不符合的采用核糖体ＲＮＡ内转录间隔区２（ＩＴＳ２）序列分析最后确证结果，从而评价质谱法的准确性、实用性。
ｄｏｉ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１００６ — ５７２５．２０１５．１７．０４４
ＴａｑＤＮＡ聚合酶、ｄＮＴＰｓ、蛋白酶Ｋ均为ＴａＫａＲａ公司产品。１．４质控菌株质控菌株ＡＴＣＣ８７３９来源于美国菌种保藏中心。
ＴＯＦＭＳ正确鉴定出其中的３０例（８５．７％），错误５例（１４．３％）；Ｖｉｔｅｋ２全自动微生物鉴定系统正确鉴定出３５例（１００．０％）。结论：ＭＡＬＤＩ．ＴＯＦＭＳ相对于传统的生化鉴定具有操作简便、快速、成本低、重复性好的优

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法对中药材霉菌污染的快速鉴定

Abstract: A mUWx-assistP laser desounoo/ionization time of Oight mass spectumetWc ( MALDI 一 TOF MS) method with N-alkylpyridinium isotope quateuization( NAPIQ) was deveWpeX for the rapib iUextiXcaPoo of microbial contamination in UerUs in this paper. The sterols in UerUs were extracted with chboofou, and then de/vatized with three reagents, 0 c. pyridine,。5烷)0；— and tWXuoumethanesuWonic annyyriUe. The deUvatization could significantly epdance the iooizadoo of sterols in the analysis by MALDI 一 TOF MS. Only phytosterols such as sitosterols and stigmasteuls in the 0x2 trabitional Chioese medicioe were detected by this method, white the zoosteuls and the mycosterol such as (anosteul and eryosteul were obseueX in the mass spectra of moldy herUs. Furtheunora, the method was compared with the micubiat enomeration method in Chinese Phaunacopoeia (2219 edidoo) . No molds in the fresh herUs were detected by the micubiat exomeraPob method, white the micubiat counts in the moldy herUs significantly exceeded the threshold of 192 cOi/g. Results showed that the MALDI 一 TOF MS combined with NAPIQ puviUeX an alternative method for the ipptificUioo of potptim moldy herUs. Keywords： herUs ； micubiat contamination ； phytosterols ； zoosteuls ； NAPIQ ； matWc-assisteX la ser desounoo/iodizaPoo time of Oight mass spectumetu( MALDI - TOF MS)

基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱

基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）是一种生物分子分析技术。

它通过激光辅助基质过程，将生物大分子（如蛋白质、多肽、核酸等）与基质溶液混合后，使其在基质表面结晶，并把样品分子固定在基质晶面上。

然后用激光照射样品，使其产生电离，带电的分子离子被加速进入飞行管道，在高压电场中飞行，根据分子离子的分子量和电荷量比值来确定分子的质量。

这种技术由于具有高灵敏度、高分辨率、快速分析速度、不需要预处理等优点，被广泛应用于蛋白质组学、代谢组学、化合物分析、病毒检测等领域。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 技术的主要特点是，先通过PCR扩增目标序列，然后加入snp序列特异延伸引物，在SNP 位点上，延伸1个碱基。

将制备的样品分析物与芯片基质共结晶，将该晶体放入质谱仪的真空管, 而后用瞬时纳秒(10-9s) 强激光激发，由于基质分子经辐射所吸收的能量，导致能量蓄积并迅速产热，从而使基质晶体升华，核酸分子就会解吸附并转变为亚稳态离子，产生的离子多为单电荷离子，这些单电荷离子在加速电场中获得相同的动能，进而在一非电场漂移区内按照其质荷比率加以分离，在真空小管中飞行到达检测器。

MALDI产生的离子常用飞行时间（Time-of-Flight,TOF）检测器来检测，离子质量越小，就越快到达。

理论上讲，只要飞行管的长度足够，TOF检测器可检测分子的质量数是没有上限的。

MassARRAY SNP 检测的质谱范围为5000 to 8500 Da。

主要用途： 1.对生物大分子物质分子量的测定； 2.对蛋白质进行高通量的鉴定； 3.对有机小分子化合物分子量的测定； 4.对寡核苷酸的分析； 5.对基因的单核苷酸多态性的分析仪器类别：0303071402 /仪器仪表/成份分析仪器/质谱仪指标信息： 1.质量数测定范围最高可达40万Da以上； 2.检测灵敏度范围：10-15～10-18摩尔； 3.质量准确度可达5ppm； 4.分辨率右达2万。

附件信息：配有源后衰变装置，可对多肽、蛋白质的序列进行分析机组简介：基质辅助激光角吸附电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS Reflex Ⅲ）：具有操作简单、快速、谱图直观、能耐受一定浓度的盐和去垢剂等特点，特别适合于混合多肽、蛋白、寡核苷酸的精确质量数测定，其测定质量数范围最高可达40万Da以上，灵敏度可达10-15～10-18摩尔，质量准确度5ppm。

配有源后衰变（post-sourc e decay, PSD)装置，计算机自动联机检索系统。

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱MALDI-TOF-MS

基质辅助激光解析电离飞⾏时间质谱MALDI-TOF-MS MALDI-TOF-MS（基质辅助激光解析电离飞⾏时间质谱）是近年来发展起来的⼀种新型的简单⾼效软电离⽣物质谱仪。

质谱分析法主要是通过对样品的离⼦的质荷⽐的分析⽽实现对样品进⾏定性和定量的⼀种⽅法。

因此，质谱仪都必须有电离装置把样品电离为离⼦，有质量分析装置把不同质荷⽐的离⼦分开,经检测器检测之后可以得到样品的质谱图，由于有机样品,⽆机样品和同位素样品等具有不同形态、性质和不同的分析要求,所以，所⽤的电离装置、质量分析装置和检测装置有所不同。

但是，不管是哪种类型的质谱仪，其基本组成是相同的。

都包括离⼦源、质量分析器、检测器和真空系统。

以某种⽅式使⼀个有机分⼦电离、裂解，然后按质荷⽐（m/z）⼤⼩把⽣成的各种离⼦分离，检测它们的强度，并将离⼦按其质荷⽐⼤⼩排列成谱，这种分析研究的⽅法叫做质谱图，质谱的最⼤⽤途之⼀是可以测定未知物的分⼦量（质谱能通过检测分⼦离⼦的质荷⽐获得分⼦量），并可以确定化合物的分⼦式（可通过碎⽚离⼦的质荷⽐的强度推测有机物的结构。

这相当于⼀个精巧的花瓶被打碎了，如果我们仔细地收集和归属这些碎⽚，然后将碎⽚拼构起来，就可以使花瓶复原。

花瓶好⽐有机物的分⼦，打碎花瓶犹如使分⼦电离、裂解。

收集和归属碎⽚就像是按质荷⽐分离、记录离⼦。

⽽将碎⽚重拼花瓶的过程，相当于通过解析谱图得到有机物结构的过程。

由于各种有机物都有其特定的、可以重复的质谱图，⽽且⼈们对质谱裂解过程的研究中已经发现了⼀些普遍适⽤的裂解规律，这为质谱⽤于有机物结构分析提供了可靠的基础）。

飞⾏时间质谱仪Time of Flight Mass Spectrometer (TOF) 是⼀种很常⽤的质谱仪。

这种质谱仪的质量分析器是⼀个离⼦漂移管。

由离⼦源产⽣的离⼦加速后进⼊⽆场漂移管，并以恒定速度飞向离⼦接收器。

离⼦质量越⼤，到达接收器所⽤时间越长，离⼦质量越⼩，到达接收器所⽤时间越短，根据这⼀原理，可以把不同质量的离⼦按m/z值⼤⼩进⾏分离。

基质辅助激光解析离子-飞行时间质谱仪在快速鉴定常见革兰阴性杆菌中的应用

基质辅助激光解析离子-飞行时间质谱仪在快速鉴定常见革兰阴性杆菌中的应用摘要：目的了解基质辅助激光解析离子－飞行时间质谱仪（MALDI-TOF-MS, MS）在临床分离革兰阴性杆菌鉴定中的应用，为临床医师正确诊断提供科学依据。

方法回顾性分析2015年4月－2015年10月临床标本经MS鉴定为革兰阴性杆菌，将所得菌质谱峰图与数据库中峰图进行比较，分析得出鉴定结果。

结果 MS共鉴定出革兰阴性杆菌834株，肠杆菌科622株共6种，占74.58%，主要为大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌，分别占肠杆菌科的39.40%及50.16%；非发酵菌属212株共4种，占25.42%，主要为鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌，其在非发酵菌属中的构成比分别为49.53%及39.15%，使用MS后能鉴定出临床常见革兰阴性杆菌。

结论MS能快速鉴定出常见革兰阴性杆菌，为临床治疗及鉴别感染病原菌提供了快速的筛选方法。

关键词：常见革兰阴性杆菌；基质辅助激光解析离子-飞行时间质谱仪；快速鉴定Performance of matrix - assisted laser desorption/ionozation-time of flight mass spectrometry in rapid identification of gram negative bacilliAbstract:Objective To investigate the performance of matrix - assisted laser desorption/ionozation-time of flight mass spectrometry in rapid identification of gram negative bacilli so as to provide scientific basis for correct clinical diagnosis. Methods The gram negative bacilli that were identified from clinical specimens by the MALDI-TOF mass spectrometry were retrospectively analyzed. The mass spectrometer was placed for the identification after it was dried; the acquired bacterial mass spectral peak figure was compared with the peak figure in the databases, and the results of the identification were analyzed. Results A total of 834 strains of gram-negative bacillihave been identified with the use of MALDI -TOF mass spectrometry , including 622 (74.58%)strains of Enterobacteriaceae, with 6 species involved; the Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae were the main parts of Enterobacteriaceae, accounting for39.40%, 50.16%, respectively; there were 212(25.42%) strains of nonfermentative bacteria (4 species), among which the Baumanii and Pseudomonas aeruginosa werethe predominant species, accounting for 49.53%, 39.15%, respectively. Conclusion The MALDI-TOF mass spectrometry can identify a variety of species of gram -negative bacilli, and it may facilitate the clinical treatment an the rapid screening of the pathogens causing infections.Key words: common gram negative bacilli; matrix - assisted laserdesorption/ionozation-time of flight mass spectrometry; Rapid identification 革兰阴性杆菌是是临床最常见的病原菌[1]。

基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统的血流感染致病菌早期检测

基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统的血流感染致病菌早期检测张可昕;胡翀;陈琛;何赏;杨明;王成彬【期刊名称】《解放军医学杂志》【年(卷),期】2018(043)001【摘要】目的基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统(MALDI-TOF MS)建立早期血流感染致病菌检测体系.方法选取大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯杆菌、屎肠球菌、粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、变形杆菌、肺炎链球菌等10种临床最常见的病原菌作为检测对象,结合多重PCR 技术和Mass ARRAY iPLEX单碱基延伸技术、MALDI-TOF MS技术,模拟细菌感染血液样本建立MALDI-TOF MS细菌核酸检测体系,测定其灵敏度;选取2017年3-5月在解放军总医院急诊科收集的疑似脓毒症患者血液样本33例对该体系进行验证,并将检测结果与微生物科血培养结果进行比较.结果本研究所建立的MALDI-TOF质谱血液致病菌检测系统可同时检测分属两组的10种细菌,所有细菌样本均可见延伸峰;灵敏度为100CFU/ml;与33例临床血培养鉴定结果的阴性符合率为100％(27/27),6例血培养阳性样品中有2例为摩氏摩根菌和人葡萄球菌感染,因这两种细菌不包含在10种检测对象之内而未能通过质谱检出,其余4例血培养阳性样品与质谱检测结果的符合率为100％.结论本研究建立的MALDI-TOF质谱检测体系可从全血样本中直接检测10种临床常见血流感染致病菌,无需进行培养,与传统血培养及生化鉴定相比具有耗时短、灵敏度高、准确度高等优势,可在一定程度上满足临床早期、快速诊断血流感染致病菌的需求.%Objective To establish a clinical method for early detection of the bloodstream infection bacteriabased on matrix-assisted laser ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS).Methods After consulting the Laboratory Information System statistics and domestic related literature,We chose 10 kinds of bacteria (Escherichia coli.,Pseudomonas aeruginosa,Acinetobacter baumannii,Klebsiella pneumoniae,Enterococcus faecium,Enterococcus faecalis,Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis,Proteus mirabilis,Streptococcus pneumoniae) as target.The MALDI-TOF MS was established using simulated bacterial infection blood samples.From March to May 2017,33 blood samples of suspected sepsis patients from Emergency Department,General Hospital of PLA,were tested.Results The MALDI-TOF MS whose detecting sensitivity was 100CFU/ml had the same negative detection rate with the blood culture(27cases/27cases,100％).Besides the 2 samples of Morganella morganii infection and Staphylococcus hominis infection were out of the range,the results of the remaining 4 positive samples were consistent (100％).Conclusion Compared to the blood culture and biochemical identification,MALDI-TOF MS can rapidly detect 10 kinds of bloodstream infection bacteria with high sensitivity and high accuracy.【总页数】6页(P17-22)【作者】张可昕;胡翀;陈琛;何赏;杨明;王成彬【作者单位】325000浙江温州温州医科大学检验医学院/生命科学学院;100853北京解放军总医院临床检验科;100853北京解放军总医院临床检验科;100853北京解放军总医院临床检验科;100853北京解放军总医院临床检验科;325000浙江温州温州医科大学检验医学院/生命科学学院;100853北京解放军总医院临床检验科;325000浙江温州温州医科大学检验医学院/生命科学学院;100853北京解放军总医院临床检验科【正文语种】中文【中图分类】R03;R373.13【相关文献】1.基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对10株军团菌的检测分析 [J], 李曲文; 郑恩惠; 徐海滨; 黄梦颖; 翁顺太2.基于相关性分析的电力系统数据驱动异常早期检测 [J], 钱忠敏; 贺兴; 葛晓军; 毛亚明; 石鑫3.基于Chen系统的滚动轴承早期微弱故障检测方法研究 [J], 唐贵基;闫晓丽;王晓龙4.基于零序电压小波变换的小电流接地系统电缆早期故障检测 [J], 胡婧;周洋5.基于无人机和红外热成像技术的小型水库坝体早期非稳定渗漏检测系统 [J], 王玉磊;汤雷;钱思蓉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

MALDI-TOF MS检测在粪肠球菌中的应用效果分析

MALDI-TOF MS检测在粪肠球菌中的应用效果分析刘云;周正;吴殿水【期刊名称】《医药前沿》【年(卷),期】2022(12)29【摘要】目的:使用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)鉴别耐利奈唑胺粪肠球菌(LRE)和利奈唑胺敏感粪肠球菌(LSE),探讨MALDI-TOF MS检测在粪肠球菌中的应用效果,并对LRE进行流行病学相关性分析。

方法:选取2020年1月—2022年3月临床分离出的78株粪肠球菌菌株,其中LRE 38株、LSE 40株。

采用MIC药敏方法确定利奈唑胺耐药情况,使用MALDI-TOF MS对菌株进行鉴定并采集图谱,使用ClinPro Tools软件对质谱峰进行分析,选取其中的18株LRE 和20株LSE进行模型的建立,并用剩余20株LRE和20株LSE进行模型的验证。

结果:使用MALDI-TOF MS遗传算法建立的最佳模型进行验证,敏感性为85.00%,特异性为90.00%,阳性预测值为89.47%,阴性预测值为85.71%。

LRE的38菌株中携带optrA基因的菌株30株,占78.94%(30/38),cfr基因阳性的6株,占15.78%(6/38),出现L4突变的有4株,出现L3突变的有1株。

使用脉冲场凝胶电泳技术(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)对38株LRE进行分析,可得Ⅰa 型有7株,Ⅰb型有5株,Ⅱa为25株,Ⅱb为1株,并对38株LRE菌株使用MALDI-TOF MS进行同源性分析,结果与PFGE结果一致。

结论:LRE主要耐药机制是optrA基因所致,MALDI-TOF MS能够快速、准确的鉴定出耐利奈唑胺的粪肠球菌,有利于指导临床合理用药以及调查社区和院内感染传播的危险因素和传播途径,为院感防控提供依据。

【总页数】5页(P14-18)【作者】刘云;周正;吴殿水【作者单位】山东省第二人民医院临床微生物科;山东省公共卫生临床中心汉光微生物实验室【正文语种】中文【中图分类】R574【相关文献】1.纳米银在牙科根管应用中对粪肠球菌抑制效果评价2.自繁自养猪场中不同来源粪肠球菌与屎肠球菌的耐药性调查分析3.尾翼稳定弹近弹故障分析4.Optochin试验和胆汁溶解试验及MALDI-TOF MS在肺炎链球菌鉴定中的应用价值因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。