呼吸道九联检sop
呼吸道九联检技术手册
一、呼吸道感染概述
呼吸道感染是指病原体感染人体的鼻腔、咽喉、气管和支气管等呼吸系统。分为上呼吸道感染和下呼吸道感染,上呼吸道感染常见的是急性上呼吸道感染(acute upper respir tract infection),指鼻腔、咽或喉部急性炎症的概称,是呼吸道最常见的一种传染病。常见病因为病毒,少数由细菌引起。患者不分年龄、性别、职业和地区。不仅具有较强的传染性,而且可引起严重并发症。下呼吸道感染是最常见的感染性疾患,包括急性气管——支气管炎、慢性支气管炎、肺炎、支气管扩张等,由病毒、细菌、支原体、衣原体、军团菌等微生物引起,其防治应遵循预防为主、准确诊断、及时治疗的原则,治疗时必须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素。
二、非典型呼吸道病原体
已报道的非典型呼吸道病原体有很多,最常见的有嗜肺军团菌、肺炎支原体、肺炎衣原体、Q热立克次体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒等。
嗜肺军团菌
嗜肺军团菌(Legionella pneumophila,LP)是一种兼性细胞内致病菌,有鞭毛,革兰氏阴性,军团菌科军团菌属多形态性的短小球杆菌。其不抗酸,无孢子,无荚膜,类似于杆菌。不能分解明胶、糖类或是尿素,同时,不可参加酵解反应。嗜肺军团菌无色,也非自身荧光,氧化酶与过氧化氢酶测试阳性,β-内酰胺酶阳性。专性需氧,在自然界可长期存活,如在蒸馏水中可存活100d以上,污水中可存活一年,对热和一般消毒剂敏感。菌落特征为灰白色,有光泽,湿润,圆形,凸起,并有特殊臭味,革兰氏染色不明显,多用镀银法或Giemsa法染色。广泛分布于天然淡水环境或人工水域中,在阿米巴体内寄生,亦可感染人巨噬细胞,在其胞内繁殖和杀死人巨噬细胞,是引起军团菌病(军团菌肺炎)的重要病原体。军团菌病在国内外时有爆发流行,中央空调冷凝塔水系统是引起军团菌病的主要传染源,病死率较高。目前已知军团菌有48个种70多个血清型,其中嗜肺军团菌有15个血清型,血清型-1是引起社区获得性肺炎和院内感染性肺炎的重要病原体。通常军团病的爆发时间是在仲夏和初秋,易发生在封闭式中央空调房间里。军团菌的易感人群通常为老年人、吸烟者和有慢性肺部疾患者;同时,免疫功能低下,如癌症病人、肾透析病人和艾滋病人也特别易感。它的症状类似于肺炎,表现为发冷、不适、肌痛、头晕、头痛,并有烦躁、呼吸困难、
呼吸道九联检操作规程-SOP
广州市医院检验科
免疫室(SOP)文件
撰写人:
审核人:
批准人:
批准日期:2011年8月8日启用日期:2011年8月8日
二零一一年八月八日制
文件编号: HDHY-MYJY-P001-2011
版序:第 2 版第 1 次修订
生效日期: 2011年8月8日
责任科室: 免疫室页码: 第1页共 1页
批准页
根据《临床检验操作规程》(2006年,第三版),九项呼吸道病原体IgM抗体检测试剂盒使用说明书;免疫检验有关试剂盒、质控品的使用操作说明书;《消毒技术规范》以及医院内部有关管理制度、生物安全制度的规定和要求,临床免疫检验操作规程文件NO.2版经实际运行,现予以批准通过,于 2011年 8月8日起生效并开始实施。免疫室和检验科有关工作人员必须认真学习,严格遵照执行。(NO.2版依据检验技术和我科工作发展及管理工作的需求进行的补充完善和改进另行通知)。任何个人不得更改,实际工作中如发现不妥之处,请按程序以文字形式向审核人汇报;在未经批准人同意/批准新文件之前,仍执行此文。
2011年8月8日
编写人修改内容及修改人批准人生效日期
文件编号: HDHY-MYJY-P003-2011
版序:第 2 版第 1 次修订
生效日期: 2011年8月8日
责任科室: 免疫室页码: 第1页共 2页
呼吸道九联检操作规程
1.项目中英文名称:九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测试剂盒(间接免疫荧光法)
2.实验原理与方法:
2.1 原理:间接免疫荧光法(IFA)是基于待测样本中的抗体与吸附在载玻片上的抗原发生的反应。样本中存在的特异性抗体和抗原反应,未与抗原结合的免疫球蛋白在洗涤步骤中除去。在下一步骤中,抗原-抗体复合物与荧光素标记的抗人球蛋白反应。用免疫荧光显微镜观察结果。
呼吸道九联检SOP
呼吸道九联检操作程序
一、呼吸道感染概述
呼吸道感染是指病原体感染人体的鼻腔、咽喉、气管和支气管等呼吸系统。分为上呼吸道感染和下呼吸道感染,上呼吸道感染常见的是急性上呼吸道感染(acute upper respir tract infection),指鼻腔、咽或喉部急性炎症的概称,是呼吸道最常见的一种传染病。常见病因为病毒,少数由细菌引起。患者不分年龄、性别、职业和地区。不仅具有较强的传染性,而且可引起严重并发症。下呼吸道感染是最常见的感染性疾患,包括急性气管——支气管炎、慢性支气管炎、肺炎、支气管扩张等,由病毒、细菌、支原体、衣原体、军团菌等微生物引起,其防治应遵循预防为主、准确诊断、及时治疗的原则,治疗时必须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素。
二、免疫荧光法介绍
免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescent antibody technique)。
用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已
知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。这两种方法总称免疫荧光技术,因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合,用于检测或定位各种抗原,也可以与其他蛋白质结合,用于检测或定位抗体,但是在实际工作中荧光抗原技术很少应用,所以人们习惯称为荧光抗体技术,或称为免疫荧光技术。用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞(或组织)化学技术。
呼吸道病原体IgM九联检
呼吸道病原体 IgM 九联检
1、名称: 呼吸道感染病原体
IgM 九联检
2、项目简介、临床意义及收费标准:
检测项目
临床意义
适用
收
人群 费
肺炎衣原体 引起非典型性肺炎,其诊断主要依靠实验室诊断。
肺炎支原体 引起支气管炎、毛细支气管炎及间质性肺炎的重要病原体
呼 呼吸道合胞病毒 下呼吸道感染最重要的病因之 一。
呼
吸 吸 道
副流感病毒Ⅰ、Ⅱ、 下呼吸道感染的一种病毒,其致病性仅次于呼吸道合胞病毒。
Ⅲ型
道
感
感
染
染
嗜肺军团菌
社区获得性肺炎和院内感染性肺炎的重要病原体
病 病
原
原 腺病毒 居病毒性肺炎的第二位 体 体
筛
甲型流感病毒
病毒呈季节性流周期性行爆发,每年都会发生。 Ig
查
M
乙型流感病毒
引起乙型流行性感冒,每 3-6 年爆发一次。
九
联
Q 热立克次体 严重病例常发生大叶实变,慢性会并发肝炎和心内膜炎等。
检
3 、标本采取:
试管种类:分离胶 -促凝管(黄帽) ,静脉血 3ml 。
采取时间:每天 9 点之前送三层检验科微生物室。
特殊要求:无
所有 40
呼 吸 0
道 感 元
染 症
状 的
人群
4、检测时间、报告时间:
报告回送:现每周一、三、五出报告。以后根据临床需求,出报告日期会有所调整。
5、注意事项:标本避免溶血、乳糜血、黄疸血等特殊标本。
6 、联系科室、电话:检验科微生物室(TeL : 84205491) 。
呼吸道九联检SOP
呼吸道九联检操作程序
一、呼吸道感染概述
呼吸道感染是指病原体感染人体的鼻腔、咽喉、气管和支气管等呼吸系统。分为上呼吸道感染和下呼吸道感染,上呼吸道感染常见的是急性上呼吸道感染(acute upper respir tract infection),指鼻腔、咽或喉部急性炎症的概称,是呼吸道最常见的一种传染病。常见病因为病毒,少数由细菌引起。患者不分年龄、性别、职业和地区。不仅具有较强的传染性,而且可引起严重并发症。下呼吸道感染是最常见的感染性疾患,包括急性气管——支气管炎、慢性支气管炎、肺炎、支气管扩张等,由病毒、细菌、支原体、衣原体、军团菌等微生物引起,其防治应遵循预防为主、准确诊断、及时治疗的原则,治疗时必须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素。
二、免疫荧光法介绍
免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescent antibody technique)。
用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已
知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。这两种方法总称免疫荧光技术,因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合,用于检测或定位各种抗原,也可以与其他蛋白质结合,用于检测或定位抗体,但是在实际工作中荧光抗原技术很少应用,所以人们习惯称为荧光抗体技术,或称为免疫荧光技术。用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞(或组织)化学技术。
呼吸道九联检
关于开展呼吸道病原体九联检的通知
为满足临床要求,给临床和病患提供更好的检验服务,检验科开展了呼吸道九项病原体的检测,在免疫项目中开呼吸道九联检(收费375元)即可,医保项目,抽血当日即可出报告。抽血:血清2-3ml(红盖试管)。
呼吸道九项病原体的临床意义
采用西班牙VIRCELL公司生产的间接免疫荧光法检测试剂,同时检测人血清中呼吸道感染主要病原体的IgM抗体,可检测的病原体包含:1、嗜肺军团菌 2、肺炎支原体 3、Q热立克次体 4、肺炎衣原体 5、腺病毒 6、呼吸道合包病毒 7、甲型流感病毒 8、乙型流感病毒 9、副流感病毒1、2、3型。
1、嗜肺军团菌
人最易感染的是嗜肺军团菌血清I型,非典型性肺炎常伴随有全身症状,10%的肺炎是由嗜肺军团菌血清I型引起的。在血清学诊断中,间接免疫荧光法是唯一的标准技术。临床上军团菌感染主要有两种表现形:肺炎型和庞蒂亚克热型。前驱症状:乏力、头痛、全身肌肉酸痛,于1~2日内突然发热,可达40℃以上,多呈稽留热。病程早期即可出现多系统受累症状,为本病的突出特点。绝大多数患者有咳嗽,起初为干咳,半数患者转成非脓性粘稠痰或略带脓性痰,痰中常含少量血丝,个别可咯血。少数患者有胸痛,呼吸困难较为多见。肺部可闻及细湿罗音。继之可出现明显肺实变体征。约25%有恶心、呕吐及腹泻等消化道症状,有的腹泻为唯一首发症状。神经症状多见于极期,有时非常突出,包括不同程度意识障碍、肌张力增强或阵颤、步态不稳等,可有暂时性肢体软瘫; 个别可有腹泻、清水样便。或者失眠、眩晕、记忆力减退、意识朦胧、项强、震颤等神经系统表现.
呼吸道九联检SOP
呼吸道九联检操作程序
一、呼吸道感染概述
呼吸道感染是指病原体感染人体的鼻腔、咽喉、气管和支气管等呼吸系统。分为上呼吸道感染和下呼吸道感染,上呼吸道感染常见的是急性上呼吸道感染(acute upper respir tract infection),指鼻腔、咽或喉部急性炎症的概称,是呼吸道最常见的一种传染病。常见病因为病毒,少数由细菌引起。患者不分年龄、性别、职业和地区。不仅具有较强的传染性,而且可引起严重并发症。下呼吸道感染是最常见的感染性疾患,包括急性气管——支气管炎、慢性支气管炎、肺炎、支气管扩张等,由病毒、细菌、支原体、衣原体、军团菌等微生物引起,其防治应遵循预防为主、准确诊断、及时治疗的原则,治疗时必须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素。
二、免疫荧光法介绍
免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescent antibody technique)。
用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已
知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。这两种方法总称免疫荧光技术,因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合,用于检测或定位各种抗原,也可以与其他蛋白质结合,用于检测或定位抗体,但是在实际工作中荧光抗原技术很少应用,所以人们习惯称为荧光抗体技术,或称为免疫荧光技术。用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞(或组织)化学技术。
呼吸道联检操作规程--SOP资料教程文件
________________医院检验科_____室(SOP)文件
撰写人:
审核人:
批准人:
批准日期:2007年7月31日启用日期:2007年8月 1 日
二零零七年七月一日制
4.标本的要求:
需由专业人员无菌静脉穿刺采集血液。使用消毒或无菌技术能保持样本的完整性。血清样本采集后如不在8小时内检测应2~8 ºC冷藏,如7天内不检测,则应冷冻(-20ºC)保存。不要反复冻融以防止免疫球蛋白滴度降低,特别是IgM。不要使用高血脂或污染的血清。若样本中含有微粒要离心使之澄清。
4.仪器:荧光显微镜
5.试剂厂家及名称:西班牙VIRCELL公司
6.操作步骤:
1. 使用前,将所有试剂平衡至室温。载玻片平衡至室温后再打开。
2. 样本的稀释:按1:1比例稀释血清样本,即25µL血清加入25µL PBS2中。阴阳性对照34不需要稀释。
3. 用抗人IgG吸附剂7处理稀释后的血清:将30µL稀释后的血清加入150µL吸附剂中,彻底混匀。阴阳性对照3和4不需吸附剂处理。处理后的血清要离心10-15分钟除去沉淀,以防干扰检测。
4. 在载玻片1的每孔中加15µL吸附剂处理过的血清(一份样本对应一个载玻片)。在一个载玻片的每孔中加入15µL不稀释的阳性对照3,在另一个载玻片的每孔中加入15µL不稀释的阴性对照4。
5. 将载玻片放入湿盒中,37℃温育90分钟。
6. 用PBS 2的缓慢水流冲洗载玻片1(避免直接冲入孔内)后,浸泡在PBS中并放置在水平摇床上轻轻摇动10分钟。再用蒸馏水缓慢水流冲洗(避免直接冲入孔内)。
7. 载玻片1自然晾干。
呼吸道九联检(简单)
contents
目录
• 呼吸道九联检简介 • 呼吸道九联检的临床应用 • 呼吸道九联检的优势与局限性 • 呼吸道九联检的注意事项 • 呼吸道九联检的发展前景
01 呼吸道九联检简介
定义与目的
定义
呼吸道九联检是一种针对呼吸系统疾 病的检测方法,通过对九种常见呼吸 道病原体的检测,帮助医生快速诊断 病因,为治疗提供依据。
呼吸道九联检的仪器和试剂成本较高,增 加了医疗费用,不利于在基层医疗机构推 广。
呼吸道九联检的操作较为复杂,需要专业 的技术人员进行操作和维护,限制了其在 基层医疗机构的应用。
假阳性与假阴性
对新技术接受度不一
呼吸道九联检可能出现假阳性或假阴性的 情况,影响诊断的准确性,需要结合临床 症状和其他检查结果进行综合判断。
快速检测
呼吸道九联检采用先进的分子 生物学技术,能够在短时间内 完成检测,缩短了患者的等待 时间。
减少漏检率
由于同时检测多种病原体,避 免了单一检测可能出现的漏检 情况,提高了诊断的准确性。
指导临床治疗
通过呼吸道九联检,医生可以 快速了解患者的感染情况,为
制定治疗方案提供依据。
局限性
成本较高
操作复杂
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
监测病情变化
通过定期进行呼吸道九联检,可以监 测病情的变化情况,评估治疗效果。
呼吸道九联检sop
呼吸道九联检操作程序
一、呼吸道感染概述
呼吸道感染是指病原体感染人体的鼻腔、咽喉、气管和支气管等呼吸系统。分为上呼吸道感染和下呼吸道感染,上呼吸道感染常见的是急性上呼吸道感染〔acute upper respir tract infection〕,指鼻腔、咽或喉部急性炎症的概称,是呼吸道最常见的一种传染病。常见病因为病毒,少数由细菌引起。患者不分年龄、性别、职业和地区。不仅具有较强的传染性,而且可引起严重并发症。下呼吸道感染是最常见的感染性疾患,包括急性气管——支气管炎、慢性支气管炎、肺炎、支气管扩张等,由病毒、细菌、支原体、衣原体、军团菌等微生物引起,其防治应遵循预防为主、准确诊断、及时治疗的原则,治疗时必须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素。
二、免疫荧光法介绍
免疫荧光技术〔Immunofluorescence technique 〕又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术〔fluorescent antibody technique〕。用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已
知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。这两种方法总称免疫荧光技术,因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合,用于检测或定位各种抗原,也可以与其他蛋白质结合,用于检测或定位抗体,但是在实际工作中荧光抗原技术很少应用,所以人们习惯称为荧光抗体技术,或称为免疫荧光技术。用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞〔或组织〕化学技术。
呼吸道九联检 (1)
3,实验片子最好在48小时内观察,若需保存,需避光 放置在2-8摄氏度下不超过7天.
4,结果判定,对结果荧光细胞数占3%以上时,报阳 性,其余阴性。
临床应用
一:儿童 儿童呼吸道感染的入院筛查项目
二:呼吸科入院筛查项目 呼吸道感染的入院筛查项目
三:易发生呼吸道感染的病人人群
文献报道: 恶性肿瘤继发下呼吸道感染 肺癌合并肺部感染,发病率60%左右, 肺部感染是妇科肿瘤术后常见并发症 恶性淋巴瘤临床表现有呼吸道感染 呼吸道感染导致肾功能衰竭 呼吸道感染诱发加重肾功能不全 病毒感染时肾病综合征常见并发症
呼吸道合胞病毒
➢ RNA病毒 ➢约有2/3的婴儿在出生第一年会感染;2.5%的感染者住院 (每年美国有超过9万的儿童),0.1%的感染者会致命 ➢占病毒性肺炎的 25%-35% ;居儿童病毒性感染第一位 ➢在冬季爆发流行 ➢潜伏期3-7天,IgM抗体在发病1周出现,持续2~3个月
流感病毒
➢球形RNA病毒 ➢根据其核蛋白的抗原性可以分为三类:
内科病人以及外科病人术后易发呼吸道感染或免疫力低下易受到感染的患者皆可
呼吸道病原体感染概况——郑州大学基础医学院
——《呼吸道联检试剂在儿童不典型呼吸道感染中的应用研究》
呼吸道病原体感染概况—云南省第一人民医院
呼吸道九联检——套餐式组合更高效、特异、全面!
呼吸道九联检——套餐式组合更高效、特异、全面!
今年随着我们检验科新的检验项目的陆续开展,在我们检验科同事们的共同努力下,呼吸道九联检终于开始在我院开展了。套餐式组合让临床呼吸道感染的检测更加高效、特异、全面。
一、呼九简介
1、呼吸道感染是指病原体感染人体的鼻腔、咽喉、气管和支气管等呼吸系统。分为上呼吸道感染和下呼吸道感染,上呼吸道感染常见的是急性上呼吸道感染,是呼吸道最常见的一种传染病。常见病因为病毒,少数由细菌引起。下呼吸道感染是最常见的感染性疾患,包括急性气管——支气管炎、慢性支气管炎、肺炎、支气管扩张等,由病毒、细菌、支原体、衣原体、军团菌等微生物引起,其防治应遵循预防为主、准确诊断、及时治疗的原则,治疗时必须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素。
2、呼吸道九联检也叫九项呼吸道病原体IgM抗体联合检测:(嗜肺军团菌血清1型IgM抗体+肺炎支原体IgM抗体+Q热立克次体IgM抗体+肺炎衣原体IgM抗体+腺病毒IgM抗体+呼吸道合胞病毒IgM抗体+甲型流感病毒IgM抗体+乙型流感病毒IgM抗体+副流感病毒1、2和3型IgM抗体)。
3、采用间接免疫荧光法,主要针对九项病原体的IgM检测。由于机体受到抗原刺激后最早产生的抗体是IgM,但是IgM的半衰期短(约5天)若血清中特异性IgM类抗体含量增高,表明有近期感染,这有助于感染性疾病的早期诊断。以下是关于九项病原体名称及其潜伏期和产生IgM的时间。
九项病原体IgM抗体产生时间
病原体潜伏期IgM产生时间
嗜肺军团菌4-10天1周左右
肺炎支原体14-21天1周左右
呼吸道九联检sop
呼吸道九联检操作程序
一、呼吸道感染概述
呼吸道感染是指病原体感染人体的鼻腔、咽喉、气管和支气管等呼吸系统。分为上呼吸道感染和下呼吸道感染,上呼吸道感染常见的是急性上呼吸道感染(acute upper respir tract infection),指鼻腔、咽或喉部急性炎症的概称,是呼吸道最常见的一种传染病。常见病因为病毒,少数由细菌引起。患者不分年龄、性别、职业和地区。不仅具有较强的传染性,而且可引起严重并发症。下呼吸道感染是最常见的感染性疾患,包括急性气管——支气管炎、慢性支气管炎、肺炎、支气管扩张等,由病毒、细菌、支原体、衣原体、军团菌等微生物引起,其防治应遵循预防为主、准确诊断、及时治疗的原则,治疗时必须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素。
一、免疫荧光法介绍
免疫荧光技术(Immunofluorescence technique)又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescent antibody technique)。用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已
知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。这两种方法总称免疫荧光技术,因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合,用于检测或定位各种抗原,也可以与其他蛋白质结合,用于检测或定
呼吸道九联检sop
呼吸道九联检操作程序
一、呼吸道感染概述呼吸道感染是指病原体感染人体的鼻腔、咽喉、气管和支气管等呼吸系统。分为上呼吸道感染和下呼吸道感染,上呼吸道感染常见的是急性上呼吸道感染 (acute upper respir tract infection ),指鼻腔、
咽或喉部急性炎症的概称,是呼吸道最常见的一种传染病。常见病因为病毒,少数由细菌引起。患者不分年龄、性别、职业和地区。不仅具有较强的传染性,而且可引起严重并发症。下呼吸道感染是最常见的感染性疾患,包括急性气管——支气管炎、慢性支气管炎、肺炎、支气管扩张等,由病毒、细菌、支原体、衣原体、军团菌等微生物引起,其防治应遵循预防为主、准确诊断、及时治疗的原则,治疗时必须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素。
二、免疫荧光法介绍
免疫荧光技术 ( Immunofluorescence technique )又称荧光抗
体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons 等于1941 年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术( fluorescent antibody technique )。用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。这两种方法总称免疫荧光技术,因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合,用于检测或定位各种抗原,也可以与其他蛋白质结合,用于检测或定位抗体,但是在实际工作中荧光抗原技术很少应用,所以人们习惯称为荧光抗体技术,或称为免疫荧光技术。用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞(或组织) 化学技术。
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呼吸道九联检操作程序
呼吸道感染概述一、
气管和支气管等咽喉呼吸道感染是指病原体感染人体的鼻腔、、
上呼吸道感染常见的分为上呼吸道感染和下呼吸道感染呼吸系统,。指鼻腔是急性上呼吸道感染、),tract infectionupper(acute respir 常见病因是呼吸道最常见的一种传染病咽或喉部急性炎症的概称。,不仅性别职业和地区为病毒少数由细菌引起患者不分年龄。、,、。
下呼吸道感染是最常见具有较强的传染性而且可引起严重并发症。,肺炎支气管炎慢性支气管炎的感染性疾患包括急性气管——、,、、
军团菌等微生物引衣原体由病毒支气管扩张等细菌支原体、、、,、
治疗时必及时治疗的原则起其防治应遵循预防为主准确诊断,,、、
须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素。
免疫荧光法介绍一、
又称荧光抗体免疫荧光技术)technique(Immunofluorescence
生物化学是标记免疫技术中发展最早的一种它是在免疫学技术、。,
很早以来就有一些学者和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。利用抗原抗体反应进行组织或试图将抗体分子与一些示踪物质结合,年首次采用荧光素进行标等于细胞内抗原物质的定位1941。Coons 这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为记而获得成功。用荧光抗体示踪荧光抗体技术technique)。fluorescent(antibody 用已或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;
这两知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合种方法总称免疫荧光技术,,用于检测或定也可以与其他蛋白质结合用于检测或定位各种抗原,,
位抗体但是在实际工作中荧光抗原技术很少应用所以人们习惯称,,为荧光抗体技术或称为免疫荧光技术用免疫荧光技术显示和检查。,细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞或组织)(化学技术。
荧光免疫法按反应体系及定量方法不同还可进一步分做若干种。,
与放射免疫法相比荧光免疫法无放射性污染并且大多操作简便,,,
便于推广该技术的主要特点是特异性强敏感性高速度快主。:、、。
要缺点是非特异性染色问题尚未完全解决结果判定的客观性不足,,:技术程序也还比较复杂但近年来发展了几种特殊的荧光免疫测定,。已经很好改善了这些缺点与酶免疫测定和放射免疫分析一样应用,,在临床检验中。
原理.1
免疫学的基本反应是抗原抗体反应由于抗原抗体反应具有高-。
度的特异性所以当抗原抗体发生反应时只要知道其中的一个因素,,,就可以查出另一个因素免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的。荧光色素标记在抗体或抗原上与其相应的抗原或抗体结合))((,
后在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应其根据反应体系的不。,同可分为直接法将标记的特异性荧光抗体直接加在抗原标本上,:,:经一定的温度和时间的染色用水洗去未参加反应的多余荧光抗体,,室温下干燥后封片镜检间接法如检查未知抗原先用已知未标,。、:
记的特异抗体第一抗体与抗原标本进行)(
反应用水洗去未反应的抗体再用标记的抗抗体第二抗体与抗),(,
原标本反应使之形成抗原抗体抗体复合物再用水洗去未反应——,,的标记抗体干燥封片后镜检如果检查未知抗体则表明抗原标,。、,
本是已知的待检血清为第一抗体其它步骤的抗原检查相同根据。,,
抗原抗体反应后定量方法的不同可分为荧光抗体技术荧光显微镜技(:术抗原抗体反应后利用荧光显微镜判定结果的检测方法免疫荧:)。,光测定技术抗原抗体反应后利用特殊仪器测定荧光强度而推算被,:
测物浓度的检测方法。
荧光物质2.
许多物质都可产生荧光现象但并非都可用作荧光色素只有那。,
些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫
荧
光色素或荧光染料所用荧光物质介绍:。
异硫氰酸荧光素为黄色或:FITC)(fluoresceinisothiocyanate,
橙黄色结晶粉末易溶于水或酒精等溶剂分子量为最大吸,。389.4,
收光波长为最大发射光波长呈现明亮,530nm520~495nm,~490的黄绿色荧光有两种同分异结构其中异构体型在效率稳定性、,、,Ⅰ
与蛋白质结合能力等方面都更好在冷暗干燥处可保存多年是应用,,
最广泛的荧光素其主要优点是人眼对黄绿色较为敏感通常②:①,。
切片标本中的绿色荧光少于红色。
呼吸道九联检产品介绍一、
九项呼吸道感染病原体抗体检测试剂盒采用间接免疫荧光,IgM
法同时检测人血清中呼吸道感染主要病原体的抗体,IgM)(IFA,可检的病原体包括嗜肺军团菌血清型肺炎支原体热立克次Q:1、、
体、.
:0001文件编号红河州第三人民医院检验科
版本:第一版2016生效日期:呼吸道感染病原体九联检操作程序主题内容
页第
乙型流甲型流感病毒腺病毒呼吸道合胞病毒肺炎衣原体、、、、
用于呼吸道感染疾病的辅助诊断和型感病毒和副流感病毒。31、2。
检测原理1.
是基于待测样本中的抗体与吸附间接免疫荧光法图)(1(IFA)
样本中存在的特异性抗体和抗原反应在载玻片上的抗原发生的反应,。抗原在下一步骤中未与抗原结合的免疫球蛋白在洗涤步骤中除去,。
用免疫荧光显微镜观抗体复合物与荧光素标记的抗人球蛋白反应-,
察结果。
图1
抗体检测试剂盒检测原理图九项呼吸道感染病原体1:IgM
试剂盒组成及用途 2.
组分成分和用途
检测的物理载体覆有聚四氟乙烯并包被有针对检测,载玻片包装袋内有一袋硅胶以防潮物的特异性抗原。,
含有人血清及防腐用于证明试剂盒及试验的有效性,质控品剂。含羊抗人检测用来吸附人避免干扰吸附剂,IgM IgG IgG