实验四尿液理化及显微镜检查
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(5)在规定时间内判读结果 加热乙酸法和 磺基水杨酸法都要求立即观察结果。
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2、尿糖
(1)标本留取 根据临床需要留取清晨空腹尿或餐 后2h尿。
(2)容器清洁 不含氧化性物质,否则易导致班氏 法假阴性而试带法假阳性。
(3)及时送检 标本不宜长时间存放,以免细菌繁 殖造成假阴性结果。
(4)干扰因素及处理
结果判断:与对照管通明度一致- 黑色背景下轻微浑浊+/-
不加黑色背景可见浑浊但无颗粒+ 明显浑浊并出现颗粒++ 浑浊更明显出现絮状物+++ 严重浑浊出现大量絮块++++
评价:敏感,假阳性率高,适用蛋白尿的筛选。
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8
3 糖定性试验:班氏试验
原理:葡萄糖含有醛基,在热碱性溶液中, 能将班氏试剂的兰色硫酸铜还原为黄色的氧化 亚铜,进而生成红色氧化亚铜沉淀。
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3
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4
3 尿液比密:比密计悬浮法
操作:将比密计轻轻放入已盛尿液(2/3高度) 的比密筒中,并加以捻转,使其垂直悬浮于 尿液中,待比密计平稳后,读取与尿液凹面 相切的刻度。
成人:1.003~1.030
注意:尿液沿比密筒壁缓慢加入,不要产生气泡
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二、 尿液化学检验
1 pH值:尿试带法/PH试纸 正常范围 4.5~8 受到药物、疾病等影响, pH降低:酸中毒,肾小球肾炎,痛风等。 pH升高:尿路感染,呼吸性碱中毒等。
正常人尿中排出红细胞数量甚少,24h尿 中排出红细胞数多不超过100万。
在新鲜标本沉渣中,典型的红细胞形态呈两面 凹的圆盘形,淡黄色;在低渗的环境下,红细 胞吸水胀大破裂,血红蛋白从细胞中逸出,成 为一个大小不等的空环,则称影细胞 (shadow cell);在浓缩尿液中,由于渗透 压增高,细胞中的水分减少,红细胞常表面带 刺,呈皱缩状。
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均一性红细胞
非均一性红细胞
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血 因尿
原
泌尿系统疾病
泌尿系统各部位的炎症、肿瘤、结核、结 石、创伤、肾移植排斥、先天性畸形
其它系统疾病
泌尿系统 附近器官疾病
各种原因引起的出血性疾病 如特发性血小板减少性紫癜; 免疫性疾病如SLE
前列腺炎、精囊炎、盆腔炎
可Fra Baidu bibliotek辑版
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2.WBC
(a) 尿中尿酸、水杨酸盐等,可使班氏定性出现假 阳性;而高浓度的VitC使试带法呈假阴性。
(b) 蛋白尿 影响班氏法的检查结果,应加热除去。
(c)其它还原性糖类 会使班氏法定性结果高于试带 法,此时按试带法结果报告。
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13
手工制片镜检
镜检标本制作:
取新鲜尿标本10~15ml,以1000~1500rpm离心 3~5分钟,取出离心管,用吸管慢慢将上清液弃 掉,切勿弄混沉渣,最终留取0.2ml,混匀后滴 在载玻片上,用18mm×18mm盖玻片镜检。
实验三 尿液分析
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1
尿液一般检查
尿液理学检查:尿色 通明度 比密 尿液化学检查:酸碱度 蛋白 糖定性 尿液显微镜检查:细胞 管型 结晶
要求:
掌握尿液的常规检查;掌握各种实验的基本原 理,会按规程操作;镜下能识别常见有形物; 能观察和判断各项实验的正常和异常结果
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一、尿液的理学检验
一般而言尿中白细胞是指分叶核粒细胞而言, 新鲜尿中,白细胞外形完整,无明显的退行性 变,浆内颗粒清晰可见,胞核不是非常清楚。 炎症时,外形多不规则,结构模糊,浆内充满 粗大颗粒,核不清楚,细胞常成团,界线不清, 此时称为脓细胞。尿标本久置室温后,因pH、 渗透压等改变,白细胞也可产生退行性变,难 以与脓细胞区分开。因尿中白细胞与脓细胞增 多时意义相同,故区分白细胞与脓细胞没有多 少实际意义。
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2 尿蛋白定性
1)加热乙酸法
原理:加热可使蛋白变性凝固,然后加醋酸使得尿液 的pH接近蛋白质的等电点,有利于蛋白质下沉。
操作:2/3试管尿液,用试管夹夹住试管底部,倾 斜试管使上1/3尿液处煮沸,加5%乙酸2d~3d, 再加热至沸腾,观察结果。
结果判断: 清晰-
黑色背景下轻微浑浊+/-
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(3) 药物 药物不仅影响磺基水杨酸法蛋白 定性结果,对于化学试带法也会产生干扰。当 病人应用大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺、 含碘造影剂时,容易使磺基水杨酸法出现假阳 性;而使化学试带法呈假阴性。
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(4) 标本的污染 当尿中混有生殖道分泌物 时,可使定性出现“假”阳性,为此很有必要 指导病人清洁尿道口采集中段尿,或离心后测 定上清液。
镜检:
观察时先用低倍镜观察有形成分全貌和管型,然 后用高倍镜鉴定细胞成分,细胞用高倍镜观察10 个视野,管型用低倍镜观察20个视野,记录结果
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参考值
WBC<5个/HPF RBC <3个/HPF 扁平上皮或大圆上皮细胞少许/HPF 通明管型偶见/LPF
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细胞
1.尿红细胞
1、尿蛋白
(1)尿pH 尿液偏碱时(pH>9.0)可使加热乙酸法, 磺基水杨酸法呈假阴性,而使干化学试带法呈假 阳性;尿液偏酸(pH<3)也会引起蛋白定性假阴性。 因此,实验前需先将尿液pH调至5.0-6.0。
(2) 离子强度 尿液离子强度很低时,可使加热 乙酸法呈假阴性。因此对于限盐或无盐饮食的病 人使用本法进行尿蛋白定性时,需滴加饱和氯化 钠溶液1一2滴后再进行检查。
1 尿液颜色:直接倒入试管观察 报告方式:书明尿液色泽及深度, 如淡黄色,深黄色,乳白色等 新鲜尿液为淡黄色;可呈现不同黄色,受到饮水, 季节,生理,药物,病理等因素影响。如血尿分为 镜下,肉眼。棕色,咖啡色可能是肾前疾病, 而血块、红色则为下尿道感染。
2 尿液透明度: 报告方式:清晰透明、微混、混浊, 若有凝块等亦需注明 正常尿液:淡黄色 清晰透明
明显浑浊无颗粒+ 明显浑浊有较多颗粒++
大量絮状物有部分沉淀+++ 絮块状大量沉淀++++ 评价:最为经典也最为准确的尿蛋白定性方法。
特异性强
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7
2) 磺基水杨酸法
原理:磺基水杨酸在略低于蛋白质等电点的酸性 环境下,其阴离子与蛋白质氨基酸的阳离子结合, 生成不溶性的蛋白盐而沉淀。
操作:试管2支,各加1ml尿液,一管对照另一 管加20%磺基水杨酸0.1ml,轻轻混匀1min后观察 结果。
操作:1ml班氏试剂,加热试管底部,煮 沸,观察,再加尿液0.1ml,继续煮沸1~2 min,冷却后观察结果。
结果判断:蓝色不变- 蓝中略带绿无沉淀+/-
绿色有少许黄绿色沉淀+ 较多黄绿色沉淀++ 土黄色浑浊大量沉淀+++ 大量红棕/砖红色沉淀++++
评价:方法稳定,缺乏特异性。
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三、 注意事项
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2、尿糖
(1)标本留取 根据临床需要留取清晨空腹尿或餐 后2h尿。
(2)容器清洁 不含氧化性物质,否则易导致班氏 法假阴性而试带法假阳性。
(3)及时送检 标本不宜长时间存放,以免细菌繁 殖造成假阴性结果。
(4)干扰因素及处理
结果判断:与对照管通明度一致- 黑色背景下轻微浑浊+/-
不加黑色背景可见浑浊但无颗粒+ 明显浑浊并出现颗粒++ 浑浊更明显出现絮状物+++ 严重浑浊出现大量絮块++++
评价:敏感,假阳性率高,适用蛋白尿的筛选。
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3 糖定性试验:班氏试验
原理:葡萄糖含有醛基,在热碱性溶液中, 能将班氏试剂的兰色硫酸铜还原为黄色的氧化 亚铜,进而生成红色氧化亚铜沉淀。
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3
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3 尿液比密:比密计悬浮法
操作:将比密计轻轻放入已盛尿液(2/3高度) 的比密筒中,并加以捻转,使其垂直悬浮于 尿液中,待比密计平稳后,读取与尿液凹面 相切的刻度。
成人:1.003~1.030
注意:尿液沿比密筒壁缓慢加入,不要产生气泡
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二、 尿液化学检验
1 pH值:尿试带法/PH试纸 正常范围 4.5~8 受到药物、疾病等影响, pH降低:酸中毒,肾小球肾炎,痛风等。 pH升高:尿路感染,呼吸性碱中毒等。
正常人尿中排出红细胞数量甚少,24h尿 中排出红细胞数多不超过100万。
在新鲜标本沉渣中,典型的红细胞形态呈两面 凹的圆盘形,淡黄色;在低渗的环境下,红细 胞吸水胀大破裂,血红蛋白从细胞中逸出,成 为一个大小不等的空环,则称影细胞 (shadow cell);在浓缩尿液中,由于渗透 压增高,细胞中的水分减少,红细胞常表面带 刺,呈皱缩状。
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均一性红细胞
非均一性红细胞
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17
血 因尿
原
泌尿系统疾病
泌尿系统各部位的炎症、肿瘤、结核、结 石、创伤、肾移植排斥、先天性畸形
其它系统疾病
泌尿系统 附近器官疾病
各种原因引起的出血性疾病 如特发性血小板减少性紫癜; 免疫性疾病如SLE
前列腺炎、精囊炎、盆腔炎
可Fra Baidu bibliotek辑版
18
2.WBC
(a) 尿中尿酸、水杨酸盐等,可使班氏定性出现假 阳性;而高浓度的VitC使试带法呈假阴性。
(b) 蛋白尿 影响班氏法的检查结果,应加热除去。
(c)其它还原性糖类 会使班氏法定性结果高于试带 法,此时按试带法结果报告。
可编辑版
13
手工制片镜检
镜检标本制作:
取新鲜尿标本10~15ml,以1000~1500rpm离心 3~5分钟,取出离心管,用吸管慢慢将上清液弃 掉,切勿弄混沉渣,最终留取0.2ml,混匀后滴 在载玻片上,用18mm×18mm盖玻片镜检。
实验三 尿液分析
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1
尿液一般检查
尿液理学检查:尿色 通明度 比密 尿液化学检查:酸碱度 蛋白 糖定性 尿液显微镜检查:细胞 管型 结晶
要求:
掌握尿液的常规检查;掌握各种实验的基本原 理,会按规程操作;镜下能识别常见有形物; 能观察和判断各项实验的正常和异常结果
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2
一、尿液的理学检验
一般而言尿中白细胞是指分叶核粒细胞而言, 新鲜尿中,白细胞外形完整,无明显的退行性 变,浆内颗粒清晰可见,胞核不是非常清楚。 炎症时,外形多不规则,结构模糊,浆内充满 粗大颗粒,核不清楚,细胞常成团,界线不清, 此时称为脓细胞。尿标本久置室温后,因pH、 渗透压等改变,白细胞也可产生退行性变,难 以与脓细胞区分开。因尿中白细胞与脓细胞增 多时意义相同,故区分白细胞与脓细胞没有多 少实际意义。
可编辑版
6
2 尿蛋白定性
1)加热乙酸法
原理:加热可使蛋白变性凝固,然后加醋酸使得尿液 的pH接近蛋白质的等电点,有利于蛋白质下沉。
操作:2/3试管尿液,用试管夹夹住试管底部,倾 斜试管使上1/3尿液处煮沸,加5%乙酸2d~3d, 再加热至沸腾,观察结果。
结果判断: 清晰-
黑色背景下轻微浑浊+/-
可编辑版
10
(3) 药物 药物不仅影响磺基水杨酸法蛋白 定性结果,对于化学试带法也会产生干扰。当 病人应用大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺、 含碘造影剂时,容易使磺基水杨酸法出现假阳 性;而使化学试带法呈假阴性。
可编辑版
11
(4) 标本的污染 当尿中混有生殖道分泌物 时,可使定性出现“假”阳性,为此很有必要 指导病人清洁尿道口采集中段尿,或离心后测 定上清液。
镜检:
观察时先用低倍镜观察有形成分全貌和管型,然 后用高倍镜鉴定细胞成分,细胞用高倍镜观察10 个视野,管型用低倍镜观察20个视野,记录结果
可编辑版
14
参考值
WBC<5个/HPF RBC <3个/HPF 扁平上皮或大圆上皮细胞少许/HPF 通明管型偶见/LPF
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细胞
1.尿红细胞
1、尿蛋白
(1)尿pH 尿液偏碱时(pH>9.0)可使加热乙酸法, 磺基水杨酸法呈假阴性,而使干化学试带法呈假 阳性;尿液偏酸(pH<3)也会引起蛋白定性假阴性。 因此,实验前需先将尿液pH调至5.0-6.0。
(2) 离子强度 尿液离子强度很低时,可使加热 乙酸法呈假阴性。因此对于限盐或无盐饮食的病 人使用本法进行尿蛋白定性时,需滴加饱和氯化 钠溶液1一2滴后再进行检查。
1 尿液颜色:直接倒入试管观察 报告方式:书明尿液色泽及深度, 如淡黄色,深黄色,乳白色等 新鲜尿液为淡黄色;可呈现不同黄色,受到饮水, 季节,生理,药物,病理等因素影响。如血尿分为 镜下,肉眼。棕色,咖啡色可能是肾前疾病, 而血块、红色则为下尿道感染。
2 尿液透明度: 报告方式:清晰透明、微混、混浊, 若有凝块等亦需注明 正常尿液:淡黄色 清晰透明
明显浑浊无颗粒+ 明显浑浊有较多颗粒++
大量絮状物有部分沉淀+++ 絮块状大量沉淀++++ 评价:最为经典也最为准确的尿蛋白定性方法。
特异性强
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2) 磺基水杨酸法
原理:磺基水杨酸在略低于蛋白质等电点的酸性 环境下,其阴离子与蛋白质氨基酸的阳离子结合, 生成不溶性的蛋白盐而沉淀。
操作:试管2支,各加1ml尿液,一管对照另一 管加20%磺基水杨酸0.1ml,轻轻混匀1min后观察 结果。
操作:1ml班氏试剂,加热试管底部,煮 沸,观察,再加尿液0.1ml,继续煮沸1~2 min,冷却后观察结果。
结果判断:蓝色不变- 蓝中略带绿无沉淀+/-
绿色有少许黄绿色沉淀+ 较多黄绿色沉淀++ 土黄色浑浊大量沉淀+++ 大量红棕/砖红色沉淀++++
评价:方法稳定,缺乏特异性。
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三、 注意事项